KR20050087786A

KR20050087786A - 신규한 디페닐에틸렌 화합물의 헤테로사이클릭 동족체

Info

Publication number: KR20050087786A
Application number: KR1020057006147A
Authority: KR
Inventors: 파르타 네오기; 데벤드라나쓰 데이; 사티아나라야나 메디첼라; 비스와지트 나그; 아써 리
Original assignee: 테라코스, 인코포레이티드
Priority date: 2002-10-08
Filing date: 2003-10-08
Publication date: 2005-08-31
Also published as: CA2501456A1; MXPA05003781A; JP2006505551A; US20080293949A1; EP1549625A1; CN1708486A; US20030181494A1; NZ539121A; WO2004033438A1; US7718682B2; US20060235062A1; AU2003282754A1; US7407978B2

Abstract

타입 II 당뇨병의 동물모델에서 혈당농도, 혈청 인슐린, 트리글리세라이드 및 유리 지방산 농도를 저하시키는데 효과적인 티아졸리딘디온 또는 옥사졸리딘디온 부위를 포함하는 신규한 디페닐에틸렌 화합물 및 그의 유도체가 제공된다.

Description

신규한 디페닐에틸렌 화합물의 헤테로사이클릭 동족체{Novel heterocyclic analogs of diphenylethylene compounds}

본 발명은 디페닐에틸렌 화합물 및 그의 유도체를 티아졸리딘 또는 옥사졸리딘 중간체와 화학적으로 결합시켜 형성된 신규한 화합물에 관한 것이다. 이들 화합물은 여러 가지 유용한 약리학적 효과를 제공하는데 효과적이다. 예를 들면, 본 화합물은 타입 II 당뇨병의 동물모델에서 혈당, 혈청 인슐린 및 트리글리세라이드 농도를 저하시키는데 유용하다.

더욱이, 이들 화합물은 인슐린 저항(insulin resistance) 관련 질환, 예를 들어 다낭난소 증후군은 물론 과지질혈증, 관상동맥 질환 말초근육질환을 치료하며 또한 염증 및 면역질환, 특히 TNF-알파, IL-1, IL-6 및/또는 COX-2 등의 사이토킨 또는 사이클로옥시게나제에 의해 매개되는 질환을 치료하는데 유용하다.

타입 I 및 타입 II 당뇨병의 원인은 유전학 및 환경이 주요 인자인 것처럼 보이지만 아직 공지되어 있지 않다. 인슐린 의존 타입 I 및 비-인슐린 의존 타입 II는 공지되어 있는 타입이다. 타입 I은 관련 자가항원이 아직 공지되어 있지 않은 자가면역 질환이다. 타입 I의 환자는 생존하기 위해 비경구로 또는 피하로 인슐린을 투여할 필요가 있다. 그러나 더욱 통상적인 형태의 타입 II 당뇨병은 충분한 량의 인슐린을 만들거나 생산된 인슐린을 적절히 사용하기 위하 신체의 무능력으로부터 생기는 대사질환이다. 인슐린 분비 및 인슐린 저항은 주요한 흠결로 간주되지만, 메카니즘에 수반된 정밀한 유전인자는 미공지로 남아있다.

당뇨병 환자는 통상적으로 다음 결함중의 하나 이상을 가지고 있다: 췌장에 의한 인슐린의 적은 생산; 간에 의한 글루코오스의 과잉 분비; 골격근에 의한 저하된 글루코오스 섭취; 글루코오스 운반체의 결함; 및 인슐린 수용체의 탈감각.

인슐린의 비경구 또는 피하 적용 이외에는, 약 4개 부류의 경구 저혈당제가 사용된다.

[표 1]

부류	승인된 약제	작용양상	한정
설포닐우레아	4(1차생산) 및2(2차생산)	췌장에 작용하여 더 많은인슐린을 방출	저항의 발전
비구아나이드	메트포민	간에 의한 글루코오스 생성 감소, 인슐린 민감성 증가	간 장애, 락틱 아시도시스
알파'- 글루코시다제 억제제	아카보스	소화공정 간섭; 글루코오스 흡수 감소	식후 수준에서 유용함
티아졸리딘디온	트로글리타존(제거)로지글리타존 피오글리타존	인슐린 저항 감소	인슐린 "add-on", 심장 및 간장 질환 사람에게 유용하지 않음

1, 로지글리타존 2, 피오글리타존

3, 트로글리타존 4, 메트로민

상기 표로부터 명백한 바와 같이, 당뇨병의 치료에 사용 가능한 약제 각각은 특정한 이점을 갖는다. 따라서 당뇨병의 치료에 사용되는 신약, 특히 경구적으로 투여할 수 있는 수용성 약제의 확인 및 개발에 계속적인 관심이 있다.

상기 표에 목록된 티아졸리딘디온 부류는 타입II 당뇨병의 치료를 위해 최근에 더욱 광범위한 용도로 사용되고 있으며, 이는 환자가 인슐린의 효과에 덜 반응하게 되는 증상인 "인슐린 저항"을 다투기 위한 인슐린 민감제로서 특별한 유용성을 나타낸다. 그러나 공지된 티아졸리딘디온은 환자 인구의 상당한 부분에 효과적이지 않다. 그 외에, FDA에서 승인하는 이런 부류의 제1 약제, 즉 트로글리타존은 간독성의 문제 때문에 시장에서 철수되었다. 따라서 비독성, 더욱 광범위하게 효과적인 인슐린 민감제에 대해 계속되는 필요가 있다.

티아졸리딘디온을 이용하는 약제학적 조성물 및 방법은 미국특허 6,133,295호, 6,133,293호, 6,130,216호, 6,121,295호, 6,121,294호, 6,117,893호, 6,114,526호, 6,110,951호, 6,110,948호, 6,107,323호, 6,103,742호, 6,080,765호, 6,046,222호, 6,046,202호, 6,034,110호, 6,030,973호, RE36,575호, 6,011,036호, 6,011,031호, 6,008,237호, 5,990,139호, 5,985,884호, 5,972,973호 등에 기술되어 있다.

상기 지적한 바와 같이, 본 발명은 또한 면역학적 질환 또는 염증, 현저하게는 사이토킨 또는 사이클로옥시게나제에 의해 매개된 바와 같은 질환의 치료와 관련이 되어 있다. 면역시스템의 주요 인자는 대식세포 또는 항원-존재 세포, T-세포 및 B-세포이다. 다른 면역세포, 예를 들어 NK세포, 호염기성, 비만세포 및 수지상 세포의 역할은 알려져 있지만, 주요 면역학적 질환에서 그의 역할은 불명확하다. 대식세포는 T세포 자극 및 증식에 필요한 "도움"을 제공하며 또한 두 가지 염증의 중요한 매개체이다. 가장 중요하게 대식세포는 IL, 1, IL 12 및 TNF-알파를 생산하며, 이들은 모두 강력한 프로-염증성 분자이며 또한 T-세포에 대한 도움을 제공한다. 그 외에, 대식세포의 활성화는 효소, 예를 들어 사이클로옥시게나제 II (COX-2), 유도 가능한 산화질소 합성효소 (NOS)의 유도, 및 정상세포를 손상할 수 있는 자유 라디칼의 생산을 하게 한다. 많은 인자들은 박테리아 생성물, 초 항원 및 인터페론 감마 (IFN γ)를 포함한 대식세포를 활성화 한다. 포스포티로신 키나제(PTKs) 및 다른 하기 정의된 셀룰라 키나제는 활성화 과정에 관여하는 것으로 믿어진다.

대식세포는 섭취하여 항원을 작은 단편으로 파괴한다. 이어서 이들 단편은 주요한 조직 적합성 복합물 II (MHC II)와 연관한다. 항원 단편 및 MHC II의 복합물은 T세포 수용체에 의해 인식된다. 적절한 동시자극 신호와 연관하여 이 수용체-리간드 상호작용은 T-세포의 활성화 및 증식을 유도한다. 항원의 투여경로, 그들의 투여량 및 대식세포가 활성화 되는 증상에 따라, 면역반응은 B 세포 도움 및 항체 생산이나 세포 매개 반응의 발전을 하게 한다. 대식세포는 면역반응의 발달에 민감하기 때문에, 그들의 작용을 변형하는 약제, 구체적으로 그들의 사이토킨 분비 프로파일은 면역반응의 방향 및 효력을 결정할 가능성이 있다.

사이토킨은 면역반응을 매개하는데 중요한 면역세포에 의해 분비되는 분자이다. 사이토킨 생산은 다른 사이토킨의 생산, 변화된 세포작용, 세포분열 또는 차별화를 유도한다. 염증은 상처 또는 감염에 대한 신체의 정상반응이다. 그러나 류마티스성 관절염 등의 염증성 질환에서, 병리학적 염증성 과정은 질병률 및 사망률을 유도할 수 있다. 사이토킨 종양 괴사인자-알파(TNF-알파)는 염증성 반응에 중심적 역활을 하며 또한 염증성 질환의 중재점으로 목표로 하고 있다. TNA-알파는 활성화 대식세포 및 다른 세포에 의해 방출되는 폴리펩티드 호르몬이다. 낮은 농도에서, TNF-알파는 백혈구를 활성화하고 이들을 염증의 관외부위로 이행을 촉진하는데 관여한다 (Moser 등, J Clin Invest, 83:444-55, 1989). 더 높은 농도에서, TNF-알파는 강력한 발열인자로 작용할 수 있으며 또한 프로-염증성 사이토킨의 생산을 유도한다 (Haworth등, Eur J Immunol, 21: 2575-79, 1991; Brennan 등, Lancet, 2:244-7, 1989). TNF-알파는 또한 급성-상 단백질의 합성을 자극한다. 류마티스성 관절염에서 만성 및 진행 염증성 질환은 미국 성인인구의 약 1%에 영향을 미치며, TNF-알파는 손상 및 파괴를 접합하게 하는 사이토킨 다단계를 매개로 한다 (Arend 등, Arthritis Rheum, 38:151-60, 1995). 가용성 TNF-수용체 (etanercept) (Goldenberg, Clin Ther, 21: 75-87, 1999) 및 안티-TNF-알파 항체(inflinximab) (Luong 등, Ann Pharmacotherapy, 34:743-60, 2000)을 포함하는 TNF-알파의 억제제는 미국식품의약관리청(FDA)에서 류마티스성 관절염의 치료제로서 승인하였다.

상승된 농도의 TNF-알파는 또한 많은 다른 질환 및 질병증상에서 암시되고 있다: 예를 들어, 악액질 (Fong등, Am J Physiol, 256:8659-65, 1989), 패혈충격 증후군 (Tracey등, Proc Soc Exp Biol Med, 200:233-9, 1992), 골관절염 (Venn 등, Arthritis Rheum, 36:819-26, 1993), 염증성 장 질환 예를 들어 크론 질병 및 궤양성 대장염 (Murch등, Gut, 32:913-7, 1991), 베호에트 질병 (Akoglu등, J Rheumatol, 17:1107-8, 1990), 가와사끼 질병 (Matsubara등, Clin Immunol Immunopathol, 56:29-36, 1990), 뇌 말라리아 (Grau등, N 뚜히 J Med, 320:1586-91, 1989), 성인 호급곤란 증후군(Millar등, Lancet 2:712-4, 1989), 석면 침착증 및 규폐증 (Bissonnette등, Inflammation, 13:329-39, 1989), 폐 시르코이드증 (Baughman 등, J Lab Clin Med. 115:36-42, 1990), 천식 (Shah등, Clin Exp Allergy, 25:1038-44, 1995), AIDS (Denzube등, J Acquir Immune Defic Syndr, 5: 1099-104, 1992), 뇌막염 (Vaage등, Lancet, 1:355-7, 1987), 건선 (Oh등, J Am Acad Dermatol, 42:829-30, 2000), 이식편대 숙주반응 (Nestel등, J Exp Med, 175:405-13, 1992), 다발성 경화증 (Sharief등, N Engl J Med, 325:467-72, 1991), 전신성 낭창 홍반 (Maury등, Int J Tissue React, 11:189-93, 1989), 당뇨병 (Hotamisligil등, Science, 259:87-91, 1993), 및 죽상경화증 (Bruunsgaard등, Clin Exp Immunol, 121-60, 2000).

상기 인용된 문헌들로부터 TNF-알파의 억제제는 광범위한 질병의 치료에 강력하게 유용함을 알 수 있다. TNF-알파를 억제하는 화합물은 미국특허 6,090,817호, 6,080,763호, 6,080,580호, 6,075,041호, 6,057,369호, 6,048,841호, 6,046,319호, 6,046,221호, 6,040,329호, 6,034,100호, 6,028,086호, 6,022,884호, 6,015,558호, 6,004,974호, 5,990,119호, 5,981,701호, 5,977,122호, 5,972,936호, 5,968,945호, 5,962,478호, 5,958,953호, 5,958,409호, 5,955,480호, 5,948,786호, 5,935,978호, 5,935,977호, 5,929,117호, 5,925,636호, 5,900,430호, 5,900,417호, 5,891,883호, 5,869,677호 등에 기술되어 있다.

인터로킨-6 (IL-6)은 다상 유전증 및 작용 중복성을 나타내는 또 하나의 프로-염증성 사이토킨이다. IL-6은 면역 반응, 염증 및 조혈에 참여한다. 간급성 상반응의 강력한 유도인자이며 또한 글루코코르티코이드에 의한 음성 조절 하에 있는 시상하부-뇌하수체-부신 축의 강력한 자극제이다. IL-6은 성장호르몬의 분비를 촉진하지만, 티로이드 작극 호르몬의 방출을 억제한다. 증가된 농도의 IL-6은 여러 가지 염증성 질환에서 나타나며, 또한 IL-6 사이토킨 서브 패미리의 억제는 류마티스성 관절염 치료요법을 증진시키는 전략으로 제안되었다 (Carroll등, Inflamm Rex, 47:1-7, 1998). 그 외에, IL-6은 아테롬성 경화의 진전 및 관상심질환의 변인론과 연관되어 있다 (Yudkin 등, Atherosclerosis, 148:209-14, 1999). IL-6의 과잉생산은 스테로이드 제거 증후군, 미조절 바소프레신 분비와 관련된 증상, 증가된 뼈 흡수와 연관된 골다공증, 예를 들어 과잉 기생 및 성-스테로이드 결핍의 경우에 나타난다 (Papanicolaou등, Ann Intern Med, 128:127-37, 1998).

IL-6의 과도한 생산은 여러 가지 질병상태에 연관되어 있기 때문에, IL-6분비를 억제하는 화합물을 개발하는 것이 크게 바람직하다. IL-6를 억제하는 화합물은 미국특허 6,004,813호, 5,527,546호 및 5,166,137호에 기술되어 있다.

사이클로옥시게나제는 염증 및 통증의 중요한 매개체인 프로스타글란딘의 생합성에서 속도-조절단계를 촉진하는 효소이다. 효소는 적어도 두개의 독특한 이성체, 사이클로옥시게나제-1 (COX-1) 및 사이클로옥시게나제-2 (COX-2)로서 발생한다. COX-1 이성체는 위점막, 혈소판 및 기타 세포에서 구성적으로 표현되며 또한 본래의 소화관을 보호함을 포함하는 포유동물에서 호메오스타티스의 유지에 연관되어 있다. 다른 한편, COX-2이성체는 구성적으로 표현되지 않지만, 다양한 약제, 예를 들어 사이토킨, 미토겐, 호르몬 및 성장인자에 의해 유도된다. 특히 COX-2는 염증성 반응 도중에 유도된다 (De Witt DL, Biochim Biophys Acta, 1083:121-34, 1991; Seibert 등, Receptor, 4:17-23, 1994). 아스피린 및 다른 통상적인 비-스테로이드 항-염증성 약제 (NSAIDs)는 COS-1과 COS-2의 비-선택성 억제제이다. 이들은 염증성 통증 감소 및 팽창에 효과적이지만, 이들은 COX-1의 보호작용을 방해하기 때문에 이들은 위장 병리학의 바람직하지 않은 부작용을 일으킨다. 따라서 COX-2를 선택적으로 억제하는 약제 (단 COX-1은 제외)는 염증성 질환의 치료에 바람직하다. 최근에, COX-2를 선택적으로 억제하는 디아릴피라졸 설폰아미드 (celecoxib)는 류마티스성 관절염의 치료에 사용하기 위해 FDA에 의해 승인되었다 (Luong 등, Ann Pharmacother, 34:743-60, 2000; Penning 등, J Med Chem, 40:1347-65, 1997). COX-2는 또한 많은 암 및 전암성 병변에서 표현되며, 또한 선택적 COX-2 억제제가 직장, 유방 및 기타 암을 치료 및 예방하는데 유용할 수 있다는 증거가 있다 (Taketo MM, J Natl Cancer Inst, 90:1609-20, 1998; Fournier 등, J Cell Biochem Suppl, 34:97-102, 2000; Masferrer등, Cancer Res, 60:1306-11, 2000). 1999년 celecoxib은 미처리된 상태로 직장암을 유발하는 증상인 특유한 선종양 폴립증의 환자들을 통상적으로 취급하는 부속물로서 FDA가 승인하였다.

COX-2를 선택적으로 억제하는 화합물은 미국특허 5,344,991호, 5,380,738호, 5,434,178호, 5,466,823호, 5,474,995호, 5,510,368호, 5,521,207호, 5,521,213호, 5,536,752호, 5,550,142호, 5,552,422호, 5,604,260호, 5,639,780호, 5,643,933호, 5,677,318호, 5,691,374호, 5,698,584호, 5,710,140호, 5,733,909호, 5,789,413호, 5,811,425호, 5,817,700호, 5,849,943호, 5,859,257호, 5,861,419호, 5,905,089호, 5,922,742호, 5,925,631호, 5,932,598호, 5,945,539호, 5,968,958호, 5,981,576호, 5,994,379호, 5,994,381호, 6,001,843호, 6,002,014호, 6,004,950호, 6,004,960호, 6,005,000호, 6,020,343호, 6,034,256호, 6,046,191호, 6,046,217호, 6,057,319호, 6,071,936호, 6,071,954호, 6,077,850호, 6,077,868호, 6,077,869호 및 6,083,969호에 기술되어 있다.

사이토킨 IL-1은 또한 염증성 반응에 참여한다. 이것은 흉선세포 증식, 섬유아세포 성장인자 활성, 및 활액세포로부터 프로스타글란딘의 방출을 자극한다.

상승 또는 미조절 농도의 사이토킨 IL-1 베타는 다수의 염증성 질환 및 다른 질병 상태와 연관되어 있다. 예를 들어 성인 호흡곤란 증상 (Mefuri 등, Chest 107:1062-73, 1995), 알러지 (Hastie등, Cytokine 8:730-8, 1996), 알쯔하이머 병 (O'Barr 등, J Neuroimmunol 109:87-94, 2000), 식욕감퇴 (Laye 등, Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 279:893-8, 2000), 천식 (Sousa 등, Thorax 52:407-10, 1997), 아테롬성 경화 (Dewberry등, Arterioscler Thromb Vasc Biol 20:2394-400, 2000), 뇌종양 (Ilyin 등, Mol Chem Neuropathol 33:125-37, 1998), 카헥시 (Nakatani 등, Res Commun Mol Pathol Pharmacol 102:241-9, 1998), 암종 (Ikemoto 등, Anticancer Res 20:317-21, 2000), 만성 관절염 (van den Berg등, Clin Exp Rheumatol 17:S105-14, 1999), 만성피로 증후근 (Cannon등, J Clin Immunol 17:253-61, 1997), CNS 손상 (Herx 등, J Immunol 165:2232-9, 2000), 간질 (De Simoni 등 Eur J Neurosci 12:2623-33, 2000), 섬유증 폐 질환 (Pan 등, Pathol Int 46:91-9, 1996), 전격성 간장애 (Sekiyama등, Clin Exp Immunol 98:71-7, 1994), 치은염 (Biesbrock 등, Monogr Oral Sci 17:20-31, 2000), 사구체염 (Kluth 등, J Nephrol 12:66-75, 1999), 귈랑-바레 증후군 (Zhu 등, Clin Immunol Immunopathol 84:85-94, 1997), 열 통각과민 (Opree등, J Neurosci 20:6289-93, 2000), 출혈 및 내독소혈증 (Parsey등, J Immunol 160:1007-13, 1998), 염증성 장질환(Olson 등, Pediatr Gastroenterol Nutr 16:241-6, 1993), 백혈병 (Estrov등, Leuk Lymphoma 24:379-91, 1997), 백혈병 관절염 (Rudwaleit등, Arthritis Rheum 41:1695-700, 1998), 전신 홍반성 루푸스 (Mao등, Autoimmunity 24:71-9, 1996), 다발성 경화 (Martin 등, J Neuroimmunol 61:241-5, 1995), 골관절염 (Hernvann등, Osteoarthritis Cartilage 4:13942, 1996), 골다공증 (Zheng 등, Maturitas 26:63-71, 1997), 파킨스병 (Bessler 등, Biomed Pharmacother 53:141-5, 1999), POEMS증후군(Gherardi 등, Blood 83:2587-93), 1994), 조기분만 (Dudley, J Reprod Immunol 36:93-109, 1997), 건선 (Bonifati 등, J Biol Regul Homeost Agents 11:133-6, 1997), 재관류 장애 (Clark등, J Surg Res 58:675-81, 1995), 류마티스성 관절염 (Seitz 등, J Rheumatol 23:1512-6, 1996), 패혈성 쇼크 (van Deuren 등, Blood 90:1101-8, 1997), 전신성 혈관염 (Brooks 등, Clin Exp Immunol 106:273-9, 1996), 측두 하악골 접합 질환 (Nordahl 등, Eur J Oral Sci 106:559-63, 1998), 결핵 (Tsao 등, Tuber Lung Dis 79:279-85, 1999), 바이러스성 비염 (Roseler 등, Eur Arch Otorhinolaryngol Suppl 1:S61-3, 1995), 및 균, 염좌, 외상, 감염 또는 다른 질병과정으로부터 생기는 통증 및/또는 염증을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.

IL-1 베타의 과잉생산은 수많은 질병 증상과 연관되어 있기 때문에 IL-1 베타의 생산 또는 활성을 억제하는 화합물들을 개발하는 것이 바람직하다. IL-1베타를 억제하는 방법 및 조성물은 미국특허 6,096,728호, 6,090,775호, 6,083,521호, 6,036,978호, 6,034,107호, 6,034,100호, 6,027,712호, 6,024,940호, 5,955,480호, 5,922,573호, 5,919,444호, 5,905,089호, 5,874,592호, 5,874,561호, 5,874,424호, 5,840,277호, 5,837,719호, 5,817,670호, 5,817,306호, 5,792,778호, 5,780,513호, 5,776,979호, 5,776,954호, 5,767,064호, 5,747,444호, 5,739,282호, 5,731,343호, 5,726,148호, 5,648,017호, 5,683,992호, 5,668,143호, 5,624,931호, 5,618,804호, 5,527,940호, 5,521,185호, 5,492,888호, 5,488,032호 등에 기술되어 있다.

전술한 기재로부터, 예를 들어 TNF-알파, IL-1, IL-6, COX-2 또는 면역반응, 염증 또는 염증성 질환, 예를 들어 관절염에 관계를 갖는 것으로 간주되는 다른 약제가 있는 반면, 이러한 질병들을 효과적으로 치료 또는 억제하기 위한 신규하고 개선된 화합물들에 대한 필요성이 여전히 남아있음을 인식할 것이다. 본 발명의 주요 목적은 상기한 치료 뿐만 아니라 인슐린 저항, 과지질혈증, 관상심질환, 다발성 경화증 및 암의 치료에 효과적인 화합물을 제공한다.

본 발명의 한 태양에서, 다음 일반식의 화합물이 제공된다.

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 독립적으로 H; 선형 또는 분지형 C₁- C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂- C₂₀알케닐; - CO₂Z' (식중, Z'는 H, 나트륨, 칼륨, 또는 다른 약제학적으로 허용되는 반대이온(counter-ion) 예를 들어 칼슘, 마그네슘, 암모니움, 트로메타민, 테트라메틸암노니움 등이다); -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로, 치환된 C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 치환된 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐, 여기서 R'''는 독립적으로 C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬, 선형 또는 분지형 알케닐 또는 아르알킬 -(CH₂)_x-Ar (식중, x는1-6임);-CONR₂''''(식중, R''''는 독립적으로 H, 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬, 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시, 바람직하게는 임의로 치환된 C₁-C₆알콕시 (예를 들어 메톡시, 에톡시 또는 프로폭시), 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐 또는 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴이며 또는 NR₂'''는 사이클릭 부위 예를 들어 모르폴린, 피페리딘, 피페라진 등을 나타내며;

R''는 독립적으로 H; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'(식중, Z'는 H, 나트륨, 칼륨, 또는 다른 약제학적으로 허용되는 반대이온 예를 들어 칼슘, 마그네슘, 암모니움, 트로메타민, 테트라메틸암모니움 등임); -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로; 치환된 C₁-C₂₀선형 또는 분지형 알킬 또는 치환된 C₂-C₂₀선형 또는 분지형 알케닐, 여기서 R'''는 독립적으로 C₁-C₂₀선형 또는 분지형 알킬, 선형 또는 분지형 알케닐 또는 아르알킬 -(CH₂)_x-Ar (식중, x는1-6임 )이며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 H; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 H; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알케노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르보실아미노; 아로일; 아르알카노일; 카르복실; 시아노; 할로; 하이드록시; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬 또는 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 함께, A' 및 B'는 함께; A'' 및 B''는 함께 결합하여 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 형성하며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.

본 발명의 추가의 태양에서, 다음과 같은 일반식 (1)의 바람직한 화합물이 제공된다.

A)

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.

B)

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카르보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.

이들 화합물은 당뇨병 과지방혈증 및 다른 인슐린 저항관련 질환, 예를 들어 관상동맥질환 및 말초혈관 질환을 치료하며 또한 예를 들어 TNF-알파, IL-1, IL-6 및/또는 COX-2 등의 사이토킨 또는 사이클로옥시게나제 에 의해 원인이 되는 염증성 관절염 및 콜라겐 혈관 질환 등의 염증 및 염증성 질환을 치료하는데 유용하다. 이들 화합물은 또한 암 등의 사이토킨 및/또는 사이클로옥시게나제에 의해 매개된 다른 질병을 치료하는데 유용하다.

따라서 본 발명은 치료학적으로 유효량의 일반식(1)의 화합물을 당뇨병 또는 관련 증상으로 고통하는 환자에게 투여함을 포함하는 당뇨병 또는 관련 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 그 외에 본 발명은 유효량의 일반식(1)에 따른 화합물을 사이토킨 및/또는 사이클로옥시게나제의 치료를 필요로 하는 대상에게 투여함으로써 사이토킨 및/또는 사이클로옥시게나제에 의해 매개된 염증 또는 염증성 질환의 치료방법을 제공한다. 다른 용도들은 본 명세서로부터 명백할 것이다.

여기서 검토되는 치료에 사용되는 약제학적으로 또는 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효량의 하나 이상의 일반식(1)에 따른 화합물을 포함유하는 약제학적 조성물이 또한 제공된다.

도면의 간단한 설명

도 1a 및 1b는 15일에 걸쳐 본 발명에 따른 화합물을 공급한 db/db (자발성 당뇨병) 수컷 마우스의 혈당 농도 및 체중의 그래프를 나타낸다.

도 2a 및 2b는 15일에 걸쳐 본 발명에 따른 화합물을 공급한 ob/ob (유전학적으로 비만성 및 자발성 당뇨병) 수컷 마우스의 혈당 농도 및 체중의 그래프를 나타낸다.

도 3a 및 3b는 20-25일에 걸쳐 본 발명에 따른 화합물을 공급한 db/db 마우스 및 ob/ob 마우스의 혈당 농도 및 체중의 그래프를 나타낸다.

도 4는 본 화합물의 투여 후 72시간에 걸쳐 db/db 수컷 마우스의 혈당 농도의 그래프를 나타낸다.

도 5a, 5b, 5c 및 5d는 본 발명에 따른 화합물로 처리된 db/db 마우스의 혈청에서 트리글리세라이드 농도, 유리 지방산 농도, glyc-Hb 농도 및 렙틴 농도의 그래프를 나타낸다.

도 6a, 6b, 6c 및 6d는 본 발명에 따른 화합물로 처리된 ob/ob 마우스의 혈청에서 혈청 인슐린 농도, 트리글리세라이드 농도, 유리 지방산 농도 및 Glyc-Hb 농도를 보여주는 그래프이다.

도 7a 및 7b는 본 발명에 따른 화합물로 21일간 처리 후 마우스에서 간효소의 평가를 나타낸다.

도 8은 본 발명의 화합물에 대한 3T3-L1 세포에서 당 (글루코오스, glucose) 흡수를 나타낸다.

도 9는 LPS-유도 TNF 생산의 억제용 로지글리타존(rosiglitazone)과 본 발명의 화합물의 비교 그래프이다.

도 10은 LPS-유도 IL-6 생산의 억제용 로지글리타존과 본 발명의 화합물의 비교 그래프이다.

도 11은 LPS-유도 IL-1 베타 생산의 억제용 로지글리타존과 본 발명의 화합물의 비교 그래프이다.

도 12a 및 12b는 LPS-유도 COX-2 활성의 억제용 로지글리타존(도 12b)과 본 발명의 화합물(도 12a)의 비교를 나타낸다.

도 13a, 13b, 13c 및 13d는 본 발명에 따른 화합물을 사용하여 콜라겐-유도 관절염의 억제를 예시한다.

도 14는 본 발명에 따른 화합물을 사용하여 실험 알러지성 뇌척수염 (EAE)의 억제를 예시한다.

도 15는 자극된 RAW 264 세포에서 NF-kB 활성화를 나타낸다.

도 16a는 화합물 11 및 로지글리타존을 사용하여 db/db 마우스의 혈당의 감소율의 비교이다. 도 16b는 동물의 체중이다.

도 17a는 화합물 11을 사용하여 ob/ob 마우스의 혈당의 감소율의 비교이다. 도 17b는 동물의 체중이다.

도 18은 14일간 처리 후 db/db 마우스의 혈청 프로파일이다.

도 19는 ob/ob 마우스의 글루코오스 농도에 대한 화합물 11의 투여량 반응이다.

도 20은 화합물 11 또는 부형제의 증가하는 농도로 처리한 후 구별된 3T3-L1 아디포사이트에서 측정한 시험관내 글루코오스 흡수량이다. 도 20b는 부형제, 로지글리타존 또는 화합물 11의 존재 하에 인슐린의 증가하는 농도의 존재 하에 측정한 구별된 3T3-L1 아디포사이트의 글루코오스 흡수량이다.

도 21은 당뇨병 동물에서 화합물 11의 시험관내 항 혈당 활성이다.

혈청 프로파일이다.

도 22는 ob/ob 마우스에서 화합물 11 대 로지글리타존의 시험관내 항혈당 활성이다.

도 23은 3T3-L1 세포에서 화합물 11 대 로지글리타존의 시험관내 항혈당 활성이다. (A). 축적된 트리글리세라이드의 정량적 측정. (B) 오일 레드 O에 의한 트리글리세라이드 축적의 정성적 평가.

도 24는 화합물 11 및 로지글리타존에 의한 PPRE-Luc Reporter의 PPAR 감마-매개 트랜스 활성화의 유도이다.

도 25는 HepG2 세포에서 시험관내 글리코겐 합성에 대한 화합물 11의 영향이다. a. 인슐린의 부재 하에 화합물 11에 의한 글루코오스로부터 글리코겐 합성의 투여량-의존 자극. b. 화합물 11-자극 글리코겐 합성에서 시간-의존 증가. c. 화합물 11에 의해 유도된 사이클로헥시마이드 블록 글리코겐 합성.

바람직한 실시예에 대한 서술

일반식 (1)에 따른 바람직한 화합물은 이후에 화합물 11로 언급되는 5-(4-(4-(1-카르보메톡시-2-(3,5-디메톡시페닐)-에테닐)-펜옥시)-벤질)-2,4-티아졸리딘디온이다. 그러나, 본 발명은 또한 일반식 (1)에 따른 다른 화합물의 제공 및 용도를 의도하는 것으로 인식될 것이다.

본 발명에 따른 화합물은 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 결합하여 약제학적 조성물, 예를 들어 다양한 충진제 및 결합제와 함께 정제 또는 캡슐 형태의 동결건조 분말을 제공할 수 있다. 조성물에서 효과적인 투여량은 당업계의 통상의 기술자들에 의해 선택되는 바와 같이 광범위하게 변할 수 있으며 또한 경험적으로 측정할 수 있다.

앞서 지적한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 상승된 혈당 농도의 존재를 나타내는 당뇨병의 치료에 유용하다. 즉 타입 I 및 타입 II 당뇨병을 포함하는 당뇨병 등의 과혈당 질환은 물론, 과트리글리세라이드 혈증, 신장 관련 질환 등의 과지질혈증, 증가된 콜레스테롤, 비만 등의 과혈당 질환. 이 화합물은 또한 인슐린 저항 및/또는 과인슐린 혈증에 관련된 질환의 치료에 유용하며, 이는 당뇨병 이외에 안드로겐 과잉 증상 예를 들어 다낭성 난소 증후군 (Ibanez등, J. Clin Endocrinol Metab, 85:3526-30, 2000; Taylor A.E., Obstet Gynecol Clin North, Am, 27:583-95, 2000), 관상동맥 질환 예를 들어 죽상경화증 및 맥관 재발협착증, 및 말초혈관 질환을 포함한다. 그 외에, 본 발명의 화합물은 또한 염증 및 면역성 질환의 치료에 유용하며, 이는 프로-염증성 사이토킨에 연결된 신호통로, 예를 들어 류마티스성 관절염 및 기타 염증성 관절염, 다발성 경화증, 염증성 장 질환, 건선, 건선 관절염, 강직 척추염 및 기타 척추 관절염, 및 접촉 및 아토피성 피부염을 포함한다.

"치료"는 본 발명의 화합물이 염증성 또는 면역성 질환으로 고통하는 환자의 반응처럼 또는 프로-염증성 사이토킨의 발전을 억제 또는 예방하고 또한 과혈당 질환으로 고통하는 환자에서 혈당 농도를 감소시키는데 적어도 충분한 량으로 투여됨을 의미한다. 당뇨병의 경우에, 본 화합물은 통상적으로 혈당 농도, 유리 지방산 농도, 콜레스테롤 농도 등을 허용 가능한 범위로 감소시키는데 충분한 량으로 투여되며, 여기서 허용가능한 범위는 정상 평균 혈당 농도 및 대상의 같은 농도의 + 또는 -10%, 및 보통 + 또는 5%를 의미하며 또는 상승된 농도의 이들 파라미터와 연관된 복잡화의 위험을 감소시키고/거나 증후군을 경감시키는데 충분하다. 다양한 대상들은 본 화합물로 처리하여 가축, 야생 또는 희귀 동물, 애완동물은 물론 인간 등의 혈당 농도를 감소시킬 수 있다. 이 화합물은 정맥내, 피내, 근육내, 피하, 경구 등을 포함하는 통상의 투여기술을 사용하여 과혈당 질환으로 고통하는 대상에 투여할 수 있다. 그러나 매일 경구투여가 바람직하다. 숙주에 공급되는 투여량은 화합물이 공급되는 경로에 따라 필수적으로 달라지지만, 일반적으로 약 0.1-500mg/kg 인간체중 또는 대표적으로 약 1 내지 50mg/kg 인간체중 범위이다. 일반적으로, 유사한 형태의 투여 및 투여용량은 본 발명의 화합물이 염증성 또는 면역성 질환을 치료하는데 사용되는 경우 생각되어 진다.

본 발명의 화합물은 소장 또는 비경구 투여용 약제학적으로 허용되는 담체, 예를 들어 물, 알콜, 젤라틴, 아라비아 검, 락토오스, 아밀라제, 스테아르산 마그네슘, 탈크, 식물성 오일, 폴리알킬렌 글리콜 등을 사용하여 제형으로 사용할 수 있다. 본 화합물은 고체 형태, 예를 들어 정제, 캡슐제, 당제(drage) 및 좌제 또는 액체형태, 예를 들어 용액, 현탁액 및 유액으로 제형화할 수 있다. 본 제제는 또한 경피성 또는 외용으로 공급할 수 있다.

본 발명에 따른 대표적인 화합물은 반응도식 1 내지 11에 하기 기술된 방법으로 합성할 수 있으며, 여기서 반응도식 1은 예시 화합물 10, 11 및 14의 제조를 예시하며; 반응도식 2는 예시 화합물 17 및 18의 제조를 예시하며; 반응도식 3은 예시 화합물 22 및 23의 제조를 예시하며; 반응도식 6은 예시 화합물 40, 41 및 42의 합성을 예시하며; 반응도식 7은 예시 화합물 46, 47, 49 및 50의 제조를 예시하며; 반응도식 8은 예시 화합물 54의 합성을 예시하며; 반응도식 9는 예시 화합물 58 및 59의 제조를 예시하며; 또한 반응도식 4, 5, 10 및 11은 더욱 일반적으로 합성 방법을 기술한다.

반응도식 1

^a시약 및 조건: (a) 무수 아세트산, Et₃N, 6h, 130℃, 47%; (b) MeOH, H₂SO₄, 20시간, 환류, 97%; (c) 4-플루오로벤즈알데히드, NaH, DMF, 18시간, 80℃, 77%; (d) 2,4-티아졸리딘디온, 피페리딘, 벤조산, 톨루엔, 5시간, 환류, 86%; (e) Pd/C(10%), HCOONH₄/AcOH,48시간, 환류, 49%; (f) NaBH₄, EtOH, 1시간, 25℃, 정량; (g) PBr₃, CH₂Cl₂, 25℃, 1시간, 99%; (h) BuLi, 2,4-티아졸리디논, THF, 0℃, 45분, 15%; (i) 수성 NaOH, MeOH, 15h, 25℃, 73%.

반응도식 2

^a시약 및 조건: (a) Pd/C (10%), H₂, 18시간, 25℃, 정량; (b) 4-플루오로벤즈알데히드, NaH, DMF, 18시간, 80℃, 69%; (c) 2,4-티아졸리딘디온, 피페리딘, 벤조산, 톨루엔, 2시간, 환류, 81%; (d) Pd/C (10%), H₂(60psi), 34시간, 25℃, 38%.

반응도식 3

^a시약 및 조건: (a) 무수 아세트산, Et₃N, 24시간, 125℃, 13%; (b) MeOH, H₂SO₄, 18시간, 환류, 35%; (c) 4-플루오로벤즈알데히드, NaH, DMF, 18시간, 80℃, 74%; (d) 2,4-티아졸리딘디온, 피페리딘, 벤조산, 톨루엔, 5시간, 환류, 91%; (e) Pd/C (10%), 암모늄 포르메이트, 아세트산, 20시간, 환류.

반응도식 4

반응도식 5

반응도식 6

반응도식 7

반응도식 8

반응도식 9

반응도식 10

반응도식 11

반응도식 1을 참조하면, 알데히드 5 및 산 6을 무수 아세트산 중에 축합시켜 불포화산 7을 형성할 수 있다. 화합물 8을 생성하기 위해 산의 에스테르화 후, 페놀 하이드록시 그룹은 p-플루오로벤즈알데히드와 함께 에테르 9로 형성된다. 이어서 알데히드 9는 티아졸리딘디온과 축합하여 화합물 10을 생성하며 또한 화합물 10에서 헤테로 사이클에 결합(exo)은 수소로 환원되어 목적 화합물 11을 형성한다.

반응도식 1에서 단계들은 반응도식 4에 일반화되어 있다. 일반식 2b, 3b, 4b, 6b, 7b 및 8b는 각각 반응도식 1에서 식 5, 6, 7, 9, 10 및 11에 상응한다.

반응도식 5에는 트리사이클릭 생성물 35 및 36의 일반적 합성이 도시되어 있다. 알데히드 또는 케톤 32는 33과 축합하여 비사이클릭 화합물 34를 형성한다. 화합물 34는 헤테로사이클릭 디온과 축합하여 트리사이클릭 생성물 35를 형성하며, 이는 임의로 36으로 수소화될 수 있다.

반응도식 10에는 R=R'=H인 화합물의 일반적 합성이 도시되어 있다. 알데히드 또는 케톤 62는 헤테로사이클릭 디온과 축합하여 비사이클릭 화합물 63을 형성하며, 이는 임의로 생성물 64로 수소화될 수 있다. 임의로 치환된 알데히드와 64의 커플링은 트리사이클릭 화합물 65를 생성한다. 65의 위트히 반응은 스틸벤 유도체 66을 형성하게 한다.

반응도식 11에는 비페닐 생성물 69 및 70의 일반적 합성이 도시되어 있다. 임의로 치환된 하이드록실 비페닐 67과 임의로 치환된 알데히드 또는 케톤의 커플링은 68을 생성한다. 알데히드 또는 케톤 68은 헤테로사이클릭 디온과 축합하여 화합물 69를 형성하며, 이는 임의로 수소화 되어 생성물 70을 형성할 수 있다.

일반식 1에서, C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, t-부틸, sec-부틸, 이소펜틸, 네오펜틸 등의 그룹을 의미한다. C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐은 1,3-부타디엔 등과 같이 다수의 불포화 부위를 포함하는 에텐일, 프로펜일, n-부텐일, 이소부텐일 등의 불포화 그룹을 의미한다. 할로 그룹은 클로로, 플루오로, 브로모, 요오도를 의미한다. 치환된 C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 치환된 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐은 알킬 또는 알케닐 그룹이 할로, 하이드록시, 카르복시, 시아노, 아미노, 알콕시 등과 같은 그룹으로 치환될 수 있음을 의미한다. C₁-C₂₀아실아미노 또는 아실옥시 그룹은 아실 그룹(RCO)에 결합된 산소 또는 아미노 그룹을 의미하며, 여기서 R은 수소, C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐일 수 있다. 알케닐 그룹은 -C=C-이며, 여기서 R은 수소, C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐이다. 알콕시 카보닐은 그룹 ROCO-를 의미하며, 여기서 R은 수소, C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐일 수 있다. C₁-C₂₀알킬 카보닐 아미노 그룹은 그룹 RCON(R)-를 의미하며 여기서 R은 독립적으로 수소, C₁-C₂₀ 선형 또는 분지형 알킬 또는 C₂-C₂₀ 선형 또는 분지형 알케닐일 수 있이다. 카보닐은 그룹 HO₂C-이며, 또한 알카노일은 그룹 RCO-이며 여기서 R은 선형 또는 분지형 탄소 체인이다. 그룹 아로일은 Ar-CO-이며 여기서 Ar은 방향족 그룹 예를 들어 페닐, 나프틸, 치환된 페닐 등이다. 아르알카노일은 그룹 Ar-R-CO-이며 여기서 Ar은 방향족 그룹 예를 들어 페닐, 나프틸, 치환된 페닐 등이며, 또한 R은 선형 또는 분지형 알킬체인이다.

앞서 지적한 바와 같이, a, b 또는 c가 이중결합을 나타내는 본 발명의 화합물은 E 또는 Z 배열을 가질 수 있다. 다른 한편, a, b 또는 c가 부재하는 경우, 즉 단일결합이 존재하는 경우, 수득된 화합물은 R- 및/또는 S-입체이성체일 수 있다. 본 발명은 입체 이성체는 물론 개개의 분리된 입체이성체의 라세미체 혼합물을 포함한다. 개개의 입체이성체는 광학적으로 활성인 해상약제의 사용에 의해 얻을 수 있다. 이와는 달리 바람직한 거울상 이성체는 공지된 배열의 광학적으로 순수한 출발물질을 사용하여 입체 특이적 합성에 의해 얻을 수 있다.

화합물 11, 즉 5-(4-(4-(1-카르보메톡시)-2-(3,5-디메톡시페닐)-에테닐)-페녹시)-벤질)-2,4-티아졸리딘디온 (또한 3-(3,5-디메톡시-페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소-티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 메틸 에스테르로 알려짐)의 제조는 반응도식 1을 참조하여 하기에 기술된다.

3,5-디메톡시벤즈알데히드5와 4-하이드록시페닐 아세트산 6의 퍼킨 축합은 E-이성체로서 독점적으로 알파-페닐 치환 신남산 7을 생성한다. 이중결합의 기하학은 보고된 화합물 (Pettit등, J Nat Prod 51:517-27, 1998)과 ¹HNMR 비교에 의해 확인하였다. 4-플루오로 벤즈 알데히드로 축합 후 7의 에스테르화는 9를 생성하였다. 물의 공비성 제거와 함께 피페리디늄 벤조에이트의 존재 하에 2,4-티아졸리딘디온과 알데히드 9의 크노벤아겔 축합은 양호한 수율의 10을 생성하였다.

주요한 반응은 화합물 11, 17 및 18을 생산하기 위해 이중결합의 선택적 수소화이었다. 마그네슘/메탄올로 10의 환원은 비-선택적이었으며 또한 생성물의 혼합물을 생산하였다. 1,4-디옥산에서 촉매로서 탄소 상의 10% 팔라듐으로 수소화는 6:4의 비로 11과 18의 혼합물을 생산하였다. 이 혼합물로부터 화합물들의 분리는 C-18 실리카의 가역 상 크로마토그래피에 의해서만 가능하였다. 이들 문제는 여러 가지 방법으로 해결되었다. 팔라듐 촉매 (Hudlicky, ACS Monograph 188:46-7, 1996; Ram and Ehrenkaufer, Synthesis 91-5, 1988)의 존재 하에 수소 공여체로서 포름산 암모늄을 사용하여 10의 수소화는 최소량의 과잉 환원 생성물 18을 생산하였으며 또한 고 순도로 11의 분리는 메탄올로부터 반복되는 결정화에 의해 가능하였다. 이러한 접근의 바람직한 변화에서, 백금 촉매는 팔라듐으로 치환하였고, 조 생성물은 디클로로메탄으로부터 재결정화 하였다; 이들 변형에서 둘 다 촉매량이 요구되었으며 또한 반응시간은 현저하게 감소된 반면, 전체 수율은 상당히 증가했다. 11을 제조하기 위한 또 다른 시도에서, 알데히드 9는 알콜 12로 환원하였으며 PBr로 처리시 브롬 화합물 13을 고수율로 생산하였다. 브롬 화합물은 BuLi로 생성되는 2,4-티아졸리딘디온 음이온과 축합하여 11을 저 수율로 생산하였다.

분자내에 2,4-티아졸리딘디온에 의한 촉매의 독성 때문에 팔라듐-촉매화된 수소화에 의해 10 또는 11로부터 18을 양호한 수율로 합성하는 것이 어려웠다. 수득된 혼합물은 부생성물로서 18을 함유하였다. 이 문제를 해결하기 위하여 (반응도식 2에 도시함), 먼저 촉매로서 탄소상의 10% 팔라듐을 사용하여 15로 정량적으로 환원시킨 다음 4-플루오로벤즈알데히드 및 2,4-티아디아졸리딘디온으로 커플링시켜 17을 양호한 수율로 제공하였다. 반응을 통해 더 긴 시간 및 촉매 재생 절반 도중 탄소 촉매상에서 팔라듐으로 17의 환원 후, C-18 가역 상 실리카 겔상의 크로마토그래피 정제는 18을 적당한 수율로 생산하였다.

11의 상응하는 Z-이성체인 23을 제조하기 위해 채택된 합성전략은 반응도식 3에 요약되어 있다. 무수 아세트산 및 트리에틸아민으로 7을 장시간 가열(Kessar등, Indian J Chem 20B:1-3, 1981)은 상응하는 Z-이성체 19를 13% 수율로 생산하였다. 계속하여, 22를 생성하기 위하여 21과 2,4-티아졸리딘디온의 반응은 신남산 이중결합의 최소 이성화를 나타냈으며 또한 E- 및 Z- 이성체의 혼합물을 1:7의 비로 생산하였다. 환원은 추가의 정제 없이 수행하였으며 또한 최종 생성물은 준비 HPLC로 정제하여 23을 생산하였다.

실시예 1

일반적 방법. 융점은 Mel-Temp 융점 장치에서 측정하였으며 수정하지 않는다. ¹H NMR 및 ¹³C NMR 스펙트럼은 JEOL Eclipse (400 MHz) 또는 Nicolet NT 36 (360 MHz) 분광기상에 기록하였으며 또한 TMS로부터 낙하된 100만당 부 (ppm)으로 보고한다. 적외선 스펙트럼은 Nicolet Impact 410 FT-IR 분광계 상에 기록하였다.

질량 스펙트럼은 HP 1100MDS 1964A 질량 분광계의 Fison VG 플랫폼에 기록하였다. 자외선 스펙트럼은 벡크만 DU650 분광계 상에 기록하였다. TLC는 머크 실리카 겔 F₂₅₄예비피복 판상에서 행하였다. 칼럼 크로마토그래피를 위해 사용된 실리카겔은 플래시 크로마토그래피의 경우 'Baker' 실리카 겔 (40㎛)이었다.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크릴산 (7)

3,5-디메톡시벤드알데히드 5 (500g, 3.0mol), 및 4-하이드록시페닐 아세트산 6 (457g, 3.0mol)의 혼합물에 무수 아세트산 (1.0L, 10.60mol) 및 트리에틸아민 (420mL, 3.0mol)을 첨가하였다. 130-140℃에서 6시간 교반한 후, 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 진한 HCl (1L)은 20-30℃의 반응온도를 유지시키면서 반응혼합물에 50분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 수득된 담황색 침전물을 여과하고 물로 세척하였다. 고체를 3N NaOH (5L)중에 용해하고 1시간 교반하고 여과하였다. 여과물은 25-30℃의 온도를 유지시키면서 진한 HCl로 pH 1로 산성화하였다. 침전된 생성물을 여과하고 물로 세척하여 조생성물을 얻고 이를 MeOH-H₂O로부터 재결정화하고 40℃에서 6시간 건조하여 7 (428g, 47%)을 생성시켰다: 융점 225-227℃(lit. 226-228℃)¹⁷; ¹H NMR(360MHz, DMSO-d₆) δ12.48 (br s, 1H), 9.42(s, 1H), 7.59(s,1H), 6.95(d, J =8.0Hz, 2H), 6.76(d, J=8.0Hz, 2H), 6.35(t, J =2.2Hz, 1H), 6.27(d, J =2.2Hz, 2H), 3.56(s, 6H),; MS (EI) m/z 299[M]^-.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크릴산 메틸에스테르(8).

메탄올(3.0L)을 완전히 건조된 7 (427g, 1.42mol)에 아르곤 하에 첨가하였다. 이 교반된 현탁액에 진한 황산 (100ml)을 첨가하고 질소 하에 20시간 환류로 가열하였다. 메탄올을 30℃에서 감압하에 증발시켰다. 잔사를 아세트산 에틸(3.0L)에서 취하고 물 (2x1.0L), 포화 수성 Na HCO₃ (2x1.0L), 염수 (2x1.0L)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 용매를 증발시켰다. 수득된 잔사를 백색 고체 (433.6g 97%)로서 높은 진공 하에 철저히 건조시켰다. 융점 106-108℃; ¹H NMR(360MHz, CDCl₃); δ7.72 (s, 1H), 7.06 (d, J=7.9Hz, 2H), 6.77 (d, J=7.9Hz, 2H), 6.33 (t, J=2.2Hz, 1H), 6.26(d, J =2.2Hz, 2H), 5.74(s, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.60 (s, 6H); MS (EI) m/z 315[M]⁺.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-[4-(4-포르밀펜옥시)-페닐)-아크릴산 메틸에스테르(9).

아르곤 하에, 8 (433.0g, 1.37mol)을 무수 DMF (1.6L)중에 용해하고 여기에 수소화 나트륨 (60.4g, 1.51mol)을 첨가하였다. 수득된 오랜지색 용액에 4-플루오로벤즈알데히드 (185.0mL, 1.71mol)을 첨가하고 80℃에서 18시간 가열하였다. 반응혼합물을 실온으로 냉각하고, 아세트산 에틸 (3.0L)로 희석하고 물(3x1.0L)로 추출한 다음 염수 (1x1.0L)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 마그네슘으로 건조하고, 여과하고 용매를 증발시켰다. 수득된 잔사를 메탄올 (3.0L)중에 현탁시키고 하룻밤 교반하였다. 고체를 여과하고 진공하에 40℃에서 건조시켜 담황색 고체 (445g, 77%)을 생성시켰다. 융점 108-110℃; ¹H NMR(360MHz, CDCl₃) δ9.94 (s 1H), 7.86 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.80(s, 1H), 7.28 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.11 (오버래프 d, J=9.0Hz, 2H), 7.08 (오버래프 d, J=9.0Hz, 2H), 6.36 (t, J=2.2Hz, 1H), 6.25 (d, J = 2.2Hz, 2H), 3.83(s, 3H), 3.63(s, 6H).

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐)-아크릴산 메틸에스테르(10).

무수 톨루엔 (2.5L)중 9 (352g, 0.82mol)의 교반 현탁액에 2,4-티아졸리딘디온 (98.6g, 0.84mol), 벤조산 (134g, 1.10mol) 및 피페리딘(107.4g, 1.26mol)을 연속적으로 첨가하고 Dean-Stark 장치의 도움으로 5시간 물의 계속적인 제거와 함께 환류온도로 가열하였다. 톨루엔 (1.0L)을 반응 혼합물로부터 제거하고 4℃에서 하룻밤 냉각하였다. 분리된 고체를 여과하고 모액을 감압하에 건조 증발시켰다. 수득된 잔사를 MeOH-디에틸에테르 (1:1, 3.0L)의 혼합물중에 다시 용해하였다. 4℃에서 하룻밤 유시키시면서, 용액은 더욱 고체를 생성하였다. 두개의 로트로부터 고체를 결합시키고 40℃에서 진공오븐 중에 하룻밤 건조시켜 황색 고체로서 10 (362.5g, 86%)을 얻었다. 융점 106-108℃; 융점 225-226℃; ¹H NMR(360 MHz, DMSO-d₃); δ 12.53 (br s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.73(s, 1H), 7.63 (d, J=9.2Hz, 2H), 7.25 (d, J=9.2Hz, 2H), 7.13 (오버래프 d, J=8.3Hz, 2H), 7.11 (오버래프 d, J=8.6Hz, 2H), 6.42 (t, J=2.2 Hz, 1H), 6.27(d, J =2.2Hz, 2H), 3.73(s, 3H), 및 3.59(s, 6H); MS (EI) m/z 518[M]⁺.

5-(4-(4-(1-카보메톡시-2-(3,5-디메톡시페닐)-에테닐)-펜옥시)-벤질)-2,4-티아졸리딘디온, 또한 소위 3-(3,5-디메톡시페닐)-2{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 메틸 에스테르 (화합물11).

화합물 10 (30g, 58mmol)을 따뜻한 디옥산 (900mL)중에 용해하고, 2L 수소화 병에 옮기고, 여기에 10% Pd-C (~50%물, 15g)을 첨가하고 Parr 수소화장치에서 60psi에서 24시간 수소화시켰다. 이 기간 이후에, 추가의 15g Pd-C를 첨가하고 수소화를 24시간 더 계속 시켰다. 촉매를 셀라이트 베드를 통해 여과하고, 용매를 증발시켰다. 잔사를 아세토니트릴 (500ml)에 취하고 C-18실리카 (50g)에 흡수시켰다.

흡수된 물질을 C-18 가역상 실리카 겔 (400)을 함유하는 칼럼의 상부에 넣었다. 칼럼을 H₂O(45%, 2L)중 CH₃CN, H₂O(5o%, 2L)중 CH₃CN, H₂O(55%, 2L)중 CH₃CN으로 용출시켜 원하지 않는 분획을 용출시켰다. 분획을 원하는 화합물을 위해 H₂O용출중 60% CH₃CN의 개시와 함께 수집하였다. 분획을 그의 HPLC 순도를 기본으로 하여 혼합하였다. 아세토니트릴을 감압하에 증발시켰다. 물을 동결건조로 제거하였다. 수율: 12g (40%). 백색 고체; 융점 126-128℃; ¹H NMR (DMSO-d₃) δ12.01 (br, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.28(d, J=8.6Hz, 2H), 7.19 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.02 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.96(d, J=8.6Hz, 2H), 6.40 (t, J=2.2 Hz, 1H), 6.27(d, J =2.2Hz, 2H), 4.92(dd, J=9.2 및 4.4Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.57 (s, 6H), 3.37 (dd, J=14.8 및 4.3Hz, 1 H) 및 3.12 (dd, J=14.8 및 9.4Hz, 1 H); IR (KBr) ν_mzx 3200, 2950, 2850, 1700, 1600, 1500, 1350, 1150, 및 850cm^-1; EIMS:m/z, 518, [M-H]^- 265, 249 및 113.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 메틸 에스테르 (화합물11).

빙초산 (11.5L)중의 화합물 10 (599g, 1.16mol)의 용액에 포름산 암모늄 (4.0kg, 62.9mol)을 첨가하고 30분간 교반하였다. 빙초산 (500mL)중 탄소상의 Pd 슬러리 (10%, 건조, 300g)를 플라스크에 첨가하고 (주의: 대규모적으로 반응 발열성이 문제가 될 수 있음; 산소의 격렬한 제거가 바람직함), 120℃에서 24시간 가열한 다음 실온에서 48시간 교반하였다. 수득된 혼합물을 셀라이트(Celite)®의 베드를 통해 여과하였다. 여과물을 격렬하게 교반된 물 (12L)에 서서히 붓고 분리된 고체를 여과하고 건조하였다. 수득된 고체는 뜨거운 메난올 중에 2번 그리고 에탄올에 1번 슬러리하고 정제하여 백색 고체로서 순수한 11 (296g, 49.2%)을 얻었다; 융점 126-128℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₃) δ 12.01 (br s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.28(d, J=8.6Hz, 2H), 7.19 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.02 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.96(d, J=8.6Hz, 2H), 6.40 (t, J=2.2 Hz, 1H), 6.27(d, J =2.2Hz, 2H), 4.92(dd, J=9.2 및 4.4Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.57 (s, 6H), 3.37 (dd, J=14.8 및 4.3Hz, 1 H) 및 3.12 (dd, J=14.8 및 9.4Hz, 1H); IR (KBr) ν_max 3200, 2950, 2850, 1700, 1600, 1500, 1350, 1150, 및 850cm^-1; MS:m/z, 518 [M-H]^- 265, 249 및 113.

화합물 10 (20g, 38.6mol), 포름산 암모늄 (150g, 2.38mol), 10%Pt/C (건조, 4g) 및 아세트산 (660mL)을 환류 응축기, 열량계 및 기계적 교반기가 장치된 둥근 바닥 플라스크에서 결합시켰다. 반응기를 배기하고 질소로 3회 정화하고, 일정한 환류 (ca 124℃)로 가열하였다. 반응은 15시간 내에 완료하고 주위 실온으로 교반하면서 냉각시켰다. 냉각 후, 혼합물은 셀라이트®(5g)의 패드를 통해 여과하였다. 여과 패드를 새로운 아세트산 (2 x 100mL)로 세척하였다. 모액 및 세척물을 결합하고 농축시켰다. 잔사를 디클로로메탄 (400mL)로 희석하고 결합된 유기물을 물 (400mL) 및 5% 비카보네이트 (400mL)로 2회 추출하였다. 이어서 유기부분을 건조하고 실리카 겔(30g)을 통해 붓고 디클로로메탄 (2x100mL)로 세척하였다. 세척물을 결합시키고 농축시켰다. 잔사를 에탄올로 희석하고 60℃로 냉각시키고 종자 결정을 첨가하였다. 이 슬러리는 50℃에서 약 30분간 교반한 다음 주위 실온으로 냉각시켜 화합물 11 (12.85g, 64%)을 생산하였다. HPLC 평가 98.1%.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2[4-(4-하이드록시메틸펜옥시)-페닐]-아크릴산 메틸 에스테르 (화합물12).

화합물 9 (5.0g, 11.9 mol)을 실온에서 무수 에탄올 (60mL)중에 현탁시키고 소듐 보로하이드라이드 (0.23g, 6.1 mmol)을 충분히 교반하면서 첨가하였다. 반응은 1시간 내에 완료하고, 용매는 증발하고 잔사는 에틸아세테이트 중에 용해시켰다. 유기층을 물 (50mL), 염수 (25mL)로 추출하고, 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜 백색 고체로서 표제 화합물 12 (5.1g, 100%) 얻었다. 융점 93-95℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₃) δ 7.72 (s 1H), 7.35 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.19 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.02 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.00(d, J=8.4Hz, 2H), 6.41 (t, J=2.4 Hz, 1H), 6.29(d, J =2.0Hz, 2H), 5.18(t, J=6.4 Hz, 1H), 4.49(d, J=4.8Hz, 2H), 3.73(s, 3H), 3.57(s, 6H); MS(EI)m/z 315[M]⁺.

2-[4-(4-브로모메틸펜옥시)-페닐]-3-(3,5-디메톡시페닐)-아크릴산 메틸 에스테르 (화합물13).

PBr₃(CH₂Cl₂중 1.0M의 4.8mL)의 용액을 잘 교반하면서 온도에서 CH₂Cl₂(20mL)중에 용해된 12 (5.0g, 11.9mmol)을 적가하였다. 1시간 후, 용액을 물 (2x60mL) 및 염수 (20mL)로 추출하였다. 유기상을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카겔 (20g)의 작은 베드를 통해 여과하고 용매를 증발시켰다. 수득된 끈적끈적한 시럽을 실온에서 48시간 높은 진공하에 건조시켜 표제 화합물 (5.7g, 99%)을 수득하였다.

융점 79-81℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₃) δ7.73 (s 1H), 7.49 (d, J=8.4Hz, 2H), 7.22 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.07 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.00(d, J=8.4Hz, 2H), 6.42 (t, J=2.4 Hz, 1H), 6.28(d, J =2.0Hz, 2H), 4.73(d, J=4.8Hz, 2H), 3.68(s, 3H), 3.58(s, 6H); 분석치 (C₂₅H₂₃BrO₅)C: 계산치, 61.12; 실측치 62.26; H; 계산치 4.80; 실측치 4.88.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 메틸 에스테르 (화합물11).

2,4-티아졸리딘디온 (2.83g, 24.2mmol)을 건조 THF (170mL)중에 용해하고 아르곤 하에 0℃로 냉각하였다. 부틸리튬 (헥산중 1.6M, 30mL, 48.0mmol)을 적가하였다. 아르곤 하에 0℃에서 계속 교반하면서, 13 (5.7g, 11.8mmol)을 건조 THF (30ml)중에 용해시키고 빠르게 교반하면서 상기 현탁액에 시린지를 신속히 첨가하였다. 온도를 수성 HCl (5%, 40mL)로 급냉하기 전에 0℃에서 45분간 유지시켰다. 추가적인 H₂O(40mL)을 첨가하고 에틸 아세테이트 (3 x 30mL)로 추출하였다. 오렌지색 층들을 결합하고, 염수로 세척하고, 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켰다. 용출 용매로서 헥산-에틸 아세테이트 (3:2)를 사용하는 실리카 겔에 대한 플래시 크로마토그래피는 표제 화합물 11 (0.93g, 15%)을 얻었다. 이 방법으로 제조한 화합물 11의 융점 및 ¹H NMR은 상술한 화합물 10으로부터 출발하는 합성경로에 의해 생성된 화합물 11에 대한 것과 동일하였다.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 (화합물14).

메탄올 (50mL)중 10℃이하로 냉각된 교반된 11의 현탁액 (10g, 19.27mmol)에, 수성 수산화 나트륨 (2N, 33.7ml, 67.4mmol)을 첨가하고 실온에서 15시간 교반하였다. 수득된 담황색 용액을 10℃로 냉각하고 수성 HCl (5%, 115ml)로 산성화 하였다. 분리된 고체를 여과하고 물로 세척하고 (3 x 30mL), 에탄올로 재결정화하여 백색 고체로서 14(7.14g, 73%)을 얻었다. 융점 138-140℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₃) δ 7.69 (s 1H), 7.28 (d, J=8.8Hz, 2H), 7.19 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.02 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.97(d, J=8.8Hz, 2H), 6.41 (t, J=2.4 Hz, 1H), 6.28(d, J =2.4Hz, 2H), 4.92(dd, J=9.2 및 4.4 Hz, 1H), 3.58 (s, 6H), 3.38 (dd, J=14.0 및 4.0 Hz, 1H) 및 3.13(dd, J=14.4 및 9.2Hz, 1H); MS(EI) m/z 506[M]⁺.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2(4-하이드록시페닐)-프로피온산 메틸에스테르 (15).

에탄올 (200mL)중 8의 현탁액 (6.28g, 20.0mmol)에, 탄소상의 팔라듐 (10%, 습윤, 0.63g)을 첨가하고 실온에서 18시간 대기압에서 H₂하에 교반하였다. 촉매를 셀라이트®의 베드를 통해 여과하고 용매를 감압하에 증발시켜 백색고체로서 15(6.32g, 100%)을 얻었다. 융점 63-65℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₃): δ7.15 (d, J=8.7Hz, 2H), 6.74 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.29 (t, J=2.4 Hz, 1H), 6.25(d, J=2.4Hz, 2H), 3.78 (t, J=8.7 Hz, 1H), 3.72(s, 6H), 3.62(s, 3H), 3.31(dd, J=13.5 및 8.4 Hz, 1H), 2.93(dd, J=13.5 및 6.9 Hz, 1H); MS(EI) m/z 317[M]⁺..

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-[4-(4-포르밀펜옥시)-페닐]-프로피온산 메틸에스테르 (16).

아르곤 하에 DMF (2mL)중 수소화 나트륨 현탁액 (오일중 60%, 0.25g, 6.3mmol)에 무수 DMF (3mL)중 15 (2.0g, 6.3mmol)을 첨가하였다. 수득된 황색용액에 4-플루오로벤즈알데히드 (0.68mL, 6.3mmol)을 첨가하고 80℃에서 18시간 가열하였다. 반응혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(20mL)을 첨가하고 에틸아세테이트 (3x50mL)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켰다. 조생성물의 에틸아세테이트 용액을 실리카겔의 작은 베드를 통해 여과하여 오일로서 16 (1.83g, 69%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₃): δ 9.91(s, 1H), 7.84(d, J=8.7Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.04 (d, J=5.4 Hz, 2H), 7.01(d, J=5.4Hz, 2H), 6.30 (t, J=2.1 Hz, 1H), 6.25(d, J=2.1 Hz, 2H), 3.86(t, J=7.8Hz, 1Hz), 3.76(s, 6H), 3.66(s, 3H), 3.36(dd, J=12.6 및 8.1 Hz, 1H), 2.97(dd, J=13.5 및 7.5 Hz, 1H); MS(EI) m/z 421[M]⁺.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-프로피온산 메틸에스테르 (17).

무수 톨루엔(25mL)중 16의 교반된 현탁액 (1.81g, 4.3mmol)에 2,4-티아졸리딘디온 (0.56g, 4.74mmol), 벤조산 (0.68g, 5.60mmol) 및 피페리딘 (0.60mL, 6.03mmol)을 연속적으로 첨가하고 Dean-Dark 장치를 사용하여 2시간 동안 물의 연속적인 제거와 함께 환류온도에서 가열하였다. 용매를 감압하에 건조 증발시켰다. 수득된 잔사를 헥산-에틸아세테이트 (1:1)로 용출된 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 17 (1.82g, 81%)을 얻었다. 융점 104-106℃; ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.53 (br s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.60 (d, J=8.7Hz, 2H), 7.35 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.07 (d, J=4.8 Hz, 2H), 7.03 (d, J=4.8Hz, 2H), 6.33-6.28 (m, 3H), 4.01 (t, J=7.5Hz, 1H), 3.66 (s, 6H), 3.56 (s, 3H), 3.22 (dd, J=13.8 및 8.4 Hz, 1H), 2.90(dd, J=13.5 및 7.2 Hz, 1H); MS(EI) m/z 520[M]⁺; 분석치(C₂₈H₂₅NO₇S)C:계산치 64.73; 실측치 65.89; H: 계산치 4.85; 실측치 5.08, N: 계산치 2.70; 실측치 2.56.

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-프로피온산 메틸에스테르 (18).

17 (1.6g, 3.08mmol)을 디옥산(45mL)중에 용해시키고, 수소화 병에 옮기고 탄소상의 Pd (10%, 1.0g)을 첨가하였다. 수소화는 65psi에서 34시간 수행하였다. 이 기간 이후에 탄소상의 추가적인 Pd (10%, 0.6g)을 첨가하고 수소화를 18시간 더 계속하였다. 촉매는 셀라이트®의 베드를 통해 여과하고 용매를 증발시켰다. 잔사를 아세토니트릴-물(1:1)을 사용하여 가역상 실리카겔 칼럼크로마토그래피(C-18)로 정제하여 백색고체로서 18 (0.60g, 38%)을 얻었다. 융점 125-128℃; ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.04(br s, 1H), 7.31(d, J=8.4Hz, 2H), 7.25 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.92 (d, J=8.6 Hz, 4H), 6.30(d, J=2.0Hz, 2H), 6.29(t, J=2.0 Hz, 1H), 4.90(dd, J=9.2 및 4.4 Hz, 1H), 3.98(t, J=8.0 Hz, 1H), 3.67(s, 6H), 3.56(s, 3H), 3.37(dd, J=13.6 및 4.0 Hz, 1H), 3.21 (dd, J=14.0 및 8.8 Hz, 1H); 3.11 (dd, J=14.0 및 9.2 Hz, 1H) 및 2.90(dd, J=13.6 및 7.6Hz, 1H); MS(EI) m/z 522[M]⁺.

Z-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크릴산(19)

E-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크릴산 7 (10.0g, 33.3mmol)을 무수 아세트산 (40mL, 0.42mL) 및 트리에틸아민 (40mL, 0.29mol)의 혼합물 중에 용해시키고 125℃에서 24시간 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 에틸아세테이트 (150mL)를 첨가하고 5℃로 더 냉각하고, 진한 HCl (30mL)로 산성화하여 이 온도에서 90분간 교반하였다. 유기층을 분리하고 수성층을 에틸아세테이트 (100mL)로 추출하였다. 결합된 유기층을 물(2x50mL)로 세척하고 수성 NaOH (5M, 3x70mL)로 추출하였다. 수성 알카리층을 빙초산 (65mL)로 pH 5.2로 산성화하고 0℃에서 30분간 교반하였다. 분리된 고체를 여과하고 모액을 진한 HCl (90mL)로 농축하고 5℃에서 1시간 교반하였다. 분리된 고체를 여과하고 냉수 (2x50mL)로 세척하고 45℃에서 6시간 건조하여 19 (1.3g, 13%)을 얻었다. 융점 135-137℃; ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 13.28 (br, 1H), 9.70 (br, 1H), 7.32 (d, J=10.4Hz, 2H), 6.81 (s, 1H, 오버래프), 6.79 (d, J=9.7 Hz, 2H), 6.67 (d, J=2.5 Hz, 2H), 6.64(t, J=2.5 Hz, 1H), 및 3.73 (s, 6H); MS(EI) m/z 299[M]^-.

Z-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크릴산메틸에스테르(20)

진한 황산 (10방울)을 아르곤 하에 완전히 건조된 19 (0.60g, 2.0nmol)의 교반된 메탄올 현탁액에 첨가하고 환류하에 18시간 가열하였다. 메탄올을 감압하에 증발시키고, 잔사를 에틸아세테이트 (20mL)중에 취하여 물(20mL), 포화 수성 NaHCO₃ (10mL) 및 염수 (10mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 마그네슘으로 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켰다. 수득된 조생성물을 실리카 겔상의 크로마토그래피로 정제하고 헥산-에틸 아세테이트 (7:3)으로 용출시켜 백색고체로서 20 (0.24g, 35%)를 얻었다: ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.26(d, J=8.4Hz, 2H), 6.82(s, 1H), 6.76(d, J=8.4Hz, 2H), 6.45(d, J=2.0, 2H), 6.34(t, J=2.0 Hz, 1H), 4.97(s, 1H), 3.73(s, 3H), 3.72(s, 6H).

Z-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-[4-(4-포르밀펜옥시)-페닐]-아크릴산 메틸에스테르(21)

아르곤 하에, 20 (0.60g, 1.9mmol)을 무수 DMF (4mL)중에 용해시키고 여기에 소듐 하이드라이드(오일중 60%, 0.09g, 2.28mmol)을 첨가하였다. 수득된 오렌지 용액에 4-플루오로벤즈알데히드 (0.25mL, 2.28mmol)을 첨가하고 80℃에서 18시간 가열하였다. 반응혼합물을 실온으로 냉각하고 물 (10mL)을 첨가하고 혼합물을 에틸아세테이트 (3x20mL)로 추출하였다. 증발 후 얻어진 조생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하고 헥산-에틸 아세테이트 (4:1)의 혼합물로 용출시켜 백색고체로서 21 (0.59g, 74%)을 얻었다: ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.93(s, 1H), 7.86(d, J=8.8Hz, 2H), 7.49(d, J=8.8Hz, 2H), 7.10 (오버래프 d, J=8.8Hz, 2H), 7.08(오버래프 d, J=8.8Hz, 2H), 6.96(s, 1H), 6.53(dd, J=2.8 Hz, 1H), 6.43(t, J=2.0 Hz, 1H), 3.80(s, 3H), 3.79(s, 6H).

Z-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐]-아크릴산 메틸에스테르(22)

무수 톨루엔(10mL) 중 21 (0.53g, 1.30mmol)의 교반된 현탁액에 2,4-티아졸리딘디온 (0.15g, 1.30mmol), 벤조산 (0.21g, 1.69mmol) 및 피페리딘 (0.19g, 1.95mmol)을 연속적으로 첨가하고 혼합물을 Dean-Stark 장치를 사용하여 5시간 물의 연속적인 제거와 함께 환류온도에서 가열하였다. 톨루엔을 증발시키고 잔사를 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하고 헥산-에틸 아세테이트(1:1)의 혼합물로 용출시켜 백색고체로서 22 및 10의 혼합물(0.60g, 91%)를 양성자 NMR 분석을 기준으로 7:1의 비로 생산하였다: ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.53(br, s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.65 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.54(d, J=8.8Hz, 2H), 7.18 (오버래프 d, J=8.8Hz, 2H), 7.16(오버래프 d, J=8.8Hz, 2H), 7.17(오버래프 s, 1H), 6.57(d, J=2.0Hz, 2H), 6.50(t, J=2.0Hz, 1H), 3.79(s, 3H) 및 3.75 (s, 6H).

Z-3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐]-아크릴산 메틸에스테르(23)

아세트산 (15mL)중 22 (0.60g, 1.6mmol)의 용액에 탄소상의 Pd(10%, 300mg) 및 포름산 암모늄 (4.3g, 55.8mmol)을 첨가하고 (주의: 대규모 반응 발열이 문제가 될 수 있음; 산소의 격렬한 배제가 바람직함), 120℃에서 20시간 가열하였다. 촉매를 셀라이트®의 베드를 통해 여과하고 아세트산을 감압 하에 증발시켰다. 물 (50mL)을 잔사에 첨가하고 분리된 고체를 여과하였다. 순수 Z-이성체는 포름산 (0.05%)를 함유하는 메탄올:아세토니트릴:물(3:3:2)를 사용하여 분당 15mL의 속도로 움직이는 Intersil ODS-3 준비 칼럼 (250x4.6mm, 5㎛)를 사용하는 준비 HPLC로 분리하였다. 융점 65-66℃; ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₃) δ 12.05(br s, 1H), 7.48(d, J=9.2Hz, 2H), 7.29(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.03(오버래프 d, J=8.8, Hz, 2H), 7.01(오버래프 d, J=8.4 Hz, 2H), 6.56(d, J=2.0Hz, 2H), 6.49(t, J=2.0Hz, 1H), 4.90(dd, J=9.2 및 4.4Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.75 (s, 6H), 3.38(dd, J=14.8 및 4.8Hz, 1H) 및 3.13 (dd, J=14.4 및 9.2 Hz, 1Hz); MS(EI) m/z 300[M]⁺.

도면을 참조하면, 화합물 11은 도 1a에 도시한 바와 같이 db/db 숫컷 마우스에 15일간 단일 경구 투여량 (50mg/kg 체중)으로 투여하였다. 혈당 농도에서 상당한 감소가 관찰되었다. 도 1b에서 활성 성분 없이 부형제로 처리한 대조군에 비하여 처리군에서 체중의 증가는 없었다.

화합물은 단일 경구투여량 (50mg/kg 체중)으로 ob/ob 마우스에 경구적으로 투여하였다. 도 2A에 도시한 바와 같이 혈당 농도에 62% 낙하가 있었으며, 또한 db/db 마우스와 유사하게, 도 2B에 도시한 바와 같이 대조군과 처리군 사이에 체중의 현저한 증가는 없었다. 이것은 체중 증가와 연관된 것으로 알려진 티아졸리딘디온 타입 화합물에 의한 당뇨병 동물의 처리와 대비된다. 참조 오쿠노 등, J. Clin. Invest., 101, 1354-1361 (1998) 및 요시오카 등, Metabolism, 42, 75-80 (1993). 두 가지 모델에서 14일 후에 처리를 정지함으로써 도 3A 및 3B에 도시한 바와 같이 글루코오스 농도의 증가를 나타냈다. db/db 마우스에서 화합물의 단일 투여량의 경구투여는 24시간 및 그 이상 효과적이었다.

트리글리세라이드 농도를 또한 측정하였다. 지방산 및 글리세롤의 에스테르인 트리글리세라이드는 플라스마에 자유로이 순환하지 않지만, 단백질에 결합되어 리포단백으로 불리우는 거대분자 복합물로서 이동하였다. 트리글리세라이드는 db/db 및 ob/ob 마우스의 트리글리세라이드 농도를 측정하기 위한 변형과 함께, McGowan등, Clin Chem 29:538-42, 1983에 기술된 효소 방법으로 측정하였다. 화합물로 15일 처리 후에 db/db 마우스(도 15A)에서 트리글리세라이드 농도에서 24% 낙하를 나타냈으며, ob/ob 마우스에서 10일간 처리후에 대조군 (도 6B)에 비하여 트리글리세라이드의 65% 감소를 나타냈다.

유리 지방산 (FFA)는 아실 CoA 합성효소(Wako Chemicals USA)의 존재 하에 동효소를 사용하여 효소적으로 측정하였다. 화합물로 처리된 db/db 및 ob/ob 마우스에서 유리 지방산 농도는 대조 동물에 비하여 현저하게 낮았다. db/db 마우스에서 FFA농도의 34%낙하(도 5B)는 화합물로 15일간 처리후에 나타났다. ob/ob 마우스에서 10일간 처리 후 FFA의 33% 저하는 대조군에 비하여 나타났다 (도 6C).

혈액중 글리코헤모글로빈(GHb)의 백분율은 평균 혈당 농도를 반영한다. 이것은 전체 당뇨병 대조군의 측정이며 또한 평균 혈당 농도를 검사하는데 사용할 수 있다. 헤모글로빈의 글리코실화는 적색 혈세포에서 계속적으로 발생한다. 그러나 반응은 비효소적이며 비가역적이기 때문에 세포중의 글리코헤모글로빈의 농도는 그의 수명중에 세포에 의해 나타난 평균 혈당 농도를 반영한다. 평가는 아브라함 등, J. Lab. Clin. Med. 102, 187 (1983)에 기술된 바와 같이 보로네이트로 친화성 크로마토그래피를 사용하여 수행하였다. 화합물로 처리 15일 후에 db/db 마우스의 GHb농도에서 0.7% 낙하를 나타냈으며(도 5C), 또한 처리 14일 후에 ob/ob 마우스에서 대조군에 비하여 GHb농도에서 1.3% 감소를 나타냈다 (도 6D). 혈 인슐린 농도는 표준 프로토콜 이후에 ELISA에 의해 측정하였다. ob/ob에서 혈청 인슐린의 58% 낙하 (도 6A)는 화합물로 처리 10일 후에 나타났으며, 이는 인슐린 감지제로서 작용할 수 있는 능력을 입증한다.

비만은 당뇨병 및 심장질환 같은 다양한 성인병의 현저한 위험 요소로 간주된다. 비만 유전자 생성물인 렙틴은 ob/ob 마우스의 조사로부터 확인되었으며 여기서 렙틴은 상기 유전자의 돌연변이 때문에 부족하다 (Zhiang 등, Nature, 372, 425 (1994). 렙틴은 지방조직에서 표현되며 또한 식욕을 억제하고 대사를 자극하여 체중감소를 촉진하는 약 16kDa의 단백질이다. 현재 렙틴은 비만 증후군에 주요한 역할을 하는 것으로 생각된다. 상기 실험에 따른 db/db 마우스에서 렙틴 농도는 표준 프로토콜 이후에 ELISA로 측정하였다. 화합물로 처리 25일 후에, 대조군에 비하여 혈청 렙틴 농도의 23^o/a 증가가 있다 (도 5D).

간효소 글루타믹 옥살아세틱 트랜스아미나제/아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST/GOT) 및 글루타믹 피루빅 트랜스아미나제/알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALP/GPT)는 시험화합물의 처리 (경구, 50mg/kg) 21일 후에 ob/ob 마우스의 혈청에서 평가하였다. 시험은 또한 트로글리타존을 사용하여 수행하였다. 이들 효소농도는 여러 종류의 간질환 또는 간괴사를 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 도 7A에서 마우스의 AST농도는 미처리된 마우스 또는 트로글리타존으로 처리된 마우스에 비하여 증가하지 않았다. 유사하게, 도 7B는 ALT 농도가 미처리된 마우스 또는 트리글리타존으로 처리된 마우스에 비하여 증가하지 않았음을 보여준다.

도 8을 참조하면, 3T3-L1 분화된 아디포사이트의 글루코오스 흡수량은 시험화합물로 처리 후에 측정하였다. 분석은 Tafuri, Endocrinology, 137, 4706-4712 (1996)의 방법에 따라 수행하였다. 혈청-결핍 세포는 상이한 농도에서 48시간 동안 시험화합물로 처리하고, 이어서, 세정하고, 37℃에서 30분간 글루코오스가 없는 배지에서 배양하였다. 이어서 ¹⁴C-데옥시글루코오스를 첨가하고 흡수량을 배양하에 30분간 검사하였다. 세척후 세포는 용해하고 (0.1% SIDS) 계산하였다. 도 8에 도시한 바와 같이, 기본 농도에 대하여 시험화합물의 정해진 농도에서 글루코오스 흡수량의 3.5 내지 4배 증가가 있다.

도 9를 참조하면, RAW 세포는 10% FBS 함유 RPMI-1640에서 37℃에서 1시간 동안 화합물 11 또는 로지글리타존 (0.1, 1, 10, 50 또는 100pM)으로 예비 배양하였다. 1시간 후, LIPS (0.1pg/ml)을 첨가하고 세포를 6시간 더 배양하였다. 세포 상등액을 수집하고, 분취하고 -70℃에서 냉동하고, 일정부분을 ELISA에 의한 TNF-알파의 농도를 측정하기 위해 사용하였다.

도 10을 참조하면, RAW세포는 10% FBS 함유 RPMI-1640에서 37℃에서 1시간동안 화합물 11 또는 로지글리타존 (0.1, 1, 10, 50 또는 100pM)으로 예비 배양하였다. 1시간 후, LIPS (0.1pg/ml)을 첨가하고 세포를 6시간 더 배양하였다. 세포 상등액을 수집하고, 분취하고 -70℃에서 냉동하고, 일정부분을 ELISA에 의한 IL-6의 농도를 측정하기 위해 사용하였다.

도 11을 참조하면, RAW세포는 10% FBS 함유 RPMI-1640에서 37℃에서 1시간 동안 화합물 11 또는 로지글리타존 (0.1, 1, 10, 50 또는 100pM)으로 예비 배양하였다. 1시간 후, LPS (0.1pg/ml)을 첨가하고 세포를 6시간 더 배양하였다. 세포 상등액을 수집하고, 분취하고 -70℃에서 냉동하고, 일정부분을 ELISA에 의한 IL-1-베타의 농도를 측정하기 위해 사용하였다. 화합물 11은 로지글리타존 보다 더 잘 IL-1-베타를 억제하였다.

도 12A 및 12B를 참조하면, RAW세포는 10% FIBS 함유 RPMI-1640에서 37℃에서 1시간 동안 화합물 11 (12A) 또는 로지글리타존 (12B) (0.1, 1, 10, 50 또는 100μM)으로 예비 배양하였다. 1시간 후, LPS (0.1pg/ml)을 첨가하고 세포를 6시간 더 배양하였다. 세포 상등액을 수집하고, 분취하고 -70℃에서 냉동하고, 일정부분을 COX-2 및 COX-1 활성을 측정하기 위해 사용하였다. 로지글리타존이 아닌 화합물 11은 COX-1 활성을 억제하였다 (50 μl시료의 PGE2 생산으로 측정함). 화합물은 COX-1 활성을 억제하지 않았다.

전사인자 NF-카파B는 프로-염증성 사이토킨에 대한 반응에 수반된 많은 유전자의 활성화를 배위하며, 따라서 염증성 질환의 개발에 주요 역할을 한다. NF-카파B는 억제 단백질 I카파B의 인산화에 의해 활성화 된다. I카파B의 LPS-자극 인산화에 대한 화합물 11의 영향을 조사하기 위하여, RAW 264.7 세포는 단지 부형제, 양성 대조예로서 15-데옥시-Δ^12,14-프로스타글란딘 J2 (15dPGJ₂)(3 pM), 화합물 11 (3, 10 또는 30pM), 또는 로지글리타존 (3,10 또는 30μM)으로 37℃에서 1시간 예비 배양하였다. 이어서 세포를 LPS (10 μg/mL) 및 IFN-감마(10U/mL)의 존재하에 또는 부재하에 37℃에서 5분 또는 15분간 처리하였다. 이어서 세포를 용해하고 세포 용해물(27μg/lane)을 4-20% 폴리아크릴아미드 겔 상에 전기영동에 의해 분리하고, 니트로셀룰로오스 막에서 블롯팅시키고, 항-포스포-I카파B 항체로 탐침하였다. 그 결과는 로지글리타존이 아닌 화합물 11이 I카파B의 인산화의 투여량-의존성 억제를 나타낸 것으로 밝혀졌다.

NF-kB의 활성화를 억제할 수 있는 화합물 11의 능력을 더 확인하기 위하여, LPS-자극 세포에서 유리 p65(활성화) NF-kB의 생산을 측정하였다. RAW세포는 6-웰 판의 5x10⁵/웰에 접종하여 10%FBS 완전 배지에서 37℃에서 밤샘배양하였다. 세포를 0.5% FBS 배지로 2X 세척한 다음 10 μM의 화합물 11, 로지글리타존, 또는 15PGGJ₂로 37℃에서 1시간 동안 전처리하였다. 전처리 후, 세포들을 0.5% FBS 배지로 배양하거나 37℃에서 15분간 1 μg/ml LPS로 자극시켰다. 냉 PBS로 3X 세척한 후, 세포를 용해하여 전 세포 용해물을 생성하였다, 단백질 농도를 측정하고 5μg 단백질의 전 세포 용해물은 시판되는 ELISA kit (Active Motif, Carlsbad, CA)를 사용하여 각 샘플에 대해 NF-kB p65 활성을 측정하는데 사용하였다. 이 ELISA에서 마이크로-웰 플레이트는 NF-kB에 대한 교감 결합부위를 함유하는 올리고뉴클레오타이드로 피복하였다. 세포 용해물의 첨가 후, DNA-결합 전사인자는 항 p65 항체를 사용하여 검침하였다. 두개의 웰의 각 샘플을 평가하고 각 샘플에 대한 두개의 ELISA 해독의 평균을 측정하였다. 결합의 특이성은 각각의 웰에 20pmol의 와일드 타입 교감 올리고뉴클레오타이드의 후속 첨가에 의해 체크하였다.

도 15에 도시한 바와 같이, 화합물 11 및 15 dPGJ₂는 NF-kB의 활성화를 억제하였다. 반면, 로지글리타존, PPAR-감마의 강한 작용물질은 p65 전사인자의 생산을 억제하지 않았다.

도 13A-D는 화합물 11로 처리에 의한 콜라겐-유도 관절염의 억제를 예시한다. 관절염은 7주의 DBA/1 Lac 마우스의 완전한 보조에서 콜라겐(100㎍/마우스)의 피내투여에 의해 유도된다. 불완전한 보조에서 부스터 (100㎍/마우스) 면역은 21일에 피하로 제공하였다. 2일후에 관절염 점수가 1 부근인 경우, 동물을 두개의 그룹으로 나누었다. 하나의 그룹은 매일 17일동안 경구적으로 50mg/kg 투여량의 화합물 11을 접수하였다. 두 번째 그룹은 물중에 10% PEG를 접수하고 부형제 처리 그룹으로서 사용하였다. 체중 (도 13A), 임상점수 (도 13B), 감염된 접합 (도 13C) 및 포우(Paw) 두께 (도 13D)는 상이한 시간 간격에서 약물 투여후 24시간 검사하였다. 도면에 도시한 바와 같이, 화합물 11로 처리한 마우스는 부형제 처리 군에 비하여 현저하게 낮은 임상 점수, 감염접합 및 포우 두께를 나타냈다. 부형제와 처리 그룹간에 체중 변화는 없었다.

실험적 알러지성 뇌수막염 (EAE)는 중앙 신경계의 자가면역 탈수 염증성 질환이다. EAE는 인간 다발성 경화증(MS)의 임상적 및 병리학적 증상의 많은 것을 나타내며 또한 그것은 MS에 대한 시험 잠재적 치료제를 시험하기 위한 동물모델로서 작용한다 (Scolding 등, Prog Neurobiol, 43:143-73, 2000). 도 14는 화합물 11에 의한 EAE의 억제를 예시한다. 활성 EAE는 실질적으로 Owans 및 Sriram의 방법에 따라 SJL-/J 마우스에서 유도된다. 순수 마우스는 0일 및 7일에 완전한 Freund 보조제의 마우스 척수 균등액을 각각 400pg로 피하로 면역하였다. 이어서 마우스는 50㎍ 또는 200㎍의 화합물 11로 또는 부형제만으로 피하 주사에 의해 매일 한번 처리하였다. 마비는 지시된 수자 눈금에 따라 등급하였다. 도 14에 도시된 임상점수의 급격한 감소에 의해 입증되는 바와 같이, 200㎍ 투여량의 화합물 11로 처리는 EAE를 회복하는데 크게 효과적이었다.

화합물 11로 나타내는 본 발명에 따른 화합물, 즉 낮은 혈당 농도, 트리글리세라이드 농도, 유리지방산 농도, 글리코헤모글로빈 및 혈청 인슐린 뿐만 아니라 렙틴 농도를 상승시키지만 체중 또는 간 독성의 현저한 증가를 나타내지 않는다. 화합물은 또한 TNF-알파, IL-6, IL-1-베타 생산 및 시험관내 COX-2활성을 억제하며 또한 도 13A-13D 및 14에 도시한 바와 같이, 화합물은 관절염을 억제하고 다발성 경화증을 강력하게 치료하는데 사용할 수 있다. 상기 입증한 특성들은 본 발명의 화합물이 인슐린 저항, 과지질 혈증, 관상동맥질환 및 말초근육 질환과 관련된 질환의 치료에 또한 염증, 염증성 질환, 면역질환 및 암, 특히 사이토킨 및 사이클로옥시게나제에 의해 매개된 질환의 치료를 위해 유용해야 한다.

본 발명은 화합물 11의 제조 및 사용을 참조하여 상기 예시되어 있지만, 본 발명은 일반식 1로 표시되는 화합물의 범위와 일치하는 더 광범위한 적용이 가능하다는 것으로 이해할 것이다. 이것은 예를 들어 화합물11을 제조하기 위한 중간체로서 유용할 뿐만 아니라 화합물 11의 활성과 인치하는 유용한 생물학적 활성을 입증하는 화합물 10을 포함한다.

본 발명의 범위의 대표적인 다른 화합물의 합성은 다음과 같은 실시예로 예시된다.

실시예 2

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아클릴아미드(24)

다음 화학식으로 나나내는 화합물 24는 화합물 14로부터 다음과 같이 제조하였다:

교반막대를 가진 깨끗한 건조 플라스크에 화합물 14 (0.423g, 0.837mmol) 및 건조 DMF (10mL)을 충진하였다. 이어서 교반하면서 카보닐디이미다졸 (0.271g, 1.67mmol)을 첨가하고 반응물을 오일-버블러를 통해 통기하면서 60℃에서 1시간 가열하였다. 이어서 반응혼합물을 0℃로 냉각하고 메탄올 (2.1mL, 4.2mmol)중 2M 암모니아를 첨가하였다. 반응은 10% 시트르산 (10mL), 에틸아세테이트 (50mL), 및 물 (40mL)로 혼합물을 분리하여 작업완료하였다. 이어서 유기상을 물 (2x30mL), 염수 (1x20mL)로 연속적으로 헹구고 무수 MgSO₄로 건조시켰다. 유기물의 농도는 조생성물을 제공하였다. 조생성물은 1% 아세트산 구배 용출을 포함하는 에틸아세테이트-헥산 (3:2)에 1% 아세트산을 함유하는 에틸아세테이트-헥산(1:1)을 사용하여 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획의 농도는 고체로서 백색-담황색 일차 아민 200mg (47%)를 얻었다. ¹HNMR, 400 MHz (DMSO-d₆); δ 12.06(br 1H), 7.40(s, 1H), 7.34(br, 1H), 7.27(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.18 (d, J=8.8, Hz, 2H), 7.05(d, J=9.2, 2H), 6.98(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.93(br, 1H), 6.36(m, 1H), 6.20(s, 1H), 6.19(s, 1H), 4.91(dd, J=4.OHz, 1H), 3.57 (s, 6H), 3.12(dd, J=9.2Hx, 1H).

실시예 3

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-N,N-디메틸아크릴아미드(25)

다음 화학식으로 나나내는 화합물 25는 다음과 같이 제조하였다:

교반막대를 가진 깨끗한 건조 플라스크에 화합물 14 (0.422g, 0.835mmol) 및 건조 DMF (1mL)을 충진하였다. 이어서 교반하면서 카보닐디이미다졸 (0.271g, 1.67mmol)을 첨가하고 반응물을 오일-버블러를 통해 통기하면서 60℃에서 1시간 가열하였다. 이어서 반응혼합물을 0℃로 냉각하고 THF (2.1mL, 4.2mmol)용액중 2M 디메틸아민을 첨가하였다. 반응은 10% 시트르산 (10mL), 에틸아세테이트 (50mL), 및 물 (40mL)로 혼합물을 분리하여 작업 완료하였다. 이어서 유기상을 물 (2x30mL), 염수 (1x20mL)로 연속적으로 헹구고 무수 MgSO₄로 건조시켰다. 유기물의 농도는 조생성물을 제공하였다. 조생성물은 1% 아세트산 용출을 포함하는 에틸아세테이트-헥산 (3:2)을사용하여 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획의 농도는 고체로서 백색-3차 디메틸아미드 381mg (86%)를 얻었다. 분석: ¹HNMR, 400 MHz (DMSO-d₆); δ 11.97(br 1H), 7.29(d, J=8.8Hz, 2H), 7.27(d, J=8 Hz, 2H), 6.99(d, J=8.8 Hz), 6.95(d, J=8.8Hz, 2H), 6.57(s, 1H), 6.35(m, 1H), 6.29(s, 1H), 6.28(s, 1H), 4.91(dd, J=4.4 Hz, 1H), 3.58(s, 6H), 3.12(dd, J=9.2Hz, 1H), 3.05(br, 3H), 2.91(s, 3H).

실시예 4

3-(3,5-디메톡시페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-N-메톡시-N-메틸아크릴아미드(26)

다음 화학식으로 나나내는 화합물 26은 다음과 같이 제조하였다:

교반막대를 가진 깨끗한 건조 플라스크에 화합물 14 (0.450g, 0.890mmol) 및 건조 DMF (1mL)을 충진하였다. 이어서 교반하면서 카보닐디이미다졸 (0.29g, 1.78mmol)을 첨가하고 반응물을 오일-버블러를 통해 통기하면서 60℃에서 1시간 가열하였다. 이어서 반응혼합물을 0℃로 냉각하고 물 (1mL) 및 트리에틸아민 (0.62mL)중 N-메틸-N-메톡시하이드록실아민 하이드로클로라이드(0.434g, 4.45mmol)를 첨가하고 하룻밤 교반하였다. 반응은 10% 시트르산 (10mL), 에틸아세테이트 (50mL), 및 물 (40mL)로 혼합물을 분리하여 작업 완료하였다. 이어서 유기상을 물 (2x30mL), 염수 (1x20mL)로 연속적으로 헹구고 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 유기물의 농도는 조생성물을 제공하였다. 조생성물은 에틸아세테이트-클로로포름(1:5)용출을 사용하여 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획의 농도는 고체로서 백색-3차 N-메틸-N-메톡시아미드 400mg (82%)를 얻었다. 분석: ¹HNMR, 400 MHz (DMSO-d₆); δ 12.06(br 1H), 7.27(d, J=9.2Hz, 2H), 7.26(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.00(d, J=8.8 Hz), 6.95(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.57(s, 1H), 6.35(m, 1H), 6.29(s, 1H), 6.28(s, 1H), 4.91(dd, J=4.4 Hz, 1H), 3.58(s, 6H), 3.12(dd, J=9.2Hz, 1H), 3.05(br, 3H), 2.91(s, 3H).

실시예 5

이 실시예에 나타낸 합성은 반응도식 6에 예시되어 있다.

2-(4-아세톡시페닐)-3-p-톨일아크릴산(37)

250mL 무수 아세트산중 (4-하이드록시페닐)-아세트산 (18.3g, 120.3mmol) 및 4-메틸벤즈알데히드 (12.0g, 100mmol)의 혼합물에 탄산칼륨 (11.9g, 121.2mmol)을 첨가하였다. 반응혼합물은 실온으로 냉각하기 전에 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물에 100mL H₂O, pH1의 물중 5% HCl 및 200mL 에틸아세테이트를 첨가하였다. 이어서 모든 에틸 아세테이트가 증발될 때까지 혼합물을 80℃로 가열하였다. 침전물을 여과하고 물 및 헥산으로 세척하였다. 여과 케이크를 톨루엔으로 재결정화 하고 헥산으로 세척하고 진공 하에 건조시켜 담황색 분말 (20.16g, 68.1%)을 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.62(br s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.19(d, J=8.8Hz, 2H), 7.13(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.01(d, J=8.0Hz, 2H), 6.94(d, J=8.4 Hz, 2H), 2.29(s, 3H), 2.23(s, 3H)

2-(4-아세톡시페닐)-3-p-톨일아크릴산(38)

100mL THF중 화합물 37 (20.15g, 68.1mmol)의 용액에 100mL 물중 수산화리튬 (5.7g, 237.5mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응은 실온에서 16시간 교반시킨 후 물중 5% HCl을 pH=1로 첨가하였다. 황색고체를 여과하고 톨루엔으로 재결정화하고 헥산으로 세척하고 진공하에 건조시켜 백색 고체 (14.27g, 82.5%)를 얻었다.¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.46(br s, 1H), 9.47(br s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.02(d, J=8.0Hz, 2H), 6.97(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.93(d, J=8.4Hz, 2H), 6.74(d, J=8.8 Hz, 2H), 2.22(s, 3H)

2-[4-(4-포르밀펜옥시)-페닐]-3-p-톨일아크릴산(39)

200mL N,N-디메틸아세트아미드중 화합물 38 (7.27g, 28.6mmol) 및 포타슘카보네이트(8.68g, 62.9 mmol)의 용액에 4-플루오로벤즈알데히드(3.9mL, 36.4mmol)을 첨가하였다. 반응혼합물은 아르곤 하에 190℃에서 1.5시간 교반시킨 후 실온으로 냉각하였다. 물중 5% HCl을 pH=1로 첨가하여 오일로서 분리하는 생성물을 얻었다. 약 50mL 에틸아세테이트를 혼합물에 첨가하고 16시간 교반시켰다. 고체를 수집하고 톨루엔으로 재결정하고 헥산으로 헹구고 진공하에 건조시켜 백색 분말 (8.1g, 79.0%)을 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.71(s, 1H), 9.94(s, 1H), 7.97(d, J=8.8Hz, 2H), 7.76(s, 1H), 7.25(d, J=8.4, 2H), 7.18(d, J=6.8Hz, 2H), 7.16(d, J=6.4Hz, 2H), 7.07(d, J=8.0 Hz, 2H), 6.98(d, J=8.4 Hz, 2H), 2.25(s, 3H)

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산(40)

100mL 톨루엔중 화합물 39 (4.0g, 11.2mmol), 티아졸리딘-2,4-디온(1.31g, 11.2mmol) 및 벤조산 (1.64g, 13.4mmol)의 용액에 피페리딘 (1.66mL, 16.8mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에 Dean Stark 장치로 1.5시간 동안 격렬하게 환류시킨 다음 실온으로 냉각하였다. 5% HCl을 pH=1로 첨가하였다. 고체를 여과하고 톨루엔으로 재결정화 하고 여과하고 진공하에 황색 고체(정량)로 건조하기 전에 헥산으로 세척하였다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.70(br, s, 1H), 12.59(br r, 1H), 7.80(s, 1H), 7.75(s, 1H), 7.67(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.22(d, J=9.2, 2H), 7.18(d, J=7.6 Hz, 2H), 7.12(d, J=9.2Hz, 2H), 7.07(d, J=8.0 Hz, 2H), 6.99(d, J=8.0 Hz, 2H), 2.25(s, 3H)

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산(41)

25mL 빙초산중 화합물 40 (1.0g, 2.2mmol) 및 포름산 암모늄 (8.32g, 132mmol)의 용액에 5% Pd/C (1.0g)을 첨가하였다. 혼합물을 7.5시간 환류시키고, 실온으로 냉각하고 셀라이트 상에 여과하였다. 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음 200mL 물에 첨가하였다. 생성물을 여과하고 헥산으로 세척하였다. 고체를 톨루엔으로 재결정화 하고 실온으로 냉각하고 고체가 관찰될 때까지 초음파 처리하였다. 이어서 혼합물을 실온에서 16시간 교반하였다. 침전물을 수집하고 헥산으로 세척하여 백색 고체(0.609g, 59.1%)를 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.65(s, 1H), 12.05(br s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.30(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.16(d, J=8.4Hz, 2H), 7.05(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.01(d, J=8.4Hz, 2H), 6.99(d, J=9.2 Hz, 2H), 6.98(d, J=8.0 Hz, 2H), 4.92(dd, J=4.4 및 9.6Hz, 1H), 3.38(dd, J=4.4 및 14.0 Hz, 1H), 3.21 (dd, J=9.2 및 14.0 Hz, 1H), 2.24(s, 1H)

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산(42)

5mL 디클로로메탄중 화합물 41 (0.1g, 0.218mmol) 및 BOP[Castro's Reagent, 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-(디메틸아미노)-포스포늄 헥사플루오로포스페이트] (0.144g, 0.326mmol)의 혼합물에 트리에틸아민 (0.067mL, 0.477mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 교반한 다음 소듐 메톡사이드 (메탄올중 0.5M용액, 0.07mL, 0.035mmol)을 5mL MeOH와 함께 첨가하였다. 반응물을 실온에서 16시간 교반시켰다. 5%HCl을 pH 0으로 첨가하고 혼합물을 25mL 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 결합된 유기층을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조하고 농축시켰다. 잔사를 디클로로메탄중 용액으로 실리카겔 칼럼상에 부하시켰다. 생성물을 헥산-에틸 아세테이트 (3:2)로 용출하였다. 분획을 진공하에 백색고체(0.037g, 36.4%)로 농축하였다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.05(br s, 1H), 7.75(s, 1H), 7.30(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.18(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.06(d, J=8.0 Hz, 2H), 7.02(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.99(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.98(d, J=8.0 Hz, 2H), 4.91(dd, J=4.8 및 9.6 Hz, 1H), 3.72(s, 3H), 3.39(dd, J=4.0 및 13.6 Hz, 1H), 3.13 (dd, J=9.2 및 14.0 Hz, 1H), 2.25(s, 3H)

실시예 6

이 실시예에 나타낸 합성은 반응도식 7에 예시되어 있다.

3,5-디메틸벤즈알데히드 (43)

디클로로메탄 (200mL)중 3,5-디메틸벤조산 (7.51g, 50mmol) 및 트리에틸아민 (21mL, 150mmol)의 혼합물에 BOP 시약 (22.11g, 50mmol)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 20분간 교반한 다음 N,O-디메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드 (5.0g, 50mmol)을 첨가하였다. 추가로 30분 후, 트리에틸아민 (7mL, 50mmol)을 첨가하고 혼합물을 0.5시간 더 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고 에틸아세테이트 (300mL)중에 재용해하고, 1N HCl (200mL), 1N NaOH (200mL), 물, 염수로 세척한 다음 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축시켜 무색 시럽 (6.25g)을 얻었다. 이 물질을 THF(250mL)중에 용해하고 아르곤 분위기 하에 0℃로 냉각하였다. DIBAL 용액[디이소부틸알루미늄하이드라이드] (THF중 1M, 50mL)을 5분에 걸쳐 교반 용액에 첨가하였다. 교반 20분 후, 추가적인 DIBAL (20mL)을 첨가하였다. 추가로 15분 후, 반응을 1N HCl (300mL)로 급냉하고 생성물을 에틸아세테이트 (300mL)로 추출하고, 물 (2 x 200mL), 염수 (200mL)로 세척하고, 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 건조시켜 화합물 43 (4.97g, 전체 74%)을 얻었다.

3-(3,5-디메틸벤즈페닐)-2-(4-하이드록시페닐)-아크,릴산 (44)

화합물 43 (3.23g, 24mmol), 4-하이드록시페닐아세트산 (3.66g, 24mmol) 및 포타슘 아세테이트 (2.83, 28mmol)의 혼합물에 무수 초산 (100mL)을 첨가하였다. 혼합물을 가열하여 4시간 환류시키고 실온으로 냉각한 다음 물(400mL)에 부었다. 1.5시간 교반 후, 고체 검을 병에 침강시킨 다음 상등액을 가만히 따랐다. 잔사에 THF (100mL) 및 1N NaOH (150mL)을 첨가하고 혼합물을 30분간 교반하였다. 혼합물을 1N HCl (200mL)로 산성화하고 생성물을 에틸아세테이트 (300mL)로 추출하고, 물 (300mL), 염수 (300mL)로 세척하고 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축시켰다. 조 고체를 톨루엔 중에 결정화시켜 2.65g (42%)의 담황색 고체 44를 얻었다.

3-(3,5-디메틸페닐)-2-[4-(4-포르밀펜옥시)-페닐]-아크릴산 (45)

DMF (20mL)중 화합물 44 (2.65g, 10mmol)의 용액에 수소화 나트륨 (광유중 60% 분산액, 0.88g, 22mmol)을 첨가하였다. 가스 용출을 정지한 후, 4-플루오로벤즈알데히드 (1.60g, 15mmol)를 첨가하고 반응을 16시간 교반하였다. 혼합물을 10% 시트르산 (100mL)에 붓고, 밝은 황색 고체를 형성하였다. 고체를 물로 세척하고 습윤 고체를 공비증류하고 톨루엔으로 재결정화하여 2.97g (80%)의 황색 고체 45를 얻었다.

3-(3.5-디메틸페닐)-3-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산(46)

Dean-Stark 장치를 구비한 100mL의 둥근바닥 플라스크에, 화합물 45 (1.55g, 4.2mmol), 2,4-티아졸리덴디온 (0.5g, 4.2mmol), 벤조산 (0.62g, 5.0mmol) 및 피페리딘 (0.62mL, 6.3mmol)을 격렬한 환류하에 45분간 톨루엔 (60mL)중에 공비증류 시켰다. 반응 혼합물을 10% 시트르산 (40mL)에 붓고 밝은 황색 고체가 형성될 때까지 교반하였다. 고체를 여과하고 물로 세척하고 습윤 고체를 공비증류 하고 톨루엔으로 재결정화 하여 1.83g (93%)의 화합물 46을 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.72(br s, 1H), 12.57 (br s, 1H), 7.77(s, 1H), 7.70(s, 1H), 7.63(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.22(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.14(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.12(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.92(s, 1H), 6.69(s, 2H), 2.16(s, 6H).

3-(3.5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산(47)

화합물 46 (1.83g, 3.9mmol), 포름산 암모늄 (4.90g, 78mmol) 및 알루미늄상의 10% Pd (2.0g)을 15시간 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고 촉매를 여과 제거하였다. 생성물을 물의 첨가와 함께 분리제거하고 고체를 여과하였다. 습윤 고체를 공비증류하고 톨루엔으로 재결정화 하여 0.18g (44%)의 화합물 5을 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.68(br s, 1H), 12.05 (br s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.27(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.16(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.02(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.96(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.90(s, 1H), 6.62(s, 2H), 4.92((dd, J=8.8 및 4.4Hz, 1H), 3.37 (dd, J=14.0 및 4.4Hz, 1H), 3.12(dd, J=14.0 및 8.8Hz, 1H), 2.12 (s, 6H).

3-(3.5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 벤즈트리아졸-1-일 에스테르(48)

디클로로메탄 (20mL)중 화합물 47 (0.81g, 1.7mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.33mL, 1.9mmol)을 BOP 시약 (0.76g, 1.7mmol)을 첨가하였다. 실온에서 교반 45분 후에, 혼합물을 에틸 아세테이트 (150mL)로 희석하고 1N HCl (100mL), 물 (100mL), 염수 (100mL)로 세척하고 건조하고(MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물을 헥산:에틸 아세테이트 (3:2)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 농축 후 수득된 고체를 헥산:에틸아세테이트 (4:1)로 분쇄하여 0.75g (76%)의 화합물 48을 얻었다.

3-(3.5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산 메틸에스테르(49)

메탄올 (10mL)중 화합물 48 (240mg, 0.4mmol)을 소듐 메톡사이드(메탄올 중 0.5N, 2mL)를 첨가하였다. 10분 후 혼합물을 1N HCl (2mL)로 희석하고 생성물을 에틸아세테이트 (50mL)로 추출하고, 물(50mL), 염수 (50mL)로 세척하고 건조하고 (MgSO₂), 여과하고 진공하에 농축시켰다. 조 물질을 헥산:에틸아세테이트 (3:2)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 백색 기포로서 화합물 49 (122mg, 62%)을 얻었다. ¹HNMR, (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.10(br s, 1H), 7.71(s, 1H), 7.28(d, J=8.8Hz, 2H), 7.18(d, J=8.8Hz, 2H), 7.03(d, J=8.8Hz, 2H), 6.97(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.92(s, 1H), 6.68(s, 2H), 4.91(dd, J=8.8 및 4.4 Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 3.37(dd, J=14.0 및 4.4 Hz, 1H), 3.12 (dd, J=14.0 및 8.8 Hz, 1H), 2.12(s, 6H).

5-(4-{4-[2-(3,5-디메틸페닐)-1-(모르폴린-4-카보닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온 (50)

실온에서 디클로로메탄 (5mL)중 화합물 48 (116mg, 0.2mmol)의 현탁액에 모르폴린 (87μL, 1mmol)을 첨가하였다. 용액은 깨끗하게 되었다. 10분 후, 혼합물을 10% 시트르산 (4mL)로 처리하였다. 디클로로메탄 층을 건조하고 (MgSO₄), 칼럼상에 직접적으로 부하시키고 헥산:에틸 아세테이트 (2:3)으로 용출하여 백색 기포로서 화합물 50 (104mg, 86%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.10 (br s, 1H), 7.27(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.26 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.98(d, J=8.8 Hz, 2H), 6.96(d, J=8.8Hz, 2H), 6.85(s, 1H), 6.72(s, 2H), 6.61(s, 1H), 4.91(dd, J=8.8 및 4.4 Hz, 1H), 3.59(bs, 8H), 3.37(dd, J=14.0 및 4.4 Hz, 1H), 3.12 (dd, J=14.0 및 8.8 Hz, 1H), 2.13(s, 6H).

실시예 7

5-(4-{4-[2-(4-메톡시페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온 (54)의 합성 (반응도식 8 참조)

5-(4-하이드록시벤질리덴)-티아졸리딘-2,4-디온(51)

톨루엔 (100mL)중 4-하이드록시벤즈알데히드 (3.67g, 30mmol), 2,4-티아졸리딘디온 (3.51g, 30mmol) 및 벤조산 (4.40g, 36mmol)의 혼합물에 피페리딘 (4.5mL, 45mmol)을 첨가하고 혼합물을 Dean Stark 장치에 충진하고 격렬히 환류시켰다. 45분 후, 혼합물을 빙욕에 냉각하고 상등액을 가만히 따랐다. 밝은 황색 고체를 빙초산 (100mL)의 첨가에 의해 현탁액으로 만들고 부흐너 깔때기를 통해 여과하여 담황색 고체 (6.00g, 90%)을 얻었다. ¹HNMR: (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.45 (bs, 1H), 10.30(s, 1H), 7.70(s, 1H), 7.45(d, J=8.8Hz, 2H), 6.91(d, J=8.8 Hz, 2H).

5-(4-하이드록시벤질)-티아졸리딘-2,4-디온(52)

빙초산(100mL)중 화합물 51 (600g, 27mmol)의 현탁액에 포름산 암모늄 (6.27g, 100mmol) 및 탄소상의 10%Pd (5.80g)을 첨가하고 혼합물을 가열하여 16시간 격렬히 환류시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각한 다음 셀라이트를 통해 여과하였다. 대부분의 아세트산을 진공하에 제거하고 조 생성물을 에틸 아세테이트 (250mL)에 용해하고 물(2x250mL)로 세척한 다음 염수 (250mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하게 농축시켜 베이지색 고체 (5.35g, 85%)를 얻었다. ¹HNMR: (400 MHz, DMSO-d₆): δ 11.98(bs, 1H), 9.32(s, 1H), 7.02(d, J=8.4Hz, 2H), 6.68(d, J=8.4Hz, 2H), 4.82(dd, J=8.4 및 4.0 Hz, 1H), 3.25 (dd, J=14.4 및 4.4 Hz, 1H), 2.99(dd, J=14.0 및 9.2 Hz, 1H).

4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-벤즈알데히드 (53)

DMF(150mL)중 화합물 52 (5.35g, 24mmol)의 용액에 4-플루오로벤즈알데히드 (3.00g, 24mmol) 및 Cs₂CO₃(20g, 62mmol)을 첨가하고 혼합물을 100℃로 2시간 가열하였다. 혼합물을 격렬히 교반하면서 10% 시트르산 (200mL) 및 에틸아세테이트 (200mL)을 부었다. 유기층을 물 (300mL), 염수 (300mL)로 세척하고, 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸아세테이트 (2:1)중에 분쇄하여 백색고체 (5.15g, 65%)를 얻었다. ¹HNMR: (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.07(bs, 1H), 9.92(s, 1H), 7.92(d, J=8.4Hz, 2H), 7.35(d, J=8.4Hz, 2H), 7.12(d, J=8.4 2H), 7.09 (d, J=8.4 Hz, 2H) 4.94 (dd, J=8.4 및 4.4 Hz, 1H), 3.41(dd, J=14.4 및 4.4 Hz, 1H), 3.17(dd, J=14.4 및 9.2 Hz, 1H).

5-(4-{4-[2-(4-메톡시페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온 (54).

0℃에서 THF(10mL)중 4-메톡시벤질트리페닐포스포늄 클로라이드 (419mg, 1.0mmol)의 현탁액에 고체 포타슘 tert-부톡사이드 (224mg, 2.0mmol)을 첨가하였다. 수득된 오렌지-적색 용액을 0℃에서 15분간 교반하고 -45℃로 냉각하였다. 고체 화합물 53 (327mg, 1.0mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 이 온도에서 30분간 교반하였다. 이 담황색 용액에 빙초산 (60μL, 1mmol)을 첨가하고 용매를 진공하에 제거하였다. 조 생성물을 디클로로메탄 중에 현탁하고 실리카 겔상에 흡수시키고 헥산-에틸 아세테이트 (7:3)을 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 고 진공하에 건조 후 백색 고체 (143mg, 33%)을 얻었다. ¹HNMR: (400 MHz, DMSO-d₃): δ 12.04(bs, 1H), 7.27(d, J=8.0 Hz, 2H), 7.24(d, J=8.4 Hz, 2H), 7.18(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.97(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.88(d, J=8.8Hz, 2H), 6.84(d, J=8.8Hz, 2H), 6.53(d,J=12.4 Hz,2H), 6.48(d,J=12.0 Hz, 2H) 4.90 (dd, J=9.2 및 4.4 Hz, 1H), 3.36(dd, J=14.0 및 4.4 Hz, 1H), 3.11(dd, J=14.0 및 8.8 Hz, 1H).

실시예 8

5-(4-{4-[2-(3,5-디메톡시페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온 (55).

0℃에서 THF(10mL)중 3,5-디메톡시벤질트리페닐포스포늄 브로마이드 (0.82g, 2.0mmol)의 현탁액에 고체 포타슘 tert-부톡사이드 (224mg, 2.0mmol)을 첨가하였다. 수득된 적색 용액을 0℃에서 15분간 교반하고 -78℃로 냉각하였다. 고체 53 (0.3mg, 0.90mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 30분 후 10% 시트르산 (50mL)을 첨가하고 혼합물을 물 (50mL)과 에틸 아세테이트 (75mL) 사이에 분리하였다. 유기층을 물 (50mL) 및 염수 (50mL로 세척하고 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 헥산-에틸아세테이트 (7:3)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 고 진공하에 농축 및 건조 후 약간 불투명한 막 (25mg, 6%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ12.04(bs, 1H), 7.26(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.25(d, J=8.8Hz, 2H), 6.93(d, J=8.4Hz, 2H), 6.91(d, J=8.4 Hz, 2H), 6.61 (d, J=12.4 Hz, 1H) 6.53(d, J=12.0Hz, 1H), 6.39 (d, J=2.4Hz, 1H), 6.36(t, J=2.4Hz, 1H), 4.90 (dd, J=9.2 및 4.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 6H), 3.36 (dd, J=14.0 및 4.4Hz, 1H), 3.11 (dd, J=14.4, 8.8Hz, 1H).

실시예 9

이 실시예에서 나타낸 합성은 반응도식 9에 예시되어 있다.

4'-메톡시비페닐-3-올 (56)

2M 수성 K₂CO₃(4mL)중 3-하이드록시페닐브론산 (1.00g, 7.3mmol)의 용액에 아세톤 (4mL)중 4-요오도아니솔 (1.70g, 7.3mmol)의 용액을 첨가하였다. 균일 혼합물은 물 (60mL) 및 아세톤 (30mL)의 연속적인 첨가에 의해 얻었다. 촉매 Pd(OAc)₂는 (160mg, 0.73mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 10분간 교반하였다. 아세톤을 진공하에 어두운 갈색 용액으로부터 제거하고 수득된 수성 혼합물을 1N HCl (20mL)러 산성화하고 에틸아세테이트 (75mL)로 추출하였다. 유기층을 물 (50mL), 염수(50mL)로 세척하고 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄중에 현탁시키고 실리카 겔상에 흡수시키고 헥산-에틸아세테이트 (3:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 용매 제거 후에 1.20g (82%)의 화합물 56을 얻었다.

4-(4'-메톡시비페닐-3-일옥시)-벤즈알데히드 (57)

DMF (25mL)중 화합물 56 (1.20g, 6.0mmol) 및 4-플루오로벤즈알데히드(745mg, 6.0mmol)의 용액에 세슘 카보네이드 (3.90g, 12.0mmol)을 첨가하였다. 100℃에서 1시간 교반 후, 생성물을 에틸 아세테이트 (100mL)과 물 (100mL) 사이에 분리하였다. 유기층을 물 (100mL), 염수(100mL)로 세척하고 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중에 현탁시키고 실리카 겔상에 흡수시키고 헥산-에틸아세테이트 (6:1)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 용매 제거 후에 백색 고체로서 화합물 57 (1.23g, 67%)을 얻었다.

5-[4-(4'-메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온 (58).

톨루엔 (30mL)중 화합물 57 (1.23g, 4.0mmol), 2,4-티아졸리딘디온 (0.48g, 4.0mmol), 벤조산 (0.60g, 4.8mmol) 및 피페리딘 (0.61mL, 6.0mmol)의 혼합물을 대부분의 용매가 증발될 때까지 가열하여 격렬히 환류시켰다. 황색 현탁액을 아세트산 (25mL) 첨가후 분쇄에 의해 얻었다. 현탁액의 여과후 아세트산 (10mL)로 세척은 여과 및 오븐 건조 후에 화합물 58 (1.25g, 75%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.57(br s, 1H), 7.78(s, 1H), 7.63(d, J=8.8Hz, 2H), 7.62(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.49(d, J=5.2Hz, 2H), 7.36(t, J=1.6Hz, 1H), 7.16(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.03(m, 1H), 7.01(d, J=8.8 Hz, 2H) 3.7 (s, 3H).

5-[4-(4'-메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온 (59).

아세트산 (30mL)중 화합물 58 (1.25g, 3.0mmol)의 현탁액에 포름산 암모늄 (1.50g, 24mmol) 및 탄소상의 10% Pd (1.30g)을 첨가하였다. 16시간 격렬히 교반한 후, 혼합물을 물 (2x75mL), 1N NaHCO₃ (50mL), 염수 (75mL)로 세척하고, 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축하였다,. 조 생성물은 티클로로메탄 중에 용해하고 실리카 겔상에 흡수시키고, 헥산:에틸아세테이트(3:7)을 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 헥산-에틸아세테이트 (4:1)로부터 농축, 분쇄 및 여과 후에 백색 고체 (0.48g, 38%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.04(br s, 1H), 7.58(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.43(t, J=7.6 Hz, 1H), 7.39(dt, J=8.0 Hz, 1H), 7.27(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.22(t, J=2.0 Hz, 1H), 7.01(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.00(d, J=9.2Hz, 2H), 4.91 (dd, J=8.8 및 4.4 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.37 (dd, J=14.4 및 4.4 Hz, 1H), 3.13 (dd, J=14.4 및 8.8 Hz, 1H).

실시예 10

5-[4-(3',5'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온 (61).

먼저, 5-[4-(2',4'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온 (60)은 반응도식 9에 도시된 화합물 53의 합성과 동일한 반응도식을 사용하여 합성하였다. 아세토니트릴 (20mL)중 화합물 60 (0.28g, 0.65mmol)의 현탁액에 트리에틸아민 (180μl, 1.3mmol), 포름산 암모늄 (0.41g, 6.5mmol) 및 알루미늄상의 10%Pd (0.5g)를 첨가하였다. 2.5시간 환류 후, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸아세테이트 (60mL)로 세척하였다. 혼합물을 10% 시트르산 (50mL)로 산성화하고 물 (50mL), 염수 (50mL)로 세척한 다음 건조하고 (MgSO₄), 여과하고 진공하에 농축하였다. 조 생성물은 헥산:에틸아세테이트(3:7)를 사용하여 플래시 크로마토그래피로 정제하여 고 진공하에 농축 및 건조 후 가벼운 막 (59mg, 21%)를 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.04(br s, 1H), 7.38(t, J=8.4 Hz, 1H), 7.27(d, J=9.2 Hz, 2H), 7.22(d, J=8.4 Hz, 1H), 7.20(dt, J=8.4 Hz 및 0.8 Hz, 1H), 7.06 (t, J=2.0 Hz, 1H), 7.00 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.90 (ddd, J=8.0 2.4 및 0.8 Hz, 1H), 6.64 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.60 (dd, J=8.4 및 2.4 Hz, 1H), 4.91 (dd, J=8.8 및 4.4 Hz, 1H), 3.79 (s, 6H), 3.37 (dd, J=14.4 및 4.4 Hz, 1H), 3.13 (dd, J=14 및 8.8 Hz, 1H0.

실시예 11

보강제 유발 관절염(AIA) 래트에서 망상조직 골 손실의 예방

염증성 관절염은 파골세포 활성을 활성화시키는 사이토킨의 활성화 때문에 귀주위 뼈 손실을 생기게 한다. 티아졸리딘디온(TZD)은 염증성 관절염에서 뼈 손실을 유도하는 중요한 인자인 TNF-알파 생산을 억제할 수 있는 인슐린 민감제이다. 이 조사의 목적은 TZD 화합물 11 및 에타너셉트 (p55 TNF 용해가능한 수용체)는 AIA 래트에서 뼈손실을 예방할 수 있음을 입증하는 것이다. 관절염은 테일 베이스에서 Mycobacterium butyricum (100μg)를 함유하는 프레운드 완전 보강제로 이들을 면역화시킴으로써 수컷 루이스 래트 (Harlan, 체중 150g)에서 유발되었다. 관절염 증상이 (12-14일) 나타나기 시작했을 때, 동물은 세 개의 처리군의 하나로 뷸규칙화 하였다: 그룹 I: 부형제 (물중 20% PEG-400, 경구 위관); 그룹 II: 화합물 11 (50mg/kg, 매일 한번 경구위관 당); 및 그룹 III: 에타너셉트 (1.67mg/kg, 매일 한번 복강내). 각각의 사지는 처리군에 문외한인 관찰자에 의해 0 (변화 없음 또는 정상) 내지 4 (팽창, 홍반, 결절, 변형, 견고성을 가진 현저한 관절염)까지 개별적으로 점수를 매겼다. 체중, 감염된 사지의 수 및 뒤발 용적을 주의하였다. 11일에 AIA 래트는 치사시키고 우측 대퇴부, 경골을 획득하고, 절개하고 70% EtOH중에 고정시켰다. 우측 인접 경골 및 말초 대퇴골의 망상조직 뼈 용적 및 미세구조는 MicroCT (μCT-20, 스칸코, 메디칼, 바서스도르프, 스위스)에 의해 평가하였다. 우측 인접 경골의 결과는 다음 표에 나타냈다.

표 2

그룹	BV/TV(%)	Tb.N(1/mm)	Conn.Dens(1/mm3)	C.Th(μm)	SMI(0-3)
Sham(n=7)	21.4 ±2.6	4.5 ±0.4	70.5 ±14.9	250 ±24	2.3 ±0.9
부형제(n=12)	6.2 ±4.0	2.0 ±0.4	10.3 ±15.3	167 ±27	3.5 ±0.3
화합물 11(n=9)	13.7 ±4.7	2.6 ±0.5	38.3 ±19.7	186 ±25	2.8 ±0.3
에타너셉트(n=9)	12.9 ±5.2	2.8 ±0.5	31.9 ±19.7	198 ±25	2.8 ±0.4

요컨대, 현저한 망상조직 뼈 손실 및 미세구조 변화는 AIA 래트에서 일어났다. 그러나 이 AIA 모델에서, 거의 50% 미만 망상조직 뼈는 화합물 11 또는 에타너셉트로 처리한 동물에서 손실이었다. 따라서 화합물 11은 염증성 관절염 및 유사 급속 뼈 손실 상태에서 뼈 손실을 감소시키는데 효과적일 수 있다.

실시예 12

글루코오스 흡수량

기본 글루코오스 흡수량은 변형으로 타푸리(6)의 프로토콜 후에 분화된 3T3-L1 아디포사이트에서 측정하였다. 간략히, ATCC(Manassa, VA)로부터 입수한 3T3-섬유아세포는 프로스트 및 레인 (7)의 프로토콜 이후에 돼지 인슐린 (1μg/ml, 4일간), 덱사메타손 (0.25μM, 처음 2일간) 및 이소부틸메틸 크산틴 (IBMX, 0.5mM, 처음 2일간) (모두 시그마 케미칼, 세이트 로이스, NO)로 세포를 처리함으로써 아디포사이트로 분화시켰다. 분화된 아디포사이트는 24-웰 플레이트에서 48시간 다양한 농도의 화합물 11 또는 부형제 (0.1% DMSO)로 10% 태아 소 혈청 (GibcoBRI, Gaitherburg, MD)를 함유하는 덜베코 변형 이글 매체 (DMEM)에서 배양하였다. 세포는 인산염 완충 염류 (PBS, 150mM NaCl, 1mM KH₂PO₄, 3mM NaHPO₄; pH 7.4)로 세척하고 37℃에서 2시간 글루코오스 유리 DMEM중에 배양하였다. 세포를 크렙 링거 인산염 완충액 (KRP)로 3회 세척하였다. 글루코오스 흡수는 웰당 0.25μCi 2-¹⁴C(U)-데옥시-D-글루코오스(300 μCi/mmol, 아메리칸 라디오레이블드 케미칼스 인코포레이티드, St Louis, MO)의 첨가에 의해 개시하고 0.1 mmol 차가운 2-데옥시-D-글루코오스의 존재하에 세포를 실온에서 10분간 배양하였다. 최종적으로, 세포를 10mM 차가운 글루코오스를 함유하는 빙냉 PBS로 3회 세척하고 0.5% SDS로 용해하고, 섬광계수기 (베크만 LS6500)로 카운트 하였다.

트랜스팩션 및 루시퍼라제 활성 평가

인간 PPAR-γ2 표현 벡터는 pcDNA3.1+ 벡터(인비트로겐, 칼스바드, 캘리포니아)내로 PPAR-γ2엔코딩 영역을 삽입하여 구성하였다. 루시퍼라제 리포터 벡터는 파이어플라이 루시퍼라제 코딩 영역의 상류에 인접한 PPRE 반응 요소를 결착시켜 구성하였다. 레닐라 루시퍼라제를 표현하는 조절 벡터, pRL-SV40은 프로메가 (메디손, WI)로부터 구입하였다.

약 2.7 x 10⁴ 293셀 (ATCC, Manassa, VA)는 35mm 배양 웰에 평판배양하고 24시간 동안 10% 가열 비활성화 호스 혈청 (ATCC, Manassa, VA)으로 보충하였다. 표현, 리포터 및 조절 벡터 (배지 웰당 2.5ng 조절 및 100ng 기타)는 LIPOFECTAMIN PLUS^TM 시약 (인비트로겐, 칼스바드, 캘리포니아)에 의해 세포로 감염시켰다. 세포감염제 및 DNA는 제조업자의 추천에 따라 제조하였고 세포로 3시간 배양한 다음 20% 말 혈청으로 보충된 동일 용적 EMEM을 첨가하였다. 세포 감염 24시간 후, 세포를 지시된 농도에서 24시간 부형제 또는 화합물로 처리하였다. 부형제의 최종 농도는 매체 중에 0.001% DMSO (시그마, 세인트루이스, MO)이었다. 부형제 및 화합물 처리는 모두 3회 수행하였다. 이어서 각각의 배양 웰은 레닐라 루시퍼라제 활성으로 정상화된 파이어 플라이 루시퍼라제 활성 증가를 나타내는 반응으로 평가하였다.

파이어플라이 루시퍼라제 활성 및 레닐라 루시퍼라제 활성의 평가 후 듀얼-루시퍼라제 리포터® 평가 시스템 (프로메가, 메디슨, WI)의 표준 프로토콜을 수행하였다. 간략하게는, 400μl 패시브 세포용해 완충제는 각각의 배양 웰에 첨가하였고 모든 웰은 세이커에 15분간 충진하였다. 각각의 웰의 5μl 세포 용해물은 반응튜브에 첨가하였다. 루시퍼라제 시약 II 및 Stop & Glo®는 연속적으로 시리우스 루미노미터 (베톨드 디텍션 시스템, 프로자임, 독일)에 의해 반응 튜브롤 주사하였다. 최종 리포터 활성은 레닐라 루시퍼라제 활성에 의해 파이어플라이 루시퍼라제 활성의 비로 계산하였다.

결과

상이한 위치 (10, 11, 17)에서 이중결합을 갖는 세 개의 가능한 메틸에스테르 동족체, 이중결합 18이 없는 메틸에스테르, 화합물 11의 유리산 동족체 14 및 화합물 11의 Z-이성체 23은 0.1 및 1 μM 농도 (표 3)에서 3T3-L1 세포 (타푸리 등, 내분비학, 137:4706-12, 1996; 프로스트 및 레인, J. Biol Chem 260: 2646-52, 1985)의 시험관내 글루코오 흡수에 대해 시험하였다. 1 μM 농도에서 화합물 10, 11 및 14는 로지글리타존에 필적할 만한 농도로 글루코오스 흡수를 증가시켰다. 화합물 17 및 18은 1 μM 농도에서 최적 활성을 보여주었으며 또한 화합물 23은 필수적으로 비활성이었다. 0.1 μM 농도에서, 화합물 10 및 11은 활성을 유지시켰지만, 로지글리타존의 활성보다는 더 적다. 두개의 이중결합을 함유하는 화합물 10은 화합물 11에 비하여 더 낮은 증가된 글루코오스 흡수를 나타냈다. 단지 하나의 이중결합을 갖는 화합물 17은 TZD 고리에 결합하고 이중으로 감소된 생성물 18은 0.1 μM에서 활성이 결여되었다. 우리는 이로부터 TZD고리에 결합된 이중결합의 부존재 및 신남산 이중결합의 존재가 이 시스템에서 증가된 글루코오스 섭취에 중요함을 추측한다. 화합물 11의 상응하는 Z-이성체인 화합물 23 활성의 결여는 이중결합의 기하학이 활성에 중요함을 나타낸다. 메틸에스테르 11에 비하여 유리산 14의 더 낮은 활성은 화합물들의 지방 치화성의 차이 때문일 수 있다.

TZD부류의 항당뇨병 화합물은 PPAR-감마 활성화를 거쳐 인슐린에 대한 말초조직 민감성을 증가시킨다. 우리의 목표는 이 추가적인 활성 메카니즘인 화학적 변형에 의해 디페닐에틸렌 화합물로 도입하는 것이었다. PPAR-감마에 대한 작용물질 활성은 리포터 요소로서 파이어플라이 루시퍼라제에 결착된 인간 PPAR-감마2로 세포 용해된 세포을 사용하여 시험관내 시스템에서 개발하였다. 시험된 화합물에 대한 이 시험관내 트랜스 활성화 평가로부터 결과는 표 4에 요약되어 있다. 이 계열에서 가장 강력한 화합물은 동일 평가에서 로지글리타존 (0.28 μM의 EC₅₀)의 활성의 약 30분의 1을 갖는 화합물 11(0.009 μM의 EC₅₀)인 것으로 밝혀졌다. 화합물 10 (두개의 이중결합) 및 화합물 14 (11의 유리산)도 또한 화합물 11의 것보다 더 적지만 상당한 효력을 나타냈다. 신남산 이중결합이 감소되는 화합물 17 및 18은 필수적으로 비활성이었다.

Z-이성체 23은 이 평가에서 화합물 11의 효력의 10분의 1미만을 보여주었다. 이들 시험관내 결과를 기준으로 하여, 화합물 11은 NIDDM의 두개의 널리 사용되는 마우스 모델에서 평가하였다.

초기에, 화합물 11의 생체내 글루코오스-저하 효과는 (0.5% CMC 및 10% PEG중에) 50mg/kg의 단일 경구 투여 다음에 유전학적으로 인슐린 과잉 당뇨병 마우스 (db/db) 모델 (8주 된 수컷, 그룹당 5마리 동물)에서 조사하였다. 혈당 농도는 0분, 1, 4, 6, 24, 48 및 72시간의 간격으로 검사하였다. 화합물 11은 24시간에서 최대인 시간 의존 글루코오스 저하 효과를 나타냈다 (0분의 23%, 데이터 도시안함). 로지글리스타존과 화합물 11의 비교(각각 50mg/kg/일, 경구적으로, 14일간)은 급격한 상당한 혈글루코오스 저하효과를 보여주었으며, 이는 투여 기간 중에 증가하였다 (도 16A). 체중 (도 16B)는 단기간 실험에서 어느 화합물에 의해 영향 받지 않았다.

화합물 11은 또한 50mg/kg 체중의 투여량에서 14일간 계속 처리한 유적학적으로 비만(ob/ob) 수컷 당뇨병 마우스 (7주된 수컷 마우스, 그룹당 5마리 동물)에서 평가하였다. 화합물 11에서 처리된 마우스 혈당 농도는 48시간 내에 현저히 감소하였으며 또한 3일까지 정상화 하였다 (^*p값 〈 0.05; 쌍 T시험) (도 17A). 이들 마우스에서 혈당 농도는 처리를 멈춘 후에 서서히 다시 올라갔다 (도 17A). 흥미롭게는 우리는 부형제 처리 그룹에 비하여 약물 처리 동물의 체중에서 어떠한 증가를 보지 못했다 (도 17B). 이것은 상이한 동물 모델에서 큰 체중 증가를 보여준 강한 PPAR-감마 작용물질에 비하여 유리한 상활이 될 수 있다.

14일의 처리후에, 혈 샘플은 글루코실화 헤모글로빈, 혈청 인슐린, 트리글리세라이드, FFA 농도들의 측정을 위한 그룹으로부터 수집하였다 (도 18). 당뇨병 관리의 표시자로서 사용되는 글루코실화 헤모글로빈은 5.2%에서 3.8%로 감소하였다 (p=0.15). 화합물 11은 부형제 처리 동물에 비하여 혈청 인슐린 농도를 58%로, 트리글리세라이드 농도를 65%로 또한 유리지방산(FFA)농도를 33%로 증가하였으며 모두 p〈 0.05.

화합물 11의 효과적인 투여량을 설정하기 위하여, 3개의 상이한 투여량으로 ob/ob 마우스 (n=8)중에서 수행하였다. 도 19에 도시한 바와 같이, 투여량 의존 글루코오스 저하효과가 있었다. 3.12mg/kg으로 처리된 동물은 처리 12일 후에 12.5mg/kg에 비하여 유사한 정도의 글루코오스 감소를 나타냈다. 따라서 11의 효과는 db/db 및 ob/ob에서 로지글리타존과 비교할 만하다.

PPAR-감마의 고도 활성화를 보여주는 화합물이 일반적으로 동물 실험에서 우수한 글루코오스 저하 활성을 갖는 갓으로 이전에 제안되었다 (윌슨 등, J Med Chem 39:665-8, 1996; Foreman,et al, Cell 83:803-12, 1995).

그러나, 여기서 보고된 발견은 이 해석과 다르다. 우리는 로지글리타존의 것에 비교할 말한 동물에서 글루코오스 저하활성을 나타낸 덜 강력한 PPAR-감마 작용물질 11을 발견하였다. 화합물 11의 이 강력한 글루코오스 저하 활성 이면의 메카니즘을 더욱 밝히기 위한 시도들이 이루어지고 있다. 간에서 특히 근육에서 글리코겐 합성은 식후의 글루코오스의 처분에 대한 주요 부위이다. 가장 온화한 PPAR-감마 작용물질 활성에도 불구하고 강한 글루코오스 저하 활성에 대한 한 가지 가능한 설명은 우리의 관찰로는 로지글리타존에 비하여 화합물 11에 의해 유도된 더 높은 글리코겐 합성이다.

표 3. 3T3-L1 아디포사이트^a에서 시험관내 글루코오스 흡수

화합물 번호	% 글루코오스 흡수
화합물 번호	0.1μm	1.0μm
1(로지글리타존)	204.2 ±8.5	214.7 ±36.5
10	142.6 ±7.4	209.3 ±22.6
11	161.6 ±11.4	218.1 ±10.0
14	108.6 ±19.9	199.5 ±11.6
17	101.9 ±6.8	130.0 ±27.0
18	104.4 ±5.7	137.0 ±10.1
23	89.5 ±5.6	118.0 ±3.6
인슐린	335.2 ±21.7	345.6 ±8.3

^a기본글루코오스 흡수는 비처리 세포의 %기준으로 표현된다 (각 점은 4회 반복 측정 ±SD값의 평균이다).

표 4. 티아졸리딘디온^a에 의한 PPAR-γ매개 루시퍼라제 활성의 유도

화합물 번호	EC₅₀ (μM)
1 (로지글리타존)	0.009 ±0.007
10	1.136
11	0.284 ±0.036(n=5)^b
14	0.690 ±0.038(n=2)
17	23.9
18	57.7
23	3.686 ±1.454(n=2)

^a결과는 여러 가지 독립적인 실험을 기준으로 한다. 각각의 실험은 적어도 3개의 상이한 농도의 의약 처리 (0.1 내지 30μM 사이)를 함유하며 각각의 농도는 3회 반복한다. EC₅₀ 값은 그라프패드 프리즘 소프트웨어를 사용하여 비선형-회귀 분석에 의해 계산하였다.

^bn=독립 실험

결론

알파-신남산 모티프를 기본으로 하는 TZD는 당뇨병 마우스의 유전모델에서 글루코오스 저하 활성을 갖는다. 화합물 11은 약한 PPAR-감마 작용물질일지라도 강력한 글루코오스 저하활성을 나타냈다. 더 약한 PPAR-감마 작용물질임에도 불구하고 화합물 11의 강한 글루코오스 저하 활성은 로지글리타존에 비하여 더 높은 글리코겐 합성에 기인할 수 있다. TZD의 새로운 패미리의 작용메타니즘을 완전히 밝히기 위해서는 추가의 조사가 필요하다.

실시예 13

글리코겐 합성

글리코겐 합성은 시아랄디 등, 당뇨병 41:975-81, 1992에 기술된 바와 같이 HepG2에서 셀룰라 글리코겐으로 ¹⁴C-D-글루코오스의 순수 전환으로 측정하였다. 간략하게, 6-웰 플레이트에서 HepG2 세포 (ATCC, Manassas, VA)는 화합물 11 또는 다른 화합물로 48시간 처리하였다. 이들은 1% BSA를 함유하는 10mM HEPES 완충제 (150mM NaCl, 5mM KCl, 1.2 mM MgSO₄, 1.2 mM CaCl₂, 2.5 mM CaCl₂, 10mM HEPES; pH 7.4)로 세척하였다. 세포는 ¹⁴C-D-글루코오스의 0.2 μCi/웰(5mM 최종 농도, 10 μCi/mmol, 아메리칸 라디오라벨 케미칼스 인코포레이티드, St Louis, MO)의 첨가 전에 30분간 동일 완충제로 배양하였다. 37℃에서 2시간 배양 후, 세포를 빙냉 PBS로 세척하고 55℃에서 1M KOH로 가용화하였다. 전환된 글리코겐은 10mM 담체 글리코겐의 첨가 후에 침전되었다. 펠렛은 세척하고 물중에 재 현탁하고, 일정부분을 섬광계수기 (벡크만 LS6500)에서 카운트 하였다. 총 단백질을 평가하고 결과는 단백질의 cpm/mg로서 보고하였다.

지질생성

3T3-L1 섬유아세포에서 지질생성은 Wu 등, J Clin Invest 101:22-32, 1998에 기술된 바와 같이 수행하였다. 6-웰 플레이트에서 성장 2일후에 세포는 부형제 (0.1% DMSO) 또는 화합물들로 10일간 처리하였다. 화합물 또는 부형제를 갖는 새로운 매개체는 48시간 마다 보충하였다. 세포를 PBS로 2회 세척하고 PBS중 10% 포르말린 (시그마)에서 고정하였다. PBS에서 세척 후, 세포를 실온에서 1시간 이소프로판올 중에 새로 희석된 Oil Red O로 오염시켰다. 세포를 PBS로 5회 세척하고 올림푸스 BH2 현미경으로 육안 검사하였다. 트리글리세라이드의 정량적 축적은 유사한 실험조건하에 수행하였으며, 단 이 경우에 세포는 100mm 조직 배양 접시에 평판배양하였다. 트리글리세라이드는 메탄올:클로로포름 (2:1)혼합물로 추출하였다. 회수효율을 검사하기 위하여 ³H-콜레스테롤 올레이드 (50,000cpm/웰, 아메리칸 라디오라벨드 케마칼스 인코포레이티드, St Louis, MO)를 브라운 등, J Clion Invest 55:783-93, 1975의 프로토콜 다음에 추출 전에 추적자로서 각각의 튜브에 첨가하였다. 추출된 트리글리세라이트는 제조업자 지시에 따라 열량계 평가 (GPO-Trinder, 시그마)에 의해 측정하였다.

세포감염 및 트랜스 활성화 평가

인간 PPAR-γ2 표현 벡터는 pcDNA3.1+ 벡터(인비트로겐, 칼스바드, 캘리포니아)내로 PPAR-γ2엔코딩 영역을 삽입하여 구성하였다. PPRE-루시퍼라제 리포터 유전자는 케네트 프라인골드 박사의 친절한 선물이었다. 레닐라 루시퍼라제 cDNA를 함유하는 pRL-SV40인 조절 벡터는 프로메가(메디슨, WI)로부터 구입하였다. 약 2.7x10⁴ HEK 293 인간배아 신장 세포 (ATCC)는 35mm 조직 배양 접시에 평판배양하고 24시간 동안 10% 가열 비활성화 호스 혈청을 함유하는 이글 모디파이드 이센셜 메디움(EMEM, ATCC)에 유지시켰다. 발현, 리포터(100ng/디시) 및 대조군(2.5ng/디시) 벡터는 제조업자의 추천에 따라 LIPOFECTAMIN PLUS^TM시약(GibcoBRL)을 사용하여 세포 감염시켰다. 세포감염 24시간 후, 세포는 지시된 농도에서 부형제(매개체중 0.001% DMSO) 또는 화합물로 처리하고 24시간 배양하였다. 각각의 처리는 3회 수행하였다. 각각의 배양 접시는 세포감염 효율의 차이를 설명하기 위해 레닐라 루시페라제 활성에 의해 정상화된 파이어플라이 루시페라제 활성에 대해 평가하였다. 루시ㅣ페라제 활성은 듀얼-루시페라제 리포터 ^®평가시스템 (프로메가) 및 시리우스 루미노미터 (베르톨드 디텍션 시스템, 프로르자임, 독일)을 사용하여 측정하였다.

생체내 연구

수행된 모든 절차는 동물 복지법 및 미국 농림부에 따른 것이며 또한 칼리스 치료 기관 동물 관리 및 사용 위원회에서 승인하였다. 동물은 12-시간 밝고 어두운 사이클로 22℃ 및 50% 상대습도에서 유숙시키고 물에 자유접근으로 규칙적인 설치동물 다어어트 (Harlan Teklad, Madison, WI) ad libitum을 받았다. 수컷 C57BL/KsJ-db/db 및 C57BL/6J-ob/ob 마우스는 그들이 나이가 5주 되었을 때 잭슨 실험실(Bar Harbor, Maine)로부터 입수하였다. 7주 된 동물은 화합물 11, 로지글리타존 말레이트 (상업적으로 이용가능한 정제로부터 재결정화) 또는 부형제 (수중 0.5% 카복시메틸 셀룰로오즈 (시그마, St. Louis, MO))로 가비지에 의해 경구적으로 매일 한번 투여하였다. 혈당 측정은 다음 투여량 및 공급상태에서 투여하기 전에 원 터치 글루코오스 미터 (라이프 스캔, 인코포레이티드, 밀리타스, 캘리포니아) 및/또는 글루코오스 옥시다제 분석 (글루코오스 트린더, 시그마, St. Louis, MO)로 하였다. 체중은 연구를 통해 검사하였다. 8주 된 수컷 주커 당뇨병 지방 (ZDF-fa/fa)래트 (유전모델, 인디아나폴리스, IN)를 상술한 바와 같이 투여하기 전에 2주 동안 6.5% 지방 포루랩 다이어트 5008 (PMI 피드, 리치몬드, IN)에 유지시켰다.

통계 분석

데이터는 평균 ±표준편차 (SE)로 나타내며 또한 통계적 비교는 적절하게는 스타트 뷰우 5 소프트웨어 (SAS 인스티튜트)를 사용하여 터키/크라머 포스트 호크 시험으로 ANOVA 또는 t 시험으로 행하였다.

결과

화합물 11은 시험관내 글루코오스 흡수를 자극한다.

분화하는 3T3-L1 아디포사이트는 글루코오스 흡수를 연구하는 인슐린-민감성 세포-배양 모델을 나타내며 또한 흔히 잠재적 항당뇨병 화합물을 특성화 하는데 사용된다. TZD는 이들 세포에서 글루코오스 흡수를 증가시키지만, 인슐린의 부재 또는 존재 하에, 이런 효과의 대부분은 비-인슐린 매개 글루코오스 처분의 결과인 것으로 보인다. 도 20A에 도시한 바와 같이, 글루코오스 흡수는 화합물 11의 증가하는 농도 (0.01, 0.1, 1.0 및 10μM)에 대한 반응시 기본 농도에 걸쳐 최대 1.33 ±0.02 (평균 ±SE)로 증가하였다. 우리는 또한 3T3-L1 아디포사이트에서 인슐린-자극 글루코오스 섭취에 대한 화합물 11 및 로지글리타존의 효과를 검사하였다.

TXD의 존재 (5μM) 또는 부재하에 인슐린에 대한 반응시 글루코오스 흡수의 투여량 반응곡선에서 차이는 없다. 최대 반응의 차이는 글루코오스 흡수에 대한 상승효과가 아닌 첨가제를 나타내는 화합물 11 또는 로지글리타존 및 인슐린의 부재에서 증가량의 기본 글루코오스를 설명할 수 있다.

이들 결과는 글루코오스 흡수의 증가가 GLUT-1 트랜스포터에서 증가와 같은 비-인슐린-의존 메카니즘을 통해 매개된다는 것을 암시한다.

화합물 11의 생체내 항과혈당 활성은 타입 2 당뇨 꿀제제의 여러 가지 모델에서 검사하였다. 도 21은 8 내지 9일에 걸쳐 50mg/kg (96.2 μmol/kg)의 단일 일일 경구투여량으로 주어진 화합물 11의 효과를 요약하고 있다. 각각의 연구 끝부분에서 의약은 ob/ob 마우스 (59% 대 기준선), db/db 마우스 (32% 대 기준선) 및 ZDF 래트 (50% 대 기준선)에서 혈당 농도의 현저한 증가를 나타냈다.

처리 및 대조 동물에서 중량증가는 ZDF 래트를 제외하고는 유사하였으며, 여기서 화합물 11 처리 동물은 대조동물보다 13% 더 많은 체중을 얻었다. 후속 연구에서 화합물 11의 생체내 효력은 ob/ob 마우스에서 로지글리타존에 비교하였다 (도 22). 화합물 11 및 로지글리타존 처리 (둘다 10mg/kg/일에서; 화합물 11 및 로지글리타존에 대해 각각 19.2 및 28.0 μmol/kg/일)은 8일 처리기간에 걸쳐 유사한 항당뇨 표력을 입증하였다.

체중증가는 부형제 및 약물-처리 그룹에서 유사하였다. 두 가지 화합물은 이 모델(데이터 도시안함)에서 혈청 인슐린, 유리지방산 및 트리글리세라이드를 현저히 더 저하시킨다).

화합물 11은 로지글리카존보다 덜 지질생성이다.

TZD는 PPAR-감마용 리간드이며 또한 아디포사이트 차등 (13-145)를 유도하기 때문에, 우리는 3T3-L1 프리아디포사이트 모델을 사용하여 화합물 11의 지질생성 잠재성을 측정하려고 하였다. 이들 연구에서 3T3-섬유아세포는 덱사메타손, 인슐린 및 IBMS의 부재하에 다양한 농도 (0.1, 1. 10 μM)의 화합물 11, 로지글리타존 또는 부형제로 배양하였다. 14일 후 세포는 Oil Red O로 오염시키고, 육안평가를 위해 메틸렌 블루로 오염제거하고(도 23B), 트리글리세라이드 축적을 평가하였다. 도 23A에 도시한 바와 같이, 화합물 11 및 로지글리타존에 대한 반응시 트리글리세라이드 축적에서 투여량-의존 증가가 있었다. 화합물 11에 대한 반응시 트리글리세라이드 축적의 투여량 반응은 로지글리타존에 비하여 오른쪽으로 이동하였다. 더구나 화합물 11에 대한 반응시 축적된 최대량의 트리글리세라이드는 로지글리타존에 대한 반응시 나타난 것보다 현저히 더 적었다 (각각 대조군 보다 3.96 대 9.22배 증가; P〈 0.0001, ANOVA). 100μM 및 그 이상의 농도에서 화합물 11은 이 시스템에서 세포독성이었다 (데이터 도시안함).

화합물 11은 PPAR γ²의 부분 작용물질이다.

우리는 인간 PPAR-감마2 표현벡터와 공-세포감염된 HEK293 세포에서 PPRE-Luc 리포터 유전자를 처리할 수 있는 로지글리타존 및 화합물 11의 능력을 검사하였다. 화합물 11은 로지글리타존보다 PPAR-표현 벡터의 실질적으로 덜 강력한 활성제이었다 (도 24). 이 시스템에서 트랜스 활성화를 위한 EC₅₀은 로지글리타존의 경우 0.009 ±0.0007μM(SE) 또한 화합물 11 (n=5)의 경우 0.284 ±0.036 μM(SE)이었다. 유사한 투여량-반응 곡선은 GAL4-DNA 결합 도메인/PPAR-감마 리간드 결합 도메인의 불균일 cDNA 구조물 및 5X 상류 활성제 서열 (UAS)-루시퍼라제 구조물 (데이타 도시안함)로 세포 감염된 세포에서 리포터-유전자 평가를 사용하여 얻었다.

화합물 11은 HepG2 헤파토하이테스에서 글리코겐 합성을 증가시킨다.

글리코겐 합성을 증가시킬 수 있는 화합물 11의 능력은 HepG2 헤파토사이테스에서 검사하였다. 도 25A는 인슐린의 부재 하에 화합물 11에 대한 반응시 글리코겐내로 혼입된 ¹⁴C-글루코스의 투여량-의존 증가가 있음을 나타낸다. 이 반응은 48 내지 72시간동안 최대(기준선보다 3.1-배 증가)이었다 (도 25B). 반면, 로지글리타존은 글리코겐 합성을 증가하지 않았다 (10 μM에서 0.9배 감소, 도 25A).

별도의 실험에서, 30μM보다 더 높은 로지글리타존의 농도는 글리코겐 합성에서 단지 최소 증가를 나타냈다 (기준선보다 1.4 ±0.06, SD 배 증가). 화합물 11에 의해 유도된 글리코겐 합성에서 증가는 사이클로헥시딘과 함께 처리에 의해 봉쇄되기 때문에 새로운 단백질 합성에 의존한다 (도 25C).

토의

우리의 결과는 화합물 11이 타입 2 당뇨의 여러 가지 동물 모델에서 혈당을 감소시키는데 효과적임을 나타낸다. 글루코오스 농도를 정상화 하는 경우 ZDF 래트에 강한 항 과잉혈당증 효과를 갖는다. 이 약제는 또한 질량 기준으로 로지글리타존에 효력이 동등한 경우 ob/ob마우스에서 강력한 글루코오스-저하 활성을 갖는다. 실제적으로 화합물 11은 몰대 몰 기준으로 생체내 로지글리타존보다 46% 더 강력한 것으로 보인다. 로지글리타존의 분자량은 화합물 11보다 실질적으로 더 작다 (357 대 520g/mol). 그러나 두개의 약제는 ob/ob마우스에서 동일한 정도의 글루코오스-저하를 나타냈다. 우리의 결과는 또한 화합물 11이 로지글리타존보다 실질적으로 더 적은 지질생성을 나타낸다. 이 효과는 로지글리타존에 비하여 PPAR-감마에 대한 화합물 11의 더 낮은 친화성을 반영한다. 우리는 화합물 11로 처리된 ZDF 래트에서 체중의 작은 증가를 검출하였다. 또한 우리는 단기간 연구에서 로지글리타존과 화합물 11 처리된 동물들 사이에 체중증가의 차이를 검색할 수 없었다. 이들 데이터는 체중에 대한 이들 약물의 상이한 효과가 불명확할 수 있는 유적학적으로 비만 동물에서 연구가 수행되었기 때문에 해석하기 어렵다. 일 개월 기간까지 정상동물에서 여러 가지 연구는 임상적으로 의미 있는 체중증가를 입증하게는 실패했다 (데이터 도시안함).

TZD와 연관된 체중증가는 부분적으로 그의 지지생성 잠재성 때문이며 또한 강력한 PPAR-감마 활성제이지만 체중증가의 원인이 되지 않는 화합물을 찾는데 많은 노력이 있었음이 널리 알려져 있다. 화합물 11은 덜 지질생성 활성을 갖지만 항과혈당증 활성을 유지하기 때문에, 현재 상업적으로 입수 가능한 PPAR-감마 활성제보다 더 체중증가를 나타내는 약리학적 PPAR-감마 활성제를 개발할 수 있는 것으로 보인다. 지질생성의 기여 이외에, 부종은 PPAR-감마 활성물질과 연관된 체중증가의 중요한 인자이다. 이 독성은 분자의 PPAR-감마 활성화 효력에 직접적으로 관련되어 있는 것으로 믿어진다. 화합물 11은 PPAR-감마의 약한 활성물질이기 때문에 더 적은 부종과 연관될 수 있다. 임상연구는 인간의 체중에 대한 화합물 11의 효과를 정의하는 것을 보조할 것이다.

화합물 11에 대한 PPAR-감마의 친화성 (Ki)는 예비 경쟁 결합 평가에서 로지글리타존에 대한 친화성보다 6.5배 더 적으며(데이터는 도시안함), 또한 트랜스 활성화 효력은 로지글리타존의 것보다 30배 더 적다. 일반적으로, PPAR-감마 친화성과 글루코오스-저하 활성간의 비교적 강한 상관관계가 있다. 그러나 최근 데이터는 이 관계가 이 수용체의 모든 리간드에 대해 사실이 아닐 수 있다. 최근에 비-TZD PPAR-감마 활성제, FMOC-L-로이신은 화합물 11과 유사한 프로파일을 갖는 것으로 나타났다. FMOC-L-로이신은 PPAR-감마에 대해 약 400배 더 적은 친화성을 가지며, 단지 약하게 지질생성이지만, 강력한 생체내 항 과혈당 활성을 갖는다 (Rocchi 등, Mol Cell 8:737-47, 2001). 생체내 대사의 차이는 화합물 11과 다른 리간드에 대한 PPAR-감마 친화성 및 생체내 항당뇨병 효력 사이의 겉보기 차이의 일부를 설명할 수 있다. 레지나토 등 (J Biol Chem 273:32679-84, 1998), 무크헤르지 등 (Mol Endocrinol 14:1425-33, 2000) 및 로찌 등 (Mol Cell 8:737-47, 2001)에 의한 연구는 광활성제 SRC-1 내지 PPAR-감마의 리간드-매개 보충이 리간드의 상이한 활성을 위해 중요한 결정이 될 수 있음을 암시한다. 현재, 우리는 화합물 11이 PPAR-감마-RXR 착물에 공활성제 보충에 영향을 미치는 방식으로 추정할 수 있을 뿐이다. 화합물 11은 SRC-1 또는 PGC-1에 덜 도움이 되며 그 결과 전사 활성화 된다. 최근 연구 (Nugent등, Mol Endocrinol 15:1729-38, 2001)은 아디포사이트 내에 시험관내 글루코오스 흡수가 PPAR과 부분적으로 독립적이라고 보고하였다. 비-PPAR감마-매개 활성 또는 공활성제 보충이 화합물 11의 독특한 특성들을 설명하는지 여부는 더 많은 조사가 필요할 것이다.

현재, TZD를 포함한 PPAR-감마 리간드가 그의 항 과혈당 효과를 나타내는 메카니즘은 알려져 있지 않다. 주요한 지혜는 이들 약제의 글루코오스-저하 효과가 인슐린 민감성을 증가시키는 PPAR-감마 수용체를 통해 매개되어 있음을 제안한다. 최근 데이터는 PPAR-감마, 그의 리간드 및 인슐린 민감성 사이의 관계가 더욱 복잡함을 제안한다. 예를 들면, 헤테로성 PPAR-감마 제로 마우스는 실제로 증가된 인슐린 민감성을 입증하며 또한 합성 리간드의 인슐린 민감 효과는 전사 활성화 및 회귀 사이의 균형으로부터 생길 수 있다 (Miles등, J Clin Invest 105:287-92, 2000). 그 외에, 화합물 11 및 기타 PPAR-감마 활성물질에 대한 비-수용체 매개 작용 메카니즘은 제외될 수 없다. 당연히, 내생적 PPAR-감마를 폐기하는 것은 TZD 활성의 제거를 생기게 하지 않는다 (Nugent 등, Mol Endocrinol 15: 1729-38, 2001; Chawla 등, Nat Med 7:48-52, 2001). 우리의 데이터는 로지글리타존에 비하여, 화합물 11은 당뇨병 동물에서 글루코오스 농도를 저하시키는 추가된 메카니즘을 제공할 수 있는 간세포에서 글리코겐 합성을 증가시킨다. 최근 연구는 약간의 비-TZD PPAR-감마 작용물질이 글리코겐 합성에 수반된 유전자를 과잉 규제할 수 있다고 암시한다 (Way 등, Endocrinology 142:1269-77, 2001). 이 수용체에 대한 리간드가 친화성 스펙트럼, 전사활성 및 생체내 약동력학적 프로파일를 가질 것임이 분명해진다. 따라서 선택적 PPAR-감마 조절 활성을 갖는 화합물을 생산하는데 실질적인 임상 값이 있다. "선택적 PPAR 모듈레이터"(Mukherjee 등, Mol Endocrinol 14: 1425-33, 2000)에 대한 두문자어 SPRM은 이들 분자를 가장 잘 설명할 수 있다. SPRM은 현재 시판되는 TZD와 연관된 체중증가의 잠재적 회피를 포함하는 구체적 및 테일러 활성을 갖는 것으로 최종적으로 입증될 수 있다. 이러한 약제는 타입 2 당뇨병을 가지는 환자를 치료하는데 큰 효과가 있는 잠재성을 가진다.

도 20은 3T3-L1 세포에서 글루코오스 흡수를 나타낸다. A. 시험관내 글루코오스 흡수는 화합물 11 (검정 막대) 또는 부형제로서 0.1% DMSO (선영막대)의 농도를 증가시키면서 48시간 처리 후 구별된 3T3-L1 아디포사이트에서 측정하였다. * P ≤0.001. B. 분화된 3T3-L1 아디포사이트에서 글루코오스 흡수는 부형제 (원형), 로지글리타존 (5μM) (삼각형) 또는 화합물 11 (5μM) (정방형)의 존재 하에 인슐린의 증가하는 농도의 존재 하에 측정하였다. * P ≤0.05, # P=0.02 대 부형제.

도 21은 당뇨병 동물에서 화합물 11의 생체내 항 과혈당 활성을 나타낸다. 당뇨병 ob/ob 마우스 (A) 및 db/db 마우스 (B) 및 당뇨병 ZDF 래트 (C)는 8 또는 9일 동안 경구 위관에 의해 단일 매일 투여량의 화합물 11 (50mg/kg = 96.2 μmol)(정방형) 또는 부형제 (0.5% 카르복시메틸 셀룰로오즈)(원형)으로 처리하였다. 혈당 측정은 공급 상태에서 하였다. * P ≤ 0.05, #* P ≤0.01, * P ≤ 0.001.

도 22는 ob/ob 마우스에서 화합물 11 대 로지글리타존의 생체내 항과혈당 활성을 나타낸다. 당뇨병 ob/ob 마우스는 경구 위관에 의해 단일 일일 투여량의 화합물 11 (정방형) 및 로지글리타존 (삼각형)을 10mg/kg (각각 19.2 및 28.0 μmol/kg)으로 및 부형제 (0.5% 카르복시메틸 셀룰로오스)(원형)으로 처리하였다. 혈당 (A) 및 체중 (B)는 8일 처리 기간중에 측정하였다.

도 23은 화합물 11의 시험관내 지질생성 활성을 나타낸다. 3T3-세포는 부형제, 화합물 11 또는 로지글리스탄으로 10일간 배양하였다. 총 축적된 트리글리세라이드를 측정하였다. (A) 화합물 11 (흑색 막대) 또는 로지글리스타존 (선영막대) 또는 부형제 (백색막대)의 증가하는 농도로 처리 10일 후에 축적된 트리글리세라이드의 정량적 측정. (B) 1 μM 화합물 11, 로지글리타존 또는 부형제로 10일 처리 후에 오일 레드 O에 의한 트리글리세라이드 축적의 정성적 평가.

도 24는 화합물 11 및 로지글리타존에 의한 PPRE-Luc 리포터의 PPAR 감마-매개 트랜스 활성화의 유도를 나타낸다. HEK293 세포는 PPAR-감마 표현 벡터 및 PPARE-Luc 리포터 구성물로 잠정적으로 함께 전사하였다. 세포는 또한 트랜스팩션 효율를 조절하는데 사용되는 레닐라 루시페라제 함유 cDNA 구성물로 세포감염 된다. 감염된 세포는 증가하는 농도의 화합물 11 및 로지글리타존으로 처리하였다. 루시퍼라제 활성은 기준 농도 (약물 아님)보다 증가로 표현되며 또한 트랜스팩션 효율을 위해 수정된다. 도면은 5개 실험의 대표적인 결과를 나타낸다.

도 25는 HepG2 세포에서 시험관내 글리코겐 합성에 대한 화합물 11의 효과를 나타낸다. A. 글48시간 인슐린 부재하에 화합물 11에 의한 글루코오스로부터 글리코겐 합성의 투여량-의존 자극. 글리코겐 합성의 자극은 100%로 정의되는 기본 (부형제)의 백분율로 표현된다. B. 화합물 11-자극 글리코겐 합성에서 시간-의존 증가. C. 화합물 11 (30μM, 48시간)에 의해 유도된 사이클로헥시미드 블록 글리코겐 합성. 부형제=백색 막대, 화합물 11=흑색막대, 로지글리타존=선영막대, CHX=사이클로헥시미드, 체크막대, rosi=로지글리타존.

공-투여

본 발명에 따른 화합물은 생리학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 결합하여 약제학적 조성물, 예를 들어 다양한 충진제 및 결합제와 캡슐 형태의 동결건조 분말을 제공할 수 있다. 유사하게, 화합물은 다른 약제로 함께 투여할 수 있다. 공-투여는 두 가지 약제의 결합의 유익한 효과를 제공하기 위하여 대상에게 적어도 두 가지 약제의 투여를 의미한다. 예를 들면, 약제는 일정 시간에 걸쳐 동시에 또는 연속적으로 투여할 수 있다. 조성물중에 효과적인 투여량의 화합물은 당 업계에 통상의 기술자에 의해 선택되는 바와 같이 널리 변화하며 또한 경험적으로 측정할 수 있다. 더구나 본 발명의 화합물은 지시 및 원하는 치료효과에 따라 단독으로 또는 하나 이상의 추가제와 결합되게 사용할 수 있다. 예를 들면, 당뇨병의 경우에 비만 및 과지질혈증을 포함한 당뇨병, 인슐린 저항 및 관련 증상 또는 합병증의 경우에, 이러한 추가 약제는 인슐린 또는 인슐린 유사물, 설포닐우레아 (예를 들어 아세토헥사마이드, 클로로프로파니드, 글리메리라이드, 를리피지드, 글리부라이드, 톨부타마이드 등) 또는 기타 인슐린 분비촉진제 (예를 들어 나테글리나이드, 레파글리나이드 등), 티아졸리딘디온 (예를 들어 피오글리타존, 로지글리타존 등) 또는 기타 퍼옥시좀 확장제-활성 수용체 (PPAR)-감마 활성제, 피브레이트 (예를 들어 벤자피브레이트, 클로피브레이트, 페노피브레이트, 게피브로졸 등) 또는 기타 PPAR-알파 활성제, 비구아나이드 (예를 들어 메트포르민), 스타틴 (예를 들어 플루바스타틴, 로바그타틴, 프라바스타틴, 심바스타틴 등 ) 또는 기타 하이드록시 메틸글루타릴 (HMG) CoA 리덕타제 억제제, 알파-글루코시다제 억제제 (예를 들어 콜레스티라민, 셀레스티폴 등), 고밀도 리포단백질 (HDL)-저하제 예를 들어 아포리프로테인-A-I (apoA1), 니아신 등, 프로부콜 및 니코딘산으로 이루어진 그룹중에서 선택할 수 있다.

염증, 염증성 질환, 자가면역 질환 및 기타 이러한 사이코킨 매개 질환의 경우에, 추가약제는 비스테로이드성 항-염증성 약제(NSAID) (예를 들어 디클로페낙, 디클루니살, 이부프로펜, 나프로센 등), 코르티코스테로이드 (예를 들어 프레드니손, 메틸프레드니손 등) 또는 기타 면역 억제제 (예를 들어 메톡트레세이트, 레프루노마이드, 사이클로포그파미드, 아자티오프린 등), 질병-변형 항류마티스성 약제 (DMARD)(예를 들어 주사 금, 페니실린아민, 하이드로클로로퀴인, 설파살라진 등), TNF-알파 억제제 (예를 들어 에타너셉트, 인플리시맙 등), 기타 사이토킨 억제제 (예를 들어 가용성 사이토킨 수용체, 항 사이토킨 항체 등), 기타 면역 조절제 (예를 들어 사이클로스포린, 타크로리무스, 라파마이신 등) 및 마취제 (예를 들어 하이드로코돈, 모르핀, 코데인, 트라마돌 등)으로 이루어진 그룹으로부터 선택할 수 있다. 본 발명에 의해 고려되는 결합 치료요법은 예를 들어 단일 약제학적 제형으로 본 발명 화합물 및 추가제의 투여는 물론 별도의 약제학적 제형으로 본 발명 화합물 및 추가제의 투여를 포함한다.

상기에서 기술되고 또한 다음 특허청구범위에서 정의되는 발명에서 다양한 변형이 이루어질 수 있음을 인식할 것이다.

Claims

하기 일반식(1)로 표시되는 화합물:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p +s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온(counter ion)을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카르보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
하기 일반식(1)로 표시되는 화합물:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카르보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 포함하는 약제학적 조성물:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 포함하는 약제학적 조성물:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 약제학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 당뇨병 증상으로 고통당하는 대상에게 투여함을 포함하는 당뇨병의 치료방법.

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 당뇨병 증상으로 고통받는 대상에게 투여함을 포함하는 당뇨병의 치료방법:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 염증 또는 염증성 질환 증상으로 고통받는 대상에게 투여함을 포함하는 염증 또는 염증성 질환의 치료방법:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 염증 또는 염증성 질환 증상으로 고통받는 대상에게 투여함을 포함하는 염증 또는 염증성 질환의 치료방법:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 면역질환으로 고통받는 대상에게 투여함을 포함하는 면역질환의 치료방법:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R 및 R'는 각각 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
생리학적으로 허용되는 담체와 함께 치료학적으로 유효한 양의 하기 일반식(1)로 표시되는 화합물을 면역질환으로 고통받는 대상에게 투여함을 포함하는 면역 질환의 치료방법:

(1)

상기 식에서,

Z는 다음 그룹이며:

또는

또는

n, m, q 및 r은 독립적으로 0 내지 4의 정수를 나타내며, 단 n + m ≤4 및 q + r ≤4;

p 및 s는 독립적으로 0 내지 5의 정수를 나타내며, 단 p + s ≤5;

a, b 및 c는 존재 또는 부재할 수 있는 이중결합을 나타내며, 존재하는 경우 이중결합은 E 또는 Z 배열이며 또한 부재하는 경우 수득되는 입체중앙은 R- 또는 S-배열을 가질 수 있으며;

R은 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OR'''; -CONR₂''''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R''는 독립적으로 수소원자; 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; -CO₂Z'; -CO₂R'''; -NH₂; -NHR''', -NR₂'''; -OH; -OR'''; 할로겐원자; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

R'''는 독립적으로 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐; 또는 -(CH₂)_x-Ar을 나타내며, 여기서 x는 1 내지 6의 정수를 나타내며 또한 Ar은 아릴을 나타내며;

R''''는 독립적으로 수소원자; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알킬; 임의로 치환된 C₁-C₂₀알콕시; 임의로 치환된 C₂-C₂₀알케닐; 임의로 치환된 C₆-C₁₀아릴을 나타내며; 또는 NR₂''''는 사이클릭 부위를 나타내며;

Z'는 수소원자 또는 약제학적으로 허용되는 반대이온을 나타내며;

A, A' 및 A"는 각각 독립적으로 수소원자; C₁-C₂₀아실아미노; C₁-C₂₀아실옥시; C₁-C₂₀알카노일; C₁-C₂₀알콕시카보닐; C₁-C₂₀알콕시; C₁-C₂₀알킬아미노; C₁-C₂₀알킬카르복실아미노; 카르복실; 시아노; 할로; 또는 하이드록시를 나타내며;

B, B' 및 B"는 각각 독립적으로 C₂-C₂₀알케노일; 아로일; 아르알카노일; 니트로; 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₁-C₂₀알킬; 또는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C₂-C₂₀알케닐을 나타내며;

또는 A 및 B는 결합하여, A' 및 B'는 결합하여, 또는 A'' 및 B''는 결합하여 독립적으로 메틸렌디옥시 또는 에틸렌디옥시 그룹을 나타내며; 또한

X 및 X'는 독립적으로 >NH, >NR''', -O-, 또는 -S-를 나타낸다.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 TNF-알파, IL-1, IL-6 또는 COX-2의 활성의 억제를 필요로 하는 숙주에 투여함을 포함하는 상기 활성의 억제방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 사이토킨 또는 사이클로옥시게나제의 바람직하지 않은 작용의 억제를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 작용의 억제방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 사이토킨 또는 사이클로옥시게나제의 매개 질병의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 질병의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 인슐린 저항(insulin resistance)의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 인슐린 저항의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 과지혈증의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 과지혈증의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 관상동맥심질환의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 관상동맥심질환의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 다발성 경화증의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 다발성 경화증의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물의 유효량을 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 투여함을 포함하는 상기 암의 치료방법.
제1항에 있어서, 다음 화합물로 이루어진 그룹 중에서 선택된 화합물:

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산,

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산,

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산메틸에테르,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산메틸에스테르,

5-(4-{4-[2-(3,5-디메틸페닐)-1-(모르폴린-4-카보닐)-비닐)-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-{4-[2-(4-메틸페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-{4-[2-(3,5-디메톡시페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(4'-메톡시비페닐)-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(4'-메톡시비페닐)-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(2',4'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온, 및

5-(4-(3',5'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온.
제1항에 있어서, 다음 화합물로 이루어진 그룹 중에서 선택된 화합물의 치료학적 유효량을 그의 생리학적으로 허용되는 담체와 함께 함유하는 약제학적 조성물:

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산,

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산,

2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-3-p-톨일아크릴산메틸에테르,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일리덴메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산,

3-(3,5-디메틸페닐)-2-{4-[4-(2,4-디옥소티아졸리딘-5-일메틸)-펜옥시]-페닐}-아크릴산메틸에스테르,

5-(4-{4-[2-(3,5-디메틸페닐)-1-(모르폴린-4-카보닐)-비닐)-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-{4-[2-(4-메틸페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-{4-[2-(3,5-디메톡시페닐)-비닐]-펜옥시}-벤질)-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(4'-메톡시비페닐)-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(4'-메톡시비페닐)-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온,

5-(4-(2',4'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질리덴]-티아졸리딘-2,4-디온, 및

5-(4-(3',5'-디메톡시비페닐-3-일옥시)-벤질]-티아졸리딘-2,4-디온.
유효량의 제1항 또는 제2항의 화합물, 및 인슐린 또는 인슐린 의태. 설포닐우레아 또는 다른 인슐린 분비촉진제, 티아졸리딘디온, 섬유상 또는 다른 PPAR-알파 아고니스트, PPAR-델타 아고니스트, 비구아나이드, 스타틴 또는 다른 하이드록시메틸글루타릴(HMG) CoA 환원효소, 알파-글루코시다제 억제제, 담즙산-결합수지, apoA1, 니아신, 프로부콜, 및 니코틴산으로 이루어진 그룹중에서 선택된 약제를 함께 투여함을 포함하는 당뇨병의 치료방법.
유효량의 제1항 또는 제2항의 화합물, 및 비-스테로이드성 항소염제 (NSAID), 사이클로옥시게나제-2 억제제, 코르티코스스테로이드 또는 다른 면역억제제, 질병-변형 항류마티스치료제(DMAARD), TNF-알파 억제제, 다른 시토키닌 억제제, 다른 면역조절제 및 마취제로 이루어진 그룹 중에서 선택된 약제를 투여함을 포함하는 염증 또는 염증성 질병의 치료방법.
제1항에 있어서, Z가 다음 구조식으로 표시되는 화합물.
제3항에 있어서, Z가 다음 구조식으로 표시되는 약제학적 조성물.