KR102575303B1 - 식물 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물 - Google Patents

식물 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 우수한 항산화 효과를 나타내며, 자외선 조사된 인간 섬유아세포(NHDF)에서 타입 Ⅰ 프로콜라겐 및 TGF-β1 단백질의 생성을 현저하게 증가시키는 한편, 콜라겐을 분해하는 MMP-1 단백질의 발현을 억제시키는 우수한 효과를 나타내고, 피부 보습에도 우수한 효과가 있으므로 화장품 및 식품 분야에서 유용하게 이용 가능하다. 또한, 본 발명의 조성물은 인체에 매우 안전할 뿐만 아니라, 안정성도 매우 탁월하다.

Description

식물 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물{Composition for Improving Collagen Synthesis Comprising Plant Complex Extracts as Active Ingredients}
본 발명은 식물 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세히는 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 조성물에 관한 것이다.
피부 주름은 피부 수분함량, 콜라겐 함량 및 외부 환경에 대한 면역력 등 여러 가지 요소들에 의해 영향을 받는 것으로 알려져 있으며, 이중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량 및 콜라겐 분해 효소인 콜라게나아제의 발현과 활성이다.
콜라겐은 피부 진피층에 존재하는데, 피부 전체 건조 중량의 약 70 내지 80%를 차지하는 엘라스틴과 함께 피부에 탄력을 부여하는 주요 성분으로 알려져 있다. 콜라겐은 자연 노화에 따른 세포활성 저하와 같은 내부 요인에 의해 감소되고, 여러 유해 환경에서의 스트레스 증가나 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외부 요인에 의하여 생합성이 감소되거나, 분해가 촉진되고 있다.
한편, 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)의 생성은 UVB 노출 환경에서 보고된 바 있고, UVB 노출과 연관된 신호전달 체계는 MAPKs(mitogen-activated protein kinases), ERK(extracellular signal-regulated kinase), p38 카이나아제, 및 JNK(c-Jun amino-terminal kinase) 등의 단백질과 관련되어 있는데, NF-ĸ및 AP-1 전사인자의 발현증가를 유도한다. 또한, AP-1 단백질은 MMP(matrix metalloproteinase) 유전자의 활성과 관련되어 있고, NF-ĸ단백질은 인터루킨과 같은 전염증 사이토카인(proinflammatory cytokines)의 발현에 영향을 미친다.
노화된 피부에서 콜라겐 및 엘라스틴의 붕괴는 주로 MMP 단백질과 같은 그 분해 효소의 증가한 발현으로 야기된다. 또한, 전염증 사이토카인은 콜라겐의 합성을 방해하고, 콜라겐의 붕괴를 촉진시킨다. 타입 I 콜라겐은 연결 조직의 세포외 기질에서 가장 풍부한 단백질이다. 세포외 기질에는 타입 III, V, 및 VII 콜라겐, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 피브로넥틴과 같은 다른 유형의 단백질을 포함한다.
타입 I 콜라겐 단백질의 발현 수준을 조절하는 것은 피부 광노화를 예방하는데 있어서 가장 중요한 인자이다. UVB의 조사는 TGF-β/Smad 신호전달 체계의 억제를 통해 피부 섬유아세포에서 콜라겐 전구체인 프로콜라겐(procollagen)의 발현을 감소시키게 된다. 또한, TGF-β1 신호전달 체계는 인간 피부 섬유아세포에서 세포외 기질의 합성을 조절하는 중요한 인자의 하나이다.
따라서, AP-1 및 MAPKs 인자에 의해 조절되는 활성산소종(ROS)의 생성, 및 MMPs, ILs, TGF-β, 및 타입 I 프로콜라겐의 발현은 피부 광노화 연구에 있어서 유용한 마커로 작용한다.
이와 같이 콜라겐 감소를 저해하여 피부 주름개선에 효과가 있는 천연물질을 탐색하고자 하는 여러 다양한 시도가 있었다. 콜라겐의 주름개선 효과를 이용하기 위하여 화장품 또는 연고 등과 같은 피부외용제 조성물에 콜라겐을 배합한 제품들이 출시되었으나, 이들 제품들은 콜라겐 자체를 피부 표면에 도포하는 것으로 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 본질적인 주름개선 효과를 나타낼 수 없었다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 콜라겐합성 촉진물질에 대한 관심이 높아졌으며, 종래 알려진 콜라겐 합성 촉진물질로는 비타민C, 레티노익산, 형질전환생장인자(transforming growth factor, TGF), 동물태반 유래의 단백질(JP 1996-231370A), 베툴린산(betulinic acid, JP 1996-208424A), 클로렐라 추출물(JP 2001-072567A) 등이 있다. 그러나 상기 물질은 피부 적용시 자극과 발적 등 안전성 문제로 사용량에 제한이 있거나 그 효과가 미미하여 실질적으로 주름개선 효과를 기대할 수 없다는 문제점이 있었다. 따라서 종래 콜라겐 합성 성분들에 비해 생체에 안전하고 콜라겐 합성 효과를 높일 수 있는 새로운 성분의 개발이 절실히 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 콜라겐 합성 촉진에 시너지 효과를 나타내는 천연물질들의 조합을 탐색하여 제품화 하고자 예의 연구 노력한 결과, UVB 조사에 의해 유도된 인간 섬유아세포(human dermal fibroblasts, NHDFs)의 광노화에 대응하여 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물이 활성산소종의 생성 억제, 콜라겐 단백질의 합성 촉진 및 분해 억제, 히알루론산의 생성 증진에 시너지 효과가 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
(0001) JP 공개 제1996-208424호(1996.08.13.), 베툴린산을 포함하는 화장품 조성물 (0002) JP 공개 제1996-231370호(1996.09.10), 피부 화장료 (0003) JP 공개 제2001-072567호(2001.03.21), 피부 화장료 (0004) KR 등록 제10-1561579호(2015.10.13.), 편백나무, 계피, 아마씨를 주재로 하는 마사지용 오일타입 화장료 조성물 및 제조방법 (0005) JP 공개 제2022-092330호(2022.06.22), 콜라겐 산생 촉진제
따라서, 본 발명의 주된 목적은 활성산소종의 생성 억제, 콜라겐 단백질의 합성 촉진 및 분해 억제, 히알루론산의 생성 증진에 시너지 효과를 나타내는 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 여러 가지 천연 추출물질들을 대상으로 콜라겐 합성의 효과를 탐색하였고, 단일추출물의 한계를 극복하기 위해 시너지 효과를 나타내는 천연 추출물들의 조합을 발굴하고자 연구노력하였다. 그 결과, 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일추출물의 콜라겐 합성 증진 효과는 미미하나, 이들 3종 성분을 조합한 복합추출물이 항산화, 콜라겐 합성 촉진 및 콜라겐 분해 억제에 시너지 효과를 나타내는 동시에 피부 보습에도 우수한 효과가 있음을 입증하였으며, 피부에 적용 시에도 안전성에 문제가 없음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서 상기 "아마씨"는 쌍떡잎식물 말피기목 아마과의 한해살이풀인 아마(Linum usitatissimum)의 종자를 의미한다. 또한, 상기 "렌틸콩"은 남부 유럽의 지중해 연안이 원산지인 일년생 콩과 식물(Lens Esculenta)의 종자를 의미한다. 또한, 상기 "케일"은 십자화과의 2년생 또는 다년생 식물(Brassica oleracea var. acephala)을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 추출 처리에 따라 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 바람직하게 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다. 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 추출에 있어서, 상기 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 추출방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일을 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물; 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 바람직하게, 물, 저급알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트를 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명에서 열수 추출 또는 냉침 추출한 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조하여 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 아마씨, 렌틸콩, 및 케일을 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다. 본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexane), 에틸아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 구체적으로는 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 복합추출물은 이에 제한되는 것은 아니나 아마씨, 렌틸콩, 및 케일 원료를 1:1:1-3의 중량비로 혼합하여 추출될 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는, 아마씨, 렌틸콩, 및 케일을 1:1:1-3의 중량비로 혼합하여 추출하였을 때 항산화 효과가 가장 높은 것을 확인하였으며, 상기 중량비의 복합추출물이 나타내는 항산화 효과가 양성대조군으로 사용된 아스코르브산과 비교하여 동등한 수준임을 확인한 바 있다(표 1).
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 조성물은 활성산소종(ROS, Reactive Oxygen Species) 생성을 억제하는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물이 농도 의존적으로 자유 라디칼을 소거하는 항산화 활성이 있으며, 각각의 단일추출물 대비 월등하게 개선된 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었다(도 2 참조).
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 조성물은 타입 I 프로콜라겐 및 TGF-β1 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물이 자외선 조사된 인간 섬유아세포(NHDF)에서 타입 Ⅰ 프로콜라겐 및 TGF-β1의 생성을 증가시키는 한편, 콜라겐을 분해하는 MMP-1(matrixmetalloproteinase-1) 단백질의 발현을 억제하는 효과가 있어, 콜라겐 생성을 촉진하고, 콜라겐 분해를 억제하며, 이를 통해 피부 탄력 증가, 피부 재생, 피부 주름 개선, 상처 치유, 손상된 피부조직의 수복 및 재생; 및 피부 노화 방지 등의 효과 등을 나타낼 수 있고, 보다 구체적으로는 피부 주름의 예방 또는 개선의 효과를 나타낼 수 있음을 확인한바 있다(도 3 내지 도 5 참조).
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 조성물은 히알루론산 합성을 촉진하여 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물이 히알루론산(Hyaluronan)의 생성량을 농도 의존적으로 증가시키는 양상을 확인할 수 있었고, 각각의 단일추출물과 비교하여 피부 보습에 우수한 시너지 효과가 있음을 확인한 바 있다(도 6 참조).
본 발명의 화장료 조성물은 식용 가능 식물성 소재에서 유래하여 인체에 해가 없으며, 그 첨가로 인해 화장품의 물질의 품질을 손상하지 않으므로 화장료 조성물에 포함되어 사용되는데 적합하다. 특히, 항산화, 콜라겐 합성 촉진 및 분해 억제, 피부 보습과 관련된 기능이 있으므로, 기능성 화장료 조성물에 포함되어 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 마스크팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물은 구체적으로는 건조 중량으로, 화장료 조성물 총 중량의 0.0001 중량% 내지 50 중량%로 포함될 수 있으며, 보다 구체적으로는 0.0005 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내에서 항산화, 콜라겐 생성 촉진 및 분해 억제, 그리고 피부 보습과 관련된 기능에 대한 우수한 효능을 나타내는 이점이 있으며, 조성물의 제형이 안정화되는 이점이 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 아마씨, 렌틸콩, 및 케일로 구성된 3종 복합추출물은 항산화, 콜라겐 생성 촉진 및 분해 억제, 그리고 피부 보습에 우수한 효과를 나타내어 피부 상태 개선을 위한 식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 아마씨, 렌틸콩, 및 케일로 구성된 3종 복합추출물과 항산화, 콜라겐 생성 촉진 및 분해 억제, 그리고 피부 보습에 대한 효과는 상기에서 설명한 바와 같다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물은 상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물과 이들의 가공물의 형태로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품 보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품 보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품 보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미하며, 본 발명에서는 항산화, 콜라겐 생성 촉진 및 분해 억제, 그리고 피부 보습과 관련된 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법으로 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식용 식물추출물을 원료로 하여 식품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나며, 항산화, 콜라겐 생성 촉진 및 분해 억제, 그리고 피부 보습 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용하여 사용할 수 있다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 2종 복합 균주, 그 배양액, 또는 이들의 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함된다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(1) 본 발명은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 조성물을 제공한다.
(2) 본 발명의 조성물은 세포 독성이 없고, 우수한 항산화 효과를 나타내며, 자외선 조사된 인간 섬유아세포(NHDF)에서 타입 Ⅰ 프로콜라겐 및 TGF-β1 단백질의 생성을 현저하게 증가시키는 한편, 콜라겐을 분해하는 MMP-1 단백질의 발현을 억제시키는 우수한 효과를 나타내고, 피부 보습에도 우수한 효과가 있으므로 화장품 및 식품 분야에서 유용하게 이용 가능하다.
(3) 또한, 본 발명의 조성물은 인체에 매우 안전할 뿐만 아니라, 안정성도 매우 탁월하다.
도 1은 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물 처리에 따른 인간피부섬유아세포(NHDF)의 세포 생존율을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 인간각질형성세포(HaCaT)에 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물을 처리한 후, 활성산소종(ROS)의 생성량 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 인간피부섬유아세포(NHDF)에 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물을 처리한 후, 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 인간피부섬유아세포(NHDF)에 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물을 처리한 후, TGF-β1 단백질의 발현 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 인간피부섬유아세포(NHDF)에 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물을 처리한 후, MMP-1 단백질의 발현 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 인간각질형성세포(HaCaT)에 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 단일 또는 이들의 복합추출물을 처리한 후, 히알루론산(Hyaluronan) 생성량 변화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1. 복합 식물추출물의 제조
1-1. 아마씨 추출물의 제조
건조 중량 100g의 분쇄한 아마씨 분말을 10배 중량의 정제수로 12시간 가온 환류추출하고 냉침한 후, 1.2㎛ 투과 사이즈를 갖는 여과지(Glassfiber, sartorius, 미국)로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 50℃ 이하에서 감압농축한 후 감압건조기(Eyela Rotary evaporator, Tokyo Rikakika Co.,LTD, 일본)를 이용해 완전히 건조시켜 아마씨 추출물(제조예 1)을 수득하였다.
1-2. 렌틸콩 추출물의 제조
아마씨 분말을 렌틸콩 분말로 대체한 것을 제외하고 실시예 1-1과 동일한 방법을 사용하여, 렌틸콩 추출물(제조예 2)을 수득하였다.
1-3. 케일 추출물의 제조
아마씨 분말을 케일 분말로 대체한 것을 제외하고 실시예 1-1과 동일한 방법을 사용하여, 케일 추출물(제조예 2)을 수득하였다.
1-4. 3종 복합추출물의 제조
아마씨 분말을 대체하여 아마씨, 렌틸콩 및 케일 분말이 1:1:1의 중량비율로 혼합된 혼합 분말을 사용한 것을 제외하고 실시예 1-1과 동일한 방법을 사용하여, 3종 복합추출물(제조예 4)을 수득하였다.
실시예 2. 세포 독성
세포독성은 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 비색정량분석법(colorimetric assay)을 사용하여 측정하였다. MTT(Methyl thiazol tetrazolium) 분석은 세포 생존 능력을 측정하기 위해 사용되는 것으로, MTT가 보라색을 생성하는 포마르잔 염색으로 바꾸는 것이다. 인큐베이션 72시간 후, 배지의 부피는 1㎖로 감소하였고, 1㎎/㎖ MTT의 100㎕는 각 벽에 첨가되었다. 이후, 인간 섬유아세포(NHDF)를 37℃에서 2시간 동안 5%의 CO2 및 95%의 O2 존재 하에 배양하였다. 기질-함유 배지는 제거되었고, 1㎖의 DMSO는 포마르잔 결정을 용해시키기 위해 각 벽에 첨가되었다. 또한, 상온에서 30분 동안 오비탈 쉐이커로 플레이트를 흔들었다. 100㎕의 부분 표본의 흡수율은 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices E09090; 샌프란시스코, CA, 미국)를 사용하여 570㎚에서 흡수율을 측정함으로써 정량화하였다. 배양된 세포에 실시예 1-1 내지 1-4의 단일 또는 복합추출물을 처리한 후, 72시간 경화 후의 세포독성을 확인하고자, 인간 섬유아세포들에서 MTT 분석을 실시하였다.
실험 결과를 정리한 [도 1]을 참조하면, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물 또는 이들의 복합추출물이 인간 섬유아세포의 세포 생존을 억제하지 않고, 오히려 세포 생장을 촉진하는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 3. 항산화 활성
3-1. 활성산소종 생성 억제
인간각질형성세포(HaCaT, Human immortalized keratinocyte)에 UVB(UVB Peak range: 312nm, UV dose: 150mJ/cm2)를 조사한 다음, 무혈청 DMEM 배지로 희석한 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물 또는 이들의 복합추출물을 농도별(10, 30, 100㎍/㎖)로 처리하여 30분 동안 배양하였다. 이후, 여기(excitation) 480nm, 방출(emission) 530nm 조건에서 형광도를 측정하고, DCF 형광 강도(DCF fluorescence intensity)를 비교하여 활성산소종(ROS, reactive oxygen species)의 생성량 변화를 측정하였다. 통계처리는 GraphPad Prism 프로그램을 사용하여 실시하였으며, ANOVA(one-way analysis of variance)를 이용하여 평균값의 유의성을 5% 미만의 한계로 조사하였다.
실험 결과를 정리한 [도 2]를 참조하면, 아마씨, 렌틸콩 및 케일 추출물의 단독 처리에 비해 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 복합추출물(1:1:1 중량비)의 활성산소종 생성 억제를 통한 항산화 효과가 더욱 우수한 것으로 나타났는데, 구체적으로 3종 복합추출물은 아마씨 단일추출물 대비 활성산소종의 생성이 각각 5%(10㎍/㎖), 17%(30㎍/㎖) 및 49%(100㎍/㎖) 감소하였고, 렌틸콩 단일추출물 대비 활성산소종의 생성이 각각 4%(10㎍/㎖), 18%(30㎍/㎖) 및 47%(100㎍/㎖) 감소하였으며, 케일 단일추출물 대비 활성산소종의 생성이 각각 5%(10㎍/㎖), 13%(30㎍/㎖) 및 43%(100㎍/㎖) 감소였다. 또한, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 복합추출물을 100㎍/㎖ 농도로 처리한 실험군에서는 UV 무처리된 음성대조군과 유사한 정도의 활성산소종(ROS)의 생성이 관찰되었고, 이를 통해 3종 성분 조합에 따른 시너지 활성을 확인할 수 있었다.
3-2. 배합 비율에 따른 항산화 활성 변화
DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, Sigma, USA)의 환원력을 이용하는 상 등의 문헌(Sang S et al., J.Agric. Food Chem. 50(8), p2459-2463, 2002)에 기재된 방법에 따라, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 배합 비율을 달리하여 이들의 항산화 효과를 측정하였다.
실험은 메탄올에 녹인 0.2mM DPPH 용액 180ul와 증류수 20ul에 녹인 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 복합추출물(10, 30 및 100㎍/㎖)과 아스코르브산(양성대조군)을 96-웰 마이크로플레이트에 넣고 37℃에서 30분 동안 배양한 후, 환원된 DPPH의 양을 분광 광도계(Precision microplate reader; Molecular Devices, VersaMax)를 이용하여 520nm에서 흡광도를 측정한 후, 시료를 가하지 않는 무첨가 대조군과 활성을 비교하였다.
상기 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 복합추출물은 1:1:1(제조예 4), 1:1:3(제조예 5), 1:1:5(제조예 6), 1:3:1(제조예 7), 3:1:1(제조예 8), 및 3:1:3(제조예 9)의 중량비율로 혼합하여 실험하였고, 상기 실험은 3회 반복하여 수행되었다.
[표 1]
실험 결과를 정리한 [표 1]을 참조하면, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 복합추출물은 1:1:1-3의 중량비로 혼합될 때 항산화 효과가 가장 높은 것으로 측정되었으며, 이러한 항산화 효과는 양성대조군으로 사용된 아스코르브산과 비교하여도 동등한 수준으로 측정되었다.
이하, 항산화 효과가 가장 높은 것으로 확인된 제조예 5의 복합추출물(아마씨, 렌틸콩 및 케일=1:1:3)을 시료로 이용하여 콜라겐 합성 촉진능과 피부 보습 활성을 평가하였다.
실시예 4. 콜라겐 합성 촉진 활성
4-1. 콜라겐 합성 촉진
아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)이 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현에 미치는 영향을 분석하였다.
실험에 사용되는 세포는 40mm 세포 배양 접시에 2mL의 DMEM 배양액을 넣고, 인간 피부 섬유아세포(human dermal fibroblasts, NHDFs)를 약 1.2x105 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하여 사용하였다. 그 후, UVB를 150mJ/cm2 조건으로 조사한 후, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)을 농도(10, 30 및 100㎍/㎖)별로 포함하는 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 타입 1 프로콜라겐(Procollagen Type I C Peptide EIA Kit, Takara, Shiga, Japan) 단백질의 발현량 변화를 확인하였다. 모든 실험은 3회 반복하여 측정되었다.
타입 1 프로콜라겐 단백질 발현 변화를 정량한 [도 3]을 참조하면, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물 처리군에 비해 3종 성분의 복합추출물을 처리한 시험군의 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현이 농도 의존적으로 더욱 증가하는 양상을 확인할 수 있었다.
구체적으로, UVB 조사(150mJ/cm2)로 인해 2/3 수준으로 감소한 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현량(Con.)을 기준으로, 아마씨 단일추출물 처리군은 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현이 각각 103%(10㎍/㎖), 111%(30㎍/㎖) 및 117%(100㎍/㎖) 증가하였고, 렌틸콩 단일추출물 처리군은 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현이 각각 105%(10㎍/㎖), 112%(30㎍/㎖) 및 119%(100㎍/㎖) 증가하였으며, 케일 단일추출물 처리군은 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현이 각각 101%(30㎍/㎖) 및 104%(100㎍/㎖) 증가하여, 단일추출물의 처리로 인한 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현량 증가 폭은 전반적으로 미미한 것으로 분석되었다.
이에 반해, 본 발명의 3종 성분의 복합추출물 처리군은 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현은 UVB 조사(150mJ/cm2) 무처리군을 기준으로 각각 121%(10㎍/㎖), 134%(30㎍/㎖) 및 152%(100㎍/㎖) 증가하여 3종 성분의 혼합으로 타입 1 프로콜라겐 단백질 발현이 현저하게 증가하였고, 피부 주름 개선에 대한 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
4-2. TGF-β1 합성 촉진
아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)이 TGF-β1 단백질 발현에 미치는 영향을 분석하였다.
40mm 세포 배양 접시에 2㎖의 DMEM 배양액을 넣고, 인간섬유아세포를 약 1.2x105의 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, UVB를 150mJ/cm2 조건으로 조사한 후, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)을 농도(10, 30 및 100㎍/㎖)별로 포함하는 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 TGF-β1(Human Total TGF-β1 kit; R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 단백질 발현량을 확인하였다.
실험 결과를 정리한 [도 4]를 참조하면, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물 처리군에 비해 3종 성분의 복합추출물을 처리한 시험군의 TGF-β1 발현이 농도 의존적으로 크게 증가하는 양상을 확인할 수 있었다.
구체적으로, UVB 조사(150mJ/cm2)로 인해 2/3 수준으로 감소한 TGF-β1 발현량(Con.)을 기준으로, 아마씨 단일추출물 처리군은 TGF-β1 발현이 각각 106%(30㎍/㎖) 및 112%(100㎍/㎖) 증가하였고, 렌틸콩 단일추출물 처리군은 각각 102%(10㎍/㎖), 109%(30㎍/㎖) 및 118%(100㎍/㎖) 증가하였으며, 케일 단일추출물 처리군은 각각 105%(30㎍/㎖) 및 112%(100㎍/㎖) 증가하여, 단일추출물의 처리로 인한 TGF-β1 발현량 증가 폭은 전반적으로 미미한 것으로 분석되었다.
이에 반해, 본 발명의 3종 성분의 복합추출물 처리군의 TGF-β1 발현은 UVB 조사(150mJ/cm2) 무처리군을 기준으로 각각 119%(10㎍/㎖), 129%(30㎍/㎖) 및 141%(100㎍/㎖) 증가하여 3종 성분의 혼합으로 TGF-β1 발현이 현저하게 증가하였고, 피부 주름 개선 및 광노화 억제에 대한 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
4-3. 콜라겐 분해 억제
아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)이 MMP-1 유전자 발현에 미치는 영향을 분석하였다.
실험에 사용되는 세포는 40mm 세포 배양 접시에 2mL의 DMEM 배양액을 넣고, 인간피부섬유아세포(human dermal fibroblasts, NHDFs)를 약 1.2x105 농도로 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하여 사용하였다. 그 후, UVB를 150mJ/cm2 조건으로 조사한 후, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)을 농도(10, 30 및 100㎍/㎖)별로 포함하는 배지로 교체하여 3일간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)하여 ELISA 방법을 이용하여 MMP-1(Human Total MMP-1 kit; R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA) 단백질의 발현량 변화를 확인하였다. 모든 실험은 3회 반복하여 측정되었다.
MMP-1 단백질 발현량 변화를 정량한 [도 5]를 참조하면, 단일추출물을 처리한 시험군들 중 케일 추출물이 아마씨 또는 렌틸콩 추출물에 비해 MMP-1 단백질 발현 억제 효과가 다소 높은 것으로 나타났으나, 단일추출물의 전반적인 효과는 미미한 것으로 나타났다. 한편, 본 발명의 3종 성분 복합추출물을 처리군에서는 MMP-1 단백질 생성량이 단일추출물 처리군에 비해 농도 의존적으로 더욱 큰 폭으로 감소하는 양상을 확인할 수 있었다.
구체적으로, UVB 조사(150mJ/cm2)로 증가한 MMP-1 단백질 함량(Con.)을 기준으로 하여 아마씨 단일추출물 처리군은 MMP-1 발현량은 각각 103%(10㎍/㎖), 101%(30㎍/㎖) 및 105%(100㎍/㎖)로 오히려 증가하였고, 렌틸콩 단일추출물 처리군은 각각 1%(10㎍/㎖), 3%(30㎍/㎖) 및 2%(100㎍/㎖) 감소하였으며, 케일 단일추출물 처리군은 각각 9%(30㎍/㎖) 및 16%(100㎍/㎖) 감소하여, 단일추출물의 처리로 인한 MMP-1 발현량 감소 폭은 전반적으로 미미한 것으로 분석되었다.
이에 반해, 본 발명의 3종 성분의 복합추출물 처리군의 MMP-1 발현량은 UVB 조사(150mJ/cm2) 무처리군을 기준으로 각각 15%(10㎍/㎖), 28%(30㎍/㎖) 및 52%(100㎍/㎖) 감소하여 3종 성분의 혼합으로 MMP-1 단백질 발현이 현저하게 감소하였고, 피부 주름 개선 및 광노화 억제에 대한 시너지 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 3종 성분으로 구성된 복합추출물은 TGF-β/Smad 신호전달체계에 작용하여 타입 1 프로콜라겐의 생성 및 TGF-β1의 생성을 촉진시키고, 콜라겐 분해 효소인 MMP-1의 발현을 억제하는 작용을 통해, 콜라겐 분해를 직접적으로 억제하여 주름을 효과적으로 예방하고, 콜라겐 생성을 촉진하여 생성된 주름을 개선하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
실시예 5. 피부 보습 활성
본 발명의 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 3종 성분으로 구성된 복합추출물의 피부 보습 효과를 검증하기 위해 복합추출물의 처리에 따른 히알루론산(Hyaluronan) 생성량 변화를 측정하였다.
히알루론산(HA, Hyaluronan, Hyaluronic acid)은 주로 표피 각질형성세포와 진피 섬유아세포에 의해 합성되며, 수분과 결합하여 세포가 정상적으로 활동할 수 있는 환경을 조성하는 중요한 역할을 하는 물질이다. 피부에서 히알루론산의 감소는 피부 탄력 저하 및 수분 함유량 감소의 직접적인 원인 중 하나이다. 따라서 본 실험에서는 인간 섬유아세포 내에서 히알루론산의 생성량을 확인하였다.
인간각질형성세포(HaCaT, Human immortalized keratinocyte)를 24 well 세포배양 접시에 1㎖의 배양액을 넣고 약 1×105의 농도로 세포를 접종한 후, 37℃, 5% CO2 환경에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 아마씨, 렌틸콩 및 케일의 단일추출물(제조예 1 내지 3)과 이들의 복합추출물(제조예 5)을 각각 10, 30 및 100㎍/㎖ 농도로 포함한 배지로 교체하여 24시간 배양하였다. 이후 배양액을 회수(harvest)하여 4℃, 7,500rpm 환경에서 5분간 원심분리(centrifuge)한 뒤, ELISA 방법을 이용하여 Hyaluronan(Hyaluronan kit, R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)의 발현량 변화를 확인하였다.
히알루론산의 발현량 변화를 정량한 [도 6]을 참조하면, 무처리 음성대조군과 비교하여 아마씨 단일추출물 처리군은 히알루론산 생성이 각각 106%(30㎍/㎖) 및 111%(100㎍/㎖) 증가하였고, 렌틸콩 단일추출물 처리군은 각각 105%(30㎍/㎖) 및 109%(100㎍/㎖) 증가하였으며, 케일 단일추출물 처리군은 각각 104%(30㎍/㎖) 및 112%(100㎍/㎖) 증가하여, 단일추출물의 처리로 인한 히알루론산 생성량 증가 폭은 전반적으로 미미한 것으로 분석되었다.
이에 반해, 본 발명의 3종 성분의 복합추출물 처리군의 히알루론산 생성량은 무처리군을 기준으로 각각 118%(10㎍/㎖), 131%(30㎍/㎖) 및 143%(100㎍/㎖) 증가하여 3종 성분의 혼합으로 히알루론산 생성이 현저하게 증가하였고, 피부 보습에 시너지 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (6)

  1. 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하되,
    상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일은 1:1:1-3의 중량비로 배합된 것을 특징으로 하고,
    상기 복합추출물은 콜라겐 합성 촉진, 항산화, 및 피부 보습 활성을 동시에 나타내는 것을 특징으로 하는,
    콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 활성산소종(ROS, Reactive Oxygen Species) 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 타입 I 프로콜라겐 및 TGF-β1 단백질의 발현을 증가시키고, MMP-1 단백질의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는, 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 히알루론산 합성을 촉진하여 피부 보습 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는, 콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 화장료 조성물.
  6. 아마씨, 렌틸콩, 및 케일의 복합추출물을 유효성분으로 포함하되,
    상기 아마씨, 렌틸콩, 및 케일은 1:1:1-3의 중량비로 배합된 것을 특징으로 하고,
    상기 복합추출물은 콜라겐 합성 촉진, 항산화, 및 피부 보습 활성을 동시에 나타내는 것을 특징으로 하는,
    콜라겐 합성 촉진, 항산화 및 피부 보습용 식품 조성물.
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08208424A (ja) 1994-12-20 1996-08-13 Unilever Nv ベツリン酸を含む化粧品組成物
JPH08231370A (ja) 1995-02-23 1996-09-10 Taiyo Kagaku Co Ltd 皮膚化粧料
JP2001072567A (ja) 1999-09-07 2001-03-21 Sunstar Inc 皮膚化粧料
KR101561579B1 (ko) 2015-05-18 2015-10-20 박준학 편백나무, 계피, 아마씨를 주재로 하는 마사지용 오일타입 화장료 조성물 및 제조방법
KR20180082050A (ko) * 2017-01-09 2018-07-18 주식회사 아미코스메틱 렌즈콩, 캐럽콩, 연꽃씨 및 퀴노아씨 추출물을 포함하는 모공 수축 및 피지 분비 억제용 화장료 조성물
KR20190138094A (ko) * 2018-06-04 2019-12-12 주식회사 익스플즌 해산물 추출물을 포함하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물 및 이를 포함하는 기능성 화장품
JP2022092330A (ja) 2020-12-10 2022-06-22 ヤクルトヘルスフーズ株式会社 コラーゲン産生促進剤

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08208424A (ja) 1994-12-20 1996-08-13 Unilever Nv ベツリン酸を含む化粧品組成物
JPH08231370A (ja) 1995-02-23 1996-09-10 Taiyo Kagaku Co Ltd 皮膚化粧料
JP2001072567A (ja) 1999-09-07 2001-03-21 Sunstar Inc 皮膚化粧料
KR101561579B1 (ko) 2015-05-18 2015-10-20 박준학 편백나무, 계피, 아마씨를 주재로 하는 마사지용 오일타입 화장료 조성물 및 제조방법
KR20180082050A (ko) * 2017-01-09 2018-07-18 주식회사 아미코스메틱 렌즈콩, 캐럽콩, 연꽃씨 및 퀴노아씨 추출물을 포함하는 모공 수축 및 피지 분비 억제용 화장료 조성물
KR20190138094A (ko) * 2018-06-04 2019-12-12 주식회사 익스플즌 해산물 추출물을 포함하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물 및 이를 포함하는 기능성 화장품
JP2022092330A (ja) 2020-12-10 2022-06-22 ヤクルトヘルスフーズ株式会社 コラーゲン産生促進剤

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