KR20090042147A - 김치유산균으로 발효한, 콩요구르트(쏘이프로)와 식물추출발효액(면역유산효소)을 함유하는 의약품 및 건강기능식품의 제조방법 - Google Patents

김치유산균으로 발효한, 콩요구르트(쏘이프로)와 식물추출발효액(면역유산효소)을 함유하는 의약품 및 건강기능식품의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 김치유산균과 우유유산균의 단계적 발효를 하여 콩요구르트(쏘이프로)분말과 식물추출발효액(면역유산효소) 분말을 제조하고 이를 이용하여 의약품 및 건강기능식품을 만드는 제조방법에 관한 것으로, (a) 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii )를 포함하는 식물성 김치유산균을 혼합배양(mixed culture) 하는 단계; (b) 배지에 동물성 우유유산균을 혼합배양(mixed culture)하는 단계; (c) 멸균한 콩물에 김치유산균 혼합배양액을 첨가하여 1차 발효하고, 우유유산균 혼합배양액을 첨가하여 2차 발효 후 건조하여 콩요구르트 분말을 제조하는 단계; (d) 별도로 콩물에 식물추출물을 첨가하고 가열 멸균한 후, 김치유산균 혼합배양액을 첨가하여 1차 발효하고, 우유유산균 혼합배양액을 첨가하여 2차 발효 후 건조하여 식물추출발효액 분말을 제조하는 단계; (e) 콩요구르트 분말과 식물추출발효액 분말을 이용한 의약품 및 건강기능식품의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명으로 제조한 의약품 및 건강기능식품은 양질의 영양을 공급하고 장을 좋게 하며 면역력을 높여, 각종 질병을 극복하고 건강을 유지할 수 있도록 우리 몸을 강건한 체질로 바꾸어 준다.
김치유산균, 콩요구르트(쏘이프로), 식물추출발효액(면역유산효소), 의약품, 건강기능식품

Description

김치유산균으로 발효한, 콩요구르트(쏘이프로)와 식물추출발효액(면역유산효소)을 함유하는 의약품 및 건강기능식품의 제조방법{Pharmaceutical and health food composition comprising soy yogurt and fermented product of plant extracts, fermented kimchi lactic acid bacteria}
본 발명은 콩요구르트(쏘이프로)와 식물추출발효액(면역유산효소)을 함유하는 의약품 및 건강기능식품의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 김치유산균과 우유유산균의 단계적 발효를 하여 콩요구르트(쏘이프로) 분말과 식물추출발효액(면역유산효소) 분말을 제조하고 이를 이용하여 의약품 및 건강기능식품을 만드는 제조방법에 관한 것이다.
식물성 식품을 주로 소비하던 1970년대 이전 시대와는 달리 동물성 식품을 과잉 소비하는 현재는 비만과 당뇨 등 성인병이 사회 문제화되고 있어서 대안으로 식물성 식품의 요구가 높아지고 있다. 요구르트 또한 동물성인 우유요구르트보다는 식물성인 콩요구르트를 먹는 것이 비만, 당뇨, 고혈압, 갱년기 증세, 아토피 등의 각종 질병을 개선하는데 효과가 있다.
두유의 경우 콩 특유의 비린 맛과 이취를 가지고 있으며, 일반적으로 맛이 없고, 콩에서 유래하는 몇 가지 사포닌 등의 부수성분으로 인해 자극성을 가진 풍미를 갖게 된다. 이러한 두유의 나쁜 풍미를 개선하기 위하여 유산균을 접종하여 두유를 발효시키는 단계를 포함하는 방법이 개발되어 있다. 예를 들어 대한민국 특허공개 제1992-11383호에는 콩 요구르트 및 그의 제조방법이 개시되어 있고, 대한민국 특허공개 제1993-22956호에는 대두 요구르트의 제조방법이 개시되어 있으며 대한민국 특허 제 1998-70641호에는 발효 두유의 제조방법이 개시되어 있다. 이 기술의 대부분은 두유의 발효에, 전통적으로 우유 요구르트의 제조에 사용하던 동물성 우유유산균을 적용한 기술이다. 그리고 이와 같이 제조된 콩요구르트가 상품으로 출시되었으나 맛이나 향에서 소비자의 기호를 충족하지 못하여 큰 호응을 얻지 못하는 상황이다. 본 특허의 발명자는 발효취가 없고 영양이 풍부한 콩요구르트를 김치유산균 복합균주와 우유유산균 복합균주의 단계적 발효를 통하여 제조하고 이를 쏘이프로(soypro)라고 명명하였다.
식물성 발효식품 중의 하나인 식초 또한 비만, 지방간, 장이나 피부 트러블 등을 해소하는 식품으로 많은 사람이 이용하고 있다. 그래서 기능성이 있는 감식초, 현미식초, 모로미초 등의 식초가 많이 개발되어 있다. 이는 식초에 함유되어 있는 각종 유기산과 식물성 생리활성 물질이 체질개선에 효과가 있기 때문이다. 유기산은 항산화, 체지방분해, 정장 작용 등을 통하여 면역력을 높여 준다. 한편 아 미노산은 우리 몸을 이루는 단백질의 기본요소일 뿐만 아니라 항산화와 면역작용이 왕성하게 이루어지기 위해서도 필수적인 요소이다.
본 발명자들은 김치유산균 복합균주와 우유유산균 복합균주를 이용한 단계적 발효를 통하여 유기산과 아미노산 그리고 식물성 생리활성물질이 풍부한 식물추출 발효액을 제조하였고 이를 면역유산효소라고 명명하였다.
본 발명의 목적은 발효취가 없으면서 유리 아미노산 , 천연비타민, 활성 이소플라본, 발효 GABA 등의 발효 대사산물이 풍부한 콩요구르트(쏘이프로) 분말과 유기산, 아미노산, 식물성 생리활성물질이 풍부한 식물추출발효액(면역유산효소) 분말을 제조하고 이를 이용하여 의약품 및 건강기능식품을 제조하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 류코노스톡 김치아이(Leuconostoc kimchii)를 포함하는 식물성 김치유산균을 혼합배양(mixed culture)하는 단계; (b) 동물성 우유유산균을 혼합배양(mixed culture)하는 단계; (c) 콩물에 김치유산균 혼합배양액과 우유유산균 혼합배양액을 시간차를 두고 접종하여 발효하는 단계적 발효를 통하여 쏘이프로를 제조하는 단계; (d) 식물추출액이 함유된 콩물에 김치유산균 혼합배양액과 우유유산균 혼합배양액을 시간차를 두 고 접종하여 발효하는 단계적 발효를 통하여 면역유산효소를 제조하는 단계; (e) 상기 쏘이프로와 면역유산효소의 분말을 이용하여 의약품 및 건강기능식품을 제조하는 단계;를 포함하여 이루어지는 를 포함하여 이루어지는 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물의 제조방법을 제공한다. 본 발명자들은 김치유산균 복합균주와 우유유산균 복합균주를 이용하여 혈중 콜레스테롤의 강하에 효과가 있다고 알려진 양파, 마늘, 다시마, 결명자 또는 현미 등의 천연식물들의 단계적 발효를 통하여 유기산과 아미노산 그리고 식물성 생리활성물질이 풍부한 식물추출 발효액을 제조하였고 이를 면역유산효소라고 명명하였다. 본 발명에 있어서 상기 식물추출액은 혈중 콜레스테롤의 강하에 효과가 있다고 알려진 어떠한 천연 식물추출액도 될 수 있으나, 바람직하게는 양파, 마늘, 다시마, 결명자 또는 현미 등의 천연식물인 것이 바람직하다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물의 제조방법에 따라 제조된 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물의 제조방법에 따라 제조된 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물을 포함하는 콜레스테롤 저하용 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 콜레스테롤 저하용 조성물에 있어서, 상기 조성물은 당업계에서 공지된 어떠한 형태의 제형으로도 제조가능하나 바람직하게는 산제, 환제, 캡슐, 정제, 또는 액상 형태로 제조하는 것이 좋다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물의 제조방법에 따라 제조된 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물을 포함하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 상기 콜레스테롤 저하용 건강기능식품에 있어서, 상기 건강기능식품은 당업계에서 공지된 어떠한 형태의 제형으로도 제조가능하나 바람직하게는 산제, 환제, 캡슐, 정제, 또는 액상 형태로 제조하는 것이 좋다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.
이때, 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 갖는다. 또한, 종래와 동일한 기술적 구성 및 작용에 대한 반복되는 설명은 생략하기로 한다. 본 발명에서 콩물은 익힌 콩에 물을 넣고 2배 정도 불린 다음, 이를 갈아서 콩 분쇄물이 균일하게 분산되어 있는 액상 상태를 말한다. 본 발명에서는 두유 정도의 농도(적어도 대두 고형분이 5% 이상)를 유지하는 콩물을 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명에서 김치유산균이라 함은 김치발효에 관여하는 유산균을 의미하고 우유유산균이라 함은 우유를 발효하여 요구르트를 만드는데 관여하는 유산균을 의미한다.
본 발명에서 사용한 유산균은 식물성 김치유산균 7가지 균주와 동물성 우유유산균 4가지 균주이다. 구체적으로 김치유산균으로는 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii ), 류코노스톡 시트레움( Leuconostoc citreum ), 류코노 스톡 메센테로이드스( Leuconostoc mesenteroides ), 류코노스톡 가시코미타툼( Leuconostoc gasicomitatum ), 류코노스톡 락티스( Leuconostoc lactis ) 락토바실러스 플랜타룸( Lactobacillus plantarum ) 및 락토바실러스 사케이( Lactobacillus sakei )을 사용하고, 우유유산균으로는 락토바실러스 엑시도필루스( Lactobacillus acidophilus ), 비피도박테리움 론굼( Bifidobacterium longum ), 스트렙토코커스 써머필러스( Streptococcus thermophilus ) 및 락토바실러스 불가리쿠스 ( Lactobacillus bulgaricus )를 사용하는 것이 바람직하다. 이 중 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii )는 한국의 김장 김치에서 발견되어 국제적으로 공인받은 유산균으로서 김치가 아주 맛있게 발효되는 시기에 출현하는 균주이다. 그리고 이 유산균의 모든 유전자 게놈분석이 서울대 미생물연구소에서 완료되었고 조류독감 바이러스 등의 전염성 급성호흡기질환을 일으키는 바이러스에 대한 항바이러스 효능이 보고되었다.
본 발명에서는 복합유산균을 사용하였는데 그 이유는 유산균의 종류마다 그 발효메카니즘이 상이하여 상호 보완을 통해 발효취를 없애고 풍부한 발효산물을 만들 수 있기 때문이다. 구체적으로 발효 메카니즘의 상이함의 예를 들면 같은 부류의 유산균이라 하더라도 포도당을 이용하여 생육할 때에 젖산(Lactic acid)을 주로 생성하는 스트렙토코커스 속의 유산균이 있는가 하면 젖산과 더불어 에탄올과 이산화탄소를 생성하는 류코노스톡 속의 유산균이 있고 젖산과 초산을 생성하는 비피도박테리움 속의 유산균이 있다.
이하 제조 단계를 설명하면 다음과 같다.
- 1차 종균 배양 단계(김치유산균)
배지를 멸균하고 김치유산균인 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii ), 류코노스톡 시트레움( Leuconostoc citreum ), 류코노스톡 메센테로이드스( Leuconostoc mesenteroides ), 류코노스톡 가시코미타툼( Leuconostoc gasicomitatum ), 류코노스톡 락티스( Leuconostoc lactis ) 락토바실러스 플랜타룸( Lactobacillus plantarum ), 락토바실러스 사케이( Lactobacillus sakei )를 접종하여 20~40℃에서 10~20시간 정치 배양한다. 이때, 배지는 MRS 배지를 사용하는 것이 바람직하다.
- 2차 종균 배양 단계(우유 유산균)
배지를 멸균하고 우유유산균인 락토바실러스 엑시도필루스( Lactobacillus acidophilus ), 비피도박테리움 론굼( Bifidobacterium longum )과 스트렙토코커스 써머필러스( Streptococcus thermophilus ), 락토바실러스 불가리쿠스 ( Lactobacillus bulgaricus )를 접종하여 20~40℃에서 10~20시간 정치 배양한다. 이때, 배지는 MRS 배지를 사용하는 것이 바람직하다.
- 콩요구르트 1차 발효단계
콩물을 가열 멸균하고 식힌 다음 여기에 1차 종균을 2~5%(v/v) 접종한 다음 20~40℃에서 10~20시간 발효한다. 이때, 10 시간 미만을 발효하면 발효 대사산물이 충분히 만들어지지 않으며 20시간을 초과하여 발효하면 우유유산균에 의한 2차 발효를 억제하기 때문에, 상술한 발효 시간 범위 내에서 발효하는 것이 바람직하다. 그리고 처음에 우유유산균이 아닌 김치유산균을 먼저 발효하는 것은 식물성인 콩을 초기에 발효하는 효율이 식물성 김치를 발효하는 김치유산균이 더 높기 때문이다.
- 콩요구르트 2차 발효 및 건조단계
다음으로 2차 종균을 2~5%(v/v) 접종한 다음 20~40℃에서 5~10시간 발효한 후 동결건조 한다. 이때, 5시간 미만을 발효하면 우유유산균에 의한 발효대사산물이 충분히 만들어지지 않으며 10시간을 초과하여 발효하면 콩요구르트의 신맛이 강하여 식감이 떨어지기 때문에 상술한 발효 시간 범위 내에서 발효하는 것이 바람직하다. 발효물의 건조는 열풍건조보다 동결건조하는 것이 좋다. 콩요구르트에 함유된 비타민, 유산균 등의 열에 약한 유용성분을 보존하기 위해서 동결건조를 하는 것이 바람직하다.
- 식물추출물 제조 단계
일정비율의 식물혼합물을 중량비율로 10~20배의 정제수에 침지한 후 100~120℃에서 1~6시간 가열하면서 추출기로 추출한다. 추출시간과 추출온도는 추출코자 하는 식물에 따라 다르고 또한 추출성분에 따라 다를 수 있다. 그리고 식물혼합물의 구성은 제조하는 면역유산효소의 목적성에 따라 다를 수 있다. 예를 들면 콜레스테롤을 저하시키는 면역유산효소를 만들고자 할 경우에는 양파, 다시마, 결명자 및/또는 현미 등을 사용할 수 있다.
- 면역유산효소 1차 발효단계
식물추출물을 콩물에 5~10% 되게 섞고 가열 멸균하고 식힌 다음 여기에 1차 종균을 2~5%(v/v)되게 접종한 다음 10~30℃에서 10~20시간 발효한다.
- 2차 면역유산효소 발효 및 건조단계
다음으로 2차 종균을 2~5%(v/v)되게 접종한 다음 10~30℃에서 100~200시간 발효한 후 동결건조한다. 이때 100시간 미만을 발효하면 콩물과 함께 발효되는 식물추출물의 유효성분이 충분히 만들어지지 않으며 200시간을 초과하여 발효하면 발효 취가 심해져 복용에 거북함을 줄 수 있으므로 상술한 발효 시간 범위 내에서 발효하는 것이 바람직하다.
상기 각 단계를 통해 제조한 콩요구르트 동결건조분말과 면역유산효소 동결건조분말을 이용하여 양질의 영양을 공급하고 장을 좋게 하며 면역력을 높여주어 우리 몸을 강건한 체질로 바꾸어 줄 수 있는 의약품 및 건강기능식품을 만들 수 있다.
상기 제조방법을 통하여 제조된 본 발명의 콜레스테롤 저하용 조성물은 1차 복합 김치유산균과 2차 복합 우유유산균으로 콩물과 식물추출물을 발효하여 제조된 콩요구르트와 면역유산효소를 혼합하여 제조되어 기존에 콜레스테롤 저하에 효과적 인 식물추출물과 복합 유산균을 통하여 발효된 대사산물을 풍부하게 포함하고 있어 콜레스테롤의 저하에 효과적이다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 상기 콜레스테롤 저하용 조성물을 생후 5 주된 마우스에 투여한 결과 본 발명의 조성물을 투여하지 않은 마우스에 비해 혈액 내에 혈중 콜레스테롤이 현저하게 저하됨을 확인하였다.
본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물의 투여방법은 제형에 따라 용이하게 선택될 수 있으며, 산제, 정제, 환제, 과립제, 당의정, 경질 또는 연질의 캡슐제, 액, 에멀젼, 현탁액, 시럽제 등의 형태로 제형화되어 전신 또는 국소적으로 경구 또는 국소적으로 경구 또는 비경구 투여될 수 있으며, 특히 경구 투여가 바람직하다. 경구투여를 위한 고형 제형에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제형은 본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 슈크로스, 락토오스, 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제형으로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제형에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌클리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물은 조성물 총중량 대비 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 1 내지 80 중량%로 포함하는 것이 좋고, 더욱 바람직하게는 10 내지 50 중량 %로 포함되는 것이 좋다. 본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다.
본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물은 우수한 콜레스테롤 강하 효과를 제공할 뿐만 아니라, 약물에 의한 독성 및 부작용도 없어 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있다. 본 발명의 콜레스테롤 저하용 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
본 발명의 콜레스테롤 저하용 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.01-10g/kg 범위 내이다.
본 발명의 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 건강기능식품은 콜레스테롤의 저하 또는 체내 콜레스테롤의 축적 방지를 위한 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이때 식품 또는 음료 중에 본 발명의 상기 콩요구르트 및 면역유산효소 혼합 조성물의 양은 일반적으로 전체 식품 중량의 1 내지 70 중량%로 가할 수 있으며, 음료 조성물에는 100ml를 기준으로 0.02 내지 30 g, 바람직하게는 0.3 내지 5g의 비율로 본 발명의 식품조성물을 가할 수 있다. 상기 식품은 과일, 야채, 과일이나 야채의 건조제품이나 절단제품, 과일쥬스, 야채쥬스, 이들의 혼합 주스이거나, 산성음료수를 포함하는 음료류, 쿠키, 사탕, 카라멜, 껌 등과 같은 제과류, 제빵류, 아이스크림 제품류, 다류, 요구르트와 같은 발효류식품, 유가공식품, 양념류, 주류, 통조림 또는 병조림류, 면류, 축산가공식품, 수산가공식품, 미생물발효식품, 두류식품, 곡류식품, 육가공류, 감초류, 또는 허브류 중 어느 하나 또는 하나 이상이다.
본 발명의 건강기능식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 포도당, 과당 등의 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스 등의 다이사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 폴리사카라이드, 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연향미제(타우마틴, 스테비아 추출물. 예를 들어 헤바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초코릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 본 발명의 복합 김치유산균으로 발효한 콩 발효물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있다.
본 발명을 통하여 발효취가 없고 영양이 풍부한 콩 요구르트와 유기산과 아미노산이 풍부한 면역유산효소 및 이를 함유한 의약품 및 건강기능식품을 제공할 수 있게 되었다.
< 실시예 1 >
콩요구르트와 면역유산 효소의 제조
< 1-1 > 1차 종균 배양
MRS 배지를 121℃에서 15분간 멸균하고 식물성 김치유산균인 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii KCTC0651 ), 류코노스톡 시트레움( Leuconostoc citreum KCTC 3526 ), 류코노스톡 메센테로이드스( Leuconostoc mesenteroides IMSNU 10146 ), 류코노스톡 가시코미타툼( Leuconostoc gasicomitatum KCTC 3753 ), 류코노스톡 락티스( Leuconostoc lactis KCTC 3528) 락토바실러스 플랜타룸( Lactobacillus plantarum KCTC 10123 ), 락토바실러스 사케이( Lactobacillus sakei IMSNU 10130 )를 각각 1×104cfu/ml 되게 접종하여 35℃에서 12시간 정치 배양하였다.
< 1-2 > 2차 종균 배양
MRS 배지를 121℃에서 15분간 멸균하고 동물성 우유유산균인 락토바실러스 엑시도필루스( Lactobacillus acidophilus KCTC3145 ), 비피도박테리움 론굼( Bifidobacterium longum KCTC 3421 )과 스트렙토코커스 써머필러스( Streptococcus thermophilus KCTC 3658 ), 락토바실러스 불가리쿠스 ( Lactobacillus bulgaricus IMSNU 13005 )를 각각 1×104cfu/ml 되게 접종하여 35℃에서 12시간 정치 배양하였다.
< 1-3 > 콩요구르트 발효
콩물을 100℃에서 1시간 가열하여 멸균하고 35℃로 식힌 다음 여기에 상기 실시예 1-1의 1차 종균을 3%(v/v)되게 접종한 다음 35℃에서 12시간 발효하였다. 다음으로 실시예 1-2의 2차 종균을 3%(v/v)되게 접종한 다음 35℃에서 6시간 발효한 후 동결건조하여 콩 요구르트 분말을 제조하였다( 발효액의 12%(w/w)의 분말이 제조되었다 ).
<1-4> 면역유산효소의 발효
먼저 중량비율로 양파 50%, 마늘 20%, 다시마 10%, 결명자 10% 및 현미 10%의 식물혼합물에 15배(w/w)의 물을 넣어 추출기로 3시간 추출한 후 콩물에 8% 되게 섞고 100℃에서 1시간 가열하여 멸균하고 20℃로 식힌 다음 실시예 1-1의 1차 종균을 3%(v/v)되게 접종한 다음 12시간 발효하였다. 다음으로 실시예 1-2의 2차 종균을 3%(v/v)되게 접종한 다음 20℃에서 170시간 발효한 후 동결건조하였다( 발효액의 12.5%(w/w)의 분말이 제조되었다 ).
<1-5> 콩요구르트와 면역유산효소의 혼합
콩 요구르트와 면역유산효소 분말을 80:20, 70:30, 60:40, 50:50 (w/w)의 비율로 혼합하였다.
< 실험 예1 >
콩요구르트와 면역유산효소 혼합물의 혈중콜레스테롤 저하 효과
생후 5주된 마우스를 한 그룹당 6마리씩 4그룹으로 나눠 첫 번째 그룹은 일반사료만 주고(Normal) 두 번째 그룹은 일반사료에 실시예 1-5에서 제조한 콩요구르트와 면역유산효소의 혼합물(DDSP)을 매일 0.2mg씩 투여하고(Normal+DDSP) 세 번째 그룹은 일반사료에 고지방 라드를 줬으며(Lard), 네 번째 그룹은 먹이는 세 번째 그룹과 같이 하고 실시예 1-5에서 제조한 콩요구르트와 면역유산효소의 혼합 물(DDSP)을 매일 0.2mg씩 투여하고 2주간 식이 후 각 그룹의 혈중 콜레스테롤의 수치를 측정하였다<표 1>.
Figure 112008062663803-PAT00001
일반사료를 준 경우에는 콩요구르트와 면역유산효소의 혼합물을 투여한 경우 혈중 콜레스테롤의 양에 큰 영향을 주지 못하였다. 그러나 고지방식이(Lard)의 경우에는 뚜렷하게 혈중 콜레스테롤의 양을 떨어뜨렸고 상대적으로 콩요구르트와 면역유산효소의 혼합비율이 중량 비율로 70:30 ~ 60:40의 경우에 혈중콜레스테롤의 하강폭이 컸다.
본 발명의 콩요구르트와 면역유산효소의 동결건조분말은 아래와 같은 제형으로 투여할 수 있으며 아래의 제제예는 본 발명의 예시일 뿐 이에 의해 본 발명의 내용이 제한되는 것은 아니다.
<제제예1> 정제의 제조
실시예 1-5의 70:30의 혼합물 --------- 100mg
카복시메칠셀룰로오스 ---------------- 200mg
유당 ------------------------------- 100mg
스테아린산 마그네슘 ----------------- 적량
통상의 정제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 타정하여 의약품 또는 건강기능식품을 제조한다.
<제제예2> 건강기능식품의 제조
실시예 1-5의 70:30의 혼합물 --------- 1,000mg
미네랄 혼합물 --------------------- 적량
( 황산 제일철 ----------------1.73mg )
( 산화아연 ------------------ 0.87mg )
( 탄산마그네슘 -------------- 25.6mg )
( 제1인산칼륨 --------------- 15mg )
( 제2인산칼슘 --------------- 55mg )
( 염화 마그네슘 ------------- 25mg )
본 발명의 혼합물에는 유리 아미노산, 천연비타민, 식이섬유, 유기산 등의 영양소가 많은 양 함유되어 미네랄 혼합물만을 첨가하였다. 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
<제제예 3> 건강 음료의 제조
실시예 1-5의 70:30의 혼합물 -------- 10 g
치커리식이섬유 -------------------- 3 g
매실농축액 ----------------------- 5 g
죽염 -------------------------- 50 mg
타우린 ------------------------ 200 mg
정제수를 합하여 전체 ----------- 1000 ml
충분히 혼합한 다음 75℃에서 10분간 가열 교반하고 10℃이하로 식혀서 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
전술한 개시에 대해서 일정 범위의 수정, 변화 및 치환이 가능하며, 어떤 경우에는 본 발명의 특징 중 일부만이 사용될 수도 있다. 따라서, 첨부된 청구항들이 넓게 또한 본 발명의 사상과 범위에 부합되게 해석되어야 한다.

Claims (6)

  1. (a) 콩물을 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii )를 포함하는 김치유산균 복합균주로 1차 발효한 후 락토바실러스 엑시도필루스( Lactobacillus acidophilus )를 포함하는 우유유산균 복합균주로 2차 발효하는, 단계적 발효를 통하여 제조하는 콩요구르트의 제조단계;
    (b) 식물추출물이 첨가된 콩물을 류코노스톡 김치아이( Leuconostoc kimchii )를 포함하는 김치유산균 복합균주로 1차 발효한 후 락토바실러스 엑시도필루스( Lactobacillus acidophilus )를 포함하는 우유유산균 복합균주로 2차 발효하는, 단계적 발효를 통하여 제조하는 면역유산효소의 제조단계; 및
    (c) 상기 콩요구르트와 면역유산효소를 혼합하는 단계;
    를 포함하여 이루어지는 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물의 제조방법.
  2. 청구항 1의 제조방법에 따른 콩요구르트 및 면역유산효소의 혼합 조성물.
  3. 청구항 2의 혼합 조성물을 함유하는 콜레스테롤 저하용 조성물.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 콜레스테롤 저하용 조성물은 산제, 환제, 캡슐, 정제 및 액제로 이루어지는 군에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 콜레스테롤 저하용 조성물.
  5. 청구항 2의 조성물을 함유하는 건강기능식품.
  6. 청구항 5에 있어서, 상기 건강기능식품의 제형은 산제, 환제, 캡슐, 정제 및 액제로 이루어지는 군에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
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