KR20210066212A - 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방용 조성물 - Google Patents
흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩새싹 추출물의 발효물은 항산화 작용을 함으로써 피부 노화 방지 효과를 나타내므로, 피부 노화 방지를 위한 화장품, 식품의 소재로 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방용 조성물에 관한 것이다.
인체 내에서 일어나는 대사과정 생성되는 활성산소는 산화되는 과정에서 생체 조직에 손상과 생체 장기의 비정상적인 활동을 일으키는 분자이다. 산소와는 다르게 전자를 하나 잃어 불안정한 상태이며 그러므로, 활성산소는 산화력이 강한 산소로써, 생체 조직 및 세포를 악영양을 미친다. 그러므로 유해산소라고도 알려져 있다. 환경오염, 자외선과 같은 환경적인 요인과 생체내 혈액순환장애, 스트레스등으로 과도한 산소의 발생으로 체내의 활성 산소가 증가하게 되는데 체내에서 세포, DNA, 아미노산 등과 같은 생체 분자에 손상을 일으켜 각종 질병을 야기하게 된다. 비만, 동맥경화, 당뇨병 및 피부 노화를 일으키며 현대인의 질병 중 90%가 활성산소와 관련이 있다고 알려져 있다.
환경오염과 각종 스트레스는 체내 활성 산소종의 농도를 증가시키고, 이러한 활성 산소종은 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당 및 DNA 등을 공격하여 과산화 반응을 일으킴으로써 피부의 노화를 촉진하는 문제가 있었다. 이에 따라, 활성 산소종의 생성을 억제하는 항산화 효과 및 상기와 같은 항산화 작용을 함으로써 항노화(피부 노화 방지) 효과를 가지는 화장료 조성물에 대한 개발이 요구되고 있다.
흑미에는 α,β,γ,δ-tocopherol, tocotrienol, phytosterol, 다양한 페놀성 화합물들이 함유되어 있으며, 일반 백미보다식이섬유, 무기질, 불포화지방산, 식이섬유 등 영양소 함량이 뛰어나며 흑미의 겨층에는 다른 곡류에 비하여 플라보노이드와 안토시아닌이 풍부하다.
땅콩은 콩과에 속하는 일년생의 초본식물로 지방과 단백질을 많이 함유하고 있는 고열량 식품으로 식용으로 이용되거나 식용류, 버터, 마가린, 쨈 등 다양한 분야에 이용되고 있다. 땅콩은 천연 폴리페놀 화합물인 레스베라트롤 물질이 함유되어 있는 대표적인 식물로 알려져 있으며, 항암, 항산화 활성 물질로 항당뇨, 항노화, 심장병 예방, 다이어트 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있고, 또한 활성 산소로부터 세포를 보호하는 뛰어난 항산화 작용을 갖고 있어, 당뇨병, 비만, 암의 예방 등 많은 유익한 건강 효과가 있는 것으로 이미 보고되어 있다.
채소 중 새싹채소 및 어린잎은 씨앗을 발아시킨 어린 새싹을 말하는 것으로 잎이 1~3개정도로 싹이 발아한지 1주일 남짓되는 어린 채소를 말한다. 다 자란 채소보다 크기는 작으나 영양적인 측면이 우수하다고 보고되어져 있으며,(Park SG, Korean J Fac Hort Res, 1989, 2: 34 ; Khalil er al., LWT, 2007, 40: 937-945) 식물 종자로부터 싹이 발아할때 곰팡이, 박테리아, UV 등 외부의 적으로부터 자신을 보호하기 위한 생리활성 물질을 생산한다.
최근에는 한 가지 시료에서 항산화 성능을 확인하는데에 그치는 것이 아니라 이를 활용하여 발효 과정이나 다른 시료와의 혼합 등의 과정을 거쳐 생리활성을 높이는 복합물에 대한 연구가 많이 진행되고 있다. 대표적으로 사용되는 기술 중 하나인 발효는 유산균이 혐기적 환경에서 유산을 주된 산물로 하여 생산하는 과정이다. 유산균은 면역증강, 장내 유해 세균 제거, 항암효과, 변비예방, 간경화 개선 작용 등 다양한 효능을 나타낸다고 알려져 있다. 현재에도 발효를 한 시료에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으며 건강기능식품으로서 각광받고 있다.
이에 본 발명자들은 유산균으로 발효시킨 흑미 추출물과 땅콩새싹 추출물의 항산화 활성 및 피부 노화 예방 효과를 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 염증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
나아가 본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 염증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩새싹 추출물의 발효물은 항산화 작용을 함으로써 피부 노화 방지 효과를 나타내므로, 피부 노화 방지를 위한 화장품, 식품의 소재로 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명에 의한 조성물의 DPPH 라디칼 소거 활성 측정결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 의한 조성물의 ABTS 라디칼 소거 활성 측정결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 의한 조성물의 아질산염 소거 활성 측정결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명에 의한 조성물의 환원력 측정결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 의한 조성물의 ABTS 라디칼 소거 활성 측정결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 의한 조성물의 아질산염 소거 활성 측정결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명에 의한 조성물의 환원력 측정결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
피부 노화예방 또는 개선용 화장료 조성물
본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 추출 대상을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 의이인 유래 정유는 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출할 수 있으며, 바람직하게는 80% 에탄올로 추출할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 조성물에 있어서, 상기 발효물은 유산균(Lactobacillus plantarum)으로 흑미 추출물 또는 땅콩 새싹 추출물을 발효시킨 발효물이며, 상기 발효는 30 내지 40℃에서 48 내지 96시간 발효할 수 있으며, 바람직하게는 35 내지 40℃에서 70 내지 74시간 발효할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물은 흑미 분말에 30 내지 70배의 에탄올을 첨가하여 침지추출하는 단계(단계 1); 땅콩새싹분말에 10 내지 20배의 에탄올을 첨가하여 침지추출하는 단계(단계 2); 및 상기 단계 1의 흑미 에탄올 추출물 및 상기 단계 2의 땅콩새싹 에탄올 추출물을 1 : 0.3 내지 1의 부피비로 혼합하고, 상기 혼합액의 1 내지 3%의 부피 만큼 유산균(Lactobacillus plantarum)을 접종하여 발효하는 단계(단계 3);을 포함하여 제조할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상술한 본 발명의 유효성분의 화장품학적 유효량(cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조할 수 있다.
화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 상기 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 제형에서 선택된 하나 이상의 제형일 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면 유효성분의 함량은 특별히 제한되지 않으나, 본 발명에 따른 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20 중량%로 포함할 수 있다. 상기 함량을 만족하는 경우 부작용없이 우수한 효능을 나타낼 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에는 상기 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
피부 노화 예방 또는 개선용 건강기능식품 또는 건강식품 조성물
본 발명은 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강기능식품 또는 건강식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출할 수 있으며, 바람직하게는 80% 에탄올로 추출할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 조성물에 있어서, 상기 발효물은 유산균(Lactobacillus plantarum)으로 흑미 추출물 또는 땅콩 새싹 추출물을 발효시킨 발효물이며, 상기 발효는 30 내지 40℃에서 48 내지 96시간 발효할 수 있으며, 바람직하게는 35 내지 40℃에서 70 내지 74시간 발효할 수 있다.
본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 건강기능식품 및 건강식품 조성물로 사용하는 경우, 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 첨가할 수 있는 건강기능식품의 예로는 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태일 수 있으며, 건강식품의 예로는 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품 및 건강식품 조성물을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 및 건강식품 조성물 중의 상기 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품 및 건강식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 함유하는 건강기능식품 및 건강식품 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 유산균(
Lactobacillus plantarum
)으로 발효한 흑미 추출물 제조
흑미를 잘게 가루로 만든 후 상온에서 흑미 분말 1kg 당 50 ℓ의 70% 에탄올에 넣어 3회 침지추출 하였다. 추출액을 필터페이퍼로 여과한 후 여과액을 40℃에서 농축한 후 동결 건조 과정을 거쳐 흑미 추출물을 만들었다.
이후 만들어진 흑미 추출물을 100g당 1L의 증류수에 용해시킨 후 유산균(Lactobacillus plantarum)을 부피의 2%만큼 접종하였다. 접종한 후 37℃에서 3일간 배양하여 발효된 흑미 추출물을 제조하고, BRF로 약칭하였다. 이후 동결건조 과정을 거친 후 가루 형태로 마쇄하여 실험에 사용하였다.
<실시예 2> 유산균(
Lactobacillus plantarum
)으로 발효한 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물 제조
<2-1> 흑미 추출물의 제조
흑미를 잘게 가루로 만든 후 상온에서 흑미 분말 1kg 당 50ℓ의 70% 에탄올에 넣어 3회 침지추출 하였다. 추출액을 필터페이퍼로 여과한 후 여과액을 40℃에서 농축한 후 동결 건조 과정을 거쳐 흑미 추출물을 만들었다.
<2-2> 땅콩새싹 추출물의 제조
땅콩새싹 추출물은 발아한 지 10일된 땅콩새싹을 사용하였다. 땅콩새싹을 50℃ 열풍건조기에 48시간 건조하였다. 건조 땅콩 새싹은 잘게 파쇄한 후 10배의 70% 에탄올에 넣어 3회 침지추출 하였다. 추출액을 필터페이퍼로 여과한 후 여과액을 40℃에서 농축한 후 동결 건조 과정을 거쳐 땅콩새싹 추출물을 만들었다.
<1-3> 유산균(
Lactobacillus plantarum
)으로 발효
상기 실시예 2-1의 흑미 추출물과 상기 실시예 2-2의 땅콩새싹 추출물을 2:1의 부피비로 혼합하고, 추출 혼합물을 100g당 1L의 증류수에 용해시킨 후 유산균(Lactobacillus plantarum)을 부피의 2% 만큼 접종하였다. 접종한 후 37℃에서 3일간 배양하여 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물을 제조하고, BRPSF로 약칭하였다. 이후 동결건조 과정을 거친 후 가루 형태로 마쇄하여 실험에 사용하였다.
<비교예 1> 유산균(
Lactobacillus plantarum
)으로 발효한 땅콩새싹 추출물 제조
땅콩새싹 추출물은 발아한 지 10일된 땅콩새싹을 사용하였다. 땅콩새싹을 50℃ 열풍건조기에 48시간 건조하였다. 건조 땅콩 새싹은 잘게 파쇄한 후 10배의 70% 에탄올에 넣어 3회 침지추출 하였다. 추출액을 필터페이퍼로 여과한 후 여과액을 40℃에서 농축한 후 동결 건조 과정을 거쳐 땅콩새싹 추출물을 만들었다.
이후, 땅콩새싹 추출물을 100g당 1L의 증류수에 용해시킨 후 유산균(Lactobacillus plantarum)을 부피의 2%만큼 접종하였다. 접종한 후 37℃에서 3일간 배양하여 발효된 땅콩새싹 추출물을 제조하고, PSF로 약칭하였다. 이후 동결건조 과정을 거친 후 가루 형태로 마쇄하여 실험에 사용하였다.
<실험예 1> DPPH 라디칼 소거활성 측정
추출물의 DPPH 라디칼 소거활성 (Electron donating abilities, EDA)은 다음과 같이 측정하였다. 비교예 1(PSF), 실시예 1(BRF) 및 실시예 2(BRPSF)를 100㎍/㎖ 농도로 제작하고, 각 시료용액 80㎕에 0.2 mM 농도 DPPH 용액을 80㎕씩 분주하였다. 그 후 foil로 완전히 감싼 후 실온에서 30분간 반응시켜주었다. 반응 후 517㎚에서 흡광도를 측정하였다(ELISA reader(16039400, TECAN). 추출물의 항산화력은 라디칼 소거능의 중간 활성을 나타내는 농도를 표시하는 IC50(half maximal inhibitory concentration)으로 표시하였다. 즉, DPPH 라디칼의 흡광도를 50% 줄여주는 값의 농도를 말한다.
DPPH 라디칼 소거 활성 측정한 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 비교예 1(PSF), 실시예 1(BRF) 및 실시예 2(BRPSF)의 DPPH 라디칼 IC50을 측정한 결과 비교예 1의 발효된 땅콩새싹 추출물은 11.7mg/㎖이고, 실시예 1의 발효된 흑미 추출물은 9.6mg/㎖이었으며, 실시예 2의 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물의 경우 4.5mg/㎖로 각각 단독의 경우보다 혼합사용의 경우 항산화 활성이 더 우수한 것을 확인하였다.
<실험예 2> ABTS
+
라디칼 소거활성 측정
ABTS+ 라디칼 소거 활성 실험은 ABTS+ radical cation은 72,2‘-azinbis-3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid와 증류수를 혼합한 용액에 2.45mM potassium persulfate를 1:1로 혼합하여 foil로 완전히 감싸고 상온에서 12~16시간 반응시켰다. 반응한 solution을 0.01M PBS(pH 7.4)을 혼합하여 734nm에서 흡광도 값이 0.70±0.02 되도록 하였다. 추출물의 항산화력은 라디칼 소거능의 중간 활성을 나타내는 농도를 표시하는 IC50(half maximal inhibitory concentration)으로 표시하였다. 즉, ABTS 라디칼의 흡광도를 50% 줄여주는 값의 농도를 말한다.
ABTS+ 라디칼 소거활성 측정결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 비교예 1(PSF), 실시예 1(BRF) 및 실시예 2(BRPSF)의 DPPH 라디칼 IC50을 측정한 결과 비교예 1의 발효된 땅콩새싹 추출물은 14.6mg/㎖이고, 실시예 1의 발효된 흑미 추출물은 13.2mg/㎖이었으며, 실시예 2의 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물의 경우 7.8mg/㎖로 각각 단독의 경우보다 혼합사용의 경우 항산화 활성이 더 우수한 것을 확인하였다.
<실험예 3> 아질산염 소거활성 측정
아질산염 소거능은 Gray와 Dugan의 실험방법을 사용하였다. 비교예 1(PSF), 실시예 1(BRF) 및 실시예 2(BRPSF)를 각각 0, 100, 200, 300, 400, 500 ㎍/㎖ 농도에서 측정하였다. 각 농도별로 120㎕를 E-tube에 분주하고 NaNO2 120㎕, 0.2M Citrate buffer(pH 3.0) 960㎕와 혼합 후 37℃ waterbath에서 1시간 반응시켰다. E-tube에 반응시킨 용액 200㎕, acetic acid 400㎕, Griess reagent A, B 각각 40㎕를 분주 후 15분간 상온반응 시켰다. 96 well plate에 분주 후 ELISA reader(16039400, TECAN)를 이용하여 520nm에서 흡광도를 측정을 하였다.
Scavenging activity (%) = {1-(Absorbance of treated sample - Absorbance of sample or standard)/ Absorbance of control} ×100
아질산염 소거활성 측정 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 농도 의존적으로 아질산염 소거활성이 증가하는 것을 확인하였으며, 비교예 1의 발효된 땅콩새싹 추출물 또는 실시예 1의 발효된 흑미 추출물 보다 실시예 2의 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물 혼합사용의 경우 항산화 활성이 더 우수한 것을 확인하였다.
<실험예 4> 환원력 측정
환원력 측정은 Chung등에(Chung et al. 2005) 의해 기술된 방법에 따라 약간 변형하여 실행하였다. Gray와 Dugan의 실험방법을 사용하였다. Standard인 ascorbic acid와 시료를 다양한 농도에서 측정하였다. 각 농도별로 120μL를 E-tube에 분주하고 NaNO2 120μL, 0.2M Citrate buffer(pH 3.0) 960μL와 혼합 후 37℃ waterbath에서 1시간 반응시켰다. E-tube에 반응시킨 용액 200μL, acetic acid 400μL, Griess reagent A, B 각각 40μL를 분주 후 15분간 상온반응 시켰다. 96 well plate에 분주 후 ELISA reader(16039400, TECAN)를 이용하여 520nm에서 흡광도를 측정을 하였다.
환원력 측정 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 농도 의존적으로 환원력이 증가하는 것을 확인하였으며, 비교예 1의 발효된 땅콩새싹 추출물 또는 실시예 1의 발효된 흑미 추출물 보다 실시예 2의 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물 혼합사용의 경우 환원력이 더 우수한 것을 확인하였다.
<실험예 5> MMP-1 억제활성 측정
피부가 다양한 내외적인 요인으로 인해 노화가 진행되면 각질형성세포가 불규칙적으로 변하고, 섬유아세포와 염증세포는 증가하며 혈관벽은 얇아지며 진피 재 주로 존재하는 교원섬유(collagen)의 감소가 가속화되는데(Physiology of skin aging. Clin Plast Surg. 2012. 39:1-8.), 콜라겐(collagen)의 감소는 진피 내 섬유아세포에서 주로 분비되며 세포 외 기질(extracellular matrix)을 분해시키는 효소군인 matrix metalloproteinases(MMPs)에 의해 주로 일어난다고 알려져 있다(The role of TRPV1 channel in aged human skin. J Dermatol Sci. 2012. 65:81-85.).
노화와 관련되는 MMP-1의 UV 조사 및 시료 첨가 후 농도를 측정함으로써, 시료에 의한 MMP-1 발현 억제 효과를 확인하였다. 이를 위해 다음과 같이 효소면역분석법(ELISA)을 실시하였다.
UV 챔버를 이용하여 인간 진피 섬유아세포에 UVA를 5 J/cm2의 에너지로 조사하였다. 자외선 조사량 및 배양 시간을 결정하기 위하여, 예비 실험을 통해 섬유아세포에서 MMP 발현량이 최대가 되는 조건을 확인하였다. 음성대조군은 은박지로 싸서 UVA 환경에서 같은 시간 동안 유지하였다. UVA 방출량은 UV 라디오미터를 이용하여 측정하였다. UVA가 조사되는 동안의 세포는 이전에 분주된 상태 그대로이며, UVA를 조사한 후 시료가 들어간 배지로 교환하여 24시간 배양 후 배지를 회수하여 96-웰에 코팅하였다.
일차항체로서 MMP-1 (Ab-5) 단일클론항체와 MMP-2 (Ab-3) 단일클론항체를 처리하고, 37℃에서 60분 동안 반응시켰다. 이차항체인 항마우스 IgG(whole mouse, alkaline phosphatase conjugated)를 다시 60분 동안 반응시킨 후, 알카린 포스파타제 기질 용액(1 mg/ml ρ-nitrophenyl phosphate in diethanolamine buffer)을 상온에서 30분간 반응시켰다. 그 후, microplate reader(UVT-06685, Termo max, USA)를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 음성 대조군으로서 시료를 첨가하지 않은 것을 사용하였으며, 양성 대조군으로서 MMP-1 발현 억제효과가 뛰어나다고 알려진 레티놀을 사용하였다. 시료 처리농도 001%를 기준으로 MMP-1 발현 억제율(%)을 하기 표 1에 나타내었다.
MMP-1 발현 억제율(%) | |
비교예 1 | 40.1 |
실시예 1 | 49.9 |
실시예 2 | 85.4 |
양성대조군-레티놀 | 42.7 |
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 2의 발효된 흑미 추출물 및 땅콩새싹 추출물 혼합사용의 경우 양성 대조군으로 사용된 레티놀과 비교하였을 때 2배 이상의 우수한 효과를 나타내었다. 상기 결과로 인해 본 발명의 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물의 경우 MMP 효소 발현을 억제하여, 콜라겐 분해를 막을 수 있으며, 이에 따라 피부 탄력 저하 및 주름 형성을 억제할 수 있는 것을 확인하였다.
<통계처리>
모든 데이터는 평균± 표준 편차(SDM)로 제시하였다. 모든 실험은 3회 반복 실시하였다. 각 군 간의 측정치 비교는 one-way analysis of variance (ANOVA) test를 실시한 후 p < 0.05의 유의수준에서 차이를 검증하였다. GraphPad Prism 5, Sigma plot 10.0 및 Microsoft Excel 2007은 그래프의 평가와 통계에 사용하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특히 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (11)
- 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 유기용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 발효물은 유산균(Lactobacillus plantarum)으로 흑미 추출물 또는 땅콩 새싹 추출물을 발효시킨 발효물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 발효는 30 내지 40℃에서 48 내지 96시간 발효하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 제형에서 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 노화 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 흑미 추출물의 발효물 및 땅콩 새싹 추출물의 발효물을 포함하는 피부 염증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
- 제6항 또는 제7항에 있어서,
상기 추출물은 유기용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것을 특징으로 하는 조성물. - 제6항 또는 제7항에 있어서,
상기 발효물은 유산균(Lactobacillus plantarum)으로 흑미 추출물 또는 땅콩 새싹 추출물을 발효시킨 발효물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 형태의 식품인 것을 특징으로 하는 건강기능식품 조성물. - 제7항에 있어서,
상기 건강식품은 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제에서 선택되는 것을 특징으로 하는 건강식품 조성물.
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KR20050075516A (ko) * | 2004-01-15 | 2005-07-21 | 주식회사 코리아나화장품 | 흑미 추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
KR101825803B1 (ko) | 2016-02-17 | 2018-03-22 | 주식회사 씨앤비코스메틱 | 마가목추출물의 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부노화방지 및 피부주름개선용 화장료 조성물 |
KR20180051899A (ko) * | 2016-11-09 | 2018-05-17 | 주식회사 코리아나화장품 | 땅콩새싹 발효 초고압 추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
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2019
- 2019-11-28 KR KR1020190155176A patent/KR102331119B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
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WO2023101440A1 (ko) * | 2021-11-30 | 2023-06-08 | 경희대학교 산학협력단 | 금나노-땅콩새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물 |
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