KR20100003182A

KR20100003182A - 과채류 발효물 및 이를 함유하는 조성물

Info

Publication number: KR20100003182A
Application number: KR1020090023532A
Authority: KR
Inventors: 박선민; 소광섭; 박영호
Original assignee: 호서대학교 산학협력단; 주식회사 고려비엔피
Priority date: 2008-06-30
Filing date: 2009-03-19
Publication date: 2010-01-07
Also published as: KR101124660B1

Abstract

본 발명은 과채류 발효물 및 이를 함유하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 과일, 채소 또는 이들의 혼합물에 순차적으로 1차 및 2차 발효시키는 과채 발효물의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 과채류 발효물, 및 상기 과채류 발효물을 함유하는 기능성 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 과채류 발효물은 다양한 유산균을 함유하여 항균 활성 및 소취 활성이 우수함으로써 항균제, 항균성 식품 및 항균성 사료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

과채류 발효물, 유산균, 항균 활성, 사료 조성물

Description

과채류 발효물 및 이를 함유하는 조성물{fermented fruits and vegetables and compositions comprising the same}

본 발명은 과채류 발효물 및 이를 함유하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 과일, 채소 또는 이들의 혼합물에 순차적으로 1차 및 2차 발효시키는 과채류 발효물의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 과채류 발효물, 및 상기 과채류 발효물을 함유하는 기능성 조성물에 관한 것이다.

조류, 특히 닭은 대부분 좁은 공간에서 가둬 지내므로 면역기능이 감소하여 병균에 감염되기 쉬워 태어나면서부터 항생제를 지속적으로 복용시키고 있다. 이런 항생제의 복용은 축산물에는 스트레스 호르몬이나 잔류 항생제 함량이 높으므로 소비자가 잔류물 섭취량이 높아지고 건강에 문제를 일으킬 수 있다. 최근 조류 인플렌자에 의한 피해는 매우 크며, 그 이동 경로 막는 것이 쉽지 않으므로 조류의 면역기능을 강화시키고, 자연 친화적인 항균 및 항바이러스를 공급하는 것이 요구되고 있다. 이에, 친환경 양계와 양돈을 하기 위해서는 면역 능력을 강화시키고, 항균 및 항바이러스에 효과가 있는 천연물질을 탐색하는 것이 필요하다.

일반적인 세균은 중성(약 pH 7)에서 발육하는데 유산균은 pH가 낮은데서 생육하므로 유해균이 사멸하므로 천연 항생제로서의 효과가 높다.

국내에서 유산균 연구는 주로 김치를 통해 연구되어졌다. 김치에 들어 있는 유산균이 조류독감을 치료하고 식중독을 예방한다는 보고, 축산에 적용할 때 사료효율의 획기적 개선으로 생산성을 증대시키고 항생제 내성에 대한 장내 세균총의 정상화를 도모하며, 살모넬라, 대장균 및 병원성균을 억제하여 폐사율을 감소시키고 자돈, 송아지의 식이성 및 미생물에 의한 설사 예방 및 치료에 탁월한 효과를 발휘한다는 보고가 있었다.

국외에서는 요구르트 박테리아가 에이즈 바이러스(HIV)의 감염 차단 효과가 있고, 치즈와 요구르트 제조과정에 사용되는 유산균인 락토코쿠스 락티스(lactococcus lactis)가 HIV의 감염을 차단하는 효과가 있다는 것을 보고한 바 있다. 또한, 다양한 과일, 근채류, 곡류, 콩류 또는 해조류 등을 3 ~ 5년 저온 발효한 식품이 유산균에 의해 면역력을 증가시키고, 알코올 섭취후 혈중 알데히드의 농도 증가를 억제하는 효과가 있음이 보고된 바 있다. 또한, 비피더스균이 인플루엔자 바이러스 감염의 위험을 낮춘다는 보고가 있었다.

그러나 국내외 과채류 유산균에 대한 연구는 거의 이루어져 있지 않다. 김치 유산균은 내염성인 유산균인 반면에 과채류 발효 유산균은 내염성이 아니므로 유산균 종에 큰 차이가 있고 장기간 발효시켜서 나오는 유산균이므로 새로운 유산 균이 발견되어 이의 활용이 가능할 것으로 사료된다.

비해리 형태의 유기산은 미생물의 세포막을 통해 세균 안으로 들어갈 수 있다. 세포막 지질 이중 층 안에서 분배되면서 비해리된 유기산 분자는 세포막 단백질/효소의 활성을 간섭한다. 분배계수가 높은 유기산(안식향산 또는 푸마릭산)은 소수성이 아주 강해 지질 막 안에 축적 정도나 흡수율이 굉장히 높아 세포 성장 억제에 효과가 높다. 유기산의 분배계수가 높은 것은 병원균의 성장을 억제하는데 필요한 유기산의 농도가 낮아 효과적으로 병원균의 성장을 억제한다.

항균활성을 측정하는 방법에는 라디칼 확산 분석법(radial diffusion assay) 및 마이크로브로스 희석 분석법(Microbroth dilution assay)이 있다. 구체적으로, 라디칼 확산 분석법은 병원성 미생물[내성 포도상구균, 폐렴구균, 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes), 살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 이콜라이(E. coli) 등]이 포함된 아가로즈 젤(agarose gel)에 홀(hole)을 만든 후, 시료를 첨가하고, 상기 시료가 젤 내로 충분히 확산되도록 배양한 후, 젤 내의 홀(hole)을 중심으로 형성된 클리어링 영역(clearing zone)의 직경을 측정함으로써 시료의 항균 활성(antimirobial activity)을 측정하는 방법이다. 마이크로브로스 희석 분석법은 박테리아 현탁액(bacteria suspension), 항균 펩타이드(peptide) 및 배지의 혼합물에 시료를 첨가하고 배양한 후, 상기 첨가한 시료의 A₆₃₀을 측정하여, 박테리아의 성장 억제율(ent growth inhibition; IC)을 {1-A₆₃₀(시료 및 균주)/ A₆₃₀(균주)}×100으로 정하고 80%의 성장 억제율(IC80)을 갖도록 해주는 펩타이드들의 농도를 최소 억제 농도(minimum inhibitory concentration; MIC)로 결정하여 측정하는 방법이다.

과일과 채소류는 비타민, 무기질 및 섬유소 등의 영양소가 풍부하고 관능적인 신선감, 고유의 맛, 향기를 지니고 있다. 또한 이들이 함유하고 있는 풍부한 섬유소는 정장작용효과가 우수하며 포만감을 주어 배변작용 및 다이어트에 효과적이다. 또한, 과채류의 과피와 종자에 존재하는 각종 폴리페놀 성분들은 항산화력이 우수하여 건강 미용식으로도 인식되고 있다.

최근에는 과채류에 유산균을 접종하여 발효시킴으로써 생리활성이 증가된 가공식품을 제조하는 방법들이 개발되고 있다. 예를 들어, 대한민국특허 제319377호에는 채소와 한약재의 착즙액을 락토바실러스 플라타룸으로 발효시켜 제조한 발효음료가 개시되어 있으며, 대한민국특허 제167863호에는 약초, 과일즙 및 곡물을 유산균으로 발효시킨 발효액을 첨가한 복합효소 음료의 제조방법이 개시되어 있다. 특허 제 185250호에는 야채즙에 락토바실러스 플란타룸을 배양시켜 야채 발효액을 얻고 여기에 기호에 따라 과즙 또는 야채즙을 첨가하여 유산균이 함유된 과채음료를 제조하는 방법이 개시되어 있다.

이에, 본 발명자들은 종래 방법에 비해 보다 우수한 내산성, 내담즙성 및 항균 활성을 가지는 유산균이 함유된 과채류 발효액을 연구하던 중, 과채류를 시럽과 혼합 후 발효조에서 누룩을 첨가하여 1차 발효시킨 다음, 냉암소의 숙성조에 넣어 2차 발효시킨 발효액이 다양한 유산균을 포함하고 있으며, 높은 항균 활성을 가지고 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 과채 발효액을 제조하는 방법, 상기 제조방법에 의해 제조된 과채 발효액, 및 상기 과채 발효액을 함유하는 기능성 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은

1) 과일, 채소 또는 이들의 혼합물을 파쇄한 후 시럽과 혼합하여 혼합액을 제조하는 단계;

2) 상기 단계 1)의 혼합액을 발효조에 넣은 후 누룩을 첨가하여 발효시켜 1차 발효액을 제조하는 단계;

3) 상기 단계 2)의 1차 발효액을 30 ~ 40℃의 숙성조에 넣어 발효시켜 2차 발효액을 제조한 후, 살균 및 여과하는 단계, 또는 이에 추가적으로 유산균을 첨가하여 3차 발효시키는 단계를 포함하는 과채류 발효물 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 제조방법에 의해 제조된 과채류 발효물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 건강기능식품을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 사료조성물을 제공한다.

본 발명의 방법에 따라 제조된 과채 발효액은 내산성, 내담즙성 및 항균성이 우수한 다양한유산균을 고함량으로 함유하며, 항균 활성 및 소취 활성이 우수하여, 면역 증강용 기능성 식품, 항균제 및 사료 조성물의 원료로서 유용하게 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은

상기 방법에 있어서, 단계 1)의 과일은 사과, 참외, 수박, 배, 귤, 오렌지, 감, 포도, 키위, 파인애플 및 딸기로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것이 바람직하나 상기 과일의 종류는 이에 한정되지 않는다.

상기 방법에 있어서, 단계 1)의 채소는 토마토, 양배추, 케일, 당근, 브로컬리, 파 및 양파로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것이 바람직하나 상기 채소의 종류는 이에 한정되지 않는다.

상기 방법에 있어서, 단계 1)의 과일, 채소 또는 이들의 혼합물은 상기 혼합액에 대하여 각각 60 ~ 80 중량%(w/w)로 동량으로 혼합하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

상기 방법에 있어서, 단계 1)의 시럽은 설탕, 물엿 및 꿀로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 혼합물인 것이 바람직하고, 2종 이상의 혼합물인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 시럽은 20 ~ 40 중량%(w/w)로 혼합하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

상기 방법에 있어서, 단계 2)의 누룩은 1 내지 5 중량%(w/w) 첨가하는 것이 바람직하고, 2% 첨가하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

상기 방법에 있어서, 단계 2)의 1차 발효는 30 내지 40℃의 온도에서 30일 내지 90일 동안 발효시키는 것이 바람직하고, 30 내지 35℃의 온도에서 40일 내지 60일 동안 발효시키는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 발효기간은 과일의 종류(껍질의 두께 및 딱딱함) 또는 과일의 익은 상태에 따라 차이가 있으며 당업자에 의해 적절하게 정할 수 있다.

상기 방법에 있어서, 단계 2)의 2차 발효는 30 내지 40℃의 온도에서 10 내지 100일 동안 발효시키는 것이 바람직하고, 30 내지 35℃의 온도에서 20일 내지 90일 동안 발효시키는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 발효기간은 유기산도의 정도. pH의 상태, 유산균의 종류 및 균수에 따라 차이가 있으며 당업자에 의해 적절하게 정할 수 있다.

상기 방법에 있어서, 추가적으로 3차 발효를 위한 유산균은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtillis), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 바실러스 폴리미샤(Bacillus polymyxa), 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리티커스(Bacillus amylolyticus), 바실러스 스테아로터머필러스(Bacillus sterothemophilus) 및 지오바실러스 스테아로터머필러스(Zeobacillus sterothemophilus)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상을 사용하는 것이 바람직하고, 지오바실러스 스테아로터머필러스(Zeobacillus sterothemophilus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 또는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)를 사용하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

본 발명자들은 6종의 과채를 각각 60 ~ 80 중량%(w/w)로 준비하여 세척한 후, 일괄 또는 각각 파쇄하였다. 상기 파쇄된 과채에 설탕 및 물엿을 혼합한 혼합물을 발효조에 넣고 2%의 누룩을 넣은 후 35℃의 온도로 유지하면서 48일 동안 1차 발효시키고, 상기 1차 발효된 혼합물을 여과장치를 이용하여 1차 여과하여 발효액 을 분리하였다. 상기 분리된 1차 발효액을 30 ~ 35℃의 숙성조에 넣어 20일 내지 90일 동안 숙성시킨 후, 숙성된 발효액을 여과장치를 이용하여 2차 여과하여 발효액을 수득하였다(도 1 참조).

상기 과채 발효액은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 힐가르디(Lactobacillus hilgardii), 락토바실러스 나겔리(Lactobacillus nagelii), 락토바실러스 삿수멘시스(Lactobacillus satsumensis), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 말리(Lactobacillus mali) 및 지고사카라마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)의 유산균을 함유하고 있으나 이에 한정되지 않는다.

상기 과채 발효액은 내상성, 내담즙성, 항균활성 및 소취능을 가지는 것을 특징으로 한다.

본 발명자들은 과채 발효액에서 분리한 유산균의 위액 강산성에 대한 저항성 여부를 확인하기 위하여, 산성 배지에서 배양한 후 확인하였다. 그 결과, 상기 유산균은 pH 3.5까지 성장이 우수하며 특히 과채 발효액의 락토바실러스 힐가르디(Lactobacillus hilgardii), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 지고사카로마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)는 pH 2.0까지도 안정한 것을 확인하였다. 따라서 본 발명의 과채 발효액은 동물에게 공급하였을 때 위산에서도 죽지 않고 장에서도 활성을 나타낼 수 있어 동물 사료로 효율적임을 알 수 있었다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액에서 분리한 유산균의 담즙에 저항성을 확인하기 위하여, 담즙산(oxgall)이 함유된 배지에 접종한 후, 배양하면서 생균수의 변화를 관찰하였다. 그 결과, 유산균은 1%의 담즙 농도에 대해 내성이 있는 것으로 나타났다. 따라서 본 발명의 과채 발효액 내 유산균은 장관 내에서 증식 가능성이 높은 균주임을 알 수 있다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액에서 분리한 유산균의 항균 활성을 확인하기 위하여, 라디칼 확산 분석법(radial diffusion assay)을 이용하여 측정하였다. 그 결과, 대체적으로 병원균에 대한 항균력을 가지고 있었고, 그 중 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium)에 대해서 효과적이었다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액 자체의 산도 및 비해리 유기산을 측정한 결과, 과채 발효액은 산 제제(Acidifiers)[아세트산(Acetic acid), 말린산(Malic acid), 젖산(Lactic acid)]가 함유되어 있고, 산도가 낮아(pH 3.5) 병원균의 성장을 효과적으로 억제할 수 있음을 알 수 있다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액 자체의 항균 활성을 측정한 결과, 병원성 세균인 살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium) 및 대장균(E. coli)에 대해서 높은 항균성을 가지고 있고, 발효기간이 길어질수록 산도 가 높아지고 항균력이 증가하며, 과채 발효액이 개별 균주에 비해 항균력이 높은 것을 알 수 있다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액 자체가 소취능이 있는지 알아보기 위해, 암모니아와 황화수소 농도를 가스텍으로 측정하였다. 그 결과, 과채 발효액은 암모니아와 황화수소에 대한 초기에 빠른 소취능력을 나타내었다(도 2 참조).

상기 면역증강용 조성물은 과채류 발효물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.

상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 과채류 발효물을 1 내지 50 중량%로 포함하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 조성물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사 또는 근육내 주사를 통할 수 있다.

투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 5 mg ~ 100 mg/㎏이고, 바람직하기로는 5 mg ~ 50 mg/㎏이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 면역증강 방법을 제공한다.

본 발명의 과채류 발효물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 과채류 발효물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 과채류 발효물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 과채류 발효물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.

상기 외에 본 발명의 과채류 발효물은 여러가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 과채류 발효물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 사료조성물은 과채류 발효물 이외에도, 당해 기술분야에 공지된 일반적인 사료 성분을 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 사료 조성물은 곡물 가루, 당질, 비타민, 아미노산, 단백질, 지질, 광물질 등을 포함할 수 있다.

본 발명의 사료 조성물에는 곡물 및 곡물 부산물이 사용될 수 있는데, 예컨대 평지씨, 면실, 대두, 밀기울，미강，탈지강，맥강，옥수수겨，맥아근，대두피,감자 전분，고구마 전분，옥수수 전분，커피박，잠사，잠분，해조분，타피오카，대두박，면실박，임자박，채종박，아마박，호마박，옥수수글루텐，밀글루텐，낙화생 박，야자박，해바라기씨박，주정박，옥수수배아박，고추씨박，장유박，맥주박 중에서 하나 또는 2종 이상이 혼합될 수 있다.

본 발명의 사료 조성물은 수용성 및 수불용성 모노사카라이드, 디사카라이드 및 폴리사카라이드와 같은 당 및 복합 탄수화물을 포함할 수 있다. 사용될 수 있는 당질로서 보다 상세하게는, 포도당, 만노오스, 프룩토오스, 백당, 맥아당, 셀로비오스, 젖당, 트레할로오스, 멜리비오스, 라피노오스, 에스크린, 살리신, 아미그달린, 만니톨, 솔비톨, 소르보스, 멘티토오스 등을 들 수 있으며, 당밀, 자당뿐만 아니라 올리고당도 병용하여 이용할 수 있다.

본 발명의 사료 조성물에 포함될 수 있는 임의의 아미노산 성분에는 아르기닌, 히스티딘, 이소로이신, 로이신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트레오닌, 트립토판, 발린, 티로신, 알라닌, 아스파르트산, 글루탐산나트륨, 글리신, 프롤린, 세린, 시스테인, 및 이들의 동족체, 및 이들의 염이 있다.

본 발명의 사료 조성물에 임의로 첨가할 수 있는 비타민에는 티아민· HCl, 리보플라빈, 피리독신·HCl, 니아신, 니아신아미드, 이노시톨, 염화콜린, 판토텐산칼슘, 바이오틴, 폴산, 아스코르브산, 및 비타민 A, B, K, D, E 등이 있다. 이 중, 특히 비타민 A, 비타민 B군 및 비타민 E는 항산화 물질로도 사용될 수 있다.

본 발명의 사료 조성물에 포함될 수 있는 지방산은, 예를 들어, 대두유, 평지씨유, 옥수수유, 홍화유, 해바라기유, 라이스유, 비프스테이크 식물유, 달맞이꽃유, 유리지치유, 아마인유 등의 식물유, 및 가다랭이, 고등어, 정어리 등의 어유 및 각종 미생물 유래의 트리글리세라이드 등의 유지를 가수 분해 처리함으로써 수 득할 수 있다. 그리고, 상기에서 얻어지는 지방산의 금속염으로서 지방산의 칼슘염 및 마그네슘염 또한 포함될 수 있다.

본 발명의 사료 조성물에는 사장석, 벤토나이트, 맥반석 등 공지의 바이오세라믹 물질이 소량 첨가되어 항균 기능 등을 배가시킬 수 있다.

본 발명의 사료 조성물에는 당해 기술분야에 공지되어 있는 임의의 약제 성분을 첨가할 수 있고, 특히 항생제, 생균제, 감미제, 제산제, 지사제 등의 인공적 화학약품을 포함시켜도 본 발명의 범주 안에 든다. 이외에도, 본 발명의 사료 조성물은 칼슘원으로서 패각류를, 철, 망간, 구리, 아연, 몰리브덴의 미네랄원으로서 게 껍질, 소라 껍질 등을 소량 첨가할 수도 있다.

본 발명자들은 과채 발효액을 0.1% 수준으로 사료에 첨가하여 육계사양실험을 수행한 결과, 과채 발효액을 0.1% 사료에 첨가하여 투여한 실험군은 첨가하지 않은 사료를 투여한 대조군에 비해 증체량 및 사료요구율 개선 효과가 있었다. 따라서, 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여하면 육계의 생산성 향상이 가능하다는 것을 알 수 있다(도 3 참조).

또한, 본 발명자들은 과채 발효액을 0.1% 수준으로 사료에 첨가하여 산란계 실험을 수행한 결과, 과채 발효액을 0.1% 사료에 첨가하여 투여한 실험군이 대조군에 비해 식욕이 왕성하고 움직임이 활발하며, 산란일이 약 7 ~ 10일 정도 단축되는 것을 알 수 있었으며, 폐사율이 줄어 면역력이 강화되었음을 알 수 있었다. 또한, 계사내 냄새가 줄어들었고, 모든 산란계가 일률적으로 고르게 성장하였으며, 산란율이 93.5%에 이르렀다. 아울러, 계란을 관찰한 결과 계란의 껍질이 두껍고, 노른 자의 탄력이 강하고 색상이 진하였으며, 비린내가 거의 없었으며, 콜레스테롤 함량이 낮은 것을 알 수 있었다.

또한, 본 발명자들은 과채 발효액을 0.2% 수준으로 사료에 첨가하여 포유자돈(30일령 이내의 새끼 돼지)을 이용하여 양돈사양 실험을 수행하였다. 그 결과, 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여한 실험군은 대조군에 비해 일일 평균 6.3% ~ 3.7%의 증체 효과를 나타내었고, 설사지수가 최고 87% 감소하였으며, 낮은 폐사율을 나타내었다. 따라서, 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여하면 증체, 소화기능 강화 및 면역력이 강화됨으로써 생산성이 향상될 수 있음을 알 수 있다(도 4 내지 도 6 참조).

이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 과채 발효액의 제조

본 발명자들은 청과시장에서 구입한 본 발명자들은 7종의 과채인 사과 10중량%, 참외 10중량%, 토마토 10중량%, 오렌지 7중량%, 수박 10중량%, 포도 10중량%, 양배추 10중량%(w/w)를 준비하여 세척한 후, 일괄 또는 각각 파쇄하였다. 상기 파쇄된 과채에 설탕(20중량%), 물엿(10중량%) 및 꿀(3중량%)으로 구성된 군으로부터 선택된 2종 이상과 혼합하였다. 상기 혼합물을 발효조[100L 고무통이나 스텐레스 통을 35℃를 유지하도록 장치한 방에 인큐베이터(incubator) 형식으로 절연(insulation)이 되도록 자체 제작함]에 넣고 2중량%의 누룩을 넣은 후 30 내지 35℃의 온도로 유지하면서 48 내지 60일 동안 1차 발효시키고, 상기 1차 발효된 혼합물을 1차 여과(실크천으로 자연여과)하여 발효액(수득량: 60%)을 분리하였다. 상기 분리된 발효액을 30 내지 35℃의 숙성조에 넣어 20일 내지 90일 동안 숙성시킨 후(2차 발효기간을 1개월, 2개월 및 3개월 동안 각각 수행하여 제조), 숙성된 발효액을 여과장치를 이용하여 2차 여과하여 발효액(0.22 미크롬 여과지 또는 0.22 미크롬 여과장치로 제균하여 2차 발효 여과액을 추출, 수득량 95 내지 100%)을 수득하였다. 또한, 상기 2차 발효액에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtillis)를 접종하여 48시간 배양한 후 담체를 혼합하여 사료를 제조하였다(도 1).

<실시예 2> 과채 발효액으로부터 유산균의 분리 및 동정

<2-1> 유산균 분리

본 발명자들은 상기 <실시예 1>에서 제조한 과채 발효액 10 g을 멸균 생리식염수에 넣고 교반하여 현탁물(suspension)을 얻은 이후 각각의 현탁물을 연속희석(serial dilution)하여 유산균 생장 배지인 MRS 아가(agar) 및 LB(Luria-Bertani) 아가 배지에 접종하여 플레이팅(plating)한 후 37℃에서 48시간 동안 배양하여 수득한 콜로니(colony)의 형태를 관찰하였다.

<2-2> 유산균 동정

본 발명자들은 상기 실시예 <2-1>에서 분리한 유산균으로부터 프로테이나제 K(Proteinase K) 추출 방법 및 CTAB(Cetyltrimethylammonium bromide) 방법을 이용하여 유산균의 염색체 DNA(Chromosomal DNA)를 분리하였다. 상기 분리된 DNA로부터 16S rRNA를 증폭하기 위해 프라이머[박테리아 16S 포워드 프라이머(forward primer): 5'-CCGAATTCGT CGACAACAGA GTTTGATCCT GGCTCAG-3(서열번호: 1)' 및 박테리아 16S 리버스 프라이머(reverse primer): 5'-CCCGGGATCC AAGCTTACGG CTACCTTGTT ACGACTT-3'(서열번호: 2)]를 이용하여 PCR 증폭하였다. 상기 PCR 조건은 하기와 같다: 94℃에서 5분 동안 변성(denaturating(1 사이클)), 94℃(30초)에서 변성, 55℃에서(60초) 풀림(annealing), 72℃(60초)에서 연장(extending)(35 사이클), 및 72℃에서 최종 연장(final extension)을 10분 동안 한다.

여러 유산균으로부터 생성되는 PCR 조각의 크기가 거의 유사하므므로 각각의 균주에서 얻어지는 PCR 조각을 서로 분리하기 위해, 변성 농도구배 겔(3% 아가로즈 젤) 전기영동(denatured gradient gel electrophoresis; DGGE) 방법을 통해 DNA 조각을 염기서열의 차이에 따라 서로 분리하였다. 전기영동 겔 내 유전자 변성 시약의 농도구배를 조절함으로써 전기영동 밴드가 중첩됨이 없이 뚜렷하게 나오도록 변성시약의 최적 농도를 결정하였다. 상기 분리 및 정제한 16S rDNA는 주)솔젠트의 DNA Sequencing Laboratory에 의뢰하여 16S rDNA의 염기서열을 분석하였다.

상기 16S rDNA의 염기서열을 통한 동정 결과, 과채 발효유에 함유된 유산균의 종류는 하기와 같았다: 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실 러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 힐가르디(Lactobacillus hilgardii), 락토바실러스 나겔리(Lactobacillus nagelii), 락토바실러스 삿수멘시스(Lactobacillus satsumensis), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 말리(Lactobacillus mali) 및 지고사카라마이세스 비스포러스(Zygosaccharomyces bisporus)(각각 1 x 10⁷cfu/g).

<실험예 1> 과채류 발효액 유래 유산균의 내산성 , 내담즙성 및 항균성 측정

<1-1> 유산균의 내산성 측정

본 발명자들은 상기 <실시예 2>에서 분리한 유산균의 위액 강산성에 대한 저항성 여부를 확인하기 위하여, MRS 브로스(broth) 배지에 0.1N-염산(0.1N HCl)을 첨가하여 pH(2.0/2.5/3.0/3.5/4.0/무 조절)를 조절하여 6개의 형태로 나누어 제조한 뒤 과채 발효액내 유산균 및 효모를 각각의 pH별 배지에 접종하여 유산균은 37℃, 효모는 30℃ 인큐베이터(incubator)에 보관하면서 성장 여부를 지속적으로 관찰하였다.

그 결과, 표 1에서 보는 바와 같이 대부분의 균주는 pH 3.5까지 성장이 우수하며 특히 과채 발효액의 락토바실러스 힐가르디(Lactobacillus hilgardii)(L5), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)(L6), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)(L11), 지고사카로마이세스 비스포러 스(Zygosaccharomyces bisporus)(Y-17)는 pH 2.0까지도 안정한 것을 확인함으로써 동물에게 공급하였을 때 위산에서도 죽지 않고 장에서도 활성을 나타낼 수 있어 동물 사료로 효율적임을 알 수 있었다(표 1).

<1-2> 유산균의 내담즙성 측정

본 발명자들은 상기 <실시예 2>에서 분리한 유산균의 담즙에 저항성을 확인하기 위하여, 각각 pH 5.0으로 조정된 MRS 아가(agar) 배지와 1% 담즙산(oxgall)이 함유된 MRS 아가 배지에 접종한 후에, 37℃에서 4시간, 8시간, 12시간, 24시간 배양하면서 생균수의 변화 및 집락 형성을 관찰하였다.

그 결과, 유산균은 담즙산에 대한 내성이 높은 편으로 나타났다. 본 발명의 유산균은 1%의 담즙 농도에 대해 내성이 있는 것으로 나타나 장관 내에서 증식 가능성이 높은 균주임을 알 수 있다.

<1-3> 유산균의 항균성 측정

본 발명자들은 상기 <실시예 2>에서 분리한 유산균의 항균 활성을 확인하기 위하여, 라디칼 확산 분석법(radial diffusion assay)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 병원성 세균[살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium), 대장균(E. coli)] 배양액을 TSA 배지에 각각 중층 분주한 뒤 배지가 굳은 후 홀(hole)을 만든 후, 분리된 각각의 유산균 배양액(3일 배양)을 50ul 씩 적재(loading)하여 30℃ 인큐베이터(incubator)에서 2일간 배양한 뒤 나타난 홀(hole)을 중심으로 형성된 클리어링 영역(clearing zone)의 직경을 측정함으로써 시료의 항균 활성(antimirobial activity)을 확인하였다.

그 결과, 표 2에서 보는 바와 같이 락토바실러스 삿수멘시스(Lactobacillus satsumensis)(L1), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus)(L2), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)(L3), 락토바실러스 말리(Lactobacillus mali)(L4), 락토바실러스 힐가르디(Lactobacillus hilgardii)(L5), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)(L6), 락토바실러스 나겔리(Lactobacillus nagelii)(L7), 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)(L11)은 모두 병원균에 종류에 따른 차이는 약간 있었지만 대체적으로 병원균인 살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium) 및 대장균(E. coli)에 대한 항균력을 가지고 있었고, 그 중에서도 락토바실러스 나겔리(Lactobacillus nagelii)(L7) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)(L11)이 가장 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium)에 대해서 효과적이었다(표 2).

<실험예 2> 과채류 발효액의 산도, 비해리 유기산 및 항균력 측정

<2-1> 과채 발효액의 산도 및 비 해리 유기산 측정

본 발명자들은 과채 발효액의 성분 분석 및 pH를 측정하였다. 그 결과, 2차 발효기간이 1개월, 2개월 및 3개월인 과채류 발효액이 각각 산도가 1%씩 증가하였으며, 상기 모든 과채류 발효액에서 산 제제(Acidifiers)[아세트산(Acetic acid), 말린산(Malic acid), 젖산(Lactic acid)]가 함유되어 있고, 산도가 낮아(pH 3.5) 병원균의 성장을 효과적으로 억제할 수 있음을 알 수 있다. 표 3에서 보는 바와 같이 과채 발효액에 함유된 아세트산(Acetic acid), 말린산(Malic acid) 및 젖산(Lactic acid)의 함량은 각각 0.6+0.1%, 0.9+0.1%, 및 0.6+0.1%를 함유되어 있어 이들이 병원균의 성장을 억제할 수 있음을 알 수 있다(표 3).

<2-2> 과채 발효액의 항균력 시험

병원성 세균[살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium), 대장균(E. coli)] 배양액을 TSA 배지에 각각 중층 분주한 뒤 배지가 굳은 후 Hole cup을 배지 위에 치상하고, 홀(Hole) 안에 분리된 유산균 함유 과즙 액을 150㎕씩 적재(loading)하여 30℃ 인큐베이터(incubator)에서 2일간 배양 후 나타난 홀(hole)을 중심으로 형성된 클리어링 영역(clearing zone)의 직경을 측정함으로써 시료의 항균 활성(antimirobial activity)을 확인하였다.

그 결과, 표 4에서 보는 바와 같이 과채 발효액은 병원성 세균인 살모넬라 티피머리운(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 갈리나리움(Salmonella gallinarium) 및 대장균(E. coli)에 대해서 높은 항균성을 가지고 있었으며, 발효기간이 길어질수록 산도가 높아지고 항균력이 증가하였다(표 4). 또한, 표 5에서 보는 바와 같이 과채 발효액이 개별 균주에 비해 항균력이 증가됨을 알 수 있었다(표 5).

< 실험예 3> 과채 발효액의 탈취력 시험

과채 발효액을 400배 희석한 다음 소취능을 검증하였다. 악취원은 암모니아 및 황화수소를 각각 25 및 50 ppm으로 하였다. 코르크 마개로 밀봉된 모 악취원을 각각 주사기로 주입한 뒤 400배 희석된 배양액 10 ml을 주입하고 병을 10분 간격으로 흔들어 주었으며 0분, 30분, 60분, 120분 및 240분의 암모니아와 황화수소 농도를 가스텍으로 측정하였다.

그 결과, 표 6에서 보는 바와 같이 암모니아와 황화수소는 초기(30분)에 빠른 소취능력(암모니아 68% 및 황화수소 48%)을 나타내었으며, 2시간 후에는 암모니아의 76%, 황화 수소 58%의 소취능을 나타내었다(표 6 및 도 2).

< 실험예 4> 과채 발효액을 이용한 닭 및 돼지의 사육

<4-1> 육계사양실험

본 발명자들은 규모가 각각 9,000수*2동인 강원도 영월군 주천면 구구농장에서 코림 바이오㈜에서 생산한 과채 발효액인 사료 첨가제를 0.1% 수준으로 사료에 첨가하여 사육한 200마리의 육계 실험군, 및 상기 과채 발효액을 첨가하지 않은 사료를 투여한 200마리의 육계 대조군을 각각 주령 별로 육계의 사료섭취량, 증체량 및 사료요구율을 조사하였다.

그 결과, 표 7에서 보는 바와 같이 과채 발효액을 0.1% 사료에 첨가하여 투여한 실험군은 상기 과채 발효액을 첨가하지 않은 사료를 투여한 대조군에 비해 증체량 7.7%, 사료요구율 6.9% 개선 효과가 있다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여하면 육계의 생산성 향상이 가능하다는 것을 알 수 있었다(표 7 및 도 3).

<4-2> 산란계실험

본 발명자들은 경기도 화성시 비봉면 양노리 일지농장에서 코림 바이오㈜에서 생산한 과채 발효액인 사료 첨가제를 0.1% 수준으로 사료에 첨가하여 사육한 200마리의 육계 실험군, 및 상기 과채 발효액을 첨가하지 않은 사료를 투여한 200마리의 육계 대조군을 각각 주령 별로 닭들의 산란일, 면역력, 계란상태 및 환경위생을 조사하였다.

그 결과, 표 8에서 보는 바와 같이 과채 발효액을 0.1% 사료에 첨가하여 투여한 닭들은 상기 과채 발효액을 첨가하지 않은 사료를 투여한 닭들에 비해 식욕이 왕성하고 움직임이 활발하며, 산란일이 약 7 ~ 10일 정도 단축되는 것을 알 수 있었다. 또한, 인근 농장의 닭들이 살모넬라에 의해 폐사하였으나 당 농장에서는 살모넬라에 의한 폐사가 없었으며 오히려 체중이 평균 300g 정도 증가한 것을 확인함으로써 면역력이 강화되었음을 알 수 있었다. 또한, 계사 내 냄새가 줄어들었고, 모든 산란계가 일률적으로 고르게 성장하였으며, 산란율이 93.5%에 이르렀다. 아울러, 계란을 관찰한 결과 계란의 껍질이 두껍고, 노른자의 탄력이 강하고 색상이 진하였으며, 비린내가 거의 없었으며, 콜레스테롤 함량이 낮은 것을 확인하였다(표 8).

<4-3> 양돈사양실험

본 발명자들은 포유자돈(30일령 이내의 새끼 돼지) 24마리(강화 불은면 산성리 공공 농장)를 코림 바이오㈜에서 생산한 과채 발효액인 사료 첨가제 0.2%를 사료에 첨가하여 사육한 12마리의 돼지 실험군, 및 상기 과채 발효액을 첨가하지 않은 사료로 사육한 12마리의 돼지 대조군을 사육한 후 증체량, 설사지수 및 폐사율을 측정하였다.

그 결과, 도 4 내지 도 6에서 보는 바와 같이 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여한 실험군은 대조군에 비해 일일 평균 6.3% ~ 3.7%의 증체 효과를 나타내었고, 설사지수가 최고 87% 감소하였으며, 대조군에서는 총 30마리 중 2마리가 폐사하였으나, 실험 군에서는 폐사가 전혀 나타나지 않았다. 따라서, 과채 발효액을 사료에 첨가하여 투여하면 증체, 소화기능 강화 및 면역력이 강화됨으로써 생산성이 향상될 수 있음을 알 수 있다(도 4 내지 도 6).

하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.

< 제조예 1> : 약학적 제제의 제조

1. 산제의 제조

과채류 발효물 2 g

유당 1 g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

2. 정제의 제조

과채류 발효물 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유 당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

3. 캡슐제의 제조

과채류 발효물 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유 당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

4. 환의 제조

과채류 발효물 1 g

유당 1.5 g

글리세린 1 g

자일리톨 0.5 g

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1 환 당 4 g이 되도록 제조하였다.

5. 과립의 제조

과채류 발효물 150 ㎎

대두 추출물 50 ㎎

포도당 200 ㎎

전분 600 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.

< 제조예 2> : 식품의 제조

1. 조리용 양념의 제조

본 발명의 과채류 발효물 20 ~ 95 중량부로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.

2. 토마토 케찹 및 소스의 제조

본 발명의 과채류 발효물 0.2 ~ 1.0 중량부를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스를 제조하였다.

3. 스프 및 육즙(gravies)의 제조

본 발명의 과채류 발효물 0.1 ~ 5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.

4. 그라운드 비프(ground beef)의 제조

본 발명의 과채류 발효물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.

5. 유제품(dairy products)의 제조

본 발명의 과채류 발효물 5 ~ 10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.

6. 건강보조식품의 제조

과채류 발효물 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B1 0.13 ㎎

비타민 B2 0.15 ㎎

비타민 B6 0.5 ㎎

비타민 B12 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

< 제조예 3> : 음료의 제조

1. 건강음료의 제조

과채류 발효물 1000 ㎎

구연산 1000 ㎎

올리고당 100 g

매실농축액 2 g

타우린 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

2. 야채쥬스의 제조

본 발명의 과채류 발효물 5 g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.

3. 과일쥬스의 제조

본 발명의 과채류 발효물 1 g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000 ㎖ 에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.

도 1은 과채 발효액 및 이를 이용한 사료의 제조과정을 나타내는 그림이다.

도 2는 과채 발효액의 탈취력 시험의 결과를 나타내는 그래프이다.

도 3은 과채 발효액을 첨가한 육계사양실험의 결과인 증체량, 사료섭취량 및 사료요구량을 나타내는 그래프이다.

도 4는 과채 발효액을 첨가한 양돈사양실험의 결과인 총제중 증가량을 나타내는 그래프이다:

대조군 : 무처리;

시험 1군 : 과채발효액 0.2% 음수 및 경구투여; 및

시험 2군 : 과채발효액 10일 이후 음수 투여.

도 5는 과채 발효액을 첨가한 양돈사양실험의 결과인 설사지수를 나타내는 그래프이다:

대조군 : 무처리;

시험 1군 : 과채발효액 0.2% 음수 및 경구투여; 및

시험 2군 : 과채발효액 10일 이후 음수 투여.

도 6은 과채 발효액을 첨가한 양돈사양실험의 결과인 폐사율을 나타내는 그래프이다:

대조군 : 무처리;

시험 1군 : 과채발효액 0.2% 음수 및 경구투여; 및

시험 2군 : 과채발효액 10일 이후 음수 투여.

<110> Hoseo University Academic Cooperation Foundation KBNP, INC <120> fermented fruits and vegetables and compositions comprising the same <130> 9p-03-12 <150> KR10-2008-0062538 <151> 2008-06-30 <160> 2 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for 16S rRNA <400> 1 ccgaattcgt cgacaacaga gtttgatcct ggctcag 37 <210> 2 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for 16S rRNA <400> 2 cccgggatcc aagcttacgg ctaccttgtt acgactt 37

Claims

3) 상기 단계 2)의 1차 발효액을 30 ~ 40℃의 숙성조에 넣어 발효시켜 2차 발효액을 제조한 후, 살균 및 여과하는 단계를 포함하는 과채류 발효물 제조방법.

제 1항에 있어서, 추가적으로 유산균을 접종하여 3차 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 2항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtillis), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 바실러스 폴리미샤(Bacillus polymyxa), 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 아밀로리티커스(Bacillus amylolyticus), 바실러스 스테아로터머필러스(Bacillus sterothemophilus) 및 지오바실러스 스테아로터머필러스(Zeobacillus sterothemophilus)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 1항에 있어서, 단계 1)의 과일은 사과, 참외, 수박, 배, 귤, 오렌지, 감, 포도, 키위, 파인애플 및 딸기로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 1항에 있어서, 단계 1)의 채소는 토마토, 양배추, 케일, 당근, 브로컬리, 파 및 양파로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 1항에 있어서, 단계 2)의 1차 발효는 30 내지 40℃의 온도에서 45 내지 65일 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 1항에 있어서, 단계 2)의 2차 발효는 30 내지 40℃의 온도에서 20 내지 90일 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는 제조방법.

제 1항의 제조방법에 의해 제조된 과채류 발효물.

제 8항의 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 조성물.

제 8항의 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 건강기능식품.

제 8항의 과채류 발효물을 유효성분으로 함유하는 면역증강용 사료조성물.