KR20100133090A - 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents

꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출한 꾸지뽕나무 열매 추출물이 생체외(in vitro) 실험에서 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC, RANTES 및 IL-8의 발현을 감소시키고, 생체내(in vivo) 실험에서 아토피 유발 마우스의 피부와 귀 조직에서 아토피 치료 효과가 있으며, 세포 독성이 없어 안전하므로 아토피 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Figure P1020090051791
꾸지뽕나무, 열매, 아토피, TARC, MDC, RANTES, IL-8, 혈중 IgE.

Description

꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물{Composition comprising extracts of Cudraniae fructus for treating and preventing apotic dermatitis as an active ingredient}
본 발명은 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출한 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료제, 건강식품, 피부외용제, 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
아토피는 심한 가려움증을 가지는 재발성 만성피부염으로, 어린이의 약 10 ~ 15%가 아토피성 피부염을 가지고 있으며, 90%는 5년 내 저절로 호전되는 것으로 보고되어 있다. 이러한 아토피는 성인기에는 대체로 호전되어 약 30 ~ 40%는 외관상으로 피부염이 재발되지 않으나, 나머지는 성인이 되어서도 피부 건조, 자극성 물질에 의한 피부자극, 주부습진 등의 피부염으로 어려움을 겪는 것으로 알려져 있다. 또한, 민감성 피부의 경우, 수분 보유력 및 그 회복력이 낮고, 피부 각질화, 가려움증 등이 나타나기 쉽기 때문에 아토피성 피부로 될 확률이 높다.
아토피 피부염의 정확한 병리 생리는 아직까지 완전히 이해되고 있지 않지만 유전적 소인과 함께 면역학적, 비면역학적 기전이 관여한다고 보고 있다. 아토피 피부염의 대부분을 차지하는 외인성 아토피 피부염은 IgE와 연관된 면역 기전에 의해 발생되는데 특정 알레르겐(allergen)에 대한 즉시형 면역 반응보다는 T세포 이상에 의한 지연성 면역 반응이 관여한다는 보고들이 많다. 또한, 요즘은 B세포로 부터 IgE의 생성을 유도하는 IL-4 등 Th2 관련 사이토카인(cytokine)들이 아토피의 원인이라고 보고되고 있다(JS Kang et al., Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice. intl immunopharm. (2008) 8. 1475-1480).
아토피성 피부염의 중증도 평가에는 증상의 유도 및 증상을 악화시키는 물질인 "TARC(thymus and activation-regulated chemokine)" 수치를 측정하는 것이 일반적이다. TARC는 CC chemikines에 속하는 71개의 아미노산으로 구성된 단백질로 말초혈액 단핵세포, 단핵구, 대식세포, 흉선세포, 가지세포, 혈관내피세포, 기관지 내피세포에서 생산되어 사람의 T세포에 화학주성을 유발시키며, 기억 T세포(memory T cells) 사이의 인테그린 의존성 점착성(integrin-dependent adhesion)을 유도는 물론 혈소판의 형태 변화, 교원질이나 섬유소원의 점착, 응집, 칼슘 유입 등에 영향을 준다고 알려진 물질이다. 아토피성 피부염에서는 다양한 자극에 의해 피부 각질세포 등으로부터 TARC의 생산이 유도 및 증가되며, 이때 생산된 TARC가 병변 국소 부위로 Th2 세포들을 불러들여 알러지 반응을 항진시킴으로써 아토피성 피부염의 병태가 형성되며, 증상이 악화된다고 알려져 있다(YR Pokhare et al., Sopungyangjae-Tang Inhibits Development of Dermatitis in NC/Nga Mice. eCaM (2008) 5(2) 179-180).
이러한 아토피를 치료하기 위하여, 종래 세라마이드, 리놀레산, 식물유 또는 광물성 오일 등의 성분들, 하이드로코티손(hydrocortisone) 등의 스테로이드(steroid) 제제 또는 이들에 항균 및 항염 기능을 강화한 물질들이 제안된 바 있다. 그러나, 상기 스테로이드 제제는 표피의 성장억제나 부작용 등의 역효과를 유발할 수 있으며, 우레아 퍼록사이드 등은 피부의 과다 자극을 야기할 수 있고, 항히스타민제 등의 항생물질은 균의 내성(resistance) 및 광과민 등의 부작용을 유발할 가능성이 높은 문제점이 있다. 또한, 장기간 피부에 적용시 모세 혈관 확장증 및/또는 각질층의 두께 증가 내지 확장을 유발하는 등의 심각한 부작용을 발생시킬 염려가 있으며, 최근 아토피 완화에 많이 쓰이는 감마-리놀레산(한국특허공개 2000-0046633호)은 쉽게 산화되므로 안정성이 열등함과 아울러, 피부 자극성이 비교적 강하여 민감한 피부에는 사용하기 곤란한 등의 문제점이 있다.
이에 최근에는 아토피에 효과를 갖는 천연물질을 탐색하는데 초점을 맞추고 있다. 대표적으로, 쑥 추출물(대한민국 특허등록 제10-0377262호), 영지버섯, 유 근피, 감초, 백봉령, 백지마 및 백년초의 추출물(대한민국 특허등록 제10-0517465호), 달맞이유, 알로에, 목초액, 제비꽃, 대추, 송이버섯, 두릅, 인삼, 녹차, 두충, 복분자, 오미자, 쑥, 포공영, 삼백초, 황기, 하고초, 해송, 황금 및 우슬의 추출물(대한민국 특허등록 제10-0451444호), 청자소엽과 적자소엽의 추출물(대한민국 특허등록 제10-0454752호), 건률, 의이인, 오미자, 길경, 나복자, 맥문동 및 석창포의 추출물(대한민국 특허등록 제10-0483539호), 라벤더, 유칼립투스 및 티트리 오일(대한민국 특허등록 제10-0597997호) 등이 있고, 그 외에도 상기생, 합환피, 창이자, 맥아 등이 효과가 있다고 알려져 있다. 그러나, 상기 천연물질들은 그 효능이 미미하거나, 효과는 있더라도 민감성 피부에 있어서는 알레르기 과민반응을 보여 그 사용이 제한되는 단점이 있었다.
따라서, 종래 알려진 아토피 예방 및 치료제에 비하여 보다 효과가 뛰어나고 안전한 물질을 개발하는 것이 요구된다.
꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata (Carr.) Bureau ex Lavallee)는 구지뽕나무, 굿가시나무, 활뽕나무 등으로도 불리며 뽕나무과(Moraceae)의 낙엽 활엽 소교목 또는 관목으로 분류된다. 닥나무와 동속의 식물로 원산지는 한국으로 잎은 호생하며 2 ~ 3개로 갈라지는 것과 가장자리가 밋밋하고 난형인 것이 있다. 갈라지는 잎은 둔두 원저이며 가장자리가 밋밋한 것은 예두이고 넓은 예저이며 길이 6 ~ 10 cm, 너비 3 ~ 6 cm로서 표면에 잔털이 있고 뒷면에는 융모가 있다. 엽병은 길이 15 ~ 25 mm로서 털이 있다. 잎 모양은 생육장소가 비옥하면 감나무 잎보다 크 고 결각도 적으나 바위틈이나 산비탈의 척박지에서 자라는 것은 잎이 작고 결각이 심하며 잎끝이 꼬리처럼 길게 뻗어난다. 열매는 취과로 둥글며 지름 2.5 cm로서 육질이고 9 ~ 10월에 적색으로 성숙하며 수과는 길이 5 mm 정도로서 흑색이다. 과육은 달고 식용가능하다(국가생물종지식정보시스템, http://www.nature.go.kr/plant/plantGuide/). 꾸지뽕나무의 항균활성물질로 유크레스타플라본 B(euchrestaflavanone B)와 유크레스타플라본 C(euchrestaflavanone C)가 보고된 바 있으며(이병원 등, 꾸지뽕나무로부터 항균성 prenylated flavonoids의 분리. 한국응용생명화학회지 제47권 제2호(2004. 6) pp.270-273), 잎 및 목부에서 분리한 캠퍼롤(kaempferol), 캠퍼롤 7-O-β-D-글루코시드(kaempferol 7-O-β-D-glucoside), 노랄소카르페틴(norarthocarpetin), 알소카르페신(arthocarpesin) 등의 과산화 지질 함량 감소 활성에 대한 보고가 있다(최종원 등, 꾸지뽕나무 잎 , 열매 , 줄기 및 뿌리의 분획물과 플라보노이드 화합물이 흰쥐의 과산화지질 함량에 미치는 영향. 생약학회지, (1995) 26: 377-384).
지금까지 꾸지뽕나무의 잎, 줄기 또는 뿌리와 관련하여, 항암 효능(대한민국 특허등록번호 10-0784628; Anticancer Drugs. 2007 Oct;18(9):1023-8., Nat Prod Res. 2007 Jun;21(7):616-24., Arch Pharm Res. 2005 Jan;28(1):44-8., Am J Chin Med. 2001;29(2):313-20), 항 바이러스 효능(대한민국 특허등록번호 10-0639395; 대한민국 특허등록번호 10-0501831), 동맥경화 예방 및 치료 효능(Planta Med. 2007 Sep;73(11):1163-8. Epub 2007 Aug 23., Biol Pharm Bull. 2007 Apr;30(4):805-9., Bioorg Med Chem Lett. 2006 Nov 1;16(21):5580-3., Life Sci. 2002 Apr 19;70(22):2599-609.) 및 간보호 효능(대한민국 특허등록번호 10-0834111), 심장순환계 질환 예방 및 치료 효능(대한민국 특허등록번호 10-08231550000)이 보고된 바 있다. 그러나, 꾸지뽕나무의 열매에 대한 유효 활성은 보고된 바 없다.
이에, 본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매의 유효 활성에 대해 연구하던 중, 꾸지뽕나무 열매 추출물이 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC, RANTES 및 IL-8의 발현을 감소시키고, 아토피를 유발한 NC/Nga 마우스의 피부와 귀 조직에서 아토피 치료에 효과가 있으며, 세포독성이 거의 없음을 확인함으로써 상기 꾸지뽕나무 열매 추출물을 아토피 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 이용한 아토피 예방 및 치료제, 아토피 예방 및 개선용 건강식품, 아토피 예방 및 개선용 피부외용제, 및 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 아토피에 걸린 개체에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 치료방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 예방방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 피부외용제를 제공한다.
아울러, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC, RANTES 및 IL-8의 발현을 감소시키고, 아토피를 유발한 NC/Nga 마우스의 피부와 귀 조직에서 아토피 치료에 효과가 있으며, 세포독성이 거의 없으므로 아토피 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명에서 사용되는 용어들을 정의한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 아토피의 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치료" 및 "개선"은 본 발명의 조성물의 투여로 아토피의 증세가 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "개체"는 본 발명의 조성물을 투여하여 아토피 증상이 호전될 수 있는 인간, 원숭이, 개, 염소, 돼지 또는 쥐 등 모든 동물을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜 또는 위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 이는 개체의 아토피의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 사용하여 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 저급 알코올은 C1 내지 C4 저급 알코올인 것이 바람직하다.
상기 추출물은 꾸지뽕나무 열매 시료 중량의 약 2 내지 20배, 바람직하게는 약 5배 내지 10배의 물, 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 추출용매로 이용하는 것이 바람직하며, 상기 저급 알코올은 메탄올 또는 에탄올인 것이 바람직하며, 상기 물과 저급 알코올의 혼합물은 10 ~ 90% 메탄올 또는 에탄올 혼합물인 것이 바람직하고, 50 ~ 70% 메탄올 또는 에탄올 혼합물인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 추출은 실온에서 약 1 내지 24시간, 바람직하게는 4 내지 15시간 동안, 가장 바람직하게는 1 ~ 2시간 동안 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출횟수는 1회 내지 5회 추출하는 것이 바람직하고 2회 내지 3회 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 추출은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 및 증기 추출로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 추출방법에 의해 수행되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출 후 동결건조를 수행하므로써 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매 추출물이 세포독성이 있는지 알아보기 위해, 사람 각질형성세포주(Human keratinocyte cell line)인 HaCat 세포를 꾸지뽕나무 열매 추출물을 처리한 배지에 배양한 후 세포생존율을 측정하였다. 그 결과, 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 500 ug/ml의 높은 노도에서도 95% 이상의 세포생존율을 나타냄으로써 세포독성이 거의 없는 안전한 물질임을 알 수 있었다.
또한, 본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매 추출물이 시험관내에서(In vitro) 아토피 관련 유전자의 발현변화에 영향을 미치는지 알아보기 위해, HaCat 세포를 TNF-a와 꾸지뽕나무 열매 추출물을 처리한 배지에 배양한 후 RNA로부터 cDNA를 합성하여 TARC, MDC 및 RANTES에 대한 mRNA 수준을 검색하였다. 그 결과, 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물이 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES 발현을 대조군에 비해 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 1 참조).
또한, 본 발명자들은 꾸지뽕나무의 열매 이외의 부위별 추출물이 시험관내에 서(In vitro) 아토피 관련 유전자의 발현변화에 영향을 미치는지 알아보기 위해, HaCat 세포를 TNF-a와 꾸지뽕나무 잎, 줄기 및 뿌리 추출물을 처리한 배지에 배양한 후 RNA로부터 cDNA를 합성하여 TARC, MDC 및 RANTES에 대한 mRNA 수준을 검색하였다. 그 결과, 꾸지뽕나무 잎, 줄기 및 뿌리 추출물은 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES의 발현을 아토피 반응 유발군과 비교하여 차이가 없는 것을 확인하였다(도 2 참조).
또한, 본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매 추출물이 생체내에서(In vivo) 아토피 치료 효능이 있는지 알아보기 위해, 비오스타(Biostir)에 의해 아토피가 유발된 NC/Nga 마우스에 꾸지뽕나무 열매 추출물을 경구 투여한 후, 피부에 대한 관능평가 및 귀와 등 피부의 조직검사를 수행하였다. 그 결과, 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 아토피 치료에 사용되는 프레드니손(predisone)과 유사하게 아토피 유발에 의한 피부 결손 및 출혈을 현저히 감소시키고, 피부의 두께 및 비만세포의 분포를 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 3 및 도 4 참조).
또한, 본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매 추출물이 생체내에서(In vivo) 아토피 치료 효능이 있는지 알아보기 위해, 상기 아토피 유발 마우스에 꾸지뽕나무 열매 추출물을 경구 투여한 후, 혈장을 분리하여 혈중 IgE, TARC 및 히스타민(histamine) 수준을 정량하였다. 그 결과, 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 아토피 치료에 사용되는 프레드니손(predisone)과 유사하게 혈중 IgE, TARC, 히스타민 수준을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 5 내지 도 7 참조).
또한, 본 발명자들은 꾸지뽕나무 열매 추출물이 꾸지뽕나무의 잎, 줄기 또는 뿌리 추출물에 비해 아토피 치료에 있어서 현저한 효과가 있는지 알아보기 위해, 상기 아토피 유발 마우스에 꾸지뽕나무 다양한 부위의 추출물들을 각각 경구 투여한 후, 혈장을 분리하여 혈중 IgE, TARC 및 히스타민 수준을 정량하였다. 그 결과, 꾸지뽕나무 열매 추출물이 꾸지뽕나무의 잎, 줄기 또는 뿌리 추출물에 비해 혈중 IgE, TARC 및 히스타민 수준을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(표 2 참조). 따라서, 꾸지뽕나무의 열매 추출물이 꾸지뽕나무의 다른 부위의 추출물에 비해 현저한 아토피 치료 효능이 있음을 알 수 있다.
상기 결과들을 종합하여 보면, 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 생체외에서(in vitro) 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES의 발현을 감소시키고, 생체내에서(in vivo) 아토피 유발 마우스의 피부와 귀 조직에서 아토피 치료 효과가 있으며, 세포 독성이 거의 없으므로 아토피 예방 및 치료용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
아울러, 꾸지뽕나무 부위별 추출물 중 열매(B1, B2) 추출물이 잎(B3), 줄기(B4), 뿌리(B5) 추출물과 비교하여 각질형성세포를 이용한 생체외 실험(In vitro)에서 효과가 우수하게 나타나고, NC/Nga 생쥐를 이용한 생체내 실험(In vivo)에서도 꾸지뽕나무 열매 추출물의 항아토피 효과가 우수하게 나타남으로써 다른 부위 추출물들에 비해 열매 추출물이 현저한 항아토피 효과가 있음을 알 수 있다.
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 함유하는 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
보다 상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 쥐, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장, 정맥, 복강, 근육 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 조성물은 0.0001 ~ 1000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 ~ 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 전체 조성물 총 중량에 대하여0.001 ~ 50 중량%의 함량으로 배합될 수 있다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 아토피에 걸린 개체에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 치료방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 예방방법을 제공한다.
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES의 발현을 감소시키고, 아토피를 유발한 NC/Nga 마우스의 피부와 귀 조직에 서 아토피 치료에 효과가 있으며, 세포독성이 거의 없으므로 아토피 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
상기 투여는 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
상기 투여를 위해서는 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 산제, 정제, 캡슐제, 환, 과립 또는 주사액제로 제제화 할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 투여는 투여 방법에 따라 비경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 화합물의 일일 투여량은 0.0001 ~ 1000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 ~ 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 꾸지뽕나무 열매 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 유제품, 음료, 껌, 차, 비타민 단일제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
또한, 아토피 예방 및 개선을 목적으로 건강식품 또는 건강음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중에서 상기 꾸지뽕나무 열매 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 를 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 꾸지뽕나무 열매 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로오스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 꾸지뽕나무 열매 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 피부외용제를 제공한다.
상기 피부외용제로 사용되는 적합한 제형으로는 예를 들면, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고 또는 스프레이의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
상기 피부외용제는 꾸지뽕나무 열매 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
아울러, 본 발명은 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라 도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 및, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등)를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴 또는 케라틴이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등)이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 갈조 엑기스, 홍조 엑기스 또는 녹조 엑기스이 바람직하고, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨 또는 아르긴산칼륨이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다. 상기 다른 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 또는 정제수가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지 또는 식물 유지가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리 세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴 또는 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스 또는 와셀린 등의 탄화 수소계 유지가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산메틸스테알록시실록산 공중합 체, 알킬 변성 실리콘유 또는 아미노 변성 실리콘유가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린 또는 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자 또는 지용성 고분자가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n=2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n=2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n=2 이상), 락트산 또는 락트산염이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤 또는 콜레스테롤에스테르가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록 시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산 또는 덱스트린 이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르 또는 고분자 실리콘이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산 또는 라놀린지방산콜레스테릴에스테르가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 또는 양성 계면 활성제가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEPOP (폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드 또는 수소첨가대두인지질이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염 또는 퍼플루오로알킬인산에스테르가 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드 또는 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형 또는 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금
속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 또는 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 사불화에틸렌가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert -부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p -(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진 또는 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨 또는 운데시렌산이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필 또는 엘리소르빈산이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨 또는 인산일수소나트륨이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 0.01 ~ 5% 중량 백분율로 배합되는 것이 바람직하고, 0.01 ~ 3% 중량 백분율로 배합되는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 유화물 또는 점성형 혼합물의 형상을 취할 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 화합물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적 인 보조제 및 담체를 포함할 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액 또는 모발화장료로 제조될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클린저의 제형을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연이 이용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트가 이용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제제예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제제예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예 및 제제예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 꾸지뽕나무 열매( Cudraniae fructus ) 추출물 제조
꾸지뽕나무 열매(국내산)를 약재상(동국당, 대전)에서 구입하여 사용하였다. 약재의 10배 (w/v)에 해당하는 추출용매를 사용하였으며 추출방법으로 열수추출법, 70% 에탄올 수용액을 이용하여 각각 추출물을 얻었다. 추출액을 감액 농축 후 동결건조하여 각 추출물을 제조하였다. 각 추출물의 수율은 하기 표 1에서 보는 바와 같았다(표 1)
꾸지뽕나무 열매 추출법에 따른 추출물의 수율
기호 추출용매 방법 수율 (%)
B1 탈이온 증류수 열수추출, 가열시간 90분 12.70
B2 70% 에탄올 수용액 환류추출, 가열 및 환류장치 90분 12.36
<비교예 1> 꾸지뽕나무 잎 추출물의 제조
꾸지뽕나무 잎(동국당, 대전)을 이용하여, 상기 <실시예 1>과 같은 방법으로 70% 에탄올 수용액 추출물(B3)을 수득하였다(수율: 28.6 %).
<비교예 2> 꾸지뽕나무 줄기 추출물의 제조
꾸지뽕나무 줄기(동국당, 대전)를 이용하여, 상기 <실시예 1>과 같은 방법으로 70% 에탄올 수용액 추출물(B4)을 수득하였다(수율: 6.14 %).
<비교예 3> 꾸지뽕나무 뿌리 추출물의 제조
꾸지뽕나무 뿌리(동국당, 대전)를 이용하여, 상기 <실시예 1>과 같은 방법으로 70% 에탄올 수용액 추출물(B5)을 수득하였다(수율: 5.23 %).
<실험예 1> 꾸지뽕나무 열매 추출물의 세포독성 검색
사람 각질형성세포주(Human keratinocyte cell line)인 HaCat 세포를 96 웰 플레이트(well plate)에 1 × 103 cells/well로 분주한 후, 꾸지뽕나무 열매 추출물들(B1, B2)을 각각 2 ~ 600 ug/ml 농도로 첨가하였다. 48시간 동안 배양한 후, 테트라졸리움 염(tetrazolium salt)인 CCK-8 kit(Cell Counting Kit-8, Dojindo Laboratories, Tokyo, Japan) 용액을 첨가하여 4시간 더 배양한 다음, ELISA reader(Benchmark Plus, Bio-Rad, U.S.A.)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군 웰(Control well)의 흡광도에 대한 꾸지뽕나무 열매 추출물(약물) 첨가 웰(well)의 흡광도의 비를 %로 계산하였고, 여러 웰(well)의 평균값을 사용하였다. 하기 [수학식 1] 같이 계산하였다.
그 결과, 꾸지뽕나무 열매 추출물들(B1, B2)을 각각 HaCat 세포에 500 ug/ml로 처리하였을 때 HaCat 세포 생존율은 95% 이상으로 나타내었다. 따라서 꾸지뽕 나무 열매 추출물은 용매에 따라 약간의 차이가 있으나 모두 세포독성이 거의 없음을 알 수 있었다.
<비교예 4> 추출 부위별 추출물의 세포독성 검색
사람 각질형성세포주(Human keratinocyte cell line)인 HaCat 세포를 96 웰 플레이트(well plate)에 1 × 103 cells/well로 분주한 후, 꾸지뽕나무 잎, 줄기, 뿌리 추출물들(B3, B4, B5)을 각각 1 ~ 500 ug/ml 농도로 첨가하였다. 48시간 동안 배양한 후, 테트라졸리움 염(tetrazolium salt)인 CCK-8 kit(Cell Counting Kit-8, Dojindo Laboratories, Tokyo, Japan) 용액을 첨가하여 4시간 더 배양한 다음, ELISA reader(Benchmark Plus, Bio-Rad, U.S.A.)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군 웰(Control well)의 흡광도에 대한 꾸지뽕나무 열매 추출물(약물) 첨가 웰(well)의 흡광도의 비를 %로 계산하였고, 여러 웰(well)의 평균값을 사용하였다. 상기 [수학식 1] 같이 계산하였다.
그 결과, 꾸지뽕나무 부위별 추출물(B3, B4, B5)을 각각 HaCat 세포에 처리하였을 때 잎(B3) 500 ug/ml, 줄기(B4) 500 ug/ml, 뿌리(B5) 10 ug/ml까지 HaCat 세포 생존율 95% 이상을 나타내었다. 뿌리 추출물의 경우 열매 추출물과 비교하여 세포독성이 강한 것으로 나타났다. 이후의 실험은 세포독성이 나타나지 않는 농도에서 진행하였다.
<실험예 2> 꾸지뽕나무 열매 추출물의 아토피 관련 유전자 발현변화 효과 분석
HaCat 세포 1 × 106 cell을 6 웰(well)에 분주한 후, TNF-a (20 ng/ml)를 처리한 다음, 꾸지뽕나무 열매 추출물들 (B1, B2)을 각각 250 ug/ml로 처리하여 아토피 관련 유전자의 변화를 관찰하였다. 상기 처리 24시간 후 RNA를 추출하였다. 추출된 RNA는 cDNA 합성 kit(Biorad, USA)를 사용하여 cDNA를 합성하여 아토피 관련 유전자 TARC, MDC 및 RANTES에 대한 mRNA 수준을 검색하였다.
그 결과, 도 1에서 보는 바와 같이 꾸지뽕나무 열매 추출물들(B1, B2)을 TNF-a와 같이 처리하면 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES가 대조군에 비해 모두 유의적으로 감소하는 것을 관찰할 수 있었다(도 1).
<비교예 5> 꾸지뽕나무 부위별 추출물의 아토피 관련 유전자 발현변화 효과 분석
HaCat 세포 1 × 106 cell을 6 웰(well)에 분주한 후, TNF-a (20 ng/ml)를 처리한 다음, 꾸지뽕나무 부위별 추출물들 (B3, B4, B5)을 각각 250, 250, 10 ug/ml로 처리하여 아토피 관련 유전자의 변화를 관찰하였다. 상기 처리 24시간 후 RNA를 추출하였다. 추출된 RNA는 cDNA 합성 kit(Biorad, USA)를 사용하여 cDNA를 합성하여 아토피 관련 유전자 TARC, MDC 및 RANTES에 대한 mRNA 수준을 검색하였다.
그 결과, 도 2에서 보는 바와 같이 꾸지뽕나무 부위별 추출물들(B3, B4, B5)을 TNF-a와 같이 처리하면 아토피 관련 유전자인 TARC, MDC 및 RANTES의 발현은 아 토피 반응 유발군과 비교하여 차이가 없는 것으로 나타났다(도 2). 이후 동물실험은 꾸지뽕 나무 열매 물추출물(B1)으로 진행하였다.
<실험예 3> 생체내( In vivo ) 꾸지뽕나무 열매 추출물의 아토피 치료 효과 검증
<3-1> NC/Nga 마우스에서의 아토피 유발
실험 동물인 수컷 8주령의 NC/Nga 마우스들(중앙실험동물, 한국)을 공급받아 2주간 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 알레르겐(allergen)으로서 집먼지 진드기 추출물인 비오스타(Biostir)(Japan)를 사용하였다. 실험 전 마우스들의 등과 귀 주위를 제모하고 1주일에 2회씩 비오스타를 5주간 도포하여 실험을 진행하였다. 양성대조군으로서 스테로이드(steroid)계인 프레드니손(predisone)을 3 mg/kg/day, 실험군으로서 꾸지뽕 나무 열매 추출물(B1) 60 mg/kg/day를 각각 6주간 경구 투여하였다.
<3-2> 관능평가
상기 실험예 <3-1>과 같이, NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day, 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 60 mg/kg/day를 각각 6주간 경구 투여한 후, 음성대조군, 아토피 유발군, 양성대조군 및 실험군 유래 마우스에서 관능 평가와 비오스타(Biostir)를 처리한 후 6주간 진행상황을 사진을 찍어 관찰하였다.
상기 결과, 도 3에서 보는 바와 같이 아토피 유발군은 3주 후부터 피부 결손 및 건조 정도가 심해지고, 4주 후부터는 출혈로 인한 상처가 많아지는 반면에, 양 성 대조군으로 사용된 프레드니손(predisone) 처리군은 3주 정도에 유발된 아토피 질환이 감소하는 것을 육안으로 확인할 수 있었다. 또한, 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 처리군은 아토피 유발군보다 피부 결손이나 출혈이 양성 대조군과 비슷한 경향으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 3).
<3-3> 조직 검사
상기 실험예 <3-1>과 같이, NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day, 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 60 mg/kg/day를 각각 6주간 경구 투여한 후, 음성대조군, 아토피 유발군, 양성대조군 및 실험군 유래 마우스에서 귀와 등 피부를 분리하여 10% 포르말린으로 고정시킨 후, 파라핀을 이용하여 포매시켰다. 포매한 후, 마이크로톰(microtome)을 이용하여 5 로 조직 표본을 절단한 후, H&E(Hematoxylin & Eosin) 염색(Jonathan M.S. et al., J.Clin. Invest. 101, 1614-1622, 1998)을 하여 광학현미경으로 피부의 두께 및 비만세포(mast cell)의 분포를 관찰하였다.
그 결과, 도 4에서 보는 바와 같이 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1)은 아토피 유발군에 비해 피부의 두께를 감소시키고 비만세포의 분포를 감소시켰다. 이는 꾸지뽕나무 열매 추출물이 양성 대조군으로 사용된 프레드니손(predisone) 처리군과 유사한 결과를 나타낸다는 것을 확인하였다(도 4).
<3-4> 혈중 IgE, TARC, 히스타민 수준 분석
상기 실험예 <3-1>과 같이, NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day, 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 60 mg/kg/day를 각각 6주간 경구 투여한 후, 음성대조군, 아토피 유발군, 양성대조군 및 실험군 유래 마우스에서 혈장을 분리하여 혈중 IgE, TARC, 히스타민(histamine) 수준(level)을 ELISA kit(Bethyl laboratoris, U.S.A)를 이용하여 정량하였다.
그 결과, 표 2 및 도 5에서 보는 바와 같이 아토피 유발군이 음성 대조군에 비해 IgE의 수준이 상승한 반면에, 양성 대조군인 프레드니손(predisone) 또는 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 처리군은 혈중 IgE 수준을 유의성 있게 감소하는 것을 확인할 수 있었다(표 2 및 도 5). 또한, 도 6 및 도 7에서 보는 바와 같이 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 처리군은 혈중 TARC 및 히스타민(histamine) 수준을 양성 대조군인 프레드니손(predisone)에 비해 떨어지지만 음성 대조군에 비해 유의적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 6 및 도 7).
시료 IgE(ng/ml) TARC(ug/ml) 히스타민(ug/ml)
음성 대조군 100 10.5 40
아토피 유발군(Biostir) 630 14.8 82
프레드니손(predisone) 340 5.0 38
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1) 375 9.5 58
결론적으로 꾸지뽕나무 부위별 추출물 중 열매(B1, B2)가 잎(B3), 줄기(B4), 뿌리(B5)와 비교하여 각질형성세포를 이용한 생체외 실험(In vitro)에서 효과가 우수하게 나타났을 뿐만 아니라 NC/Nga 생쥐를 이용한 생체내 실험(In vivo)에서도 꾸지뽕나무 열매 추출물의 항아토피 효과가 우수하게 나타났다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.
<제조예 1> 약학적 제제의 제조
<1-1> 산제의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 20 ㎎
유당 20 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<1-2> 정제의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 10 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<1-3> 캡슐제의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 10 ㎎
결정성 셀룰로오스 3 ㎎
락토오스 14.8 ㎎
스테아린산 마그네슘 0.2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<1-4> 액제의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 20 ㎎
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
<1-6> 주사제의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP pH 7.6로 될 때까지
주이용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖
적당한 용적의 주이용 염화나트륨 BP 중에 도코사헥사에노일 리소포스파티딜콜린을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 이용하여 pH 7.6로 조절하고, 주이용 염화나트륨 BP를 이용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
<제조예 2> : 식품의 제조
본 발명의 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.
<2-1> 밀가루 식품의 제조
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 0.5 ~ 5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
<2-2> 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 5 ~ 10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<2-3> 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2)을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2)의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2)(3 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
<2-4> 건강보조식품의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 100 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
<제조예 3> : 건강음료의 제조
꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 100 ㎎
구연산 100 ㎎
올리고당 100 ㎎
매실농축액 2 ㎎
타우린 100 ㎎
정제수를 가하여 전체 500 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 1 ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
<제조예 4> : 화장품의 제조
<4-1> 유화 제형의 화장품 제조
표 3에 기재된 조성으로 유화제형의 화장품을 제조하였다. 제조 방법은 하기와 같다.
1) 1 내지 9의 원료를 혼합한 혼합물을 65∼70℃로 가열하였다.
2) 10의 원료를 상기 단계 1)의 혼합물에 투입하였다.
3) 11 내지 13의 원료의 혼합물을 65∼70℃로 가열하여 완전히 용해시켰다.
4) 상기 단계 3)을 거치면서, 상기 2)의 혼합물을 서서히 첨가하여 8,000 rpm에서 2∼3분간 유화시켰다.
5) 14의 원료를 소량의 물에 용해시킨 후 상기 단계 4)의 혼합물에 첨가하고 2분간 더 유화시켰다.
6) 15 내지 17의 원료를 각각 평량한 후 상기 단계 5)의 혼합물에 넣고 30초간 더 유화시켰다.
7) 상기 단계 6)의 혼합물을 유화 후 탈기과정을 거쳐 25∼35℃로 냉각시킴으로써 유화제형의 화장품을 제조하였다.
유화 제형 1, 2, 3의 조성
조성 유화제형 1 유화제형 2 유화제형 3
1 스테아린 산 0.3 0.3 0.3
2 스테알리 알콜 0.2 0.2 0.2
3 글리세릴 모노스테아레이트 1.2 1.2 1.2
4 밀납 0.4 0.4 0.4
5 폴리옥시에틸렌솔비탄
모노라우린산 에스테르		 2.2 2.2 2.2
6 파라옥시안식향산 메틸 0.1 0.1 0.1
7 파라옥시안식향산 프로필 0.05 0.05 0.05
8 세틸에틸헥사노에이트 5 5 5
9 트리글리세라이드 2 2 2
10 사이클로메티콘 3 3 3
11 증류수 ~ 100 ~ 100 ~ 100
12 농글리세린 5 5 5
13 트리에탄올아민 0.15 0.15 0.15
14 폴리아크릴산 중합체 0.12 0.12 0.12
15 색소 0.0001 0.0001 0.0001
16 향 0.10 0.10 0.10
17 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 0.0001 1 10
<4-2> 가용화 제형의 화장품 제조
표 4에 기재된 조성으로 가용화 제형의 화장품을 제조하였다. 제조 방법은 하기와 같다.
1) 2 내지 6의 원료를 1의 원료(정제수)에 넣고 아직믹서를 이용하여 용해시켰다.
2) 8 내지 11의 원료를 7의 원료(알코올)에 넣고 완전용해시켰다.
3) 상기 단계 2)의 혼합물을 상기 단계 1)의 혼합물에 서서히 첨가하면서 가용화시켰다.
가용화 제형 1, 2, 3의 조성
조성 가용화 제형 1 가용화 제형 2 가용화 제형 3
1 정제수 ~ 100 ~ 100 ~ 100
2 농글리세린 3 3 3
3 1,3-부틸렌글리콜 2 2 2
4 EDTA-2Na 0.01 0.01 0.01
5 색소 0.0001 0.0002 0.0002
6 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1, B2) 0.1 5 5
7 알코올(95%) 8 8 8
8 파라옥시안식향산 메틸 0.1 0.1 0.1
9 폴리옥시에틸렌
하이드로제네이디트에스테르		 0.3 0.3 0.3
10 향 0.15 0.15 0.15
11 사이클로메티콘 - - 0.2
본 발명의 꾸지뽕나무 열매 추출물은 우수한 아토피 치료 효과가 있으며 세포독성이 거의 없으므로, 꾸지뽕나무 열매 추출물을 주성분으로 사용하는 아토피 치료제, 아토피 개선용 건강식품, 아토피 개선용 피부외용제 및 아토피 개선용 화장품 개발에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 HaCat 세포를 TNF-a(20 ng/ml) 또는 꾸지뽕나무 열매 추출물(B1: 열수 추출물; 및 B2: 70% 에탄올 수용액 추출물)을 250 ug/ml로 처리한 후 24시간 후에 상기 세포로부터 추출된 RNA로부터 cDNA 합성 kit(Biorad, USA)를 사용하여 아토피 관련 유전자 TARC, MDC, RANTES 및 IL-8의 mRNA 수준을 나타내는 전기영동 그림이다.
도 2는 HaCat 세포를 TNF-a(20 ng/ml) 또는 꾸지뽕나무 부위별 추출물(B3: 잎, B4: 줄기, B5: 뿌리)을 250, 250, 10 ug/ml로 처리한 후 24시간 후에 상기 세포로부터 추출된 RNA로부터 cDNA 합성 kit(Bio-Rad, USA)를 사용하여 아토피 관련 유전자 TARC, MDC 및 RANTES의 mRNA 수준을 나타내는 전기영동 그림이다.
도 3은 비오스타(Biostir)를 이용한 아토피 유발 NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day 또는 꾸지뽕나무 열매 70% 에탄올 수용액 추출물 60 mg/kg/day를 6주간 경구 투여한 후, 상기 마우스의 피부 증상을 나타내는 사진이다.
도 4는 비오스타(Biostir)를 이용한 아토피 유발 NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day 또는 꾸지뽕나무 열매 열수추출물 60 mg/kg/day를 6주간 경구 투여한 후, 상기 마우스의 귀 및 등의 피부를 분리하여 면역화학(immunochemistry) 염색을 이용하여 피부의 두께 및 비만세포의 분포을 관찰한 결과를 나타내는 그림이다.
도 5는 비오스타(Biostir)를 이용한 아토피 유발 NC/Nga 마우스에 프레드니 손(predisone) 3 mg/kg/day 또는 꾸지뽕나무 열매 열수추출물 60 mg/kg/day를 6주간 경구 투여한 후, 상기 마우스의 혈장을 분리하여 ELISA 키트를 이용하여 정량한 혈중 IgE의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 6은 비오스타(Biostir)를 이용한 아토피 유발 NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day 또는 꾸지뽕나무 열매 열수추출물 60 mg/kg/day를 6주간 경구 투여한 후, 상기 마우스의 혈장을 분리하여 ELISA 키트를 이용하여 정량한 혈중 TARC의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 7은 비오스타(Biostir)를 이용한 아토피 유발 NC/Nga 마우스에 프레드니손(predisone) 3 mg/kg/day 또는 꾸지뽕나무 열매 70% 에탄올 수용액 추출물 열수추출물 60 mg/kg/day를 6주간 경구 투여한 후, 상기 마우스의 혈장을 분리하여 ELISA 키트를 이용하여 정량한 혈중 히스타민(histamine)의 수준을 나타낸 그래프이다.

Claims (13)

  1. 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata) 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 치료용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 치료용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 치료용 조성물.
  4. 약학적으로 유효한 양의 제 1항의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 아토피에 걸린 인간을 제외한 포유류에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 치료방법.
  5. 약학적으로 유효한 양의 제 1항의 꾸지뽕나무 열매 추출물을 인간을 제외한 포유류에 투여하는 단계를 포함하는 아토피 예방방법.
  6. 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 건강기능식품.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 개선용 건강기능식품.
  8. 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 피부외용제.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 개선용 피부외용제.
  10. 제 9항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 개선용 피부외용제.
  11. 꾸지뽕나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물.
  12. 제 11항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물.
  13. 제 12항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 아토피 예방 및 개선용 화장료 조성물.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101521083B1 (ko) * 2013-04-26 2015-05-19 강원도 고성군 (관리부서 농업기술센터) 꾸지뽕 추출물을 함유하는 피부외용제
KR102250380B1 (ko) * 2019-11-07 2021-05-11 재단법인 전주농생명소재연구원 꾸지뽕나무 캘러스 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 대한 피부 보호용 조성물
KR20220059060A (ko) * 2020-11-02 2022-05-10 인천대학교 산학협력단 갯끈풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증 또는 아토피 피부염의 개선, 예방 또는 치료용 조성물

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