KR20050097500A - 치아우식증 및 박테리아 유발 치아우식증을 감소시키는데이용되는 유산균 - Google Patents

치아우식증 및 박테리아 유발 치아우식증을 감소시키는데이용되는 유산균 Download PDF

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Abstract

본 발명은 구강 점액소와 치태에 대한 우수한 결합 능력과 함께 저해 활성을 통하여 포유동물의 구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 총수를 감소시키고, 따라서 치아우식증을 예방, 감소 또는 치료하는 능력에서 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 균주; 인간 투여용으로 우식증의 예방 또는 치료를 위한 약품을 비롯하여 상기 균주로부터 유래된 산물에 관한다.

Description

치아우식증 및 박테리아 유발 치아우식증을 감소시키는데 이용되는 유산균{USE OF LACTIC ACID BACTERIA FOR REDUCING DENTAL CARIES AND BACTERIAL CAUSING DENTAL CARIES}
본 발명은 비-병원성 항-우식성 균주를 선별하는 방법의 용도; 구강 박테리아, 예를 들면, 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 및 다른 우식증-유발 병원균에 의해 유발되는 치아우식증(dental caries)의 치료와 예방에 이런 균주를 이용하는 방법에 관한다.
인간 및 다른 포유동물의 구강에는 다수의 상이한 락토바실러스(Lactobacillus) 종들을 비롯하여 다양한 종류의 박테리아가 존재한다. 1890년에, Miller는 "Chemico-Parasitic Theory"에서 우식증이 치아의 하이드록시헤파타이드를 분해시키는 소화 탄수화물로부터 산을 생성하는 구강 박테리아에 의해 유발된다는 가설을 제시하였다. 이후, 주로 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 군중에서 통상적인 구강 박테리아 균총이 관여하고, 또한 락토바실러스(Lactobacillus) 군이 관여한다는 것이 노토바이오틱(gnotobiotic) 쥐에서 입증되었다. 구강에 존재하는 이들 “산생성(acidogenic)”종들이 치아우식증의 존재와 발생에 연관한다(Locsche WJ, Microbiolog Rev., 1986:50:353-380). 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 군에는 7가지 박테리아 종이 존재하는데, 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)(혈청형 c,e,f)가 전체 인간 분리물의 90%에서 발견된다(Linder L., Oral Mikrobiologi 1996, ISBN 91-7205-037-3). 우식증의 개시는 치태(dental plaque) 내에서 상대적으로 높은 비율의 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)를 요구하는 것으로 확인되고 있다. 이들 박테리아는 치아 표면에 잘 부착되고, 다른 박테리아 유형보다 많은 양의 산을 당으로부터 생산하며, 산성 환경에서 다른 박테리아보다 더욱 효과적으로 생존하고, 자당으로부터 세포외 다당류를 생산한다. 치태에서 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 비율이 높으면(2-10% 범위), 환자는 우식증의 위험이 높다. 이런 비율이 낮으면(0.1% 미만), 환자는 우식증의 위험이 낮다. 이들이 다른 박테리아보다 높은 내산성을 보유하기 때문에, 치태 내에서 산성 조건은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 생존과 재생에 유리하다. 다른 2가지 유형의 박테리아 역시 상아질(dentin)을 통한 우식증의 진행과 연관한다. 이들은 여러 종의 락토바실러스(Lactobacillus) 및 액티노마이세스 비스코서스(Actinomyces viscosus)이다. 이들 박테리아 역시 높은 산 생산을 보이고, 산성 조건에서 잘 생존한다. 치아우식증에 락토바실러스(Lactobacillus)의 관여가 확립되었다(Smith et al., Microbios 105: 77-85, 2001). 실제, 상이한 선별 배지 또는 다른 기술을 이용하여 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 총수의 개산에 더하여 타액에서 락토바실러스(Lactobacillus) 총수의 개산은 우식증의 위험이 높은 군을 확인하는 “우식증 검사”로서 수년동안 이용되었다. 따라서, 락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 고도 우식성인데, 이들 중에서 일부가 인간 치태로부터 분리되었다(Fitzgerald et al., J. Dent. Res. 60: 919 926, 1981).
박테리아가 치아우식증의 형성에서 일차 병원균이 되기 위해서는 여러 필요 특성의 조합이 요구된다(tinder, 1996): 치아 표면에 부착되고 이식하는 능력; 치아의 제한된 표면에 다수 축적되는 능력; 음식물에서 발견되는 탄수화물로부터 산을 신속하게 생산하는 능력; 낮은 pH하에서도 치태에서 산 생산을 지속하는 능력.
식이 수크로오스는 치태의 두께와 화학적 성질 모두를 변화시킨다. 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 및 일부 다른 치태 박테리아는 단당류 성분(글루코오스와 프럭토오스) 및 세포외 다당류를 구성하는 수크로오스의 이당류 결합의 에너지를 이용한다. 이들은 치태의 두께를 실질적으로 증가시키고, 이의 세포외 공간의 화학적 성질을 액체로부터 겔로 변화시킨다. 두꺼운 겔-치태는 타액 완충으로부터 보호되는 치아 표면에서 산성 환경의 발생을 가능하게 한다. 수크로오스와 접촉하지 않는 치태는 훨씬 얇고 훨씬 효과적으로 완충제에 의해 제거된다. 이런 이유로, 수크로오스의 비율이 높은 음식물은 우식증 위험을 증가시킨다. 더욱 두꺼운 치태는 구멍과 갈라진 틈 및 구강 위생이 불량한 환자의 잇몸모서리(gingival margin) 주변에서 발생한다.
상기 질환의 이런 특성을 고려하면, 치아우식증의 예방과 치료는 예로써 박테리아에 대한 기질을 감소시키는 수단으로서 식이 변화를 통하여 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 효과를 방해함으로써 치아의 표면 구조 보강 또는 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 박테리아 총수의 감소를 요한다. 따라서, 현재까지 시도된 치료법은 아래와 같다: 국소 클로르헥시딘과 국소 플루오르화물과 같은 약품을 이용하여 미세균총을 변화시키는 노력; 식이 변화 및 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)에 의해 잘 대사되지 않는 감미료, 예를 들면, 솔비톨, 아스파르탄, 자일리톨로의 대체에 의한 식이 수크로오스의 양적 감소; 식이 선택에 의한 식사 빈도의 감소; 특히 양치질동안 매일 적용을 통한 플루오르화물 첨가; 유동을 감소시키는 약물을 변화시키거나 유동을 강화시키는 약물을 사용함으로써 유동을 강화시키는 활발한 저작(chewing)동안 물리적 자극을 이용한 타액 유동 증가.
여러 다양한 방식으로 치아우식증을 예방하는 효과를 평가하였다, 가령, 한 조성물은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)에 특이적인 박테리오파지에 의해 생산된 용해 효소를 이용한다(U.S. Patent No. 6,399,098, Fischetti et al.). 또한, 유전자조작으로 락토바실러스 지에(Lactobacillus zeae) 균주를 변형하여 유해성 스트렙토코커스(Streptococcus) 박테리아를 중화시키는 항체를 상기 균주의 표면에서 생산하였지만(Hammarstrom L., July 2002 issue of Nature Biotechnology), 유전자 조작된 미생물을 이용한 이런 방식은 안정성 승인 문제에 직면하고 있다.
이에 더하여, 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus)의 한 균주(균주 GG)는 스트렙토코커스 사브리누스(Streptococcus sabrinus)와 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)를 전반적으로 감소시키는 생균 방법으로 장려되었다(Nase et al., Caries Res. 35: 412-420, 2001). 다른 연구에서는 발효유에서 발효용 배양균으로서 상기 균주의 활용이 우유에 존재하는 인간 우식성 박테리아에 대한 항체의 역가에 영향을 주지 않는다는 것을 입증하였다(Wei et al., Oral Microbio. & Immunol. 17: 9-15, 2002). 락토바실러스 람노수스(L. rhamnosus) GG는 발효 특성과 분리 출처를 비롯한 여러 방식에서 락토바실러스 루테리(L. reuteri)와 구별된다. 치태의 형성에 저해 활성을 보이는 것으로 밝혀진 다른 미생물은 내성세균(Enterococcus), 락토바실러스 아시돌필루스(Lactobacillus acidophilus) V20, 락토바실러스 락티스(Lactobacillus lactis) 1370(Ohs U.S. Patent No. 6036, 952) 등이다. 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)를 저해하기 위하여, 소위 “경쟁 배제(competitive exclusion)”를 이용한 다른 연구가 수행되었다. 가령, 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주 ATCC 55730은 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)를 저해하는 것으로 밝혀졌다(Nikawa H. et al, News release by Hiroshima University July 11, 2002). 일본에서 LS1로 시판되고 있는 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius)(LS1) 균주를 함유하는 정제 산물(Prente Ltd. Japan)은 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)를 저해하는 것으로 주장되고 있다.
락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)를 비롯한 다양한 (Lactobacillus) 종의 균주가 생균 제제에 이용되고 있다. 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)는 동물의 위장관에서 자연 발생 거주자의 하나이며, 소장에서 주로 발견되고 인간을 비롯한 건강한 동물의 출산 채널, 모유, 입에서도 종종 발견된다. 이는 항균 활성을 갖는 것으로 알려져 있다(참조: U.S. Patent No. 5,439,678, 5,458,875, 5,534,253, 5,837,238, 5,849,289). 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 세포가 글리세롤의 존재에서 혐기성 조건하에 성장되는 경우에, 이들은 루테린(reuterin)(β-하이드록시-프로피온알데하이드)으로 알려진 항생 물질을 생산한다.
전통적인 유기산 이외에 다른 항생 물질, 예를 들면, “루테리사이클린(Reutericyclin)”(Holtzel, A. et al. Angewandte Chemie International Edition 39, 2766 - 2768, 2000)과 “PCA(피로글루탐산)”(Yang, Z. Dissertation, Univ. of Helsinki, March 2000) 역시 보고되었다. 락토바실러스 루테리(L. reuteri)를 비롯한 락토바실러스(Lactobacillus)는 영양분의 국소 경쟁 및 다른 대사 상호작용을 통하여 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)와 같은 다른 미생물을 저해하는 능력을 보유하는 것으로도 알려져 있다. 면역조절과 소염 활성 역시 락토바실러스 루테리(L. reuteri)와 연관하였다. 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 점액소 결합 단백질이 분리되고 상술되었다(참조: U.S. Patent No. 6,100,388).
락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 다양한 세포주와 숙주 점액에 부착되는 것으로 보고되었다. 이는 생균 활성에 중요한 것으로 추정되며, 병원성 박테리아에서 독력 인자의 개념으로부터 유래되는데, 지난 수십년동안 이런 상호작용이 광범위하게 발견되었다(Klemm, P. and Schembri, M. A.(2000) Bacterial adhesins: function and structure. Int. J. Med. Microbiol. 290, 27-35). 락토바실러스 루테리(L. reuteri)에 의한 효과적인 항균 활성의 가능성이 알려져 있고, 점액소 결합과 같은 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 특정 결합 특성이 알려져 있으며, 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주 ATCC 55730과 락토바실러스(Lactobacillus) GO ATCC 53103의 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 저해 효과 역시 알려져 있긴 하지만, 저해 효과와 결합 활성의 결과로서 구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 총수 및 결과적으로 우식증을 감소시키는 능력에서 락토바실러스(Lactobacillus) 균주 사이에 실질적인 차이가 존재하는 지의 여부 및 이런 균주가 선별될 수 있는 지의 여부는 아직 확인되지 않았다.
이런 이유로, 본 발명의 목적은 구강 점액소와 치태에 대한 우수한 결합 능력과 함께 항생 활성을 통하여 구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 총수를 감소시키고, 따라서 치아우식증을 예방, 감소 또는 치료하는 능력에서 선별된 더욱 우수한 락토바실러스(Lactobacillus) 균주를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 인간 투여용으로 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)와 연관된 우식증의 예방 또는 치료를 위한 약품을 비롯하여 상기 균주를 함유하는 산물을 제공하는 것이다.
다른 목적과 이점은 아래의 개시 및 첨부된 특허청구범위에 의해 더욱 명백하다.
본 발명의 요약
본 발명은 구강 점액소와 치태에 대한 우수한 결합 능력과 함께 저해 활성을 통하여 포유동물의 구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 총수를 감소시키고, 따라서 치아우식증을 예방, 감소 또는 치료하는 능력에서 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 균주; 인간 투여용으로 우식증의 예방 또는 치료를 위한 약품을 비롯하여 상기 균주로부터 유래된 산물; 이들 산물을 생산하는 방법에 관한다.
본 발명의 다른 목적과 이점은 아래의 개시 및 첨부된 특허청구범위에 의해 더욱 명백하다.
본 발명은 구강 점액소와 치태에 대한 우수한 결합 능력과 함께 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)에 대한 우수한 항생 활성으로 치아우식증을 예방, 감소 또는 치료하는 적어도 한가지의 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 균주의 세포를 함유하는 치아우식증 박테리아의 성장과 활성을 저해하는 산물을 제시한다. 이런 균주는 락토바실러스 루테리(L. reuteri) CE2-7F(ATTC PTA 4965)와 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF2-3(ATTC PTA-4964)이다.
구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 총수를 감소시키는 능력에 더하여, 본 발명에서 락토바실러스(Lactobacillus) 균주 선별의 다른 기준은 숙주 점액소에 부착되는 균주의 능력이다. 실제로, 락토바실러스(Lactobacillus)는 점막 표면과 이의 구성요소에 부착되는 것으로 밝혀졌다. 점액에 락토바실러스(Lactobacillus)의 부착과 관련된 연구에서 많은 균주가 시험관내에서 점액 물질에 결합하는 능력이 부재하는 것으로 밝혀졌다. 이들 비-결합자의 대부분은 점막 표면으로부터 분리되기 때문에, 성장 환경이 박테리아의 부착 특성에 영향을 줄 수 있다고 가정할 수 있다.
본 발명에 이용된 선별 방법에서, 부착 특성은 박테리아 성장 배지에 점액소를 포함시킴으로써 장내 환경을 부분적으로 모방함으로써 조사하였다. 따라서, 실시예에 기술된 바와 같이, 본 발명의 선별 방법은 1) 락토바실러스(Lactobacillus) 균주에 의한 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 저해 효과의 평가 및 2) 락토바실러스(Lactobacillus)에 의한 점액소 결합의 평가를 포함한다.
본 발명의 산물은 치아우식증에 대한 예방제 또는 치료제로서 구강에 배치되는 임의의 산물, 또는 영양적 또는 호흡 목적의 산물, 예를 들면, 식품 산물, 치아 치료 제품(가령, 구강청정제) 또는 다른 명시된 건강 산물, 츄잉 검 등일 수 있다. 본 발명에 사용하기 특히 적합한 식품 산물은 요구르트와 같은 우유-함유 산물, 주스, 드링크 등이다. 본 발명에 사용되는 치아 치료 제품은 치약, 액체 치아 세척제, 구강청정제, 항-구취 산물 등이다.
본 발명에 따른 산물의 효능을 위하여 필요한 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 세포의 농도는 식품 유형 및 소화되는 식품의 양(또는 구강에서 비-식품 치아 치료 제품의 사용 시간)에 좌우되긴 하지만, 바람직하게는 산물 g당 대략 106-107 CFU(콜로니-형성 단위) 이상이 된다. 최대 1010-1011 CFU가 가능하며, 산물의 관능(organoleptic) 특성(풍미와 향기)에 부정적인 영향을 주지 않으면서 효능을 증가시키는데 이용될 수 있다. 산물이 요구르트 또는 다른 유산 발효 제품이면, 상기 산물을 생산하는데 이용되는 유산 제조 균주는 이런 특정 목적에 적합한 표준 배양액이고, 본 발명의 항-우식성 박테리아는 상기한 바와 같이 요구르트 ㎖당 대략 106-107 CFU 수준 이상으로 산물의 발효 전후에 첨가될 수 있다.
적절하게는, 본 발명의 산물은 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 균주를 저해 또는 사멸시키거나 이의 항-우식성 활성을 간섭하는 다른 항균 성분을 함유하지 않는다.
락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 이런 유형의 산물의 제조를 위한 당분야에 공지된 수단으로 구성요소에 혼합되거나, 또는 상기 산물에 혼합되거나 피복되는 첨가제일 수 있다. 선별된 식품 또는 본 발명의 다른 산물의 제조가 가열 단계를 필요로 하는 경우에, 락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 가열이후에 첨가된다. 선별된 락토바실러스(Lactobacillus) 세포가 산물 내에 존재하면, 장기간동안 60-70℃ 이상으로 산물을 가열하지 않는 것이 바람직하다.
본 발명의 특징은 아래의 실시예를 인용하면 더욱 분명하게 인지되지만, 이들 실시예는 본 발명을 제한하지 않는다.
실시예 1. 균주의 선별 방법
본 발명에 이용되는 락토바실러스(Lactobacillus) 균주의 선별은 아래의 두 단계 방식으로 수행될 수 있다:
a) 락토바실러스( Lactobacillus ) 균주에 의한 스트렙토코커스 뮤탄스( S. mutans )의 저해 효과의 평가
저해 효과를 측정하는데 이용되는 균주의 한가지 예는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) ATCC 25175(The American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)이다. 상기 분리물은 0.5 % 효모 추출액(Disco)(TSBY)으로 보충된 트립티케이스 소이 액체배지(trypticase soy broth)(Disco, Detroit, USA)에서 성장시킨다. 이들 세포는 기하급수적 성장기동안 1000 x g에서 원심분리로 집합시키고, PBS로 2회 세척하며, 동일 완충액에 재부유시킨다. 세포 현탁액은 저-밀도 초음파 장치에 가하여 박테리아 집합체를 분산시킨다.
검사 락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 포도상구균용 액체배지(brain-heart infusion broth)(Disco)에서 성장시키고, 기하급수적 성장기동안 1000 x g에서 원심분리로 집합시키며, 인산염 완충액(PBS; pH 6.8)으로 2회 세척하고, 동일 완충액에 재-부유시킨다.
박테리아 현탁액의 광학 밀도는 1 ㎝ 광로(light path)를 갖는 1.0 ㎖ 쿠벳에서 측정하고, 현탁액은 1.0 x 108 CFU(콜로니 형성 단위)/㎖의 최종 농도로 조정한다.
저해 측정은 아래와 같이 수행한다: 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 현탁액 및 락토바실러스(Lactobacillus)의 현탁액은 무균 원심분리 튜브(전체 부피 100 ㎕)에서 100-0, 75-25, 50-50, 25-75의 비율로 혼합하고, 최대 10 ㎖까지 BHI 액체배지를 첨가하며, 10초동안 와동 혼합하고, 부드럽게 교반하면서 37℃에서 90분동안 배양한다. 대조로서, 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 현탁액은 대조 튜브(락토바실러스(Lactobacillus) 없음)에서 동등 부피의 PBS와 혼합한다. 이후, 각 현탁액은 1000 x g에서 원심분리로 세척하고, PBS로 2회 세척하며, MS 아가에 도말하여 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 CFU 계수를 측정한다. 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 생존 %는 아래의 공식으로 구한다.
스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 생존 % =
[락토바실러스(Lactobacillus)와 함께 배양된 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 CFU]/[PBS와 함께 배양된 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 CFU]x 100
상기 측정은 최소한 삼중 샘플로 수행한다. 모든 획득된 수치 데이터는 통계학적으로 분석한다.
b) 락토바실러스( Lactobacillus )에 의한 점액소 결합 효과의 평가
돼지 위로부터 얻은 점액소(Sigma, St. Louis, MO, USA)는 0.1 ㎎/㎖ 농도로 탄산염 완충액, pH 9.7에 부유시킨다. 200 ㎕의 상기 용액은 마이크로역가 웰에 피펫으로 옮기고, 피복을 위하여 37℃에서 대략 3시간동안 방치한다. 웰은 실온에서 1시간동안 200 ㎕ PBS 1% Tween20의 첨가로 차단하고, PBS 0.5% Tween20(PBST)으로 3회 세척한다. 락토바실러스(Lactobacillus) 평가 균주는 37℃에서 하룻밤동안, 0.01% 돼지 위 점액소(Sigma, M1778)로 보충된 MRS 액체배지에 성장시켜 생체내 성장 조건을 모방하고, 이후 PBST에서 세척하고 재-부유시킨다. 이들 박테리아 세포의 광학 밀도(OD)는 Beckman DU650 분광계에서 600 nm에서 측정하고 OD 0.5로 조정한다. 100 ㎕ 박테리아 현탁액을 각 웰에 첨가하고 4℃에서 하룻밤동안 배양한다. 웰은 PBST로 세척하고, 결합은 역상(inverted microscope)으로 조사한다. 완충액은 쏟아 버리고, 웰은 건조시킨 이후, ELISA 플레이트 판독기에서 OD405를 측정한다. 결합의 결과는 0 내지 3의 척도에서 기록하는데, 0은 결합 없음을 나타내고 3은 점액소에 대한 강한 결합을 나타낸다.
상기 측정에서, 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 저해 및 점액소에 대한 결합에서 최고의 결과를 보이는 락토바실러스(Lactobacillus) 균주가 선별된다.
실시예 2. 균주의 선별
1. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) SD2112(ATCC 55730)
2. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) DSM 20016(DSM 20016)
3. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MM2-3(ATCC PTA-4659)
4. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) CF2-7F(ATTC PTA-4965)
5. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF2-3(ATTC PTA-4964)
6. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MP14-C(Culture collection of Biogaia AB, Raleigh NC, USA)
7. 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF52-1F(Culture collection of Biogaia AB, Raleigh NC, USA)
8. 락토바실러스 살리바리우스(L. salivarius) LS1(Frente Ltd.(Japan)에 의해 LS1 정제로부터 분리됨)
9. 락토바실러스 람노수스(L. rhamnosus) GG(ATCC 53103)
본 연구에서, 상기 기재된 락토바실러스(Lactobacillus) 균주는 본 발명에 따라 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 저해와 점액소에 대한 부착의 선별 기준을 이용한 평가에 의해 선택된다. 실시예 1에 제시된 방법이 이용된다. 가장 적합한 균주의 선택은 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 저해 효과 및 점액소에 대한 락토바실러스(Lactobacillus) 균주 세포의 부착에 기초한다.
상기 측정법에 따른 락토바실러스(Lactobacillus) 균주의 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 저해 및 점액소에 대한 부착 스코어(0 = 결합 없음, 3 = 높은 결합, S = 선별됨)
균주 CFU/g생존 S. mutans 비율 10:1 CFU/g생존 S. mutans 비율 3:1 CFU/g생존 S. mutans 비율 1:1 CFU/g생존S. mutans 비율 1:3 점액소 결합 스코어(0-3) 선별
L. reuteri SD2112 2.0E+08 8.0E+07 6.0E+07 9.0E+06 2 -
L. reuteri DSM 20016 1.OE+08 2.0E+07 7.0E+06 3.0E+05 3 S
L. reuteri MM2-3 1.OE+08 7.0E+07 5.0E+07 9.0E+06 3 -
L. reuteri CF2-7F 1.OE+08 1.0E+07 7.0E+05 9.0E+04 3 S
L. reuteri MF2-3 2.OE+08 2.0E+07 4.0E+06 1.0E+05 2 S
L. reuteri MF14-C 9.OE+07 8.0E+07 7.0E+07 3.0E+07 1 -
L. reuteri MF52-1F 1.OE+08 8.0E+07 7.0E+07 3.0E+07 1 -
L. salivariusLS1 1.OE+08 8.0E+08 7.0E+09 3.0E+09 0-1 -
L. rhamnosusGG 2.OE+08 8.0E+07 7.0E+07 3.0E+07 0-1 -
실시예 3. 선별된 락토바실러스( Lactobacillus ) 균주의 효능 검증
스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 구강 운반(oral carriage)에 대한 실시예 2의 목록에 따른 평가 락토바실러스(Lactobacillus) 균주와 함께 발효된 우유(검사 요구르트)와 플라시보 발효된 우유(플라시보 요구르트)의 효과를 조사한다. 검사 요구르트는 아래와 같다:
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) SD2112를 함유하는 검사 요구르트 1
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) DSM 20016을 함유하는 검사 요구르트 2
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MM2-3을 함유하는 검사 요구르트 3
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) CF2-7F를 함유하는 검사 요구르트 4
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF2-3을 함유하는 검사 요구르트 5
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF14-C를 함유하는 검사 요구르트 6
- 락토바실러스 루테리(L. reuteri) MF52-1F를 함유하는 검사 요구르트 7
- 락토바실러스 살리바리우스(L. salivarius) LS1을 함유하는 검사 요구르트 8
- 락토바실러스 람노수스(L. rhamnosus) GG를 함유하는 검사 요구르트 9
- 검사 요구르트 10 플라시보, 아래 참조.
200명의 건강한 여성 피험자(연령; 20 ± 2년)는 10개 군으로 나누었다. 모든 피험자는 임의의 활성 우식증 병소, 치은염 또는 치주질환의 증상을 보이지 않는다. 제 1 군에서 피험자는 2주동안 매일 점심시간(12:00-13:00)에 1컵(95 g)의 플라시보 요구르트를 섭취하고, 이후 추가로 2주동안 매일 점심시간에 1컵의 검사 요구르트 no.1을 섭취한다. 제 2 군에서 피험자는 2주동안 매일 점심시간(12:00-13:00)에 1컵(95 g)의 플라시보 요구르트를 섭취하고, 이후 추가로 2주동안 매일 점심시간에 1컵의 검사 요구르트 no.2를 섭취하며, 제 9 군까지 이런 방식으로 시험이 수행된다. 제 10 군에서 피험자는 양 기간동안 플라시보 요구르트를 섭취한다. 각 종류의 요구르트의 섭취 전후에, 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 구강 운반 수준은 아래와 같이 측정한다. 대략 5 ㎖의 자극되지 않은 전체 타액을 15:00-16:00에 얼음 위의 용기에 집합시킨다. 이후, 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 구강 운반을 통상적인 생존 계수로 측정한다. 플라시보 요구르트는 발효된 유제품에 널리 이용되는 락토바실러스 불가리스(L. bulgaris)와 스트렙토코커스 써모필러스(S. thermophilus)로 구성되는데, 상기 플라시보 요구르트는 미생물을 사멸시키기 위하여 10분동안 80℃로 가열되고 검사 요구르트 no. 10으로 제조된다. 피험자와 연구자 모두 전체 연구 기간동안 어떤 요구르트가 어떤 검사 미생물을 함유하는 지를 인지하지 못한다. 락토바실러스(Lactobacillus) 또는 다른 제약학적 유산균을 함유하는 다른 산물의 이용은 개입 이전 1주일동안 및 전체 개입 기간동안 금지된다. 데이터는 통계학적으로 분석한다.
락토바실러스(Lactobacillus) 균주에 의한 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 생체내 저해의 결과, 데이터는 log(구강 스트렙토코커스(Streptococcus)의 CFU)로 표시된다.
요구르트 및 균주 최초 플라시보 이후 검사 이후
검사 요구르트 1:L. reuteri SD2112 5.0E+05 6.0E+05 1.0E+05
검사 요구르트 2:L. reuteri DSM 20016 3.0E+05 2.0E+05 4.0E+04
검사 요구르트 3:L. reuteri MM2-3 2.0E+05 4.0E+05 1.0E+05
검사 요구르트 4:L. reuteri CF2-7F 1.0E+05 7.0E+05 9.0E+02
검사 요구르트 5:L. reuteri MF2-3 9.0E+04 7.0E+05 2.0E+03
검사 요구르트 6:L. reuteri MF14-C 1.0E+03 4.0E+05 1.0E+05
검사 요구르트 7:L. reuteri MF52-1F 3.0E+04 7.0E+05 2.0E+05
검사 요구르트 8:L. salivarius LS1 4.0E+05 7.0E+05 1.0E+06
검사 요구르트 9:L. rhamnosus GG 8.0E+04 4.0E+05 1.0E+05
검사 요구르트 10:플라시보 7.0E+05 9.0E+05 1.0E+06
실시예 4: 선별된 균주를 함유하는 산물의 제조
본 실시예에서, 상기한 방법을 이용하여 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans) 저해와 점액소 결합에 대하여 락토바실러스 루테리(L. reuteri) CF2-7F(ATCC PTA-4965)를 선별하고 상기 균주를 표준 요구르트에 첨가하였다. 상기 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주는 낙농업계에서 락토바실러스(Lactobacillus)를 성장시키는 표준 방법을 이용하여 성장시키고 냉동 건조시켰다. 이후, 상기 배양액은 전통적인 요구르트 배양액을 이용하여 요구르트 g당 107 CFU 수준으로, 미리 발효된 우유에 첨가하는데, 상기 요구르트는 인간에 의해 우식증을 예방하는 방법으로 이용된다.
대표적인 특정 구체예가 본 명세서에 기술되긴 했지만, 본 발명의 기술적 사상 또는 범위를 벗어나지 않은 다양한 개변이 가능하다.

Claims (19)

  1. 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 CF2-7F(ATTC PTA-4965)의 생물학적으로 순수한 배양액.
  2. 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 MF2-3(ATTC PTA-4964)의 생물학적으로 순수한 배양액.
  3. 포유동물에서 치아우식증의 예방 또는 치료를 위하여 구강 점액소에 대한 우수한 결합 능력과 함께 저해 활성의 선별 측정법을 이용하여 구강에서 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 총수를 감소시키는 능력에서 선별된 락토바실러스(Lactobacillus)의 생물학적으로 순수한 배양액.
  4. 치아우식증 박테리아의 성장을 저해하는 산물에 있어서, 구강 점액소에 우수한 결합 능력과 함께 우식성 박테리아에 대한 저해 활성을 보유하는 선별된 적어도 한가지 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주의 세포를 함유하는 것을 특징으로 하는 산물.
  5. 제 4 항에 있어서, 적어도 한가지 균주는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 CF2-7F(ATTC PTA-4965), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 MF2-3(ATTC PTA-4964), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 SD2112(ATTC 55730)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 산물.
  6. 제 4 항에 있어서, 식품 산물인 것을 특징으로 하는 산물.
  7. 제 6 항에 있어서, 식품 산물은 요구르트, 젤리, 푸딩, 츄잉 검, 캔디, 초콜릿, 비스킷, 쿠키, 치즈, 주스, 차에서 선택되는 것을 특징으로 하는 산물.
  8. 제 6 항에 있어서, 식품 산물은 우유-함유 산물인 것을 특징으로 하는 산물.
  9. 제 8 항에 있어서, 식품 산물은 요구르트인 것을 특징으로 하는 산물.
  10. 제 4 항에 있어서, 치아 치료 제품인 것을 특징으로 하는 산물.
  11. 제 10 항에 있어서, 구강청정제인 것을 특징으로 하는 산물.
  12. 항-우식성 산물을 생산하는 방법에 있어서, 구강 점액소에 우수한 결합 능력과 함께 우식성 박테리아에 대한 저해 활성을 보유하는 선별된 적어도 한가지 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주의 세포를 산물에 첨가하는 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 제 12 항에 있어서, 적어도 한가지 균주는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 CF2-7F(ATTC PTA-4965), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 MF2-3(ATTC PTA-4964), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주 SD2112(ATTC 55730)에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 제 12 항에 있어서, 산물은 식품 산물인 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 제 14 항에 있어서, 식품 산물은 요구르트, 젤리, 푸딩, 츄잉 검, 캔디, 초콜릿, 비스킷, 쿠키, 치즈, 주스, 차에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제 14 항에 있어서, 식품 산물은 우유-함유 산물인 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제 16 항에 있어서, 식품 산물은 요구르트인 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제 12 항에 있어서, 산물은 치아 치료 제품인 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 제 18 항에 있어서, 산물은 구강청정제인 것을 특징으로 하는 방법.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100845034B1 (ko) * 2006-08-31 2008-07-08 경북대학교 산학협력단 충치균 성장을 억제하는 항균제를 생성하는 락토바실루스파라플란타룸 ｋｎｕｃ25로부터 제조된 충치균 항균제
KR20180131823A (ko) * 2017-06-01 2018-12-11 한국생명공학연구원 신규한 락토바실러스 류테리 균주 및 이를 유효성분으로 포함하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7105336B2 (en) * 2002-10-07 2006-09-12 Biogaia Ab Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation caused by Helicobacter
US20050281756A1 (en) * 2004-06-14 2005-12-22 Eamonn Connolly Use of lactic acid bacteria for decreasing gum bleeding and reducing oral inflammation
US6872565B2 (en) * 2003-01-29 2005-03-29 Biogaia Ab Product containing Lactobacillus reuteri strain ATTC PTA-4965 or PTA-4964 for inhibiting bacteria causing dental caries
US7517681B2 (en) * 2003-01-29 2009-04-14 Biogaia Ab Selection and use of lactic acid bacteria for reducing dental caries and bacteria causing dental caries
EP1634948A1 (en) * 2004-09-10 2006-03-15 Basf Aktiengesellschaft Means and methods for preventing and/or treating caries
TW200808191A (en) 2006-08-09 2008-02-16 Genmont Biotech Inc Product containing Lactobacillus paracasei
CN104814983A (zh) * 2006-12-19 2015-08-05 巴斯夫欧洲公司 用于预防和/或治疗变形链球菌群引起的龋的用途和方法
US7910127B2 (en) * 2007-03-02 2011-03-22 Biogaia Ab Use of lactic acid bacteria for improving food lysine absorption of pet animals
CN101273737B (zh) * 2007-03-28 2011-08-24 哈尔滨正方科技有限公司 一种在常温下保持高活菌数的发酵乳饮料的制备方法
US20080254011A1 (en) * 2007-04-11 2008-10-16 Peter Rothschild Use of selected lactic acid bacteria for reducing atherosclerosis
BE1018018A6 (nl) * 2008-02-28 2010-04-06 Gielen Cornelis Oplossing voor het biologisch reinigen van tandenborstels en bijhorende inrichting.
TWI346554B (en) 2008-04-30 2011-08-11 Genmont Biotech Inc Lactobacillus isolates having anti-inflammatory activities and uses of the same
EP2133414A1 (en) 2008-06-11 2009-12-16 Basf Se Uses and methods for preventing and /or treating oral malodour
KR101690090B1 (ko) 2009-07-16 2016-12-27 고쿠리츠다이가쿠호진 히로시마다이가쿠 구강내 질환의 예방, 개선 또는 치료제
CN101946898B (zh) * 2010-06-30 2011-08-31 江苏省农业科学院 一种抗龋齿鸭肉干的制作方法
JP5784294B2 (ja) * 2010-09-22 2015-09-24 シスメックス株式会社 細胞分析装置および細胞分析方法
CL2010001124A1 (es) * 2010-10-14 2011-01-21 Univ De Concepcion 50% Ma Loreto Ormeno 50% Alimento funcional probiotico que comprende cepas viables de lactobacillus sp.; uso de dicho alimento funcional para contrarestar los efectos colaterales de la quimioterapia.
GB201206599D0 (en) 2012-04-13 2012-05-30 Univ Manchester Probiotic bacteria
CN103478390B (zh) * 2013-08-13 2015-04-15 华侨大学 一种预防和辅助治疗牙周炎的口香糖的制备方法
EP3145520A2 (en) * 2014-05-20 2017-03-29 Biogaia AB Neonatal microbiome supplementation
CN106883999A (zh) * 2017-04-24 2017-06-23 南开大学 乳酸杆菌nk318.1及其用途
KR101966772B1 (ko) * 2017-07-11 2019-04-09 주식회사 다케어 락토바실러스 루테리 cs 132(kctc 11452bp) 또는 이의 배양물을 포함하는 구강병원균 억제조성물

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0154549B1 (en) * 1984-03-09 1990-12-27 Kabushiki Kaisya Advance Anticariogenic or antiperiodontitic agent
US5413960A (en) 1987-05-01 1995-05-09 Biogaia Ab Antibiotic reuterin
FR2672494A1 (fr) 1991-02-13 1992-08-14 Madinier Isabelle Ferments prophylactiques favorisant la prevention de la carie dentaire.
WO1997022353A1 (en) 1995-12-21 1997-06-26 Abbott Laboratories Use of lactobacillus reuteri to inhibit cryptosporidiosis in mammals
US5837238A (en) 1996-06-05 1998-11-17 Biogaia Biologics Ab Treatment of diarrhea
US5800813A (en) 1996-11-12 1998-09-01 Biogaia Biologics Ab Treatment of cryptosporidium infections
US5895758A (en) * 1997-06-10 1999-04-20 Bio-Energy Systems Strain of lactobacillus Plantarum
KR19990024297A (ko) 1997-08-07 1999-04-06 오종석 인체 구강내 치태형성을 억제하는 신규한 유산균
KR100266752B1 (ko) * 1997-08-07 2001-03-02 오종석 인체 구강내 치태형성을 억제하는 신규한 유산균
US6100388A (en) * 1998-03-16 2000-08-08 Biogaia Biologies Ab Lactobacilli harboring aggregation gene as a vaccine delivery vehicle
JP4564169B2 (ja) * 1998-08-12 2010-10-20 ソシエテ・デ・プロデュイ・ネスレ・エス・アー 口腔ミクロフローラに外因性乳酸菌の添加
US6461607B1 (en) * 1998-08-24 2002-10-08 Ganeden Biotech, Inc. Probiotic, lactic acid-producing bacteria and uses thereof
IT1306716B1 (it) * 1999-06-21 2001-10-02 Mendes S U R L Associazione di batteri lattici e suo uso per la prevenzione e/o iltrattamento terapeutico di infezioni e di stati infiammatori.
GB9920578D0 (en) 1999-08-31 1999-11-03 Nestle Sa Composition for maintenance of bone or dental health or treatment of bone or dental disorders
JP2003299480A (ja) * 2002-04-09 2003-10-21 Hiroki Futagawa 虫歯予防用細菌、虫歯予防用食品、虫歯予防用口腔洗浄剤及びヨーグルトの製造方法
JP4021720B2 (ja) * 2002-07-22 2007-12-12 パイオニア株式会社 絶縁導線および自己融着性絶縁導線
US6835397B2 (en) * 2002-12-23 2004-12-28 Balchem Corporation Controlled release encapsulated bioactive substances
US6872565B2 (en) * 2003-01-29 2005-03-29 Biogaia Ab Product containing Lactobacillus reuteri strain ATTC PTA-4965 or PTA-4964 for inhibiting bacteria causing dental caries

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100845034B1 (ko) * 2006-08-31 2008-07-08 경북대학교 산학협력단 충치균 성장을 억제하는 항균제를 생성하는 락토바실루스파라플란타룸 ｋｎｕｃ25로부터 제조된 충치균 항균제
KR20180131823A (ko) * 2017-06-01 2018-12-11 한국생명공학연구원 신규한 락토바실러스 류테리 균주 및 이를 유효성분으로 포함하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물

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