KR20070040420A - 피앤에이 단량체와 그의 전구체 - Google Patents

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KR20070040420A
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김성기
이현일
임종찬
이성희
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주식회사 파나진
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Abstract

본 발명은 PNA(Peptide nucleoic acid) 올리고머 합성에 적합한 일반식(Ⅰ)의 모노머에 관한 것이고, 정해진 서열(predefined sequence) PNA 올리고머와 무작위 서열(random sequence) PNA 올리고머의 합성방법을 제공한다.
Figure 112007023315465-PAT00001
상기 식에서
E는 황 또는 산소이고;
J는 질소 또는 C-R' 이고;
R1, R'은 독립적으로 수소, 할로겐, 알킬, 니트로, 니트릴, 알콕시, 할로겐화 알킬, 할로겐화 알콕시 또는 하기의 화학식 중 하나를 가지는 작용기이고:
Figure 112007023315465-PAT00002
Figure 112007023315465-PAT00003
이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 불소, 염소, 브롬 및 요오드와 같은 할로겐, CF3, 알킬(바람직하게는 C1-C4의 알킬), 니트로, 니트릴, 알콕시(바람직하게는 C1-C4의 알콕시), 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알킬(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알킬), 또는 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알콕시(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알콕시), 페닐, 그리고 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 페닐로부터 독립적으로 선택되고;
R2는 수소 또는 천연 혹은 비천연의 α-아미노산의 보호되거나 비보호된 곁사슬이고;
B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 작용기는 티올 존재시 약염기나 중간염기에 안정하고 산에 불안정한 보호기로 보호된다.
PNA 단량체, PNA올리고머

Description

피앤에이 단량체와 그의 전구체{PNA MONOMER AND PRECURSOR}
본 발명은 다음에 서술된 상세한 설명에 의해 완전하게 이해될 수 있으며, 도식으로 주어진 도면에 의해 본 발명이 제한되는 것은 아니다.
도 1은 DNA 인식에 유용한 천연 또는 비천연의 핵산염기의 화학적 구조들을 보여 준다.
도 2는 DNA 인식에 유용한 천연 또는 비천연의 핵산염기의 또 다른 화학적 구조들을 보여 준다.
도 3은 보호된 기본골격의 합성을 도식적으로 보여 준다.
도 4는 단량체의 전구체인 보호된 피페라진온(piperazinone)의 합성방법을 도식적으로 보여 준다.
도 5는 PNA 단량체의 합성방법을 도식적으로 보여 준다.
도 6은 PNA 단량체의 또 다른 합성 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 7은 PNA 티민 단량체의 합성방법을 도식적으로 보여 준다.
도 8은 PNA 티민 단량체의 또 다른 합성 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 9는 PNA 시토신 단량체의 합성 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 10은 PNA 아데닌 단량체의 합성 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 11은 PNA 구아닌 단량체의 합성 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 12는 PNA 단량체로부터 PNA 올리고머를 합성하는 방법을 도식적으로 보여 준다.
도 13은 합성된 올리고머(H2N-CGCTA-H)의 HPLC 결과를 보여 준다.
본 발명은 PNA 올리고머 합성에 적합한 단량체에 관한 것이다. 또한 본 발명은 단량체의 전구체와 그 전구체로부터 PNA 단량체를 제조하는 방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 PNA 단량체를 이용하여 PNA 올리고머를 제조하는 방법에 관한 것이다.
지난 20여년간 올리고뉴클레오타이드의 포스페이트(phosphate)기, 리보오스 고리, 혹은 핵산 염기를 변환하여 그 물성을 최적화하려는 노력에 의해 DNA 진단, 안티센스(antisense)와 안티젠(antigene) 형태의 치료제 및 분자생물학과 생물공학분야의 기초연구에서의 응용분야에 수많은 신규 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide)가 합성되어 왔다 (U. Englisch and D. H. Gauss, Angew . Chem. Int . Ed . Engl . 1991 , 30, 613-629; A. D. Mesmaeker et al. Curr . Opinion Struct. Biol . 1995, 5, 343-355; P. E. Nielsen, Curr . Opin . Biotech., 2001, 12, 16-20.).
그 중 가장 큰 전환을 이루는 업적은 덴마크의 Buchardt, Nielsen, Egholm, Berg 등에 의해 보고된 PNA (peptide nucleic acid) 이다 (P. E. Nielsen, et al., Science, 1991, 254, 1497-1500). PNA는 DNA의 포스페이트-리보오스고리 기본 골격을 N-(2-아미노에틸)글리신 폴리아미드 기본 골격으로 대체하고 천연 또는 인공의 핵산염기를 메틸렌카르보닐 링커로 N-(2-아미노에틸)글리신의 중심 질소원자와 연결한 DNA 유사체이다. 획기적인 구조의 변화에도 불구하고 PNA는 DNA 뿐만 아니라 RNA와 와트슨-클릭(Watson-Crick) 염기 짝이룸 규칙에 따라 염기배열에 따른 상보적인 결합을 할 수 있다. PNA는 상보적인 핵산과 결합함에 있어서 기본 골격이 전기적으로 중성이므로 전기적 반발을 최소화하여 DNA 및 RNA에 비해 강한 친화력을 갖는다.(S. K. Kim et al., J. Am . Chem . Soc ., 1993 , 115, 6477-6481; B. Hyrup et al., J. Am . Chem . Soc ., 1994, 116, 7964-7970; M. Egholm et al., Nature, 1993, 365, 566-568; K. L. Dueholm et al., New J. Chem ., 1997, 21, 19-31; P. Wittung et al., J. Am . Chem . Soc., 1996, 118, 7049-7054; M. Leijon et al., Biochemistry, 1994, 9820-9825.). 또한 PNA/DNA 이중복합체의 열안정성은 혼성화 조건의 염농도에 관계없음이 알려져 있다(H. Orum et al., BioTechniques, 1995, 19, 472-480; S. Tomac et al., J. Am . Chem . Soc ., 1996, 118, 5544-5552). 그리고, PNA는 DNA 또는 RNA와 평행(parallel) 또는 반대평행(anti-parallel) 상보 결합이 가능하며 반대평행(anti-parallel) 상보 결합이 선호된다(E. Uhlmann, et al., Angew . Chem . Int . Ed ., 1996, 35, 2632-2635).
PNA/DNA 이중복합체는 부정합(mismatch)에 있어서 DNA/DNA 의 부정합에 비해 열안정성이 저하된다. 단일염기 부정합에 있어서 PNA/DNA와 DNA/DNA 이중복합체는 Tm 값이 각각 15℃, 11℃씩 저하된다. 호모피리미딘(homopyrimidine) PNA와 피리미딘/퓨린 비가 높은 PNA 올리고머의 경우는 상보적인 DNA와 결합하여 PNA2/DNA 형태의 안정한 삼중복합체(triplex)의 구조를 형성한다(P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500; L. Betts et al., Science, 1995, 270, 1838-1841; H. Knudsen et al., Nucleic Acids Res., 1996, 24, 494-500.). 비록 PNA가 아미드 결합과 핵산 염기로 이루어져 있지만, 뉴클레아제(nuclease)와 프로테아제(protease) 에 대하여 매우 안정하다. DNA는 강한 산 조건 하에서 탈퓨린 반응이 일어나고 염기 수용액 조건하에서 가수분해가 일어나는 반면 PNA는 강한 산 조건 하에서는 매우 안정하며 염기 조건하에서도 상당히 안정하다.
일반적으로 PNA 올리고머는 고체상 펩타이드 합성 방법에 의해 합성된다. 여러 그룹에서 독립적으로 PNA 올리고머 합성을 최적화하기 위한 새로운 PNA 단량체들이 개발되었다. PNA 단량체의 합성은 적당한 보호기로 보호된 N-(2-아미노에틸)글리신의 제조, 적당한 보호기로 보호된 핵산 염기의 아세트산 유도체 합성 및 두 중간체의 커플링 과정으로 나눌 수 있다.
첫번째 보고된 PNA 올리고머 합성 방법은 기본 골격의 아미노기와 핵산염기의 아미노기를 각각 t-부틸옥시카르보닐기와 벤질옥시카르보닐기로 보호된 PNA 단랑체를 사용하여 메리필드(Merrifield) 고체상 합성을 한 것이다(P. E. Nielsen et al., Science , 1991, 254, 1497-1500; M. Egholm et al., J. Am . Chem . Soc., 1992, 114, 9677-9678; M. Egholm et al., J. Am . Chem . Soc., 1992, 114, 1895- 1897; M. Egholm et al., J. Chem . Soc . Chem . Commun., 1993, 800-801; K.L. Dueholm et al., J. Org . Chem., 1994, 59, 5767-5773; WO 92/20702). t-부틸옥시카르보닐과 벤질옥시카르보닐로 보호된 PNA 단량체는 현재 상업적으로 유용하지만 t-부틸옥시카르보닐기를 제거하기 위한 트리플루오로아세트산의 처리와 벤질옥시카르보닐기를 제거하기위한 불산(HF), 혹은 트리플루오로메탄설폰산과 같은 강산의 처리를 반복하여 수행해야 하기 때문에 사용에 불편하다. 따라서 이 방법은 PNA-DNA 키메라와 같은 여러 가지 변환된 PNA 올리고머 합성에 부합되지 않는 단점이 있다. 더욱이 불산(HF)이나 트리플루오로메탄설폰산과 같은 유해산의 사용은 작업자의 안전 및 자동화기기와 생산 라인의 부식가능성의 측면에서 볼 때 상업적으로 유용하지 못하다. 부가적으로, t-부틸옥시카르보닐/벤질옥시카르보닐을 사용하는 보호방법은 보호기를 제거하는 시약과 반응조건이 동일하고 다만 상대적인 반응속도의 차이에 의존하는 방법이므로 어려운 방법이다. 예를 들면 t-부틸옥시카르보닐 보호기와 벤질옥시카르보닐 보호기는 모두 산 조건하에서 제거되는 보호기지만 벤질옥시카르보닐기가 더 강한 산성 조건하에서 효과적으로 제거될 수 있다. 따라서 상대적으로 산에 민감한 t-부틸옥시카르보닐기를 제거할 때 동시에 벤질옥시카르보닐기의 일부가 제거될 가능성이 있다. 불행히도, t-Boc(t-부틸옥시카르보닐)기는 올리고머를 합성하는 과정에서 매 싸이클마다 기본골격의 아미노기에서 제거되어야만 한다. TFA는 곁사슬의 벤질옥시카르보닐기의 일부를 탈보호시킬 수 있을 정도로 강력하므로, 올리고머의 가지화의 가능성이 있고 원하는 올리고머 산물의 전체 수율이 감소하게 된다.
DNA 올리고머 합성과도 부합되는 온화한 조건하에서 탈보호기화가 가능한 PNA 올리고머 합성법을 찾기 위한 노력으로, 기본 골격의 아미노기의 보호기로 모노메틸트리틸 (Mmt)기를, 핵산염기의 아미노기의 보호기로 시토신과 아데닌에 벤조일, 아니소일, t-부틸벤조일 또는 구아닌에 이소부티릴, 아세틸과 같은 아실기를 사용한 PNA 단량체들이 개발 되었다(D. W. Will et al., Tetrahedron, 1995, 51, 12069-12082; P. J. Finn et al., Nucleic Acid Research, 1996, 24, 3357-3363; D. A. Stetsenko et al., Tetrahedron Lett. 1996, 3571-3574; G.. Breipohl et al., Tetrahedron, 1997, 14671-14686).
또 다른 상업적으로 유용한 PNA단량체로서는 기본 골격의 아미노기의 보호기로 플루오렌릴메틸옥시(Fmoc)기를, 핵산염기의 아미노기의 보호기로 벤즈히드릴옥시카르보닐(Bhoc)기를 사용한 것이다 (J. M. Coull, et al., US 6,133,444). 그러나 Fmoc/Bhoc 단량체를 이용한 방법은 Fmoc의 탈보호화 과정 중에 부반응이 일어나거나 단량체 용액의 안정성 등의 단점을 갖고 있다. 가장 심각한 부반응은 Fmoc 탈보호화 조건 하에서 아미노에틸글리신 기본골격의 핵산염기아세틸기가 2차 아미노기로부터 N 말단의 아미노기로 전이되는 반응이다(L.Christensen et al., J. Pept . Sci. 1995, 1,175-183 ). 이러한 N-아세틸전이 반응은 PNA 올리고머 합성에 있어서 매단계의 탈보호기화 반응 시 일어나 부반응물이 축적 될 수 있고 이러한 부반응물들은 비슷한 극성과 같은 분자량을 가지므로 분리가 어렵다. 따라서 Fmoc 보호기는 소량의 아민 존재 하에서도 불안정하여 용매의 선정에 있어서도 주의를 기울여야 한다. 일반적으로 고품질의 N-메틸피롤리돈(NMP)이 사용되며, 이는 PNA 올리고머의 가격 상승으로 이어진다.
PNA 올리고머의 합성에 Fmoc/벤질옥시카르보닐과 (S. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194), Fmoc/Mmt(G.Breipohl et al., Bioorg . Med . Chem . Lett., 1996, 6, 665-670)로 보호된 단량체를 사용한 결과들도 보고되어 있다. 그러나 어떠한 경우에도 단량체의 용해도 및 단량체 및 올리고머 합성 반응에서의 가혹한 조건 및 부반응 등의 심각한 단점들을 갖고 있다.
새로운 단량체를 찾으려는 시도는 ISIS와 Biocept에 의해 각각 보고된 고리화 된 단량체가 있다. ISIS에 의해 개발된 방법은 보호된 아미노에틸글리신 기본 골격을 모르포리논으로 대체한 것이다(U. S. Patent No. 5,539,083). 그러나 이 방법은 매단계 커플링마다 생성되는 히드록시기를 아미노기로 전환하여야 하는 심각한 단점을 갖고 있다. 또 다른 고리화된 단량체는 보호된 아미노에틸글리신 기본 골격을 N-(t-부틸옥시카르보닐)피페라진온으로 대체한 것이다(WO 00/02899). 그러나 이 방법 역시 단량체의 반응성이 떨어지고 상기 서술된 t-Boc/벤질옥시카르보닐을 보호기로 사용하는 경우와 같은 문제점들을 안고 있다.
많은 연구의 결과에도 불구하고 높은 수율 및 순도, 낮은 가격 그리고 자동화 평행 합성에 적합한 PNA 단량체의 개발이 절실히 요구되고 있다.
본 발명은 PNA 올리고머 합성에 있어서 보다 효율적이고 높은 수율과 편리함을 갖는 새로운 단량체를 제공한다. 또한 본 발명은 PNA 올리고머의 합성을 위한 자동합성기와 같은 기기에 편리하게 적용할 수 있는 PNA 단량체를 제공하는 것이다.
본 발명에 따른 새로운 단량체는 화학식Ⅰ의 구조를 갖는 화합물이다:
Figure 112007023315465-PAT00004
상기 식에서
E는 황 또는 산소이고;
J는 질소 또는 C-R' 이고;
R1, R'은 독립적으로 수소, 불소, 염소, 브롬 및 요오드와 같은 할로겐, CF3, 알킬(바람직하게는 C1-C4의 알킬), 또는 하기의 화학식과 같은 아릴기이고,
Figure 112007023315465-PAT00005
상기 식에서
A1, A2, A3, A4, A5는 독립적으로 수소, 불소, 염소, 브롬 및 요오드와 같은 할로겐, 알킬(바람직하게는 C1-C4의 알킬), 니트로, 니트릴, 알콕시(바람직하게는 C1-C4의 알콕시), 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알킬(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알킬), 또는 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알콕시(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알콕시), 페닐, 또는 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 페닐이다.
또다른 양태로, R1, R'은 하기의 화학식과 같다.
Figure 112007023315465-PAT00006
이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 위에서 정의한 바와 같다.
R2는 수소 또는 천연 혹은 비천연의 α-아미노산의 보호되거나 비보호된 곁사슬이고;
B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노기를 가질 때 그 작용기는 티올 존재시 약염기나 중간염기에 안정하고 산에 불안정한 보호기로 보호된다:
B의 또 다른 구체적인 예로는 티민(T), 시토신(C), 아데닌(A), 또는 구아닌(G)이다.
특히, B의 엑소사이클릭 아미노기의 보호기는 하기의 화학식으로 표현된다:
Figure 112007023315465-PAT00007
R4는 하기의 화학식으로 표현된다:
Figure 112007023315465-PAT00008
Y1-Y10은 독립적으로 수소, 불소, 염소 및 브롬과 같은 할로겐, 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, t-부틸), 메톡시, 에톡시, t-부틸옥시와 같은 알콕시 중에서 선택된다.
R4는 또 다른 양태로 하기의 화학식으로 표시된다.
Figure 112007023315465-PAT00009
Z1-Z5는 독립적으로 수소, 불소, 염소 및 브롬과 같은 할로겐, 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, t-부틸), 메톡시, 에톡시, t-부틸옥시와 같은 알콕시 또는 두 인접한 작용기가 메틸렌디옥시인 중에서 선택된다.
본 발명은 또한 화학식 Ⅴ의 화합물로부터 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
Figure 112007023315465-PAT00010
상기 식에서, E, J, R1, R2와 B는 앞에서 정의한 바와 동일하다.
핵산염기 B가 엑소사이클릭 아미노기를 가질 때 그 보호기도 앞에서 정의한 바와 동일하며,
R3는 수소, 알킬(바람직하게는 메틸, 에틸, t-부틸과 같은 C1-C4의 알킬) 또는 아릴이다.
또 다른 구체적인 예로 본 발명은 화학식 V의 화합물과 화학식II의 화합물로부터 화학식 V의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
Figure 112007023315465-PAT00011
상기 식에서, E, J, R1, R2와 R3는 앞에서 정의한 바와 동일하다.
또한 본 발명은 화학식 II의 화합물과 그 제조방법을 제공한다.
또다른 양태에서, 화학식 II의 화합물과 핵산염기 아세트산 유도체(nucleobase acetic acid moiety)를 비친핵성 유기염기와 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링 제제하에서 커플링 반응시켜 화학식 V의 화합물을 제조하 는 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 화학식 I의 화합물을 화학식 IV의 화합물로부터 제조하는 방법을 포함한다.
Figure 112007023315465-PAT00012
상기 식에서, E, J, R1, R2는 앞에서 정의한 바와 동일하고,
HX는 유기산 또는 무기산이다.
본 발명은 화학식 Ⅳ의 화합물과 그의 중화된 형태 및 그 합성방법을 제공한다.
더욱이 본 발명은 화학식 Ⅱ의 화합물로부터 화학식 Ⅳ의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 화학식 Ⅳ의 화합물과 핵산염기 아세트산 유도체(nucleobase acetic acid moiety)를 비친핵성 유기염기와 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링 제제하에서 커플링 반응시켜 화학식 Ⅰ의 화합물을 제조하는 방법을 포함한다.
본 발명은 또한 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링 제제 또는 혼성 산무수물(mixed anhydride)를 사용함으로써 화학식 Ⅵ의 화합물을 고리화반응시켜 화학식 Ⅰ의 화합물을 제조하는 방법을 포함한다.
Figure 112007023315465-PAT00013
상기 식에서, E, J, R1, R2와 B는 앞에서 정의한 바와 동일하고,
핵산염기 B가 엑소사이클릭 아미노기를 가질 때 그 보호기도 앞에서 정의한 바와 동일하다.
본 발명은 앞에서 서술한 화학식 Ⅱ의 화합물을 제공한다. 특히, R2는 수소 또는 천연 α-아미노산의 보호되거나 비보호된 곁사슬이다. 또 다른 양태로는, 화학식 II의 화합물은 다음과 같은 구조를 가질 수 있다 : E는 황이고 R1은 다음과 같은 일반식을 가질 수 있다.
Figure 112007023315465-PAT00014
A1, A2, A3, A4, A5는 독립적으로 수소, 불소, 염소, 브롬 및 요오드와 같은 할로겐, CF3, 알킬(바람직하게는 C1-C4의 알킬), 니트로, 니트릴, 알콕시(바람직하게는 C1-C4의 알콕시), 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알킬(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알킬), 또는 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 알콕시(바람직하게는 할로겐화 C1-C4의 알콕시), 페닐, 또는 할로겐(불소, 염소, 브롬, 요오드 등)화 페닐이다.
본 발명은 또한 티아디아졸-2-설포닐클로라이드(thiadiazole-2-sulfonyl chloride), 옥사디아졸-2-설포닐클로라이드(oxadiazole-2-sulfonyl chloride), 티아졸-2-설포닐클로라이드(thiazole-2-sulfonyl chloride), 또는 옥사졸-2-설포닐클로라이드(oxazole-2-sulfonyl chloride) 유도체를 비친핵성 유기 염기 존재 하에서 N-(2-아미노에틸)글리신 에스테르(N-(2-aminoethyl)glycine ester)와 반응시켜 화학식 II의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
또한 본 발명은 화학식 IV의 화합물과 그의 중화된 형태의 화합물을 제공한다. 화학식 IV의 잔기들은 앞에서 정의한 바와 같다. 특히, 잔기 R2는 수소 또는 천연 의 α-아미노산의 보호되거나 비보호된 곁사슬이다. 다른 양태에서 화학식 IV의 화합물은 다음 구조를 가질 수 있다: R1은 메틸, 페닐, 2-니트로페닐, 4-니트로페닐, 2-클로로-4-니트로페닐, 4-클로로-2-니트로페닐, 2,5-디클로로페닐 또는 2,4-디클로로페닐이고; E는 황이고; J는 질소이다. 또다른 양태에서 R1은 수소, 메틸, 또는 벤조일이고; E는 황이고; J는 C-CH3, 또는 C-Ph(C-페닐)기이다.
또한 본 발명은 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하거나 또는 혼성 산무수물(mixed anhydride)를 사용함으로써 화학식 III의 화합물을 고리화반응시킨 후, t-Boc(t-부틸옥시카르보닐)과 같은 보호기를 산성 조건 하에서 탈보호하여 화학식 IV의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
Figure 112007023315465-PAT00015
상기 식에서 E, J, R1과 R2는 앞에서 정의한 바와 같다.
본 발명은 또한 화학식 I의 화합물들을 연결하여 PNA 올리고머를 제조하는 방법을 제공한다.
앞에서 인용된 “R”기들과 E 및 J는 화학식 Ⅰ-Ⅵ의 모든 화합물에 적용된다. 또한 인용된 기호들은 본 발명의 과정을 수행함에 있어서 모든 화합물에 적용되는 것이다.
본 발명의 목적들은 본 발명에 대한 하기의 설명, 참조된 도면들과 서술된 청구항으로부터 완전하게 이해될 것이다. 도면에 인용된 화학식들은 대표적인 예로 서 이해되어야 한다. 본 발명의 화학식은 명세서 전반에 걸쳐 논의될 것이다. 도면에서 재인용된 화학식은 어떤 의미에서도 그 범위를 제한하는 것은 아니다.
도면에서 묘사된 화학식들은 단순히 실시예를 설명하기 위한 것이며 특정 화학식이 청구항에서 인용된 경우 명세서에서 명시된 사항을 의미한다.
본 발명에 있어서, 화학식 I의 구조를 갖는 화합물의 1,3,4-티아디아졸-2-설포닐, 1,3,4-옥사디아졸-2-설포닐, 티아졸-2-설포닐, 또는 옥사졸-2-설포닐기는 기본 골격의 아민 보호기뿐만 아니라 커플링반응의 활성화기로서의 중요한 역할을 하고 있다. 또한 앞에서 서술된 특성을 갖는 단량체들은 수동 또는 자동화 합성기에 의한 PNA 올리고머의 합성이나 조합화학을 이용한 PNA 올리고머 라이브러리의 제조에 유용하다. 화학식 I에서 핵산염기 B는 자연계에서 발견되는 위치, 즉 티민과 시토신은 1번 위치, 아데닌과 구아닌은 9번 위치에서 결합할 뿐 아니라 비천연의 핵산염기(핵산염기 유사체) 또는 핵산염기 결합 부위와도 결합한다. 도 1과 도 2는 몇몇 핵산염기들과 합성 가능한 핵산염기의 구조를 보여 준다.
보호된 기본 골격의 제조
화학식 Ⅰ의 구조를 갖는 새로운 단량체 제조의 첫 단계는 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 N-[2-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체의 합성이다.
Figure 112007023315465-PAT00016
상기 식에서,
N-[2-(1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체의 경우 E는 황, J는 질소이고; N-[2-(1,3,4-옥사디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체의 경우 E는 산소, J는 질소이고; N-[2-(티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체의 경우 E는 황, J는 C-R'이고; N-[2-(옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체의 경우 E는 산소, J는 C-R'이고; R', R1, R2와 R3는 앞에서 정의된 바와 같다.
화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 유도체들은 일반적으로 하기 화학식의 구조를 갖는 설포닐 클로라이드 화합물을 N-(2-아미노에틸)글리신 유도체의 일차아민과 선택적으로 반응시켜 합성한다:
Figure 112007023315465-PAT00017
상기 식에서,
1,3,4-티아디아졸-2-설포닐클로라이드 유도체의 경우 E는 황, J는 질소이고; 1,3,4-옥사디아졸-2-설포닐클로라이드 유도체의 경우 E는 산소, J는 질소이고; 티아졸-2-설포닐클로라이드 유도체의 경우 E는 황, J는 C-R'이고; 옥사졸-2-설포닐클로라이드 유도체의 경우 E는 산소, J는 C-R'이고; R'과 R1은 앞에서 정의된 바와 같다.
화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 유도체의 제조의 예로서 N-[2-(1,3,4-티아디아졸 또는 티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 유도체를 N-(2-아미노에틸)-글리신 유도체의 일차아민의 선택적 반응을 사용하는 알려진 방법으로 합성한다 (예를 들어, R2 이 수소일 경우, S. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194; R2가 천연 또는 비천연 아미노산의 보호 또는 비보호된 곁사슬인 경우, A. Puschl et al., Tetrahedron Lett., 1998, 39, 4707-4710를 보라.). 1,3,4-티아디아졸-2-설포닐클로라이드 또는 티아졸-2-설포닐클로라이드 유도체는, 벤조티아졸-2-설포닐클로라이드 유도체를 제조하는 방법과 동일하게, 상응하는 2-머캅토-1,3,4-티아디아졸 또는 2-머캅토-티아졸 유도체로부터 제조할 수 있다(E. Vedejs, et al., J. Am . Chem. Soc ., 1996, 118, 9796-9797.).
N-[2-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]글리신 유도체는 비친핵성 유기 염기의 존재 하에 상온에서 N-(2-아미노에틸)-글리신 유도체 용액에 1,3,4-티아디아졸-2-설포닐클로라이드, 1,3,4-옥사디아졸-2-설포닐클로라이드, 티아졸-2-설포닐클로라이드, 또는 옥사졸-2-설포닐클로라이드를 천천히 첨가하는 커플링 반응에 의해 합성된다. 상기반응의 용매의 예로는 제한 없이 물, 톨루엔, 벤젠, 에틸 아세테이트, 테트라히드로퓨란, 디이소프로필 에테르, 디에틸 에테르, 디클로로메탄, 클로로포름, 사염화탄소 그리고 아세 토니트릴이다. 바람직한 용매는 디클로로메탄이다, 비친핵성 유기염기의 예로는 트리에틸아민, 트리프로필아민, N,N-디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린과 N-에틸모르폴린 등이 있으나 이것으로 한정되는 것은 아니다. 바람직한 비친핵성 유기염기는 트리에틸아민이다. 박막크로마토그래피 (TLC)로 반응의 완결을 확인한 후 반응혼합물을 물로 씻고 건조한 후 감압 하에서 농축하여 원하는 화합물을 얻는다.
1-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐)-피페라진-2-온의 제조
화학식 Ⅰ의 구조를 갖는 단량체의 합성을 위한 첫번째 전구체인 화학식 Ⅳ의 화합물은 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 N-[2-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 유도체로부터 가수분해, 이차아민의 보호기화, 고리화 및 이차아민의 탈보호기화를 거쳐 합성된다 (도 4).
Figure 112007023315465-PAT00018
상기 식에서 E, J, R1, R2와 HX는 앞에서 정의한 바와 같다.
첫번째로, 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 N-[2-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 유도체는 과량의 히드록사이드 이온 소스를 첨가하여 대응되는 산으로 변환된다. 화학식 Ⅱ에서 바람직한 R3는 메틸 또는 에틸이다. 히드록사이드 이온 소스의 예로는 리튬히드록사이드, 소 듐히드록사이드와 포타슘히드록사이드를 들 수 있으나 그 예로 제한되는 것은 아니다. 바람직한 히드록사이드 이온 소스는 리튬히드록사이드이다. 반응물을 정제 과정 없이 디-t-부틸디카보네이트와 같은 보호기로 처리하여 이차아민을 보호기화 처리하여 하기 화학식Ⅲ의 구조를 갖는 화합물을 합성한다:
Figure 112007023315465-PAT00019
상기 식에서 E, J, R1, R2는 앞에서 정의한 바와 같다.
바람직한 가수분해 반응은 상온에서 N-[2-(1,3,4-티아디아졸, 1,3,4-옥사디아졸, 티아졸 또는 옥사졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에스테르 유도체 용액에 2당량의 리튬히드록사이드 수용액을 첨가함에 의하여 수행된다. 박막크로마토그래피 (TLC) 분석으로 반응의 종결을 확인한 후 1.5 당량의 디-t-부틸디카보네이트와 1당량의 리튬히드록사이드 수용액을 첨가한다. 반응물을 충분히 교반한다. 그리고나서, 과량의 디-t-부틸디카보네이트를 에틸 아세테이트로 추출하여 제거한다. 용액을 산성화한 후, 디클로로메탄으로 추출하고, 건조하고, 감압 하에서 농축하여 고체를 얻는다. 상기반응의 용매의 예로서는 테트라하이드로퓨란 수용액, 디옥산 수용액과 1,2-디메톡시에탄 수용액이 있다. 바람직한 용매는 테트라하이드로퓨란 수용액이다.
두번째로, 화학식 Ⅲ의 구조를 갖는 카르복실산을 고리화 반응 시킨 후, t-부틸옥시카르보닐기(t-Boc)를 탈보호화 하여 화학식 Ⅳ의 구조를 갖는 피페라진온 유도체를 합성한다. 고리화 반응은 카르복실산의 활성화과정과 동시에 일어난다. 카르복실산의 활성화는 상온에서 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링제제를 사용하여 수행될 수 있다. 커플링제제의 예로는 HATU, HOAt, HODhbt (L. A. Carpino et al., J. Am . Chem . Soc., 1993, 115, 4397-4398), HAPyU, TAPipU (A. Ehrlich et al., Tetrahedron Lett., 1993, 4781-4784), HBTU (V. Dourtoglou et al., Synthesis, 1984, 572-574), TBTU, TPTU, TSTU, TNTU (R. Knorr et al., Tetrahedron Lett., 1989, 1927-1930), TOTU, BOP (B. Castro et al., Tetrahedron Lett., 1975, 1219-1222), PyBOP (J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1990, 205-208), BroP (J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1990, 669-672), PyBroP (J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1991, 1967-1970), BOI (K.Akaji et al., Tetrahedron Lett., 1992, 3177-3180), MSNT (B. Blankemeyer-Menge et al., Tetrahedron Lett., 1990, 1701-1704), TDO (R. Kirstgen et al., J. Chem . Soc ., Chem. Commun., 1987, 1870-1871), DCC, EDCI, CDI (H. A. Staab, Justus Liebigs Ann. Chem., 1957, 609, 75.), HOBt (W Knig et al., Chem . Ber., 1970, 103, 788, 2024, 2034), HOSu (E. Wnsch et al., Chem . Ber., 1966, 99, 110), NEPIS (R. B. Woodward et al.,. J. Am . Chem . Soc., 1961, 83, 1010), BBC (S. Chen et al., Tetrahedron Lett. 1992, 33, 647), BDMP (P, Li et al., Chem . Lett., 1999, 1163), BOMI (P, Li et al., Tetrahedron Lett., 1999, 40, 3605), AOP (L. A Carpino et al., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 2279), BDP (S. Kim et al., Tetrahedron Lett., 1985, 26, 1341), PyAOP (F. Albericio et al., Tetrahedron Lett. 1997, 38, 4853), TDBTU (R. Knorr et al., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 1927), BEMT (P. Li et al., Tetrahedron Lett. 1999, 40, 8301), BOP-Cl (J. Diago-Meseguer et al., Synthesis 1980, 547), BTFFH, TFFH (A. El-Faham et al.. Chem. Lett., 1998, 671), CIP (K. Akaji, et al., Tetrahedron Lett ., 1994, 35, 3315), DEPBT (H. Li et al. Organic Lett. 1999, 1, 91), Dpp-Cl (R. Ramage et al., J. Chem . Soc ., Perkin Trans I, 1985, 461), EEDQ (B. Belleau et al., J. Am. Chem . Soc., 1968, 90, 1651), FDPP (S. Chen et al., Tetrahedron Lett., 1991, 32, 6711), HOTT, TOTT (M. A. Bailn et al., J. Org . Chem. 1999, 64, 8936) , PyCloP (J. Coste et al., Tetrahedron Lett., 1991, 32, 1967 and J. Coste et al., J. Org . Chem., 1994, 59, 2437)가 있으며 그 예로 제한되는 것은 아니다. 반응용매로는 테트라하이드로퓨란, 디클로로메탄, 클로로포름, 디메틸포름아미드(DMF)와 N-메틸피롤리돈 중에서 선택될 수 있다. 바람직한 용매는 디메틸포름아미드(DMF)이다.
다른 방법으로, 카르복실산의 활성화는 비친핵성 유기염기 존재 하에 알킬 클로로포르메이트 또는 알카노일클로라이드를 사용하여 혼성 산무수물 (mixed anhydride)의 형성을 통해 수행될 수 있다. 적당한 무수 용매의 예로는 아세토니트릴, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디메톡시에탄, 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르와 테트라하이드로퓨란이 포함되나 이들로 제한되는 것은 아니다. 바람직한 용매는 디클로로메탄과 테트라하이드로퓨란이다. 가장 바람직한 반응 온도는 -20℃에서 이소부틸 클로로포르메이트를 첨가한 후 0℃ 까지 온도를 서서히 올리는 것이 다.
도 4에서 t-부틸옥시카르보닐기(t-Boc)는 산성 조건하에서 탈보호기화 된다. 산의 예로서는 염산, 브롬산, 불산, 요오드산, 질산, 황산, 메탄설폰산, 트리플루오로아세트산(TFA)와 트리플루오로메탄설폰산이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 산은 TFA이다. 탈보호기화 반응에 사용되는 용매로는 디클로로메탄, 클로로포름, 사염화탄소, 에틸 아세테이트, 톨루엔과 벤젠이 있으며 그 예로 제한되는 것은 아니다. 바람직한 용매는 디클로로메탄이다.
PNA 단량체의 제조
본 발명의 방법에 따라, 화학식 I의 구조를 갖는 PNA 단량체는 적어도 2가지 방법으로 합성될 수 있다. 도 5에 있어서, PNA 단량체를 제조하기 위한 첫 번째 방법은 보호 또는 비보호된 핵산염기아세트산 부위를 보호된 선형 기본골격에 도입한 후 고리화하는 방법이다. 또다른 방법으로는 보호된 선형 기본골격의 고리화한 후 고리화된 기본골격을 탈보호하고, 보호 또는 비보호된 핵산염기아세트산과 커플링하여 원하는 PNA 단량체를 제조하는 방법이다.
방법 1
도 5에 도시된 바와 같이 화학식 V의 선형 구조 화합물은 화학식 Ⅱ의 보호화된 선형 기본골격을 갖는 화합물로부터 커플링 제제를 사용한 핵산염기아세트산 유도체와의 아실화 반응에 의해 합성된다.
도 5에 도시된 바와 같이, 이 커플링반응은 화학식 Ⅱ의 보호화된 선형 기본골격 화합물, 핵산염기 아세트산 유도체과 비친핵성 유기염기를 적당한 무수용매에 녹인 혼합용액에 커플링 제제를 첨가하여 수행된다. 커플링 제제의 예로는 HATU, HOAt, HODhbt, HAPyU, TAPipU, HBTU,TBTU, TPTU, TSTU, TNTU, TOTU, BOP, PyBOP, BroP, PyBroP, BOI, MSNT, TDO, DCC, EDCI, CDI, HOBt, HOSu, NEPIS, BBC, BDMP, BOMI, AOP, BDP, PyAOP, TDBTU, BOP-Cl, CIP, DEPBT, Dpp-Cl, EEDQ, FDPP, HOTT, TOTT와 PyCloP 이 있으며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 커플링 제제는 PyBOP 또는 EDCI이다. 비친핵성 유기염기의 예로는 트리에틸아민, 트리프로필아민, N,N-디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린과 N-에틸모르폴린이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 비친핵성 유기염기는 N,N-디이소프로필에틸아민이다. 적당한 무수 용매의 예로는 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디메톡시에탄, 테트라하이드로퓨란, DMF와 N-메틸피롤리돈이 포함되며 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직한 용매는 DMF이다.
Figure 112007023315465-PAT00020
상기 식에서 E, J, R1, R2, R3와 B는 앞에서 정의한 바와 같다.
화학식 V의 구조를 갖는 화합물은 과량의 히드록사이드이온 소스를 첨가하여 화학식 Ⅵ와 같은 대응되는 산으로 변환된다. 바람직하기로는 R3가 메틸 또는 에틸 이다. 히드록사이드 이온 소스의 예로는 리튬 히드록사이드, 소듐 히드록사이드와 포타슘 히드록사이드를 포함하며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 히드록사이드 이온 소스는 리튬 히드록사이드이다.
Figure 112007023315465-PAT00021
상기 식에서 E, J, R1, R2와 B는 앞에서 정의한 바와 같다.
또한 도 5에 도시된 바와 같이, 카르복실산의 활성화와 동시에 일어나는 고리화 반응을 통하여 화학식 I의 구조를 갖는 PNA 단량체를 제조한다. 카르복실산의 활성화는 상온에서 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하여 수행된다. 커플링 제제의 예로는 HATU, HOAt, HODhbt, HAPyU, TAPipU, HBTU, TBTU, TPTU, TSTU, TNTU, TOTU, BOP, PyBOP, BroP, PyBroP, BOI, MSNT, TDO, DCC, EDCI, CDI, HOBt, HOSu, NEPIS, BBC, BDMP, BOMI, AOP, BDP, PyAOP, TDBTU, BOP-Cl, CIP, DEPBT, Dpp-Cl, EEDQ, FDPP, HOTT, TOTT와 PyCloP이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 커플링 제제는 EDCI 또는 PyBOP이다. 비친핵성 유기염기의 예로는 트리에틸아민, 트리프로필아민, N,N-디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린과 N-에틸모르폴린이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 비친핵성 유기염기는 N,N-디이소프로필에틸아민이다. 용매로는 제한 없이 테트라하이드로퓨란, 디클로로메탄, 클로로포름, DMF, 또는 N-메틸피롤리돈 중에서 선택될 수 있 다. 바람직한 용매는 DMF이다.
다른 방법으로, 카르복실산의 활성화는 비친핵성 유기염기 존재 하에 알킬 클로로포르메이트 또는 알카노일클로라이드를 사용하여 혼성 산무수물 (mixed anhydride)의 형성을 통해 수행될 수 있다. 알킬 할로포르메이트 또는 알카노일클로라이드의 예로는 메틸 클로로포르메이트, 에틸 클로로포르메이트, 프로필 클로로포르메이트, 부틸 클로로포르메이트, 이소부틸 클로로포르메이트, 피발로일클로라이드와 아다만틴카르복실클로라이드가 있으며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 가장 바람직한 것은 이소부틸 클로로포르메이트이다. 이소부틸 클로로포르메이트를 사용한 고리화 반응은 -30℃ 부터 10℃ 온도 사이에서 카르복실산과 비친핵성 유기염기를 적당한 무수 용매에 녹인 용액에 이소부틸 클로로포르메이트를 천천히 첨가함으로서 진행된다. 비친핵성 유기염기의 예로는 트리에틸아민, 트리프로필아민, N,N-디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린과 N-에틸모르폴린이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 비친핵성 유기염기는 N-메틸모르폴린이다. 적당한 무수 용매의 예로는 아세토니트릴, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디메톡시에탄, 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르와 테트라하이드로퓨란이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 용매는 디클로로메탄과 테트라하이드로퓨란이다. 바람직한 반응 온도는 -20℃에서 이소부틸 클로로포르메이트를 첨가한 후 0℃까지 온도를 천천히 올리는 것이다.
방법 2
또다른 방법으로, 본 발명의 PNA 단량체는 보호되거나 비보호된 핵산염기아세트산 유도체를 화학식 Ⅳ의 구조를 갖는 고리화된 전구체와 커플링하여 합성할 수 있다:
Figure 112007023315465-PAT00022
상기 식에서 E, J, R1, R2와 HX는 앞에서 정의한 바와 같다.
도 6에 도시된 바와 같이, 고리화된 전구체와 보호되거나 비보호된 핵산염기아세트산 유도체와의 커플링 반응은 상온에서 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링 제제와 비친핵성 유기염기 존재 하에서 수행된다. 커플링 제제의 예로는 HATU, HOAt, HODhbt, HAPyU, TAPipU, HBTU, TBTU, TPTU, TSTU, TNTU, TOTU, BOP, PyBOP, BroP, PyBroP, BOI, MSNT, TDO, DCC, EDCI, CDI, HOBt, HOSu, NEPIS, BBC, BDMP, BOMI, AOP, BDP, PyAOP, TDBTU, BOP-Cl, CIP, DEPBT, Dpp-Cl, EEDQ, FDPP, HOTT, TOTT와 PyCloP이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 커플링 제제는 PyBOP이다. 비친핵성 유기염기의 예로는 트리에틸아민, 트리프로필아민, N,N-디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린과 N-에틸모르폴린이 포함되며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 비친핵성 유기염기는 N,N-디이소프로필에틸아민이다. 용매로는 테트라하이드로퓨란, 디클로로메탄, 클로로포름, DMF, 또는 N-메틸피롤리돈 중에서 제한없이 선택될 수 있다. 바람직한 용매는 DMF이다.
핵산염기와 보호기
본 발명의 핵산염기의 예로는 도 1과 도 2에 도시된 아데닌, 시토신, 구아닌, 티민, 유리딘, 2,6-디아미노퓨린과 천연 또는 비천연의 핵산 염기를 포함하며 그 예로서 제한되는 것은 아니다. 바람직한 핵산염기는 아데닌, 시토신, 구아닌과 티민이다. 핵산염기는 PNA 올리고머 합성을 위하여 보호기로 보호될 수 있다. 보호기는 t-부틸옥시카르보닐, 아다만틸옥시카르보닐, 벤질옥시카르보닐 (P. E. Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500; M. Egholm et al., J. Am . Chem . Soc., 1992, 114, 9677-9679; M. Egholm et al., J. Am . Chem . Soc., 1992, 114, 1895-1897; M. Egholm et al., J. Chem . Soc . Chem . Commun., 1993, 800-801; K. L. Dueholm et al., J. Org . Chem., 1994, 59, 5767-5773; WO 92/20702), 4-메톡시벤질옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카르보닐, 벤즈히드릴옥시카르보닐 (U. S. Patent No. 6,133,444), 피페로닐옥시카르보닐 유도체들, 2-메틸티오에톡시카르보닐 (U. S. Patent No. 6,063,569), 모노메틸트리틸(Mmt) (G. Breipohl et al., Bioorg. Med . Chem . Lett., 1996, 6, 665-670), 또는 산 유리 보호기 (acid labile protecting group) (T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Group in Organic Synthesis, 3rd Edition, pp 494~653)이며 이에 제한되는 것은 아니다.
T-단량체의 합성
T-단량체는 화학식 I-t의 구조를 갖는 화합물이다.
Figure 112007023315465-PAT00023
상기 화학식에서 E, J, R1과 R2는 앞에서 정의한 바와 같다.
T-단량체의 전구체인 하기 화학식의 (티민-1-일)-아세트산은 알려진 방법에 의해 합성된다 (K. L. Dueholm et. al., J. Org . Chem., 1994, 59, 5767-5773; WO 92/20702).
Figure 112007023315465-PAT00024
도 7에서, 하기의 화학식 V- t 의 화합물은 (티민-1-일)-아세트산과 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 1,3,4-티아디아졸 또는 티아졸-2-설포닐기로 보호된 기본골격의 에스테르 화합물을 커플링 제제 존재 하에서 커플링하여 합성하였다.
Figure 112007023315465-PAT00025
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R3는 앞에서 정의한 바와 같다.
바람직한 R3는 메틸 또는 에틸이다.
화학식 V-t의 구조를 갖는 화합물은 과량의 히드록사이드 이온 소스를 첨가함에 의해 화학식 VI - t 의 구조를 갖는 산으로 변환된다.
Figure 112007023315465-PAT00026
상기 식에서 E, J, R1와 R2는 앞에서 정의한 바와 같다.
도 7에서, 카르복실산의 활성화와 동시에 일어나는 고리화 반응을 통하여 화학식 I-t의 구조를 갖는 PNA T-단량체를 제조한다. 카르복실산의 활성화는 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하여 수행하거나 혼성 산무수물(mixed anhydride)에 의해 이루어진다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
또다른 방법으로 도 8에 도시된 바와 같이, PNA T-단량체는 (티민-1-일)-아세트산을 화학식 IV의 구조를 갖는 피페라진온 유도체와 커플링하여 합성될 수 있다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다
C-단량체의 제조
C-단량체는 화학식 I-c의 구조를 갖는 화합물이다:
Figure 112007023315465-PAT00027
상기 식에서 E, J, R1, R2, R3와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
PNA C-단량체의 전구체인, 하기의 구조를 갖는 적절히 보호된 (시토신-1-일)-아세트산(아래 그림 참조)은 U. S. Patent No. 6,133,444; U. S. Patent No. 6,063,569; Dueholm, et al., J. Org . Chem ., 1994, 59, 5767-5773 및 WO 92/20702에 서술된 알려진 방법에 의해 합성되었으며 상기 방법들은 그 자체 또는 변형된 형태로 본원에 참조된다.
Figure 112007023315465-PAT00028
R4은 벤질, 벤즈히드릴, 4-메톡시벤질, 또는 피페로닐 유도체들이다.
도 9에 있어서, PNA C-단량체는 적절히 보호된 (시토신-1-일)-아세트산과 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 1,3,4-티아디아졸 또는 티아졸-2-설포닐기로 보호된 기본골격의 에스테르화합물을 커플링 제제 존재 하에서 커플링함에 의해 합성되어 하기 화합물을 얻는다.
Figure 112007023315465-PAT00029
상기 식에서 E, J, R1, R2, R3와 R4는 앞에서 정의한 바와 같다.
화학식 V-c의 구조를 갖는 화합물은 과량의 히드록사이드 이온 소스를 첨가하여 대응하는 산으로 변환되어 하기의 화학식 VI - c 의 화합물을 얻는다:
Figure 112007023315465-PAT00030
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
도 9에서, 카르복실산의 고리화는 카르복실산의 활성화와 동시에 일어나 화학식 I-c의 구조를 갖는 PNA 단량체를 생성한다. 카르복실산의 활성화는 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하거나 또는 혼성 산무수물(mixed anhydride)를 형성함으로 이루어진다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
다른 방법으로는 적절히 보호된 (시토신-1-일)-아세트산을 화학식 IV의 구조를 갖는 피페라진온 유도체와 커플링하여 PNA C-단량체를 제조할 수 있다. 반응조 건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
A-단량체의 제조
A-단량체는 화학식 I-a의 구조를 갖는 화합물이다:
Figure 112007023315465-PAT00031
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
PNA A-단량체의 전구체인, 하기의 구조를 갖는 적절히 보호된 (아데닌-9-일)-아세트산은 U. S. Patent No. 6,133,444 및 S. A. Thomson et al., Tetrahedron, 1995, 6179-6194에 서술된 알려진 방법에 의해 합성되었으며 상기 방법들은 그 자체 또는 변형된 형태로 본원에 참조된다.
Figure 112007023315465-PAT00032
R4은 벤질, 벤즈히드릴, 4-메톡시벤질과 피페로닐 유도체 중에서 선택된다.
도 10에 관하여, PNA A-단량체는 적절히 보호된 (아데닌-9-일)-아세트산과 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 1,3,4-티아디아졸 또는 티아졸-2-설포닐기로 보호된 기본골격의 에스테르를 커플링 제제 존재 하에서 커플링함에 의해 하기 화학식 V-a의 화합물을 얻는다.
Figure 112007023315465-PAT00033
상기 식에서 E, J, R1, R2, R3와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
화학식 V-a의 구조를 갖는 화합물은 과량의 히드록사이드 이온 소스를 첨가하여 대응하는 산으로 변환되어 하기의 화학식 Ⅵ- a 의 화합물을 얻는다:
Figure 112007023315465-PAT00034
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
도 12에 관하여, 카르복실산의 활성화와 동시에 일어나는 고리화 반응을 통하여 화학식 I- a 의 구조를 갖는 PNA 단량체를 제조한다. 카르복실산의 활성화는 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하거나 또는 혼성 산무수물(mixed anhydride)를 형성함으로 이루어진다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
다른 방법으로는 PNA A-단량체는 적절히 보호된 (아데닌-9-일)-아세트산을 화학식 Ⅳ의 구조를 갖는 피페라진온 유도체와 커플링하여 합성할 수 있다. 반응조 건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
G-단량체의 제조
G-단량체 화학식 I-g의 구조를 갖는 화합물이다:
Figure 112007023315465-PAT00035
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
PNA G-단량체의 전구체인, 하기의 구조를 갖는 적절히 보호된 (구아닌-9-일)-아세트산은 U. S. Patent No. 6,172,226에 기술된 알려진 방법 또는 그 변형된 방법에 의해 합성되었다.
Figure 112007023315465-PAT00036
R4은 벤질, 벤즈히드릴, 4-메톡시벤질, 또는 피페로닐 유도체이다.
도 11에 관하여, PNA G-단량체는 적절히 보호된 (구아닌-9-일)-아세트산과 화학식 Ⅱ의 구조를 갖는 1,3,4-티아디아졸 또는 티아졸-2-설포닐기로 보호된 기본골격의 에스테르를 커플링 제제 존재 하에서 커플링함에 의해 하기 화학식 V-g의 화합물을 얻는다:
Figure 112007023315465-PAT00037
상기 식에서 E, J, R1, R2, R3와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
화학식 V-g의 구조를 갖는 화합물은 과량의 히드록사이드 이온 소스를 첨가하여 대응하는 산으로 변환되어 하기의 화학식 Ⅵ- g 의 화합물을 얻는다:
Figure 112007023315465-PAT00038
상기 식에서 E, J, R1, R2와 R4은 앞에서 정의한 바와 같다.
도 11 에 관하여, 카르복실산의 활성화와 동시에 일어나는 고리화 반응을 통하여 화학식 I- g 의 구조를 갖는 PNA 단량체를 제조한다. 카르복실산의 활성화는 펩타이드 합성에 사용되는 일반적인 커플링 제제를 사용하거나 또는 혼성 산무수물(mixed anhydride)를 형성함으로 이루어진다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
다른 방법으로는 PNA G-단량체는 적절히 보호된(구아닌-9-일)-아세트산을 화학식 IV의 구조를 갖는 피페라진온 유도체와 커플링하여 합성할 수 있다. 반응조건과 제제는 앞에서 서술한 바와 같다.
PNA 올리고머의 제조
화학지에 이미 보고된 여러 가지 조합 합성 방법이 본 발명의 단량체를 이용한 PNA 올리고머의 합성에 일반적으로 적용될 수 있다. 이러한 방법들은 고체상 합성(solid phase synthesis) 및 용액상 합성 (solution phase synthesis)을 포함하며, 이에 국한되는 것은 아니다. 앞에서 서술된 바와 같이 PNA 단량체를 제조한 후, 폴리스티렌, CLEAR®, Tentagel®과 같은 폴리옥시에틸렌 변형된 폴리스티렌 또는 CPG(controlled pore glass)등의 적당한 고상지지체에서 고체상 합성을 통하여 PNA 올리고머를 제조한다. 고상지지체는 이와 같은 예로서 제한되는 것은 아니며, PNA 올리고머를 고정할 수 있고 잠재적으로 유리 가능한 아민작용기를 포함한다.
고체상 합성에 있어서 고상지지체와의 커플링 반응을 통하여 본 발명의 첫번째 PNA 단량체를 부착한다. 다음 과정은 원하는 PNA 올리고머 배열의 조직적인 합성과정이다. 이러한 과정은 반복된 탈보호기화/커플링/캡핑과정을 포함한다. 최종 커플링된 단량체의 기본골격의 보호기인 1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 또는 티아졸-2-설포닐기는 유기염기 존재 하에서 적당한 티올로 처리하면 정량적으로 제거되어 말단 아민기가 유리된다. 일단 PNA 올리고머 합성이 완료되면 올리고머를 양이온 포착제로 크레졸을 포함하는 TFA로 상온에서 1~2시간 동안 처리하여 고상지지체로부터 유리하며, 동시에 핵산염기의 보호기도 제거한다.
다음은 PNA 올리고머 합성에 사용되는 일반적인 반응 순환 과정이며, 어떤 올리고머 합성방법도 본 발명의 단량체를 사용하여 일반적으로 사용될 수 있기 때문에 어떤 의미에서도 본 발명을 제한하는 것은 아니다.
1. 레진의 보호기를 제거하여 아민작용기를 활성화함.
2. 말단에 보호된 아민기를 갖는 아미노산, 링커 또는 PNA 단량체를 레진에 도입함.
3. 세척.
4. 유기염기 존재하에 무수초산에 의한 캡핑 (Capping).
5. 세척.
6. 과반응한 설폰아미드의 아세틸기 제거.
7. 세척.
8. 설포닐기의 탈보호기화.
9. 세척.
10. 단량체 첨가.
11. 3 단계로 돌아가서 4에서 11단계까지 반복.
올리고머 합성을 위한 단량체의 커플링 반응에 있어서 아실화 반응은 머큐리 아세테이트, 테트라메틸암모늄 플루오라이드, 테트라에틸암모늄 플루오라이드, 테 트라부틸암모늄 플루오라이드, 벤질트리메틸암모늄 플루오라이드, 세슘 플루오라이드, 트리부틸포스핀 또는 트리페닐포스핀과 같은 촉매를 제한 없이 사용하여 가속화 될 수 있다. 바람직한 촉매로는 테트라부틸암모늄 플루오라이드이다. 또한 반응속도는 사용되는 용매와 반응온도에 의존한다. 용매의 예로는, DMF, N-메틸피롤리돈, 디메톡시에탄, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, DMSO, 테트라하이드로퓨란, 헥사메틸포스포아미드, 테트라메틸렌 설폰, 이소프로필 알콜, 에틸 알콜과 선택된 용매들의 혼합물이 포함되며 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직한 용매는 DMF이다. N-말단 아미노보호기는 용매하에서 유기염기와 티올을 사용하여 제거된다. 티올의 예로는 알칸(C2-C20)티올, 4-메톡시톨루엔티올, 4-메틸벤젠티올, 3,6-디옥사-1,8-옥탄티올, 4-클로로톨루엔티올, 벤질머캡탄, N-아세틸시스테인, N-(t-부틸옥시카르보닐)시스테인 메틸 에스테르, 메틸 3-머캡토프로피오네이트와 4-메톡시벤젠 티올이 포함되며 이에 제한되는 것은 아니다. 유기염기의 예로는 트리에틸아민, N,N-디이소프로필에틸아민, 피페리딘, N-메틸모르폴린과 1,8-디아자바이씨클로[5,4,0]운데크-7-온이 포함되며 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직한 유기염기는 N,N-디이소프로필에틸아민이다.
약어목록
t-Boc t-부틸옥시카르보닐
AOP O-(7-아조벤조트리아졸-1-일)-트리스(디메틸아미노)포스포늄
BBC 1-벤조트리아졸-1-일옥시-비스(피롤리디노)우로늄 헥사플루오로포스페이 트
BDMP 5-(1H-벤조트리아졸-1-일옥시)-3,4-디히드로-1-메틸 2H-피롤륨 헥사클로로안티모네이트
BDP 벤조트리아졸-1-일 디에틸 포스페이트
BEMT 2-브로모-3-에틸-4-메틸티아졸륨 테트라플루오로보레이트
BTFFH 비스(테트라메틸렌플루오로포름아미디늄) 헥사플루오로포스페이트
BOMI 벤조트리아졸-1-일옥시-N,N-디메칠메탄이미늄 헥사클로로안티모네이트
BOI 2-(벤조트리아졸-1-일)옥시-1,3-디메틸-이미다졸륨 헥사플루오로포스페이트
BOP벤조트리아졸일-1-옥시-트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트
BOP-Cl 비스(2-옥소-3-옥사졸리딘일)포스피닉 클로라이드
BroP 브로모트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트
CDI 카르보닐디이미다졸
CIP 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸리디늄 헥사플루오로포스페이트
DMF 디메틸포름아미드
DCC 1,3-디시클로헥실카르보디이미드
DEPBT 3-(디에톡시포스포릴옥시)-1,2,3-벤조트리아진-4(3H)-온
Dpp-Cl 디페닐포스피닉 클로라이드
EDCI 1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드
EEDQ 2-에톡시-1-에톡시카르보닐-1,2-디하이드로퀴놀린
Fmoc 9-플루오렌닐메틸옥시카르보닐
FDPP 펜타플루오로페닐 디페닐포스피네이트
HAPyU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트
HATU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HBTU O-(벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HOBt 히드록시벤조트리아졸
HOAt 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸
HODhbt 3-히드록시-3,4-디하이드로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진
HOSu 히드록시숙신이미드
HOTT S-(1-옥시도-2-피리딘일)-1,1,3,3-테트라메틸티오우로늄 헥사플루오로포스페이트
MSNT 2,4,6-메시틸렌설포닐-3-니트로-1,2,4-트리아졸리드
Mmt 4-메톡시페닐디페닐메틸
NEPIS N-에틸-5-페닐이소옥사졸늄-3'-설포네이트
PyAOP 7-아조벤조트리아졸일옥시트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트
PyBOP 벤조트리아졸일-1-옥시-트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트
PyBroP 브로모트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트
PyCloP 클로로트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트
TAPipU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-비스(펜타메틸렌)우로늄 테트라플루오로보레이트
TBTU O-(벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
TDO 2,5-디페닐-2,3-디하이드로-3-옥소-4-히드록시티오펜 디옥사이드
TFA 트리플루오로아세트산
TFFH 테트라메틸플루오로포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트
TOTT S-(1-옥시도-2피리딘일)-1,1,3,3-테트라메틸티오우로늄 테트라플루오로보레이트
TDBTU 2-(3,4-디하이드로-4-옥소-1,2,3-벤조트리아진-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
TNTU O-[(5-노르보넨-2,3-디카르복스이미도)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
TOTU O-[(시아노(에톡시카르보닐)메틸렌)아미노]-1,1,3.3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
TPTU O-(1,2-디하이드로-2-옥소-1-피리딜-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라 플루오로보레이트
TSTU O-(N-숙신이미딜)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
본 발명은 다음 실시예에서 더 상세히 설명하고 있으며 다른 언급이 없는 한 이들로 제한되는 것은 아니다.
실시예
실시예 1. N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
Will에 의해 보고된 방법(D. W. Will et al., Tetrahedron, 1995, 51, 12069)에 따라 합성된 N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염(1.4 g, 6.4 mmol)을 디클로로메탄 (50 mL)에 녹인 후 0℃에서 5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드(1.5 g, 5.1 mmol)를 가하고 나서 트리에틸아민(2.7 mL)을 천천히 적가하였다. 혼합 반응 결과물을 2시간 동안 상온에서 교반 한 후 물(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 마그네슘 설페이트로 건조하여 여과하였다. 여과액을 농축, 컬럼크로마트그라피 하여 고상의 표제 화합물(1.1 g, 2.7 mmol)을 53 %의 수율로 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.08 (d, 2H), 7.66 (d, 2H), 4.03 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.15 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 1.14 (t, 3H).
실시예 2. N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-Phenyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제의 화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.05 (d, 2H), 7.60-7.56 (m, 3H), 4.02 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.16 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 1.14 (t, 3H).
실시예 3. N-2-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터( N-2-[5-(2,5-Dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 4.03 (q, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.15 (t, 3H).
실시예 4. N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.42 (d, 2H), 8.27 (d, 2H), 6.40 (brs, 2H), 4.05 (q, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.15 (t, 3H).
실시예 5. N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2-Nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.16 (d, 1H), 7.81-7.78 (m, 3H), 4.02 (q, 2H), 3.34 (s, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.70 (t, 2H), 1.15 (t, 3H).
실시예 6. N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미 노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2-Chloro-4-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.60 (d, 1H), 8.54 (d, 1H), 8.40 (dd, 1H) 4.05 (q, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.16 (t, 3H).
실시예 7. N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2,4-Dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl- glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과과 5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.29 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.70 (dd, 1H), 5.65 (brs, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.17 (t, 3H).
실시예 8. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미 노]-에틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2- sulfonylamino]-ethyl-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.40 (d, 1H), 8.05 (dd, 1H), 8.02 (d, 1H) 4.07 (q, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.18 (t, 3H).
실시예 9. N-[2-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-methyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 4.07 (q, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.09 (t, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.62 (t, 2H), 1.18 (t, 3H).
실시예 10. N-[2-(4-메틸-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(4-methyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 4-메틸-티아졸-2-설포닐 클 로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 7.68 (s, 1H), 4.07 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.58 (t, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.18 (t, 3H).
실시예 11. N-[2-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-benzoyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 7.46 (d, 2H), 7.36-7.24 (m, 4H), 7.19-7.11 (m, 4H), 4.05 (q, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.19 (t, 2H), 2.66 (t, 2H), 1.16 (t, 3H).
실시예 12. N-[2-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-methyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-glycine ethyl ester)
N-(2-아미노에틸)-글리신 에틸 에스터 염산염과 5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐 클로라이드로부터 실시예 1과 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 7.68 (d, 2H), 7.51 (t, 2H), 7.44 (t, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.10 (t, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.63 (t, 2H), 1.16 (t, 3H).
실시예 13. N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-chlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2- sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester
N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(4.05 g, 10 mmol)를 DMF 30 mL에 녹이고, 1-히드록시벤조트리아졸 일수화물 1.68 g (11 mmol), 디시클로헥실카보디이미드 2.27 g (11 mmol)과 (티민-1-일)-아세트산 1.84 g (10 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반하였다. 침전된 디시클로헥실우레아를 여과하여 제거하고 남은 여액을 감압농축하고, 실리카겔 컬럼크로마토그라피하여 표제화합물(4.85 g, 8.5 mmol)을 85%의 수율로 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.6H), 11.26 (s, 0.4H), 9.15 (brs, 0.6H), 9.00 (brs, 0.4H), 8.07 (d, 2H), 7.67 (d, 2H), 7.31 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.65 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.31 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.03 (s, 1.2H), 3.55 (t, 1.2H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.23 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.21 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H).
실시예 14. N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-[(티민 -1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-phenyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino)- ethyl]-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.6H), 11.26 (s, 0.4H), 9.08 (brs, 1H), 8.05 (d, 2H), 7.66-7.57 (m, 3H), 7.32 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.65 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.04 (s, 1.2H), 3.56 (t, 1.2H), 3.43-3.38 (m, 2H), 3.24 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.21 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H).
실시예 15. N-2-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2,5-Dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.27 (s, 0.6H), 11.25 (s, 0.4H), 9.13 (brs, 1H), 8.26 (d, 0.4H), 8.25 (d, 0.6H), 7.81-7.74 (m, 2H), 7.32 (s, 0.6H), 7.23 (s, 0.4H), 4.63 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.16 (q, 0.8H), 4.06 (q, 1.2H), 4.04 (s, 1.2H), 3.55 (t, 1.2H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.25 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H), 1.22 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H).
실시예 16. N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.20 (s, 1H), 8.37 (d, 2H), 8.24 (d, 2H), 7.49 (s, 1H), 4.82 (s, 1.7H), 4.45 (s, 0.3H), 4.42 (s, 0.3H), 4.13 (q, 0.3H), 4.04 (q, 1.7H), 4.01 (s, 1.7H), 3.39 (t, 1.7H), 3.28 (t, 0.3H), 3.16 (t, 1.7H), 3.03 (t, 0.3H), 1.74 (s, 3H), 1.21 (t, 0.6H), 1.16 (t, 2.4H).
실시예 17. N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 9.21 (brs, 0.6H), 9.10 (brs, 0.4H), 8.26-8.21 (m, 1H), 7.97-7.89 (m, 3H), 7.33 (d, 0.6H), 7.26 (d, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.45 (s, 0.4H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.07 (s, 1.2H), 3.59 (t, 1.2H), 3.47-3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.74 (s, 3H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H).
실시예 18. N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2-chloro-4-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.6H), 11.25 (s, 0.4H), 9.16 (brs, 1H), 8.62-8.57 (m, 1H), 8.54-8.48 (m, 1H), 8.42-8.36 (m, 1H), 7.33 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.57 (t, 1.2H), 3.45- 3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.75 (s, 1.8H), 1.74 (s, 1.2H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H).
실시예 19. N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(2,4-dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.6H), 11.27 (s, 0.4H), 9.11 (brs, 1H), 8.28 (d, 0.6H), 8.27 (d, 0.4H), 8.00 (d, 0.6H), 7.98 (d, 0.4H), 7.72-7.68 (m, 1H), 7.33 (s, 0.6H), 7.25 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.57 (t, 1.2H), 3.45-3.39 (m, 2H), 3.26 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H), 1.25 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H).
실시예 20. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)- acetyl]-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 (티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 9.20 (brs, 1H), 8.41-8.40 (m, 1H), 8.07-7.97 (m, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.26 (s, 0.4H), 4.67 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.33 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (q, 1.2H), 4.06 (s, 1.2H), 3.58 (t, 1.2H), 3.46-3.40 (m, 2H), 3.28 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H), 1.24 (t, 1.2H), 1.18 (t, 1.8H).
실시예 21. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(benzhydryloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸에스터와 [4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.97 (s, 1H), 9.16 (brs, 1H), 8.40 (d, 0.6H), 8.38 (d, 0.4H), 8.06-7.94 (m, 2H), 7.91 (d, 0.6H), 7.85 (d, 0.4H), 7.45 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.96-6.93 (m, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.81 (s, 1.2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.36 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.07 (s, 1.2H), 4.06 (q, 1.2H), 3.61 (t, 1.2H), 3.48-3.40 (m, 2H), 3.27 (t, 0.8H), 1.25 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H).
실시예 22. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터 (N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(benzhydryloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.90 (s, 0.45H), 10.89 (s, 0.55H), 9.30 (brs, 0.55H), 9.12 (brs, 0.45H), 8.59 (s, 0.45H), 8.58 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.55H), 8.38 (d, 0.45H), 8.34 (s, 0.55H), 8.33 (s, 0.45H), 8.02-7.97 (m, 1H), 7.92 (d, 0.55H), 7.89 (d, 0.45H), 7.53 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.39 (s, 1.1H), 5.18 (s, 0.9H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.09 (s, 1.1H), 4.03 (q, 1.1H), 3.73 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.29 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H).
실시예 23. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[2-N-(benzhydryloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.65 (brs, 1H), 11.25 (s, 0.45H), 11.23 (s, 0.55H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s,1H), 8.03-7.91 (m, 2H), 7.82 (s, 0.55H), 7.80 (s, 0.45H), 7.46 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.30 (dt, 2H), 6.87 (s, 1H), 5.15 (s, 1.1H), 4.96 (s, 0.9H), 4.47 (s, 0.9H), 4.22 (q, 0.9H), 4.10 (s, 1.1H), 4.09 (q, 1.1H), 3.69 (t, 1.1H), 3.52 (t, 0.9H), 3.45 (t, 1.1H), 3.29 (t, 0.9H), 1.26 (t, 1.35H), 1.16 (t, 1.65H).
실시예 24. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글 리신 에틸 에스터와 [4-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.69 (s, 1H), 9.21 (brs, 0.6H), 9.09 (brs, 0.4H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.36 (d, 2H), 7.02 (d, 0.6H), 7.01 (d, 1H), 6.94 (d, 2H), 5.12 (s, 2H), 4.81 (s, 1.2H), 4.64 (s, 0.8H), 4.37 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.08 (q, 1.2H), 3.76 (s, 3H), 3.62 (t, 1.2H), 3.47 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.28 (t, 0.8H), 1.24 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H).
실시예 25. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐l)-아데닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.56 (s, 1H), 10.59 (s, 0.55H), 9.31 (brs, 0.55H), 9.11 (brs, 0.45H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.40 (d, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.31 (s, 0.55H), 8.30 (s, 0.45H), 8.03-7.99 (m, 1H), 7.93 (d, 0.55H), 7.91 (d, 0.45H), 7.39 (d, 1H), 6.95 (d, 2H), 5.38 (s, 1.1H), 5.17 (s, 0.9H), 5.14 (s, 2H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.76 (s, 3H), 3.72 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.29 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H).
실시예 26. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터( N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[2-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [2-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.39 (brs, 0.45H), 11.36 (brs, 0.55H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.95 (d, 0.55H), 7.92 (d, 0.45H), 7.82 (s, 0.55H), 7.79 (s, 0.45H), 7.37 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.17 (s, 2H), 5.13 (s, 1.1H), 4.93 (s, 0.9H), 4.45 (s, 0.9H), 4.21 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.76 (s, 3H), 3.66 (t, 1.1H), 3.49 (t, 1.1H), 3.43 (t, 0.9H), 3.28 (t, 0.9H), 1.25 (t, 1.35H), 1.16 (t, 1.65H).
실시예 27. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(piperonyloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1H), 9.22 (brs, 0.6H), 9.08(brs, 0.4H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.02 (d, 0.6H), 7.00 (d, 0.4H), 6.99 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.81 (s, 1.2H), 4.64 (s, 0.8H), 4.37 (s, 0.8H), 4.18 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.08 (q, 1.2H), 3.62 (t, 1.2H), 3.47 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.28 (t, 0.8H), 1.24 (t, 1.2H), 1.17 (t, 1.8H).
실시예 28. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(피페노닐옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(piperonyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 [6-N-(피페로닐옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.60 (s, 0.45H), 10.59 (s, 0.55H), 9.31 (brs, 0.55H), 9.11 (brs, 0.45H), 8.58 (s, 0.45H), 8.57 (s, 0.55H), 8.40 (d, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.32 (s, 0.55H), 8.31 (s, 0.45H), 8.03-7.98 (m, 1H), 7.93 (d, 0.55H), 7.90 (d, 0.45H), 7.05 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.38 (s, 1.1H), 5.17 (s, 0.9H), 5.11 (s, 2H), 4.48 (s, 0.9H), 4.23 (q, 0.9H), 4.08 (s, 1.1H), 4.07 (q, 1.1H), 3.73 (t, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45 (t, 0.9H), 3.30 (t, 0.9H), 1.27 (t, 1.35H), 1.15 (t, 1.65H).
실시예 29. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터 (N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[2-N-(piperonyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine ethyl ester)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터와 N-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.37 (brs, 0.4H), 11.35 (brs, 0.6H), 9.20 (brs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.03-7.99 (m, 1H), 7.95 (d,0.6H), 7.92 (d, 0.4H), 7.82 (s, 0.6H), 7.79 (s, 0.4H), 7.01 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.14 (s, 3.2H), 4.93 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.21 (q, 0.8H), 4.08 (s, 1.2H), 4.07 (q, 1.2H), 3.65 (t, 1.2H), 3.48 (t, 1.2H), 3.43 (t, 0.8H), 3.27 (t, 0.8H), 1.25 (t, 1.2H), 1.16 (t, 1.8H).
실시예 30. N-[2-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신 에틸 에스터( N-[2-(5-Benzoyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)- ethyl]-N-(thymine-1-yl-acetyl)-glycine ethyl ester)
N-[2-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터와 N-(티민-1일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.26 (s, 0.6H), 11.24 (s, 0.4H), 8.90 (brs, 0.6H), 8.78 (brs, 0.4H), 7.72 (d, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 4H), 4.61 (s, 1.2H), 4.48 (s, 0.8H), 4.32 (s, 0.8H), 4.15 (q, 0.8H), 4.06 (s, 1.2H), 4.05 (q, 0.8H), 3.56 (t, 1.2H), 3.44 (t, 2H), 3.30 (t, 0.8H), 1.72 (s, 1.8H), 1.71 (s, 1.2H), 1.21 (t, 1.2H), 1.15 (t, 1.8H).
실시예 31. N-[2-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신 에틸 에스터(N-[2-(5-Methyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)- ethyl]-N-(thymine-1-yl-acetyl)-glycine ethyl ester)
N-[2-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터와 N-(티민-1-일)-아세트산으로부터 실시예 13과 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 1.26 (s, 1H), 8.58 (brs, 0.6H), 8.50 (brs, 0.4H), 7.68 (d, 2H), 7.53-7.47 (m, 3H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.27 (s, 0.6H), 7.25 (s, 4H), 4.60 (s, 1.2H), 4.47 (s, 0.8H), 4.29 (s, 0.8H),4.13 (q, 0.8H), 4.05 (q, 0.8H), 4.04 (s, 1.2H), 3.52 (t, 1.2H), 3.40 (t, 0.8H), 3.34 (t, 1.2H), 3.17 (t, 0.8H), 2.64 (s, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.20 (t, 1.2H), 1.15 (t, 1.8H).
실시예 32. N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(4-Chlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]- ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터(2.85 g, 5.0 mmol)를 테트라히드로퓨란 10 mL과 물 20 mL의 혼합액에 현탁시키고 수산화 리튬 일수화물(0.84g, 20 mmol)을 가하고 이 반응 혼합액을 10분간 상온에서 교반하였다. 박층크로마토그라피로 반응이 완결된 것을 확인한 후, 물 20 mL을 가하고 나서 1N 염산으로 pH가 3.0 내지 3.5가 되도록 조절하였다. 침전된 고형물을 여과, 물로 세척, 질소가스로 건조하여 90%의 수율로 표제화합물(2.44 g, 4.5 mmol)을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.5H), 11.24 (s, 0.5H), 8.09-8.05 (m, 2H), 7.68-7.65 (m, 2H), 7.31 (s, 0.5H), 7.24 (s, 0.5H), 4.64 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 3.54 (t, 1H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.25 (t, 1H), 1.73 (s, 1.5H), 1.71 (s, 1.5H)
실시예 33. N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-[(티민-1-일-아세틸]-글리신(N-[2-(5-Phenyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-N-[(thymin-1- yl)-acetyl]-glycine)
N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.55H), 11.25 (s, 0.45H), 9.05 (brs, 1H), 8.05 (d, 2H), 7.68-7.57 (m, 3H), 7.32 (s, 0.55H), 7.24 (s, 0.45H), 4.64 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.20 (s, 0.9H), 3.97 (s, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.45-3.37 (m, 2H), 3.24 (t, 0.9H), 1.74 (s, 1.1H), 1.73 (s, 0.9H)
실시예 34. N-2-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]- 에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(2,5-Dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole- 2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.27 (s, 0.6H), 11.24 (s, 0.4H), 9.13 (brs, 1H), 8.26 (d, 0.4H), 8.25 (d, 0.6H), 7.82-7.25 (m, 2H), 7.32 (s, 0.6H), 7.24 (s, 0.4H), 4.62 (s, 1.2H), 4.45 (s, 0.8H), 4.20 (s, 0.8H), 3.97 (s, 1.2H), 3.54 (t, 1.2H), 3.43-3.37 (m, 2H), 3.26 (t, 0.8H), 1.73 (s, 3H).
실시예 35. N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(4-Nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2- sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일) 아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 12.85 (brs, 1H), 11.29 (s, 0.5H), 11.25 (s, 0.5H), 8.43-8.39 (m, 2H), 8.36-8.32 (m, 2H), 7.33 (s, 0.5H), 7.25 (s, 0.5H), 4.65 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.56 (t, 1H), 3.42 (t, 2H), 3.27 (t, 1H), 3.03 (t, 0.3H), 1.75 (s, 1.5H), 1.74 (s, 1.5H).
실시예 36. N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(2-Nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]- ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일) 아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 12.95 (brs, 1H), 11.30 (s, 0.55H), 11.28 (s, 0.45H), 9.22 (brs, 0.55H), 9.08 (brs, 0.45H), 8.27-8.23 (m, 1H), 7.99-7.89 (m, 3H), 7.34 (s, 0.55H), 7.27 (s, 0.45H), 4.67 (s, 1.1H), 4.48 (s, 0.9H), 4.24 (s, 0.9H), 4.00 (s, 1.1H), 3.57 (t, 1H), 3.47- 3.41 (m, 2H), 3.33 (t, 0.9H), 1.75 (s, 3H),
실시예 37. N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(2-chloro-4-nitrophenyl)-1,3,4- thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일) 아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.55H), 11.24 (s, 0.45H), 9.26 (brs, 1H), 8.62-8.57 (m, 1H), 8.55-8.48 (m, 1H), 8.43-8.36 (m, 1H), 7.34 (s, 0.55H), 7.24 (s, 0.45H), 4.65 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.20 (s, 0.9H), 3.99 (s, 1.1H), 3.56 (t, 1.1H), 3.46-3.39 (m, 2H), 3.29 (t, 0.9H), 1.75 (s, 1.1H), 1.73 (s, 0.9H)
실시예 38. N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(2,4-dichlorophenyl)-1,3,4- thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일) 아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.28 (s, 0.5H), 11.25 (s, 0.5H), 9.23 (brs, 1H), 8.29 (d, 0.5H), 8.27 (d, 0.5H), 7.99 (d, 0.5H), 7.97 (d, 0.5H), 7.72-7.67 (m, 1H), 7.34 (s, 0.5H), 7.25 (s, 0.5H), 4.65 (s, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.56 (t, 1H), 3.45-3.38 (m, 2H), 3.28 (t, 1H), 1.73 (s, 3H)
실시예 39. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미 노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(N-2-[5-(4-chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4- thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[(thymin-1-yl)-acetyl]-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일) 아세틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.29 (s, 0.5H), 11.27 (s, 0.5H), 9.28 (brs, 1H), 8.41-8.39 (m, 1H), 8.06-7.97 (m, 2H), 7.33 (s, 0.5H), 7.26 (s, 0.5H), 4.66 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.57 (t, 1H), 3.46-3.39(m, 2H), 3.29 (t, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.74 (s, 1H)
실시예 40. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(benzhydryloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.95 (brs, 1H), 9.16 (brs, 1H), 8.39 (d, 0.45H), 8.37 (d, 0.55H), 8.06-7.94 (m, 2H), 7.91 (d, 0.45H), 7.84 (d, 0.55H), 7.45 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.94 (d, 0.45H), 6.90 (d, 0.55H), 6.80 (s, 1H), 4.79 (s, 0.9H), 4.58 (s, 1.1H), 4.07 (s, 0.9H), 3.98 (s, 1.1H), 3.56 (t, 1.1H), 3.46 (t. 0.9H), 3.41 (t, 1.1H), 3.30 (t, 0.9H)
실시예 41. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(benzhydryloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 8.57 (s, 0.4H), 8.56 (s, 0.6H), 8.38 (d, 0.4H), 8.35 (d, 0.6H), 8.34 (s, 0.4H), 8.32 (s, 0.6H), 8.01-7.91 (m, 1.4H), 7.82 (d, 0.6H), 7.54 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.37 (s, 0.8H), 5.11 (s, 1.2H), 4.12 (s, 1.2H), 3.97 (s, 0.8H), 3.78 (t, 0.8H), 3.54 (t, 0.8H), 3.44 (t, 1.2H), 3.33 (t, 1.2H).
실시예 42. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4- Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[2-N-(benzhydryloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.20 (brs, 1H), 8.38 (d, 0.3H), 8.35 (d, 0.7H), 8.04-7.79 (m, 3H), 7.81 (d, 1H), 7.46 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.28 (dt, 2H), 6.86 (s, 0.3H, 6.85 (s, 0.7H), 5.13 (s, 0.6H), 4.89 (s, 1.4H), 4.02 (s, 1.4H), 3.96 (s, 0.6H), 3.66 (t, 0.6H), 3.51 (t, 0.6H), 3.44 (t, 1.4H), 3.34 (t, 1.4H)
실시예 43. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(4-메톡시벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(4-methoxybenzhydryloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(4-메톡시벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.71 (brs, 1H), 8.40 (s, 0.5H), 8.38 (s, 0.5H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.92 (d, 0.5H), 7.85 (d, 0.5H), 7.36 (d, 2H), 7.02 (d, 0.5H), 6.98 (d, 0.5H), 6.94 (d, 2H), 5.11 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.98 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.59 (t, 1H), 3.47 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H)
실시예 44. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노-에틸-N-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노-에틸-N-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-아데닌9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.56 (s, 1H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.38 (d, 0.55H), 8.31 (s, 0.45H), 8.30 (s, 0.55H), 8.02-7.96 (m, 1H), 7.93 (d, 0.45H), 7.87 (d, 0.55H), 7.39 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.37 (s, 0.9H), 5.14 (s, 2H), 5.13 (s, 1.1H), 4.27 (s, 1.1H), 4.00 (s, 0.9H), 3.76 (s, 3H), 3.71 (t, 0.9H), 3.54 (t, 0.9H), 3.44 (t, 1.1H), 3.31 (t, 1.1H).
실시예 45. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미 노-에틸-N-[2-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[2-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노-에틸-N-[2-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.38 (s, 1H), 11.35 (brs, 1H), 9.30 (brs, 0.5H), 9.12 (brs, 0.5H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.95 (d, 0.5H), 7.92 (d, 0.5H), 7.82 (s, 0.5H), 7.79 (s, 0.5H), 7.37 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.17 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.65 (t, 1H), 3.50 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H).
실시예 46. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노-에틸-N-[4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[4-N-(piperonyloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노-에틸-N-[4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.71 (brs, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.95 (m, 2H), 7.92 (d, 0.5H), 7.85 (d, 0.5H), 7.00 (d, 0.5H), 6.99 (s, 1H), 6.98 (d, 0.5H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.60 (t, 1H), 3.46 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.29 (t, 1H).
실시예 47. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(피페로닐옥시카보닐)-아데닌-9-일-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(piperonyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(피페로닐옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.59 (s, 1H), 8.57 (s, 0.45H), 8.56 (s, 0.55H), 8.39 (d, 0.45H), 8.37 (d, 0.55H), 8.32 (s, 0.45H), 8.30 (s, 0.55H), 8.02-7.96 (m, 1H), 7.93 (d, 0.45H), 7.86 (d, 0.55H), 7.05 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.37 (s, 0.9H), 5.13 (s, 1.1H), 5.12 (s, 2H), 4.21 (s, 1.1H), 3.99 (s, 0.9H), 3.71 (t, 0.9H), 3.54 (t, 0.9H), 3.44 (t, 1.1H), 3.32 (t, 1.1H).
실시예 48. N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸-글리신(N-2-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]-ethyl-N-[6-N-(piperonyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl-glycine)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일-아세틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.50 (brs, 1H), 11.35 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.03-7.94 (m, 2.5H), 7.90 (d, 0.5H), 7.82 (s, 0.5H), 7.79 (s, 0.5H), 7.01 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.14 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.65 (t, 1H), 3.50 (t, 1H), 3.42 (t, 1H), 3.30 (t, 1H).
실시예 49. N-[2-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신(N-[2-(5-Benzoyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-N- (thymine-1-yl-acetyl)-glycine)
N-[2-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.25(s, 0.55H), 11.21 (s, 0.45H), 8.96 (brs, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 4H), 4.60 (s, 1.1H), 4.46 (s, 0.9H), 4.17 (s, 0.9H), 3.99 (s, 1.1H), 3.54 (t, 1.1H), 3.44 (t, 2H), 3.31 (t, 0.9H), 1.73 (s, 1.65H), 1.71 (s, 1.35H)
실시예 50. N-[2-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신(N-[2-(5-Methyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-N- (thymine-1-yl-acetyl)-glycine)
N-[2-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 32와 같은 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 8.61 (brs, 0.55H), 8.56 (brs, 0.45H), 7.68 (d, 2H), 7.53-7.47 (m, 2H), 7.46-7.40 (m, 1H), 7.27 (s, 0.55H), 7.24 (s, 45H), 4.58 (s, 1.1H), 4.45 (s, 0.9H), 4.17 (s, 0.9H), 3.97 (s, 1.1H), 3.49 (t, 1.1H), 3.38 (t, 0.9H), 3.33 (t, 1.1H), 3.17 (t, 0.9H), 2.63 (s, 3H), 1.73 (s, 3H).
실시예 51. N-[2-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신(N-[2-(5-Methyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]- N-(tert-butoxycarbonyl)-glycine)
N-[2-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터(616 mg, 2 mmol)의 테트라히드로푸란(10 mL) 용액에 수산화리튬 일수화물(252 mg, 6mmol)의 수용액(3mL)을 첨가하였다. 상온에서 1시간 교반 후, 디-t-부틸 디카보네이트(655 mg, 3 mmol)를 첨가하였다. 반응혼합물을 30분 동안 교반하고, 박층크로마토그라피로 반응의 완결을 확인한 후, 테트라히드로퓨란을 감압하에서 제거하고 남은 용액을 에테르(100 mL)로 세척하였다. 수층을 2N 염산으로 pH 3이 되게 조절한 후 디클로로메탄(50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 무수 마그네슘 설페이트로 건조하고 여과하였다, 여액을 감압하에서 농축하여 표제의 화합물을 얻었다(690 mg, 91 %). 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 8.82 (brs, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.28 (t, 2H), 3.21~3.16 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 1.38 (s, 4.5H), 1.33 (s, 4.5H).
실시예 52. N-[2-(4-메틸-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신(N-[2-(4-Methyl-thiazole-2-sulfonylamino)-ethyl]-N-(tert-butoxycarbonyl)-glycine)
N-[2-(4-메틸-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-글리신 에틸 에스터로부터 실시 예 51과 같은 방법으로 표제 화합물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 12.50 (brs, 1H), 8.29 (s, 0.5H), 8.27 (s, 0.5H), 7.59 (s, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.14 (t, 2H), 3.06~2.98 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.27 (s, 4.5H), 1.23 (s, 4.5H).
실시예 53. N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신(N-2-[5-(4-chlorophenyl)-methyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonylamino]- ethyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-glycine)
N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-글리신 에틸 에스터로부터 실시예 51과 같은 방법으로 표제 화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 9.01 (brs, 1H), 8.11-8.08 (m, 2H), 7.68 (d, 2H), 3.84 (s, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.30-3.23 (m, 4H), 1.38 (s, 4.5H), 1.30 (4.5H).
실시예 54. 1-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐)-피페라진-2-온, 트리플루오르 아세트산 염(1-(5-methyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl)-piperazin-2-one, trifluoroacetic acid salt)
N-[2-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신 (760 mg, 2 mmol)의 디클로로메탄(10 mL) 용액에 디시클로헥실카르보디 이미드 (516 mg, 2.5 mmol)를 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 침점물을 여과제거 하였다. 여액을 약 3 mL 정도로 농축하고 0℃로 냉각하고 여기에 트리플루오로 아세트산(2 mL)을 첨가하였다. 혼합액을 동일한 온도에서 2시간 교반 후, 디에틸 에테르(10 mL)를 천천히 가하였다. 침전된 생성물을 여과하고 디에틸 에테르로 세척 및 감압 하에서 건조하여 백색 고체로서 표제화합물을 얻었다(602 mg, 80 %). 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.13 (brs, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.54 (t, 2H), 2.87 (s, 3H).
실시예 55. 1-(4-메틸-티아졸-2-설포닐)-피페라진-2-온, 트리플루오로 아세트산 염(1-(4-methyl-thiazole-2-sulfonyl)-piperazin-2-one, trifluoroacetic acid salt)
N-[2-(4-메틸-티아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신으로부터 실시예 54와 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 9.20 (brs, 2H), 7.94 (s, 1H), 4.08 (t, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.52 (t, 2H), 2.46 (s, 3H).
실시예 56. 1-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-피페라진-2-온, 트리플루오르 아세트산(1-[5-(4-Chlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2- sulfonyl]-piperazin-2-one, trifluoroacetic acid salt)
N-2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-(tert-부톡시카보닐)-글리신으로부터 실시예 54와 같은 방법으로 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 9.37 (brs, 2H), 8.15 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 4.14 (t, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 1.41 (s, 9H).
실시예 57. 1-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin- 1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염(0.21 g, 1.1 mmol)을 N-{2-[5-(4-클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸}-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신(0.54 g, 1.0 mmol)의 DMF 용액(5 mL)에 첨가하였다. 반응 혼합액을 상온에서 3시간 교반하고 여기에 물 50 mL을 첨가하였다. 침전된 고형물을 여과, 물로 세척, 질소가스로 건조하여 표제화합물을 얻었다(0.45 g, 0.86 mmol, 86%). 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.29 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 8.13 (d, 2H), 7.68 (d, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.57 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.29 (s, 1.2H), 4.16 (t, 1.2H), 4.02 (t, 0.8H), 3.94 (t, 1.2H), 3.84 (t, 0.8H), 1.74(s, 3H).
실시예 58. 1-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐)-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-(5-Phenyl-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl)-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]- piperazin-2-one)
N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신 (1.02 g, 2 mmol)의 테트라히드로푸란 용액에(50 mL) N-메틸몰폴린(3.3 mL, 3 mmol)을 첨가하고 반응물을 -20℃까지 냉각하였다. 같은 온도에서 5분간 교반 후, 이소부틸 클로로포르메이트(3.4 mL, 26 mmol)를 반응 혼합액에 첨가하였다. 반응 혼합물의 온도를 1시간 동안 서서히 0℃로 올렸다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축 한 후 에틸 아세테이트와 아세토 니트릴의 혼합액에 녹였다. 용액을 소금용액으로 세척 후 무수 마그네슘 설페이트로 건조, 여과하였다. 여과액을 감압하에서 농축하고, 테트라하이드로퓨란/에틸 에테르(1/1, v/v)로 처리하여 고체를 침전시켰다. 침전된 고체를 여과제거, 에틸 에테르로 세척, 감압하에서 건조하여 표제화합물을 얻었다(883 mg, 90 %). 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.10 (d, 2H), 7.68-7.57 (m, 3H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.30(s, 1.2H), 4.17 (t, 1.2H), 4.02 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.85 (t, 0.8H), 1.73(s, 3H).
실시예 59. 1-[5-(2,5-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민- 1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(2,5-Dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-[2-(5-페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노)-에틸]-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30 (s, 0.6H), 11.28 (s, 0.4H), 8.31 (s, 1H), 7.85-7.75 (m, 2H), 7.33 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.43 (s, 0.8H), 4.30 (s, 1.2H), 4.18 (t, 1.2H), 4.04 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.85 (t, 0.8H), 1.74 (s, 3H).
실시예 60. 1-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30(s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.44-8.39(m, 4H), 7,34(s, 0.6H), 7.25(s, 0.4H), 4.69(s, 1.2H), 4.59(s, 0.8H), 4.45(s, 0.8H), 4.31 (s, 1.2H), 4.18(t, 1.2H), 4.05(t, 0.8H), 3.97(t, 1.2H), 3.86(t, 0.8H), 1.75(s, 3H).
실시예 61. 1-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.31(s, 1H), 8.27-8.24(m, 1H), 7.99-7.90 (m, 3H), 7,35(s, 0.6H), 7.30(s, 0.4H), 4.69(s, 1.2H), 4.61 (s, 0.8H), 4.49 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21(t, 1.2H), 4.07(t, 0.8H), 3.98 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 1.75(s, 3H).
실시예 62. 1-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(2-chloro-4-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(2-클로로-4-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.31 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.65-8.55 (m, 2H), 8.44-8.37 (m, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.59 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.32 (s, 1.2H), 4.20 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 3.97 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H), 1.75(s, 3H).
실시예 63. 1-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(2,4-dichlorophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(2,4-디클로로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 8.35 (d, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.68 (s, 1.2H), 4.59 (s, 0.8H), 4.45 (s, 0.8H), 4.31 (s, 1.2H), 4.19 (t, 1.2H), 4.05 (t, 0.8H), 3.96 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H), 1.75 (s, 3H).
실시예 64. 1-(4-메틸-티아졸-2-설포닐)-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-(4-methyl-thiazole-2-sulfonyl)-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
4-(4-메틸-티아졸-2-설포닐)-피페라진-2-온 트리플루오르 아세트산 염 0.30 g (0.8 mmol), (티민-1-일)-아세트산 0.147 g (0.8 mmol) 및 PyBOP 0.458 g을 DMF 3 mL에 첨가하고 반응 혼합액을 상온에서 4시간 교반 하였다. 거의 모든 용매를 감 압하에서 제거하고, 잔사를 디클로로메탄에 녹였다. 이 용액을 포화 탄산수소나트륨 용액, 물, 1N 염산 및 소금물로 세척하였다. 유기층을 농축하여 실리카겔 컬럼크로마토그라피 하여 표제 화합물 0.19 g(56%)을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.33 (s, 0.6H), 11.31 (s, 0.4H), 7.90 (d, 1H), 7.35 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.39 (s, 0.8H), 4.25 (s, 1.2H), 4.13 (t, 1.2H), 3.98 (t, 0.8H), 3.90 (t, 1.2H), 3.79 (t, 0.8H), 2.45 (s, 3H), 1.74 (s, 3H).
실시예 65. 1-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐)-4-[(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-(4-methyl-thiazole-2-sulfonyl)-4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
4-(5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐)-피페라진-2-온 트리플루오르 아세트산 염으로부터 실시예 64의 방법에 의해 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.31 (s, 1H), 7.34 (s, 0.6H), 7.28 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.41 (s, 0.8H), 4.28 (s, 1.2H), 4.14 (t, 1.2H), 3.99 (t, 0.8H), 3.92 (t, 1.2H), 3.82 (t, 0.8H), 2.86 (s, 3H), 1.74 (s, 3H).
실시예 66. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐)-4- [(티민-1-일)-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]- 4-[(thymin-1-yl)-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[(티민-1-일)-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57에 의해 표제화합물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.31 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.35 (s, 0.6H), 7.29 (s, 0.4H), 4.69 (s, 1.2H), 4.61 (s, 0.8H), 4.48 (s, 0.8H), 4.37 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.07 (t, 0.8H), 3.98 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 1.76(s, 3H).
실시예 67. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[4-N-(benzhydryloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 8.42 (s, 1H), 8.06-7.95 (m, 2H), 7.90 (d, 0.6H), 7.86 (d, 0.4H), 7.46 (d, 4H), 7.37 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.96 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.83 (s, 1.2H), 4.76 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.01 (t, 1.2H), 3.87 (t, 0.8H).
실시예 68. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[6-N-(benzhydryloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.43 (s, dH), 8.33 (d, 0.6H), 8.31 (d, 0.4H), 8.07-7.98 (m, 2H), 7.53 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.29 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.41 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.27 (t, 1.2H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.90 (t, 0.8H).
실시예 69. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[2-N-(benzhydryloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(벤즈히드릴옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.06-7.93 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.46 (d, 4H), 7.38 (t, 4H), 7.30 (t, 2H), 6.86 (s, 1H), 5.17 (s, 1.2H), 5.09 (s, 0.8H), 4.60 (s, 0.8H), 4.36 (s, 1.2H), 4.25 (t, 1.2H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.89 (t, 0.8H).
실시예 70. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[4-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[4-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.69 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.07-7.96 (m, 2H), 7.90 (d, 0.6H), 7.87 (d, 0.4H), 7.36 (d, 2H), 7.03 (d, 1H), 6.94 (d, 2H), 5.11 (s, 2H), 4.83 (s, 1.2H), 4.75 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.01 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H).
실시예 71. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[6-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.57 (s, 1H), 8.59 (s, 0.6H), 8.58 (s, 0.4H), 8.43 (s, 0.4H), 8.42 (s, 0.6H), 8.31 (s, 0.6H), 8.29 (s, 0.4H), 8.04-8.00 (m, 2H), 7.39 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.40 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 5.14 (s, 2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.28 (t, 1.2H), 4.11 (t, 1.2H), 4.08 (t, 0.8H), 3.90 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H).
실시예 72. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[2-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[2-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(4-메톡시벤질옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.38 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.82 (s, 0.6H), 7.80 (s, 0.4H), 7.38 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 5.18 (s, 2H), 5.15 (s, 1.2H), 5.07 (s, 0.8H), 4.60 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.25 (t, 1.2H), 4.12-4.05 (m, 2H), 3.89 (t, 0.8H), 3.76 (s, 3H).
실시예 73. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[4-N-(piperonyloxycarbonyl)-cytosin-1-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[4-N-(피페로닐옥시카보닐)-시토신-1-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz ; DMSO-d6) δ 10.71 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.07-7.95 (m, 2H), 7.91 (d, 0.6H), 7.87 (d, 0.4H), 7.02 (d, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.02 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 4.84 (s, 1.2H), 4.76 (s, 0.8H), 4.52 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.21 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 4.02 (t, 1.2H), 3.88 (t, 0.8H).
실시예 74. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[6-N-(피페로닐옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[6-N-(piperonyloxycarbonyl)-adenin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[6-N-(피페로닐옥시카보닐)-아데닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H), 8.59 (s, 0.6H), 8.58 (s, 0.4H), 8.43 (s, 0.4H), 8.42 (s, 0.6H), 8.31 (s, 0.6H), 8.30 (d, 0.4H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.02 (s, 2H), 5.40 (s, 1.2H), 5.31 (s, 0.8H), 5.11 (s, 2H), 4.63 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.28 (t, 1.2H), 4.12 (t, 0.8H), 4.08 (t, 1.2H), 3.90 (t, 0.8H).
실시예 75. 1-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐]-4-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-피페라진-2-온(1-[5-(4-Chloro-2-nitrophenyl)-1,3,4-thiadiazole-2-sulfonyl]-4-[2-N-(piperonyloxycarbonyl)-guanin-9-yl]-acetyl]-piperazin-2-one)
N-2-[5-(4-클로로-2-니트로페닐)-1,3,4-티아디아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-[2-N-(피페로닐옥시카보닐)-구아닌-9-일]-아세틸]-글리신으로부터 실시예 57의 방 법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.38 (brs, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.09-7.99 (m, 2H), 7.82 (s, 0.6H), 7.80 (s, 0.4H), 7.01 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.03 (s, 2H), 5.14 (s, 3.2H), 5.07 (s, 0.8H), 4.59 (s, 0.8H), 4.35 (s, 1.2H), 4.24 (t, 1.2H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.88 (t, 0.8H).
실시예 76. 1-(5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐]-4-(티민-1-일-아세틸)-피페라진-2-온(1-(5-Benzoyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonyl)-4-(thymine-1-yl-acetyl)-piperazin-2-one)
N-[2-[5-벤조일-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30(s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 7.76-7.72 (m, 2H), 7.59 (t, 1H), 7.47 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.34-7.26 (m, 4H), 4.66(s, 1.2H), 4.60 (s, 0.8H), 4.47 (s, 0.8H), 4.33 (s, 1.2H), 4.20 (t, 1.2H), 4.06 (t, 0.8H), 3.95 (t, 1.2H), 3.84 (t, 0.8H), 1.73 (s, 1.65H), 1.74 (s, 3H).
실시예 77. 1-(5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐]-4-(티민-1-일-아세틸)-피페라진-2-온(1-(5-methyl-4-phenyl-thiazole-2-sulfonyl)-4-(thymine-1-yl-acetyl)- piperazin-2-one)
N-[2-[5-메틸-4-페닐-티아졸-2-설포닐아미노]-에틸-N-(티민-1-일-아세틸)-글리신으로부터 실시예 57의 방법으로 표제화합물을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz ; DMSO-d6) δ 11.30 (s, 0.6H), 11.29 (s, 0.4H), 7.69 (d, 2H), 7.52 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (s, 0.6H), 7.27 (s, 0.4H), 4.66 (s, 1.2H), 4.58 (s, 0.8H), 4.42 (s, 0.8H), 4.28 (s, 1.2H), 4.17 (t, 1.2H), 4.03 (t, 0.8H), 3.92 (t, 1.2H), 3.81 (t, 0.8H), 2.68 (s, 3H), 1.74 (s, 3H).
PNA 올리고머의 고체상 합성
일반적 합성 방법
PNA 올리고머 합성은 아민 작용기를 갖는 교차 결합된 에틸레이트 아크릴레이트 레진인 CLEAR-Base 레진(Peptide international)에서 수동으로 합성 되었다. 레진을 DMF 용매 하에서 커플링제제로 HBTU를 사용하여 PAL링커 (5-[4-(9-플루오렌일메틸옥시카르보닐)아미노-3,5-디메톡시페녹시]펜타노익산, Advanced ChemTech)와 반응시켰다. 레진을 20% 피페리딘의 DMF 용액으로 처리하여 PNA 올리고머 합성을 위해 PAL 링커의 아민 작용기를 활성화하였다. PNA 올리고머는 다음 합성 과정에 의해 합성 되었다. 모든 레진의 반응과 세척은 프릿화된(fritted) 반응기에서 진행 되었다.
다음 합성법은 PNA 올리고머의 고체상 합성법으로 제한되는 것은 아니다.
1. 10 당량의 적당한 단량체 (0.4M in 0.5M 아세트산 in DMF)로 2시간 동안 커플링.
2. DMF로 세번 세척
3. 무수 아세트산으로 (5 % 무수아세트산과 6 % 루티딘의 DMF 용액)로 5분간 캡핑.
4. DMF로 두번 세척
5. 피페리딘(1M 피페리딘의 DMF 용액)으로 5분간 반응 하여 설폰아미드에 과아세틸화된 아세틸기 제거
6. DMF로 세번 세척.
7. 4-메톡시벤젠티올로 15분간 반응하여 티아졸 또는 티아디아졸-2-설포닐기의 탈 보호화
8. DMF로 세번 세척
마지막 티아졸 또는 티아디아졸-2-설포닐기를 제거한 후 레진을 DMF로 3회, 디클로로메탄으로 2회 세척한 후 건조하였다. 1.5시간 동안 25%의 m-크레졸이 혼합된 트리플루오로 아세트산을 처리하여 핵산염기의 엑소싸이클릭 아민의 보호기 제거와 탈레진 반응을 동시에 수행하였다. 레진을 여과하고 TFA로 씻어 주었다. 여과액을 질소가스로 불어서 대부분의 TFA를 제거하였다. 잔여액을 에틸 에테르에 분산 시키고 원심분리하였다. 상층액을 경사하여 제거하였다. 분리된 고체를 다시 한번 에틸 에테르에 분산시키고 원심분리와 상층액 제거의 과정으로 세척하고 건조하여 PNA 올리고머를 얻었다. 얻어진 조 PNA 올리고머를 HPLC로 분석하고 MALDI-TOF (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight)로 분자량을 확인 하였다.
실시예 78. PNA 올리고머 서열 H2N-CGCTA-H의 합성
화학식 I에서 E가 황, J가 질소, R1이 4-클로로-2-니트로페닐, R2가 수소이고, 핵산염기(아데닌, 시토신과 구아닌)의 엑소싸이클릭 아민(exocyclic amine)의 보호기가 벤즈히드릴옥시카르보닐인 단량체를 사용하여 상기의 일반적 합성 방법에 따라 표제의 서열을 수동으로 합성하였다. 도 13은 HPLC 분석 결과와 MALDI-TOF 분석결과 (MS: 1352.5 (M+H))를 보여준다.
* * * * *
당해 분야에 숙련가들은 여기에 기재된 발명의 특별한 실시양태에 해당하는 많은 등가물을 인식할 수 있고, 단지 일반적인 실험에 의해서 만으로도 확인할 수 있다. 이와 같은 등가물들은 본 클레임의 범주에 포함될 것이다.
본 발명은 PNA 올리고머 합성에 있어서 보다 효율적이고 높은 수율과 편리함을 갖는 새로운 단량체를 제공할 수 있다. 또한 본 발명은 PNA 올리고머의 합성을 위한 자동합성기와 같은 기기에 편리하게 적용할 수 있는 PNA 단량체를 제공할 수 있다.

Claims (21)

  1. 하기 화학식 Ⅰ의 구조를 갖는 화합물:
    Figure 112007023315465-PAT00039
    상기 식에서
    E는 황 또는 산소이고;
    J는 질소 또는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시 또는 하기의 화학식 중 하나를 가지는 작용기이고:
    Figure 112007023315465-PAT00040
    Figure 112007023315465-PAT00041
    이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, 니트로, 시아노, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시, 페닐, 그리고 할로겐화페닐로부터 독립적으로 선택되고;
    R2는 수소이고;
    B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 작용기는 산성 조건 하에서 제거할 수 있고 염기 조건에서 안정한 보호기로 보호된다.
  2. 제1항에 있어서, E가 황이고, J가 질소인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, E가 황이고, J가 질소이고;
    R1이 C1-C4의 알킬 또는 하기의 화학식을 가지는 페닐인 화합물.
    Figure 112007023315465-PAT00042
    상기 식에서, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 할로겐, 니트로기로부터 독립적으로 선택된다.
  4. 제1항에 있어서, E가 황이고, J는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, 페닐 또는 벤조일인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, E가 산소이고 J는 CH인 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R2가 수소인 화합물.
  7. 제1항에 있어서, B가 티민(T), 시토신(C), 아데닌(A) 또는 구아닌(G)인 화합물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 핵산염기 B의 엑소사이클릭 아미노기의 보호기가 하기의 구조를 갖는 화합물.
    Figure 112007023315465-PAT00043
    이 때, R4는 아래 화학식으로 표현된다:
    Figure 112007023315465-PAT00044
    이 때, Y1, Y2, Y3, Y4, Y5, Y6, Y7, Y8, Y9, Y10은 독립적으로 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시 중에서 선택된다.
  9. 제1항에 있어서, 상기 핵산염기 B의 엑소사이클릭 아미노기의 보호기가 하기의 구조를 갖는 화합물.
    Figure 112007023315465-PAT00045
    이 때, R4는 아래 화학식으로 표현된다:
    Figure 112007023315465-PAT00046
    이 때, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5은 독립적으로 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 또는 두 인접한 작용기가 메틸렌디옥시인 중에서 선택된다.
  10. 제1항에 있어서, 핵산염기 B의 엑소사이클릭 아미노기의 보호기가 벤질옥시카르보닐, 벤즈히드릴옥시카르보닐, 4-메톡시벤질옥시카르보닐 또는 피페로닐옥시카르보닐인 화합물.
  11. 제1항에 있어서, A1, A2, A3, A4, A5에서, 상기 할로겐은 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알킬은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알킬이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알콕시는 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알콕시이고; 상기 할로겐화페닐은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 페닐인 화합물.
  12. 화학식 Ⅵ의 화합물을 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링제제를 사용하거나 혼성 산무수물(mixed anhydride) 방법으로 고리화하여 제1항의 화합물을 제조하는 방법.
    Figure 112007023315465-PAT00047
    상기 식에서
    E는 황 또는 산소이고;
    J는 질소 또는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시, 페닐, 할로겐화 페닐, 벤조일, C1-C4의 알킬벤조일, C1-C4의 알콕시벤조일 또는 할로겐화 벤조일이고;
    R2는 수소이고;
    B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 작용기는 산성 조건 하에서 제거할 수 있고 염기 조건에서 안정한 보호기로 보호된다.
  13. 화학식 Ⅳ의 화합물과 핵산염기 아세트산 유도체를 비친핵성 유기염기와 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링제제 존재 하에서 커플링하여 제1항의 화합물을 제조하는 방법.
    Figure 112007023315465-PAT00048
    상기 식에서
    E는 황 또는 산소이고;
    J는 질소 또는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시 또는 하기의 화학식 중 하나를 가지는 작용기이고:
    Figure 112007023315465-PAT00049
    Figure 112007023315465-PAT00050
    이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, 니트로, 시아노, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시, 페닐, 그리고 할로겐화페닐로부터 독립적으로 선택되고;
    R2는 수소이고;
    상기 핵산염기 아세트산 유도체는 아래의 화학식으로 표현된다:
    Figure 112007023315465-PAT00051
    이때 B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 아미노 작용기는 산성 조건 하에서 제거할 수 있고 염기 조건에서 안정한 보호기로 보호된다.
  14. 제13항에 있어서, A1, A2, A3, A4, A5에서, 상기 할로겐은 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알킬은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알킬이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알콕시는 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알콕시이고; 상기 할로겐화페닐은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요 오드화 페닐인 방법.
  15. 화학식 Ⅴ의 구조를 갖는 화합물.
    Figure 112007023315465-PAT00052
    상기 식에서
    E는 황 또는 산소이고;
    J는 질소 또는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시 또는 하기의 화학식 중 하나를 가지는 작용기이고:
    Figure 112007023315465-PAT00053
    Figure 112007023315465-PAT00054
    이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, 니트로, 시아노, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시, 페닐, 그리고 할로겐화페닐로부터 독립적으로 선택되고;
    R2는 수소이고;
    R3는 수소, C1-C4의 알킬, 또는 페닐이고;
    B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 작용기는 산성 조건 하에서 제거할 수 있고 염기 조건에서 안정한 보호기로 보호된다.
  16. 제15항에 있어서, A1, A2, A3, A4, A5에서, 상기 할로겐은 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알킬은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알킬이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알콕시는 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알콕시이고; 상기 할로겐화페닐은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 페닐인 화합물.
  17. 제15항에 있어서, R3가 메틸 또는 에틸인 화합물.
  18. 제15항에 있어서, 핵산염기 B의 엑소사이클릭 아미노기의 보호기가 벤질옥시카르보닐, 벤즈히드릴옥시카르보닐, 4-메톡시벤질옥시카르보닐 또는 피페로닐옥시 카르보닐인 화합물.
  19. 하기의 화학식 Ⅱ의 화합물과 핵산염기 아세트산 유도체를 비친핵성 유기염기와 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 커플링제제 존재 하에서 커플링하여 제15항의 화합물을 제조하는 방법.
    Figure 112007023315465-PAT00055
    상기 식에서
    E는 황 또는 산소이고;
    J는 질소 또는 C-R' 이고;
    R1, R'은 독립적으로 수소, C1-C4의 알킬, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시 또는 하기의 화학식 중 하나를 가지는 작용기이고:
    Figure 112007023315465-PAT00056
    Figure 112007023315465-PAT00057
    이 때, A1, A2, A3, A4, A5는 수소, 할로겐, C1-C4의 알킬, 니트로, 시아노, C1-C4의 알콕시, 할로겐화 C1-C4의 알킬, 할로겐화 C1-C4의 알콕시, 페닐, 그리고 할로겐화페닐로부터 독립적으로 선택되고;
    R2는 수소이고;
    R3는 수소, C1-C4의 알킬, 또는 페닐이고;
    상기 핵산염기 아세트산 유도체는 아래의 화학식으로 표현된다:
    Figure 112007023315465-PAT00058
    이때 B는 천연 또는 비천연의 핵산염기이고, 상기 핵산염기가 엑소사이클릭 아미노 작용기를 가질 때 그 아미노 작용기는 산성 조건 하에서 제거할 수 있고 염기 조건에서 안정한 보호기로 보호된다.
  20. 제19항에 있어서, A1, A2, A3, A4, A5에서, 상기 할로겐은 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알킬은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알킬이고; 상기 할로겐화 C1-C4의 알콕시는 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 C1-C4의 알콕시이고; 상기 할로겐화페닐은 불소-, 염소-, 브롬-, 또는 요오드화 페닐인 방법.
  21. 제1항의 화합물을 커플링하는 단계;
    캡핑하는 단계; 및
    탈보호화하는 단계를 통하여 PNA 올리고머를 제조하는 방법.
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WO (1) WO2005009998A1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8450469B2 (en) 2008-01-21 2013-05-28 Panagene Inc. Synthesis of peptide nucleic acids conjugated with amino acids and their application
KR101360037B1 (ko) * 2008-12-02 2014-02-07 현대자동차주식회사 차량용 ｌｎｇ 연료 탱크

Families Citing this family (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20030084444A (ko) * 2002-04-26 2003-11-01 주식회사 파나진 Ｐｎａ 올리고머를 합성하기 위한 신규한 단량체 및 그의제조방법
WO2006086667A2 (en) 2005-02-09 2006-08-17 Avi Bio Pharma, Inc. Antisense composition and method for treating muscle atrophy
WO2009032901A1 (en) * 2007-09-04 2009-03-12 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Biosensors and related methods
CA2764158A1 (en) 2009-06-01 2010-12-09 Halo-Bio Rnai Therapeutics, Inc. Polynucleotides for multivalent rna interference, compositions and methods of use thereof
JP5991922B2 (ja) 2009-11-13 2016-09-14 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド アンチセンス抗ウイルス性化合物およびインフルエンザウイルス感染を処置するための方法
US20120309684A1 (en) 2009-11-30 2012-12-06 Isis Innovation Limited Conjugates for delivery of biologically active compounds
WO2011112516A1 (en) 2010-03-08 2011-09-15 Ico Therapeutics Inc. Treating and preventing hepatitis c virus infection using c-raf kinase antisense oligonucleotides
EP2545173A2 (en) 2010-03-12 2013-01-16 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of nuclear hormone receptors
EP2563380B1 (en) 2010-04-26 2018-05-30 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of cysteinyl-trna synthetase
JP6294074B2 (ja) 2010-04-27 2018-03-14 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド イソロイシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
US8993723B2 (en) 2010-04-28 2015-03-31 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of alanyl-tRNA synthetases
AU2011248490B2 (en) 2010-04-29 2016-11-10 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of Asparaginyl tRNA synthetases
CA2797393C (en) 2010-04-29 2020-03-10 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl trna synthetases
US9068177B2 (en) 2010-04-29 2015-06-30 Atyr Pharma, Inc Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glutaminyl-tRNA synthetases
WO2011139986A2 (en) 2010-05-03 2011-11-10 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of arginyl-trna synthetases
WO2011140132A2 (en) 2010-05-03 2011-11-10 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-trna synthetases
CN103140233B (zh) 2010-05-03 2017-04-05 Atyr 医药公司 与甲硫氨酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的发现
JP6008844B2 (ja) 2010-05-04 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド ｐ３８ＭＵＬＴＩ−ｔＲＮＡ合成酵素複合体のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
CA2805086C (en) 2010-05-13 2020-10-20 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of interleukins 17 and 23 signaling
JP6396656B2 (ja) 2010-05-14 2018-09-26 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド フェニルアラニルβｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
JP6027965B2 (ja) 2010-05-17 2016-11-16 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド ロイシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
JP6116479B2 (ja) 2010-07-12 2017-04-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド グリシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
CA2808539C (en) 2010-08-25 2021-05-25 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of tyrosyl-trna synthetases
EP2732035A2 (en) 2011-07-15 2014-05-21 Sarepta Therapeutics, Inc. Methods and compositions for manipulating translation of protein isoforms from alternative initiation start sites
US20130085139A1 (en) 2011-10-04 2013-04-04 Royal Holloway And Bedford New College Oligomers
RS57467B1 (sr) 2011-12-08 2018-09-28 Sarepta Therapeutics Inc Oligonukleotidni analozi koji ciljaju humani lmna
KR101742954B1 (ko) * 2012-05-31 2017-06-02 페넥스 파마슈티컬스 아게 고아 핵 수용체 ror[감마]의 조절제로서의 카복사미드 또는 설폰아미드가 치환된 티아졸 및 관련된 유도체
US10006909B2 (en) 2012-09-28 2018-06-26 Vibrant Holdings, Llc Methods, systems, and arrays for biomolecular analysis
CN103145714A (zh) * 2013-03-13 2013-06-12 苏州维泰生物技术有限公司 公斤级合成pna的方法
JP6618910B2 (ja) 2013-09-05 2019-12-11 サレプタ セラピューティクス，インコーポレイテッド 酸性α−グルコシダーゼにおけるアンチセンス誘導エクソン２包含
WO2016081808A1 (en) 2014-11-20 2016-05-26 The Regents Of The University Of California Compositions and methods related to hematologic recovery
MA41795A (fr) 2015-03-18 2018-01-23 Sarepta Therapeutics Inc Exclusion d'un exon induite par des composés antisens dans la myostatine
US10849917B2 (en) 2015-06-01 2020-12-01 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense-induced exon exclusion in type VII collagen
CN108366966A (zh) 2015-08-24 2018-08-03 光环生物干扰疗法公司 用于调节基因表达的多核苷酸纳米颗粒及其用途
CN108699555A (zh) 2015-10-09 2018-10-23 萨勒普塔医疗公司 用于治疗杜兴肌营养不良和相关病症的组合物和方法
CA3005411C (en) 2015-11-16 2024-01-09 Olix Pharmaceuticals, Inc. Treatment of age-related macular degeneration using rna complexes that target myd88 or tlr3
CN108779463B (zh) 2016-02-02 2022-05-24 奥利克斯医药有限公司 使用靶向IL4Rα、TRPA1或F2RL1的RNA复合物治疗特应性皮炎和哮喘
EA201892366A1 (ru) 2016-04-18 2019-03-29 Сарепта Терапьютикс, Инк. Антисмысловые олигомеры и способы их применения для лечения заболеваний, связанных с геном кислой альфа-глюкозидазы
MA45616A (fr) 2016-04-29 2019-03-06 Sarepta Therapeutics Inc Analogues d'oligonucléotide ciblant lmna humain
WO2018005805A1 (en) 2016-06-30 2018-01-04 Sarepta Therapeutics, Inc. Exon skipping oligomers for muscular dystrophy
WO2018017814A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 President And Fellows Of Harvard College Peptidoglycan glycosyltransferase inhibitors of sed proteins for treating bacterial infections
US11202818B2 (en) 2016-09-14 2021-12-21 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for modulating erythropoiesis
WO2018112032A1 (en) 2016-12-13 2018-06-21 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for targeting tumor-infiltrating tregs using inhibitors of ccr8 and tnfrsf8
MX2019006989A (es) 2016-12-19 2019-08-16 Sarepta Therapeutics Inc Conjugados de oligomeros de omision de exon para distrofia muscular.
PL3554552T3 (pl) 2016-12-19 2022-11-21 Sarepta Therapeutics, Inc. Koniugaty oligomerów do pomijania egzonów dla dystrofii mięśniowej
DK3554553T3 (da) 2016-12-19 2022-09-19 Sarepta Therapeutics Inc Exon-overspringnings-oligomerkonjugat til muskeldystrofi
US11767520B2 (en) 2017-04-20 2023-09-26 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
WO2018218250A2 (en) 2017-05-26 2018-11-29 Vibrant Holdings, Llc Photoactive compounds and methods for biomolecule detection and sequencing
EA201991450A1 (ru) 2017-09-22 2019-12-30 Сарепта Терапьютикс, Инк. Конъюгаты олигомеров для пропуска экзона при мышечной дистрофии
JP2020536058A (ja) 2017-09-28 2020-12-10 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド 筋ジストロフィーを処置するための併用療法
WO2019067979A1 (en) 2017-09-28 2019-04-04 Sarepta Therapeutics, Inc. POLYTHERAPIES FOR TREATING MUSCLE DYSTROPHY
JP2020536060A (ja) 2017-09-28 2020-12-10 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド 筋ジストロフィーを処置するための併用療法
JP7394753B2 (ja) 2017-10-18 2023-12-08 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド アンチセンスオリゴマー化合物
US10765760B2 (en) 2018-05-29 2020-09-08 Sarepta Therapeutics, Inc. Exon skipping oligomer conjugates for muscular dystrophy
EP3806868A4 (en) 2018-06-13 2022-06-22 Sarepta Therapeutics, Inc. EXON-SKIPPING OLIGOMERS FOR MUSCULAR DYSTROPHY
TW202020153A (zh) 2018-07-27 2020-06-01 美商薩羅塔治療公司 用於肌肉萎縮症之外顯子跳躍寡聚物
US11273137B2 (en) 2018-09-04 2022-03-15 Board Of Trustees Of Michigan State University Methods and compositions to prevent and treat disorders associated with mutations in the ODC1 gene
JP2022511055A (ja) 2018-12-13 2022-01-28 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド 筋ジストロフィーに対するエクソンスキッピングオリゴマーコンジュゲート
IL295153A (en) 2019-03-12 2022-09-01 Harvard College Methods and preparations for the treatment of cancer
US20220193246A1 (en) 2019-04-18 2022-06-23 Sarepta Therapeutics, Inc. Compositions for treating muscular dystrophy
US20220226269A1 (en) 2019-06-12 2022-07-21 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for modulation of an interspecies gut bacterial pathway for levodopa metabolism
KR102403904B1 (ko) 2019-12-24 2022-06-02 주식회사 시선바이오머티리얼스 용액공정상 pna 올리고머의 제조방법
KR20210082091A (ko) 2019-12-24 2021-07-02 주식회사 시선바이오머티리얼스 개질된 감마탄소 골격 화합물 및 이의 제조방법
KR20230004456A (ko) 2020-03-04 2023-01-06 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 면역 요법에 대한 종양 세포의 감작화를 위한 방법 및 조성물
EP4157264A4 (en) 2020-05-27 2024-06-19 The Regents of the University of California COMPOSITIONS AND METHODS FOR TRANSDIFFERENTIATION OF CELLS
WO2022056454A2 (en) 2020-09-14 2022-03-17 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating hpv-positive cancers
EP4213947A2 (en) 2020-09-16 2023-07-26 President and Fellows of Harvard College Methods of treating an individual that has failed an anti-pd-1/anti-pd-l1 therapy
CA3233242A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense oligonucleotides having one or more abasic units
WO2023070086A1 (en) 2021-10-22 2023-04-27 Sarepta Therapeutics, Inc. Morpholino oligomers for treatment of peripheral myelin protein 22 related diseases
WO2023091704A1 (en) 2021-11-18 2023-05-25 Circularis Biotechnologies, Inc. Compositions and methods for production of circular nucleic acid molecules
WO2023150181A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating cancer
WO2024026474A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for transferrin receptor (tfr)-mediated delivery to the brain and muscle
WO2024064237A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Sarepta Therapeutics, Inc. Dmd antisense oligonucleotide-mediated exon skipping efficiency
WO2024098002A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Calcium voltage-gated channel auxiliary subunit gamma 1 (cacng1) binding proteins and cacng1-mediated delivery to skeletal muscle
WO2024107765A2 (en) 2022-11-14 2024-05-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for fibroblast growth factor receptor 3-mediated delivery to astrocytes
WO2024104914A1 (en) 2022-11-14 2024-05-23 BioNTech SE Rna capping efficiency assay

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3635956A (en) * 1968-03-01 1972-01-18 Squibb & Sons Inc Benzothiazines related compounds derivatives and salts thereof
IT1059127B (it) * 1976-04-15 1982-05-31 Montedison Spa Eteri e tioeteri benzilici o feni lici a catena alifatica lineare con terminale alogenato ad attivi ta ormonica giovanile e acaric/da
US5435939A (en) * 1993-07-07 1995-07-25 Isp Investments Inc. Stable emulsifiable gel matrix and aqueous macroemulsion prepared therefrom
US5539083A (en) 1994-02-23 1996-07-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Peptide nucleic acid combinatorial libraries and improved methods of synthesis
EP1095054B1 (en) 1998-07-09 2006-10-25 Biocept, Inc. Method of using an improved peptide nucleic acid universal library to optimize dna sequence hybridation
WO2002092591A1 (fr) * 2001-05-15 2002-11-21 Mitsui Chemicals, Inc. Esters acryliques et leur utilisation
KR100464261B1 (ko) 2002-01-24 2005-01-03 주식회사 파나진 Ｐｎａ 올리고머를 합성하기 위한 신규한 단량체 및 그의제조방법
KR20030084444A (ko) 2002-04-26 2003-11-01 주식회사 파나진 Ｐｎａ 올리고머를 합성하기 위한 신규한 단량체 및 그의제조방법

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8450469B2 (en) 2008-01-21 2013-05-28 Panagene Inc. Synthesis of peptide nucleic acids conjugated with amino acids and their application
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