KR20090088343A - 고함량의 유파틸린을 함유하는 쑥 추출물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 프로판올로 추출하여 얻은 쑥 추출물에 대한 것으로서, 이를 통해 항위염 물질인 유파틸린을, 기존 기술에 비해 고함량으로 함유할 뿐만 아니라 별도의 제거 공정 없이 혈액응고억제 물질이 완전히 제거된 쑥 추출물을 확보할 수 있다.

쑥(Artemisia), 쑥 추출물(Artemisia extract), 프로판올(propanol)

Description

고함량의 유파틸린을 함유하는 쑥 추출물{ARTEMISIA EXTRACT CONTAINING HIGH CONTENT OF EUPATILIN}

쑥(Artemisia mongolica, A. asiatica, A. princeps var. orientalis, A. argyi, A. montana 등)은 국화과에 속하는 다년생 약초로서 예로부터 강장보혈, 부인병, 설사치료제로 사용되어 왔으며 규명된 화학성분으로서 이소쿠마린, 쿠마린, 디테르펜락톤 등이 있으며 유파틸린, 자세오시딘 등의 플라보이노이드 성분 등도 확인되었다.

대한약전외 한약(생약)규격집에서는 상기 쑥의 잎 및 어린줄기를 일컬어 애엽(艾葉, Artemisiae argyi Herb)이라 지칭하고 있다.

이 중 플라보노이드 성분인 유파틸린(eupatilin)은 항알러지 효과(일본 공개특허공보 소59-155314호)가 알려진 바 있으며 최근 국내에서도 위장질환 치료제로서의 효용성에 대해서도 밝혀진 바 있다. (대한민국 특허등록 127777) 더불어, 또 다른 플라보노이드 성분인 자세오시딘(jaseocidin) 역시 동일한 위장질환 치료제로서 사용 가능함이 특허로 등록된 바 있다. (대한민국 특허등록 181751)

한편, 대한민국 특허등록 181751에서는, 쑥으로부터 정제한 유파틸린 또는 자세오시딘의 항위염 효과에 비해 쑥 추출물 자체의 항위염 효과가 더욱 뛰어나 해당 추출물 중 미지의 물질들이 항위염 효과를 상승시키는 것으로 추정 기술하고 있다.

상기한 바와 같이, 쑥 추출물 자체가 유효 개별성분인 유파틸린 또는 자세오시딘에 비해 그 효과가 높다 하더라도 대한민국 등록특허 181751에서 보듯이, 쑥 추출물 중 개별 유효성분의 함유율이 높을수록 비례적으로 위병변 억제효과가 높아지는 경향이 명확하게 나타나 있어 해당 추출물 중 유효성분 함유량을 증가시키는 것은 그 치료효과를 더욱 상승시킬 수 있는 기회를 확보할 수 있다 하겠다.

더불어, 대한민국 특허공개 2006-0002639에서는, 쑥에 함유되어 있는 혈액응고억제 성분 즉, 쿠마린(coumarin)류가 포함되어 있으며 특히, 이 가운데 디쿠마롤(Dicoumarol) 성분이 추출 과정에서 포함된다고 적시하고 있다. 선행기술에 기술된 바와 같이 디쿠마롤은 소량의 투약으로도 혈소판 수를 급격히 감소시킬 수 있고 간독성도 보고된 바 있어 의학적 용도로 사용할지라도 매우 신중을 기해 투약되어야 하는 성분에 해당한다. 더욱이, 위염 또는 위궤양 환자는 위장 손상에 의한 위출혈이 동반되는 경우가 허다하므로 이 같은 성분은 반드시 제거되어야만 약효 증가를 더욱 기대할 수 있다 하겠다.

또한, 상기 선행기술에서는, 기존의 대한민국 특허등록 181751에 따른 알코올 또는 알코올 수용액 추출물에서는 이 성분의 제거가 용이하지 않음을 적시하고 있으며 이를 제거할 수 있는 방법으로서, 1) 애엽 잎을 알코올 또는 알코올 수용액으로 추출하는 단계(단계1), 2) 상기 단계1에서 얻어진 추출물에 알칼리 용액을 첨 가하고 80℃에서 1시간 이상 반응시키는 단계(단계2), 3) 상기 단계2에서 얻어진 추출물에 산성 용액을 첨가하여 중화시키는 단계(단계3) 및 4) 상기 단계3에서 얻어진 추출물을 감압농축한 후 동결건조하는 단계(단계4)를 포함하는 제조방법을 제공하고 있다. 즉, 선행기술에 단계2 및 단계3의 알칼리 처리 및 이의 중화 과정을 포함시킴으로써 디쿠마롤 성분을 용이하게 제거할 수 있음을 알 수 있다.

본 발명에서는 기존 추출법과 달리 추출 용매를 에탄올에서 프로판올로 치환할 경우, 예상치 않게 높은 유파틸린 함량을 확보할 수 있음과 더불어 별도의 추가 공정을 거치지 않더라도, 혈액응고억제성분인 디쿠마롤이 포함되지 않는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 위병변 억제 효과를 나타내는 유파틸린이 고함량으로 함유되고 별도의 제거공정을 거치지 않더라도 혈액응고성분인 디쿠마롤이 포함되지 않는 쑥 추출물을 확보하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 쑥(애엽)을 프로판올로 추출, 농축하여 고농도의 유파틸린을 함유하는 쑥 프로판올 추출물에 대한 것으로 추출, 농축 과정에서 혈액응고억제 물질 즉, 디쿠마롤을 제거하기 위한 별도의 공정을 포함시키지 않더라도 디쿠마롤을 함유하지 않는 것을 특징으로 하고 있다.

본 발명에 사용되는 쑥은 황해쑥(Artemisia argyi), 쑥(A. princeps var. orientalis, A. asiatica), 산쑥(A. montana), 참쑥(A. mongolica) 및 대한약전외 한약(생약)규격집에 정의된 동속식물을 포함한다.

본 발명에서 사용되는 프로판올은 1-프로판올(n-프로판올) 또는 2-프로판올(이소프로판올)을 포함한다.

본 발명은, 쑥에 상기 프로판올을 가해 통상의 생약추출물 즉, 침지법, 환류법을 통해 추출 및/또는 재추출하여 이를 적절한 방법으로 여과한 뒤 별도의 추가 공정 없이 바로 농축하여 쑥 프로판올 추출물을 최종 확보한다.

침지법을 사용하는 경우, 쑥에 프로판올을 가해 충분한 시간 동안 침지하고 이를 적절한 방법으로 여과한 뒤 감압농축하여 추출물을 획득한다.

환류법을 사용할 경우, 여과병에 쑥을 넣고 이 병에 프로판올을 계속 환류시켜 추출액을 얻은 뒤 마찬가지로 적절한 방법으로 여과한 뒤 감압농축하여 최종 추출물을 획득한다.

본 발명을 통해 고함량의 유파틸린을 함유할 뿐만 아니라 약효가 더욱 개선되고 특히, 별도의 추가 제거공정을 포함하지 않더라도 혈액응고억제성분이 포함되지 않는 쑥 추출물을 확보할 수 있다.

<실시예1>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 2-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 400mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 49℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예2>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 2-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 침지추출하고 이를 1500mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 47-48℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예3>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 1-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 1500mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 47-48℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예4>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 3kg에 2-프로판올 39kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 3㎛ 멤브레인 필터로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 7.5kg을 추가로 가해 이를 3㎛ 멤브레인 필터로 여과하여 합친 뒤, 49-57℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 150g을 얻었다. (수득율 20:1)

<비교예1>

쑥 (A. asiatica) 1kg에 에탄올(약전) 10kg을 가해 약 24시간 동안 추출하고 이를 400mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 에탄올(약전) 23kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 49℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 에탄올 쑥 추출물 50g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실험예1> 추출용매에 따른 유파틸린 함량 비교

상기 실시예 및 비교예와 동일한 제조방법으로 추가적으로 1 batch씩을 제조하여 얻은 쑥 추출물 중 약효성분인 유파틸린의 함유량은 다음과 같다.

추출물	Batch No.	유파틸린 함량
		개별값	평균
에탄올 쑥 추출물 (비교예 1)	No. 1	0.73%	약 0.98%
	No. 2	1.22%
프로판올 쑥 추출물 (실시예 1)	No. 1	1.81%	약 1.90%
	No. 2	1.98%

결과적으로, 에탄올 추출물에 비해 프로판올 추출물에서 약효성분인 유파틸린이 약 2배 가량 증가한 결과를 나타내었다.

더욱이, 도1에서와 같이 유파틸린뿐만 아니라 기타 성분도 유사 비율로 증가한 결과를 나타내어, 선행기술에서 공지된 바와 같이 단일 약효성분이 아닌 추출물 자체의 약효가 더욱 증가되었다는 점을 감안할 때, 본 발명은 기타 약효성분의 함유율도 크게 증가시킨 쑥 추출물을 확보할 수 있음을 개시한다고 할 수 있다.

<실험예2> 혈액응고억제 성분인 디쿠마롤 측정

본 발명에 따른 프로판올추출물 중 디쿠마롤 성분 함유 여부를 확인하기 위해 다음과 같은 시험법으로 측정하였다.

시험법 고속액체크로마토그래프법 (HPLC법)

컬럼 캅셀팩 C18 (4.6 x 250mm; 5㎛)

유속 1.0mL/min

검출 UV 350nm

주입량 10㎕

이동상 이동상 A 5mM 메탄설폰산나트륨 및 10mM 인산칼륨 혼

액(pH 3.0)

이동상 B 아세토니트릴

이동상 그라디에이션(gradiation)

시간(분)	이동상 A	이동상 B
10	50	50
15	50	50
30	60	40
34	50	50
40	50	50

도2에 기재된 시험결과에서와 같이, 실시예 1 및 3의 추출물에서 디쿠마롤 성분이 전혀 검출되지 않았다.

따라서, 본 발명에 따른 쑥 프로판올 추출물은 프로판올을 이용한 추출 공정 이외에 별도의 추가 공정을 가하지 않더라도 기존 에탄올 추출물과 달리 디쿠마롤 성분이 포함되지 않음을 알 수 있다.

<실험예3> 쑥 프로판올 추출물의 위염병변 억제 효과

실시예1에 따라 제조된 쑥 추출물을 약 1.5배에 해당하는 부형제(마이크로셀락)에 가해 희석, 건조하여 이 희석건조물을 대상으로 통상의 염산-에탄올 유발 위 손상 랫드(rat) 모델에서 위점막보호 효과를 평가하였다. 대조군으로서는, 비교예1에 따라 제조된 쑥 에탄올 추출물을 함유하는 동아제약 스티렌정을 분말화하여 사용하였다.

도3에 도시된 바와 같이 실시예1에 따라 제조된 쑥 프로판올 추출물은 위손상 억제효과가 뚜렷하였고 그 효과는 투여용량에 비례한 결과를 나타내었다.

특히, 쑥 에탄올 추출물을 함유하여 시판되고 있는 스티렌정과 추출물로서 동량을 투약한 그룹 3 및 그룹 5를 비교할 때, 위병변 억제 효과가 더욱 개선되었음을 알 수 있다.

도 1은 실시예1 및 비교예1에 따라 제조된 각 추출물에 대한 액체크로마토그래프법에 따른 크로마토그램이다.

도 2a 및 2b는 실시예1 및 실시예3에 따라 제조된 쑥 프로판올 추출물에 대한 혈액응고억제 물질, 디쿠마롤(Dicoumarol) 함유 유무를 확인한 크로마토그램이다.

도 3a 및 3b는 실시예1에 따라 제조된 추출물에 대한 위병변 억제 효과를 나타내는 도이다.

Claims (4)

1. 쑥을 프로판올로 추출한 위병변에 유효한 쑥 프로판올 추출물로서, 별도의 디쿠마롤 제거 공정을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물.
2. 제 1항에 있어서, 쑥은 황해쑥(Artemisia argyi), 쑥(A. princeps var. orientalis, A. asiatica), 산쑥(A. montana), 참쑥(A. mongolica)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물.
3. 제 1항에 있어서, 프로판올은 1-프로판올 또는 2-프로판올인 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물.
4. 제 1항에 있어서, 쑥 추출물의 수득율은 최종 추출물을 기준으로 하여 20:1 인 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물.

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