KR20080049352A

KR20080049352A - 틸리아닌( ｔｉｌｉａｎｉｎ) 또는아카세틴(ａｃａｃｅｔｉｎ)을 유효성분으로 함유하는화장료 조성물

Info

Publication number: KR20080049352A
Application number: KR1020060119812A
Authority: KR
Inventors: 염명훈; 이소희; 박찬웅; 이상준
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2006-11-30
Filing date: 2006-11-30
Publication date: 2008-06-04
Also published as: KR100851489B1

Abstract

본 발명은 틸리아닌(tilianin) 또는 아카세틴(acacetin)을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시키고 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시킴으로써 피부 노화를 지연시키고 주름 생성을 억제할 수 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.

틸리아닌(tilianin), 아카세틴(acacetin), MMP-1, 프로콜라겐, 노화방지, 주름개선

Description

틸리아닌( ｔｉｌｉａｎｉｎ) 또는 아카세틴(ａｃａｃｅｔｉｎ)을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 {Cosmetic composition containing tilianin or acacetin}

피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 하고 있다. 그러나, 자외선, 외부로부터 받는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스, 영양결핍 등은 피부의 정상기능을 저하시키고 탄력손실, 각질화, 주름생성 등의 피부 노화현상을 촉진시키게 된다.

특히 각질세포가 차례차례로 계속해서 만들어지고 최외층의 오래된 각질세포가 때때로 이탈해가면서 표피가 일정한 두께를 유지하는 각화과정이 순조롭지 못하면, 비정성적인 각질세포가 생성되고 피부 표면에 쌓여 각질층이 두꺼워지고 피부 가 거칠어지며 미세한 잔주름이 생겨 결국 피부 노화가 진행되는 것이다. 특히, 자외선에 의하여 MMP-1이 생합성되면서 타입 1 프로콜라겐의 생합성이 감소되는 것은 피부 노화와 관련이 있다.

따라서 이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위하여 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리활성물질들이 강화된 화장품을 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부 노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔다.

틸리아닌(tilianin) 또는 아카세틴(acacetin)을 함유하고 있다고 알려진 기존의 화장품 원료 중 곽향(Agastache rugosa O. Kuntze, 배초향)은 순형과(Libiatae)에 속하는 다년생 초본으로서 한국, 중국, 일본 등 동북아에 분포하고 있으며 우리나라에서는 주로 남부지방에 야생하거나 일부 재배되고 있다. 예로부터 한방에서 지상부, 지하부, 정유 등 전 부위를 약재로 사용하여 왔고, 민간에서는 잎(방아잎)을 추어탕 등 각종 찌개의 풍미재료로, 꽃을 밀원으로 이용하는 등 전 식물부위를 약용 및 식용으로 사용하고 있어 장기적으로 복용하여도 안전한 식물로 간주되어 왔다.

곽향의 생리활성에 관한 연구로서는 추출물의 항균활성[Phytother. Res. 14(3), 210-212, 2000; J. food Sci. Nutr. 4(2), 97-102, 1999], 항바이러스 활성 [Arch. Pharm. Res. 22(5), 520-523, 1999; Us patent 5776462], 모노아민옥시데이즈 저해활성 [약학회지42(6), 634-638, 1998]이 보고되었고 곽향 성분 중 정유성분의 항균 활성 [Zhongguo Yaozue Zazhi 35(1), 9-11, 2000; Weishengwuxue Zazhi 18(4), 1-4, 16, 1998], 카로티노이드 성분의 항암 활성 [생약학회지 30(4), 404-408, 1999], 디테르펜류의 항암 활성 [J. Nat. Prod. 58(11) 1718-1821, 1995] 및 항바이러스활성 [Arch. Pharm. Res. 22(1), 75-77, 1999], 페닐프로파노이드류의 항바이러스 활성 [Arch. Pharm. Res. 22(5), 520-523, 1999], 항산화활성 [한국농화학회지 42(3), 262-266, 1999] 및 항보체활성 [생약학회지 27(1), 20-25, 1996; 한국농화학회지 39(2), 147-152, 1996], 항염증 활성과 항동맥경화 활성 [FEBS Letters 495, 142-147, 2001; 대한민국 특허 10-0454087]이 보고된 바 있다.

그러나 상기 천연 원료의 단순 추출물을 그대로 사용하는 경우, 효능이 미진하거나 추출물에 포함된 미지의 성분으로 인해 피부 부작용이 유발되는 문제점이 있었다.

상기 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명자들은 보다 우수한 원료를 찾고자 여러 천연물을 검색한 결과 곽향에 다량 존재하는 플라본 배당체 틸리아닌 물질이 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시키고 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진하는 효과를 가짐을 발견하였다. 더욱이 틸리아닌으로부터 당이 제거된 아카세틴은 틸리아닌보다도 효과가 더 우수함을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서 본 발명은 곽향추출물을 분리정제하여 제조된 틸리아닌, 또는 산, 알칼리 또는 효소를 이용하여 가수분해 함으로써 제조된 아카세틴을 함유하여 효과가 뛰어나고 안전한 피부노화방지용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 틸리아닌(tilianin) 및 하기 화학식 2로 표시되는 아카세틴(acacetin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 곽향(배초향)추출물로부터 유래된 것이고, 상기 아카세틴은 곽향추출물 또는 틸리아닌을 산 가수분해, 알칼리 가수분해 또는 효소 가수분해함으로써 제조된 것을 특징으로 하며, 상기 효소 가수분해반응에 사용되는 효소는 당 결합을 분해하는 β-글루코시다제(glucosidase), α,β-아라비노시다제(arabinosidase), α,β-라모시 다제(rhamosidase) 및 이들을 함유하는 복합효소제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 효소임을 특징으로 한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 조성물 총 중량에 대해 각각 0.0001∼5중량％로 함유된 것을 특징으로 한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 또는 보디에센스의 제형을 가지는 것을 특징으로 하며, 피부 노화 방지용 또는 주름 방지용인 것을 특징으로 한다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

본 발명은 틸리아닌 또는 더 나아가서 틸리아닌의 어글리콘인 아카세틴을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 틸리아닌은 5-히드록시-2-(4-메톡시페닐)-7-[3,4,5-트리히드록시-6-(히드록시메틸)옥산-2-일]옥시-크로멘-4-온{5-hydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-7-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-chromen-4-one} 화합물로서 항염증 활성과 항동맥경화 활성이 있는 것으로 알려져 있다. 또한 본 발명의 상기 화학식 2로 표시되는 아카세틴은 5,7-디히드록시-2-(4-메톡시페닐)크로멘-4-온{5,7-dihydroxy-2-(4-methoxyphenyl)chromen-4-one} 화합물이다.

본 발명의 틸리아닌 및 아카세틴의 제조법을 간략히 살펴보면 다음과 같다.

우선, 곽향을 그라인더로 잘게 부수고 헥산(hexane) 혹은 이와 유사한 유기용매를 이용하여 곽향 내의 오일 성분을 제거한다. 이때 유기용매는 에테르, 석유 에테르 등이 사용된다.

상기 오일이 제거된 잔류물을 물과 물을 포함한 유기용매, 또는 물과 유기용매로 추출하고, 이 추출물을 여과, 농축한 후 농축물을 흡착칼럼(XAD 혹은 HP 20)에 통과시켜 틸리아닌을 제조한다. 이 때 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 크로로포름 등이 사용된다.

한편, 여기서 얻은 틸리아닌을 산, 알칼리 가수분해 또는 효소를 이용한 가수분해를 함으로써 아카세틴을 제조한다. 이 때 사용하는 효소는 β-글루코시다제(glucosidase), α,β-아라비노시다제(arabinosidase) 또는 α,β-라모시다제(rhamosidase) 등의 엑소 당 결합 분해효소, 또는 이들을 함유하는 복합효소제가 사용된다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 유효성분인 상기 틸리아닌, 아카세틴, 또는 틸리아닌 및 아카세틴은 조성물 총 중량에 대해 각각 0.0001∼5중량％로 함유된 것이 바람직하다. 이는 함량이 0.0001 중량％ 미만일 경우 상기 성분에 의한 항노화 효과 등을 얻을 수 없고, 함량이 5중량％를 초과할 경우 함량 증가에 비해 효과의 증가가 크지 않기 때문이다.

이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.

[실시예 1] 틸리아닌의 제조

-1단계: 곽향추출물의 제조

곽향 1kg을 그라인더로 잘게 부순다. 헥산(hexane) 혹은 이와 유사한 유기용매(에테르, 석유 에테르 등) 2L를 이용하여 추출하고 유기용매 층을 분리하여 제거하였다. 위 공정을 3회 이상 반복하여 오일을 완전히 제거한 곽향을 얻는다. 오일이 제거된 곽향에 물과 물을 포함한 유기용매(에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 크로로포름 등), 또는 물과 유기용매(에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 크로로포름 등) 4L를 넣고 3회 환류 추출한 후, 15℃에서 하루 동안 방치하여 침적시켰다. 위 공정을 2회 반복하여 추출액을 얻고 추출액을 여과한 후 그 여과액을 진공 농축기에서 농축하여 건고물 75g을 얻었다.

-2단계: 틸리아닌의 제조

1단계에서 얻은 건고물 50g을 물(이온수) 500㎖에 녹이고, 이 용액을 흡착칼럼(XAD 혹은 HP 20)에 통과시킨 후 칼럼을 이온수로 충분히 세척하고 메탄올 혹은 에탄올 4L를 흡착칼럼에 흘려주었다. 흡착칼럼을 통과한 액을 여과, 농축하여 생성물 12.5g을 얻었다. 상기 생성물은 성상이 연한 녹황색의 미세결정이고 양성(Positive) FAB-MS가 447.4[M+H]이며 UV(λ_max)가 268, 332 이었으므로, 틸리아닌임을 확인할 수 있었다.

[실시예 2] 산 가수분해 방법에 의한 아카세틴의 제조

실시예 1에서 얻은 틸리아닌 5g을 틸리아닌 중량의 20배의 중량을 갖는 7% 황산과 50% 에탄올(v/w)로 이루어진 혼합용액에 가하여 100℃ 수욕조에서 6시간 동안 가열 환류시킴으로써, SDG에 결합된 당 결합을 가수분해시켰다. 반응액을 감압 농축하여 용매를 제거하고, 잔사에 증류수(1,000㎖)를 가해 현탁시킨 후, 동량의 에테르로 3회 추출하였다. 총 에테르층을 증류수로 세척한 뒤, 무수황산마그네슘(MgSO4)으로 탈수, 여과, 농축하여 생성물 1.4g을 얻었다. 상기 생성물은 연한 녹황색의 미세결정으로서, 양성 FAB-MS가 285.3[M+H]이고, UV(λ_max) 가 268, 332 이었으므로, 상기 질량, UV 흡수파장 및 HPLC상의 정체시간(retention time)을 아카세틴 표준품과 비교한 결과 아카세틴임을 확인할 수 있었다.

[실시예 3] 알칼리 가수분해 방법에 의한 아카세틴의 제조

실시예 1에서 얻은 틸리아닌 3g을 건조피리딘(300㎖)에 녹이고, 여기에 소디움 메톡사이드(sodium methoxide, powder, 5g)를 가해 유욕상에서 8시간동안 환류 반응시킴으로써, 사포닌의 당 결합을 가수분해시켰다. 반응액을 감압농축하여 용매를 제거하고, 잔사에 증류수(500㎖)를 가해 현탁시킨 후, 동량의 에테르로 3회 추출하였다. 총 에테르층을 증류수로 세척한 뒤, 무수황산마그네슘(MgSO₄)으로 탈수, 여과, 농축하여 생성물 0.7g을 얻었다.

[실시예 4] 효소분해방법에 의한 아카세틴의 제조

실시예 1에서 얻은 틸리아닌 5g을 100㎖의 0.1M 초산완충용액(pH 4.5)에 용해시키고, 여기에 효소 2.5g[펙티나제(pectinase) 0.5g, 나린기나제(naringinase) 0.5g, 셀룰라제(cellulose) 0.5g, β-글루크로니다제(glucuronidase) 0.2g, β-갈락토시다제(galactosidase) 0.5g, 아밀로글루코시다제(amyloglucosidase) 0.3g; Sigma 社製)을 첨가하여 37℃ 수욕상에서 48시간동안 교반시키면서, 박층크로마토 그래피에 의해 주기적으로 확인하여, 기질이 완전히 소실되면 열수중에서 10분간 가열하여 반응을 종료시킨 다음, 반응액은 동량의 에테르로 3회 추출, 여과, 농축하여 생성물 2.5g을 얻었다. 여기에서 펙티나제, 나린기나제, 셀루라제 는 β-글루코시다제, α,β-아라비노시다제, α,β-라모시다제를 미량 함유하는 복합효소제이다.

[비교예]

실시예 1의 1단계에서 제조된 곽향추출물을 그대로 사용한다.

[시험예 1] 자외선에 의한 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성 억제능 관찰

실시예 1, 4 및 비교예를 이용하여 자외선에 의한 타입 1 콜라게나제(MMP-1)의 생합성 억제능을 관찰하였다. 우선, 인체 섬유아세포를 24-웰 플레이트에 10⁴ 개의 농도로 넣은 후 10% 우태아 혈청이 들어있는 DMEM 배지에서 37℃로 배양하고, 비교예, 실시예 1(틸리아닌) 및 4(아카세틴)에서 제조한 각 시료를 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 48시간 후 상징액을 수확해서 ELISA(AP biotech RPN2610) 방법을 사용하여 생성된 타입 I 콜라게나제의 양을 정량하였고, 아무것도 처리하지 않은 대조군을 100으로 하여 측정한 비교치를 표 1에 나타내었다.

	MMP-1 생합성 (%)
시험농도	음성대조군	비교예	실시예 1	실시예 4
1ppm	100	82	64	45
10ppm	100	68	46	26

실험 결과, 실시예 4에서 제조한 아카세틴이 비교예에 비하여 자외선에 의한 타입 I 콜라게나제의 생합성을 월등히 감소시킴을 알 수 있었다. 실시예 1에서 제조한 틸리아닌도 비교예에 비하여 우수한 효과를 나타내었다. 이를 통하여 아카세틴이 피부기질의 분해를 효과적으로 막아주어 피부 주름개선에 기여할 수 있다는 것을 알 수 있다.

[시험예 2] 피부세포의 콜라겐 생합성 효능 측정

이번에는 실시예 1, 4 및 비교예를 이용하여 피부세포의 콜라겐 생합성 효능을 관찰하였다. 인체 섬유아세포를 24-웰 플레이트에 10⁴ 개의 농도로 넣은 후 10% 우태아 혈청이 들어있는 DMEM 배지에서 배양하고, 비교예, 실시예 1(틸리아닌) 및 4(아카세틴)에서 제조한 각 시료를 1ppm, 10ppm 포함한 배지로 교체하였다. 배양 48시간 후 상징액을 수확해서 ELISA (Takara MK101) 방법을 사용하여 생성된 프로콜라겐의 양을 정량하였고 그 결과, 대조군을 100으로 한 비교치를 표 2에 나타내었다.

	타입 1 프로콜라겐 생합성(%)
시험농도	음성대조군	비교예	실시예1	실시예 4
1ppm	100	103	105	129
10ppm	100	104	106	145

실험 결과, 실시예 4에서 제조한 아카세틴이 비교예에 비하여 타입 I 콜라겐 생합성을 월등하게 증가시킴을 알 수 있었다. 실시예 1도 비교예에 비하여 우수한 효과를 나타내었다. 이를 통하여 아카세틴이 피부노화 개선에 효과를 나타낼 것이라고 생각할 수 있다.

이하, 상기의 시험예의 결과를 근거로 하여, 실시예 1의 틸리아닌과 실시예 2 내지 4의 아카세틴을 함유하는 여러 가지 제형의 화장료의 조성을 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물이 하기의 예에만 한정되는 것은 아니다.

[제조예 1] 유연화장수(스킨로션)

배합성분	중량%
실시예 1	0.5
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
PEG12노닐페닐에테르	0.2
폴리솔베이트 80	0.4
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	to 100

[제조예 2] 영양화장수(밀크로션)

배합성분	중량%
실시예 4	0.5
스쿠알란	5.0
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.5
유동파라핀	0.5
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	5.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	to 100

[제조예 3] 마사지크림

배합성분	중량%
실시예 2	2.0
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
PEG 60 경화피마자유	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	0.8
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	to 100

[제조예 4] 팩

배합성분	중량%
실시예 3	0.1
폴리비닐알콜	13.0
소듐카르복시메틸셀룰로오스	0.2
글리세린	5.0
알란토인	0.1
에탄올	6.0
PEG 12 노닐페닐에테르	0.3
폴리솔베이트 60	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	to 100

[제조예 5] 젤

배합성분	중량%
실시예 4	0.2
에틸렌디아민초산나트륨	0.05
글리세린	5.0
카르복시비닐폴리머	0.3
에탄올	5.0
PEG 60 경화피마자유	0.5
트리에탄올아민	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	to 100

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명은 틸리아닌 또는 아카세틴을 화장료 조성물에 함유하여 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시킴으로써 피부기질 분해를 감소시키고 그와 더불어 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시킴으로써 피부노화 및 주름방지에 효과적으로 사용될 수 있다

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 틸리아닌(tilianin) 및 하기 화학식 2로 표시되는 아카세틴(acacetin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물.

[화학식 1]

[화학식 2]
제1항에 있어서, 상기 유효성분은 곽향(배초향)추출물로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 아카세틴은 곽향추출물 또는 틸리아닌을 산 가수분해, 알칼리 가수분해 또는 효소 가수분해함으로써 제조된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제3항에 있어서, 상기 효소 가수분해반응에 사용되는 효소는 당 결합을 분해하는 β-글루코시다제(glucosidase), α,β-아라비노시다제(arabinosidase), α,β-라모시다제(rhamosidase) 및 이들을 함유하는 복합효소제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 효소임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 유효성분은 조성물 총 중량에 대해 각각 0.0001∼5중량％로 함유된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 또는 보디에센스의 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 피부 노화 방지용 또는 주름 방지용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.