KR20100112205A - 면역강화제 - Google Patents
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Abstract
버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분, 예를 들면, 버섯 유래 성분, 특히 표고버섯 등 버섯 추출물을 초미립자화하며, 바람직하게는 물 추출물을 분산화 처리함으로써 점막으로부터의 흡수성을 높여 면역강화작용 및/또는 면역조절작용을 발휘할 수 있다. 이러한 초미립자체(또는 이것을 함유하는 조성물)는, 면역강화제 및/또는 면역조절제 또는 항종양제, 항감염제, 항바이러스제, 항자가면역 질환, 항당뇨약, 항알레르기제, 항소화기 질환제에 사용할 수 있다. 따라서, 이러한 초미립자체, 바람직하게는 상기 추출물의 분산화제 처리물을 유효성분으로서 사용한 음식품, 의약 조성물 및 이들의 제조방법을 제공한다.
Description
본 발명은 신규 버섯 추출물 초미립자화체 등, 신규 버섯 유래 성분 초미립자화체(바람직하게는, 버섯의 물 추출에 의해 수득되는 성분을 초미립자화 처리한 것) 또는 신규 β-글루칸 초미립자화체, 이러한 신규 초미립자화체를 함유하는 조성물(당해 초미립자화체 분산체 등), 이러한 초미립자화체 또는 조성물을 유효성분으로서 함유하는 면역강화제 및/또는 면역조절제(면역강화제/면역조절제), 의약 조성물(특히, 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약 및 항알레르기제 등 면역기능의 이상에 기인하여 발병하는 질환을 위한 약제 및 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등에 대한 치료제), 및 음식품(건강 식품, 기능성 식품 등), 및 이들의 유효성분으로 사용 가능한 당해 초미립자화체 또는 당해 초미립자화체 함유 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 면역강화제/면역조절제는 의약품(의약 조성물), 음식품(건강 식품, 기능성 식품 등) 등 각종 형태로 사용되며, 특히 면역기능을 강화 또는 조절하여 질환의 치료, 개선, 진행 방지나 환자의 면역기능 이상에 따라 발병하는 다른 질환의 예방 등, 또는 건상자(健常者)에 있어서는 면역기능을 강화 또는 조절함으로써 면역기능 이상에 따르는 각종 질환의 예방이나, 면역기능 개선에 의한 경미한 질환의 개선 등에 유용하다.
또한, 본 발명은 종양, 감염증, 바이러스성 질환, 자가면역 질환, 당뇨병, 알레르기성 질환, 소화기 질환(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등) 등의 치료, 개선, 진행 방지, 예방 등에 유용한 면역강화방법 또는 면역조절방법이나, 상기 신규 초미립자화체를 유효성분으로 하여 면역강화제, 면역조절제나 각종 약제, 음식품 등, 또는 의약품 제조에 사용하는 것 등도 포함한다.
버섯 또는 이의 성분에 각종 약효 성분이 함유되어 있다는 점에서, 어느 종류의 버섯을 분말화하여 가공한 것이나 열수 추출한 것을 함유하는 건강 식품이 공지되어 있다. 그러나, 종래 공지되어 있는 제품에서는, 이의 각종 성분이 유효하게 이용되고 있지 않다.
따라서, 종래품과 비교하여 버섯 또는 이와 유사한 소재의 각종 성분을 의약품 또는 건강 식품이나 기능성 식품의 형태로 유효하게 이용하고, 동물, 특히 일상적으로 사람의 건강을 유지 개선하거나, 의약품으로서 각종 질환의 치료, 개선 등에 대한 이용이 기대된다.
본 발명의 목적은, 간편한 조제 수단에 의해 버섯 또는 이와 유사한 소재의 각종 성분, 특히 약효 성분을 유효하게 활용한 음식품(건강 식품, 기능성 식품 등)또는 의약품(의약 조성물)을 제공하는 것에 있다.
본 발명자들은 상기 과제를 해결하기 위해 종래품에 있어서, 각종 성분의 이용에 관하여 예의 조사를 실시한 결과, 동물 체내에서 버섯의 각종 성분이 충분히 흡수되고 있지 않으며, 그 결과 체내에서 기대만큼 이용되고 있지 않음을 밝혀냈다. 또한, 계속 검토한 결과, 버섯 유래 성분, 특히 버섯의 물 추출물, 바람직하게는 열수 추출물에 관해서 입자직경을 보다 작게 하여 초미립자로 한 것(초미립자화체)을 조제하며, 예를 들면, 물에 분산(화)시켜 측정하였을 때의 입자의 평균 입자직경으로 나타내어 바람직하게는 10㎛ 이하, 보다 바람직하게는 1㎛ 이하, 더욱 바람직하게는 평균 입자직경으로 0.01 내지 1㎛의 미셀화 상태로 함으로써 점막으로부터의 흡수가 현저하게 개선되며, 그 결과 면역기능을 강화 또는 조절할 수 있음을 밝혀냈다. 또한, 초미립자화한 β-글루칸 (버섯 유래의 β-글루칸 및 버섯 유래가 아닌 β-글루칸을 포함한다.)에도 동일한 활성이나 작용이 존재하는 것을 밝혀냈다.
이상의 각종 지견에 근거하여, 본 발명이 완성되기에 이르렀다. 특히, 체내에서 점막(특히 소장)으로부터의 흡수에 의해 점막면역을 자극하여 강화(전신 면역강화로)하는 것, 또한 그 결과, 항종양 효과나 AIDS 등 바이러스나 세균 등에 의한 감염증의 치료, 개선효과가 기대된다. 따라서, 이러한 초미립자화체는 면역강화제/면역조절제로서 사용할 수 있으며, 특히 의약 조성물이나 음식품(건강 식품 등)의 형태로의 사용이 기대된다.
본 발명에 의해, 동물, 특히 사람의 면역 상태를 개선할 수 있는 면역강화제 및 면역조절제, 특히 이와 같이 우수한 면역강화작용 및/또는 면역조절작용을 갖는 의약 조성물이나 음식품(건강 식품, 기능성 식품 등) 등을 제공할 수 있다. 또한, 이러한 우수한 제품의 유효성분으로서 사용 가능한 신규 물질(또는 신규 조성물), 상세하게는 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분의 초미립자화체, 예를 들면 버섯으로부터의 추출물로 초미립자화된 것, 바람직하게는 물 추출물의 분산제 처리물(분산화), 특히 이의 유화제 처리에 의한 미셀화 용액도 제공할 수 있다.
본 발명에 의해, 각종 질환의 치료, 예방 등을 위한 면역강화방법 또는 면역조절방법이나, 상기 초미립자화체의 면역강화제 또는 면역조절제에 대한 사용; 또는 초미립자화체의 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등에 대한 치료제 등) 등, 또는 의약품 제조에도 사용한다.
또한, 본 발명에 있어서는, 간편한 제조수단에 의해 버섯 유래 성분이나 β-글루칸의 약효 성분, 특히 면역강화작용 및/또는 면역조절작용을 갖는 상기 유효성분의 초미립자화체(또는 이를 함유하는 조성물)을 제조할 수 있으며, 이러한 방법도 제공한다. 그 결과 유효성분을 활용한 의약 조성물이나 음식품(건강 식품, 기능성 식품 등) 등을 공업적으로 간편하게 제공할 수 있다.
따라서, 본 발명은 산업상, 특히 의료, 의약품, 식품 등의 많은 분야에서 매우 유용하다.
도 1은 실시예 1에서 표고버섯 추출액 및 미셀화 표고버섯 추출액의 입도분포를 도시한다.
실시예 1의 표고버섯 추출액의 유화제 처리[미셀화]에 있어서, 표고버섯 추출액(도 1a) 및 미셀화 표고버섯 추출액(본 발명품)(도 1b)의 입도분포를 도시한 것이다. 가로축은 입자직경(㎛)을 나타내며, 세로축(좌)은 막대그래프를 위한 입자의 빈도(%)를, 세로축(우)은 곡선을 위한 입자의 빈도누적(%)을 각각 나타낸다.
도 2는 실시예 2에 있어서 β-글루칸 용액 및 미셀화 β-글루칸의 입도분포를 도시한다.
실시예 2의 β-글루칸의 유화제 처리[미셀화]에 있어서, β-글루칸 용액(도 2a) 및 미셀화 β-글루칸 (본 발명품)(도 2b)의 입도분포를 도시한 것이다. 가로축은 입자직경(㎛)을 나타내며, 세로축(좌)은 막대그래프를 위한 입자의 빈도(%)를, 세로축(우)은 곡선을 위한 입자의 빈도누적(%)을 각각 나타낸다.
실시예 1의 표고버섯 추출액의 유화제 처리[미셀화]에 있어서, 표고버섯 추출액(도 1a) 및 미셀화 표고버섯 추출액(본 발명품)(도 1b)의 입도분포를 도시한 것이다. 가로축은 입자직경(㎛)을 나타내며, 세로축(좌)은 막대그래프를 위한 입자의 빈도(%)를, 세로축(우)은 곡선을 위한 입자의 빈도누적(%)을 각각 나타낸다.
도 2는 실시예 2에 있어서 β-글루칸 용액 및 미셀화 β-글루칸의 입도분포를 도시한다.
실시예 2의 β-글루칸의 유화제 처리[미셀화]에 있어서, β-글루칸 용액(도 2a) 및 미셀화 β-글루칸 (본 발명품)(도 2b)의 입도분포를 도시한 것이다. 가로축은 입자직경(㎛)을 나타내며, 세로축(좌)은 막대그래프를 위한 입자의 빈도(%)를, 세로축(우)은 곡선을 위한 입자의 빈도누적(%)을 각각 나타낸다.
즉, 본 발명은, 하나의 형태로서, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 초미립자화함을 특징으로 하는 초미립자화체, 예를 들면 버섯 유래 성분 또는 β-글루칸을 초미립자화함을 특징으로 하는 초미립자화체이다. 또한, 본 발명의 선행기술로서, 리포좀 내에 포집된 β-글루칸[참조: 국제출원공개번호 WO 01/85141호 공보]이 있지만, 본 발명은 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분이 초미립자화되어 있으면 양호하며, 선행기술에서 필요로 하는 β-글루칸의 리포좀 내로의 포집조작, 및 겔 컬럼 등에 의한 리포좀에 내포되지 않은 β-글루칸과 리포좀의 분리조작을 필요로 하지 않으며, 보다 간편한 공정으로 제조된다는 점에서, 이러한 선행기술과는 분명히 다른 것이다. 따라서 본 발명은, 이러한 선행기술에 기재되어 있는, 유효성분인 β-글루칸을 이의 내부에 포집하고 있음을 특징으로 하는 리포좀의 형태를 포함하지 않는 것이다.
본 발명에 있어서, 「버섯 유래 성분」은 버섯이 생산하는 성분의 총칭이다.
버섯 유래 성분에 관해서는, 버섯에 함유되는 성분 또는 버섯이 산출하는 성분이면 특별히 제한은 없다. 예를 들면, 버섯의 추출물 또는 버섯의 물 추출물 등, 버섯에 함유되는 성분을 복수종 함유된 것이라도 양호하다. 또한, 일본 특허공보 제(소)42-12000호, 일본 특허공보 제(소)46-37873호, 일본 공개특허공보 제(평)10-287584호 등에 기재되어 있는 버섯의 균사체 배양법에 있어서 배양액 중에 산출된 배양산물이라도 양호하다. β-글루칸과 같은 단일 성분이라도 양호하다. 또한, β-글루칸 함유물이라도 양호하다.
한편, 본 발명에 사용하는 β-글루칸에 관해서는, 상기와 같이 버섯 유래 성분이라도 양호하며, 버섯 유래 성분에 함유되지 않은 β-글루칸이라도 양호하다.
버섯 유래 성분에 함유되지 않은 β-글루칸으로서는, 예를 들면 효모 유래 성분(맥주 효모 등), 진균 유래 성분, 세균 유래 성분, 식물 유래 성분 등을 들 수 있다.
버섯의 추출물에 관해서는, 물에 의한 추출물(물, 열수, 물을 포함하는 용액 등에 의한 추출물을 포함한다)이 본 발명에 있어서 유효성분을 많이 취득할 수 있다는 점에서 바람직하다. 버섯의 물 추출물은 버섯으로부터 물로 추출된 성분 또는 이 성분을 함유하는 것이면 양호하며, 예를 들면 버섯을 물로 추출한 추출액을 여과지(사용하는 여과지의 종류에는 특별히 제한은 없으며, 필요에 따라서 선택할 수 있다.) 등으로 여과하여 수득된 여과액, 이 중에 함유되는 성분(고체 또는 수용액의 형태 등), 당해 여과액 중에 그 다음 물로 추출된 성분의 일부를 미립자(10O㎛ 이상의 입자직경을 갖는 응집물의 석출물 등)의 분산상태로 함유하고 있는 것 등을 들 수 있다. 이러한 물 추출물은 그 후 본 발명에 있어서 초미립자화 공정으로 처리할 수 있다. 또한, 이러한 성분을 함유하는 수용액을 버섯의 물 추출물 함유 수용액이라고 하며, 이러한 성분이 수용액 중에 반드시 완전히 용해될 필요는 없다.
한편, 초미립자화하는 출발물질 β-글루칸에 대해서도, 상기 버섯의 추출물의 경우와 마찬가지로 β-글루칸 추출물(β-글루칸 추출성분)을 사용할 수 있다. β-글루칸의 추출법으로서는, 종래부터 공지되어 있는 추출법, 예를 들면 물 또는 열수에 의한 추출법[참조: Biol. Pharm. Bull., 23(7), 866, 2000]이나 효소처리법[참조: 일본 공개특허공보 제(평)5-268905호, 일본 공개특허공보 제(평)10-287584호] 등을 이용하여 실시할 수 있다. 또한, β-글루칸 추출물을 함유하는 수용액을 β-글루칸 추출물 함유 수용액이라고 하며, β-글루칸 추출물이 수용액 중에 반드시 완전히 용해될 필요는 없다.
상기 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 초미립자화함에 있어서, 당해 성분은 수용액중 응집체를 형성하는 것이 바람직하다. 또한, 당해 응집체는 적어도 50㎛(50㎛ 이상)의 입자직경을 갖는 것이 보다 바람직하다.
상기 본 발명의 초미립자화체 입자의 평균 입자직경에 관해서는, 당해 초미립자화체를 물에 분산시켜 측정하였을 때에, 바람직하게는 10㎛ 이하, 보다 바람직하게는 1㎛ 이하, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 1㎛ 정도의 평균 입자직경을 갖는 것이다. 이러한 평균 입자직경은 입도분포 측정계에 의해 용이하게 구할 수 있다.
이러한 초미립자화체의 예로서, 이하에 몇가지 예시한다.
(1) 바람직하게는 수용액 중에서, 상기 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분으로부터 수득되며, 분산화제로 처리한 상태 또는 분산화된 상태의 초미립자화체.
(2) 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에, 분산화제를 혼합했을 때 수득할 수 있으며, 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 함유하는 초미립자화체.
(3) 미분쇄화 처리시 수득할 수 있는 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 함유하는 상기 (1) 또는 (2)에 기재된 초미립자화체.
(4) 평균 입자직경이 0.01 내지 1㎛인 (3)에 기재된 초미립자화체.
(5) 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이, 버섯의 물 또는 열수 추출액으로부터 여과지 등으로 여과한 후에 수득되는 버섯의 추출물 함유 수용액인 (1) 내지 (4) 중의 어느 하나에 기재된 초미립자화체.
(6) 버섯의 추출물 함유 수용액이, 버섯의 물 또는 열수 추출액으로부터 여과지 등으로 여과한 후, 이것을 농축 및/또는 냉각시켜 수득되는 응집물 함유 수용액인 (5)에 기재된 초미립자화체.
(7) 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이, β-글루칸의 수용액 또는 β-글루칸을 함유하는 수용액인 (1) 내지 (6) 중의 어느 하나에 기재된 초미립자화체.
당해 β-글루칸은 버섯 유래 성분에 함유되는 성분 또는 버섯 유래 성분에 함유되지 않는 성분 중 어느 것이라도 양호하다.
또한, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에 관해서는 특별히 제한은 없으며, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이면 양호하며, 이러한 성분이 수용액 중에 완전히 용해될 필요는 없다. 예를 들면, 버섯의 추출물 함유 수용액 또는 버섯의 물 추출물 함유 수용액이라도 양호하며, 버섯의 균사체 배양산물을 함유하는 배양액이라도 양호하다. 또한, 버섯 유래 성분 이외에 함유되는 것이 물만일 필요는 없으며, 따라서 적어도 물과 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 용액이면 양호하다. 마찬가지로, β-글루칸(성분)을 함유하는 수용액에 대해서도 특별히 제한은 없으며, β-글루칸을 함유하는 수용액이면 양호하며, β-글루칸이 수용액 중에 완전히 용해될 필요는 없으며, β-글루칸 함유 수용액을 사용할 수 있다. 당해 β-글루칸은 상기와 같이, 버섯 유래 성분이라도 양호하며, 버섯 유래 성분에 함유되지 않는 것이라도 양호하다. 이로 인해, 상기 β-글루칸 추출성분을 사용할 수 있다.
분산화제의 사용량에 관해서는, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액 중에 함유되는 전체 당(당의 전체량) 1에 대하여 중량비로, 바람직하게는 당해 분산화제를 많아도 100(100 이하), 보다 바람직하게는 10 이하, 더욱 바람직하게는 0.05 내지 5정도를 혼합할 수 있다.
수용액 중에 함유되는 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분의 함량에 관해서는 특별히 제한되지 않지만, 용해성의 관점에서 바람직하게는 전체 당의 농도가 많아도 50mg/ml(50mg/ml 이하), 보다 바람직하게는 0.5 내지 50mg/ml 정도의 범위가 되도록, 수용액 중에 함유되는 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분의 함량을 설정할 수 있다.
분산화제의 종류 등에는 특별히 제한은 없지만, 계면활성제, 고분자, 당류, 당알콜류, 글리세라이드, 산, 염기, 염류 등을 들 수 있다. 이 중에서 계면활성제로 대표되는 유화제가 바람직하며, 레시틴을 보다 바람직한 것으로서 채용할 수 있다.
본 발명의 초미립자화체는 유화제를 사용하여 미셀화 상태로 취득하여 사용할 수 있다.
미분쇄화 처리방법으로서는, 특별히 한정되지 않지만, 습식 분쇄법이 바람직하고, 고압 유화기, 매체 분산기, 초음파 등이 있다. 예를 들면, 고압 유화기에 의하면, 상기와 같이 1㎛ 이하의 초미립자(초미립자화체)를 조제할 수 있다. 이 때, 채용하는 유화압에 관해서는, 바람직하게는 300kgf/㎠ 이상, 보다 바람직하게는 500kgf/㎠, 더욱 바람직하게는 800kgf/㎠ 이상을 채용할 수 있지만, 처리 회수를 늘림에 따라 유화압을 저하시키는 것도 가능하다.
이러한 초미립자화체는, 바람직하게는 버섯의 물 또는 열수 추출액, 또는 β-글루칸 추출액을 여과지 등으로 여과한 다음, 수득된 버섯의 추출물 또는 β-글루칸 추출물 함유 수용액에 분산화제를 혼합하며, 바람직하게는 교반함으로써 수득할 수 있다. 이와 같이 하여 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 함유하는 초미립자화체를 취득할 수 있다.
이 경우, 예를 들면 버섯의 추출물 함유 수용액으로서, 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과지 등으로 여과한 후, 이것을 농축 및/또는 냉각하여 수득되는 응집물 함유 수용액을 사용할 수 있으며, 또한 여과 후의 상태 그대로 이것을 농축 및/또는 냉각시켰을 때에 상기 응집물을 제공하는 수용액을 사용할 수 있다. β-글루칸에 대해서도 동일한 처리를 실시하여 상기와 동일한 수용액을 조제하여 사용할 수 있다.
면역강화제 또는 면역조절제로서 사용하는 경우, 상기 초미립자화체의 수용액 또는 분산화물의 형태, 예를 들면 상기 유효성분이 초미립자화된 수용액 또는 분산화물(상기 버섯 추출물의 분산화제 처리 등)의 형태로 사용할 수 있으며, 또한 미셀화 상태인 것이 바람직하다. 이 중에서는 버섯 추출물 또는 β-글루칸의 분산화제 처리물을 사용하는 것이 간편하다. 이와 같이, 초미립자화된 각종 형태의 것도 본 발명의 초미립자화체에 포함된다.
상기 열수 추출물, 예를 들면 버섯의 열수 추출물은 버섯을 분쇄한 후에 열수 추출하는 것이 유효성분의 효율적인 추출이라는 관점에서 바람직하다.
상기 초미립자화체는 동물, 특히 사람의 소장 점막으로부터 흡수 가능하며, 그 결과 면역강화 효과 또는 면역조절 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명은, 별도의 형태로서, 상기 어느 곳에 기재된 초미립자화체를 함유함을 특징으로 하는 면역강화제 및/또는 면역조절제(면역강화제/면역조절제)이다.
본 발명은, 또한 별도의 형태로서, 모든 기재된 초미립자화체를 함유함을 특징으로 하는 의약 조성물(약제; 의약품)이다. 이 경우, 제제학상 허용되는 담체, 증량제(또는 희석제) 등을 포함할 수 있다.
또한, 상기 면역강화제/면역조절제는 음식품의 형태로 사용할 수 있다.
상기 약제의 구체적인 예로서는, 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제 및 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등을 들 수 있다.
본 발명은, 또 하나의 형태로서 상기 모든 기재된 초미립자화체(본 발명의 초미립자화체)를 함유함을 특징으로 하는 음식품이다. 초미립자화체의 함유량에는 제한은 없지만, 건강 식품 등 음식품중 당해 초미립자화체를 전체 당환산으로, 약 0.01 내지 80중량%, 보다 바람직하게는 약 0.05 내지 20중량% 함유하는 것이 바람직하다.
음식품이란 식품과 음료를 합친 것이다. 본 발명의 음식품은 건강 식품, 기능성 식품, 건강 음료, 기능성 음료 등에 사용할 수 있다. 특히, 암 질환, 세균감염 질환, 바이러스감염 질환, 자가면역 질환, 당뇨병, 알레르기성 질환, 소화기 질환(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등) 등의 질환 환자용으로서 적합하다.
본 발명은, 또 하나 별도의 형태로서, 상기 본 발명의 초미립자화체가 분산화되어 있는 수용액을 함유함을 특징으로 하는 초미립자화체 함유 조성물, 즉 초미립자화체를 함유하는 수용액(분산체 등)이다.
이러한 분산체 등은 상기와 마찬가지로 의약 조성물(의약품)에 사용할 수 있다. 이 경우, 제제학상 허용되는 담체 또는 증량제를 포함할 수 있다.
이러한 분산체 등은 상기와 마찬가지로 음식품에 사용할 수 있다. 이 경우, 음식품 중에 당해 조성물을, 전체 당환산으로 0.05 내지 5중량% 함유시킬 수 있다.
본 발명의 음식품은 건강 식품, 기능성 식품, 건강 음료, 기능성 음료 등에 사용할 수 있다. 특히, 암 질환, 세균감염 질환, 바이러스감염 질환, 자가면역 질환, 당뇨병, 알레르기성 질환, 소화기 질환(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등) 등의 질환 환자용으로서 적합하다.
조성물의 성분 함량에 관해서는, 조성물 100g당, 바람직하게는 당을 약 1 내지 20000mg, 보다 바람직하게는 약 10 내지 10OOmg 및 분산화제를 바람직하게는 약 1 내지 20000mg, 보다 바람직하게는 약 10 내지 1000mg 함유시킬 수 있다.
한편, 초미립자화체 함유 조성물에 관해서는, 버섯 유래 성분, β-글루칸 등의 초미립자화체를 함유하는 조성물이면, 특별히 제한은 없다. 바람직하게는, 버섯 유래 성분 또는 β-글루칸의 초미립자화체 및 분산화제를 함유하는 수용액이며, 보다 바람직하게는 당해 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하여 조제한 초미립자화체 및 당해 초미립자화체가 분산(화)되어 있는 수용액 등을 들 수 있다.
본 발명은, 별도의 형태로서, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분, 즉 버섯 유래 성분 또는 β-글루칸을 초미립자화 공정으로 처리함을 특징으로 하는 초미립자화체의 제조방법, 예를 들면, 버섯을 물 추출 공정으로 처리한 후, 수득된 물 추출물을 초미립자화 공정으로 처리하여 초미립자화체를 제조하는 방법이다.
특히, 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과지 등으로 여과한 후, 수득된 버섯의 추출물 함유 수용액에 분산화제를 혼합하며, 바람직하게는 교반함으로써 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 함유하는 초미립자화체를 제조할 수 있다. 이 경우, 상기한 바와 같이, 추출물 함유 수용액으로서 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과지 등으로 여과한 후, 이것을 농축 및/또는 냉각하여 수득되는 응집물 함유 수용액을 사용할 수 있으며, 또한 여과 후의 상태 그대로, 이것을 농축 및/또는 냉각시켰을 때에 상기 응집물을 제공하는 수용액을 사용할 수 있다. β-글루칸에 대해서도 동일하게 제조할 수 있다.
초미립자화 공정에는, 상기한 바와 같이 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분, 예를 들면 버섯 유래 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하여 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함할 수 있으며, 또한 초미립자화 공정에는 미분쇄화 처리, 예를 들면 고압 유화기 처리 공정 등에 의한, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함할 수 있다.
이러한 방법에 의해, 바람직하게는 면역강화활성 및/또는 면역조절활성을 갖는 초미립자화체(초미립자)를 취득할 수 있다.
본 발명은, 또한 별도의 형태로서, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분, 예를 들면 버섯 유래 성분을 초미립자화 공정으로 처리함을 특징으로 하는 초미립자화체 함유 조성물의 제조방법이다.
이러한 방법은 상기 초미립자화체의 제조방법에 따라서 실시할 수 있다. 초미립자화 공정으로서, 마찬가지로 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하여 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정이나, 미분쇄화 처리, 예를 들면 고압 유화기 처리 등에 의한 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 채용할 수 있다. 또한, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분으로서, 버섯을 물 또는 열수에 의한 추출 공정으로 처리한 후, 수득되는 물 또는 열수 추출물을 사용할 수 있으며, 버섯 유래 성분을 함유하는 수용액으로서, 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과지 등으로 여과한 후 수득되는 버섯의 추출물 함유 수용액을 채용할 수 있다. 한편, β-글루칸 추출물에 대해서도 동일하게 조제할 수 있다.
이러한 방법에 의해, 바람직하게는 면역강화활성 및/또는 면역조절활성을 갖는 분산체 등을 취득할 수 있다.
한편, 이상의 방법에 있어서, 평균 입자직경의 측정치에 관해서는, 상기와 마찬가지로 물에 분산시켜 측정했을 때 입자의 평균 입자직경으로 나타내고 있다.
본 발명은, 별도의 형태로서, 상기 본 발명의 초미립자화체를 생체내에 섭취 또는 투여함을 특징으로 하는 면역강화방법 또는 면역조절방법이며, 종양, 감염증, 바이러스성 질환, 자가면역 질환, 당뇨병, 알레르기성 질환, 소화기 질환(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등) 등의 치료, 개선, 진행 방지, 예방 등에 매우 유용하다.
당해 섭취 또는 투여하는 형태에는 상기의 면역강화제, 면역조절제 등; 또는 상기의 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등을 채용할 수 있다. 특히, 상기 의약 조성물이나 음식품의 형태로 바람직하게는 사용할 수 있다.
본 발명은, 또한 별도의 형태로서, 신규 초미립자화체의 면역강화제 또는 면역조절제에 대한 사용; 또는 초미립자화체의 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등에 대한 사용, 또는 초미립자화체의 의약품 제조에 사용된다.
면역강화제나 면역조절제, 또는 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등에 관해서는 상기에서 설명한 바와 같으며, 또한 상기와 같이 의약 조성물의 형태, 또는 음식품에 사용된 형태를 바람직한 예로서 들 수 있다.
실시 형태
이하, 본 발명의 실시의 형태에 관해서 설명한다. 본 발명에 관해서 바람직한 대표적인 예를 중심으로 설명하며, 본 발명의 바람직한 대표예를 나타내는 것이지만, 본 발명이 이러한 대표예에 한정되는 것은 아니다.
(초미립자화체; 버섯 추출물, β-글루칸 추출물 초미립자화체 등)
우선, 버섯 추출물 초미립자화체의 제조를 중심으로 설명함으로써, 본 발명의 초미립자화체를 설명한다.
본 발명에 있어서, 버섯의 종류에는 특별히 제한은 없다. 또한, 추출에 사용하는 부위에도 특별히 제한은 없다. 식용으로 제공될 수 있는 것을 사용할 수 있다. 대표적인 것을 들면 다음과 같지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
한편, 본 발명에 있어서의 버섯이란, 자실체를 형성할 수 있는 균류를 말한다.
렌티누스 에도데스(Lentinus edodes)(표고버섯)
플레우로투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus)(느타리버섯)
폴리오타 나메코(Pholiota nameko)(맛버섯)
플람물리나 벨루티페스(Flammulina velutipes)(팽이버섯)
트리콜로마 마쓰타케(Tricholoma matsutake)(송이버섯)
리오필럼 쉬메지(Lyophyllum shimeji)(땅찌만가닥버섯)
쉬조필럼 코뮨(Schizophyllum commune)(치마버섯)
크레피도투스 바리아빌리스(Crepidotus variabilis)(다색귀버섯)
리오필럼 울마리움(Lyophyllum ulmarium)(만가닥버섯)
그리폴라 움벨라타(Grifola umbellata)(저령)
지. 프론도사(G.frondosa)(잎새버섯)
코리올루스 베르시콜로르(Coriolus versicolor)(구름버섯)
포메스 포멘타리우스(Fomes fomentarius)(말굽버섯)
볼바벨라 볼바세아(Volvavella volvacea)(풀버섯)
아우리쿨라리아 아우리쿨라-유대(Auricularia auricula-judae)(목이)
가노데르마 루시둠(Ganoderma lucidum)(영지)
지. 아플라나툼(G.applanatum)(원숭이안장버섯)
포미토프시스 피니콜라(Fomitopsis pinicola)(전나무떡따리버섯)
딕티오포라 인두시아타(Dictyophora indusiata)(망태버섯)
스파라시스 크리스파(Sparassis crispa)(꽃송이버섯)
아가리쿠스 블라제이(Agaricus blazei)(아가리쿠스버섯)
페지자 베시쿨로사(Peziza vesiculosa)(주발버섯)
버섯의 부위에 관해서는, 상기와 같이 자실체, 균사체와 같은 특별한 제한은 없다. 생버섯의 성분에 관해서는, 버섯의 종류에 따라 다르며, 예를 들면 표고버섯 자실체에서는 약 90%(중량)가 수분, 약 5%(중량)가 당질, 약 2%(중량)가 단백질, 약 1%(중량)가 섬유질이며, 그 외가 약 2%(중량)를 차지한다. 따라서, 본 발명에 있어서의 유효성분은 수분을 제외한 성분중 물(열수 등)로 추출된 성분의 초미립자화체이다.
한편, β-글루칸에 대해서도 특별히 제한은 없으며, 버섯 유래 성분, 효모 유래 성분, 진균 유래 성분, 세균 유래 성분, 식물 유래 성분 등을 채용할 수 있다.
버섯 유래 성분 또는 β-글루칸의 추출물을 취득하기 위해서는 특별히 어려운 점은 없다. 예를 들면, 버섯을 사용하여 열수 등의 물로 추출하면 양호하다. 이 때, 분쇄한 것을 열수 추출 공정으로 처리하면 추출 공정이 용이하다. 열수를 사용하는 경우의 온도로서는 약 60 내지 100℃가 채용된다. 추출 공정후, 여과지(사용하는 여과지의 종류에는 특별히 제한은 없으며, 필요에 따라서 선택할 수 있다) 등으로 여과하여 수득되는 여과액은 미립자를 함유하는 현탁액 및 그 후 농축, 냉각 등으로 응집물을 함유하는 용액이더라도 본 발명에서의 추출물에 포함된다.
한편, 본 발명에 있어서 추출물이란, 상기 물(열수 등)에 의한 추출 공정에서 물에 함유되어 있는 성분(반드시 완전히 용해될 필요는 없다)이면 되며, 따라서, 예를 들면 추출 공정 후에 여과지 등으로 여과한 여과액이나 추출액으로부터 농축, 냉각 등으로 석출한 미립자 성분(응집물 등)도 이러한 추출물에 포함된다.
또한, 추출 용제로서는 상기의 물 단독 이외에, 다른 유기용제를 사용할 수도 있지만, 물 단독 또는 물 이외에 소량의 유기용제를 함유하는 혼합액이 바람직하며, 이러한 물을 함유하는 용액에 의한 추출도 당연히 본 발명에서의 물 추출에 포함된다. 또한, 산, 알칼리 및 무기물이 함유되어 있어도 버섯의 추출물량에 악영향을 미치지 않는 범위에서 이들을 적절하게 가해도 하등 문제는 없다.
추출성분을 다시 초미립자화 공정으로 처리함으로써 면역강화활성 또는 면역조절활성 작용을 갖는 초미립자화체를 제조할 수 있다.
이하에, 본 발명의 초미립자화체의 바람직한 제조예에 관해서 보다 상세하게 설명한다.
버섯으로부터 열수 등으로 추출한 것(추출물), 예를 들면 추출 공정후, 가열시 여과(셀라이트여과 등) 후, 이것을 냉각 또는 농축후 냉각시킨 경우에는 10O㎛ 이상의 평균 입자직경을 나타내는 응집물이 석출된다. 이러한 응집물은 추출액 중의 β-글루칸과 같은 다당체나 펩타이드글루칸 등이 응집하여 생성된 것이라고 생각된다. 예를 들면, 생표고버섯의 분쇄물을 95℃에서 3 내지 15시간 동안 추출하고, 셀라이트여과를 실시하여 수득되는 여과액을 관찰하면, 여과액 중에 미립자가 분산된 현탁액인 것이 확인된다. 이러한 입자의 입자직경을 측정하면, 중앙 직경이 약 250㎛인 응집물로서, 이러한 입자의 성분은 β-글루칸, 펩타이드글루칸 등인 것도 확인된다.
이러한 상태(10O㎛ 이상의 평균 입자직경을 나타내는 응집물을 함유하는 추출물)에서 경구 섭취된 경우, 추출액 중의 유효성분은 장관 점막으로부터 효율적으로 흡수되지 않으며, 생체에 유효하게 활용되지 않는다. 본 발명에 의한 초미립자화체에 의하면, 이러한 추출액 중의 유효성분을 효율적으로 장관점막으로부터 흡수시켜 점막 고유층에서 면역반응을 야기시킬 수 있다.
즉, 버섯의 물(열수 등) 추출물을 가열시 여과하여, 냉각 또는 농축후 냉각시켜 수득되는 상기 응집물을 함유하는 버섯 추출액에 있어서, 분산화제 등을 사용하여 석출한 응집물을 분산시키고, 평균 입자직경으로 바람직하게는 10㎛ 이하, 보다 바람직하게는 1㎛ 이하, 더욱 바람직하게는 약 0.01 내지 1㎛으로 입자직경을 극소화한 초미립자화체를 제조할 수 있다.
버섯 추출액의 유효성분이나 석출한 응집물을 초미립자화하기 위해서는, 함유되는 버섯 추출액의 유효성분을 함유하는 용액에 관해서 분산화제를 사용하여 석출한 응집물을 분산화시키거나, 함유되는 버섯 추출액의 유효성분을 마이크로 캡슐 등에 포매(包埋) 또는 석출한 응집물을 분산화제로 분산화시켜 이것을 마이크로 캡슐 등으로 포매함으로써 달성할 수 있다.
면역강화작용의 유무에 관해서는, 항종양활성, NK(Natural Killer)활성, 지연형 과민반응, 세포 내외의 사이토카인 측정, 항체의 생산량 등으로 측정하여 이의 유무를 용이하게 확인할 수 있다.
초미립자로 하는 방법으로서는 특별히 어려움은 없으며, 예를 들면 교반기나 균질기를 사용하며, 예를 들면 적당한 분산화제를 사용하여 초미립자화시킬 수 있다. 또한, 고압 유화기, 매체 분산기, 초음파 등의 미분쇄화 처리에 의해서도 초미립자화시킬 수 있다.
분산화제를 사용하는 경우의 분산화제에 관해서는, 액체 중에 산재시키는 성질을 갖는 분산화제이면 어느 것이라도 양호하며, 특별히 제한은 없지만, 계면활성제, 고분자, 당류, 등알콜류, 글리세라이드, 산, 염기, 염류 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 유화제로서 사용되는 것이 양호하다. 보다 바람직하게는, 식용으로 사용되는 유화제가 양호하며, 예를 들면, 레시틴, 리조레시틴, 담즙산 등을 사용할 수 있다. 한편, 본 발명의 명세서 중에서, 유화제를 사용하여 분산화시키는 것을, 특히 미셀화라고 표현하고 있지만, 본 발명은 이에 한정되는 것은 아니며, 유화제 이외의 분산화제에 의한 미셀화도 본 발명에 포함된다.
또한, 본 발명에 있어서의 미립자화 공정은 유효성분을 수득하는 공정, 예를 들면 추출 공정 등의 전 공정, 후 공정 및 동시 공정중 적어도 어느 하나로 실시하면 양호하다.
본 발명의 초미립자화체에는 이러한 초미립자화체를 물에 분산시켜 측정했을 때에 바람직하게는 10㎛ 이하, 보다 바람직하게는 1㎛ 이하, 더욱 바람직하게는 약 0.01 내지 1㎛의 평균 입자직경을 갖는 초미립자를 사용할 수 있다. 면역강화제/면역조절제로서 사용하는 경우 분산화제 처리액(분산화액), 특히 유화제로 처리한 미셀화 상태인 것이 소화, 흡수의 면에서 바람직하지만, 건조상태의 초미립자화체를 면역강화제/면역조절제로서 사용할 수도 있다.
본 발명에 있어서, 초미립자의 측정방법에 관해서는, 통상의 입자, 특히 분산화 상태에 있는 입자의 측정방법을 이용하여 실시할 수 있다. 예를 들면, 입도분포계를 사용하여, 레이저 회절·착란식 입도분포 측정법에 의해 측정할 수 있다.
(면역강화제/면역조절제)
상기에 약간 설명한 바와 같이, 본 발명의 상기 초미립자화체는 면역강화제/면역조절제(본 발명의 면역강화제/면역조절제)의 유효성분으로서 사용할 수 있다. 본 발명의 의약 조성물이나 음식품용으로서 사용 가능한 담체나 증량제(또는 희석제)를 사용할 수 있다. 구체적으로는 의약 조성물이나 음식품(건강 식품 등)으로서 사용할 수 있다.
면역강화작용 또는 면역조절작용의 유무에 관해서는, 예를 들면 항종양활성, NK활성, 지연형 과민반응, 세포 내외의 사이토카인량, 항체의 생산량을 측정함으로써 용이하게 확인할 수 있다.
(의약 조성물)
본 발명의 의약 조성물(약제)은 상기 초미립자화체, 바람직하게는 분산화제 처리액(분산화액), 특히 바람직하게는 유화제를 사용하여 미셀화한 성분을 유효성분으로서 함유하는 것으로, 면역, 특히 전신 면역을 강화 또는 조절하여, 면역 이상에 따르는 질환의 치료, 개선, 진행 방지나 다른 질환으로부터의 예방 등에 사용할 수 있는 약제이다. 예를 들면, 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등의 질환이나 이러한 질환으로부터의 예방에 사용할 수 있다.
이러한 약제가 적용되는 대상은, 동물, 특히 사람이며 면역, 특히 전신 면역을 강화 또는 조절하는 것을 필요로 하는 사람이다.
본 발명의 약제의 특징 중 하나로 경구 투여해도 우수한 효과를 나타내며, 버섯 유래 성분 및 β-글루칸, 예를 들면, 버섯, 특히 식용 버섯 등의 추출물 혼합물을 사용할 수 있으며, 특히 안전성에서도 우수한 것을 들 수 있다. 따라서, 투여형태에 관해서는 특별히 제한은 없다. 경구 투여, 비경구 투여(피하, 근육내 투여, 경비 투여, 에어졸 투여 등) 각종 투여형태를 채용할 수 있으며, 또한 면역강화작용 및/또는 면역조절작용을 필요로 하는 질환자에게 널리 간편하게 적용할 수 있다. 안전성이나 경구 투여에 적합하다는 점에서 이와 같은 질환에 대한 예방, 개선을 위해, 하기의 건강 식품, 기능성 식품, 건강 음료, 기능성 음료 등의 형태로 사용하는 것도 가능하다.
본 발명에 있어서는, 다른 약제성분(의약활성 물질)과 함께, 예를 들면 혼합 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 경우, 본 발명에서 목적으로 하는 상기 유효성분을 함유하며, 목적으로 하는 상기 약리활성(면역강화활성 또는 면역조절활성)을 나타내는 것이면 본 발명의 약제에 포함된다.
그 외, 약리학적으로 허용할 수 있는 각종 제제용 물질(보조제 등으로서)을 함유할 수 있다. 제제용 물질은 제제의 제형에 의해 적절하게 선택할 수 있으며, 예를 들면, 부형제, 희석제, 첨가제, 붕해제, 결합제, 피복제, 윤활제, 활주제, 활택제, 풍미제, 감미제, 유화제, 가용화제 등을 들 수 있다. 또한, 제제용 물질을 구체적으로 예시하면, 탄산마그네슘, 이산화티타늄, 락토스, 만니톨 및 그 밖의 당류, 활석, 우유단백, 젤라틴, 전분, 셀룰로스 및 이의 유도체, 동물유 및 식물유, 폴리에틸렌글리콜 및 용제, 예를 들면 멸균수 및 1가 알콜 또는 다가 알콜, 예를 들면 글리세롤을 들 수 있다.
본 발명의 약제는 상기와 같이 공지되거나 장래 개발될 여러 가지 의약제제의 형태, 예를 들면, 경구 투여, 복강내 투여, 경피적 투여, 흡입 투여 등 각종 투여형태로 조제할 수 있다. 본 발명의 약제를 이러한 여러 가지 의약제제의 형태로 조제하기 위해서는 공지되거나 장래 개발될 방법을 적절하게 채용할 수 있다.
이러한 여러 가지 의약제제의 형태로서, 예를 들면 적당한 고형 또는 액상의 제제형태, 예를 들면 과립, 가루제, 피복정제, 정제, (마이크로)캡슐, 좌제, 시럽, 주스, 현탁액, 유탁액, 적가제, 주사용 용액, 활성물질의 방출을 연장하는 제제 등을 들 수 있다.
이상에서 예시한 제제형태로 존재하는 본 발명의 약제에는 약효를 나타내기에 유효한 양의 상기 성분을 함유해야 하는 것은 당연한 것이다.
본 발명의 약제의 투여량에 관해서는, 질환의 종류, 정도, 제제의 형태 등에 따라서 적당히 선택된다. 예를 들면, 경구 투여로 환자 1일당, 유효성분의 초미립자화체를 전체 당 환산으로 나타내어 바람직하게는 약 1mg 내지 50g, 보다 바람직하게는 약 10mg 내지 10g, 더욱 바람직하게는 약 50mg 내지 5g 투여할 수 있다. 또한, 중독인 경우에는 더욱 증량할 수도 있다. 투여의 회수, 시기에 관해서는 몇일에 1회도, 또한 1일 1회도 가능하지만, 통상적으로는 1일당 수회, 예를 들면 2 내지 4회로 나누어, 식전, 식간, 식후에 투여된다. 바람직하게는 식전에 투여된다. 또한, 정맥투여의 경우에는 상기 경구 투여에 비해 십 내지 백분의 1정도의 투여량이라도 양호하다.
(음식품)
특히, 본 발명의 음식품을 건강 식품이나 기능성 식품으로서 사용하는 경우에도 상기 경구 투여제제를 참고로 건강 식품이나 기능성 식품으로서 필요한 성분(다른 버섯과의 추출물 등도 포함된다), 첨가제를 가하여 조제할 수 있다. 당연히 음식품으로서 사용되는 식용 또는 영양성분 등을 적절하게 첨가하여 사용할 수 있다. 통상적으로는 상기 초미립자화체를 전체 당 환산으로 바람직하게는 약 0.01 내지 80중량%, 보다 바람직하게는 약 0.05 내지 20중량% 함유할 수 있다.
음식품으로서 사용할 수 있는 조미제나 감미제를 사용하며, 용액으로서 드링크 형태로 사용할 수 있으며, 정제, 과립제, 캡슐제, 젤리 타입, 아이스크림 타입, 얼린 형태 등의 형태로 사용할 수 있다.
이러한 음식품은 예방용으로서 건상자는 물론, 각종 질환을 가진 사람으로, 중증환자에서 경증환자까지, 특히 면역기능 이상에 따르는 질환자에게 한정되지 않으며, 전신 면역강화 또는 면역조절을 목적으로 사용할 수 있다. 사람 이외의 동물에 대해서도 사료, 의약품 및 의약 조성물 등의 형태로 적용할 수 있다.
(초미립자화체 함유 조성물)
본 발명은 버섯 유래 성분 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분 초미립자화체가 분산화되어 있는 수용액에 존재하는 것으로, 상기 초미립자화체 또는 이의 각종 용도나 제조방법에 관한 설명으로부터 본 발명을 용이하게 이해하고 실시할 수 있다. 당연히 이러한 조성물을 초미립자화체의 경우와 마찬가지로, 상기의 각종 용도, 특히 의약 조성물이나 음식품에 사용할 수 있으며, 이러한 설명을 본 발명에도 적용할 수 있다.
상기한 바와 같이 본 발명은, 별도의 형태로서, 상기 본 발명의 초미립자화체를 생체내에 섭취 또는 투여함을 특징으로 하는 면역강화방법 또는 면역조절방법이나, 또 하나의 별도의 형태로서, 상기 신규 초미립자화체의 면역강화제 또는 면역조절제에 대한 사용; 또는 초미립자화체의 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등의 치료제 등) 등, 또한 의약품제조에 사용된다.
이러한 발명에 관해서는, 모두 면역강화제 또는 면역조절제에 관한 상기 설명, 또는 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 항소화기 질환제(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사 등에 대한 치료제 등) 등에 관한 상기 설명이나 의약 조성물, 음식품 등에 관한 상기 설명, 또는 하기의 적합한 실시의 형태(실시예) 등에 기초하여, 또한 필요에 따라 종래부터의 공지 기술을 참고하여 용이하게 실시할 수 있다.
본 발명(본 발명품)은, 상기와 같이 사람뿐만 아니라 다른 동물에 대해서도 사용할 수 있으며, 예를 들면 가축업 등에 있어서의 동물(소, 돼지, 양, 말, 새 등), 애완동물(pet; 개, 고양이 등) 또는 수산 양식업에 있어서의 어류 등(경골어류, 갑각류 등)의 사료로서, 또는 사료에 첨가하는 첨가제 또는 의약품 또는 의약 조성물로서도 유용하다.
적합한 실시의 형태
이하에, 제조예, 실시예 및 비교예를 들어 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이러한 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
(실시예 1)
(표고버섯 추출방법)
표고버섯(생표고버섯 환산) 1kg당 물을 약 4L 가하고, 콜로이드 밀 등을 사용하여 파쇄(파쇄후 액체량: 약 6L), 환류 등으로 수분이 증발하지 않도록 가열환류하에 95℃에서 15시간 동안 펄펄 끓이고 수득된 추출액을 여과하였다. 여과액을 60℃에서 감압농축하여 약 1L의 농축물을 수득하였다. 페놀황산법으로 당 분석하여, 당 함량으로 20mg/ml 농도의 추출액(「표고버섯 추출액」;「표고버섯 엑기스」라고도 칭한다)를 수득하였다.
(표고버섯 추출액의 유화제 처리[미셀화])
트루레시틴고교(주) 제조의 레시틴(SLP-PC70)을 탈이온수에 가하여, 표고버섯 추출액의 전체 당농도와 동일 농도의 레시틴 용해액을 조제하였다. 이어서, 레시틴 용해액에 상기 표고버섯 추출액을 동량 첨가하여, 토쿠슈키카고교(주) 제조의 아디호모믹서 2M-2형을 사용하여 진공하 교반(진공도 -60cmHg, 앵커믹서 회전수 50rpm, 호모믹서 회전수 15,000rpm)하여, 예비 미셀화액을 조제하였다. 수득된 예비 유화액을 산와기카이(주) 제조의 고압 유화기 H11형 핸들 2단식을 사용하여 고압유화처리(유화압 1,500kgf/㎠)를 실시하여, 중앙 직경 약 10Onm의 표고버섯 추출액 미셀화액(미셀화 표고버섯 추출액: 본 발명품)을 제조하였다. 중앙 직경의 측정은 (주)호리바세사쿠쇼 제조 LA-910 입도분포계에 의해 레이저 회절·착란식 입도분포 측정법에 의해 실시하였다.
표고버섯 추출액 및 미셀화 표고버섯 추출액의 입도분포 측정결과를 도 1에 도시하였다. 그 결과, 표고버섯 추출액 중의 성분은 중앙 입자직경으로 약 120㎛을 나타내며, 이것을 유화제 처리([미셀화])하여 중앙 입자직경이 약 0.09㎛로 초미립자화할 수 있음을 나타내고 있다.
(실시예 2)
(β-글루칸 용액의 조제)
β-글루칸의 정제는 생표고버섯로부터 센바라 등의 방법[참조: Cancer Res., 30, 2776(1970)]으로 실시하였다. 즉, β-글루칸은 생표고버섯의 자실체를 열수 추출한 후, 에탄올 분별침전, 세틸트리메틸암모늄하이드로옥사이드(cethyltrimethyl ammonium hydroxide)에 의한 분별침전, 아세트산에 의한 분별용출, 역성 소다에 의한 분별용출, 단백질 제거의 반복 등에 의해서 백색 분말을 수득하였다. 수득된 백색분말을 증류수에 현탁, 균질화한 후, 오토클레이브로 고온고압처리(121℃, 20분)하여, 2mg/ml의 β-글루칸 용액을 조제하였다.
(β-글루칸의 유화제 처리[미셀화])
트루레시틴고교(주) 제조의 레시틴(SLP-PC70)을 탈이온수에 가하고, 8mg/ml 농도의 레시틴 용해액을 조제하였다. 이어서, 레시틴 용해액에 상기 β-글루칸 용액을 동량 첨가하여, 산와기카이(주) 제조의 고압유화기 H11형 핸들 2단식을 사용하여 고압유화 처리(유화압 1,500kgf/㎠)를 실시하여, 중앙 직경 약 10Onm의 β-글루칸 미셀화액(미셀화 β-글루칸 : 본 발명품)을 제조하였다. 중앙 직경의 측정은 (주)호리바세사쿠쇼 제조의 LA-910 입도분포계에 의해 레이저 회절·착란식 입도분포 측정법에 의해 실시하였다. β-글루칸 용액 및 미셀화 β-글루칸의 입도분포 측정결과를 도 2에 도시하였다. 그 결과, β-글루칸 용액 중의 β-글루칸은 응집체를 형성하고 있으며, 중앙 입자직경이 약 120㎛을 나타내며, 이것을 유화제 처리([미셀화])하여 중앙 입자직경이 약 0.09㎛로 초미립자화할 수 있음을 나타낸다.
(실시예 3)
(S180 피하 이식 모델을 사용한 실시예)
(시험방법)
ICR 마우스(암컷, 4주령)에 복강내 이식함으로써 계대하고 있는 Sarcoma 18O 종양세포를 복수의 형태로 채취하여, 생리식염수로 3 ×107/ml로 조제하였다. 이러한 세포 희석액을 0.1ml/마우스에서 ICR 마우스(암컷, 4주령)의 오른쪽 요배부 피하에 25G 주사바늘을 사용하여 이식하였다.
다음날, 체중에 의해 그룹(7마리/그룹)을 분류하여 개체 식별후, 표고버섯 추출액(표고버섯 엑기스) 및 표고버섯 추출액 미셀화액(미셀화 표고버섯 엑기스)의 투여를 개시하였다. 투여는 1일 1회의 경구 투여로 하고, 5투 2체로 합계 10회 실시하였다. 1회당 투여량에 관해서는, 전체 당량 환산 10mg/kg 투여 그룹에는 1mg/ml로 조제한 투여액을 0.2ml/마우스에서, 전체 당량 환산 100mg/kg 투여 그룹에는 10mg/ml로 조제한 투여액을 0.2ml/마우스에서 투여하였다.
한편, 표 1 및 표 2 중 투여 그룹란에 기재한 표고버섯 추출액 및 미셀화 표고버섯 추출액의 뒤의 괄호 내 숫자는 전체 당량 환산의 투여량이며, 단위는 mg/kg이다. 또한, 실시예 중 유화제를 사용하여 초미립자화 처리한 것을 미셀화 표고버섯 추출액이라고 칭하고 있다.
1주일 동안에 1회, 종양 직경과 체중을 측정하였다. 종양 직경에 의해 종양 중량을 이하의 계산식을 사용하여 산출하였다.
종양 중량(mg) = 종양 단직경(mm)2 ×종양 장직경(mm) ÷2
또한, 종양 중량과 체중으로부터 숙주 중량에 대해서도 산출하였다.
숙주 중량(g) = 체중(g) - 종양 중량(g)
종양 중량에 의해 종양증식 억제율을 산출하였다.
종양증식 억제율(%) = (1-투여 그룹의 종양 중량 ÷ 무처리 그룹의 종양 중량) ×100
각주의 종양증식 억제율과 종양 이식후 35일째의 종양생착예의 수에 의해, 본 모델에 있어서의 약효를 평가하였다. 미셀화 표고버섯 추출액의 종양증식 억제효과에 관한 결과를 표 1 및 표 2에 기재하였다.
투여 그룹 | 16일 | |||
평균(g) | S.E. | t-검정 | M검정 | |
무처리 그룹 | 2.493 | 0.246 | - | - |
유화제 단독 | 2.817 | 0.401 | N.S. | N.S. |
표고버섯 추출액(10) | 1.844 | 0.363 | N.S. | N.S. |
표고버섯 추출액(100) | 2.712 | 0.522 | N.S. | N.S. |
미셀화 표고버섯 추출액(10) | 1.507 | 0.163 | p < 0.01 | p < 0.01 |
미셀화 표고버섯 추출액(100) | 1.744 | 0.394 | N.S. | N.S. |
16일: 종양 이식후 일수 16일 t-검정: Student's t-검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 t-검정을 실시한다. M 검정: Mannwhitney-U 검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 순위합 검정을 실시한다. N.S.: 유의차 없음 ; p < 0.01; 유의차 있음 |
미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹에서는 투여 기간중, 무처리 그룹과 비교하여 서서히 종양증식이 억제되며 Day 16(투여종료 2일 후)에 있어서, 미셀화 표고버섯 추출액 전체 당량 환산 10mg/kg 경구 투여 그룹에서, p < 0.01로 유의적으로 종양증식이 억제되었다.
투여 그룹 | 종양 증식 억제율(%) | ||
16일* | |||
무처리 그룹 | - | ||
유화제 단독 | -13.0 | ||
표고버섯 추출액(10) | 26.0 | ||
표고버섯 추출액(100) | -8.8 | ||
미셀화 표고버섯 추출액(10) | 39.6 | ||
미셀화 표고버섯 추출액(100) | 28.8 | ||
*종양이식후 일수 16일 |
상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 본 발명품의 초미립자화체는 종래품과 비교하여 목적으로 하는 약효를 나타내고 있는 것으로 확인되었다.
(실시예 4)
(β-글루칸의 정량)
표고버섯 추출액 중의 β-글루칸을 정량하기 위해서, (실시예 2)에서 정제한 β-글루칸을 수산화 나트륨용액(1→25)에 용해하여, 메탄올 침전을 실시하며, 이것을 2회 반복하여 메탄올 및 아세톤으로 세정한 후, 감압건조(40℃, 15시간)하여, 질소: 0.03% 이하, 강열(强熱) 잔분: 1.5% 이하의 표준 β-글루칸을 수득하였다.
표고버섯 추출액 중의 β-글루칸의 정량은, 사사끼 등의 방법[참조: Gann, 67(2) 191-5(1976)]을 응용하여, 먼저 정제한 표준 β-글루칸을 사용하여 정량하였다. 즉, 표고버섯 추출액 및 표준 β-글루칸을 각각 수산화 나트륨용액(2g/dl)으로 조제, 콩고레드 용액(10mg/dl)과 인산(2.5g/dl)을 가하여, β-글루칸에 의한 콩고레드의 극대 흡수파장의 시프트를 이용하여, 535nm의 흡광도를 분광광도계로 측정함으로써 정량하였다.
β-글루칸 양을 정량한 표고버섯 추출액을 사용하며, (실시예 1)과 동일한 방법으로, β-글루칸의 농도가 0.2mg/ml가 되도록 미셀화 표고버섯 추출액(레시틴 농도 0.8mg/ml)을 조제하였다. 또한, 동일한 방법으로 β-글루칸 용액도 0.2mg/ml이 되도록 레시틴으로 유화처리를 실시하여 미셀화 β-글루칸 용액을 수득하였다.
(실시예 5)
(미셀화 β-글루칸의 종양증식 억제효과)
상기에서 조제한 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸 및 β-글루칸 용액의 종양증식 억제효과를 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 검토하였다. 즉, ICR 마우스(암컷, 4주령)에 복강내 이식함으로써 계대하고 있는 Sarcoma 18O 종양세포를 복수의 형태로 채취하고, 생리식염수로 3 ×107/ml로 조제하였다. 이러한 세포 희석액을 0.1ml/마우스에서 ICR 마우스(암컷, 4주령)의 오른쪽 요배부 피하에 25G 주사바늘을 사용하여 이식하였다.
다음날, 체중에 의해 그룹(7마리/그룹)을 분류하고 개체 식별후, 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸 및 β-글루칸의 투여를 개시하였다. 투여는 1일 1회의 경구 투여로 하며, 5투 2체로 합계 10회 실시하였다. 1회당 투여량에 관해서는, β-글루칸 환산 1mg/kg 투여 그룹에는 β-글루칸 농도로 0.2mg/ml로 조제한 투여액을 O.1ml/마우스에서 투여하였다.
한편, 표 3 및 표 4중 투여 그룹란에 기재한 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸 및 β-글루칸 뒤의 괄호내 숫자는 β-글루칸 환산의 투여량이고, 단위는 mg/kg이다. 또한 실시예중, 유화제를 사용하여 초미립자화 처리를 실시한 것을 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸이라고 칭하고 있다.
투여 그룹 | 16일 | |||
평균(g) | S.E. | t-검정 | M검정 | |
무처리 그룹 | 3.011 | 0.323 | - | - |
미셀화 표고버섯 추출액(1) | 1.496 | 0.343 | p < 0.01 | p < 0.01 |
미셀화 β-글루칸(1) | 1.468 | 0.256 | p < 0.01 | p < 0.01 |
β-글루칸(1) | 2.041 | 0.391 | N.S. | N.S. |
16일: 종양이식후 일수 16일 t-검정: Student's t-검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 t-검정을 실시한다. M 검정: Mannwhitney-U 검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 순위합 검정을 실시한다. N.S.: 유의차 없음: p < 0.01: 유의차 있음 |
미셀화 표고버섯 추출액 및 미셀화 β-글루칸 투여 그룹, 즉 초미립자화 처리를 실시한 것의 투여 그룹에서는, 투여 기간중, 무처리 그룹과 비교하여 서서히 종양증식이 억제되며, Day 16(투여종료 2일 후)에 있어서, β-글루칸량 환산 1mg/kg 경구 투여 그룹에서, p < O.01로 유의적으로 종양증식이 억제되고 있었다.
투여 그룹 | 종양 증식 억제율(%) | ||
16일* | |||
무처리 그룹 | - | ||
미셀화 표고버섯 추출액(1) | 50.3 | ||
미셀화 β-글루칸(1) | 51.2 | ||
β-글루칸(1) | 32.2 | ||
*: 종양이식후 일수 16일 |
상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 본 발명품의 초미립자화체(미셀화 표고버섯 추출액 및 미셀화 β-글루칸 )는 종래품(β-글루칸 용액)과 비교하여 목적으로 하는 약효를 나타내고 있는 것으로 확인되었다.
(실시예 6)
(장관점막 면역활성화: 병리조직학적 검토)
미셀화 표고버섯 추출액의 장관점막 면역의 활성화를 검토하기 위해서, 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 검토하였다. 즉, ICR 마우스(암컷, 4주령)에 복강내 이식함으로써 계대하고 있는 Sarcoma 180 종양세포를 복수의 형태로 채취하고, 생리식염수로 3 ×107/ml로 조제하였다. 이러한 세포 희석액을 O.1ml/마우스에서 ICR 마우스(암컷, 4주령)의 오른쪽 요배부 피하에 25G 주사바늘을 사용하여 이식하였다.
다음날, 체중에 의해 그룹(3마리/그룹)을 분류하고 개체 식별후, 유화제(레시틴)만, 유화제에 표고버섯 추출액을 첨가한 것(초미립자화([미셀화])처리 없음) 및 미셀화 표고버섯 추출액의 투여를 개시하였다. 투여는 1일 1회 경구 투여로 실시하여, 5투 2체로 합계 10회 실시하였다. 1회당 투여량에 관해서는, 유화제는 레시틴 2mg/ml 농도를 0.1ml/마우스, 유화제에 표고버섯 추출액을 첨가한 것은 β-글루칸 환산량 1mg/kg 투여 그룹에는 β-글루칸 농도로 0.2mg/ml(레시틴 농도는 2.0mg/ml)로 조제한 투여액을 0.1ml/마우스에서 투여, 미셀화 표고버섯 추출액은 β-글루칸 환산량 1mg/kg 투여 그룹에는, β-글루칸 농도로 0.2mg/ml(레시틴 농도는 2mg/ml)로 조제한 투여액을 0.1ml/마우스에서 투여, β-글루칸 환산량 3mg/kg 투여 그룹에는 0.3ml/마우스에서 투여하였다.
투여종료후, 2일째에 각각의 그룹 및 정상 마우스(3마리)로부터 파이엘판 부착 소장을 잘라내고, 10% 포르말린 고정후, 파라핀 포매, 파라핀 절편을 작성, 탈파라핀후 헤마톡시린·에오진 염색을 실시하며, 현미경으로 장관점막 고유층 중의 단핵구(면역 담당 세포)의 집적을 관찰하였다.
한편, 표 5중 투여 그룹란에 기재한 표고버섯 추출액 및 미셀화 표고버섯 추출액 뒤의 괄호내 숫자는 β-글루칸 환산의 투여량이며, 단위는 mg/kg이다. 또한 실시예중, 유화제를 사용하여 초미립자화 처리를 실시한 것을 미셀화 표고버섯 추출액이라고 칭하고 있다.
투여 그룹 | 융모당 단핵구 집적의 비율(%) | t-검정 | |
평균(%) | S.D. | ||
정상 마우스*1 | 0.00 | 0.00 | - |
무처리 그룹 | 0.31 | 0.27 | - |
유화제 단독 | 0.24 | 0.41 | N.S. |
유화제 + 표고버섯 추출액(1)*2 | 0.35 | 0.60 | N.S. |
미셀화 표고버섯 추출액(1) | 1.33 | 0.73 | p < 0.1 |
미셀화 표고버섯 추출액(3) | 1.34 | 0.08 | p < 0.01 |
현미경으로 융모의 수를 측정(100 내지 300개/검체), 및 점막 고유층 중의 단핵구의 집적수를 측정, 융모당 집적상의 비율(%)을 산출한다. *1: 정상 마우스의 장관점막 고유층에는, 단핵구의 집적은 확인되지 않는다. *2: 유화제(레시틴)에 표고버섯 추출액을 첨가만 한 것으로, 초미립자화([미셀화])처리는 실시하지 않는다. t-검정: Student's t-검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 t-검정을 실시한다. N.S.: 유의차 없음, p < 0.1: 유의 경향, p < 0.01: 유의차 있음 |
정상 마우스, 담암 무처리 그룹, 유화제(레시틴 10mg/kg 경구 투여 그룹)처리 그룹, 유화제에 표고버섯 추출액을 첨가한 것의 β-글루칸 환산량으로 1mg/kg 경구 투여 그룹, 미셀화 표고버섯 추출액 β-글루칸 환산량으로 1mg/kg 및 3mg/kg 경구 투여 그룹의 소장의 병리조직을 현미경으로 관찰한 결과, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹에 있어서, 무처리 그룹과 비교하여, 소장점막 고유상에, 1mg/kg 투여 그룹에서 유의 경향(p < 0.1) 3mg/kg 투여 그룹에서 유의적인 단핵세포(림프구, 마크로파지)의 집적이 확인되었다(p < 0.01). 미셀화 표고버섯 추출액 투여 이외의 그룹은 무처리 그룹과 비교하여 차이는 확인되지 않았다. 따라서, 미셀화 표고버섯 추출액을 경구 투여함으로써 장관점막에 있어서 면역반응이 야기(활성화)된다고 생각된다.
상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 본 발명품의 초미립자화체(미셀화 표고버섯 추출액)는 종래품(표고버섯 추출액)과 비교하여 목적으로 하는 약효를 나타내고 있는 것으로 확인되었다.
(실시예 7)
(전신 면역의 활성화: 지연형 과민반응)
종양항원에 대한 특이적인 전신 면역반응의 활성화를 검토하기 위해서, 지연형 과민반응의 평가를 실시하였다. 지연형 과민반응 평가법에 관해서 설명한다.
상기 실시예 3과 동일한 방법으로 종양이식을 실시하였다. 즉, ICR 마우스(암컷, 4주령)에 복강내 이식함으로써 계대하고 있는 Sarcoma 180 종양세포를 복수의 형태로 채취하여, 생리식염수로 3 ×107/ml로 조제하였다. 이러한 세포 희석액을 0.1ml/마우스에서 ICR 마우스(암컷, 4주령)의 오른쪽 요배부 피하에 25G 주사바늘을 사용하여 이식하였다.
다음날, 체중에 의해 그룹(7마리/그룹)을 분류하고 개체 식별후, 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸, β-글루칸 용액의 투여를 개시하였다. 투여는 1일 1회의 경구 투여로 하며, 5투 2체로 합계 9회 실시하였다. 1회당 투여량에 관해서는, 미셀화 표고버섯 추출액 및 미셀화 β-글루칸은 β-글루칸 환산량 1mg/kg 투여 그룹에는, β-글루칸 농도로 0.2mg/ml(레시틴 농도는 0.8mg/ml)로 조제한 투여액을 0.1ml/마우스에서 투여하였다. β-글루칸 용액은 β-글루칸량 1mg/kg 투여 그룹에는, β-글루칸 농도로 O.2mg/ml로 조제한 투여액을 0.1ml/마우스에서 투여하였다.
무처리 그룹, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹, 미셀화 β-글루칸 투여 그룹, β-글루칸 용액 투여 그룹 각각 7마리씩 및 정상 마우스 3마리를 지연형 과민반응(DTH: Delayed Type Hypersensitivity)시험에 제공하였다. 즉, 종양이식후 9일째(투여개시후 8일째)에, 대조군으로서 오른쪽 풋 패드(foot pad)에 생리식염수 50㎕를, 왼쪽 풋 패드에 Sarcoma 180 세포를 3M KCl 가용화법 또는 동결융해법(5 ×107/ml의 세포 현탁액을 처리)으로 수득한 종양항원 용액을 50㎕을 투여하여, 24시간후 좌우의 발 두께를 측정, 이하의 산식에 근거하여 발의 붓기를 산출, DTH 반응의 검정을 실시하였다.
발의 붓기(mm) = 왼발의 두께(mm)-오른발의 두께(mm)
한편, 표 6중 투여 그룹란에 기재한 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸 및 β-글루칸 뒤의 괄호내 숫자는 β-글루칸 환산의 투여량이며, 단위는 mg/kg이다. 또한 실시예중, 유화제를 사용하여 초미립자화 처리를 실시한 것을 미셀화 표고버섯 추출액, 미셀화 β-글루칸이라고 칭하고 있다.
투여 그룹 | 발의 붓기(mm) | t-검정 | |
평균(mm) | S.D. | ||
정상 마우스*1 | 0.08 | 0.05 | - |
무처리 그룹 | 0.01 | 0.05 | - |
미셀화 표고버섯 추출액(1) | 0.23 | 0.25 | p < 0.05 |
β-글루칸 용액(1) | 0.08 | 0.11 | N.S. |
미셀화 β-글루칸(1) | 0.17 | 0.08 | p < 0.01 |
*1: 정상 마우스는, 종양이식(항원감작)을 실시하고 있지 않기 때문에 DTH 반응은 일으키지 않는다. t-검정: Student's t-검정: 각각의 그룹에서 무처리 그룹에 대하여 t-검정을 실시한다. N.S.: 유의차 없음, p < 0.05: 유의차 있음, p < 0.01: 유의차 있음 |
표 6에 기재하는 바와 같이, 정상 마우스, 무처리 그룹, β-글루칸 용액 투여 그룹에서는, 거의 발의 붓기가 확인되지 않는 데 대하여, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹 및 미셀화 β-글루칸 투여 그룹에서는, 무처리 그룹에 대하여 유의적인 발의 붓기가 확인되며, 지연형 과민반응이 야기되고 있는 것으로 확인되었다. 이러한 결과는, 미셀화 표고버섯 추출액 및 미셀화 β-글루칸을 경구 투여함으로써, 종양항원에 대한 전신적인 면역반응을 야기할 수 있음을 나타내고 있다.
(실시예 8)
(항알레르기 효과)
미셀화 표고버섯 추출액의 항알레르기 효과를 검토하기 위해서, 아토피성 피부염 모델 마우스인 NC 마우스를 사용하여 검토하였다. 즉, 8주령 수컷의 NC 마우스 20마리에 에탄올 및 아세톤(4:1)으로 조제한 항원; 염화피크릴(5%(w/v)) 150㎕/마우스에서 복부 및 발바닥에 도포하고 감작, 감작후 4일 후부터 주 1회, 6주 동안, 올리브 오일로 조제한 유발용 항원; 염화피크릴(0.8%(w/v))를 150㎕/마우스, 등 부분 및 양귀(내외 양측)에 도포하였다. 투여개시는 항원 감작 전날부터 1일 1회 46일 동안 투여하였다. 투여량은 대조군(10마리)에는, 용매 대조군으로서 생리식염수 0.1ml/마우스를 경구 투여하였다. 미셀화 표고버섯 추출액은 β-글루칸 환산량으로 0.2mg/ml로 조제한 투여액을 0.1mL/마우스에서 경구 투여하였다. 이러한 투여량은 1회의 투여로 β-글루칸 환산량으로 1mg/kg의 투여량에 해당하였다.
항알레르기 효과의 판정은 항원감작을 주 1회, 체중측정, 피부염 발증의 정도; ① 소양증(pruritus/itching), ② 발적·출혈(erythema/hemorrhage), ③ 부종(edema), ④ 찰상·조직결손(excoriation/erosion), ⑤ 가피형성·건조(scaring/dryness)를 관찰하여 평점화한다(평점: 0; 무증상, 1; 경도, 2; 중등도, 3; 고도). 또한, 항원감작후, 29일째와 46일째에 안저채혈을 실시하고, 혈청을 채취, 혈청 중의 임노글로블린E(IgE)량을 ELISA법으로 측정하였다.
결과: 감작후 46일째에서, IgE량은 대조군의 마우스 10마리 모두가 5.0㎍/ml 이상인 데 대하여, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹에서는 10마리중 4마리가 5.0㎍/ml 이상일 뿐이며, 나머지 6마리는 5.0㎍/ml 미만이고, 유의적으로 IgE의 증량이 억제되었다(Fisher의 확률 검정: p < 0.05). 또한, 피부염 스코어에 있어서도, 감작후 46일째에서 대조그룹에서는 10마리중 9마리가 피부염 스코어의 합계가 9 이상을 나타낸 데 대하여, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹에서는, 10마리중 5마리가 피부염 스코어의 합계가 9 이상이며, 나머지의 5마리는 피부염 스코어 9 미만으로 대조군과 비교하여 피부염이 억제되고 있는 결과이다.
상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 본 발명품의 초미립자화체(미셀화 표고버섯 추출액)는 목적으로 하는 약효(항알레르기 효과)를 나타내고 있는 것으로 확인되었다.
(실시예 9)
(항당뇨병 효과: 혈당치 상승 억제효과)
미셀화 표고버섯 추출액의 당뇨병에 대한 효과를 검토하기 위해서, Ⅱ형 당뇨병 모델 마우스인 db/db 마우스를 사용하여 혈당치 상승에 대한 효과를 검토하였다. 즉, db/db 마우스 5주령 수컷을 각 그룹 9마리씩 2그룹으로 나누고, 한 쪽에는 12주령이 될 때까지 물을 자유음수시킨 대조군으로 하고, 다른 쪽에는 12주령이 될 때까지 미셀화 표고버섯 추출액을 자유 음수시켰다. 미셀화 표고버섯 추출액의 농도는 β-글루칸 환산량으로 0.01mg/ml(레시틴 농도는 0.1mg/ml)로 하였다. 각주마다 음수량을 측정하여, β-글루칸의 경구섭취량을 산출하였다.
효과의 판정은 각주마다 안저채혈을 실시하여, 혈당치를 측정하고, 혈당치의 상승억제 효과를 검토하였다. β-글루칸의 경구섭취량은 6주령 내지 12주령에서 0.15 내지 0.36mg/마우스/일이었다.
혈당치에 관해서는, 8주령 시점에서, 대조군의 혈당치가 504.11 ±50.03mg/dl인데 대하여, 미셀화 표고버섯 추출액 투여 그룹에서는, 406.22 ±75.55mg/dl이며, 유의적으로 혈당치의 상승이 억제되었다(Student`s t-검정: p < 0.01).
상기 결과로부터 분명한 바와 같이, 본 발명품의 초미립자화체(미셀화 표고버섯 추출액)는 목적으로 하는 약효(당뇨병에 대한 혈당치 상승억제 효과)를 나타내고 있는 것으로 확인되었다.
Claims (39)
- 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 초미립자화함을 특징으로 하는, 물에 분산시켜 측정하였을 때, 입자의 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 초미립자화체.
- 제1항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분이 버섯의 물 추출물인 초미립자화체.
- 제1항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분이 β-글루칸인 초미립자화체.
- 제1항에 있어서, 버섯의 물 추출물이 β-글루칸이거나 β-글루칸을 함유하는 초미립자화체.
- 제1항에 있어서, β-글루칸이 버섯의 물 추출물이 아닌 초미립자화체.
- 제5항에 있어서, β-글루칸이 효모 유래 성분, 진균 유래 성분, 세균 유래 성분 및 식물 유래 성분으로부터 선택된 초미립자화체.
- 제1항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분이, 수용액중 응집체를 형성하는 초미립자화체.
- 제7항에 있어서, 당해 응집체가 50㎛ 이상의 입자직경을 갖는 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 초미립자화체.
- 제9항에 있어서, 평균 입자직경이 0.01 내지 1㎛인 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하였을 때에 수득할 수 있고, 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 함유하는 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 미분쇄화 처리시에 수득할 수 있으며, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 함유하는 초미립자화체.
- 제11항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이, 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과한 후 수득되는 버섯의 추출물 함유 수용액인 초미립자화체.
- 제13항에 있어서, 버섯의 추출물 함유 수용액이 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과한 후, 이것을 농축, 냉각 또는 농축 및 냉각시켜 수득되는 응집물 함유 수용액인 초미립자화체.
- 제11항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이, β-글루칸의 수용액 또는 β-글루칸을 함유하는 수용액인 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 분산화제로 처리한 상태 또는 분산화된 상태인 초미립자화체.
- 제11항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액 중에 함유되는 전체 당 1에 대하여, 분산화제가 100 이하의 중량비로 혼합되는 초미립자화체.
- 제11항에 있어서, 분산화제가 유화제인 초미립자화체.
- 제18항에 있어서, 유화제가 레시틴인 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 미셀화 상태인 초미립자화체.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 초미립자화체를 함유함을 특징으로 하는 면역강화제 또는 면역조절제.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 초미립자화체를 함유함을 특징으로 하는 항종양제, 항감염증제, 항바이러스제, 항자가면역 질환제, 항당뇨병약, 항알레르기제, 또는 항소화기 질환제[과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사에 대한 치료제].
- 제21항에 있어서, 제제학상 허용되는 담체 또는 증량제를 추가로 함유하는 면역강화제 또는 면역조절제.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 초미립자화체를 함유함을 특징으로 하는 음식품.
- 제24항에 있어서, 초미립자화체를 전체 당 환산으로 0.01 내지 80중량% 함유하는 음식품.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 초미립자화체가 분산화되어 있는 수용액을 함유함을 특징으로 하는 초미립자화체 함유 조성물.
- 제26항에 따르는 조성물을 함유함을 특징으로 하는 음식품.
- 제27항에 있어서, 조성물을 전체 당 환산으로 0.05 내지 5중량% 함유하는 음식품.
- 제24항에 있어서, 암 질환, 세균감염 질환, 바이러스 감염 질환, 자가면역 질환, 당뇨병, 알레르기성 질환 및 소화기 질환(과민성 장증후군(IBS), 염증성 장질환(IBD), 변비, 설사)의 어느 하나의 질환 환자용 음식품.
- 제26항에 있어서, 100g당 당을 1 내지 20000mg 및 분산화제를 1 내지 20000mg 함유하는 조성물.
- 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 초미립자화 공정으로 처리함을 특징으로 하는, 물에 분산시켜 측정하였을 때, 입자의 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 초미립자화체의 제조방법.
- 제31항에 있어서, 초미립자화 공정이 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하여 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함하는 방법.
- 제31항 또는 제32항에 있어서, 초미립자화 공정이, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함하는 방법.
- 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 초미립자화 공정으로 처리함을 특징으로 하는, 물에 분산시켜 측정하였을 때, 입자의 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 초미립자화체 함유 조성물의 제조방법.
- 제34항에 있어서, 초미립자화 공정이 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액에 분산화제를 혼합하여 평균 입자직경이 10㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함하는 방법.
- 제34항 또는 제35항에 있어서, 초미립자화 공정이, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정을 포함하는 방법.
- 제33항에 있어서, 평균 입자직경이 1㎛ 이하인 입자를 조제하는 공정이 고압 유화기 처리공정인 방법.
- 제31항 또는 제34항에 있어서, 버섯의 물 추출물이, 버섯을 물에 의한 추출 공정에서 수득되는 물 추출물인 방법.
- 제32항 또는 제35항에 있어서, 버섯의 물 추출물 및 β-글루칸으로부터 선택되는 성분을 함유하는 수용액이, 버섯의 물 또는 열수 추출액을 여과한 후 수득되는 버섯의 추출물 함유 수용액인 방법.
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