KR20080091286A

KR20080091286A - 비타민 ｅ 석시네이트 안정화된 약제학적 조성물, 이의 제조 방법 및 용도

Info

Publication number: KR20080091286A
Application number: KR1020087021344A
Authority: KR
Inventors: 앤드류 셴 첸
Original assignee: 에스디 파마슈티칼스 인코포레이티드
Priority date: 2006-02-01
Filing date: 2007-02-01
Publication date: 2008-10-09
Also published as: TW200744665A; WO2007089931A1; MX2008010023A; TWI376239B; CA2641146A1; BRPI0707421A2; EP1981479A1; US8470873B2; IL192967A0; JP2009525342A; AU2007211215A1; EA200870219A1; US20070207173A1

Abstract

본 발명은 비타민 E 석시네이트(VES)-안정화된 조성물, 이의 제조 방법 및 실질적으로 수불용성이고 임의로 화학적으로 불안정한 약리학적 활성 제제 (예: 도세탁셀)의 생체내 전달에 유용한 방법을 제공한다.

비타민 E 석시네이트(VES), 도세탁셀, 파클리탁셀, 이중 균질화 기술, 제타 포텐셜

Description

비타민 Ｅ 석시네이트 안정화된 약제학적 조성물, 이의 제조 방법 및 용도{Vitamin E succinate stabilized pharmaceutical compositions, methods for the preparation and the use thereof}

관련 출원에 대한 상호참조

본 출원은 미국 임시출원 제60/764,061호 (2006년 2월 1일 출원) 및 제60/771,816호 (2006년 2월 8일 출원)의 이익을 주장한다.

본 발명은 약리학적 활성 제제의 정맥내 투여를 위한 에멀젼 조성물 뿐만 아니라 이의 제조 방법에 관한 것이다.

도세탁셀(docetaxel)은 탁소이드(taxoid) 계열에 속하는 항신생물제이다. 도세탁셀의 화학명은 (2R,3S)-N-카복시-3-페닐이소세린,N-3급-부틸 에스테르, 5β-20-에폭시-1,2α-,4,7β,10β,13α-헥사하이드록시탁스-11-엔-9-온 4-아세테이트 2-벤조에이트와의 13-에스테르, 트리하이드레이트 ((2R,3S)-N-carboxy-3-phenylisoserine,N-tert-butyl ester, 13-ester with 5β-20-epoxy-1,2α-,4,7 β,10β,13α-hexahydroxytax-11-en-9-one 4-acetate 2-benzoate, trihydrate)이다. 도세탁셀은 다음의 구조식을 갖는다:

도세탁셀은 친지성이 높고 사실상 물에 불용성이다. 에스테르 그룹 (N-3급-부틸 에스테르)으로 인하여, 도세탁셀은 물의 존재 하에서 매우 불안정한데, N-3급-부틸 에스테르의 가수분해가 빠르게 일어날 수 있기 때문이다.

도세탁셀을 정맥내로 주사하기 위하여, 시판되는 제품 (TAXOTERE™)은 도세탁셀에 대해 가용화제로서 사용되는 거의 100%의 폴리소르베이트 80 중에 용해된 도세탁셀을 함유하는 황색 점성 액체로서 제공된다. 하지만, 다른 세제와 같이 폴리소르베이트 80은 독성이 매우 높다. 정맥내 주사시, 이는 치명적일 수 있는 심각한 알레르기 또는 과민 반응을 일으킨다. 이러한 이유로, FDA는 제약회사에게 TAXOTERE™ 라벨에 다음의 강한 경고문 ("블랙 박스(black box)" 경고문)을 넣도록 요청하였다:

"권장되는 3일간의 덱사메타손 예비투약을 받은 환자에서 전신 발진/홍반, 저혈압 및/또는 기관지경련, 또는 매우 드물게는 치명적인 아나필락시 스(anaphylaxis)를 특징으로 하는 심각한 과민 반응이 보고되었다. 과민 반응시에는 즉각적인 TAXOTERE의 주입 중단 및 적당한 치료의 시행이 필요하다. TAXOTERE에 대해 또는 폴리소르베이트 80과 함께 제형화된 기타 약물에 대해 심각한 과민 반응 병력이 있는 환자에게는 TAXOTERE를 투여해서는 안된다."

도세탁셀과 같은 불용성 정맥내(IV) 약물을 위한 보다 안전한 제형을 제공하기 위한 많은 노력이 있었다. 가장 잘 알려진 예로는 또다른 불용성 탁소이드 유사체 약물인 파클리탁셀(paclitaxel)이 있고, 이의 시판되는 제품(TAXOL^®)에서는 크레모포어(cremophor)라고 하는 다른 면역원성 세제를 사용한다. 가용화 방법에서의 일부 개선이 파클리탁셀의 경우에 보고되었다. 이러한 새로운 파클리탁셀 제형은 TAXOL^® 제형 이상으로 개선을 나타낸다. 하지만, 도세탁셀 제형의 경우, 파클리탁셀 또는 도세탁셀에 대해 이전에 보고된 사실상 모든 가용화 방법은 하나 이상의 다음의 단점을 나타내는 것 같다:

(1) 이들은 독성, 알레르기성 또는 정맥자극성 부형제, 예를 들면 용매 (예: 에탄올, DMA, DMSO, 프로필렌 글리콜 및 n-메틸피롤리돈), 가용화제 (예: 폴리소르베이트, 크레모포어 및 담즙염), 바이러스 오염 위험이 있는 동물 공급원으로부터 유래된 물질 (예: 사람 알부민) 또는 안전한 사용에 관한 증명된 기록이 없는 화학물질 (예: 비타민 E TPGS)을 함유한다.

(2) 이들은 물을 함유한다. 앞서 언급한 바와 같이, 도세탁셀은 물과 비상용성이다.

(3) 이들은 불안정하고, 인지질 (리포좀에서와 같이) 또는 오일 (이전에 공지된 에멀젼)과 같은 약제학적으로 안전하지 않은 많은 양의 부형제 없이 필요량의 도세탁셀을 전달할 수 없다.

따라서, 도세탁셀 및 기타 수불용성 약물의 전달을 위한 안전하고 안정한 제형을 개발해야할 필요가 있다. 본 발명은 이러한 필요를 충족하고 추가의 관련된 장점을 제공한다.

발명의 요약

본 발명은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 조성물, 이러한 조성물의 제조 방법 및 사용 방법을 제공한다.

한가지 양상에서, 본 발명은 수성 매질 중에 오일 액적(oil droplet)을 포함하고 (여기서, 상기 오일 액적은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 상당 부분을 포함하고, 상기 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다), 비타민 E 석시네이트 (VES, 또는 다른 알파 토코페릴 석시네이트 또는 이의 유사체 또는 이의 염)에 의해 안정화되고, -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜(zeta potential)을 갖는 수중유형 에멀젼을 제공한다.

특정 양태에서, 오일 액적은 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 98% 이상의 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 포함한다. 특정 양태에서, 액적의 평균 직경은 약 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm, 150 nm 또는 100 nm 이하이다. 특정 양태에서, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제는 탁소이드 약물 (예: 도세탁셀 및 파클리탁셀)이다. 특정 양태에서, 탁소이드 약물은 파클리탁셀 또는 도세탁셀이다. 특정 양태에서, 에멀젼은 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는다. 특정 양태에서, 에멀젼은 -35 mV 내지 -45 mV의 제타 포텐셜을 갖는다. 특정 양태에서, 에멀젼은 여과에 의해 멸균된다. 특정 양태에서, 에멀젼의 오일상(oil phase)은 주위 온도에서 액체이거나 결정성 고체가 부재하고, 약리학적 활성 제제는 실질적으로 오일상 중에 용해된다.

특정 양태에서, 에멀젼은 VES를 수중에 균질화시켜 서브마이크론(submicron) VES 현탁액을 형성시키고, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 하나 이상의 주사가능한 오일 및 하나 이상의 주사가능한 인지질을 함유하는 오일 용액 중에 용해시켜 오일상을 형성시키고, VES 현탁액, 오일상 및 임의로 기타 약제학적으로 허용되는 성분을 배합하고, 혼합물을 균질화시켜 VES-안정화된 에멀젼을 제조함을 포함하는, 이중 균질화 기술에 의해 제조된다.

특정 양태에서, 약리학적 활성 제제는 항신생물제, 항생제, 항진균제(antifungal agent), 항바이러스제, 항감염제, 항염증제, 제산제, 항아드레날린제, 항콜린제, 항응집제, 항알콜제, 항알레르기제, 진통제, 항부정맥제, 항진균제(antimycotic agent), 항정신병제, 항소양제, 항우울제, 항고혈압제, 마취제, 항당뇨병제, 항호르몬, 호르몬, 지질 장애 약물, 면역계 장애 약물, 대사 장애 약물 및 혈액 장애 약물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 수불용성 약물이다.

다른 양상에서, 본 발명은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 함유하고 실질적으로 물이 부재하는 고체 조성물을 제공한다. 상기 고체 조성물은 상기한 조성물로부터 물을 제거하여 제조되고, 물로 재수화시키면 주사에 적당한 에멀젼을 형성할 수 있다. 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다. 특정 양태에서, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm 또는 150 nm 이하이다.

다른 양태에서, 본 발명은 도세탁셀 또는 파클리탁셀, VES, 하나 이상의 주사가능한 오일, 주사가능한 인지질 및 물을 포함하고, -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖고, 에멀젼 액적의 평균 직경이 200nm 미만이고, 도세탁셀 또는 파클리탁셀 대 오일의 중량비가 1:50 미만인 수중유형 에멀젼을 제공한다.

특정 양태에서, 에멀젼은 0.1 내지 1 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 0.01 내지 5 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 1 내지 10 중량% 농도 범위의 식물성 오일, 임의로 1 내지 10 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일, 1 내지 20 중량% 농도 범위의 인지질, 임의로 0.01 내지 5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 40 내지 90 중량% 농도 범위의 물을 포함한다. 또한, 에멀젼의 pH는 약 5 내지 9이다. 특정 양태에서, 에멀젼은 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 5 내지 50 중량% 농도 범위의 증량제를 추가로 포함한다.

다른 양상에서, 본 발명은 도세탁셀 또는 파클리탁셀을 포함하고, 실질적으로 물이 부재하고, 상기한 에멀젼으로부터 물을 제거하여 제조되는 고체 조성물을 제공한다. 상기 고체 조성물을 물로 재수화시키면 주사에 적당한 에멀젼이 형성될 수 있고, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다. 특정 양 태에서, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm 또는 150 nm 이하이다.

특정 양태에서, 고체 조성물은 0.2 내지 3 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 0.1 내지 12 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 1.1 내지 21.9 중량% 농도 범위의 식물성 오일, 임의로 1.1 내지 21.9 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일, 2.7 내지 54.8 중량% 농도 범위의 인지질, 임의로 0.2 내지 3.3 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 4.7 내지 93.2 중량% 농도 범위의 증량제를 포함한다.

다른 양상에서, 본 발명은 상기한 항암 약물을 포함하는 에멀젼 또는 고체 조성물의 약제학적 유효량을 이를 필요로 하는 포유동물에게 투여함을 포함하여, 감수성 신생물을 치료하는 방법을 제공한다. 특정 양태에서, 포유동물은 사람이다. 특정 양태에서, 투여는 정맥내, 복부내, 동맥내, 관절내, 피막내(intracapsular), 경관내, 두개내, 관내(intraductal), 경막내(intradural), 병변내, 소방내(intralocular), 요추내, 벽내(intramural), 안내(intraocular), 수술중(intraoperative), 두정내(intraparietal), 복강내, 흉막내, 폐내, 척수내, 흉부내, 기관내, 고실내, 자궁내 및 심실내 투여로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 주사 경로, 경구 투여 및 안구 점적제 형태의 점적주입에 의해 수행된다.

다른 양상에서, 본 발명은 VES를 수중에 균질화시켜 서브마이크론 VES 현탁액을 형성시키고, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 하나 이상의 주사가능한 오일 및 하나 이상의 주사가능한 인지질을 함유하는 오일 용액 중에 용해시 켜 오일상을 형성시키고, VES 현탁액, 오일상 및 임의로 기타 약제학적으로 허용되는 성분을 배합하고, 혼합물을 균질화시켜 에멀젼을 제조함을 포함하는, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 VES 안정화된 에멀젼을 제조하기 위한 이중 균질화 기술을 제공한다.

한가지 양상에서, 본 발명은 수성 매질 중에 분산되고 VES에 의해 안정화된 비정질 또는 결정성 약리학적 활성 제제의 서브마이크론 고체 입자 (여기서, 상기 고체 입자는 액체 오일이 실질적으로 부재하고 평균 직경이 200 nm 미만이며 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는다)를 포함하는 현탁액을 제공한다.

특정 양태에서, 약리학적 활성 제제는 도세탁셀 또는 파클리탁셀이고, 현탁액은 약 0.1 내지 약 1.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀; 약 5 내지 약 15 중량% 농도 범위의 레시틴; 약 0.5 내지 약 2 중량% 농도 범위의 콜레스테롤; 약 0.1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 VES; 수크로스, 덱스트로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 10 내지 약 20 중량% 농도 범위의 증량제; 및 물을 포함한다.

한가지 양상에서, 본 발명은 약 1.3 내지 약 2.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀; 약 1 내지 약 15 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트; 대두 레시틴 및 계란 레시틴으로부터 선택되는 약 22 내지 약 32 중량% 농도 범위의 인지질; 약 1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤; 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 35 내지 약 75 중량% 농도 범위의 증량제를 포함하는 고체 조성물을 제공한다.

다른 양상에서, 본 발명은 (1) VES의 수성 현탁액을 균질화시켜 VES의 서브마이크론 현탁액을 형성시키고, (2) 약리학적 활성 제제, 인지질 및 콜레스테롤을 에탄올 중에 용해시키고 나서 에탄올을 제거하여 고체 덩어리를 제조하고, (3) VES 현탁액 및 고체 덩어리, 물 및 임의로 증량제를 배합하여 조 현탁액을 형성시키고, (4) 조 현탁액을 균질화시켜 서브마이크론 현탁액을 형성시킴을 포함하여, 약리학적 활성 제제를 포함하는 현탁액을 제조하는 방법을 제공한다. 특정 양태에서, 상기 방법은 서브마이크론 현탁액을 멸균하는 단계 (예: 여과를 통해)를 추가로 포함한다.

본 발명은 실질적으로 수불용성이고 임의로 화학적으로 불안정한 약리학적 활성 제제 (예: 도세탁셀)의 생체내 전달을 위한 조성물, 이의 제조 방법 및 당해 전달에 유용한 방법을 제공하고, 여기서 상기 약리학적 활성 제제는 비타민 E 석시네이트 (VES) (또는 이의 유사체 또는 염)에 의해 안정화된 에멀젼의 형태로 전달된다. 특히, 서브마이크론 직경을 갖고 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는 오일 액적 중에 용해된 매우 불용성이고 불안정한 도세탁셀을 포함하는 수중유형 에멀젼 조성물이 제공된다. VES-안정화된 에멀젼은 현저하게 높은 약물 대 오일 비 (예: 1:50의 중량비)로 탁소이드 약물을 전달할 수 있고, 작은 (예: 200 nm 미만의) 액적을 가질 수 있으며, 우수한 안정성을 제공할 수 있어서, 에멀젼을 다양한 건조 방법에 의해 건조시켜 물을 제거시키고 고체 조성물을 형성시킬 수 있다. 물을 제거시키면 가수분해로부터 생성되는 도세탁셀 또는 기타 화학적으로 불안정한 약리학적 활성 제제가 안정화된다. 고체 조성물을 물로 재수화시키면, 직경이 약 1 마이크론 미만인 액적을 포함하고 음의 제타 포텐셜 값을 갖는 수중유형 에멀젼이 형성될 수 있다. 본 발명은 또한 VES-안정화된 에멀젼의 제조에 유용한 "이중 균질화 기술"에 관한 것이다. 상기 기술을 통해 액적 크기가 작고 쉽게 여과시켜 멸균시킬 수 있으며 짧은 건조 시간이 필요한 에멀젼을 확실하게 제조할 수 있다. 본 발명에서 기술된 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼은 현재 시판되는 제형에서의 다수의 임상적으로 중요한 결점을 보완하고, 시판되는 제품인 TAXOTERE™와 비교하여 유리한 안전성 및 효능 프로파일을 제공한다.

VES는 통상적인 계면활성제가 아니다: 이는 오일 중에 또는 수중에 용해되지 않는다 (즉, 친지성도 아니고 친수성도 아니다). 계면활성제는 일반적으로 HLB (Hydrophilic-Lipophilic Balance; 친수성-친지성 균형) 값에 의해 특징지어진다. 계면활성제의 HLB가 높으면 (> 7) 수용성이고 HLB가 낮으면 (< 7) 지용성이다. VES는 본래 중성 pH (pH 5 내지 8)에서 수중에 잘 분산되지 않는다 (예: 고압 균질화시켜 서브마이크론 현탁액을 형성시키지 않으면 수중에서 왁스처럼 작용한다). 그러므로, 이전에 공지된 에멀젼 유화제는 수용성 (폴리소르베이트 80, 비타민 E TPGS) 또는 지용성 (올레산, 인지질) 이라는 점에서, VES는 올레산, 폴리소르베이트 80, 비타민 E TPGS, 인지질 등과 같은 이전에 보고된 다른 에멀젼 유화제 또는 안정화제와 상이한 유일한 "양소매성(amphiphobic)" 분자로 생각된다.

이론에 구속되기를 바라지 않으며, 본 발명은 VES의 양소매성 성질을 사용하여 액적 표면 상에 음전하를 가하여 오일 액적을 안정화시키는 다소 비-통상적인 접근법을 취한다. 본 발명자는 서브마이크론 크기의 VES 입자 (1차 고압 균질화 후에 수득됨)가 오일 액적과 주변의 수성 용액 사이의 계면 영역에 선택적으로 남아, 액적을 음전하로 효과적으로 대전시켜, 정전기적 반발력에 의해 액적이 서로 달라붙는 것을 방지한다고 생각한다.

본 발명에 의해 제공된 조성물은 이전에 공개된 것과 상이하다. 예를 들면, 문헌[참조: Lambert et al., 미국특허 제6,660,286호]에는 파클리탁셀에 대한 에멀젼 조성물이 공개되었는데, 이는 당해 특정 탁소이드에 가수분해성 에스테르 그룹이 없으면 물의 존재 하에서 불용성이지만 매우 안정하다. 에멀젼 조성물은 주된 오일상 성분으로서 비타민 E를 포함하고, 유화제로서 페길화된 비타민 E 또는 비타민 E TPGS 및 물을 수성상 중에 포함한다. 상기 조성물은 물이 존재하고 가수분해성 에스테르 그룹이 도세탁셀에 존재하기 때문에 도세탁셀에 적용할 수 없다. 또한, 비타민 E TPGS는 본 출원 시점에 어떠한 승인된 정맥내 약물 제품에서도 사용되지 않았고, 따라서 안전성이 확실하지 않다.

또한, 본 발명에서 공개된 에멀젼은 VES에 의해 안정화되고, 개선된 안정성 및 안전성을 위하여 바람직한 범위의 제타 포텐셜을 갖도록 제조된다. 물리적으로, VES는 용해도 면에서 비타민 E 또는 비타민 E TPGS와 매우 상이한데, 비타민 E는 오일 중에 용해되고 비타민 E TPGS는 오일 또는 물에 용해되지만, VES는 오일 또는 물에 불용성이므로, 즉 오일상으로서 사용될 수 없으므로, VES-안정화된 에멀젼에서 안정화제로서의 VES의 기능은 미국특허 제6,660,286호에 따른 조성물에 사용된 다른 비타민 E 유도체와 상이하고 유일하다. 본 발명에 따른 이중 균질화 기술은, VES가 물 또는 오일에 불용성이기 때문에 VES를 에멀젼 속으로 혼입시키기 위하여 개발되었다.

본 발명에 의해 제공되는 조성물은 또한 문헌[참조: Koichi et al., PCT 공개공보 제WO 2005065677호 및 제WO 2005065676호]에 공개된 것과 상이하다. 상기 PCT 공개공보에는 파클리탁셀 및 도세탁셀로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 활성 성분을 가용화시키는데 사용하기 위한 지방 에멀젼이 공개되었다. 상기 지방 에멀젼은 오일 성분, 유화제 및 안정화제, 예를 들면, 포스파티딜글리세롤 및 지방산을 함유하였다. 상기 문헌[참조: Koichi et al .]에 공개된 지방 에멀젼은 수성 에멀젼이고, 증량제가 부재하기 때문에 건조시키는데 적당하지 않다. 이러한 에멀젼 조성물을 건조시키면 액적이 광범위하게 응집되고 상 분리에 의해 에멀젼이 파괴되어, 정맥내 주사용으로 부적절할 것이다. 그러므로, 이전에 공개된 조성물은 수중유형 액체 에멀젼으로 남도록 의도된 것이고, 따라서 물의 존재 하에서 가수분해에 의해 빠르게 분해되는 도세탁셀에 적당한 조성물이 아니다. 본 발명의 VES-안정화된 에멀젼을 진공 건조, 분사 건조 및 동결 건조를 포함하는 다양한 건조 방법에 의해 건조시켜, 실질적으로 물이 부재하며 물로 재구성시키면 액적 크기가 1 마이크론 미만이고 정맥내 주사에 적당한 에멀젼이 형성될 수 있는 고체 조성물이 되게 할 수 있다.

본 발명에 의해 제공된 조성물은 또한 문헌[참조: Parikh et al ., 미국특허 제6,979,456호]에 공개된 것과 상이하다. 상기 미국특허에는 항암 약물, 및 특히 파클리탁셀을 위한 약제학적 투여형이 기술되어 있고, 활성 약물을 저장 안정성 자가-유화 예비농축물로 제형화한다. 자가-유화 예비농축물은 물과 혼합하면 에멀젼이 형성되는 비-수성 조성물이다. 상기 예비농축물 제형에 물이 부재하는 것은 도세탁셀에 바람직한 특징이지만, 공개된 상기 예비농축물 조성물에는 주사하기에 안전하지 않은 많은 성분, 예를 들면, 20 내지 80%의 비-이온성 계면활성제, 최대 35% w/w의 디에틸렌 글리콜 모노에틸에테르, 및 평균 분자량이 약 1000인 하이드록시알칸, 디하이드록시알칸, 폴리에틸렌 글리콜 및 이의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 최대 40% w/w의 친수성 성분이 있다. 상기 특허의 발명자들에 의해 청구된 이러한 예비농축물 조성물은 사실 경구 투여용이고 주사용이 아니다.

본 발명에 의해 제공된 조성물은 또한 이전의 출원[참조: Chen, 미국특허원 제20030099674호]에 공개된 제형과 상이하다. 상기 출원에서, 본 발명자는 탁소이드 약물, 레시틴, 중쇄 트리글리세라이드, 및 붕괴 온도가 -25℃ 내지 약 -30℃인 당류를 포함하는 항유착제(anti-adhesion agent)를 함유하는, 동일한 목적을 갖는, 즉 파클리탁셀 또는 도세탁셀과 같은 탁소이드 약물에 대해 안정한 무독성 에멀젼 제형을 제공하는 목적을 갖는 동결건조된 제형을 공개하였다. 상기 출원에 공개된 발명은 다음의 중요한 양상에 있어서 이전의 출원 이상으로 상당한 개선을 나타낸다: (1) 증가된 약물 대 오일 비; (2) 감소된 액적 크기; (3) 증가된 안정성; (4) 단축된 에멀젼 제조 과정 시간; 및 (5) 개선된 안전성. 모든 이러한 개선은 조성물 중에 안정화제로서 VES를 사용하여 달성될 수 있다. 본 발명자는, VES를 에멀젼 조성물 중에 0.1 내지 0.5%와 같이 매우 낮은 농도로 사용하여도, 에멀젼 안정성, 액적 크기, 약물 로딩(loading), 에멀젼 제조 과정 시간 및 안전성에 충분한 영향을 미칠 수 있다는 것을 발견하였다.

예를 들면, 본 발명은 에멀젼 조성물 중에 일정량의 탁소이드 약물을 용해시키는데 필요한 오일 농도, 즉 약물 대 오일 비를 크게 감소시킨다. 이전의 출원에서 공개된 에멀젼 조성물은 약물 대 오일의 중량비가 약 1 대 150 내지 187이다, 즉 파클리탁셀과 같은 약물 1부를 용해시키는데 150 내지 187 중량부의 오일이 필요하지만 [참조: 실시예 5, 미국특허원 제20030099674호], VES-안정화된 에멀젼은 1 대 13 정도의 낮은 약물 대 오일의 중량비를 달성할 수 있다. 더 낮은 오일 대 약물 비는 감소된 고지질혈증 위험성, 개선된 에멀젼 안정성 및 매우 단축된 동결건조 시간을 위하여 바람직하다. 또한, 이전에 공개된 제형 중의 평균 액적 크기는 약 200 내지 210nm이고 [참조: 실시예 5, 미국특허원 제20030099674], 이는 0.2 마이크론 멸균 필터를 통해서만 여과할 수 있지만, 본 발명의 VES-안정화된 에멀젼은 액적 크기가 약 105 내지 150nm이다. 작은 액적은 혈액 순환에서 약물의 운반을 용이하게 하고, 폐색전증 (폐에서 모세혈관이 막힘)의 위험성을 감소시키고, 멸균을 달성하기 위한 여과의 용이함과 관련하여 제조 과정이 매우 쉬워지게 할 수 있기 때문에, 액적 크기가 더 작은 에멀젼이 바람직하다. 마찬가지로, 감소된 액적 크기는 VES를 안정화제로서 사용하고 이중 균질화 기술을 사용하여 가능해진다.

VES-안정화된 에멀젼의 성질은 미국특허원 제20030099674호에 공개된 에멀젼과 상이한데, 액적의 제타 포텐셜이 VES-안정화된 에멀젼은 -20 mV 내지 -50 mV이고 이전의 출원의 에멀젼은 0 내지 -10 mV이다. 제타 포텐셜은 입자/액적 간의 반발력 또는 인력의 크기의 척도이다. 본 발명자는 개선된 에멀젼 안정성 및 안전성을 위하여 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜이 매우 바람직하다는 것을 발견하였다. 본 발명자는 VES가 부재하거나 불충분한 수준의 VES를 갖는 에멀젼 조성물은 제타 포텐셜이 0 내지 -20 mV이고, 제타 포텐셜이 -20 mV 내지 -50 mV인 에멀젼과 비교하여 덜 안정하다는 것을 관찰하였다. 본 발명자는 또한 과도하게 높은 음의 제타 포텐셜 (-60 mV 내지 -70 mV)은 동물 모델에서, 아마도 세포독성인 도세탁셀을 간으로 보내어, 에멀젼을 보다 유독하게 한다는 것을 관찰하였다. 그러므로, 에멀젼 조성물, 특히 도세탁셀과 같은 강력하거나 세포독성인 약리학적 활성 제제를 보유하는 에멀젼 조성물은, 에멀젼이 안정하면서 안전한 바람직한 범위의 제타 포텐셜을 갖는 것이 중요하다. 본 발명에서 공개된 에멀젼 조성물은 약 -20 mV 내지 -50 mV의 가장 바람직한 범위의 제타 포텐셜을 갖기 때문에 이전에 공개된 다른 에멀젼과 구별된다.

A. 실질적으로 수불용성인 제제의 전달을 위한 VES-안정화된 조성물

한가지 양상에서, 본 발명은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 VES-안정화된 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 수중유형 에멀젼, 수중유형 에멀젼으로 재구성될 수 있는 고체 조성물, 및 콜로이드성 분산액일 수 있고, 이들은 모두 안정성을 위한 충분한 양의 VES를 포함한다.

본원에서 말하는 비타민 E 석시네이트 또는 "VES"는 또한 화학식명으로 알파-토코페릴 석시네이트이다. VES 및 알파-토코페릴 석시네이트라는 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용된다.

알파 토코페롤은 (±)-(2RS,4'RS,8'RS)-2,5,7,8-테트라메틸-2-(4',8',12'-트리메틸트리데실)-6-크로만올이다. 이의 일반명(nonproprietary name)에는 영국 약전에 의한 알파 토코페롤, 유럽 약전에 의한 α-토코페롤룸 및 미국 약전에 의한 비타민 E가 포함된다. 이의 CAS 등록번호는 10191-41-0이다. 이의 실험식은 C₂₉H₅₀O₂이고 분자량은 430.69이다. 알파 토코페롤 및 이의 동족체의 구조를 아래에 제시한다.

R₁, R₂ 및 R₃은 H 또는 CH₃일 수 있다.

동족체	R1	R2	R3
알파-토코페롤	CH3	CH3	CH3
베타-토코페롤	CH3	H	CH3
감마-토코페롤	H	CH3	CH3
델타-토코페롤	H	H	CH3

천연 형태는 d-알파 토코페롤 또는 간단히 알파 토코페롤로 공지되어 있다. 알파 토코페롤에는 3개의 키랄 중심이 있어서 8개의 이성체가 존재한다. d-이성체 형태는 (2R,4'R,8'R)-알파-토코페롤, 또는 때때로 RRR-알파-토코페롤을 나타낸다.

"알파-토코페릴 석시네이트"는 석신산과 알파 토코페롤과의 헤미-에스테르, 예를 들면 d-알파-토코페릴산 석시네이트 (C₃₃H₅₄O₅, 분자량: 530.8, CAS 번호: 4345-03-3)를 말한다. 알파-토코페릴 석시네이트 및 이의 유사체의 화학구조를 아래에 제시한다.

R₁ = R₂ = R₃ = H 또는 CH₃

R = -OOC-(CH₂)_n-COOH

유사체	n	디카복실산
알파-토코페릴 옥살레이트	0	옥살산
알파-토코페릴 말로네이트	1	말론산
알파-토코페릴 석시네이트	2	석신산
알파-토코페릴 글루타레이트	3	글루타르산
알파-토코페릴 아디페이트	4	아디프산
알파-토코페릴 피멜레이트	5	피멜산
알파-토코페릴 수베레이트	6	수베르산
알파-토코페릴 아젤레이트	7	아젤라산

VES 또는 "알파-토코페릴 석시네이트"는, 특정 양태에서, dl-알파-토코페릴산 석시네이트 (CAS 번호: 17407-37-3)와 같은 이성체를 포함할 수 있다. 이는, 특정 양태에서, 베타 토코페릴산 석시네이트, 델타 토코페릴산 석시네이트, 감마 토코페릴산 석시네이트 또는 이의 이성체를 포함할 수 있다.

특정 양태에서, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 조성물을 VES의 유사체 또는 염에 의해 안정화시킬 수 있다.

본 발명에서 사용되는 "알파-토코페릴 석시네이트 유사체" 또는 "VES 유사체"라는 용어는 단쇄 디카복실산과 알파 토코페롤과의 헤미-에스테르를 말하고, 여기서 상기 디카복실산은 다음의 화학식을 갖는다.

HOOC-(CH₂)_n-COOH

단쇄 디카복실산에는 옥살산 (n=0), 말론산 (n=1), 석신산 (n=2), 글루타르산 (n=3), 아디프산 (n=4), 피멜산 (n=5), 수베르산 (n=6) 및 아젤라산 (n=7)이 포함된다.

본 발명에서 사용되는 "알파-토코페릴 석시네이트 염" 또는 "VES 염"이라는 용어는 약제학적으로 허용되는 무기 상대이온(counter ion) (예: 나트륨, 칼륨, 리튬, 칼슘, 마그네슘 및 알루미늄) 및 유기 상대이온 (예: 아민, 리신 및 아르기닌)의 이온성 이온염을 말한다.

VES 또는 알파-토코페릴 석시네이트, 알파 토코페롤의 헤미-에스테르는 다른 3개의 통상적인 종류의 비타민 E 유도체 - 토코페롤, 토코페롤 모노에스테르 (예: 아세테이트) 및 토코페롤 폴리에틸렌글리콜 석시네이트 (토코페롤 PEG 에스테르 또는 비타민 E TPGS라고도 함)와 구조적 및 기능적으로 상이하다. 헤미-에스테르는 개방된 (비-에스테르화된) 카복실산 그룹을 함유하고 이온화성이지만, 모든 다른 종류들은 비-이온화성이다. 따라서, 제형 중의 성분으로서 포함되면, 헤미-에스테르는 모노에스테르 또는 모(母) 토코페롤과 매우 상이하게 기능한다. 모노에스테르 또는 모 토코페롤은 친지성이고 지용성이지만, 헤미-에스테르는 물 또는 오일에 불용성이고 친수성 또는 소수성 약물에 적당한 용매 또는 가용화제가 아니다. 헤미에스테르 상의 개방된 (비-에스테르화된) 카복실산 그룹이 약 7 이상의 pH에서 이온화되는 경우, 헤미-에스테르는 HLB 값이 낮은 (즉, 수불용성 종류) 계면활성제와 같이 작용하지만, 비타민 E TPGS와 같은 적당한 계면활성제는 아니다. 예를 들면, 비타민 E TPGS와 달리, 토코페롤 석시네이트는 수중에서 마이셀(micelle)을 형성하여 친지성 약물을 가용화시키거나, 식물성 오일을 수중에 유화시켜 안정한 수중유형 에멀젼을 형성시킬 수 없다. 외관상, 토코페롤 석시네이트는 결정성 고체이지만, 토코페롤 및 토코페롤 아세테이트는 오일 액체이고, 비타민 E TPGS는 수용성 왁스-유사 물질이다.

특정 양태에서, 본 발명의 제형은 알파-토코페롤, 비타민 E TPGS 또는 둘 모두를 포함하지 않는다.

"VES-안정화된" 조성물은 충분한 양의 VES (또는 이의 유사체 또는 염)를 포함하여 화학적으로 및/또는 물리적으로 안정한 조성물을 말한다.

조성물 중의 약리학적 활성 제제 (예: 도세탁셀)가 적당한 상태 하에서 1개월 이상 동안 보관된 후 실질적으로 화학분해되지 않는 경우, 이러한 조성물은 "화학적으로 안정한" 것이다. 특정 양태에서, 조성물 중의 온전한 도세탁셀의 농도는 적당한 보관 상태 하에서 (예: -20℃, 2 내지 8℃ 또는 실온에서) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 15, 18 또는 24개월 이상 동안 약 1%, 3%, 5% 또는 10% 미만이 감소된다.

도세탁셀 (또는 이의 수화물)의 화학적 분해에는 주로 N-3급-부틸 에스테르 결합의 가수분해가 포함된다. 도세탁셀의 가수분해 속도는 pH 의존적이다. 진공 건조, 동결 건조, 분사 건조 또는 다른 건조 수단에 의해 연속상 중의 물을 제거하면 사실상 가수분해가 정지된다.

조성물 (예: 에멀젼 또는 건조된 에멀젼)이 적당한 상태 하에서 1개월 이상 동안 평균 입자 크기가 100% 이상 증가하지 않거나 상 분리, 크리밍(creaming) 또는 입자 응집의 증거를 보이지 않으면서 보관될 수 있는 경우, 이러한 조성물은 "물리적으로 안정한" 것이다. 특정 양태에서, 본 발명의 조성물의 입자의 평균 크기는 적당한 보관 상태 하에서 (예: -20℃, 2 내지 8℃ 또는 실온에서) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 15, 18 또는 24개월 이상 동안 약 10%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 75% 또는 100% 이상 증가하지 않는다.

특정 양태에서, 도세탁셀의 에멀젼 조성물은 90% 이상의 온전한 도세탁셀 (또는 이의 수화물)을 보유할 수 있고 직경이 5 마이크론을 초과하는 응집체가 실온에서 6개월 이상 동안 실질적으로 부재한다. 특정 양태에서, 도세탁셀의 에멀젼 조성물은 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 이상의 온전한 도세탁셀 (또는 이의 수화물)을 보유할 수 있다.

특정 양태에서, 본 발명의 VES-안정화된 에멀젼 (건조되기 전) 또는 콜로이드성 조성물 중의 VES (또는 이의 유사체 또는 염)의 농도는 약 0.1중량% 내지 약 2중량%, 예를 들면 약 0.1중량% 내지 약 1.2중량%, 및 약 0.2중량% 내지 약 0.5중량%이다. 특정 양태에서, 상기 농도는 약 0.1중량%, 0.2중량%, 0.3중량%, 0.4중량%, 0.5중량%, 0.6중량%, 0.7중량%, 0.8중량%, 0.9중량%, 1.0중량%, 1.1중량%, 1.2중량%, 1.3중량%, 1.4중량%, 1.5중량%, 1.6중량%, 1.7중량%, 1.8중량%, 1.9중량% 또는 2.0중량%이다.

"약리학적 활성 제제"는 포유동물 (예: 사람)에 대한 치료 효과를 갖는 임의의 천연 또는 합성 화합물을 말한다. 치료제에는 항암제 (예: 화학치료제)가 포함되고 단독으로 사용되거나 도세탁셀과 함께 동일한 제형에서 사용될 수 있다.

"실질적으로 수불용성"이라는 용어는 약리학적 활성 제제가 수성 용액 (예: 물, 생리식염수, 주사가능한 덱스트로스 용액 등) 중에 용해되지 않는 것을 말한다. USP/NF에서는 일반적으로 1 그램의 약물을 특정 온도에서 (예: 1g의 아스피린을 300 ml의 H₂O, 5 ml의 에탄올 중에 25℃에서) 용해시키는데 필요한 용매의 용적으로서 용해도를 표현한다. 다른 참고문헌에서는 문헌[참조: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, latest edition]에 제시된 다음의 표에 주어진 것과 같은 보다 주관적인 용어를 사용하여 용해도를 기술할 수 있다.

기술 용어	1부의 용질 당 필요한 용매의 부
매우 높은 가용성	< 1
높은 가용성	1 내지 10
가용성	10 내지 30
불충분한 가용성	30 내지 100
낮은 가용성	100 내지 1000
매우 낮은 가용성	1000 내지 10,000
사실상 불용성 또는 불용성	> 10,000

그러므로, 본 발명의 "실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제"는, 물을 용매로 사용하는 경우, 하위의 4개의 용해도 범주, 즉 "불충분한 가용성", "낮은 가용성", "매우 낮은 가용성" 및 "사실상 불용성 또는 불용성"에 속하는 약리학적 활성 제제를 포함한다.

"불용성"이라는 용어는 소수성, 친지성(lipophilic), 친유성(oleophilic) 및 유사한 용어와 상호교환적으로 사용될 수 있다.

"화학치료제"는 하나 이상의 암 형태 (예: 유방암, 난소암 및 폐암)에 대해 효과적인 임의의 천연 또는 합성 분자를 말한다. 특정 양태에서, 화학치료제는 약간 또는 완전히 친지성이거나, 친지성으로 변형될 수 있다. 화학치료제에는 세포독성인 분자 (항암제), 면역계를 자극하는 분자 (면역 자극제) 및 혈관신생(angiogenesis)을 조절하거나 억제하는 분자가 포함된다.

화학치료제에는 알킬화제, 항대사물질(antimetabolite), 탁산(taxane), 세포독성물질, 세포보호성 애주번트, LHRH 유사체, 백금 제제, 항-에스트로겐, 항-안드로겐, 호르몬 물질, 아로마타제 억제제, 세포 주기 조절제, 아폽토시스제(apoptosis agent), 토포이소머라제 억제제, 혈관신생 억제제, 면역요법제, 모노클로날 항체, 레티노이드, 키나제 억제제 및 시그날 전달 억제제가 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

특정 양태에서, 화학치료제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 및 탁소이드, 탁신(taxine) 또는 탁산이라고 총칭되는 관련 분자로부터 선택된다.

특정 양태에서, 화학치료제는 포도필로톡신(podophyllotoxin) 및 이의 유도체 및 유사체로부터 선택된다.

특정 양태에서, 본 발명에 유용한 화학치료제는 캄프토테신(camptothecin) 및 플라틴(platin)이다.

특정한 다른 양태에서, 본 발명에 유용한 화학치료제는 친지성 안트라사이클린(anthracycline)이다.

특정한 다른 양태에서, 본 발명에 유용한 화학치료제는 친지성인 화합물, 또는 당업자에게 익히 공지된 분자 화학합성 변형에 의해, 예를 들면, 조합 화학 및 분자 모델링에 의해 친지성으로 만들 수 있는 화합물이다. 이러한 화학치료제에는 아모나파이드(Amonafide), 일루딘 에스(Illudin S), 6-하이드록시메틸아실풀벤 브리오스타틴(Bryostatin) 1, 26-석시닐브리오스타틴 1, 팔미토일 리족신(Palmitoyl Rhizoxin), DUP 941, 미토마이신(Mitomycin) B, 미토마이신 C, 펜클로메딘(Penclomedine), 인터페론 알파2b, 혈관신생 억제제 화합물 (예: 염화백금과의 2-히드라지노-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 및 염화백금과의 5-히드라지노-3,4-디하이드로-2H-피롤과 같은 시스플라틴(cisplatin) 소수성 착물), 비타민 A 및 이의 유도체가 포함된다.

본 발명에 유용한 다른 화학치료제에는 1,3-비스(2-클로로에틸)-1-니트로스우레아 ("카르무스틴(carmustine)" 또는 "BCNU"), 5-플루오로우라실, 독소루비신 ("아드리아마이신(adriamycin)"), 에피루비신(epirubicin), 아클라루비신(aclarubicin), 비스안트렌(Bisantrene) (비스(2-이미다졸렌-2-일히드라존)-9,10-안트라센디카복스알데히드), 미톡산트론, 메토트렉세이트, 에다트렉세이트, 무라밀 트리펩티드, 무라밀 디펩티드, 지질다당류(lipopolysaccharide), 9-b-d-아라비노푸라노실아데닌 ("비다라빈(vidarabine)") 및 이의 2-플루오로 유도체, 젬시타빈, 레스베라트롤, 레티노산 및 레티놀, 카로티노이드 및 타목시펜이 포함된다.

본 발명에 유용한 다른 화학치료제에는 데카르바진(Decarbazine), 로니다민(Lonidamine), 피록산트론(Piroxantrone), 안트라피라졸(Anthrapyrazole), 에토포사이드(Etoposide), 캄프토테신(Camptothecin), 9-아미노캄프토테신, 9-니트로캄프토테신, 캄프토테신-11 ("이리노테칸(Irinotecan)"), 토포테칸(Topotecan), 블레오마이신(Bleomycin), 빈카 알칼로이드(Vinca alkaloid) 및 이의 유도체 [빈크리스틴(Vincristine), 비노렐빈(Vinorelbine), 빈데신(Vindesine), 빈트리폴(Vintripol), 빈크살틴(Vinxaltine), 안시타빈(Ancitabine)], 6-아미노크리센, 17-알릴아미노 겔다나마이신, 콤브레스타틴, 캄프토테신, 탈리도마이드 및 비노렐빈이 포함된다.

본 발명의 적용에 유용한 다른 화학치료제로는 탁솔, 엘레우테로빈(eleutherobin), 사르코딕틴(sarcodictyin), 디스코데르몰리드(discodermolide) 및 에포티올론(epothiolone)의 모방체(mimetic)가 있다.

특정한 다른 양태에서, 본 발명에 사용되는 약리학적 활성 제제에는 항신생물제, 항생제, 항진균제(antifungal agent), 항바이러스제, 항감염제, 항염증제, 제산제, 항아드레날린제, 항콜린제, 항응집제, 항알콜제, 항알레르기제, 진통제, 항부정맥제, 항진균제(antimycotic agent), 항정신병제, 항소양제, 항우울제, 항고혈압제, 마취제, 항당뇨병제, 항호르몬, 호르몬, 지질 장애 약물, 면역계 장애 약물, 대사 장애 약물 및 혈액 장애 약물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 수불용성 약물이 포함된다.

본 발명의 실시에 사용하는데 고려되는 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제에는 약제학적 활성 제제, 진단 제제, 영양 제제 등이 포함된다. 약제학적 활성 제제의 예에는 진통제/해열제 (예: 아스피린, 아세트아미노펜, 이부프로펜, 나프록센 나트륨, 부프레노르핀 하이드로클로라이드, 프로폭시펜 하이드로클로라이드, 프로폭시펜 나프실레이트, 메페리딘 하이드로클로라이드, 하이드로모르폰 하이드로클로라이드, 모르핀 설페이트, 옥시코돈 하이드로클로라이드, 코데인 포스페이트, 디하이드로코데인 비타르트레이트, 펜타조신 하이드로클로라이드, 하이드로코돈 비타르트레이트, 레보르판올 타르트레이트, 디플루니살, 트롤아민 살리실레이트, 날부핀 하이드로클로라이드, 메페남산, 부토르판올 타르트레이트, 콜린 살리실레이트, 부탈비탈, 페닐톨록사민 시트레이트, 디펜하이드라민 시트레이트, 메토트리메프라진, 신나메드린 하이드로클로라이드, 메프로바메이트 등); 마취제 (예: 사이클로프로판, 엔플루란, 할로탄, 이소플루란, 메톡시플루란, 아산화질소, 프로포폴 등); 항천식제 (예: 아젤라스틴(Azelastine), 케토티펜(Ketotifen), 트락사녹스(Traxanox) 등); 항생제 (예: 네오마이신, 스트렙토마이신, 클로람페니콜, 세팔로스포린, 암피실린, 페니실린, 테트라사이클린 등); 항우울제 (예: 네포팜, 옥시페르틴, 독세핀 하이드로클로라이드, 아목사핀, 트라조돈 하이드로클로라이드, 아미트립틸린 하이드로클로라이드, 마프로틸린 하이드로클로라이드, 페넬진 설페이트, 데시프라민 하이드로클로라이드, 노르트립틸린 하이드로클로라이드, 트라닐시프로민 설페이트, 플루옥세틴 하이드로클로라이드, 독세핀 하이드로클로라이드, 이미프라민 하이드로클로라이드, 이미프라민 파모에이트, 노르트립틸린, 아미트립틸린 하이드로클로라이드, 이소카복스아지드, 데시프라민 하이드로클로라이드, 트리미프라민 말레에이트, 프로트립틸린 하이드로클로라이드 등); 항당뇨병제 (예: 비구아니드, 호르몬, 설포닐우레아 유도체 등); 항진균제(antifungal agent) (예: 그리세오풀빈, 켈로코나졸, 암포테리신 B, 니스타틴(Nystatin), 칸디시딘 등); 항고혈압제 (예: 프로파놀롤, 프로파페논, 옥시프레놀롤, 니페디핀(Nifedipine), 레세르핀, 트리메타판 캄실레이트, 페녹시벤즈아민 하이드로클로라이드, 파르길린 하이드로클로라이드, 데세르피딘, 디아족사이드, 구아네티딘 모노설페이트, 미녹시딜, 레스신나민, 나트륨 니트로프루시드, 라우월피아 세르펜티나, 알세록실론, 펜톨아민 메실레이트, 레세르핀 등); 항염증제 (예: (비-스테로이드성) 인도메타신, 나프록센, 이부프로펜, 라미페나존, 피록시캄, (스테로이드성) 코르티손, 덱사메타손, 플루아자코르트, 하이드로코르티손, 프레드니솔론, 프레드니손 등); 항신생물제 (예: 아드리아마이신, 사이클로포스파미드, 악티노마이신, 블레오마이신, 두아노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 미토마이신, 메토트렉세이트, 플루오로우라실, 카르보플라틴, 카르무스틴 (BCNU), 메틸-CCNU, 시스플라틴, 에토포시드, 인터페론, 캄프토테신 및 이의 유도체, 페네스테린, 탁산 및 이의 유도체 (예: 파클리탁셀 및 이의 유도체, 도세탁셀 및 이의 유도체 등), 빈블라스틴, 빈크리스틴, 타목시펜, 피포설판 등); 항불안제 (예: 로라제팜, 부스피론 하이드로클로라이드, 프라제팜, 클로르디아제폭사이드 하이드로클로라이드, 옥사제팜, 클로라제페이트 디칼륨, 디아제팜, 하이드록시진 파모에이트, 하이드록시진 하이드로클로라이드, 알프라졸람, 드로페리돌, 할라제팜, 클로르메자논, 단트롤렌 등); 면역억제제 (예: 사이클로스포린, 아자티오프린, 미조리빈, FK506 (타크롤리무스) 등); 항편두통제 (예: 에르고타민 타르트레이트, 프로파놀롤 하이드로클로라이드, 이소메텝텐 무케이트, 디클로랄페나존 등); 진정제/수면제 (예: 바비투레이트 (예: 펜토바비탈, 펜토바비탈 나트륨, 세코바비탈 나트륨 등), 벤조디아자핀 (예: 플루라제팜 하이드로클로라이드, 트리아졸람, 토마제팜, 미다졸람 하이드로클로라이드 등) 등); 항협심증제 (예: 베타-아드레날린 차단제, 칼슘 채널 차단제 (예: 니페디핀, 딜티아젬 하이드로클로라이드 등); 니트레이트 (예: 니트로글리세린, 이소소르비드 디니트레이트, 펜타에리트리톨 테트라니트레이트, 에리트리틸 테트라니트레이트 등) 등); 항정신병제 (예: 할로페리돌, 록사핀 석시네이트, 록사핀 하이드로클로라이드, 티오리다진, 티오리다진 하이드로클로라이드, 티오틱센, 플루페나진 하이드로클로라이드, 플루페나진 데카노에이트, 플루페나진 에난테이트, 트리플루오페라진 하이드로클로라이드, 클로르프로마진 하이드로클로라이드, 페르페나진, 리튬 시트레이트, 프로클로르페라진 등); 항조병제(antimanic agent) (예: 리튬 카보네이트 등); 항부정맥제 (예: 브레틸륨 토실레이트, 에스몰롤 하이드로클로라이드, 베라파밀 하이드로클로라이드, 아미오다론, 엔카이니드 하이드로클로라이드, 디곡신, 디기톡신, 멕실레틴 하이드로클로라이드, 디소피라미드 포스페이트, 프로카이나미드 하이드로클로라이드, 퀴니딘 설페이트, 퀴니딘 글루코네이트, 퀴니딘 폴리갈락투로네이트, 플레카이니드 아세테이트, 토카이니드 하이드로클로라이드, 리도카인 하이드로클로라이드 등); 항관절염제 (예: 페닐부타존, 설린닥, 페니실라민, 살살레이트, 피록시캄, 아자티오프린, 인도메타신, 메클로페나메이트 나트륨, 골드 나트륨 티오말레에이트, 케토프로펜, 오라노핀, 오로티오글루코스, 톨메틴 나트륨 등); 항통풍제(antigout agent) (예: 콜히친, 알로퓨리놀 등); 항응고제 (예: 헤파린, 헤파린 나트륨, 와파린 등); 혈전용해제 (예: 우로키나제, 스트렙토키나제, 알토플라제 등); 항섬유소용해제 (예: 아미노카프로산 등); 혈류학적 제제(hemorheologic agent) (예: 펜톡시필린 등); 항혈소판제 (예: 아스피린, 엠피린, 아스크립틴 등); 항경련제 (예: 발프로산, 디발프로에이트 나트륨, 페니토인, 페니토인 나트륨, 클로나제팜, 피리미돈, 페노바비톨, 페노바비톨 나트륨, 카바마제핀, 아모바비톨 나트륨, 메트석시미드, 메타비탈, 메포바비탈, 메페니토인, 펜석시미드, 파라메타디온, 에토토인, 페나세미드, 세코바비톨 나트륨, 클로라제페이트 디칼륨, 트리메타디온 등); 항파키슨제 (예: 에토석시미드 등); 항히스타민제/항소양제 (예: 하이드록시진 하이드로클로라이드, 디펜히드라민 하이드로클로라이드, 클로르페니라민 말레에이트, 브롬페니라민 말레에이트, 시프로헵타딘 하이드로클로라이드, 테르페나딘, 클레마스틴 푸마레이트, 트리프롤리딘 하이드로클로라이드, 카비녹사민 말레에이트, 디페닐피랄린 하이드로클로라이드, 페닌다민 타르트레이트, 아자타딘 말레에이트, 트리펠레나민 하이드로클로라이드, 덱스클로르페니라민 말레에이트, 메트딜라진 하이드로클로라이드, 트림프라진 타르트레이트 등); 칼슘 조절에 유용한 제제 (예: 칼시토닌, 부갑상선 호르몬 등); 항세균제 (예: 아미카신 설페이트, 아즈트레오남, 클로람페니콜, 클로람페니콜 팔미테이트, 클로람페니콜 나트륨 석시네이트, 시프로플록사신 하이드로클로라이드, 클린다마이신 하이드로클로라이드, 클린다마이신 팔미테이트, 클린다마이신 포스페이트, 메트로니다졸, 메트로니다졸 하이드로클로라이드, 젠타마이신 설페이트, 린코마이신 하이드로클로라이드, 토브라마이신 설페이트, 반코마이신 하이드로클로라이드, 폴리믹신 B 설페이트, 콜리스티메테이트 나트륨, 콜리스틴 설페이트 등); 항바이러스제 (예: 인터페론 감마, 지도부딘, 아만타딘 하이드로클로라이드, 리바비린, 아시클로비르 등); 항미생물제 (예: 세팔로스포린 (예: 세파졸린 나트륨, 세프라딘, 세파클로르, 세파피린 나트륨, 세프티족심 나트륨, 세포페라존 나트륨, 세포테탄 디나트륨, 세푸톡심 아조틸, 세포탁심 나트륨, 세파드록실 모노하이드레이트, 세프타지딤, 세팔렉신, 세팔로틴 나트륨, 세팔렉신 하이드로클로라이드 모노하이드레이트, 세파만돌 나페이트, 세폭시틴 나트륨, 세포니시드 나트륨, 세포라니드, 세프트리악손 나트륨, 세프타지딤, 세파드록실, 세프라딘, 세푸록심 나트륨 등), 페니실린 (예: 암피실린, 아목시실린, 페니실린 G 벤자틴, 사이클라실린, 암피실린 나트륨, 페니실린 G 칼륨, 페니실린 V 칼륨, 피페라실린 나트륨, 옥사실린 나트륨, 바캄피실린 하이드로클로라이드, 클록사실린 나트륨, 티카르실린 디나트륨, 아즐로실린 나트륨, 카르베니실린 인다닐 나트륨, 페니실린 G 칼륨, 페니실린 G 프로카인, 메티실린 나트륨, 나프실린 나트륨 등), 에리트로마이신 (예: 에리트로마이신 에틸석시네이트, 에리트로마이신, 에리트로마이신 에스톨레이트, 에리트로마이신 락토비오네이트, 에리트로마이신 시에아레이트, 에리트로마이신 에틸석시네이트 등), 테트라사이클린 (예: 테트라사이클린 하이드로클로라이드, 독시사이클린 하이클레이트, 미노사이클린 하이드로클로라이드 등) 등); 항감염제 (예: GM-CSF 등); 기관지 확장제 (예: 교감신경 모방제(sympathomimetic) (예: 에피네프린 하이드로클로라이드, 메타프로테레놀 설페이트, 테르부탈린 설페이트, 이소에타린, 이소에타린 메실레이트, 이소에타린 하이드로클로라이드, 알부테롤 설페이트, 알부테롤, 비톨테롤, 메실레이트 이소프로테레놀 하이드로클로라이드, 테르부탈린 설페이트, 에피네프린 비타르트레이트, 메타프로테레놀 설페이트, 에피네프린, 에피네프린 비타르트레이트 등), 항콜린제 (예: 이프라트로퓸 브로마이드 등), 크산틴 (예: 아미노필린, 디필린, 메타프로테레놀 설페이트, 아미노필린 등), 비만 세포(mast cell) 안정화제 (예: 크로몰린 나트륨 등), 흡입형 코르티코스테로이드 (예: 플루리솔리드베클로메타손 디프로피오네이트, 베클로메타손 디프로피오네이트 모노하이드레이트 등), 살부타몰, 베클로메타손 디프로피오네이트 (BDP), 이프라트로퓸 브로마이드, 부데소니드, 케토티펜, 살메테롤, 크시나포에이트, 테르부탈린 설페이트, 트리암시놀론, 테오필린, 네도크로밀 나트륨, 메타프로테레놀 설페이트, 알부테롤, 플루니솔리드 등); 호르몬 (예: 안드로겐 (예: 다나졸, 테스토스테론 시피오네이트, 플루옥시메스테론, 에틸토스토스테론, 테스토스테론 에나니헤이트, 메틸테스토스테론, 플루옥시메스테론, 테스토스테론 시피오네이트 등), 에스트로겐 (예: 에스트라디올, 에스트로피페이트, 공액 에스트로겐 등), 프로게스틴 (예: 메톡시프로게스테론 아세테이트, 노르에틴드론 아세테이트 등), 코르티코스테로이드 (예: 트리암시놀론, 베타메타손, 베타메타손 나트륨 포스페이트, 덱사메타손, 덱사메타손 나트륨 포스페이트, 덱사메타손 아세테이트, 프레드니손, 메틸프레드니솔론 아세테이트 현탁액, 트리암시놀론 아세토니드, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 하이드로코르티손 나트륨 석시네이트, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 트리암시놀론 헥사카토니드, 하이드로코르티손, 하이드로코르티손 시피오네이트, 프레드니솔론, 플루오로코르티손 아세테이트, 파라메타손 아세테이트, 프레드니솔론 테불레이트, 프레드니솔론 아세테이트, 프레드니솔론 나트륨 포스페이트, 하이드로코르티손 나트륨 석시네이트 등), 갑상선 호르몬 (예: 레보티록신 나트륨 등) 등); 혈당강하제 (예: 사람 인슐린, 정제된 소 인슐린, 정제된 돼지 인슐린, 글리부리드, 클로르프로파미드, 글리피지드, 톨부타미드, 톨라자미드 등); 혈지질 저하제 (예: 클로피브레이트, 덱스트로티록신 나트륨, 프로부콜, 로바스타틴, 니아신 등); 단백질 (예: DNase, 알기나제, 초과산화물 디스뮤타제, 리파제 등); 핵산 (예: 본원에서 기술된 임의의 단백질을 포함하는 치료상 유용한 임의의 단백질을 암호화하는 센스 또는 안티-센스 핵산 등); 조혈 자극에 유용한 제제 (예: 에리트로포이에틴 등); 항궤양제/항역류제 (예: 파모티딘, 시메티딘, 라니티딘 하이드로클로라이드 등); 항구토제/진토제 (예: 메클리진 하이드로클로라이드, 나빌론, 프로클로르페라진, 디멘하이드리네이트, 프로메타진 하이드로클로라이드, 티에틸페라진, 스코폴라민 등); 지용성 비타민 (예: 비타민 A, D, E, K 등); 뿐만 아니라 미토탄, 비사딘, 할로니트로소우레아, 안트로사이클린, 엘립티신 등과 같은 기타 약물이 포함된다.

약리학적 활성 제제의 추가적인 예에는 실질적으로 수불용성인 화합물, 및 관련 내용 전체가 본원에 참조로서 인용된 문헌[참조: "Therapeutic Category and Biological Activity Index" of The Merck Index (12th Ed'n, 1996)]에 열거된 화합물이 포함된다.

본 발명의 실시에 사용하는데 고려되는 진단 제제의 예에는 초음파 조영제, 방사선 조영제 (예: 요오도-옥탄, 할로카본, 레노그라핀 등), 자성 조영제 (예: 플루오로카본, 지용성 상자성 화합물 등) 뿐만 아니라, 실질적으로 수불용성인 성질을 갖게 하는 다소의 물리적 및/또는 화학적 변형 없이 쉽게 전달될 수 없는 기타 진단 제제가 포함된다.

본 발명의 실시에 사용하는데 고려되는 영양 제제의 예에는 아미노산, 당, 단백질, 탄수화물, 지용성 비타민 (예: 비타민 A, D, E, K 등) 또는 지방, 또는 이들의 임의의 2개 이상의 조합이 포함된다.

특정 양태에서, 본 발명의 조성물은 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는다. 앞서 언급한 바와 같이, 상기 범위의 제타 포텐셜은 조성물의 안정성 및 안전성을 개선하는데 바람직하다. 본 발명자는 제타 포텐셜이 0 내지 -20 mV인 조성물은 제타 포텐셜이 -20 내지 -50 mV인 에멀젼과 비교하여 덜 안정하고, 과도하게 높은 음의 제타 포텐셜 (예: -60 mV 내지 -70 mV)을 갖는 조성물은 동물 모델에서 독성이 더 높다는 것을 발견하였다.

1. 수중유형 에멀젼

한가지 양상에서, 본 발명은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 수중유형 에멀젼을 제공한다.

"수중유형 에멀젼"은 액체 오일이 수성 매질 (연속상) 중에 작은 액적 (불연속상)으로 분산되어 있는 콜로이드성 분산계를 말한다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼의 오일 액적은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 상당 부분을 포함한다. 예를 들면, 특정 양태에서, 약 80%를 초과하는 약리학적 활성 제제가 용해되어 오일 액적으로 남는다. 특정 양태에서, 약 85%, 90%, 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 초과의 약리학적 활성 제제가 오일상에 존재한다. 특정 양태에서, 오일 액적은 주위 온도에서 (예: -4℃, 2 내지 8℃ 또는 20 내지 25℃에서) 결정성 고체가 부재한다.

특정 양태에서, 약리학적 활성 제제 대 오일 성분(들)의 비는 약 1:100 이상이다. 특정 양태에서, 상기 비는 약 1:90, 1:80, 1:70, 1:60, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:10 또는 1:5 이상이다.

수중유형 에멀젼 중에 VES가 존재하면 오일 액적의 크기가 더 작게 된다. 예를 들면, 특정 양태에서, 오일 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다. 특정한 다른 양태에서, 오일 액적의 평균 직경은 약 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm 또는 150 nm 이하이다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼을 멸균한다. 예를 들면, 오일 액적의 평균 직경이 약 200 nm 이하인 수중유형 에멀젼은 0.2 ㎛ 필터를 통해 멸균할 수 있다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제, VES (또는 이의 유사체 또는 염), 하나 이상의 오일, 인지질(등) 및 물을 포함한다.

"오일"이라는 용어는 체온 (예: 약 37℃)에서 액체이고 주사가능한 제형에서 약리학적으로 허용되는 탄화수소 유도체, 탄수화물 유도체 또는 유사한 유기 화합물을 나타내는 일반적인 의미로 본원에서 사용된다. 여기에는 글리세라이드 또는 비-글리세라이드가 포함된다.

특정 양태에서, 본 발명의 에멀젼 중의 오일은 식물성 오일이거나 식물성 오일을 포함한다. "식물성 오일"은 식물 종자 또는 견과류로부터 유래된 오일을 말한다. 대표적인 식물성 오일에는 아몬드유, 보리지유(borage oil), 까막까치밥나무(black currant) 종자유, 옥수수유, 홍화유, 대두유, 참기름, 면실유, 땅콩유, 올리브유, 평지씨유, 코코넛유, 팜유, 캐놀라유 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

식물성 오일은 통상적으로 "장쇄 트리글리세라이드"이고, 이는 3개의 지방산 (오일의 공급원에 따라, 다양한 위치에서 다양한 수의 불포화 결합을 갖고, 일반적으로 약 14개 내지 약 22개의 탄소의 길이임)이 글리세롤 상의 3개의 하이드록실 그룹과 에스테르 결합을 형성할 때 형성된다. 특정 양태에서, 높은 정제 등급의 ("수퍼 정제된(super refined)"이라고도 함) 식물성 오일은 수중유형 에멀젼의 안전성 및 안정성을 확보하기 위하여 일반적으로 사용된다. 특정 양태에서, 식물성 오일의 제어된 수소화에 의해 제조되는 수소화된 식물성 오일이 본 발명에 사용될 수 있다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼 중의 오일은 중쇄 트리글리세라이드이거나 트리글리세라이드를 포함한다. "중쇄 트리글리세라이드 (MCT)"는 천연이거나 합성일 수 있는 또다른 계열의 트리글리세라이드 오일이다. MCT는 일반적으로 약 8개 내지 약 12개의 탄소의 길이인 지방산으로부터 만들어진다. 식물성 오일과 같이, MCT는 비경구 영양을 필요로 하는 환자를 위하여 칼로리의 공급원으로서 주사용으로 설계된 에멀젼에서 광범위하게 사용되었다. 이러한 오일은 Miglyol 812 [판매원: SASOL GmbH, Germany], CRODAMOL GTCC-PN [판매원: Croda Inc. of Parsippany, New Jersey] 또는 Neobees M-5 오일 [판매원: PVO International, Inc., of Boonton, New Jersey]로서 시판된다. 다른 저융점 중쇄 오일도 본 발명에 사용될 수 있다.

특정 양태에서, 본 발명의 수중유형 에멀젼 중의 오일은 동물성 지방이거나 동물성 지방을 포함한다. "동물성 지방"은 동물 기원으로부터 유래된 오일을 말한다. 여기에는 트리글리세라이드도 포함되지만, 식물성 오일과 비교하여, 3개의 지방산 쇄의 길이 및 불포화 결합이 차이가 있다. 실온에서 고체인 기원으로부터의 동물성 지방 (예: 쇠기름, 돼지기름 등)은 필요에 따라 가공하여 액체가 되게 할 수 있다. 실온에서 본래 액체인 다른 종류의 동물성 지방에는 다양한 어유 등이 포함된다.

특정 양태에서, 식물성 오일과 MCT 오일의 조합이 본 발명에 사용된다. 이러한 조합은 일반적으로 주사가능한 에멀젼에서 함께 안전하게 사용된 오랜 기록이 있고, 본 발명의 콜로이드성 분산액 또는 건조 고체에 대해 우수한 안정성을 제공한다. 사용되는 식물성 오일의 구체적인 종류 (즉, 대두유, 옥수수유 또는 홍화유 등)는, 안전하고, 충분히 용인되고, 약제학적으로 허용되고, 화학적으로 안정하고 바람직한 크기 범위의 분산 액적을 제공하는 한, 중요하지 않다.

본 발명의 에멀젼 중의 총 오일 성분의 함량 (건조되기 전)은 약 1중량% 내지 약 20중량%의 범위 이내일 수 있다. 특정 양태에서, 오일 성분의 총 농도는 약 2% 내지 약 15%, 또는 약 5% 내지 약 10%의 범위 이내이다. 특정 양태에서, 오일 성분의 총 농도는 약, 또는 많아야 약 1중량%, 2중량%, 3중량%, 4중량%, 5중량%, 6중량%, 7중량%, 8중량%, 9중량%, 10중량%, 12중량%, 15중량%, 17중량% 또는 20중량%이다. 특정 양태에서, 에멀젼은 피험체에게 투여되는 경우에 고지질혈증을 일으키지 않는 양의 오일을 포함한다.

특정 양태에서, 콜로이드성 현탁액 중의 식물성 오일 대 MCT 오일의 중량비는 약 5:1 내지 약 1:5의 범위 이내이다. 특정 양태에서, 식물성 오일 대 MCT 오일의 비는 약 2:1 내지 약 1:2의 범위 이내이다. 특정 양태에서, 식물성 오일 대 MCT 오일의 비는 약 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4 또는 1:5이다.

본 발명에서 말하는 비-글리세라이드는 주로 콜레스테롤 및 이의 유도체이다.

특정 양태에서, 본 발명의 제형의 오일 성분은 대두유 및 콜레스테롤을 포함한다.

특정 양태에서, 본 발명의 수중유형 에멀젼은 인지질을 포함한다. "인지질"은 2개의 지방산 및 하나의 포스페이트 이온을 갖는 글리세롤의 트리에스테르를 말한다. 본 발명에 유용한 대표적인 인지질에는 포스파티딜 클로린, 레시틴 (인산화된 디아실글리세라이드의 콜린 에스테르의 혼합물), 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜글리세롤, 탄소수가 약 4 내지 약 22, 보다 일반적으로는 약 10 내지 약 18이고 포화도가 다양한 포스파티드산이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 약물 전달 조성물의 인지질 성분은 단일 인지질 또는 다수의 인지질의 혼합물일 수 있다. 사용되는 인지질은 선택된 투여 경로에 적합해야 한다.

본 발명에 유용한 인지질은 향상된 안전성을 위하여 바람직하게는 천연 기원일 수 있다. 천연 인지질에는 대두 레시틴, 계란 레시틴, 수소화된 대두 레시틴, 수소화된 계란 레시틴, 스핑고신(sphingosine), 갱글리오사이드(ganglioside) 및 파이토스핑고신(phytosphingosine), 및 이의 조합이 포함된다.

천연 레시틴은 인산의 콜린 에스테르에 연결된 스테아르산, 팔미트산 및 올레산의 디글리세라이드의 혼합물이고, 통상적으로 포스파티딜콜린이라고 하며, 계란 및 대두와 같은 다양한 공급원으로부터 얻을 수 있다. 대두 레시틴 및 계란 레시틴 (수소화된 레시틴 포함)은 생물 시스템에서 오랫동안 안전하였고, 유화성 및 가용화성을 겸비하고 있으며, 대부분의 합성 계면활성제보다 더 빠르게 무해한 물질로 분해되는 경향이 있다. 시판되는 대두 인지질로는 Centrophase 및 Centrolex 제품 [판매원: Central Soya], Phospholipon [판매원: Phospholipid GmbH, Germany], Lipoid [판매원: Lipoid GmbH, Germany] 및 EPIKURON [판매원: Degussa]이 있다.

수소화된 레시틴은 레시틴의 제어된 수소화의 산물이다. 이것도 본 발명에서 사용될 수 있다.

미국 약전(USP)에 따르면 레시틴은, 다양한 양의 트리글리세라이드, 지방산 및 탄수화물과 같은 다른 물질과 혼합된, 포스포티딜콜린, 포스포티딜에탄올아민, 포스포티딜세린 및 포스포티딜이노시톨로 주로 이루어진, 아세톤-불용성 인지질의 복합 혼합물을 기술하는 일반명이다.

약제학적으로, 레시틴은 분산제, 유화제 및 안정화제로서 주로 사용되고, 근육내 및 정맥내 주사제, 비경구 영양 제형 및 국소용 제품에 포함된다. 레시틴은 흡입제, IM 및 IV 주사제, 경구 캡슐제, 현탁액제 및 정제, 직장 제제, 국소 제제 및 질 제제 용으로 FDA 비활성 첨가제 지침(Inactive Ingredients Guide)에도 열거되어 있다.

인지질은 합성될 수도 있는데, 통상적인 합성 인지질을 아래에 열거한다:

디아실글리세롤

1,2-디라우로일-sn-글리세롤 (DLG)

1,2-디미리스토일-sn-글리세롤 (DMG)

1,2-디팔미토일-sn-글리세롤 (DPG)

1,2-디스테아로일-sn-글리세롤 (DSG)

포스파티드산

1,2-디미리스토일-sn-글리세로-3-포스파티드산, 나트륨염 (DMPA,Na)

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스파티드산, 나트륨염 (DPPA,Na)

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스파티드산, 나트륨염 (DSPA,Na)

포스포콜린

1,2-디라우로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DLPC)

1,2-디미리스토일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DMPC)

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DPPC)

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DSPC)

포스포에탄올아민

1,2-디라우로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DLPE)

1,2-디미리스토일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DMPE)

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DPPE)

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DSPE)

포스포글리세롤

1,2-디라우로일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 나트륨염 (DLPG)

1,2-디미리스토일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 나트륨염 (DMPG)

1,2-디미리스토일-sn-글리세로-3-포스포-sn-1-글리세롤, 암모늄염 (DMP-sn-1-G,NH4)

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 나트륨염 (DPPG,Na)

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 나트륨염 (DSPG,Na)

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포-sn-1-글리세롤, 나트륨염 (DSP-sn-1G,Na)

포스포세린

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포-L-세린, 나트륨염 (DPPS,Na)

혼합된 쇄 인지질

1-팔미토일-2-올레오일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (POPC)

1-팔미토일-2-올레오일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 나트륨염 (POPG,Na)

1-팔미토일-2-올레오일-sn-글리세로-3-포스포글리세롤, 암모늄염 (POPG,NH4)

리소인지질

1-팔미토일-2-리소-sn-글리세로-3-포스포콜린 (P-리소-PC)

1-스테아로일-2-리소-sn-글리세로-3-포스포콜린 (S-리소-PC)

페길화된 인지질

N-(카보닐-메톡시폴리에틸렌글리콜 2000)-MPEG-2000-DPPE

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민, 나트륨염

N-(카보닐-메톡시폴리에틸렌글리콜 5000)-MPEG-5000-DSPE

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민, 나트륨염

N-(카보닐-메톡시폴리에틸렌글리콜 5000)-MPEG-5000-DPPE

1,2-디팔미토일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민, 나트륨염

N-(카보닐-메톡시폴리에틸렌글리콜 750)-MPEG-750-DSPE

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민, 나트륨염

N-(카보닐-메톡시폴리에틸렌글리콜 2000)-MPEG-2000-DSPE

1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민, 나트륨염

본 발명의 에멀젼 중의 인지질의 양 (건조되기 전)은 약 1중량% 내지 약 20중량%의 범위 이내일 수 있다. 특정 양태에서, 인지질의 양은 약 5중량% 내지 약 15중량%, 또는 약 8중량% 내지 약 12중량%의 범위 이내일 수 있다. 특정 양태에서, 인지질의 양은 약 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19% 및 20%이다.

상기한 바와 같이, 수중유형 에멀젼은 수성 매질을 포함한다. "수성 매질" 또는 "수성상"은 산성화제, 알칼리화제, 완충제, 킬레이트제, 착화제 및 가용화제, 항산화제 및 항미생물성 보존제, 현탁화제 및/또는 점도 조절제, 장성(tonicity) 조절제, 동결방지제, 및 다른 생체적합성 물질 또는 치료제와 같은 약제학적으로 허용되는 첨가제를 함유할 수 있는 물-함유 액체를 말한다. 특정 양태에서, 이러한 첨가제는 콜로이드성 분산액을 안정화시키거나 본 발명의 제형에 생체적합성을 부여하는데 도움을 준다. 특정 양태에서, 에멀젼의 pH는 약 5 내지 약 9 (예: 약 6 내지 약 8)이다.

수성상의 삼투몰농도는 일반적으로 대략 300 내지 1000 mOsm이고, 수성상은 염화칼륨 또는 염화나트륨, 트레할로스, 수크로스, 소르비톨, 글리세롤, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 알부민, 아미노산 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 약 300 mOsm의 삼투몰농도는 덱스트로스, 락토스, 소르비톨 또는 수크로스와 같이 삼투압도 증가시키는 제제를 사용하여 달성된다.

본 발명에서 사용되는 "항산화제"는 주사가능한 제품에 사용하기에 안전한 금속 이온 킬레이트제 및/또는 환원제를 주로 말한다. 금속 이온 킬레이트제는 금속 이온에 결합하여 VES의 산화 반응에 대한 금속 이온의 촉매 효과를 감소시킴으로써 항산화제로서 작용한다. 본 발명에 유용한 금속 킬레이트제에는 EDTA, 글리신 및 시트르산 또는 이의 염이 포함될 수 있다.

특정 양태에서, 본 발명의 콜로이드성 분산액 중의 디나트륨 에데테이트의 농도는 약 0.0001% 내지 약 1% w/v일 수 있다. 특정 양태에서, 농도는 약 0.001% 내지 약 0.1% w/v, 또는 약 0.001% 내지 약 0.005% w/v이다.

특정 양태에서, 본 발명의 수중유형 에멀젼은 잠재적으로 생명을 위협하는 과민 반응, 용혈 또는 정맥 자극을 일으키는 부형제, 또는 비타민 E TPGS, 폴리소르베이트 80, 알부민 또는 올레산과 같은 기타 성분을 함유하지 않는다.

환원제는 VES와 경쟁하여 산화제와 반응하거나, 산화된 VES를 환원된 형태의 본래의 VES로 다시 전환시켜 항산화 효과를 나타낸다. 본 발명에 유용한 환원제에는 아스코르브산 또는 이의 염, 아스코르빌 팔미테이트, 나트륨 메타비설파이트, 프로필 갈레이트, 부틸화된 하이드록시아니솔, 부틸화된 하이드록시톨루엔, 토코페롤, 아미노산 또는 이의 염, 시트르산 또는 이의 염, 환원당, 또는 이의 혼합물이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

특정 양태에서, 본 발명의 수중유형 에멀젼은 증량제를 추가로 포함한다. "증량제(bulking agent)"는 진공 건조, 분사 건조 또는 동결 건조 방법에 의해 건조시키는 동안 주변의 물질 중에 산재된 서브마이크론 크기의 액적을 유지시켜 수중유형 에멀젼을 보호하는 안전하고 생체적합성인 제제를 말한다. 본 발명의 증량제는 수중유형 에멀젼으로부터 물을 제거시킨 후 생성된 고체 중 오일(oil-in-solid) 조성물의 연속상의 주요 성분으로서도 기능한다.

본 발명에 유용한 증량제에는 단당류, 이당류, 다당류, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세롤, 폴리-올, 덱스트린, 사이클로덱스트린, 전분, 셀룰로스 및 셀룰로스 유도체, 단백질, 펩티드, 아미노산, 염화나트륨, 폴리비닐피롤리돈 또는 이의 혼합물이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들면, 특정 양태에서, 증량제는 만니톨, 소르비톨, 크실리톨, 락토스, 프럭토스, 크실로스, 수크로스, 트레할로스, 만노스, 말토스, 글루코스, 덱스트로스, 덱스트란 또는 이의 혼합물이다. 특정 양태에서, 증량제는 수크로스, 수크로스와 만니톨의 배합물, 또는 수크로스와 트레할로스의 배합물이다. 특정 양태에서, 본 발명의 제형은 아카시아를 포함하지 않는다.

본 발명의 에멀젼 중의 증량제의 농도 (건조되기 전)는 약 5% 내지 약 30% w/v일 수 있다. 특정 양태에서, 농도는 약 10% 내지 약 25% w/v, 또는 약 15% 내지 20% w/v이다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼 또는 이의 성분(들)은 주사가능하다. "주사가능함"은 의약품 당국 (예: 미국 FDA)에 의해 어떠한 성분이 주사 약물에 사용가능하도록 허용된 것을 말한다.

특정 양태에서, 수중유형 에멀젼 또는 이의 성분(들)은 생체적합성이다. "생체적합성"은 살아있는 유기체 내에서 또는 살아있는 유기체에 대해 적당한 방식으로, 즉 과도한 독성 또는 생리학적 또는 약리학적 효과 없이, 기능을 수행할 수 있는 능력을 말한다.

특정 양태에서, 본 발명은 다음의 대표적인 수중유형 에멀젼을 제공한다:

1. 제타 포텐셜이 -20 내지 -50 mV이고 에멀젼 액적의 평균 직경이 200 nm 미만이며 도세탁셀- 또는 파클리탁셀 대 오일의 중량비가 1:50 이상인, 도세탁셀 또는 파클리탁셀, VES, 하나 이상의 주사가능한 오일, 주사가능한 인지질 및 물을 포함하는 수중유형 에멀젼.

2. 약 0.1 내지 약 1 (예: 약 0.3 내지 약 0.8, 및 약 0.5 내지 약 0.7) 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 약 0.01 내지 약 5 (예: 약 0.1 내지 약 3, 및 약 0.2 내지 약 1) 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 1 내지 10 (약 2 내지 약 8, 및 약 3 내지 약 5) 중량% 농도 범위의 식물성 오일, 임의로 약 1 내지 약 10 (약 2 내지 약 8, 및 약 3 내지 약 5) 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일, 1 내지 20 (약 5 내지 약 15, 및 약 8 내지 약 12) 중량% 농도 범위의 인지질, 임의로 약 0.01 내지 약 5 (약 0.1 내지 약 1, 및 약 0.4 내지 약 0.8) 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 약 40 내지 약 90 (약 50 내지 약 90, 및 약 55 내지 약 85) 중량% 농도 범위의 물을 포함하고, pH가 약 5 내지 9인, 상기 제1의 대표적인 양태에 따른 수중유형 에멀젼.

3. 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 5 내지 약 50 (예: 약 10 내지 약 40, 및 약 10 내지 약 20) 중량% 농도 범위의 증량제를 추가로 포함하는, 상기 제2의 대표적인 양태에 따른 수중유형 에멀젼.

4. 약 0.5 내지 약 0.7 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 약 0.2 내지 약 1 중량% 농도의 VES, 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 식물성 오일 (예: 대두 오일), 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드, 약 8 내지 약 12 중량% 농도 범위의 인지질 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 0.4 내지 약 0.8 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 약 55 내지 약 85 중량% 농도 범위의 물을 포함하는 수중유형 에멀젼.

5. 10 내지 20 중량% 농도 범위의 증량제 (예: 수크로스, 덱스트로스, 락토스 또는 이의 혼합물)를 추가로 포함하는, 상기 제4의 대표적인 양태에 따른 수중유형 에멀젼.

6. 약 0.1 내지 약 1.0 (예: 약 0.4 내지 약 0.6) 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 약 5 내지 약 10 중량% 농도 범위의 레시틴 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 1 내지 1.5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 약 0.2 내지 약 0.5 중량% 농도 범위의 VES, 약 10 내지 약 20 중량% 농도 범위의 증량제 (예: 수크로스, 덱스트로스, 락토스 또는 이의 혼합물) 및 물을 포함하는 수중유형 에멀젼.

7. 약 0.1 내지 약 1 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 약 0.2 내지 약 1 중량% 농도 범위의 VES, 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 식물성 오일 (예: 대두 오일), 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드, 약 8 내지 약 12 중량% 농도 범위의 인지질 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 0.4 내지 약 0.8 중량% 농도 범위의 콜레스테롤 및 물을 포함하는 수중유형 에멀젼.

8. 10 내지 20 중량% 농도 범위의 증량제 (예: 수크로스, 덱스트로스, 락토스 또는 이의 혼합물)를 추가로 포함하는, 상기 제7의 대표적인 양태에 따른 수중유형 에멀젼.

9. 약 0.1 내지 약 1.0 중량% 농도 범위의 17-알릴아미노 겔다나마이신, 콤브레스타틴, 캄프토테신, 탈리도마이드, 이타코나졸, 암포테리신 또는 베리코나졸, 약 0.2 내지 약 1 중량% 농도 범위의 VES, 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 식물성 오일 (예: 대두 오일), 약 3 내지 약 5 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드, 약 8 내지 약 12 중량% 농도 범위의 인지질 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 0.4 내지 약 0.8 중량% 농도 범위의 콜레스테롤 및 물을 포함하는 수중유형 에멀젼.

10. 10 내지 20 중량% 농도 범위의 증량제 (예: 수크로스, 덱스트로스, 락토스 또는 이의 혼합물)를 추가로 포함하는, 상기 제9의 대표적인 양태에 따른 수중유형 에멀젼.

본 발명의 수중유형 에멀젼은 다음의 단계를 포함하는 "이중 균질화 기술"에 의해 형성될 수 있다:

(1) VES의 수성 현탁액을 균질화시켜 VES의 서브마이크론 현탁액을 형성시키는 단계 - 제1 균질화 단계,

(2) 도세탁셀과 같은 약리학적 활성 제제를 하나 이상의 오일 및 인지질을 포함하는 오일상 중에 용해시키는 단계. 당해 단계는, IKA 로터-스테이터형(rotor-stator type)의 고전단 혼합기(high-shear mixer)와 같은 고전단 장치를 사용하여 혼합물을 격렬하게 교반하거나, 임의로, 에탄올을 용매로서 사용하여 고체 성분을 먼저 용해시키고, 모든 액체 성분을 혼합에 의해 합하여 약리학적 활성 제제, 오일 및 인지질을 함유하는 하나의 균일한 에탄올성 용액을 형성시키고, 마지막으로 진공 건조에 의해 에탄올을 제거하여 달성될 수 있다.

(3) VES 현탁액 및 오일상, 및 임의로 증량제와 같은 기타 성분을 배합하고 혼합물을 교반하여 조 수중유형 에멀젼을 형성시키는 단계,

(4) 조 에멀젼을 미세유동화기(microfluidizer)와 같은 고압 균질기를 통해 통과시켜 서브마이크론 에멀젼을 형성시키는 단계 - 제2 균질화 단계, 및

(5) 서브마이크론 에멀젼을 0.2 마이크론 필터를 통해 통과시켜 에멀젼을 멸균하는 단계.

특정 양태에서, 제1 균질화 단계는, 수중의 VES의 조 현탁액을 사용하여, 약 10,000 psi 내지 약 30,000 psi 범위의 미리 결정된 압력에서 작동하는 미세유동화기를 사용한 고압 균질화 단계를 거쳐, VES의 서브마이크론 현탁액을 형성시켜 수행할 수 있다.

특정 양태에서, 제2 균질화 단계는, 서브마이크론 VES 현탁액 및 약리학적 활성 제제를 함유하는 오일상의 혼합물을 사용하여, 약 10,000 psi 내지 약 30,000 psi 범위의 미리 결정된 압력에서 작동하는 미세유동화기를 사용한 고압 균질화 단계를 거쳐, 약 100nm 내지 약 300nm의 범위, 예를 들면 약 100nm 내지 약 200nm의 범위, 및 약 100nm 내지 약 180nm의 범위의 액적을 갖는 서브마이크론 에멀젼을 형성시켜 수행할 수 있다.

대표적인 수중유형 에멀젼의 제조에 관한 추가적인 설명은 실시예에서 찾을 수 있다.

2. 고체 조성물

다른 양상에서, 본 발명은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제 (예: 도세탁셀)를 포함하고, 실질적으로 물이 부재하며, 상기한 에멀젼으로부터 물을 제거하여 제조되는 고체 조성물을 제공한다. 본 발명의 VES-안정화된 수중유형 에멀젼은 충분히 안정하여, 실질적으로 물이 부재하도록 건조되어, 수불용성 약리학적 활성 제제 (예: 도세탁셀)의 가수분해가 방지될 수 있다. 고체 조성물을 물로 재수화시키면 주사에 적당한 에멀젼이 형성될 수 있고, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다. 특정 양태에서, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm 또는 150 nm 이하이다.

특정 양태에서, 고체 조성물은 약 0.2 내지 약 3 (예: 약 0.8 내지 약 2.5, 및 약 1.3 내지 약 2.0) 중량% 농도 범위의 도세탁셀, 약 0.1 내지 약 12 (약 0.4 내지 약 9, 및 약 0.7 내지 약 7) 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 약 1.1 내지 약 21.9 (약 5.5 내지 약 16.4, 및 약 8.8 내지 약 13.2) 중량% 농도 범위의 식물성 오일, 임의로 약 1.1 내지 약 21.9 (약 5.5 내지 약 16.4, 및 약 8.8 내지 약 13.2) 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드, 약 2.7 내지 약 54.8 (약 13.7 내지 약 41.1, 및 약 21.9 내지 약 32.9) 중량% 농도 범위의 인지질, 임의로 약 0.2 내지 약 3.3 (약 0.8 내지 약 2.5, 및 약 1.3 내지 약 2.0) 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 4.7 내지 약 93.2 (예: 약 23.3 내지 약 69.9, 및 약 37.3 내지 약 55.9) 중량% 농도 범위의 증량제를 포함한다.

특정 양태에서, 고체 조성물은 약 1.3 내지 약 2.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀, 약 0.7 내지 약 1.0 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 약 8.8 내지 약 13.2 중량% 농도 범위의 식물성 오일 (예: 대두 오일), 약 8.8 내지 약 13.2 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일, 약 21.9 내지 약 32.9 중량% 농도 범위의 인지질 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 1.3 내지 약 2.0 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 37.3 내지 약 55.9 중량% 농도 범위의 증량제를 포함한다.

고체 조성물은 상기한 수중유형 에멀젼을 진공 건조, 동결 건조 또는 분사 건조에 의해서와 같이 탈수시켜 제조될 수 있다.

3. 현탁액

다른 양상에서, 본 발명은 수성 매질 중에 분산되고 VES에 의해 안정화된 비정질 또는 결정성 약리학적 활성 제제의 서브마이크론 고체 입자 (여기서, 상기 고체 입자는 액체 오일 (예: 식물성 오일 또는 MCT)이 실질적으로 부재하고 평균 직경이 200 nm 미만이며 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는다)를 포함하는 현탁액 조성물을 제공한다. 특정 양태에서, 상기 현탁액은 약 0.1 내지 약 1.0 (예: 약 0.4 내지 약 0.6) 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀, 약 5 내지 약 15 중량% 농도 범위의 레시틴 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 0.5 내지 약 2 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 약 0.1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 VES, 약 10 내지 약 20 중량% 농도 범위의 증량제 (예: 수크로스, 덱스트로스, 락토스 또는 이의 혼합물) 및 물을 포함한다.

다른 양상에서, 고체 조성물은 상기한 현탁액을 진공 건조, 동결 건조 또는 분사 건조에 의해서와 같이 탈수시켜 제조될 수 있다.

특정 양태에서, 현탁액으로부터 제조된 고체 조성물은 약 1.3 내지 약 2.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀, 약 1 내지 약 15 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트, 약 22 내지 약 32 중량% 농도 범위의 인지질 (예: 대두 레시틴 또는 계란 레시틴), 약 1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 35 내지 약 75 중량% 농도 범위의 증량제를 포함한다.

본 발명의 현탁액은 다음의 단계를 포함하는 "이중 균질화 기술"에 의해 형성될 수 있다:

(2) 도세탁셀과 같은 약리학적 활성 제제, 인지질 및 콜레스테롤을 에탄올 중에 용해시켜 하나의 균일한 에탄올성 용액을 형성시키고, 진공 건조에 의해 에탄올을 제거하여 고체 덩어리를 제조하는 단계,

(3) VES 현탁액 및 고체 덩어리, 물 및 임의로 증량제와 같은 기타 성분을 배합하고 혼합물을 교반하여 조 현탁액을 형성시키는 단계,

(4) 조 현탁액을 미세유동화기와 같은 고압 균질기를 통해 통과시켜 서브마이크론 현탁액을 형성시키는 단계 - 제2 균질화 단계, 및

(5) 서브마이크론 현탁액을 0.2 마이크론 필터를 통해 통과시켜 현탁액을 멸균하는 단계.

특정 양태에서, 제2 균질화 단계는, 서브마이크론 VES 현탁액 및 약리학적 활성 제제를 함유하는 고체 덩어리의 혼합물을 사용하여, 약 10,000 psi 내지 약 30,000 psi 범위의 미리 결정된 압력에서 작동하는 미세유동화기를 사용한 고압 균질화 단계를 거쳐, 약 100nm 내지 약 300nm의 범위, 예를 들면 약 100nm 내지 약 200nm의 범위, 및 약 100nm 내지 약 180nm의 범위의 입자를 갖는 서브마이크론 현탁액을 형성시켜 수행할 수 있다.

B. VES-안정화된 조성물을 사용하는 방법

관련된 양상에서, 본 발명은 항암제 (예: 도세탁셀 또는 파클리탁셀)를 포함하는 VES-안정화된 에멀젼을 암종의 치료를 필요로 하는 피험체에게 투여함을 포함하여, 암종을 치료하는 방법을 제공한다. VES-안정화된 에멀젼은 혈관내, 경구, 근육내, 피부 및 피하 경로를 통해 동물 또는 사람에게 투여될 수 있다. 다른 투여 경로에는 복부내, 동맥내, 관절내, 피막내, 경관내, 두개내, 관내, 경막내, 병변내, 소방내, 요추내, 벽내, 안내, 수술중, 두정내, 복강내, 흉막내, 폐내, 척수내, 흉부내, 기관내, 고실내, 자궁내 및 심실내 투여가 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 VES-안정화된 에멀젼은 적당한 에어로졸 분사제를 사용하여 분무될 수도 있고, 이는 친지성 화합물의 폐 전달용으로 당업계에 공지되어 있다. VES-안정화된 에멀젼은 안구 점적제 형태의 점적주입으로 투여될 수 있다.

다른 양상에서, 본 발명은 다른 질병을 치료하는데 효과적인 약리학적 활성 제제를 포함하는 VES-안정화된 조성물을 다른 질병의 치료를 필요로 하는 피험체에게 투여함을 포함하여, 다른 질병을 치료하는 방법을 제공한다. VES-안정화된 에멀젼은, 암의 치료와 관련하여 위에 기술된 경로를 포함하여, 당업계에 공지된 특정한 치료에 적당한 임의의 경로를 통해 동물 또는 사람에게 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물에 의해 치료될 수 있는 질병에는 감염 (예: 미생물, 바이러스, 진균 감염), 염증, 알레르기, 부정맥, 우울증, 고혈압, 당뇨병, 지질 장애, 면역계 장애, 대사 장애 및 혈액 장애가 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

예를 들면, 한가지 양태에서, 본 발명은 항진균제 (예: 이트라코나졸, 암포테리신 및 베리코나졸)를 포함하는 VES-안정화된 조성물을 진균 감염의 치료를 필요로 하는 피험체에게 투여함을 포함하여, 진균 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명의 일반적인 원리는 다음의 비제한적인 실시예를 참조하여 보다 충분히 인식될 수 있다. 실시예에 제시된 바와 같이, 본 발명에 따른 도세탁셀을 포함하는 특정한 VES 안정화된 수중유형 에멀젼은 알레르기 비-유발성이고, 시판되는 제품인 TAXOTERE™ 보다 독성이 낮지만, TAXOTERE™ 만큼 효능이 있으며, 주사 부위에서 비-자극성이고, 물리적 및 화학적으로 안정하다.

실시예 1

VES-안정화된 도세탁셀 에멀젼 (표 1A)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조하였다.

성분	% w/w
도세탁셀	0.6
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
대두 레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

VES-안정화된 에멀젼을 다음의 단계를 포함하는 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다:

(1) 10,000 내지 23,000 psi의 작동 압력에서 에멀젼 상호작용 챔버(emulsion interaction chamber)가 장착된 미세유동화기 [Model 110F (판매원: Microfluidics)]를 사용하여 5% VES 서브마이크론 현탁액을 제조하는 단계,

(2) 도세탁셀, 대두 오일, 중쇄 트리글리세라이드, 계란 레시틴 및 충분한 양의 에탄올을 배합하고 혼합하여 투명한 황색 용액을 형성시키는 방법으로 오일상을 제조하는 단계. 잔류 에탄올 함량이 다른 성분들을 합한 중량의 2% 미만이 될 때까지 회전 증발기를 사용하여 용액을 진공 하에서 건조시켜 짙은 황색 액체(즉, 오일상)를 수득하였다.

(3) 고전단 혼합기 [예: Ultra Turrax (판매원: Tekmar Company)]를 사용하여 VES 현탁액, 오일상, 수크로스 및 물을 배합하고 혼합하여 조 에멀젼을 제조하는 단계,

(4) 액적 크기가 200 nm 미만에 이를 때까지 10,000 내지 23,000 psi의 작동 압력에서 에멀젼 상호작용 챔버가 장착된 미세유동화기 [Model 110F (판매원: Microfluidics)]를 통해 조 에멀젼을 통과시켜 서브마이크론 에멀젼을 제조하는 단계. 생성된 에멀젼을 멸균 0.2 마이크론 필터를 통해 여과시키고 나서, 여과된 에멀젼을 유리 바이알 속에 채웠다. 최종 VES-안정화된 에멀젼은 반투명한 회색 액체였다.

(5) (4) 단계의 에멀젼을 동결 건조시켜 바이알 안에 회색 "케이크(cake)"를 수득하여 건조 조성물을 제조하는 단계 (상기 건조 조성물은 물로 쉽게 재구성되어 반투명한 회색 에멀젼이 재생되었다).

재구성된 에멀젼의 평균 액적 크기는 레이저 광 산란 분광계 [Model 370 Submicron Particle Sizer (판매원: Particle Sizing System, Santa Barbara, CA)]에 의해 124 nm로 측정되었다. 에멀젼 중의 도세탁셀 농도는 역상 고압 액체 크로마토그래피 (Hewlett Packard Model 1050 HPLC)에 의해 6.64 mg/mL로 측정되었다. 약물 대 오일 비는 1:14였고, 제타 포텐셜은 제타 포텐셜 장치 (Malvern Zetasizer Nano model)를 사용하여 -41 mV로 측정되었다.

결론: 작은 액적 크기 (<200nm), 높은 약물 대 오일 비 (1:14) 및 -41 mV의 바람직한 제타 포텐셜을 갖는 VES-안정화된 에멀젼을 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다.

실시예 2

또다른 VES-안정화된 도세탁셀 에멀젼 (표 1B)을 실시예 1에 기술한 동일한 이중 균질화 기술을 사용하여 제조하였다.

성분	% w/w
도세탁셀	0.6
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
계란 레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

재구성된 에멀젼의 평균 액적 크기는 레이저 광 산란 분광계 [Model 370 Submicron Particle Sizer (판매원: Particle Sizing System, Santa Barbara, CA)]에 의해 208 nm로 측정되었다. 에멀젼 중의 도세탁셀 농도는 역상 고압 액체 크로마토그래피 (Hewlett Packard Model 1050 HPLC)에 의해 6.48 mg/mL로 측정되었다. 약물 대 오일 비는 1:14였고, 제타 포텐셜은 제타 포텐셜 장치 (Malvern Zetasizer Nano model)를 사용하여 -38 mV로 측정되었다.

결론: 작은 액적 크기 (208nm), 높은 약물 대 오일 비 (1:14) 및 -38 mV의 바람직한 제타 포텐셜을 갖는 또다른 VES-안정화된 에멀젼을 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다.

실시예 3

또다른 VES-안정화된 도세탁셀 에멀젼 (표 1C)을 실시예 1에 기술한 동일한 이중 균질화 기술을 사용하여 제조하였다.

성분	% w/w
도세탁셀	0.3
중쇄 트리글리세라이드, EP	2
대두 오일, USP	2
계란 레시틴, USP/EP	5
콜레스테롤, NF	0.3
비타민 E 석시네이트, USP	3.5
수크로스, NF	15
탈이온수, qs to	100

재구성된 에멀젼의 평균 액적 크기는 레이저 광 산란 분광계 [Model 370 Submicron Particle Sizer (판매원: Particle Sizing System, Santa Barbara, CA)]에 의해 87 nm로 측정되었다. 에멀젼 중의 도세탁셀 농도는 역상 고압 액체 크로마토그래피 (Hewlett Packard Model 1050 HPLC)에 의해 3.02 mg/mL로 측정되었다. 약물 대 오일 비는 1:14였고, 제타 포텐셜은 제타 포텐셜 장치 (Malvern Zetasizer Nano model)를 사용하여 -69 mV로 측정되었다.

결론: 작은 액적 크기 (87nm), 높은 약물 대 오일 비 (1:14) 및 -69 mV의 매우 높은 제타 포텐셜을 갖는 VES-안정화된 에멀젼을 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다. 당해 에멀젼은 다른 VES-안정화된 에멀젼보다 더 독성이 높은 것으로 밝혀졌다.

실시예 4

다음을 함유하는 파클리탁셀 에멀젼 (VES 미함유)을 미국특허원 제20030099674호에 따라 제조하였다.

성분	% w/w
파클리탁셀	0.05
중쇄 트리글리세라이드, EP	1.55
대두 오일, USP	1.55
계란 레시틴, USP/EP	5
수크로스, NF	15
탈이온수, qs to	100

에멀젼의 평균 액적 크기는 레이저 광 산란 분광계 [Model 370 Submicron Particle Sizer (판매원: Particle Sizing System, Santa Barbara, CA)]에 의해 115 nm로 측정되었다. 약물 대 오일 비는 1:62였고, 제타 포텐셜은 제타 포텐셜 장치 (Malvern Zetasizer Nano model)를 사용하여 -14 mV로 측정되었다.

결론: 당해 에멀젼은 동결 건조시 실시예 1, 2 및 3의 VES-안정화된 에멀젼보다 물리적으로 덜 안정하다.

실시예 5

실시예 1, 2 및 3에 따른 VES-안정화된 에멀젼 중의 도세탁셀의 안정성 (화학적 안정성) 및 에멀젼 자체의 안정성 (물리적 안정성)을 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 화학적 안정성은 에멀젼 중의 도세탁셀의 시간에 따른 농도 및 순도에 따라 측정하였다. 에멀젼 중의 도세탁셀 농도 및 순도를 역상 고압 액체 크로마토그래피 (Hewlett Packard Model 1050 HPLC)에 의해 측정하였다. 물리적 안정성은 오일 액적의 평균 직경에 따라 평가하였다. 오일 액적의 평균 직경은 레이저 광 산란 분광계 [Model ZEN3600, Zeta sizer Nano series (판매원: Malvern)]를 사용하여 측정하였다.

결론: 본 발명에 따른 다수의 VES-안정화된 에멀젼을 검사한 결과, 5℃ 또는 25℃에서 물리적 및 화학적으로 안정한 것으로 밝혀졌다.

실시예 6

마우스에서의 신규 도세탁셀 에멀젼의 급성 독성 평가

목적: 마우스에서 실시예 1에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 정맥내로 투여한 후 급성 독성 반응이 일어나는지 측정하고, 알레르기 유발성 가용화제인 폴리소르베이트 80을 함유하는 현재 시판되는 제형인 TAXOTERE™(TX) 제형과 독성을 비교한다.

방법: 1일차에 ICR 마우스에 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 꼬리 정맥에 주사하고 14일 동안 독성에 대해 관찰하였다. 14일 후, 마우스를 희생시켜, 체중을 측정하고, 형태상으로 기관 독성에 대해 검사하였다. 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 임상적으로 사용되는 도세탁셀 농도의 약 10배인 3 mg/mL로 재구성시켜, 이를 최대 투여 용적 (주사 당 0.4 mL)으로 투여하였다.

결과: 마우스에 대한 최대 주사가능 용량 (120 mg/kg)에서, 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형은 마우스에서 주사 후 14일 이내에 급성 독성, 체중 감소 또는 기관의 형태상 변화의 징후를 보이지 않았다.

결론: 이러한 결과에 따라, 당해 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형에 대한 최대 무독성 허용 용량 또는 HNTD (Highest Non-toxicity Tolerated Dose) (미국 NCI의 정의)는 마우스에서 120 mg/kg (360 mg/m²) 이상으로 추정된다. TAXOTERE™ 제형 중의 도세탁셀에 대한 마우스 HNTD는 285 mg/m² 미만으로 공개되어 있고, TAXOTERE™의 사람 권장 용량은 60 내지 100 mg/m²이다. 본 연구는, VES 안정화된 에멀젼 제형이 마우스에서 적어도 TAXOTERE™ 제형만큼 안전하며 더 많이 허용될 수 있다는 것을 시사한다.

실시예 7

기니피그(guinea pig)에서의 신규 도세탁셀 동결건조 에멀젼의 과민성 연구

목적: 본 발명에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 전신 안전성 연구의 일부로서 과민 반응을 평가한다.

방법: 기니피그를 사용하여, 1.5 mg/kg 및 0.5mg/kg (도세탁셀의 최대 사람 임상 일일 용량과 동등함)의 2가지 감작화 용량 수준에서 복강내로 투여하여 제형의 과민성을 검사하였다. 동시에, 0.9% NaCl 용액 (생리 식염수)을 음성 대조군으로서 사용하고 소 알부민 단백질 (2.5mg/동물)을 양성 대조군으로서 사용하였다.

결과: 검사 물질을 사용한 마지막 복강내 감작화 10일 후, 기니피그에 실시예에 따른 VES 안정화된 에멀젼 제형의 2배 용량을 정맥내로 투여하여 시험감염(challenge)시키고 1시간 동안 관찰하였다. 당해 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형으로 감작화되고 시험감염된 동물은 알레르기 반응의 어떠한 징후도 보이지 않았다.

결론: 본 발명에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형은 검사 동물에서 어떠한 과민 반응도 일으키지 않았고, 알레르기 비-유발성이다.

실시예 8

마우스 S180 육종 모델에서의 도세탁셀 에멀젼 효능

목적: 마우스 S180 육종 종양 모델에서 폴리소르베이트 80을 함유하지 않는 실시예 1에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 항암 활성을 폴리소르베이트 80을 함유하는 현재 시판되는 제형인 TAXOTERE™(TX)에 대하여 비교한다.

방법: 수컷 및 암컷 ICR 마우스에 S180 육종 세포를 피하로 접종하였다. 9일 동안 격일로 마우스에 검사 물질을 정맥내 주사로 투여하고 나서 희생시키고 종양을 제거하여 중량을 측정하였다. 종양 억제의 %를 항암 효능 지표로서 계산하였다. 실험을 반복하여 재현성을 확립하였다.

결과: 첫번째 실험에서, 음성 대조군 (생리 식염수를 투여함)은 중량이 1.48±0.50g인 종양이 생겼고, 양성 대조군 (TX 10 mg/kg) 및 도세탁셀의 VES 안정화된 에멀젼 제형 처리 그룹에 5 mg/kg, 10 mg/kg, 20 mg/kg의 3가지의 상이한 용량을 투여하였다. 종양 중량은 각각 0.68±0.26g, 0.88±0.28g, 0.49±0.22g 및 0.26±0.11g이 되었다. 음성 대조군과 비교하여, 각각 54.2%, 40.1%, 66.5% 및 82.4%의 % 종양 억제를 보여 종양의 유의적인 감소가 관찰되었다. 양성 대조군과 비교하여, 도세탁셀의 10 및 20 mg/kg VES 안정화된 에멀젼 제형 그룹은 그 이상의 종양 감소를 나타내었고, 20 mg/kg 그룹은 TX 10 mg/kg 그룹과 통계적으로 유의적인 차이가 있었다. 두번째 실험에서, 종양 중량은 음성 대조군의 경우에는 1.55±0.50g이었고, 양성 대조군, VES 안정화된 에멀젼 제형 5 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 그룹의 경우에는 각각 0.76±0.15g, 0.95±0.25g, 0.61±0.24g, 0.42±0.14g 이었다. 음성 대조군과 비교하여, 양성 대조군, VES 안정화된 에멀젼 제형 5 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 그룹의 경우 각각 51.2%, 38.9%, 60.4% 및 72.8%의 % 종양 억제를 보여 통계적으로 유의적인 종양 억제가 관찰되었다. 양성 대조군과 비교하여, VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 및 VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg 그룹에서 추가적인 종양 감소가 관찰되었다. VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg의 % 종양 억제 값은 10 mg/kg TX 제형 그룹의 값과 통계적인 차이가 있다.

결론: VES 안정화된 에멀젼 제형은 ICR 마우스에서 마우스 S180 육종에 대해 용량 의존적 방식으로 유의적인 항암 활성을 재현적으로 나타내었다. 당해 VES 안정화된 에멀젼 제형은 적어도 TAXOTERE™ 제형만큼 효능이 있다.

실시예 9

마우스 H22 간세포암(hepatoma) 모델에서의 도세탁셀 동결건조 에멀젼의 항암 활성

목적: 마우스 H22 간세포암 모델에서 실시예 1에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 항암 활성을 평가한다.

방법: 수컷 및 암컷 ICR 마우스에 H22 간세포암 세포를 피하로 접종하고, 9일 동안 격일로 꼬리 정맥을 통해 검사 물질을 정맥내 주사로 투여하고, 희생시켜 종양을 제거하여 중량을 측정하였다. % 종양 억제를 항암 효능 지표로서 계산하였다. 재현성을 위하여 실험을 반복하였다.

결과: 첫번째 실험에서, 음성 대조군 (생리 식염수를 투여함)은 중량이 1.261±0.255g인 암이 생겼고, 양성 대조군 (10mg/kg의 TAXOTERE™ 제형 (TX)을 투여함) 및 5 mg/kg, 10 mg/kg, 20 mg/kg 용량 수준의 VES 안정화된 에멀젼 제형 처리 그룹은 각각 종양 중량이 0.56±0.24g, 0.69±0.19g, 0.51±0.15g 및 0.33±0.08g이었다. 음성 대조군과 비교하여, 각각 51.7%, 40.0%, 56.0% 및 71.5%의 % 종양 억제를 보여 종양이 유의적으로 감소하였다. 양성 대조군과 비교하여, 10 및 20 mg/kg VES 안정화된 에멀젼 제형 그룹은 그 이상의 종양 감소를 나타내었고, 20 mg/kg VES 안정화된 에멀젼 제형 그룹은 TX 10 mg/kg 그룹과 통계적으로 유의적인 차이가 있었다. 두번째 실험에서, 종양 중량은 음성 대조군의 경우에는 1.08±0.26g이었고, 양성 대조군, VES 안정화된 에멀젼 제형 5 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg 및 VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 그룹의 경우에는 각각 0.60±0.17g, 0.74±0.10g, 0.55±0.19g, 0.38±0.09g이었다. 음성 대조군과 비교하여, 양성 대조군, VES 안정화된 에멀젼 제형 5 mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg 및 VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 그룹의 경우 각각 44.5%, 31.5%, 49.5% 및 64.2%의 % 종양 억제를 보여 통계적으로 유의적인 종양 억제가 관찰되었다. 양성 대조군과 비교하여, VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg 및 VES 안정화된 에멀젼 제형 10 mg/kg 그룹에서 추가적인 종양 감소가 관찰되었다. VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg의 % 종양 억제 값은 10 mg/kg TAXOTERE™ 제형 그룹의 값과 통계적인 차이가 있다.

결론: 본 발명에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형은 ICR 마우스에서 마우스 H22 간세포암에 대해 용량 의존적 방식으로 유의적인 항암 활성을 재현적으로 나타내었다. 당해 VES 안정화된 에멀젼 제형은 적어도 10 mg/kg의 TAXOTERE™ 제형만큼 효능이 있다.

실시예 10

MDAMB-435 사람 유방암으로 이종이식(xenograft)된 누드 마우스에서의 도세탁셀 에멀젼 효능

목적: 이종이식된 MDAMB-435 사람 유방암 모델에서 폴리소르베이트 80을 함유하지 않는 본 발명에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 항암 활성을 폴리소르베이트 80을 함유하는 현재 시판되는 제형인 TAXOTERE™(TX)에 대하여 비교한다.

방법: 암컷 누드 마우스 (Balb/c)에 MDAMB-435 사람 유방암 세포를 접종하고 치료하기 전에 종양이 100 내지 200mm³로 성장하게 하였다. 3일 마다 마우스에 검사 물질을 정맥내 주사로 꼬리 정맥을 통해 총 4회 투여하고, 체중 및 종양 용적에 대해 측정하였다. 25일 후, 동물을 희생시키고 종양 용적 및 체중을 측정하였다. 상대적인 종양 용적 (RTV), 상대적인 종양 성장률 (T/C) 및 종양 억제의 %를 통계적 분석을 위한 항암 효능 지표로서 계산하였다.

결과: 음성 대조군 (생리 식염수를 투여함) 및 5mg/kg 및 10mg/kg의 VES 안정화된 에멀젼 제형을 투여받은 그룹에서는 유의적인 체중 변화가 관찰되지 않았지만, 10mg/kg TX 및 20 mg/kg의 VES 안정화된 에멀젼 제형을 투여받은 그룹에서는 체중이 유의적으로 감소하였다. 연구 동안 어떤 그룹에서도 사망이 발생하지 않았다. 음성 대조군과 비교하여, VES 안정화된 에멀젼 제형 (20, 10 및 5 mg/kg) 그룹 및 TX 10mg/kg 그룹은 처리 10일 후 유의적인 종양 용적 감소를 나타내었다 (P <0.01 내지 0.001). 음성 대조군의 경우 RTV는 7.2였다. VES 안정화된 에멀젼 제형 20mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 10mg/kg, VES 안정화된 에멀젼 제형 5mg/kg 및 TX 10mg/kg 그룹의 경우, RTV는 각각 0.16, 0.24, 1.8 및 0.23이었고, T/C는 각각 2.2%, 3.4%, 25% 및 3.2%였고, 평균 종양 중량 (25일 후)은 각각 0.012g, 0.028g, 0.22g 및 0.024g이었고, 종양 억제의 %는 각각 98.5, 96.4, 72.3 및 96.9였다. 동일한 용량 (10mg/kg)의 TX와 비교하여, VES 안정화된 에멀젼 제형은 RTV, T/C 및 종양 억제의 %에 따르면 동등하게 효능이 있었지만, 당해 VES 안정화된 에멀젼 제형은 체중에 따르면 TX보다 낮은 독성을 보였다. TX와 비교하여 VES 안정화된 에멀젼 제형 20 mg/kg은 RTV 및 T/C에 따르면 추가적인 종양 감소가 관찰되었다.

결론: VES 안정화된 에멀젼 제형은 누드 마우스 (Balb/c)에서 이종이식된 MDAMB-435 사람 유방암에 대해 용량 의존적 방식으로 유의적인 항암 활성을 나타내었다. 당해 VES 안정화된 에멀젼 제형은 적어도 TAXOTERE™ 제형만큼 효능이 있다.

실시예 11

본 발명에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형에 대한 주사 부위에서의 정맥 자극에 관한 연구

목적: 실시예 1에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 정맥 자극 가능성을 평가하고 주사 부위에서의 국부적 안전성을 증명한다.

방법: 표준 래빗 변연(marginal) 귀 정맥 모델을 사용하여, VES 안정화된 에멀젼 제형을 래빗 당 30mL를 사용하여 1.0mL/분의 속도로 최대 임상 도세탁셀 주입 농도 (0.06 mg/mL)로 주입하였다. 3일 연속으로 1일 1회 주사하였다. 대조군에는 주사용 5% 덱스트로스 용액(D5W)을 주입하였다.

결과: 주입하는 동안, 동물은 정상 호흡을 하며 온순하였다. 각각의 주입 후, 주사 부위에서 어떠한 부종 또는 발적도 관찰되지 않았다. 마지막 주입 48시간 후, 동물을 희생시키고 주사 부위의 하류 부분으로부터 주변 조직과 함께 변연 귀 정맥을 제거하여 조직병리학적 검사를 하였다. 어떠한 조직 염증, 변성, 괴사 또는 다른 자극의 징후도 관찰되지 않았다.

결론: VES 안정화된 에멀젼 제형은 정맥 자극을 일으키지 않았고 주사 부위 안전성 요건을 충족한다.

실시예 12

신규 도세탁셀 에멀젼의 용혈 가능성 조사

목적: 실시예 1에 따른 도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형의 용혈 가능성을 판정한다. 폴리소르베이트 80은 현재 시판되는 도세탁셀 제형 (TAXOTERE™)에서 알레르기 유발성 성분인 것으로 보고되어 있다.

방법: 실시예 1에 따른 VES 안정화된 에멀젼 제형을 함유하는 생리 식염수 용액 중에 현탁시킨 2% 래빗 적혈구(RBC)에서 용혈 또는 응집을 시험관내에서 육안으로 검사한다. VES 안정화된 에멀젼 제형을 임상적으로 사용되는 농도로 조절하여 2% 래빗 RBC 현탁액과 다양한 비로 혼합하고; 혼합물을 37℃에서 3시간 동안 항온처리하여 용혈 및 응집에 대해 관찰하였다.

결과: 어떠한 혼합비에서도 용혈 또는 응집이 관찰되지 않았다.

결론: VES 안정화된 에멀젼 제형은 비-용혈성이다.

실시예 13

파클리탁셀의 VES 안정화된 현탁액 제형 (표 1D)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조하였다.

성분	% w/w
파클리탁셀	0.5
계란 레시틴, USP/EP	8.8
콜레스테롤, NF	1.2
비타민 E 석시네이트, USP	3.6
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

파클리탁셀의 VES-안정화된 현탁액 제형을 실시예 1에서와 유사한 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다. 평균 입자는 200 nm 미만이었고 현탁액은 동결건조시키기에 충분히 안정하였다. VES 없이, 당해 조성물 및 제조 방법에 따라 안정한 현탁액을 수득할 수 없었다.

실시예 14

도세탁셀의 또다른 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1E)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
도세탁셀	0.1 내지 1.0
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
덱스트로스, USP/NF	17.5
탈이온수, qs to	100

도세탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 15

도세탁셀의 VES-안정화된 현탁액 제형 (표 1F)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
도세탁셀	0.5
레시틴, USP/EP	8.8
콜레스테롤, NF	1.2
비타민 E 석시네이트, USP	3.6
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

도세탁셀의 VES-안정화된 현탁액 제형을 실시예 1에서와 유사한 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 16

파클리탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1G)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
파클리탁셀	0.1 내지 1.0
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
덱스트로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

파클리탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 17

이트라코나졸의 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1H)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
이트라코나졸	0.1 내지 1.0
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

이트라코나졸의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 18

암포테리신 B의 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1I)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
암포테리신 B	0.1 내지 1.0
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
수크로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

암포테리신 B의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 19

베리코나졸의 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1J)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조한다.

성분	% w/w
베리코나졸	0.1 내지 1.0
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
덱스트로스, NF	17.5
탈이온수, qs to	100

베리코나졸의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조한다.

실시예 20

파클리탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형 (표 1K)을 하기한 바와 같은 조성으로 제조하였다.

성분	% w/w
파클리탁셀, USP	0.4
중쇄 트리글리세라이드, EP	4
대두 오일, USP	4
대두 레시틴, USP/EP	10
콜레스테롤, NF	0.6
비타민 E 석시네이트, USP	0.3
수크로스, NF	1.75
덱스트로스 저 내독소	15.75
탈이온수, qs to	100

파클리탁셀의 VES-안정화된 에멀젼 제형을 실시예 1에 기술된 이중 균질화 기술에 의해 제조하였다.

실시예 5에 따른 VES-안정화된 에멀젼 중의 파클리탁셀의 안정성 (화학적 안정성) 및 에멀젼 자체의 안정성 (물리적 안정성)을 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 화학적 안정성은 에멀젼 중의 파클리탁셀의 시간에 따른 농도 및 순도에 따라 측정하였다. 에멀젼 중의 파클리탁셀 농도 및 순도를 역상 고압 액체 크로마토그래피 (Hewlett Packard Model 1050 HPLC)에 의해 측정하였다. 물리적 안정성은 오일 액적의 평균 직경에 따라 평가하였다. 오일 액적의 평균 직경은 레이저 광 산란 분광계 [Model ZEN3600, Zetasizer Nano series (판매원: Malvern)]를 사용하여 측정하였다. 결과를 아래의 표에 제시한다.

본 명세서에서 언급되고/되거나 출원 데이터 시트(Application Data Sheet)에 열거된 모든 상기 미국 특허, 미국 특허 공보, 미국 특허원, 외국 특허, 외국 특허원 및 비특허 문헌은 전문이 본원에 참조로서 인용된다.

본원에서 본 발명의 특정 양상을 설명 목적으로 기술하였지만, 본 발명의 취지 및 범위로부터 벗어나지 않으면서 다양한 변형이 이루어질 수 있다는 것이 앞서 말한 것으로부터 인식될 것이다. 따라서, 본 발명은 첨부된 청구항에 의한 경우를 제외하고는 제한되지 않는다.

Claims

수성 매질 중에 오일 액적(oil droplet)을 포함하고 (여기서, 상기 오일 액적은 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 상당 부분을 포함하고, 상기 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다),

비타민 E 석시네이트에 의해 안정화되고,

-20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜(zeta potential)을 갖는 수중유형 에멀젼.
제1항에 있어서, 여과에 의해 멸균된 에멀젼.
제1항 또는 제2항에 있어서, 에멀젼의 오일상(oil phase)이 주위 온도에서 액체이거나 결정성 고체가 부재하고, 약리학적 활성 제제가 실질적으로 오일상 중에 용해된 에멀젼.
제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 약리학적 활성 제제가 도세탁셀(docetaxel) 또는 파클리탁셀(paclitaxel)인 에멀젼.
제1항에 있어서,

a. VES를 수중에 균질화시켜 서브마이크론(submicron) VES 현탁액을 형성시 키고,

b. 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 하나 이상의 주사가능한 오일 및 하나 이상의 주사가능한 인지질을 함유하는 오일 용액 중에 용해시켜 오일상을 형성시키고,

c. VES 현탁액, 오일상 및 임의로 기타 약제학적으로 허용되는 성분을 배합하고,

d. 혼합물을 균질화시켜 에멀젼을 제조함

에 의해 제조된 에멀젼.
제1항에 따른 조성물로부터 물을 제거하여 제조되고, 물로 재수화시키면 주사에 적당한 에멀젼을 형성할 수 있는 (이때, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다), 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 함유하고 실질적으로 물이 부재하는 고체 조성물.
도세탁셀 또는 파클리탁셀, VES, 하나 이상의 주사가능한 오일, 주사가능한 인지질 및 물을 포함하고, -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖고, 에멀젼 액적의 평균 직경이 200nm 미만이고, 도세탁셀 또는 파클리탁셀 대 오일의 중량비가 1:50 미만인 수중유형 에멀젼.
제7항에 있어서,

a. 0.1 내지 1 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀,

b. 0.01 내지 5 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트,

c. 1 내지 10 중량% 농도 범위의 식물성 오일,

d. 임의로, 1 내지 10 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일,

e. 1 내지 20 중량% 농도 범위의 인지질,

f. 임의로, 0.01 내지 5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤,

g. 40 내지 90 중량% 농도 범위의 물

을 포함하고, pH가 약 5 내지 9인 에멀젼.
제8항에 있어서, 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 5 내지 50 중량% 농도 범위의 증량제(bulking agent)를 추가로 포함하는 에멀젼.
제7항에 따른 조성물로부터 물을 제거하여 제조되고, 물로 재수화시키면 주사에 적당한 에멀젼을 형성할 수 있는 (이때, 재형성된 에멀젼 액적의 평균 직경은 약 1 마이크론 이하이다), 도세탁셀 또는 파클리탁셀을 포함하고 실질적으로 물이 부재하는 고체 조성물.
제10항에 있어서,

a. 0.2 내지 3 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀,

b. 0.1 내지 12 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트,

c. 1.1 내지 21.9 중량% 농도 범위의 식물성 오일,

d. 임의로, 1.1 내지 21.9 중량% 농도 범위의 중쇄 트리글리세라이드 오일,

e. 2.7 내지 54.8 중량% 농도 범위의 인지질,

f. 임의로, 0.2 내지 3.3 중량% 농도 범위의 콜레스테롤, 및

g. 덱스트로스, 수크로스, 락토스 또는 이의 혼합물인 4.7 내지 93.2 중량% 농도 범위의 증량제

를 포함하는 고체 조성물.
제1항에 있어서, 약리학적 활성 제제가 항신생물제, 항생제, 항진균제(antifungal agent), 항바이러스제, 항감염제, 항염증제, 제산제, 항아드레날린제, 항콜린제, 항응집제, 항알콜제, 항알레르기제, 진통제, 항부정맥제, 항진균제(antimycotic agent), 항정신병제, 항소양제, 항우울제, 항고혈압제, 마취제, 항당뇨병제, 항호르몬, 호르몬, 지질 장애 약물, 면역계 장애 약물, 대사 장애 약물 및 혈액 장애 약물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 수불용성 약물인 약제학적 조성물.
제1항 내지 제12항 중의 어느 한 항에 따른 조성물의 약제학적 유효량을 이를 필요로 하는 사람을 포함하는 포유동물에게 투여함을 포함하여, 감수성 신생물을 치료하는 방법.
제13항에 있어서, 투여가 정맥내, 복부내, 동맥내, 관절내, 피막내(intracapsular), 경관내, 두개내, 관내(intraductal), 경막내(intradural), 병변내, 소방내(intralocular), 요추내, 벽내(intramural), 안내(intraocular), 수술중(intraoperative), 두정내(intraparietal), 복강내, 흉막내, 폐내, 척수내, 흉부내, 기관내, 고실내, 자궁내 및 심실내 투여, 경구 투여 및 안구 점적제 형태의 점적주입으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 주사 경로에 의해 수행되는 방법.
a. VES를 수중에 균질화시켜 서브마이크론 VES 현탁액을 형성시키고,

b. 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제를 하나 이상의 주사가능한 오일 및 하나 이상의 주사가능한 인지질을 함유하는 오일 용액 중에 용해시켜 오일상을 형성시키고,

c. VES 현탁액, 오일상 및 임의로 기타 약제학적으로 허용되는 성분을 배합하고,

d. 혼합물을 균질화시켜 에멀젼을 제조함

을 포함하는, 실질적으로 수불용성인 약리학적 활성 제제의 전달을 위한 VES 안정화된 에멀젼의 제조 방법.
수성 매질 중에 분산되고 VES에 의해 안정화된 비정질 또는 결정성 약리학적 활성 제제의 서브마이크론 고체 입자 (여기서, 상기 고체 입자는 액체 오일이 실질 적으로 부재하고 평균 직경이 200 nm 미만이며 -20 mV 내지 -50 mV의 제타 포텐셜을 갖는다)를 포함하는 현탁액.
제16항에 있어서, 약리학적 활성 제제가 도세탁셀 또는 파클리탁셀이고, 약 0.1 내지 약 1.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀 또는 파클리탁셀; 약 5 내지 약 15 중량% 농도 범위의 레시틴; 약 0.5 내지 약 2 중량% 농도 범위의 콜레스테롤; 약 0.1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 VES; 수크로스, 덱스트로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 10 내지 약 20 중량% 농도 범위의 증량제; 및 물을 포함하는 현탁액.
약 1.3 내지 약 2.0 중량% 농도 범위의 도세탁셀; 약 1 내지 약 15 중량% 농도 범위의 비타민 E 석시네이트; 대두 레시틴 및 계란 레시틴으로부터 선택되는 약 22 내지 약 32 중량% 농도 범위의 인지질; 약 1 내지 약 5 중량% 농도 범위의 콜레스테롤; 및 덱스트로스, 수크로스, 락토스 및 이의 혼합물로부터 선택되는 약 35 내지 약 75 중량% 농도 범위의 증량제를 포함하는 고체 조성물.
(1) VES의 수성 현탁액을 균질화시켜 VES의 서브마이크론 현탁액을 형성시키고,

(2) 약리학적 활성 제제, 인지질 및 콜레스테롤을 에탄올 중에 용해시키고 나서 에탄올을 제거하여 고체 덩어리를 제조하고,

(3) VES 현탁액 및 고체 덩어리, 물 및 임의로 증량제를 배합하여 조 현탁액을 형성시키고,

(4) 조 현탁액을 균질화시켜 서브마이크론 현탁액을 형성시킴

을 포함하여, 약리학적 활성 제제를 포함하는 현탁액을 제조하는 방법.