KR20050085951A - 개선된 가스트린 방출 펩티드 화합물 - Google Patents

Abstract

화학식 M-N-Ｏ-P-G을 갖는 진단 이미징 또는 치료에 사용하기 위한 새롭고 개선된 화합물, 상기식에서 M은 광학 라벨 또는 금속 킬레이터(금속 방사선핵종과 합성된 형태이거나 아니거나)이고, N-O-P은 링커이고, G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이다. 본 발명의 화합물을 사용하여 환자를 이미징하고/또는 환자에게 방사선 치료 또는 광선요법을 제공하기 위한 방법이 또한 제공된다. 화합물로부터 진단 이미징제를 제조하기 위한 방법 및 키트가 더욱 제공된다. 방사선치료제를 제조하기 위한 방법 및 키트가 더욱 제공된다.

Description

개선된 가스트린 방출 펩티드 화합물{IMPROVED GASTRIN RELEASING PEPTIDE COMPOUNDS}

본 발명은 진단 이미징 약제 또는 방사선치료제로서 유용한 신규 가스트린 방출 펩티드 (GRP) 화합물에 관한 것이다. 이들 GRP 화합물은 방사선핵종 또는 생체내 광 이미징에 의해 검출가능한 라벨로 표지화 되고 라벨과 표적 펩티드 사이에서 신규 링커의 사용을 포함하며, 이는 개선된 약동학을 제공한다.

암을 검출하고 치료하기 위한 방사선약물의 사용 (예를 들어, 진단 이미징 약제, 방사선치료제)은 잘 알려져있다. 보다 최근에는, 암 검출 및/또는 치료를 위한 특정부위용 방사선약물의 발견이 유행하게 되었고 의학 전문이 그러한 화합물의 특이성, 효능 및 유용성을 더욱 이해함으로써 계속해서 발전하고 있다.

이들 더욱 새로운 방사선약물 약제는 전형적으로 진단 금속 방사선핵종으로 킬레이트(예를 들어, 다음과 복합됨)될 수 있는, 금속 킬레이터와 연결된 표적화약제로 구성되며, 진단 금속 방사선핵종은 이를 테면, 예를 들어, 테크네튬 또는 인듐, 또는 치료 금속 방사선핵종 이를 테면, 예를 들어, 루테튬, 이트륨, 또는 레늄이다. 금속 킬레이터의 역할은 방사선약물 약제이 원하는 부위로 전달될 때 (즉, 킬레이트) 금속 방사선핵종을 유지하는 것이다. 금속 방사선핵종에 강하게 결합하지 않는 금속 킬레이터는 따라서 금속 방사선핵종이 그것의 원하는 부위에 도달하지 못하기 때문에, 방사선약물 약제를 그것의 원하는 사용에 효과가 없게 만들 것이다. 그러므로, 더나아간 연구 개발은 금속 킬레이터의 발견을 이끌었다, 이를 테면 금속 방사선핵종에 대한 강한 결합 친화력과 표적 약제와 접합할수 있는 능력을 나타낸 본원에 참고문헌으로 포함된 U. S. Pat. No. 5,662,885 to Pollak et. al., 에 보고된 것과 같은 것이 있다. 그후에, 금속 킬레이터와 표적 약제 사이의 물리적 분리를 생성하는 "스페이서"를 사용하는 개념은 예를 들어 본원에 참고문헌으로 포함되는 U. S. Pat. 5,976, 495 to Pollak et. al.,에서 더욱 도입되었다.

표적 약제의 역할은, 특정 결합 부위에 대한 그것의 친화력의 덕분으로, 진단 약제를 이를 테면 금속 방사선핵종을 함유하는 방사선약물 약제를, 검출 또는 치료를 위한 원하는 부위로 지시하는 것이다. 전형적으로, 표적 약제는 주어진 수용체에 대한 특정 친화력을 나타내는 단백질, 펩티드, 또는 다른 거대분자를 포함할 수 있다. 다른 알려진 표적화약제는 단일클론 항체(MAbs), 항체단편 (Fab's 및 (Fab)2's), 및 리셉터-갈망 펩티드를 포함한다. Donald J. Buchsbaum, "방사선표지 항체로의 암 치료법; 항체 및 그들의 방사선표지의 약동학; 실험적 방사선면역치료법 및 치료 효능을 증가시키기 위한 방법, "CRC Press,BocaRaton, Chapter 10, pp. 115-140, (1995); Fischman, et al. "A Ticket to Ride: 펩티드 방사선약물, "The Journal of Nuclear Me디cine, vol. 34, No. 12, (Dec. 1993).

최근에는, 일부 암 세포가 그것의 많은 서브타입이 존재하는 가스트린 방출 펩티드 (GRP) 리셉터 (GRP-R)를 함유한다는 것을 배웠다. 특히, 몇가지 타입의 암 세포는 과-발현했거나 또는 유일하게 GRP 리셉터를 발현하였다는 것이 밝혀졌다. 이러한 이유때문에, GRP 리셉터 패밀리에 결합하는 GRP 및 GRP 유사체에 대한 많은 연구가 이루어졌다. 한가지 그러한 유사체는 봄베신 (BBN), 사람 GRP의 유사체이고 높은 특이성을 갖고 GRP와 유사한 친화력을 갖는 GRP 리셉터에 결합하는 개구리 피부로부터 분리된 14 아미노산 펩티드 (즉, 테트라데카펩티드)이다.

봄베신 및 GRP 유사체는 작용제 또는 대항제의 형태를 취할 수 있다. GRP 또는 BBN 작용제의 GRP 리셉터에 대한 결합은 이들 암 세포의 세포 분열의 속도를 증가시키고 그러한 작용제는 세포에 의해 흡수되지만, 반면 GRP 또는 BBN 대항제의 결합은 일반적으로 세포에 의한 흡수 또는 세포 분열의 속도 증가 중의 하나를 초래하지 않는다. 그러한 대항제는 경쟁적으로 GRP 리셉터에 결합하는 내생적 GRP을 억제하고 암 세포 증식의 속도를 줄이도록 설계된다.

예를 들어, Hoffen, K. ; 펩티드s in Oncology II, 소마토스타틴 유사체 및 봄베신 대항제 (1993), pp. 87-112를 참조. 이러한 이유때문에, 매우 많은 작업이 이루어졌고, 대항제인 BBN 또는 GRP 유사체를 개발하려고 추구하고 있다. 예를 들어, Davis etal., 봄베신/GRP 리셉터 대항제, 펩티드의 대사 안정성 및 종양 억제 , vol. 13, pp. 401-407,1992.

암의 진단 또는 치료 제로 사용하기 위한 효과적인 화합물을 설계하는데 있어서, 적절한 생체내 표적화 및 약동학적 성질을 가지는 것이 중요하다. 예를 들어, 방사선약물에 있어서, 방사선표지 펩티드가 암 세포에 의한 (예를 들어, GRP 리셉터를 통해서) 높은 특정한 섭취를 가지는 것이 바람직하다. 게다가, 일단 방사선핵종이 암 부위에서 집중하면, 그것은 원하는 양의 시간동안 매우 집중된 방사선 용량을 그 부위에 전달하기 위해 거기에 남아있는 것이 바람직하다.

더욱이, 정상 조직으로부터 능률적으로 제거되는 방사선표지 펩티드를 개발하는 것이 또한 방사선약물 약제를 위해 중요한 인자이다.

금속성 방사선핵종 (킬레이트 접합을 통해)으로 라벨링된 생체분자 (예를 들어, MAb, Fab 또는 펩티드)가, 동물 이를 테면 사람에게 투여될 때, 큰 백분율의 금속성 방사선핵종(일부 화학적 형태로)은 신장 또는 간 실질 중의 하나에 "포획"될 수 있다(즉, 소변 또는 쓸개즙 안으로 배설되지 않는다). Duncan et al. ;인듐-111- 디에틸렌트리아민펜타아세트산-옥트레오티드가 생체내에서 췌장, 종양 세포, 신장, 및 간세포 용해소체로 송달된다, Cancer Research 57, pp. 659-671, (Feb. 15,1997). 더 작은 방사선표지 생체분자 (즉, 펩티드 또는 Fab)에 대해서, 활성의 청소의 주요 경로는 높은 수준의 방사능 금속을 보유할 수 있는 (즉, 보통은 > 주사된 용량의 10-15%) 신장을 통해서이다. 신장 또는 간에서 금속 방사선핵종의 보유는 분명히 바람직하지 않다. 거꾸로, 만일 방사선치료를 위해 더 오랜 진단 이미징 또는 높은 종양 섭취가 필요하다면, 신장에 의한 너무 빠른 혈류로부터 방사선약물의 청소는 또한 바람직하지 않다.

이를 테면 본원에 참고문헌으로 포함된 Hoffinan, et. al,의 U. S. Pat. 6,200, 546 및 US 2002/0054855에서와 같은 이어지는 작업은, X는 금속을 합성할 수 있는 기이고, Y는 스페이서 기에서의 공유 결합이고 B는 봄베신 작용제 결합 부분인 일반식 X-Y-B을 갖는 화합물을 형성함으로써, 이 문제를 극복하기 위해 시도되었다. 그러한 화합물은 GRP 리셉터에 대한 높은 결합 친화력을 갖는 것으로 보고되었고, 방사능은 연장된 기간동안 세포 내부에 보유되었다. 게다가, 생체내 정상 마우스에서의 연구는 신장에서 방사능 금속의 정체가 당업계에 알려진 것보다 더 낮았고, 방사능의 대다수는 소변으로 배설된다는 것을 보여주었다.

개선된 약동학 및 개선된 신장 배설 (즉, 신장에서 방사능 금속의 더 낮은 체류)을 갖는, 새롭고 개선된 방사선약물 및 다른 진단 화합물은 이제 진단 이미징 및 치료 용도를 위해 발견되었다. 진단 이미징을 위해서, 신속한 신장 배설 및 낮은 보유된 수준의 방사능은 개선된 이미지를 위해 결정적으로 중요하다. 방사선치료 용도를 위하여, 낮은 신장 체류와 함께 더높은 종양 섭취 및 더 우수한 종양 표적화를 허용하기 위한 더느린 혈액 청소가 결정적이다.

도 1A은 실시예 I에서 기술된 바와 같이, A (메틸-(3β, 5β)-3-아미노콜란-24-에이트) 및 B((3, 5)-3-아미노콜란-24-산)으로부터, 중간체 C ((3β, 5β)-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노콜란-24-산)의 합성을 위한 일련의 화학 반응의 도식적 그림이다.

도 1B는 실시예 I에서 기술된 바와 같이, [(3β,5β )-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]콜란-24-일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴- 글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L62)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 2A는 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N-[4-[[[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L70)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 2B은 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N [4- [2- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로 도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 에톡시]벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐- L-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L73), N-[3-[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 벤조일]-1- 글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L115), 및 N [4- [[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 페닐아세틸] -1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1- 히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L116),의 합성을 위한 순차적인 반응의 일반적인 도식적 그림이다.

도 2C 는 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N [4- [2- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]에톡시] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐- L-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L73)의 합성을 위해, 도 2B의 합성 반응에 사용된 링커의 화학 구조이다.

도 2D 는 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N- [3- [[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10- 테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L115)의 합성을 위한, 도 2B 의 합성 반응에 사용된 링커의 화학 구조이다.

도 2E는 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N [4- [[[[ 4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 페닐아세틸] -글루타밀-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L116)의 합성을 위한, 도 2B의 합성 반응에 사용된 링커의 화학 구조이다.

도 2F 는 실시예 II에서 기술된 바와 같이, N [[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 글리실-4-피페리딘카르보닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1- 히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L74)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 3A는 실시예 III에서 기술된 바와 같이, 중간체 (3β, 5β)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸]아미노-12-옥소콜란-24-산 (C),의 합성을 위한 일련의 화학 반응의 도식적 그림이다.

도 3B는 실시예 III에서 기술된 바와 같이, [(3β,5β )-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노]-12, 24-디옥소콜란-24-일] -1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L67)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 3C는 실시예 III에서 기술된 바와 같이, (3β,5β )-3-아미노-12-옥소콜란- 24-산 (B)의 화학 구조이다.

도 3D는 실시예 III에서 기술된 바와 같이, (3β,5β )-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸] 아미노-12-옥소콜란-24-산 (C)의 화학 구조이다.

도 3E 는 실시예 III에서 기술된 바와 같이, N-[(3β,5β )-3-[[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] -12, 24- 디옥소콜란-24-일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실- L-메티오닌아미드 (L67)의 화학 구조이다.

도 4A는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, 중간체(3 (3, 5 (3, 12a)-3- [[ (9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸]아미노-12-히드록시콜란-24-산(3a) 및 (3β,5β,7α,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸] 아미노-7,12-디히드록시콜란-24-산 (3b)를 얻기 위한 반응의 순서의 도식적 그림이다.

도 4B는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, [(3β, 5β, 12α)-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10- 테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노]-12-히드록시-24-옥소콜란-24-일]-1- 글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L63)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 4C는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, N- [(3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[[[ [4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노]-7,12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일]-1-글루타미닐- L-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L64)의 합성을 위한 순차적인 반응의 도식적 그림이다.

도 4D는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12- 디히드록시콜란-24-산 (2b)의 화학 구조이다.

도 4E는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, (3β, 5β, 12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸]아미노-12-히드록시콜란-24-산 (3a)의 화학 구조이다.

도 4F는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, (3 ,5 ,7α,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸] 아미노-7,12-디히드록시콜란-24-산 (3b)의 화학 구조이다.

도 4G은 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]-12- 히드록시-24-옥소콜란-24-일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L63)의 화학 구조이다.

도 4H는 실시예 IV에서 기술된 바와 같이, N-[(3β,5β, 7α,12α)-3- [[[[ [4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노]-7, 12- 디히드록시-24-옥소콜란-24-일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L64)의 화학 구조이다.

도 5A는 실시예 V에서 기술한 바와 같이, 4-[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L71) ; 및 트랜스-4-[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)- 1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 시클로헥실카르보닐-1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L72) 의 합성을 위한 순차적인 반응의 일반적인 도식적 그림이고, 이때 링커는 각각 도 5B 및 5C로부터이다.

도 5B는 도 5A에서 나타낸 바와 같고 실시예 V에서 기술된 바와 같은 화합물 L71로 사용된 링커의 화학 구조이다.

도 5C는 도 5A에서 나타낸 바와 같고 실시예 V에서 기술한 바와 같은 화합물 L72에서 사용된 링커의 화학 구조이다.

도 5D는 실시예 V에서 기술된 바와 같이, 봄베신 [7-14] (B)으로 작용화된 Rink 아미드 수지의 화학 구조이다.

도 5E는 실시예 V에서 기술한 바와 같은, 트랜스-4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 메틸] 시클로헥산카르복실산 (D)화학 구조의 화학구조이다.

도 6A는 실시예 VI에서 기술한 바와 같은, 중간체 링커2- [[[9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 메틸] 벤조산 (E)의 합성을 위한 반응의 순서의 도식적 그림이다.

도 6B은 실시예 VI에서 기술된 바와 같은, 중간체 링커 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 메틸] -3- 니트로벤조산 (H)의 합성을 위한 반응의 순서의 도식적 그림이다.

도 6C는 실시예 VI에서 기술된 바와 같이, N [2-[[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L75)의 합성의 도식적 그림이다.

도 6D는 실시예 VI에서 기술된 바와 같이, N [4-[[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸]-3-니트로벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 (L76)의 합성의 도식적 그림이다.

도 7A는 실시예 VII에서 기술된 바와 같이, 중간체 링커[4- [[[9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 메틸] 페녹시] 아세트산 (E)의 합성을 위한 도식적 그림이다.

도 7B는 실시예 VII에서 기술된 바와 같이, N-[[ 4-[[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 페녹시] 아세틸]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L124)의 합성의 도식적 그림이다.

도 7C는 실시예 VII에서 기술된 바와 같이, N-[[4-[[[4,7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸] 페녹시] 아세틸]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실- L-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L124)의 화학 구조이다.

도 8A은 실시예 VIII에서 기술된 바와 같이, 중간체 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3- 메톡시벤조산 (E)의 합성을 위한 반응의 순서의 도식적 그림이다.

도 8B은 실시예 VIII에서 기술된 바와 같이, N [4-[[[[ 4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸]-3- 메톡시벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드, (L125)의 합성의 도식적 그림이다.

도 8C는 실시예 VIII에서 기술된 바와 같은, [4- [[[[ 4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 메틸]-3- 메톡시벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드, (L125)의 화학 구조이다.

도 9A는 실시예 IX에서 기술된 바와 같이, 3-[[[(9-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸] 아미노벤조산, (B)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 9B는 실시예 IX에서 기술된 바와 같이, 6- [(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸] 아미노나프토산 (C)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 9C는 실시예 IX에서 기술된 바와 같이, 4-[[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸] 메틸아미노] 벤조산., (D)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 9D는 실시예 IX에서 기술된 바와 같이, N-[4-[[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 페닐아세틸]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드,(L146) ;N-[3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)- 1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 벤조일]-1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L233); N-[6-[[[[ [4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 나프토일] -1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L234), 및 N-[4-[[[[[4, 7, 10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 메틸아미노] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L235)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 10A는 실시예 X에서 기술된 바와 같이, 7-[[비스(1,1-디메틸에톡시) 포스피닐]메틸]-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데칸-1, 4,10- 트리아세트산 4, 10-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 H의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 10B는 실시예 X에서 기술된 바와 같이, N-[4-[[[[[4,10-비스(카르복시메틸)-7-(디히드록시포스피닐)메틸-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L237)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 11A는 실시예 XI에서 기술된 바와 같이, N,N-디메틸글리실-1-세리닐-[S-[(아세틸아미노) 메틸]]-1-시스테이닐-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 (L238)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 11B는 실시예 XI에서 기술된 바와 같이, N,N-디메틸글리실-1-세리닐-[S-[(아세틸아미노) 메틸] ]-1-시스테이닐-글리실-(3β, 5β, 7a,12a)-3-아미노-7, 12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일-1-글루타미닐-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L239)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 12A는 실시예 XII에서 기술된 바와 같이, 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸]아미노-3-메톡시벤조산 (A)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 12B는 실시예 XII에서 기술된 바와 같이, 4- [[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸] 아미노-3-클로로벤조산, (D)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 12C는 실시예 XII에서 기술된 바와 같이, 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노] 아세틸] 아미노-3-메틸벤조산 (E)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 12D는 실시예 XII에서 기술된 바와 같이, 화학 구조 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 글리실] 아미노] -3- 메톡시벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 (L240)의 화학 구조이다.

도 12E는 실시예 XII에서 기술된 바와 같은, 화합물 N-[4-[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,1O테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 글리실] 아미노] 3- 클로로벤조일]L-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드, (L241)의 화학 구조이다.

도 12F는 실시예 XII에서 기술된 바와 같은, N-[4- [[[[ 4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,1O테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]글리실] 아미노] 3- 메틸벤조일]L-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-류실-1- 메티오닌아미드 (L242)의 화학 구조이다.

도 13A는 실시예 XIII에서 기술된 바와 같이, 4- [N,N'-비스 [2- [(9-H-플루오렌-9-일메톡시) 카르보닐] 아미노에틸] 아미노]-4-옥소부탄산, (D)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 13B는 실시예 XIII에서 기술된 바와 같이, N-[4-[[4-[비스[2-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 에틸]아미노-1, 4-디옥소부틸] 아미노] 벤조일] -1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L244)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 13C는 실시예 XIII에서 기술된 바와 같은, 화합물 L244의 화학 구조이다.

도 14A 및 도 14B는 실시예 XLIII에서 기술된 결합 및 경쟁 곡선의 도식적 그림이다.

도 15A는 실시예 LV에서 기술된 방사선치료 실험의 결과의 도식적 그림이다.

도 15B는 실시예 LV에서 기술된 다른 방사선치료 실험의 결과의 도식적 그림이다.

도 16는 N-[4-[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,1O테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 글리실] 아미노]-1-리시닐-(3,6,9)-트리옥사운데칸-1,11-디카르복실산-3,7-디데옥시-3-아미노콜산)-1-아르기닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L65)의 화학 구조이다.

도 17는 [2-[S-[[[[12α-히드록시-17α-(1-메틸-3-카르복시프로필) 에티오콜란-3β-카바모일메톡시에톡시에톡시아세틸]-아미노-6- [4,7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]헥사노일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 (L66)의 화학 구조이다.

도 18A는 [4- [[[[ [4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 벤조일]- L-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L70)의 화학 구조이다.

도 18B는 화학 구조 N-[4-[[[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] -3- 카르복시프로피오닐] 아미노] 아세틸] 아미노] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L114)이다.

도 18C는 화학 구조 N-[4-[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)- 1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일]-2-히드록시-3-프로폭시] 벤조일] -1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드(L144)이다.

도 18D는 화학 구조N-[(3β,5β,7α,12α)-3-[[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 에톡시에톡시] 아세틸] 아미노] -7, 12-디히드록시콜란-24-일]-1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L69)이다.

도 18E 는 N-[4-[[[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] 페닐아세틸]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴- 글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L146)의 화학 구조이다.

도 19는 실시예 LVI에서 기술된 바와 같이 화합물 L64 및 L70을 제조하는데 사용될 수 있는 중간체의 화학 구조를 개시한다.

도 20는 실시예 LVI에서 기술된 바와 같이 단편 커플링을 사용하는 L64의 제조의 도식적 그림이다.

도 21는 (1R)-1-(비스 {2-[비스(카르복시메틸) 아미노] 에틸} 아미노)프로판-3-카르복실산-1-카르복실-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1- 류실-1-메티오닌아미드 (L201)의 제조의 도식적 그림이다.

도 22A는 L202를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 22B는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]-4-히드라지노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L202)의 제조의 도식적 그림이다.

도 23A는 L203를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 23B는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L203)의 제조의 도식적 그림이다.

도 24는 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-4-아미노벤조일-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L204)의 제조의 도식적 그림이다.

도 25는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-4-아미노벤조일-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실- L-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L205)의 제조의 도식적 그림이다.

도 26A는 L206를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 26B는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]- [4'-아미노-2'-메틸 비페닐-4-카르복실]-1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L206)의 제조의 도식적 그림이다.

도 27A는 L207를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 27B는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] - [3'-아미노-비페닐-3-카르복실]-1-글루타미닐-1-트립토필- L-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L207)의 제조의 도식적 그림이다.

도 28는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] - [1,2-디아미노에틸-테레프탈릴]-1-글루타미닐-1-트립토필- L-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L208)의 제조의 도식적 그림이다.

도 29A는 L209를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 29B는 L209의 제조의 도식적 그림이다.

도 30A는 L210를 제조하는데 사용된 화학 중간체의 화학 구조의 도식적 그림이다.

도 30B는 L210의 화학 구조이다.

도 31는 [(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드L211의 화학 구조이다.

도 32는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타밀-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 L212의 화학 구조이다.

도 33는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌 카복실레이트 L213의 화학 구조이다.

도 34는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-L 히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L214의 화학 구조이다.

도 35는 N- [(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-아르기닐-1-류실-글리실-1-아스파르기닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L215의 화학 구조이다.

도 36는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-아르기닐-1-티로시닐-글리실-1-아스파르기닐-1-글루타미닐-1- 트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L216의 화학 구조이다.

도 37는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-1-lysyl-1-티로시닐-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐- L-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L217의 화학 구조이다.

도 38는 L218의 화학 구조이다.

도 39는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-아미노펜틸, L219의 화학 구조이다.

도 40는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-세리닐-1-발릴-D-알라닐-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드, L220의 화학 구조이다.

도 41는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-류신아미드, L221의 화학 구조이다.

도 42는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-D-티로시닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-베타알라닐-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1-노르류신아미드, L222의 화학 구조이다.

도 43는 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-베타알라닐-1- 히스티딜-1-페닐알라닐-1-노르류신아미드, L223의 화학 구조이다.

도 44는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-글리실-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1- 류신아미드, L224의 화학 구조이다.

도 45는 [(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-류실-1-트립토필-1-알라닐-1-발리닐-글리실-1-세리닐-1-페닐알라닐-1- 메티오닌아미드, L225의 화학 구조이다.

도 46는 N-[(3β,5β,12α)-3- [[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-1-히스티딜-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드, L226의 화학 구조이다.

도 47는 [(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4- 아미노벤조일-1-류실-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-세리닐-1-페닐알라닐-1- 메티오닌아미드 L227의 화학 구조이다.

도 48는 N-[(3β,5β,12α)-3-[[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4- 아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-페닐알라닐- L-메티오닌아미드, L228의 화학 구조이다.

도 49는 실시예 LVII에서 기술된 바와 같이 (3β,5β,7α,12α)-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노-7,12-디히드록시콜란-24-산 (B)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 50는 실시예 LVII에서 기술된 바와 같이, N-[3β,5β,7α,12α)-3-[[[2-[2-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 에톡시] 에톡시] 아세틸]아미노-7, 12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일] -1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, (L69)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

도 51는 실시예 LVIII에서 기술된 바와 같이, N- [4- [2-히드록시-3- [4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 프로폭시] 벤조일]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실- L-메티오닌아미드 (L144)의 합성을 위한 반응의 도식적 그림이다.

발명의 상세한 설명

다음의 기술에서, 본 발명의 다양한 관점이 더욱 상세히 설명될 것이다. 설명의 목적을 위해서, 특정 구성과 세부사항이 본 발명의 철저한 이해를 제공하기 위해 설명된다. 그러나, 본 발명이 특정 세부사항없이 실행될 수 있다는 것은 또한 당업자들에게 명백할 것이다. 더욱이, 본 발명을 애매하지 않게 하기 위해 잘 알려진 특징들이 빠지거나 또는 간소화될 수 있다.

본 발명의 한가지 구체예에서, 진단 이미징 또는 방사선치료에 사용하기 위한 새롭고 개선된 화합물이 제공된다. 화합물은 링커 또는 스페이서 기에 의해 GRP 리셉터 표적화 펩티드에 부착된 의학적으로 유용한 금속 이온 또는 방사선핵종 (금속 킬레이터)을 합성할 수 있는 광학 라벨 또는 화학 부분을 포함한다.

일반적으로, 본 발명의 화합물은 하기 화학식:

M-N-Ｏ-P-G 을 가질 수 있고

상기식에서 M은 금속 킬레이터 (금속 방사선핵종 또는 아닌 것과 합성된 형태로), 또는 광학 라벨이고, N-O-P는 링커이고, G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이다. 금속 킬레이터, 광학 라벨, 링커, 및 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 각각은 뒤따르는 논의에서 기술된다.

본 발명의 또다른 구체예에서, 광학 라벨 또는 금속 킬레이터를 GRP 리셉터 표적화 펩티드에 연결시킬 수 있는 새롭고 개선된 링커 또는 스페이서 기가 제공된다. 일반적으로, 본 발명의 링커는 하기 식을 가질 수 있다:

N-O-P

상기식에서 N, O 및 P의 각각은 명세서 전반에 걸쳐 정의된다.

본원에서 정의된 기준을 만족시키는 화합물은 당업계에 알려진 다른 GRP 리셉터 표적화 펩티드 접합에 비교할때 개선된 약동학 성질을 가지는 것으로 밝혀졌다. 예를 들면, 본 발명의 링커를 함유하는 화합물은 혈류에서 더 오래 유지되었고, 따라서 이전에 알려진 화합물보다 더 킨 반감기를 가졌다. 더 긴 반감기는 그것이 암 세포 및 종양이 더 큰 양의 방사선표지 펩티드를 수용하는, 진단 이미징에 유용한, 특히 치료 용도에 유용한 더 우수한 종양 표적화를 허용하기 때문에, 의학적으로 이득이되었다.

1A. 금속 킬레이터

용어 "금속 킬레이터"는 금속 원자와의 착체를 형성하는 분자를 말하며, 이때 상기 착체는 생리학적 조건하에서 안정하다. 즉, 금속은 생체내 킬레이터 백본에 합성된 채로 남아있을 것이다. 보다 구체적으로, 금속 킬레이터는 방사선핵종 금속에 합성되어 생리학적 조건하에서 안정하고 또한 링커 N-O-P와의 접합을 위한 적어도 하나의 반응성 관능기를 가지는 금속 착체를 형성하는 분자이다. 금속 킬레이터 M은 의학적으로 유용한 금속 이온 또는 방사선핵종을 합성하기 위해 당업계에 알려진 금속 킬레이터중 어떠한 것이 될 수 있다. 금속 킬레이터는 또는 금속 방사선핵종과 합성 또는 합성되지 않을 수 있다. 더욱이, 금속 킬레이터는 선택적인 스페이서 이를 테면, 예를 들어, 금속과 합성되지 않지만, 금속 킬레이터와 링커 사이에 물리적 분리를 생성하는 단일 아미노산(예를 들어, Gly)을 포함할 수 있다.

본 발명의 금속 킬레이터는, 예를 들어, 선형, 거대고리, 터피리딘, 및 N₃S, N₂S₂, 또는 N₄ 킬레이터 (또한, U. S. 5,367, 080, U. S. 5,364, 613, U. S. 5,021, 556, U. S. 5,075, 099, U. S. 5,886, 142 참조, 이것의 개시는 본원에서 그들 전문이 참고문헌으로 포함된다), 및 이것으로 제한되지는 않지만, HYNIC, DTPA, EDTA, DOTA, TETA, 및 비스아미노 비스티올 (BAT) 킬레이터 (또한 U. S. 5,720, 934 참조)를 포함하는 당업계에 공지된 다른 킬레이터를 포함할 수 있다. 예를 들어, N4 킬레이터는 미국 특허 Nos. 6,143, 274; 6,093,382 ; 5,608, 110; 5,665, 329; 5,656, 254; 및 5,688, 487에서 기술되며, 이것의 개시는 본원에서 그들 전문이 참고문헌으로 포함된다. 특정 N3S 킬레이터는 PCT/CA94/00395, PCT/CA94/00479, PCT/CA95/00249 및 미국 특허 Nos. 5,662, 885; 5,976, 495; 및 5,780, 006에 기술되고, 이것의 개시는 본원에서 그들 전문이 참고문헌으로 포함된다. 킬레이터는 또한 킬레이팅 리간드 메르캅토-아세틸-글리실-글리실-글리신 (MAG3)의 유도체를 포함할 수 있고, 이것은 N3S, 및 N2S2 시스템 이를 테면 MAMA (모노아미드모노아민디티올s), DADS(N2S 디아민디티올), CODADS 등을 함유한다. 이들 리간드 시스템 및 다양한 다른것들이 Liu 및 Edwards, Chem Rev. 1999,99, 2235-2268 및 거기에서의 참고문헌에서 기술되고, 이것의 개시는 본원에서 그들 전문이 참고문헌으로 포함된다.

금속 킬레이터는 또한 네자리 배열로 금속에 증여되지 않은 리간드 원자를 함유하는 착체를 포함할 수 있다. 이들은 테크네튬 및 레늄 디옥심의 보론산 부가생성물, 이를 테면 미국 특허 Nos. 5,183,653; 5,387, 409; 및 5,118, 797에서 개시된 것들을 포함하고, 이것의 개시는 그들 전문이 본원에서 참고문헌에 의해 포함된다.

바람직한 킬레이터의 예는 이것으로 한정되지는 않지만, 디에틸렌트리아민 펜타아세트산 (DTPA),1, 4,7,10-테트라아자시클로테트라데칸-1, 4,7, 10-테트라아세트산 (DOTA), 1-치환 1,4, 7,- 트리카르복시메틸 1,4, 7, 10-테트라아자시클로도데칸 트리아세트산 (D03A), 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA),4-카르보닐메틸-10-포스포노메틸-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데칸-1, 7-디아세트산(Cm4pmlOd2a) ; 및 1,4, 8,11- 테트라아자시클로테트라데칸-1,4, 8,11-테트라아세트산 (TETA)을 포함한다. 추가의 킬레이팅 리간드는 디벤조-DTPA, 페닐-DTPA,디페닐-DTPA, 벤질-DTPA, 및 디벤질-DTPA; 비스-2(히드록시벤질)-에틸렌-디아민디아세트산 (HBED) 및 그것의 유도체를 포함하여, 5-C1-EHPG, 5-Br-EHPG, 5-Me-EHPG, 5-t-Bu-EHPG, 및 5-sec-Bu-EHPG; 벤조디에틸렌트리아민 펜타아세트산 (벤조-DTPA) 및 그것의 유도체를 포함하여, 에틸렌비스-(2-히드록시-페닐글리신) (EHPG), 및 그것의 유도체, 이고; 거대고리 화합물의 부류는 적어도 3 탄소 원자, 보다 바람직하게는 적어도 6, 및 적어도 two 헤테로원자(O 및/또는 N)를 함유하고, 이 거대고리 화합물 은 하나의 고리, 또는 헤테로 고리 원소, 예를 들어, 벤조-DOTA, 디벤조-DOTA, 및 벤조-NOTA에 함께 결합된 둘 또는 세 고리로 구성될 수 있고, 이때 NOTA는 1,4, 7-트리아자시클로노난 N,N', N"-트리아세트산, 벤조-TETA, 벤조-DOTMA이고, 이때 DOTMA는 1,4, 7,10-테트라아자시클로테트라데칸-1, 4,7, 10-테트라 (메틸 테트라아세트산), 및 벤조-TETMA이고, 이때 TETMA는 1,4, 8,11-테트라아자시클로테트라데칸-1, 4,8,11-(메틸 테트라아세트산)이고; 1,3-프로필렌디아민테트라아세트산 (PDTA) 및 트리에틸렌테트라아민헥사아세트산 (TTHA)의 유도체; 1,5, 10-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)-트리카테콜레이트 (LICAM) 및 1, 3,5-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)아미노메틸벤젠 (MECAM)의 유도체이다. 본 발명에 의해 예상되는 대표적인 킬레이터 및 킬레이팅기의 예는 WO 98/18496, WO 86/06605, WO 91/03200, WO 95/28179, WO96/23526, WO 97/36619,PCT/US98/01473,PCT/US98/20182, 및 U. S. 4,899, 755, U. S. 5,474, 756, U. S. 5,846, 519 및 U. S. 6,143, 274에 기술되고, 이것의 각각은 그것의 전문이 본원에 참고문헌으로 포함된다.

특히 바람직한 금속킬레이터는 아래에 설명된 화학식 1, 2 및 3의 것들을 (¹¹¹In 및 방사능 란탄계열원소, 이를 테면, 예를 들어 ^l77Lu, ⁹⁰Y,^l53Sm, 및 ¹⁶⁶Ho에 대한) 및 화학식 4,5 및 6의 것들(방사능 ^99mTc, ¹⁸⁶Re, 및 ¹⁸⁸Re에 대한)을 포함한다. 이들 및 다른 금속 킬레이팅기는 미국 특허 Nos. 6,093,382 및 5,608, 110에서 기술되고, 이것은 그들의 전문이 본원에서 참고문헌에 의해 포함된다. 추가로, 화학식 3의 킬레이팅 기는 예를 들어, 미국 특허 No. 6,143, 274에서 기술되고; 화학식 5의 킬레이팅 기는, 예를 들어, 미국 특허 Nos. 5,627, 286 및 6,093, 382에서 기술되고, 화학식 6의 킬레이팅 기는 예를 들어, 미국 특허 Nos. 5,662, 885; 5,780, 006; 및 5,976, 495에서 기술되고, 이들 모두는 참고문헌에 의해 포함된다. 화학식 6의 특정 금속 킬레이터는 N,N-디메틸Gly-Ser-Cys ;N,N-디메틸Gly- Thr-Cys;N,N-디에틸Gly-Ser-Cys ;NN-디벤질Gly-Ser-Cys ; 및 그것의 다른 변종을 포함한다. 예를 들어, 금속 방사선핵종과 실제로 합성하지 않는 스페이서는 이를 테면 여분의 단일 아미노산 Gly는, 이들 금속 킬레이터에 부착될 수 있다(예를 들어, N,N- 디메틸Gly-Ser-Cys-Gly; N,N-디메틸Gly-Thr-Cys-Gly ; N,N-디에틸Gly-Ser-Cys-Gly ; N,N-디벤질Gly-Ser-Cys-Gly). 다른 유용한 금속 킬레이터는 이를 테면 이들 모두가 또한 참고문헌에 의해 포함되는 U. S. Pat. No. 6,334, 996에서 개시된다(예를 들어, 디메틸gly-1-t-부틸gly-1- Cys-Gly;디메틸gly-D-t-부틸gly-1-Cys-Gly ; 디메틸gly-1-t-부틸gly-1-Cys, 등)

더욱이, 황 보호기 이를 테면 Acm (아세트아미도메틸), 트리틸 또는 다른 공지된 알킬, 아릴, 아실, 알카노일, 아릴로일, 메르캅토아실 및 오가노티올 기는 이들 금속 킬레이터의 시스테인 아미노산에 부착될 수 있다.

추가적으로, 다른 유용한 금속 킬레이터는 다음을 포함한다:

상기 화학식 1 및 2에서, R은 알킬, 바람직하게는 메틸이다. 상기 화학식 5a 및 5b에서, X는 CH₂ 또는 O 중의 하나이고; Y는 C₁-C₁₀ 분기 또는 미분기 알킬 ; 아릴, 아릴옥시, 아릴아미노, 아릴아미노아실 ; 아릴알킬- 이때 아릴 기에 부착된 알킬 기 또는 기는 C_l-C_l0 분기 또는 미분기 알킬 기, C₁-C₁₀ 분기 또는 미분기 히드록시 또는 폴리히드록시알킬 기 또는 폴리알콕시알킬 또는 폴리히드록시폴리알콕시알킬 기이고 ; J는 선택적이지만, 만일 존재한다면 C (=O)-, OC (=O)-, SO₂-, NC(=O)-, NC (=S)-, N (Y), NC (=NCH3)-, NC (=NH)-,N=N-, 합성 또는 자연적으로 발생하는 아미노산으로부터 유도된 호모폴리아미드 또는 헤테로폴리아민이고; 모두 n은 1-IUU이다. 이들 구조의 다른 변종은 예를 들어, 미국 특허 No. 6,093, 382에서 기술된다. 화학식 6에서, 기 S-NHCOCH₃ 는 SH 또는 S-Z로 치환될 수 있고 이때 Z는 공지된 황 보호기중 어떤것 이를 테면 위에서 기술된 것들이다. 화학식 7는 금속 킬레이터로서 유용한 t-부틸 화합물의 한가지 구체예를 예증한다. 앞서언급한 특허, 응용 및 참고문헌의 각각의 개시는, 그들의 전문이 참고문헌에 의해 본원에 포함된다.

바람직한 구체예에 있어서, 금속 킬레이터는 환식 또는 비환식폴리아미노카르복실산 이를 테면 DOTA (1,4, 7, 10-테트라아자시클로도데칸-1, 4,7, 10- 테트라아세트산), DTPA(디에틸렌트리아민펜타아세트산), DTPA-비스메틸아미드, DTPA-비스모르폴린아미드,Cm4pmlOd2a (4-카르보닐메틸-10-포스포노메틸-1, 4,7, 10- 테트라아자시클로도데칸-1, 7-디아세트산), D03AN [[ 4, 7,1 0-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10- 테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸, HP-D03A, D03A-모노아미드 및 그것의 유도체를 포함한다.

신티그램촬영 또는 방사선치료를 위한 바람직한 금속 방사선핵종은 ^{99 m}Tc, ⁵¹Cr, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁴⁷Sc, ⁵¹Cr, ¹⁶⁷Tm, ¹⁴¹Ce, ¹¹¹In, ¹⁶⁸Yb, ¹⁷⁵Yb, ¹⁴⁰La, ⁹⁰Y, ⁸⁸Y, ¹⁵³Sm, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁵Dy, ¹⁶⁶Dy, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁹⁷Ru, ¹⁰³Ru, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ²⁰³Pb, ²¹¹Bi, ²¹²Bi, ²¹³Bi, ²¹⁴Bi, ¹⁰⁵Rh, ¹⁰⁹Pd, ^117mSn, ¹⁴⁹Pm, ¹⁶¹Tb, ¹⁷⁷Lu, ¹⁹⁸Au 및 ¹⁹⁹Au 및 그것의 산화물 또는 질화물을 포함한다. 금속의 선택은 원하는 치료 또는 진단 응용에 따라 결정될 것이다. 예를 들어, 진단 목적을 위해 (예를 들어, 1차 종양 및 전이에서의 치료 진행을 진단하고 모니터하기 위해), 바람직한 방사선핵종은 ⁶⁴Cu,⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁹⁹mTc, 및 ¹¹¹In을 포함하고, ^{99 m}Tc 및 ¹¹¹In이 특히 바람직하다. 치료 목적을 위해서는(예를 들어, 전립샘, 유방, 폐,등의 암에 관련된 1차 종양 및 전이를 위한 방사선치료를 제공하기 위해서), 바람직한 방사선핵종은 ⁶⁴Cu,⁹⁰Y, ^l05Rh, ¹¹¹In, ^ll7mSn, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁵Yb, ¹⁷⁷Lu, ^186/188RE, 및 ¹⁹⁹Au을 포함하고, ¹⁷⁷Lu 및 ⁹⁰Y은 특히 바람직하다. ^{99 m}Tc는 그것의 낮은 비용, 유용성, 이미징 특성, 및 높은 특이적 활성으로 인해서특히 유용하고 진단 방사선핵종에 바람직하다. ^99mTc의 핵 및 방사능 성질은 이 동위원소를 이상적인 신티그램 촬영 이미징 약제로 만든다. 이 동위원소는 140 keV 의 단일 광자 에너지와 약 6시간의 방사능 반감기를 가지고, ⁹⁹Mo-^99mTc 발생기로부터 쉽게 이용가능하다. 예를 들어, ^99mTc 라벨화 펩티드는 1차 종양 및 전이에서의 치료 과정을 진단하고 모니터링하는데 사용될 수 있다. ¹⁷⁷ Lu, ⁹⁰Y 또는 다른 치료 방사선핵종으로 라벨화된 펩티드는 전립샘, 유방, 폐, 등의 암과 관련된 1차 종양 및 전이를 위한 방사선치료를 제공하는데 사용될 수 있다.

1B. 광학 라벨

예시적인 구체예에서, 본 발명의 화합물은 400-1500 nm의 범위의 흡수 또는 방출 최대값을 갖는 광범위한 탈위치화 고리 시스템을 갖는, 광표지, 이를 테면 유기 발색단 또는 형광발색단을 포함하는 광학 염료와 접합될 수 있다. 본 발명의 화합물은 양자택일로 생물발광 분자로 유도될 수 있다. 광표지를 위한 흡수 최대값의 바람직한 범위는 헤모글로빈으로부터의 신호와의 간섭을 최소화하기 위해 600 내지 1000 nm이다. 바람직하게는, 광흡수 라벨은 큰 몰 흡수성, 예를 들어 >10⁵cm^-1M^-1을 가지는 한편, 형광 광학 염료는 높은 퀀텀 수율을 가질 것이다. 광학 염료의 실시예는 다음으로 제한되지는 않지만 WO 98/18497, WO 98/18496, WO98/18495, WO98/18498, WO98/53857, WO96/17628, WO97/18841, WO 96/23524, WO 98/47538, 및 본원에서 인용된 참고문헌에서 기술된 것들을 포함한다. 예를 들어, 광표지는 이를 테면, 예를 들어, 본 발명의 GRP 리셉터 표적화 펩티드와 링커로 구성된 화합물처럼, 본 발명의 화합물에 직접 공유 결합될 수 있다. 전자기 스펙트럼의 가시 및 근-적외선 영역에서 광을 흡수하고 방출하는 몇가지 염료는 현재 그들의 생체교합성, 높은 몰 흡수성, 및/또는 높은 형광성 퀀텀 수율로 인해 다양한 생물의학 응용에 사용되고 있다. 콘트라스트제로서 염료와 연결된 광학 양상의 높은 민감도는 핵 약의 민감도와 유사하고, 이온화 방사선의 원치않는 효과없이 기관과 조직의 시각화를 허용한다. 근-적외선 (NIR) 영역에서 집중적인 흡수 및 방출을 갖는 시아닌 염료는 생물학적 조직이 이 영역에서 광학적으로 투명하기 때문에 특히 유용하다. 예를 들어, NIR 영역에서 흡수하고 방출하는 인도시아닌 그린은, 심장 박출량, 간장 기능, 및 간 혈액 흐름을 모니터링하기 위해 사용되었고 그것의 기능화 유도체는 진단 목적을 위해 생체분자를 접합하는데 사용되었다(R. B. Mujumdar, L. A. Ernst, S. R. Mujumdar, et al. , 시아닌 염료 라벨링 시약: 술포인도시아닌 숙시니미딜 에스테르. 생물접합 화학, 1993,4 (2), 105-111; Linda G. Lee 및 Sam L.Woo."형광 라벨로 사용하기 위한 N-헤테로방향성 이온 및 이미늄 이온 치환된 시아닌 염료", U. S. Pat. No. 5,453, 505; EricHohenschuh, et al."광 이미징 콘트라스트제", WO98/48846 ; Jonathan Turner, et al. "근 적외선 방사선에 의한 신경퇴행성 질환의 진단을 위한 광학 진단 약제", WO98/22146 ; Kai Licha, et al. "근 적외선 방사선에 의한 생체내 진단 공정", WO96/17628 ; Robert A. Snow, etal., 화합물, WO 98/48838. 다양한 이미징 기술 및 시약은 미국 특허 6,663, 847,6, 656,451, 6,641, 798,6, 485,704, 6,423,547, 6,395, 257, 6,280,703,6,277, 841, 6,264, 920, 6,264,919, 6,228,344,6,217,848, 6,190, 641,6, 183,726, 6,180, 087,6, 180,086, 6,180, 085,6, 013,243, 및 공개된 미국 특허 응용 2003185756,20031656432, 2003158127,2003152577, 2003143159, 2003105300,2003105299, 2003072763,2003036538, 2003031627,2003017164, 2002169107,2002164287,및 2002156117에서 기술된다.

2A. 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유하는 링커

본 발명의 한가지 구체예에서, 링커 N-Ｏ-P는 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유한다. 따라서, 링커 N-Ｏ-P의 이러한 구체예에서, N은 0(이때 0는 그것이 부재한다는 것을 의미한다), 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기;

Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고, 이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 비-알파 아미노산이다.

따라서, 한가지 실시예에서, N = Gly,Ｏ = 비-알파 아미노산, 및 P= 0이다.

알파 아미노산은 당업계에 잘 알려져있고, 자연적으로 발생 및 합성 아미노산을 포함한다.

비-알파 아미노산은 또한 당업계에 공지되어 있고 자연적으로 발생하는 또는 합성된 것들을 포함한다. 바람직한 비-알파 아미노산은 다음을 포함한다:

8-아미노-3,6-디옥사옥탄산;

N-4-아미노에틸-N-1-아세트산; 및

화학식 NH₂-(CH₂CH₂0)n-CH₂CO₂H 또는 NH_{2 -(}CH₂CH₂0)n-CH₂CH₂C0₂H을 갖는 폴리에틸렌 글리콜 유도체 이때 n = 2 내지 100.

적어도 하나의 비-알파 아미노산과 함께 링커를 함유하는 화학식M-N-Ｏ-P-G 을 갖는 화합물의 실시예는 표 1에 열거되어 있다. 이들 화합물은 당업자들에게 공지된 유사한 방법에 의해서는 물론이고 본원에서, 특히 실시예에서 개시된 방법을 사용하여 제조될 수 있다.

¹ HPLC 방법은 HPLC 기울기에 대한 10 분 시간을 말한다.

² HPLC RT는 HPLC에서 화합물의 잔류 시간을 말한다.

³ MS 은 분자량이 질량/유닛 전하(m/e)로부터 계산되는 질량 스텍트럼을 말한다.

⁴ IC₅₀는 세포에서 요오드화 봄베신의 GRP 리셉터로의 50% 결합을 억제하는 화합물의 농도를 말한다.

2B. 적어도 하나의 치환된 쓸개즙 산을 함유하는 링커

본 발명의 또다른 구체예에서, 링커 N-Ｏ-P는 적어도 하나의 치환된 쓸개즙 산을 함유한다. 따라서, 링커 N-O-P의 이러한 구체예에서,

N은 0 (이때 0은 그것이 부재함을 의미하고), 알파 아미노산, 치환된 쓸개즙 산 또는 다른 연결기이고;

Ｏ은 알파 아미노산 또는 치환된 쓸개즙 산이고;

P는 Ｏ, 알파 아미노산, 치환된 쓸개즙 산 또는 다른 연결기이고,

이때 N, Ｏ 또는 P중 적어도 하나는 치환된 산이다.

쓸개즙 산은 쓸개즙(간의 분비)에서 발견되고 히드록실 기와 카르복실기에서 끝나는 5 탄소 원자 측쇄를 갖는 스테로이드이다.

치환된 쓸개즙 산에서, 적어도 하나의 원자 이를 테면 쓸개즙 산의 수소 원자는 또다른 원자, 분자 또는 화학 기로 치환된다. 예를 들어, 치환된 쓸개즙 산은 위치 7 및 12 에서 수소, 히드록실 또는 케토작용기로 선택적으로 치환된 3-아미노, 24-카르복실 작용을 갖는 것들을 포함한다.

본 발명에서 다른 유용한 치환된 쓸개즙 산은 치환된 담즙산 및 그것의 유도체를 포함한다. 특정 치환된 담즙산 유도체는 :

(3β, 5β)-3-아미노콜란-24-산 ;

(3β,5β,12α)-3-아미노-12-디히드록시콜란-24-산 ;

(3β, 5β, 7a,12α)-3-아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-산;

Lys-(3,6, 9)-트리옥사운데칸-1, 11-디카르보닐-3,7-디데옥시-3-아미노콜산);

(3β, 5β, 7α)-3-아미노-7-히드록시-12-옥소콜란-24-산; 및

(3β, 5β, 7α)-3-아미노-7-히드록시콜란-24-산을 포함한다.

적어도 하나의 치환된 쓸개즙 산과 함께 링커를 함유하는 화학식 M-N-Ｏ-P-G 을 갖는 화합물의 실시예는 표 2에 열거된다. 이들 화합물은 당업자들에게 알려진 유사한 방법에 의해서는 물론이고, 본원에서 특히 실시예에서 개시된 방법을 사용하여 제조될 수 있다.

¹ HPLC 방법은 HPLC 기울기에 대한 10 분 시간을 말한다.

² HPLC RT는 HPLC에서 화합물의 잔류 시간을 말한다.

³ MS 은 분자량이 질량/유닛 전하(m/e)로부터 계산되는 질량 스텍트럼을 말한다.

⁴ IC₅₀는 세포에서 요오드화 봄베신의 GRP 리셉터로의 50% 결합을 억제하는 화합물의 농도를 말한다.

2C. 환식 기와 함께 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유하는 링커

본 발명의 여전히 또다른 구체예에서, 링커 N-Ｏ-P는 환식 기와 함께 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유한다. 따라서, 링커 N-Ｏ-P의 이 구체예에 있어서,

N는 0 (이때 0은 그것이 부재함을 의미한다), 알파 아미노산, 환식 기 또는 다른 연결기를 갖는 비-알파 아미노산이고;

Ｏ는 알파 아미노산 또는 환식 기를 갖는 비-알파 아미노산이고;

P는 0, 알파 아미노산, 환식 기를 갖는 비-알파 아미노산, 또는 다른 연결기이고,

이때 N, Ｏ 또는 P중 적어도 하나는 환식 기를 갖는 비-알파 아미노산이다.

환식 기를 갖는 비-알파 아미노산은 치환된 페닐, 비페닐, 시클로헥실 또는 환식 지방성 또는 헤테로환식 부분을 함유하는 다른 아민 및 카르복실을 포함한다. 그러한 예는 다음을 포함한다:

4-아미노벤조산

3-아미노벤조산

4-아미노메틸 벤조산

8-아미노옥탄산 트랜스-4-아미노메틸시클로헥산 카르복실산

4-(2-아미노에톡시) 벤조산 이소니페코트산

2-아미노메틸벤조산

4-아미노-3-니트로벤조산

4-(3-카르복시메틸-2-케토-1-벤지이미다졸릴-피페리딘

6-(피페라진-1-일)-4-(3H)-퀴나졸리논-3-아세트산

(2S,5S)-5-아미노-1, 2,4, 5,6, 7-헥사히드로-아제피노 [3,21-하이] 인돌-4-온-2-카르복실산

(4S, 7R)-4-아미노-6-아자-5-옥소-9-티아비시클로 [4.3. 0] 노난-7-카르복실산

3-카르복시메틸-1-페닐-1, 3,8-트리아자스피로 [4.5] 데칸-4-온

Nl-피페라진아세트산

N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산

(3S)-3-아미노-1-카르복시메틸카프로락탐

(2S, 6S, 9)-6-아미노-2-카르복시메틸- 3,8-디아자비시클로- [4, 3,0]-노난-1, 4-디온

3-아미노-3-데옥시콜산

4-히드록시벤조산

4-아미노페닐아세트산3-히드록시-4-아미노벤조산

3-메틸-4-아미노벤조산

3-클로로-4-아미노벤조산

3-메톡시-4-아미노벤조산

6-아미노나프토산

N,N'-비스 (2-아미노에틸)-숙시남산

환식 기를 갖는 적어도 하나의 알파 아미노산과 함께 링커를 함유하는 화학식 M-N-Ｏ-P-G을 갖는 화합물의 예는 표 3에 열거되어있다.

이들 화합물은 당업자들에게 공지된 유사한 방법에 의해서는 물론이고, 본원에서 특히 실시예에서 개시된 방법을 사용하여 제조될 수 있다.

*BBN (7-14)는 [SEQ ID NO : 1]이다.

**NT 는 "테스트되지 않음"으로 정의된다.

***BOA는 (lR)-1-(비스 {2-[비스 (카르복시메틸) 아미노] 에틸} 아미노)프로판-1, 3- 디카르복실산으로서 정의된다.

¹ HPLC 방법은 HPLC 기울기에 대한 10 분 시간을 말한다.

² HPLC RT는 HPLC에서 화합물의 잔류 시간을 말한다.

³ MS 은 분자량이 질량/유닛 전하(m/e)로부터 계산되는 질량 스텍트럼을 말한다.

⁴ IC₅₀는 세포에서 요오드화 봄베신의 GRP 리셉터로의 50% 결합을 억제하는

아미노-(페닐, 비페닐, 시클로알킬 또는 헤테로환식) 카복실레이트와 관련된 바람직한 링커 및 다양한 GRP 리셉터 표적화 펩티드를 함유하는 화합물의 부분집합이 표 4에 설명되어 있다. 이들 화합물은 당업자들에게 알려진 유사한 방법에 의해서는 물론이고, 본원, 특히 실시예에서 개시된 방법을 사용하여 제조될 수 있다.

2D. 다른 연결기

링커 N-O-P내에서 사용될 수 있는 다른 연결기는 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 표적 기능 또는 금속 킬레이터의 금속 합성 기능 또는 광학 라벨의 검출가능성 중 하나에 불리하게 영향을 주지 않으면서, GRP 리셉터 표적화 펩티드를 금속 킬레이터 또는 광학 라벨에 커플링하는 역할을 하는 화학 기를 포함한다. 적절한 다른 연결기는 펩티드 (즉, 함께 연결된 아미노산) 단독, 비-펩티드 기 (예를 들어 , 탄화수소 사슬) 또는 아미노산 서열과 비-펩티드 스페이서의 조합을 포함한다.

한가지 구체예에서, 링커 N- O-P내에서 사용하기 위한 다른 연결기는 L-글루타민 및 탄화수소 사슬, 또는 그것의 조합을 포함한다.

또다른 구체예에서, 링커 N-O-P내에서 사용하기 위한 다른 연결기는 일련의 아미노산들(예를 들어, 디글리신, 트리글리신, gly-gly-glu, gly-ser-gly, 등 )으로 구성되는 순수한 펩티드 연결기를 포함하고, 이때 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 N-종말 잔기와 금속 킬레이터 또는 폴리머 사슬에서 광학 라벨 사이의 원자의 총 수는 12 원자이다.

여전히 더 나아간 구체예에서, 링커 N-O-P 내에서 사용하기 위한 다른 연결기는 또한 탄화수소 사슬 [즉, R_1-(CH₂)_n-R₂] 을 포함할 수 있고 이때 n은 0-10, 바람직하게는 n = 3 내지 9이고, R₁ 은 리간드 백본 또는 미리형성된 금속 킬레이터 또는 금속 합성 백본 또는 광학 라벨을 공유 연결시키기 위한 부위로서 사용될 수 있는 기 (예를 들어, H₂N-, HS-, -COOH)이고; R₂는 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 N- 종말 NH₂-기에 공유 커플링하기 위해 사용되는 기이다(예를 들어, R₂는 활성화 COOH 기이다). 리간드 (즉, 킬레이터) 또는 바람직한 금속 킬레이트를 생체분자에 접합하기 위한 몇가지 화학 방법은 문헌 [Wilbur, 1992; Parker, 1990; Hermanson, 1996; Frizberg et al. , 1995]에 잘 기술되어있다. 이들 방법중 한가지 이상은 합성되지 않은 리간드 (킬레이터) 또는 방사성금속 킬레이트 또는 광학 라벨 중의 하나를 링커에 연결시키거나 또는 링커를 GRP 리셉터 표적화 펩티드에 연결시키기 위해 사용될 수 있었다. 이들 방법들은 산 무수물, 알데히드, 아릴이소티오시아네이트, 활성화 에스테르, 또는 N- 히드록시숙시니미드 [Wilbur, 1992; Parker, 1990; Hermanson, 1996; Frizberg et al. , 1995]의 형성을 포함한다.

바람직한 구체예에 있어서, 링커 N-O-P내에서 사용하기 위한 다른 연결기는 아래에서 설명된 바와 같은 친전자체 또는 친핵체를 갖는 링커 전구체로부터 형성될 수 있다 :

LP 1 : 적어도 두개의 위치위에 링커 동일한 친전자체 E1 또는 동일한 친핵체 Nu1를 갖는 링커 전구체;

LP2: 친전자체 E1와 링커의 또다른 위치에 다른 친전자체 E2를 갖는 링커 전구체 ;

LP3: 친핵체 Nu1 및 링커의 또다른 위치에서 다른 친핵체 Nu2를 갖는 링커 전구체; 또는

LP4: 친전자체 E1로 기능화된 하나의 말단과 친핵체 Nu1로 관능화된 나머지를 갖는 링커 전구체.

바람직한 친핵체 Nu1/Nu2 는 -OH,-NH,-NR,-SH,- HN-NH₂, -RN-NH₂, 및 -RN-NHR'을 포함하고, 이때 R'이 H이 아니라는 것을 제외하고는, R'와 R는 위에서 주어진 R에 대한 정의로부터 독립적으로 선택된다.

바람직한 친전자체 E1/E2은 -COOH,-CH=O (알데히드), -CR=OR' (케톤),-RN-C=S,-RN-C=O,-S-S-2-피리딜,-SO₂-Y,-CH2C (=O) Y, 및

상기식에서 Y는 다음 기들로부터 선택될 수 있다:

3. GRP 리셉터 표적화 펩티드

GRP 리셉터 표적화 펩티드(즉, 화학식M-N-O-P- G에서의 G)는 GRP 리셉터 패밀리에 대한 결합 친화도를 가지는 어떠한 펩티드, 그것의 등가물, 유도체 또는 유사체이다.

GRP 리셉터 표적화 펩티드는 작용제 또는 대항제의 형태를 취할 수 있다. GRP 리셉터 표적화 펩티드 작용제는 높은 친화도를 갖는 결합 후에 세포를 "활성화"시키는 것으로 알려져있고 세포에 의해 흡수될 수 있다. 거꾸로, GRP 리셉터 표적화 펩티드 대항제는 세포에 의해 흡수되지 않고 세포를 "활성화"시키지 않고 세포에서 오직 GRP 리셉터에만 결합하는 것으로 알려져있다. 바람직한 구체예에 있어서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 작용제이다.

본 발명의 더욱 바람직한 구체예에서, GRP 작용제는 봄베신 (BBN) 유사체및/또는 그것의 유도체이다. BBN 유도체 또는 그것의 유사체는 바람직하게는 특이적으로 BBN 단독만큼 (즉, Kd < 25nM) 더나은 또는 유사한 결합 친화도를 갖는 GRP 리셉터에 결합할 특정 아미노산 치환과 함께, BBN 결합 영역 (즉, BBN (7-14) [SEQ ID NO :1])의 동일한 1차 구조 또는 또는 유사한 1차 구조 중의 하나를 함유한다, . 적절한 화합물은 펩티드, 펩티도미메틱스 및 그것의 유사체 및 유도체를 포함한다. 위치 BBN-14 에서 L-메티오닌 (Met)의 존재는 일반적으로 작용제성질을 주는 반면, BBN-14에서 이 잔기의 존재는 일반적으로 대항제 성질을 부여한다 [Hoffken, 1994]. 일부 유용한 봄베신 유사체는 전문이 본원에 포함되는 미국 특허 Pub. 2003/0224998에서 개시된다.

당업계에는 BBN (8-14) 결합 영역 (예를 들어,L-Gly¹¹에 대해 D-Ala 또는 L-Trp⁸에 대해 D-Trp⁸ )에는 소수의 선택적인 수의 특정 아미노산 치환이 존재한다는 것이 잘 기록되어있고, 그것은 결합 친화도를 감소시키지 않고 만들어질 수 있다 [Leban et al. , 1994; Qin et al. , 1994; Jensen et al. , 1993]. 게다가, attachment of 일부 아미노산 사슬 또는 다른 기의 위치 BBN-8에서 N-종말 아민 기(즉, Trp⁸ 잔기)로의 부착은 BBN 유사체의 GRP 리셉터에 대한 결합 친화도를 크게 줄일 수 있다[Davis et al. , 1992; Hoffen, 1994; Moody et al. , 1996; Coy, et al. , 1988; Cai et al.,1994]. 소수의 경우에, 결합 친화도를 감소시키지 않고추가의 아미노산 또는 화학 부분을 추가하는 것이 가능하다.

BBN 리셉터 표적화 펩티드의 유사체는 GRP 또는 BBN의 뮤테인, 레트로펩티드 및 레트로-인버소-펩티드는 물론이고, BBN보다 더 크거나 동일한 갈망을 갖는 GRP 리셉터를 표적으로 하는 분자를 포함한다. 당업자중 한명은 이들 변형이 본원에서 기술된 펩티드의 생물학적 활성을 부정적으로 바꾸지 않는 한, 이들 유사체가 또한 하나 또는 몇개의 아미노산의 치환, 및/또는 결손 및/또는 첨가를 포함하는 변형을 함유할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 이들 치환은 그들의 동의어 아미노산에 의해 한가지 이상의 아미노산을 치환함으로써 수행될 수 있다. 기내에서 동의어 아미노산은 분자의 생물학적 기능을 보존하기 위해서 기의 구성원들 사이의 치환을 허용하는 충분한 물리화학적 성질을 가지는 아미노산으로서 정의된다.

아미노산의 결손 또는 삽입은 또한 단 그들이 상기 서열의 생물학적 기능을 바꾸지 않는다면, 정의된 서열안에 도입될 수 있다. 우선적으로는 그러한 삽입 또는 결손은 1,2,3,4 또는 5 아미노산으로 제한되어야 하고 작용 배좌에 결정적인 아미노산을 제거하거나 물리적으로 방해하거나 대체해서는 안된다. 본원에서 기술된 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 뮤테인은 아미노산 치환, 결손, 또는 삽입이 한가지 이상의 아미노산 위치에 존재하는 본 명세서에서 개시된 서열과 상동인 서열을 가질 수 있다. 뮤테인은 본원에서 기술된 펩티드의 적어도 40%, 바람직하게는 적어도 50%, 보다 바람직하게는 60-70%, 가장 바람직하게는 80-90% 의 생물학적 활성을 가질 수 있다. 그러나, 그들은 또한 특별히 예증된 펩티드보다 더 큰 생물학적 활성을 가질 수 있고, 따라서 반드시 예증된 펩티드의 생물학적 기능과 동일해질 필요는 없다. GRP 리셉터 표적화 펩티드의 유사체는 또한 티오아미드, 메틸렌 아민, 및 E-올레핀를 포함하여, 펩티드 백본의 아미드 결합으로의 변화를 통합하는 펩티도미메틱스 또는 가짜펩티드를 포함한다. 또한 GRP, BBN 또는 N- 치환된 히드라진 카르보닐 화합물 (또한 아자 아미노산으로 알려짐)에 의해 치환된 아미노산을 갖는 그들의 펩티드 유사체의 구조에 기반한 펩티드가 본원에서 사용된 바와 같은 용어 유사체에 포함된다.

GRP 리셉터 표적화 펩티드는 선택된 킬레이터에 따라 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 펩티드는 일반적으로 펩티드 합성의 업계에서 일반적으로 확립되고 알려진 기술에 의해, 이를 테면 고상 펩티드 합성 (SPPS) 접근법에 의해 가장 편리하게 제조될 수 있다. 고상 펩티드 합성 (SPPS)은 아미노산 잔기를 불용성 지지체 또는 매트릭스, 이를 테면 폴리스티렌에 연결되는 성장하는 펩티드 사슬에의 단계적 첨가를 포함한다. 펩티드의 C-종말 잔기는 먼저 N-보호제 이를 테면 t-부틸옥시카르보닐 기 (Boc) 또는 플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc) 기로 보호된 그것의 아미노 기를 갖는 시중에서 입수가능한 지지체에 고정된다. 아미노 보호 기는 적절한 탈보호제 이를 테면 Boc의 경우에는 TFA이고 또는 Fmoc의 경우에는 피페리딘으로 제거되고 다음은 아미노산 잔기(N-보호된 형태로)가 커플링제 이를 테면 N,N'- 디시클로헥실카보디이미드 (DCC),또는 N,N'-디이소프로필카보디이미드 (DIC) 또는 2-(1H- 벤조트리아졸-1-일)-1, 1, 3, 3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU)와 함께 첨가된다. 펩티드 결합의 형성시에, 시약은 지지체로부터 세척되었다. 최종 잔기의 첨가후에, 펩티드는 적절한 시약 이를 테면 트리플루오로아세트산 (TFA) 또는 플루오르화수소 (HF)로 지지체로부터 분열된다.

링커는 그후 GRP 리셉터 표적화 펩티드의 Trp⁸ 잔기의 자유 아미노 기를 적절한 링커의 관능기와 반응시킴으로써 커플링되어 접합을 형성할 수 있다. 위에서 논의된 킬레이터, 링커 및 표적화 부분의 전체 구성체는 또한 수지에서 회합되고 그후에 또한 적절한 시약 이를 테면 트리플루오로아세트산 또는 HF의 작용으로 분할될 수 있다.

4. 방사성 의약품 화합물의 라벨링 및 투여

방사선약물 접합체 내에 금속의 혼입은 배위 화학 분야에서 통상 알려진 다양한 방법에 의해 달성될 수 있다. 금속이 ^99mTc일때, 진단 이미징을 위한 바람직한 방사선핵종, 하기의 일반 과정은 테크네튬 착체를 형성하는데 사용될 수 있다. 펩티드-킬레이터 접합 용액은 초기에 물, 희석산, 또는 알코올 이를 테면 에탄올의 수용액 중에 접합체를 용해시킴으로써 형성된다. 용액은 그후 선택적으로 탈가스되어 용해된 산소를 제거한다. -SH 기가 펩티드에 존재할때, 티올 보호 기 이를 테면 Acm (아세트아미도메틸), 트리틸 또는 다른 티올 보호 기는 선택적으로 산화로부터 티올을 보호하는데 사용될 수 있다. 티올 보호 기(들)은 적절한 시약, 예를 들어 수산화나트륨으로 제거되고, 그후 유기 산 이를 테면 아세트산 (pH 6.0-6. 5)으로 중화된다. 양자택일로, 티올 보호 기는 인시투 테크네튬 킬레이트화 동안에 제거될 수 있다. 라벨링 단계에서, 몰리브덴 발생기로부터 얻어진 나트륨 퍼테크네테이트를 충분한 양의 환원제, 이를 테면 염화제1석과의 접합체의 용액에 첨가하여, 테크네튬을 환원시키고 실온에서 방치시키거나 또는 가열한다. 표지화 접합체는 오염물질 ^99mTc0₄-및 콜로이드^99mTcO₂로부터 크로마토그래피로, 예를 들어 C-18 Sep Pak 카트리지 [Millipore Corporation, Waters Chromatography 분열, 34 Maple Street, Milord, Massachusetts 01757]로 또는 당업자들에게 알려진 방법을 사용하는 HPLC에 의해 분리될 수 있다.

대안적인 방법으로, 라벨링은 트랜스킬레이트화 반응에 의해 수행될 수 있다. 이 방법에 있어서, 테크네튬 공급원은 선택된 킬레이터와의 반응에 앞서 환원되고 불안정한 리간드와 합성되고, 따라서 선택된 킬레이터로의 리간드 교환을 촉진하는 테크네튬의 용액이다. 트랜스킬레이트화에 적합한 리간드의 예는 타르트레이트, 시트레이트, 글루코네이트, 및 헵타글루코네이트를 포함한다. 접합체는 위에서 기술된 기술을 사용하여 표지화될 수 있고, 또는 양자택일로, 킬레이터 그자체는 표지화되고 그후에 펩티드에 커플링되어 접합체를 형성할 수 있다; "예비표지화 킬레이트"방법이라고 언급된 공정; 는 것이 이해될 것이다. Re와 Tc 는 모두 주기율표의 VIIB 열에 있고 그들은 화학 착향료이다. 따라서, 대부분의 파트에 있어서, 이들 두가지 금속의 높은 시험관내 및 생체내 안정성을 나타내는 리간드 틀구조와의 착화 화학은 동일하고 [Eckelman, 1995] 유사한 킬레이터 및 과정이 펩티드 및 단백질과의 안정한 방사선금속 착체를 형성하고, 이들 금속을 그들의 +5 산화 상태에서 킬레이트화하기 위해 채택된 Re.Many ^99mTc 또는 ^186/188Re 착체로 표지화하는데 사용될 수 있다[Lister-James et al. , 1997]. 이 산화 상태는 선택적으로 ^99mTc-또는 ^186/188Re 를 이미 생체분자에 접합된 리간드 틀구조 안으로 넣는 것을 가능하게 하고, 다양한 ^{99 m}Tc (V)및/또는 ^{l86 / l88}Re(V) 약한 킬레이트 (예를 들어,99mTc-글루코헵토네이트, 시트레이트, 글루코네이트, 등 ) [Eckelman, 1995; Lister-James et al. , 1997;Pollak et al., 1996].

5. 진단 및 치료 용도

진단적으로 및/또는 치료적으로 유용한 금속 또는 광학 라벨로 표지화할때, 본 발명의 화합물은 방사선진단, 방사선치료 및 광학 영상의 분야에서 확립된 과정에 의해 GRP 리셉터 (또는 NMB 리셉터)의 과발현을 수반하는 어떠한 병변을 치료 및/또는 검출하는데 사용될 수 있다. [ 예를 들어, Bushbaum, 1995; Fischman et al. , 1993; Schubiger et al. , 1996; Lowbertz et al. , 1994;Krenning et al., 1994 참조; 광학 염료의 예는 include, but are not limited to those described in WO 98/18497, WO 98/18496, WO 98/18495, WO 98/18498, WO 98/53857, WO 96/17628, WO 97/18841, WO 96/23524, WO 98/47538, 및 본원에서 인용된 참고문헌에서 기술된 것들을 포함하는데 이것으로 제한되지 않는다.]

GRP-R 발현은 다양한 사람 종양에서 고도로 상향조절된다. 예를 들어, WO99/62563를 참조하라. 따라서, 본 발명의 화합물은 전립샘 암 (1차 및 전이), 유방 암 (1차 및 전이), 결장 암, 위 암, 췌장 암, 비-소세포 폐 암, 소세포 폐 암, 가스트리노마스, 멜라닌종, 아교모세포종, 신경모세포종, 자궁 평활근육종 종양, 전립샘 상피내종양 [PIN], 및 난소 암을 포함하는, 암을 치료하고 진단하는데 널리 유용할 수 있다. 추가적으로, 본 발명의 화합물은 GRP 리셉터가 상향조절되는 상태와 그들이 그렇지 않은 상태 사이를 구분하는데 유용할 수 있다(예를 들어 각각 만성 췌장염 및 도관 췌장 암종).

본 발명의 화합물은, 실시예에서 보다 상세하게 설명된 바와 같이, 본원에서 개시된 신규 링커없는 화합물보다 생체내 종양에서 더높은 섭취를 나타내고, GRP 리셉터-발현 종양을 표적화하고 따라서 이들 조직으로 방사선치료를 이미징화 또는 송달하는 개선된 능력을 나타낸다. 실제로, 실시예에서 나타낸 바와 같이, 방사선치료 는 본 발명의 화합물을 사용하여 더욱 효과적이다 (생존 시간이 증가됨).

이들 화합물의 진단 응용은 방사선면역 가이드 외과수술 (RIGS) 분야에서 hand-held 방사선 검출 기구를 사용하여 신생종양의 조직을 표적화하기 위한 약제로서, 매칭된 쌍의 방사선치료 화합물을 투여하기에 앞서 선량측정 데이타를 얻기 위한 수단으로서, 그리고 및 시간에 걸친 치료의 함수로서 GRP 리셉터 개체수를 평가하기 위한 수단으로서, 신티그램 촬영, 광학, 음파발광 또는 광음향 이미징을 사용하여, 신생종양 세포의 존재를 위한 제 1 라인 진단 스크린으로서 될 수 있다.

이들 화합물의 치료 응용은 암의 치료에 있어서 제 1 라인 치료법으로서, 이들 약제가 보조약 화학요법와 함께 이용될 수 있는조합 치료법으로서, 및/또는 매칭된 쌍 치료제로서 사용될 약제로서 정의될 수 있다. 매칭된 쌍 개념은 적절한 킬레이트에 결합하기 위해 선택된 방사선금속에 따라 진단제와 치료제 모두로서 작용할 수 있는 단일 비금속화 화합물을 말한다. 만일 킬레이터가 원하는 금속을 수용할 수 없다면, 생체내 진단 화합물의 거동이 방사선치료 화합물의 거동을 예측하는데 사용될 수 있도록 약리학을 유지하면서, 적절한 치환이 다른 금속을 수용하기 위해 만들어질 수 있다. 보조약 화학요법과 함께 이용될 때 어떠한 적절한 화학치료제가 사용될 수 있으며, 예를 들어, 항신생종양제, 이를 테면 백금 화합물 (예를 들어, 스피로플라틴, 시스플라틴, 및 카르보플라틴), 메토트렉세이트, 아드리아마이신, 미토마이신, 안사미토신, 블레오마이신, 시토신, 아라비노시드, 아라비노실 아데닌, 메르캅토폴리리신, 빈크리스틴, 부술판, 클로람부실, 멜팔란 (예를 들어 , PAM, a, L-PAM 또는 페닐알라닌 머스타드), 메르캅토푸린, 미토탄. 프로카르바진 염산염, 닥티노마이신 (액티노마이신 D), 다우노루브신 염산염, 독소루비신 염산염, 탁솔, 미토마이신, 플리카마이신 (미트라마이신), 아미노글루테티미드, 에스트라무스틴 포스페이트 나트륨, 플루타미드, 류프롤리드 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 타목시펜 시트레이트, 테스톨락톤, 트릴로스탄, 암사크린 (m-AMSA), 아스파라기나아제(L-아스파라기나아제)Erwina aparaginase, 에토포시드-(VM-26), 인터페론 α-2a, 인터페론 α-2b, 테니포시드(VM-26), 빈블라스틴 술페이트(VLB), 및 및 아라비노실을 포함한다. 특정 구체예에서, 치료제는 이를 테면 흑색종 항원에 결합할 수 있는 단일클론 항체와 같은, 단일클론 항체가 될 수 있다.

방사선핵종 금속으로 표지화된 접합체는, 이를 테면 ^{99 m}Tc은, 약학적으로 허용가능한 담체 및/또는 이를 테면 등장 염수와 같은 염 용액과 같은 용액중에 정맥내, 피하 또는 복막내 주사에 의해, 사람 환자 또는 피험체를 포함하는 포유동물에게 투여될 수 있다. 본 발명에 의해 제공된 방사선표지 신티그램 촬영 이미징 약제는 적절한 양의 방사능을 가지고 제공된다. ^{99 m}Tc 방사능 착체를 형성하는데 있어서, mL당 약 0.01 밀리큐리 (mCi) 내지 100 mCi 의 농도로 방사능을 함유하는 용액중에 방사능 착체를 형성하는 것이 일반적으로 바람직하다. 일반적으로, 투여될 단위 복용량은 약 0.01 mCi 내지 약 100 mCi, 바람직하게는 1 mCi 내지 30 mCi의 방사능을 가진다. 단위 용량으로 주사될 용액은 약 0.01 mL 내지 약 10 mL이다. 투여에 적합한 표지화 접합체의 양은 신속하게 청소된 접합체는 덜 신속하게 청소된 것보다 더높은 용량으로 투여될 필요가 있을 수 있다는 의미에서, 선택된 접합체의 분포 형태에 의존한다. 생체내 분포 및 집중화는 투여에 이어서 적절한 시간; 비-표적 조직에서 청소율에 대한 표적 부위에서 축적율에 따라 전형적으로 30 분과 180 분 사이에 표준 신티그램 촬영 기술에 의해 추적될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 진단 방사선핵종-표지화 화합물을 환자에게 주사한 후에, 이미징 약제에 혼입된 핵종 의 감마선 에너지에 대해 눈금정해진 감마 카메라가 약제의 섭취 영역을 이미징화하고 부위에 존재하는 방사능의 양을 정량하는데 사용될 수 있다. 생체내 부위의 이미징은 몇 분안에 일어날 수 있다. 그러나, 이미징화는 만약 원한다면, 시간 또는 더 오랜 시간, 방사선표지 펩티드를 환자에게 주사한 후에 일어날 수 있다. 대부분의 경우에, 충분한 양의 투여된 용량은 약 0.1 시간내에 이미징화될 영역에 축적되어 과학사진을 찍는 것을 허용한다.

본 발명의 화합물은 환자에게 단독으로 또는 다른 성분들 이를 테면 당업계에 잘 알려진 부형제, 희석제, 라디칼 스캐빈저, 안정화제, 및 담체를 함유하는 조성물의 일부로서 투여될 수 있다. 화합물은 환자에게 정맥내 또는 복막내로 투여될 수 있다.

본 발명과 관련된 다양한 이점들이 존재한다. 본 발명에 따라 만들어진 화합물은 안정한, 잘 정의된 ^99mTc 또는 ^186/l88Re 표지화 화합물을 형성한다. 본 발명의 유사한 화합물는 또한 개개의 방사선금속에 대한 적절한 킬레이터 틀구조를 사용함으로써, ¹⁵³Sm, ⁹⁰Y, ¹⁶⁶Ho, ¹⁰⁵Rh, ¹⁹⁹Au, ¹⁴⁹Pm, ¹⁷⁷Lu, ¹¹¹In 또는 다른 방사선금속으로 표지화된 안정한, 잘 정의된 생성물을 형성함으로써 만들어질 수 있다. 방사선표지 GRP 리셉터 표적화 펩티드는 선택적으로 신생종양의 세포 발현 GRP 리셉터에 결합되고, 만일 작용제가 사용되면, 흡수되고, 연장된 시간동안 종양 세포에 보유된다. 암 세포에 도달하지 않는(즉, 결합하지 않는) 방사능 물질은 우선적으로는 신장에서 방사선금속의 최소 잔류와 함께 효과적으로 소변으로 배출된다

6. 광학이미징, 음파발광, 광음향이미징 및 광선요법

본 발명에 따르면, 많은 광학 파라미터가 사용되어, 광학적으로-표지화된 본 발명이 화합물로 피험자를 주사한 후에, 생체내 광 이미징으로 표적의 위치를 결정할 수 있다. 이미징의 제작에서 검출될 광학 파라미터는 투과된 방사선, 흡수, 형광 또는 인광성 방출, 광-반사, 흡광도 크기에서의 변화 또는 최대, 및 탄력적으로 산란된 방사선을 포함할 수 있다. 예를 들어, 생물학적 조직은 비교적 650-1000 nm의 근 적외선 (NIR) 파장 범위에 있는 광에 반투명하다.

NIR 방사선은 몇 센티미터까지 조직으로 침투할 수 있고, 생체내 표적-함유 조직을 이미징화하기 위한 본 발명의 화합물의 사용을 허용한다. 임상적인 실행에 있어서 가시 및 근-적외선 (NIR) 광의 사용은 빠르게 증가하고 있다. 전자기 스펙트럼의 가시, NIR, 또는 장-파장 (UV-A, > 350 nm) 영역에서 흡수하는 또는 방출하는 화합물은 광학 단층촬영 이미징, 내시경검사 시각화, 및 광선요법에 잠재적으로 유용하다.

생물의학 광학의 주된 이점은 그것의 치료 잠재력에 있다. 광선요법은 외부와 내부 모두 다양한 표면 병소의 치료를 위해 안전하고 효과적인 과정임이 증명되었다. 염료는 광학 영상 및 광선요법에서 조직의 신호 검출 및/또는 감광화를 개선하는데 중요하다. 이전의 연구들은 특정 염료가 종양에 집중될 수 있고 작은 암의 검출과 치료를 위한 강력한 프로브로서의 역할을 할 수 있다는 것을 보여주었다(D. A. Bellnier et al., 광역학적 감광제 2- [1-헥실옥시에틸]-2-데비닐 피로페오포르비드-a의 뮤린 약동학 및 항종양 효능, J. Photochem. Photobiol. , 1993,20, pp. 55- 61 ; G. A. Wagnieres etal., oncological 응용을 위한 생체내 형광성 스펙트로스코피 및 이미징, Photochem. Photobiol. , 1998,68, pp.603-632 ; J. S. Reynolds etal., 형광 콘트라스트제를 사용하는 자발적인 개과 유방 종양의 이미징, Photochem. Photobiol., 1999,70, pp. 87-94). 그러나, 이들 염료는 우선적으로 악성 조직에 집중하지 않는다.

예시적인 구체예에서, 본 발명의 화합물은 광표지, 이를 테면 광범위한 탈위치화 고리 시스템을 가지고 400-1500 nm의 범위의 흡수 또는 방출 최대값을 갖는 유기 발색단 또는 형광발색단을 포함하는 광학 염료와 접합될 수 있다. 본 발명의 화합물은 양자택일로 생물발광 분자로 유도될 수 있다. 광표지에 대한 흡수 최대의 바람직한 범위는 헤모글로빈으로부터의 신호와의 간섭을 최소화하는 600과 1000 nm 사이다. 바람직하게는, 광흡수 라벨은 큰 몰 흡수성, 예를 들어 > 10⁵cm^-1M^-1을 가지는 한편, 형광 광학 염료는 높은 퀀텀 수율을 가질 것이다. 광학 염료의 예는 이것으로 제한되지는 않지만, WO 98/18497, WO 98/18496, WO 98/18495, WO 98/18498, WO 98/53857, WO 96/17628, WO 97/18841, WO 96/23524, WO 98/47538, 및 본원에서 인용된 참고문헌에서 기술된 것들을 포함한다. 예를 들어, 광표지는 이를 테면, 예를 들어, GRP 리셉터 표적화 펩티드와 본 발명의 링커로 구성된화합물과 같은, 본 발명의 화합물에 직접 공유결합으로 연결될 수 있다. 전자기 스펙트럼의 가시 및 근-적외선 영역에서 광을 흡수하고 방출하는 몇가지 염료는 그들의 생체교합성, 높은 몰 흡수성, 및/또는 높은 형광성 퀀텀 수율로 인해 현재 다양한 생물의학 응용에 사용되고 있다. 콘트라스트제로서 염료와 결합된 광학 양상의 높은 민감도는 핵 약의 민감도와 유사하고, 이온화 방사선의 바람직하지 않은 효과없이, 기관과 조직의 시각화를 허용한다. 근-적외선 (NIR) 영역에서 집중적인 흡수 및 방출을 갖는 시아닌 염료는 생물학적 조직이 광학적으로 이 영역에서 투명하기 때문에 특히 유용하다(B. C. Wilson, 조직의 광학 성질 . 사람 생물학의 백과사전, 1991,5, 587- 597). 예를 들어, NIR 영역에서 흡수하고 방출하는 인도시아닌 그린은 심장 박출량, 간장 기능, 및 간 혈액 흐름을 모니터링하는데 사용되어왔고(Y-L. He, H. Tanigami, H.Ueyama, T. Mashimo, and I. Yoshiya, 펄스-스펙트로미트리로 측정된 인도시아닌 그린을 사용한 혈액 부피의 측정 : 그것의 재현 및 신뢰도. Critical Care Medicine, 1998,26 (8), 1446-1451 ; J. Caesar, S. Shaldon, L. Chiandussi, et al., 간장 혈류의 측정에 있어서 및 간장 기능의 테스트로서 인도시아닌 그린의 사용. Clin. Sci. 1961,21, 43-57) 그것의 기능화 유도체는 진단 목적을 위해 생체분자를 접합하는데 사용되어 왔다(R. B. Mujumdar, L. A. Ernst, S. R. Mujumdar, et al. , 시아닌 염료 라벨링 시약: 술포인도시아닌 숙시니미딜 에스테르. 생물접합 화학, 1993,4 (2),105-111 ; Linda G. Lee 및 Sam L. Woo."형광 라벨로서 사용하기 위한 N- 헤테로방향성 이온 및 이미늄 이온 치환된 시아닌 염료, U. S. Pat. No. 5,453, 505; Eric Hohenschuh, et al. "광 이미징 콘트라스트제", WO98/48846 ; Jonathan Turner, et al. "근 적외선 방사선에 의한 신경퇴행성 질환의 진단을 위한 광학 진단 약제", WO98/22146 ; Kai Licha, et ai. wm-vivo aiagnosuc processny near irrarea raaiation", wu c/udzs ; Kobert A. anow, et al. , 화합물, WO 98/48838.

광학-표지화 화합물의 주사후에, 환자는 약제에서 채택된 광표지에 적합한 파장 범위에서 한가지 이상의 광 공급원 (예를 들어, 레이저)으로 스캐닝된다. 사용된 광은 단색 또는 다색이 될 수 있고 연속 또는 진동이 될 수 있다. 투과된, 산란된, 또는 반사된 광은 하나 또는 다중 파장으로 변환된 광검출기를 통해 검출되어 피험자에서 표적-함유 조직의 위치를 결정한다 (예를 들어, GRP을 함유하는 조직). 광학 파라미터의 변화는 시간에 걸쳐 모니터링되어 표적 부위에서 광학적으로-표지화 시약의 축적을 검출할 수 있다(예를 들어 GRP 리셉터를 갖는 종양 또는 다른 부위). 표준 이미징 프로세싱 및 검출 디바이스는 본 발명의 광학 영상 시약과 함께 사용될 수 있다.

위에서 기술한 광학 영상 시약은 또한 광학적으로-표지화된 이미징 약제로 수행된 음향-광학 또는 음파발광 이미징에 사용될 수 있다(U. S. 5,171, 298, WO 98/57666, 및 본원에서의 참고문헌). 음향-광학 영상에서, 초음파 방사선을 피험자에게 가하고 투과된, 방출된, 또는 반사된 광의 광학 파라미터에 영향을 준다. 음파발광 이미징에서, 가해진 초음파는 실제로 검출된 광을 발생시킨다. 그러한 기술을 사용하는 적절한 이미징 방법이 WO 98/57666에 기술되어 있다.

다양한 이미징 기술 및 시약은 미국 특허 6,663, 847,6, 656,451, 6,641, 798,6, 485,704, 6,423, 547,6, 395,257, 6,280, 703,6,277, 841,6, 264,920, 6,264, 919,6, 228,344, 6,217, 848,6, 190,641, 6,183, 726,6, 180,087, 6,180, 086,6, 180,085, 6,013, 243, 및 공개된 미국 특허 출원 2003185756, 20031656432,2003158127, 2003152577,2003143159, 2003105300,2003105299, 2003072763,2003036538, 2003031627,2003017164, 2002169107,2002164287, 및 2002156117에서 기술된다.

7.방사선치료

방사선동위원소 치료법은 표적화된 조직을 손상시키거나 파괴하는데 충분한 양의 방사선표지 화합물을 투여하는 것을 수반한다. 화합물의 투여 후에 (예를 들어, 정맥내, 피하, 또는 복강내 주사에 의해), 방사선표지 약물은 우선적으로는 질환 부위에서 집중되고(이 경우에, GRP 리셉터를 발현하는 종양 조직 또는 다른 조직). 일단 집중화되면, 방사선표지 화합물은 그후 투여된 동위원소의 방사능 자연붕괴 동안에 방출되는 에너지로 질환 조직을 손상시키거나 파괴한다. 본원에서 논의된 바와 같이, 본 발명은 또한 보조약 화학요법과 조합하여 방사선치료의 사용을 포함한다(또는 어떠한 다른 적절한 치료제와 조합하여).

성공적인 방사선치료의 설계는 몇가지 결정적인 요인들을 수반한다:

1. 방사능을 질환 부위로 송달할 적절한 표적화 기의 선택 ;

2. 인접한 정상 조직을 실질적으로 손상시키지 않고, 질병 부위를 손상시키기에 충분한 에너지를 방출하는 적절한 방사선핵종의 선택 ; 및

3. 이 접합체가 질환 부위에 집중하는 능력에 부정적으로 영향을 주지 않고표적 기와 방사선핵종의 적절한 조합의 선택. 방사선금속에 있어서, 이는 종종 상기 킬레이트를 표적 기에 커플링시키는 링커와 조합된 방사선핵종에 단단하게 배위하고, 표적 조직에서 섭취를 최대화하고 정상, 비-표적 기관에서 섭취를 최소화하기 위해 화합물의 총체적인 바이오분포에 영향을 주는 킬레이팅 기를 수반한다.

본 발명은 표적화 기, 방사선핵종, 금속 킬레이트 및 링커의 적절한 선택을 통해, 상기 3가지 모든 기준을 만족시키는 방사선치료제를 제공한다.

방사선치료제는 란탄계열원소로 알려진 원소들의 부류(원자 번호 57-71의 원소) 및 그들의 유사체 (즉 M3⁺ 금속 이를 테면 이트륨 및 인듐)로부터 킬레이트화 3+ 금속 이온을 함유할 수 있다. 이 부류에 있는 전형적인 방사능 금속은 동위원소 90-이트륨, 111-인듐, 149-프로메튬, 153-사마륨, 166-디스프로슘, 166-홀뮴, 175-이터븀, 및 177-루테튬을 포함한다. 이들 금속의 모두는 (및 란탄계열원소 일련에 있는 다른것들) 잘 알려진 킬레이트 DTPA (디에틸렌트리아민펜타아세트산) 및 폴리아자-폴리카복실레이트 거대고리의 유도체, 이를 테면 DOTA (1,4, 7,10-tetr아자시클로도데칸-N,N', N",N"'-테트라아세트산 및 그것의 밀접한 유사체에 의해 예시된 바와 같은, 그들이 +3 산화 상태로 남아있고, 경질 (산소/질소) 도우너 원자를 갖는 리간드보다 킬레이트를 선호한다는 점에서, 매우 유사한 화학을 가진다. 이들 킬레이팅 리간드의 구조는, 그들의 완전히 탈양자화 형태로 아래에 나타낸다.

이들 킬레이팅 리간드는 다중 질소 및 산소 원자를 통해, 그것에 결합에 의해 방사선금속을 캡슐화한다, 따라서 자유 (미결합) 방사선금속을 체내로 방출하는 것을 막는다. 이는 그들의 킬레이트로부터 3+ 방사선금속의 생체내 해리가 간, 뼈 및 비장에서 방사선금속의 섭취를 초래할 수 있기 때문에, 중요하다. [Brechbiel MW, Gansow OA, "⁹⁰Y 방사선면역치료법을 위한 백본-치환 DTPA 리간드", Bioconj. Chem.1991 ; 2: 187-194; Li, WP,Ma DS, Higginbotham C,Hoffman T, Ket고리 AR, Cutler CS, Jurisson, SS, "란탄계열원소 킬레이트의 생체내 안정성을 평가하기 위한 시험관내 모델의 개발."Nucl. Med. Biol. 2001; 28 (2): 145-154; Kasokat T, Urich K. Arzneim. -Forsch,"래트에서 가도펜테테이트 디메글루민의 탈킬레이트화의 정량화". 1992; 42 (6): 869-76]. 하나가 이들 기관을 특이적으로 표적화하지 않으면, 비-표적 조직의 비-특이적 방사를 이끌고, 이는 골수의 방사로 인해 조혈 억제와 같은 그러한 문제들을 일으킬 수 있기 때문에, 그러한 비특이적 섭취는 매우 바람직하지 않다.

방사선치료 응용을 위해 본원에서 개시된 치료 방사선핵종에 대한 킬레이터중 어떤 것을 사용할 수 있다. 그러나, DOTA 킬레이트가 DTPA 또는 다른 선형 킬레이트보다 체내에서 덜 탈-킬레이트하는 것으로 예상되기 때문에, DOTA 킬레이트의 형태 [Tweedle MF, Gaughan GT, Hagan JT,"1-치환-1, 4,7-트리스카르복시메틸-1, 4,7, 10- 테트라아자시클로도데칸 및 유사체. "US 특허 4,885, 363, Dec. 5,1989] 가 특히 바람직하다.

링커를 통해(예를 들어, DOTA의 카복실레이트 중 하나의 활성화에 의해 활성 에스테르를 형성하고, 이는 그후 링커위에서 아미노 기와 반응되어 안정한 아미드 결합을 형성함) DOTA-타입 거대고리를 표적화 기에 커플링하기 위한 일반적인 방법은 당업자들에게 잘 알려져있다. (예를 들어 Tweedle et al. US 특허 4,885, 363 참조). 커플링은 또한 폴리아자 고리의 백본위에서 변형되는 DOTA-타입 거대고리에서 수행될 수 있다.

특정한 방사선치료 응용에서 사용하기 위해 적절한 핵종의 선택은 다음과 같은 많은 인자들에 의존한다.:

a. 물리적 반감기- 이는 주사하기 전에 상당한 방사능 자연붕괴 없이, 방사선금속과 접합체로부터 방사선치료 구성체의 합성과 정제, 및 상기 구성체의 주사 부위로의 송달을 허용하기위해 충분히 길어야한다. 바람직하게는, 방사선핵종은 약 0.5와 8 일 사이의 물리적 반감기를 가져야 한다.

b. 방사선핵종으로부터 방출(들)의 에너지 - 입자방출기인 방사선핵종(이를 테면 알파 방출기, 베타 방출기 및 Auger 전자 방출기)이 특히 유용한데, 그 이유는 그들이 짧은 거리에 걸쳐서 그들의 에너지를 퇴적하는 고도로 강력한 입자들을 방출하고, 그로인해 고도로 집중된 손상을 생산하기 때문이다. 베타 방출 방사선핵종은 이들 동위원소로부터 베타 입자방출로부터의 에너지가 5 내지 약 150 세포 직경 내에 퇴적되기 때문에, 특히 바람직하다. 이들 핵종으로부터 제조된 방사선치료제는 집중화의 그들의 부위에 비교적 가까운 질환 세포를 죽일 수 있지만, 이를 테면 골수같은 인접한 정상 조직을 손상시키기 위해 먼 거리는 이동할 수 없다.

c. 특이적 활성 (즉, 방사선핵종의 질량 당 방사능)- 높은 특이적 활성 (예를 들어 발생기는 90-Y,111-In, 177-Lu를 생산하였다)을 갖는 방사선핵종이 특히 바람직하다. 방사선핵종의 특이적 활성은 생산의 그것의 방법, 그것을 생산하는데 사용되는 특정한 표적, 및 문제의 동위원소의 성질에 의해 결정된다.

많은 란탄계열원소 및 란타노이드는 그들이 베타 입자들을 방출할때, 그들을 방사선치료제로서 사용하기에 적합하게 만드는 핵 성질을 가지는 방사선동위원소를 포함한다. 이들중 일부가 하기 표에 열거되어 있다.

Pm: 프로메튬, Sm: 사마륨, Dy: 디스프로슘, Ho: 홀뮴, Yb: 이터븀, Lu : 루테튬, Y: 이트륨,ln : 인듐

방사선금속 이를 테면 베타-방출 란탄계열원소 방사선동위원소의 제조 방법은 당업계에 잘 알려져있고, 다른 곳에서 기술되어 있다 [예를 들어 Cutler C S, Smith CJ, EhrhardtGJ. ; Tyler TT, Jurisson SS, Deutsch E. "란탄계열원소 방사선동위원소의 현재 및 잠재적인 치료 용도." Cancer Biother. Radiopharm. 2000 ; 15 (6): 531-545]. 많은 이들 동위원소는 비교적 낮은 비용에 대해 높은 수율로 생산될 수 있고, 많은 것들은 (예를 들어 ⁹⁰-Y, ¹⁴⁹-Pm, ¹⁷⁷-Lu) 담체-없는 특이적 활성에 가깝게 제조될 수 있다 (즉 광대한 대다수의 원자가 방사능이다). 비-방사능 원자는 표적 조직에서 리셉터로의 결합을 위해 그들의 방사능 유사체와 경쟁할 수 있기 때문에, 높은 특이적 활성 방사선동위원소의 사용은 가능한 높은 용량의 방사능을 표적 조직으로 송달을 허용하기 위해, 중요하다.

레늄의 베타-방출 동위원소(^l86-Re 및 ¹⁸⁸-Re)을 함유하는 본 발명의 방사선치료 유도체는 또한 특히 바람직하다.

8. 용량 및 첨가제

본 발명의 화합물을 위한 적절한 용량 스케줄이 당업자들에게 공지되어 있다. 화합물은 이것으로 한정되지는 않지만, 단일 또는 다중 IV 또는 IP 주사를 포함하는, 많은 방법을 사용하여 투여될 수 있다. 방사선약물에 있어서, 하나는 이미징을 허용하기에, 또는 방사선치료의 경우에는, 표적화 GRP-R 갖는 조직의 손상 또는 제거를 초래하기에 충분한 양의 방사능을 투여하지만, 비-표적 (정상 조직) 실제의 손상의 원인이 될 정도는 아니다. 신티그램 촬영 이미징에 필요한 수량과 용량은 위에서 논의된다. 방사선치료에 필요한 수량과 용량은 또한 사용된 동위원소의 에너지와 반감기, 몸으로부터 약제의 섭취와 청소의 정도 그리고 종양의 질량에 따라, 다른 구성체에 대해서 다르다. 일반적으로, 용량은 약 30-50 mCi의 단일 용량 내지 내지 약 3 Curies까지의 누적 용량의 범위가 될 수 있다.

[광학 화합물에 대한 삽입 용량 정보]

본 발명의 조성물은 생리학적으로 허용가능한 완충제를 포함할 수 있고, 주사하기 전에 화합물에 대한 방사선분해 손상을 방지하기 위해서 방사선 안정화제를 필요로할 수 있다. 방사선 안정화제는 당업자들에게 알려져있고, 예를 들어, 파라-아미노벤조산, 아스코르브산, 젠티스트산 등을 포함할 수 있다.

본 발명의 진단 또는 치료제를 제조하는데 필요한 성분들 모두를 함유하는 단일, 또는 다중-물약병 키트는 본 발명의 통합적인 부분이다. 방사선약물의 경우에는, 그러한 키트는 종종 방사선핵종을 제외한 모든 필요한 성분들을 포함할 것이다.

예를 들어, 본 발명의 방사선약물을 제조하기 위한 단일-물약병 키트는 바람직하게는 화학식 M-N-Ｏ-P-G의 킬레이터/링커/표적화 펩티드 접합체, 주석포함 염의 공급원 (만일 환원이 요구된다면, 예를 들어, 테크네튬을 사용할 때), 또는 다른 약학적으로 허용가능한 환원제를 함유하고, 약학적으로 허용가능한 산 또는 염기로 적절하게 완충되어 약 3 내지 약 9의 값으로 pH를 조절한다.

사용된 환원제의 양과 타입은 형성될 교환 착체의 성질에 크게 의존할 것이다. 적절한 조건은 당업자들에게 잘 알려져있다. 키트 내용물은 동결건조 형태인 것이 바람직하다. 그러한 단일 물약병 키트는 선택적으로 이를 테면 글루코헵토네이트, 글루코네이트, 만니톨, 말레이트, 시트르산 또는 타르타르산과 같은 불안정한 또는 교환 리간드를 함유할 수 있고 또한 반응 조절제 이를 테면, 최종 생성물의 방사선화학 순도와 안정성을 개선하는 역할을 하는 디에틸렌트리아민-펜타아세트산 (DPTA), 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA), 또는 α,β, 또는 γ-시클로덱스트린을 함유할 수 있다. 키트는 또한 냉동-건조 공정을 돕기위해 설계되는 안정화제, 벌크화제 이를 테면 만니톨 및 당업자들에게 알려져있는 다른 첨가제를 함유할 수 있다.

다중-물약병 키트 바람직하게는 동일한 일반적인 성분들을 함유하지만, 방사선약물을 재구성하는데 있어서 하나 이상의 물약병을 채택한다. 예를 들어, 하나의 물약병은 퍼테크네테이트 (예를 들어 주석 공급원 또는 다른 환원제)의 첨가시에 불안정한 Tc (V) 착체를 형성하는데 필요한 모든 성분들을 함유할 수 있다. 퍼테크네테이트가 이 물약병에 첨가되고, 적절한 시간을 기다린 후에, 이 물약병의 내용물을, pH를 그것의 최적 값으로 조절하는데 적절한 완충제는 물론이고, 킬레이터와 표적화 펩티드를 함유하는 두번째 물약병에 첨가한다. 약 5 내지 60 분의 반응 시간 후에, 본 발명의 착체가 형성된다. 이 다중-물약병 키트의 두 물약병의 내용물은 동결건조시키는 것이 바람직하다. 상기와 같이, 반응 조절제, 교환 리간드, 안정화제, 벌크화제 등이 한쪽 또는 양쪽 물약병에 존재할 수 있다.

화합물의 일반적인 제조

본 발명의 화합물은 선택된 킬레이터에 의존하여 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 화합물의 펩티드 소부분은 펩티드 합성의 분야에서 일반적으로 확립되고 알려진 기술, 이를 테면 고상 펩티드 합성 (SPPS) 접근법에 의해 가장 편리하게 제조될 수 있다. 그것이 고상 합성에 따르기 때문에, 교호하는 FMOC 보호 및 탈보호를 채택하는 것은 짧은 펩티드를 만드는 바람직한 방법이다. 재조합 DNA 기술은 단백질 및 그것의 긴 단편을 제조하기에 바람직하다.

고상 펩티드 합성 (SPPS)은 불용성 지지체 또는 매트릭스, 이를 테면 폴리스티렌에 연결되는 성장하는 펩티드 사슬에 아미노산 잔기의 단계식 첨가를 수반한다. 펩티드의 C-종말 잔기는 이를 테면 t-부틸옥시카르보닐 기 (Boc) 또는 플루오레닐메톡시카르보닐 (Fmoc) 기와 같은 N-보호제로 보호된 그것의 아미노 기로, 시중에서 입수가능한 지지체에 먼저 고정된다. 아미노 보호 기는 Fmoc에 대해서 Boc 또는 피페리딘의 경우에 적절한 탈보호제 이를 테면 TFA로 제거되고 다음에 아미노산 잔기 (N-보호된 형태로)가 커플링제 이를 테면 디이소프로필카보디이미드 (디C)와 함께 첨가된다. 펩티드 결합의 형성시에, 시약은 지지체로부터 세척되었다. 최종 잔기의 첨가 후에, 펩티드는 적절한 시약 이를 테면 트리플루오로아세트산 (TFA) 또는 플루오르화수소 (HF)로 지지체로부터 분할된다.

분절 커플링을 통한 화합물의 대안적인 제조

본 발명의 화합물은 또한 분절 커플링 또는 단편 축합과 같이 당업계에 알려진 공정에 의해 제조될 수 있다(Barlos, K. andGatos,D. ; 2002, Fmoc 고상 합성 - A Practical Approach ; Eds. Chan, W. C. 및 White, P. D.; Oxford University Press, New York ; Chap. 9, pp 215-228에서의 "수렴 펩티드 합성"). 이 방법 보통 측-쇄 보호된 형태인 펩티드의 분절은, 각각 용액 상 합성 또는 고상 합성 또는 두가지 방법의 조합에 의해 제조된다. 분절의 선택은 중대하고, C-종말 잔기와 N-종말 잔기가 보호되어 펩티드 합성에서 가장 깨끗한 커플링을 제공하는, 다루기쉬운 수의 분절들을 제공할 수 있는 분열 전략을 사용하여 만들어진다. 가장 좋은 분절의 C-말단 잔기는 키랄 알파 카본이 없거나 (탄소에서 글리신 또는 다른 부분 아키랄 oc 커플링 단계에서 활성화될 카르복실기까지) 또는 활성화와 커플링 동안에 라세미화에 대한 경향이 가능한 선책들 중에 가장 낮은 아미노산들로 이루어진다. 각각의 분절에 대한 N-종말 아미노산의 선택은 활성화 아실 중간체의 아미노 기에 대한 커플링의 용이함에 기반한다. 일단 분열 전략이 선택되면 분절의 각각의 커플링의 방법은 필요한 중간체의 합성 접근가능성 및 결과 생성물의 조작과 정제의 상대적 용이함(만일 필요하다면)을 근거로 선택된다. 분절들은 그후 둘다 용액중에, 또는 하나는 고상에서 나머지는 용액중에서 함께 커플링되어, 최종 구조물을 완전히 또는 부분적으로 보호된 형태로 제조한다.

보호된 표적 화합물은 그후 보호기의 제거를 겪고, 정제되고 분리되어 최종 원하는 화합물을 제공한다. 분절 커플링 접근법의 이점은 각각의 분절이 개별적으로 정제될 수 있어서, 사이드 생성물, 이를 테면 불완전 커플링으로부터 기인하는 결손 서열 또는 이를 테면 커플링 단계동안의 측-쇄 아미드 탈수와 같은 반응, 또는 Fmoc 기의 탈보호 동안에 측-쇄의 (이를 테면 Gln의 그것) 알파 아미노 기에 대한 내부 고리화로부터 유도된 것들의 제거를 가능하게 한다는 점이다. 그러한 사이드 생성물은 종래의 수지-기반 '통해 곧장' 펩티드 사슬 어셈블리의 최종 생성물에 모두 존재할 것인 반면에 이들 물질의 제거는 만일 필요하다면 분절 커플링 전략에서 많은 단계에서 수행될 수 있다. 분절 커플링 전략의 또다른 중요한 이점은 분절의 각각의 합성을 높은 순도와 수율로 최적화하기 위해 다른 용매, 시약 및 조건이 적용되어 결과적으로 최종 생성물의 개선된 순도와 수율을 할 수 있다는 것이다. 실현된 다른 이점으로는 시약의 소비 감소와 더 낮은 비용이다.

본 발명의 한가지 구체예에서, 진단 이미징 또는 방사선치료에 사용하기 위한 새롭고 개선된 화합물이 제공된다. 화합물은 의학적으로 유용한 금속 이온은 링커 또는 스페이서 기에 의해 GRP 리셉터 표적화 펩티드에 부착된 방사선핵종 (금속 킬레이터)을 합성할 수 있는 화학 부분을 포함한다. 또다른 구체예에서, 이들 화합물은 링커 또는 스페이서 기에 의해 GRP 리셉터 표적화 펩티드에 부착된, 광학 라벨 (예를 들어 광 영상, 광음향 영상 또는 광발광에 의해 검출가능한 광표지 또는 다른 라벨)을 포함한다.

일반적으로, 본 발명의 화합물은 다음 식을 가질 수 있다:

M-N-Ｏ-P-G

상기식에서 M은 금속 킬레이터(금속 방사선핵종이던 아니던 이것과 합성된 형태로), 또는 광학 라벨이고, N-O-P은 링커이고, G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이다.

금속 킬레이터 M은 의학적으로 유용한 금속 이온 또는 방사선핵종과 합성하기 위해 당업계에 알려진 금속 킬레이터 중 어느것이 될 수 있다. 바람직한 킬레이터는 DTPA, DOTA, D03A,HP-D03A, EDTA, TETA, EHPG, HBED, NOTA, DOTMA, TETMA, PDTA, TTHA, LICAM, MECAM, 또는 펩티드 킬레이터, 이를 테면, 예를 들어, 본원에서 논의된 것들을 포함한다. 금속 킬레이터는 금속 방사선핵종과 합성되거나 합성되지 않을 수 있고, 선택적인 스페이서 이를 테면 단일 아미노산을 포함할 수 있다. 신티그램촬영 또는 방사선치료을 위해 바람직한 금속 방사선핵종은 ^99mTc,⁵¹Cr,⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga,⁴⁷Sc, ⁵¹Cr, ¹⁶⁷Tm, ¹⁴¹Ce, ¹¹¹In, ¹⁶⁸Yb, ¹⁷⁵Yb, ¹⁴⁰La, ⁹⁰Y, ⁸⁸Y, ¹⁵³Sm, ¹⁶⁶Ho, ¹⁶⁵Dy, ¹⁶⁶Dy, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁹⁷Ru, ¹⁰³Ru, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ²⁰³Pb, ²¹¹Bi, ²¹²Bi, ²¹³Bi, ²¹⁴Bi, ¹⁰⁵Rh, ¹⁰⁹Pd, ^117mSn, ¹⁴⁹Pm, ¹⁶¹Tb, ¹⁷⁷Lu, ¹⁹⁸Au 및 ¹⁹⁹Au을 포함한다. 금속의 선택은 원하는 치료 또는 진단 응용에 기초하여 결정될 것이다. 예를 들어, 진단 목적을 위해서 바람직한 방사선핵종은 Tc와 함께 ⁶⁴Cu, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ^99mTc, 및 ¹¹¹In을 포함하고, ¹¹¹In이 특히 바람직하다. 치료 목적을 위해, 바람직한 방사선핵종은 ^l77Lu와 함께, ⁶⁴Cu, ⁹⁰Y, ¹⁰⁵Rh, ¹¹¹In, ^117mSn, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ¹⁶¹Tb, ¹⁶⁶Dy, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁵Yb, ¹⁷⁷Lu, ^186/188Re, 및 ¹⁹⁹Au를 포함하고 ⁹⁰Y은 특히 바람직하다. 본 발명의 화합물에 사용된 가장 바람직한 킬레이터는 1-치환 4,7,10-트리카르복시메틸 1,4,7,10; 테트라아자시클로도데칸 트리아세트산 (D03A)이다.

광학 라벨 M은 당업계에 알려진 다양한 광학 라벨 중 어떤 것이 될 수 있다. 바람직한 라벨은 제한없이, 유기 발색단 또는 형광발색단, 이를 테면 시아닌 염료 광-흡수하는 화합물, 광-반사 및 산란 화합물을 포함하는 광학 염료, 및 생물발광 분자를 포함한다.

한가지 구체예에서, 링커 N-O-P는 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유한다.

또다른 구체예에서, 링커 N-O-P는 적어도 하나의 치환된 쓸개즙 산을 함유한다.

여전히 또다른 구체예에서, 링커 N-O-P는 고리기를 갖는 적어도 하나의 비-알파 아미노산을 함유한다.

GRP 리셉터 표적화 펩티드는 GRP, 봄베신 또는 그것의 어떠한 유도체 또는 유사체가 될 수 있다. 바람직한 구체예에 있어서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 작용제로서 작용하는 GRP 또는 봄베신 유사체이다. 특히 바람직한 구체예에서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 본원에서 참고문헌에 의해 포함되는 U. S. Pat. 6,200, 546 및 US 2002/0054855에서 개시된 봄베신 작용제 결합 부분이다.

본 발명의 화합물을 사용하는 이미징의 신규 방법이 제공된다.

본 발명의 진단 또는 치료제를 제조하는데 필요한 성분들의 모두를 함유하는 단일 또는 다중-물약병 키트가 본 발명의 예시 구체예에서 제공된다.

주사가능한 이미징 배지에 본 발명의 화합물을 함유하는 물질을 추가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징 약제를 제조하기 위한 신규 방법이 더욱 제공된다.

본 발명의 화합물을 사용하는 방사선치료의 신규 방법이 또한 제공되고, 주사가능한 치료 배지에 본 발명의 화합물을 포함하는 물질을 추가하는 단계를 포함하는, 방사선치료제를 제조하기 위한 신규 방법으로서 제공된다.

하기 실시예는 본 발명의 각종 화합물을 제조하는데 사용될 수 있는 상이한 방법의 실시예로서 제공된다. 각각의 실시예 내에서, 단일의 굵은 대문자(예를 들어, A, B, C)로 확인되는 화합물이 존재하는데, 이것은 확인된 도면 중 동일한 표지된 대응 화합물과 상호관련한다.

일반적 실험

A. 사용되는 약어의 정의

다음 공통 약어가 본 명세서 전체에서 사용된다:

1,1-디메틸에톡시카르보닐(Boc 또는 Boc)

9-플루오레닐메틸옥시카르보닐(Fmoc) ;

1-히드록시베노조트리아졸(HOBT);

N, N'-디이소프로필카르보디이미드(DIC);

N-메틸피롤리디논(NMP);

아세트산 무수물 (Ac₂O);

(4,4-디메틸-2,6-디옥소시클로헥스-1-일이덴)-3-메틸부틸(iv-Dde);

트리플루오로아세트산(TFA);

시약 B (TFA:H₂0:페놀:트리이소프로필실란, 88:5:5:2);

디이소프로필에틸아민(DIEA);

O-(1H-벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU);

0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오르포스페이트(HATU);

N-히드록시숙신이미드(NHS);

고형 상 펩티드 합성(SPPS);

디메틸술폭시드(DMSO);

디클로로메탄 (DCM);

디메틸포름아미드 (DMF);

디메틸아세타미드(DMA) ;

1,4,7,10-테트라아자시클로테트라데칸-1,4,7,10-테트라아세트산(DOTA);

트리이소프로필실란 (TIPS);

1,4,7,10-테트라아자시클로테트라데칸-1,4,7,10-테트라아세트산(DOTA)(1R)-1-[1,4,7,10-테트라아자-4,7,10-트리스(카르복시메틸)시클로도데실]에탄-1,2-디카르복실산(CMDOTA);

태아 소 혈청 (FBS);

사람 혈청 알부민 (HSA);

사람 전립샘 암 세포주 (PC3);

이소부틸클로로포르메이트(IBCF) ;

트리부틸 아민 (TBA) ;

방사성화학 순도 (RCP); 및

고성능 액체 크로마토그래피(HPLC).

B. 재료

사용된 Fmoc-보호된 아미노산은 Nova-Biochem(San Diego, CA, USA), Advanced Chem Tech(Louisville, KY. , USA), Chem-Impex International(Wood Dale Ill., USA), 및 Multiple Peptide System(San Diego, CA., USA)으로부터 구매하였다. 합성을 위해 필요한 다른 화학물질, 시약 및 흡착제는 Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI, USA) 및 VWR Scientific Products(Bridgeport, NJ., USA)로부터 얻었다. 펩티드 합성을 위한 용매는 Pharmco Co.(Brookfield CT., USA)로부터 얻었다. HPLC 분석 및 정제를 위한 컬럼은 Water Co.(Milford, MA., USA)로 부터 얻었다. 실험상의 세부사항은 상업적으로 이용가능하지 않은 것에 대하여 하기에 제공된다.

C. 펩티드 합성을 위한 기구 사용

펩티드는 Advanced ChemTech 496 Ω MOS 합성기, Advanced ChemTech 357 FBS 합성기를 이용 및/또는 수동 펩티드 합성에 의하여 제조하였다. 그러나 반복 탈보호를 위한 프로토콜 및 사용된 사슬 확장이 모두에 대하여 동일하였다.

D. Symphony 기계장치를 이용한 자동화 합성(Rainin사 제조)

합성을 Protein Technologies Inc.에 의해 공급되는 Symphony Version 3를 이용하여 작업하였다. 0.25 mmol/g의 치환을 갖는 Novagel TGR 수지가 사용되었거, 각 웰은 2 g의 수지(50 μmol)를 함유하였다. 아미노산을 NMP에 용해시켰으며 농도는 0.25M이었다. 0.25M 용액의 HBTU 및 DMF 중 N-메틸모르폴린을 제조하여 커플링을 위해 이용하였다. 모든 커플링은 2.0 시간 동안 수행하였다. 절단은 다른 반응 용기에 수지를 옮기고 수동 합성과 같이 시약 B를 이용함으로써 기계 외부에서 수행하였다.

E. 분석 및 정제를 위해 사용된 기구 사용

분석적 HPLC를 시스템 제어, 데이터 획득, 및 작업 과정 후를 위하여 Shimadzu-ClassVP 소프트웨어 버전 4.1을 이용하는 Shimadzu-LC-10A 듀얼 펌프 기울기 분석 LC 시스템을 사용항 수행하였다. 질량 스펙트럼을 Waters Associates XTerra MSC18 컬럼(4.6 mm x 50 mm, 5μ 입자, 120Å 구멍) 상에서 직접 유동 주입 또는 주입을 위해 적합화 된 Agilent Technologies1100 시리즈 자동샘플기로서 적합화 된 Hewlett-Packard Series 1100 듀얼 펌프 기울기 HPLC 시스템과 연결되는 Hewlett-Packard Series 1100 MSD 질량 분광계 상에서 얻었다. 기구는 샘플 기탁을 위한 "MSD Anyone" 소프트웨어 및 기구 제어 및 데이터 획득을 위한 HP Chemstation 소프트웨어를 이용하여 HP Kayak 워크스테이션에 의해 구동시켰다. 대부분의 경우에 샘플을 1 mg/mL의 농도에서 샘플 용액의 5μL 주입을 이용하여 직접 주입을 통해 도입시켰고 양이온 전기분사를 이용하여 분석하여 구조의 형성을 위한 m/e 및 m/z(다중 하전된) 이온을 획득하였다. ¹H-NMR 스펙트럼은 500 MHz의 Varian Innova 분광계 상에서 얻었다. ¹³C-NMR 스펙트럼은 125.73 MHz에서 상기와 동일한 기구에서 얻었다. 일반적으로 잔여 ¹H 흡수, 또는 ¹³C-NMR의 경우에 있어서, 사용된 용매의 ¹³C 흡수는 내부 기준으로서 이용되었고; 다른 경우에 있어서 테트라메틸실란(μ= 0.00 ppm)을 사용하였다. 공명값은 μ 단위로 주어진다. 마이크로-분석 데이터는 Quantitative Technologies Inc. Whitehouse NJ로부터 얻었다. 예비 HPLC는 시스템 제어, 데이터 획득, 마찰 수집 및 작동 공정 후를 위하여 Shimadzu-ClassVP 소프트웨어 버전 4.3을 사용하는 Shimadzu-LC-8A 듀얼 펌프 기울기 예비 HPLC 시스템상에서 수행하였다.

F. 펩티드 합성을 위한 일반적 과정

링크 Amide-Novagel HL 수지(0.6mmol/g)을 고형 지지체로서 사용하였다.

G. 커플링 과정

전형적인 실험에서, 제 1 아미노산은 0.1 g의 수지(0.06 mmol) 상으로 로딩시켰다. NMP 중 적절한 Fmoc-아미노산(0.25M 용액; 0.960 mL를 수지에 첨가 한 후 N-히드록시벤조트리아졸(NMP 중 0.5M; 0.48 mL)을 첨가하였음)및 반응 블럭(자동화된 펩티드 합성의 경우에 있어서) 또는 개별 반응 용기(수동 펩티드 합성의 경우에 있어서)를 약 약 2분 동안 진탕하였다. 위의 것을 혼합하기 위해, 디이소프로필카르보디이미드(NMP 중 0.5 M; 0.48 mL)를 첨가하고 반응 혼합물을 주변 온도에서 4 시간 동안 진탕하였다. 그 후 반응 블럭 또는 개별 반응 용기를 건조 질소의 양성 압력의 적용에 의해 반응물을 정화시켰다.

H. 세척 과정

반응 블럭의 각 웰을 1.2 mL의 NMP로 채우고 상기 블럭을 5 분간 진탕하였다. 용액을 질소의 양압 하에서 배수시켰다. 이러한 과정을 3회 반복하였다. 동일한 과정을개별 반응 용기를 이용하는 수동 합성의 경우에, 적절한 부피의 NMP와 함께 사용하였다.

I. Fmoc 기의 제거

Fmoc-보호된 아미노산을 함유하는 수지를 DMF(v/v) 중 1.5 mL의 20% 피페리딘으로 처리하고 반응 블럭 또는 개별 수동 합성 용기를 15분 동안 진탕하였다. 상기 용액을 수지로부터 배수시켰다. 이러한 과정을 1회 반복하고 수지를 상기 설명되는 세척 괴정을 사용하여 세척하였다.

J. 리간드의 최종 커플링(DOTA 및 CMDOTA)

펩티드 링커 구조가 결합된 수지의 N-종말 아미노 기를 탈블럭화시키고 수지를 세척하였다. 원하는 리간드의 0.25M 용액 및 NMP 중 HBTU를 제조하고 DIEA의 2배 등가로 처리하였다. 활성화 리간드의 결과의 용액을 상기 수지(1.972mL ; 0.48 mmol)에 첨가하고 반응 혼합물을 24-30시간 동안 주변 온도에서 진탕하였다. 용액을 배수시키고 수지를 세척하였다. 수지의 최종 세척은 1.5 mL 디클로로메탄(3X)으로 수행하였다.

K. 최종 펩티드의 탈보호 및 정제

시약 B의 용액(2 mL; 88: 5: 5: 2-TFA: 페놀: 물: TIPS)을 수지에 첨가하고 반응 블럭 또는 개별 용기를 주변 온도에서 4.5 시간 동안 진탕하였다. 탈보호된 펩티드를 함유하는 결과의 용액을 물약병 내에서 배수시켰다. 이러한 과정을 1 mL의 시약 B로 2회 더 반복하였다. 조합된 여과액을 Genevac HT-12 series II 농축기를 이용하여 감압하에서 농축시켰다. 그 후 각 물약병 중 잔여물을 2 mL의 Et₂O로 분말화하고 상청액을 따라 버렸다. 이러한 과정을 2회 반복하여 무색의 고체로서 펩티드를 제공하였다. 조 펩티드를 물/아세토니트릴에 용해시키고 Waters XTerra MSC18 예비 HPLC 컬럼(50 mm x 19 mm, 5 마이크론 입자 크기, 120Å 구멍 크기) 또는 Waters-YMCC18 ODS 컬럼 (250 mm x 30 mm i.d., 10 마이크론 입자 크기. 120Å구멍 크기)을 이용하여 정제시켰다. 생성물을 포함하는 단편을 수집하고 HPLC에 의해 분석하였다. >95% 순도를 갖는 단편을 집합시키고 펩티드를 동결건조 하여 단리시켰다.

예비 HPLC를 위한 조건 (Waters XTerra 컬럼):

용리율: 50 mL/min

검출: UV,λ = 220 nm

용리액 A: 0.1 % aq. TFA; 용매 B: 아세토니트릴(0.1 % TFA).

HPLC 분석을 위한 조건:

컬럼: Waters XTerra (Waters Co..; 4.6 x 50 mm; MS C18 ; 5 마이크론 입자, 120Å 구멍).

용리율: 3 mL/분; 검출: UV,λ= 220 mn.

용리액 A: 0.1% aq. TFA; 용매 B: 아세토니트릴(0.1% TFA).

실시예 I-도1A-B

개요: 도1A-B에서 나타내는 바와 같이, L62를 다음 단계를 이용하여 제조하였다: (3β, 5β)-3-아미노콜라-24-노산 메틸 에스테르 A와 NaOH와의 가수분해는 대응하는 산 B를 제공하는데, 그 후 이것은 Fmoc-Cl과 반응하여 중간체 C를 제공하였다. 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN[7-14][SEQ ID NO:1])과 작용화 된 링크 아미드 수지를 C, Fmoc-글리신 및 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 후속하여 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물(crude)을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L62를 제공하였다. 총 수율: 2.5%. 하기에 보다 상세히 제공된다:

A. 봄베신[7-14]과 작용화 된 링크 아미드 수지, ( A )

고형 상 펩티드 합성 용기에서(동봉물 No.1 참조) Fmoc-아미노산(24 mmol), N-히드록시벤조트리아졸(HOBt) (3.67 g; 24 mmol), 및 N,N'-디이소프로필카르보디이미드(DIC)(3.75mL ; 24 mmol)을 후속하여 DMF (45 mL) 중 링크 아미드 NovaGel 수지(10 g ; 6.0 mmol) A의 현탁액에 첨가시켰다. 상기 혼합물을 벤치 탑 진탕기를 이용하여 실온에서 3 시간 동안 진탕한 후, 용액을 비우고 수지를 DMF(5 x 45 mL)로 세척하였다. 상기 수지를 4 분 동안 DMF (45 mL) 중 25% 피페리딘과 함께 진탕하고, 용액을 비운 다음 DMF (45 mL) 중 신선한 25% 피페리딘을 첨가하였다. 상기 현탁액을 10분 동안 진탕한 후, 용액을 비우고 수지를 DMF (5 x 45 mL)로 세척하였다.

이러한 과정을 다음 아미노산을 위하여 후속적으로 사용하였다:N-α- Fmoc-L-메티오닌, N-α-Fmoc-L-류신, N-α-Fmoc-N-im-트리틸-L-히스티딘, N-α-Fmoc- 글리신, N-α-Fmoc-L-발린, N-α-Fmoc-L-알라닌, N-α-Fmoc-N-in-Boc-L-트립토판.

마지막 커플링 반응에서 N-α-Fmoc-N-γ-트리틸-L-글루타민(14.6 g; 24 mmol), HOBt (3.67 g; 24 mmol), 및 DIC (3.75 mL; 24 mmol)을 DMF(45 mL) 중 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMF (5 x 45 mL), CH₂C1₂ (5 x 45 mL)로 세척하고 진공건조 시켰다.

B. 중간체 B 및 C 의 제조(도 1A):

1. (3β,5β)-3-아미노콜라-24-노산( B )의 합성

NaOH (16.6 mL; 16.6 mmol)의 1M 용액을 45 ℃에서 MeOH (65 mL) 중 (3β,5β)-3-아미노콜라-24-노산 메틸 에스테르 (5.0 g; 12.8 mmol)에 적가하였다. 45 ℃에서3시간 진탕 후, 혼합물을 25 mL로 농축시키고 H₂O (40 mL) 및 1 M HCl (22 mL)을 첨가하였다. 침전된 고체를 여과하고, H₂O(2 x 50 mL)로 세척하고 진공 건조하여 백색 고체(5.0 g; 13.3 mmol)로서 B를 얻었다 . 수율 80%.

2. (3β,5β )-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노콜라-24-노산( C )의 합성

1,4-디옥산(9 mL) 중 9-플루오레닐메톡시카르보닐 클로라이드(0.76 g; 2.93 mmol)를 10% aq. Na₂C0₃(16 mL) 중 (3β, 5β)-3-아미노콜라-24-노산 B(1.0 g; 2.66 mmol)의 현탁액에 적가하고 1,4-디옥산(9 mL)를 0℃에서 교반하였다. 실온에서 6 시간 진탕 후 H₂O(90 mL)를 첨가하고, 수성 상을 Et₂O (2 x 90 mL)로 세척한 다음 및 2 M HCl(15 mL)을 첨가하였다(최종 pH: 1.5). 수성 상을 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하고, 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고 증발시켰다. 미정제물을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체(1.2 g; 2.0 mmol)로서 C를 얻었다. 수율 69%.

C. L62 (N-[(3β ,5β )-3-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]-콜란-24-일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드) (도 1B)의 합성:

수지 A (0. 5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린을 포함하는 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 교만하였고, 상기 용액을 비운 다음 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 20분 동안 진탕한 후 용액을 비워내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β ,5β)-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노콜라-24-노산 C(0.72 g; 1.2 mmol), N-히드록시벤조트리아졸 (HOBT) (0.18 g; 1.2 mmol), N,N'-디이소프로필카르보디이미드(DIC) (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 그 후 상기 수지를 10 분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 상기 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-글리신(0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 이어서 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린으로 세척하고, 용액을 비워 내고, 신선한 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척한 후 NaCl(0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,1-디메틸에틸)에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 상기 수지를 4.5식나 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스트 내에서 진탕하였다. 상기 수지를 여과시키고 용액을 감압 하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이것을 Et₂O(20 mL)로 분말화 하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O(3 x 20 mL)로 세척한 후, HPLC에 의해 분석하고 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 (6.6 mg; 3.8x10^-3 mmol) L62를 얻었다. 수율 4.5%.

실시예 II-도2A-F

L70, L73, L74, L115 및 L116의 합성

요약: 생성물을 다른 링커들과 함께 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN[7-14][SEQ ID NO:1])(적절한 측쇄 보호를 가짐)의 커플링에 의해 얻은 후, DOTA 트리-t-부틸 에스테르로 작용화 하였다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 최종 생성물을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 총 수율 3-9%.

A. L70 의 합성(도 2A):

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린을 이용하여 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 상기 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-4-아미노벤조산 (0.43 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속하여 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린으로 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 상기 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-글리신(0.36 g; 1.2 mmol) HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)를 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 진탕시키고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 이어서 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린으로 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕시켰다. 상기 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,1-디메틸에틸)에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공건조 시켰다. 수지를 4 시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 여과액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이 미정제물을 Et₂O (5 mL)로 분말화 하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척한 후, HPLC에 의해 분석하고 및 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 플러피한(fluffy) 고체 (6.8 mg; 0.005 mmol)로서 L70을 얻었다. 수율 3%.

B. L73 , L115 및 L116 의 합성 (도. 2B-2E):

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-링커-OH (1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린으로 진탕하고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척한 다음 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과하고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성의 미정제물을 제공하였으며, 이것을 Et₂O(5mL)를 이용하여 분말화 하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척한 후, HPLC에 의해 분석하고 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켰다.

C. L74 의 합성 (도 2F):

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMF (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-이소니페코트산(0.42 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 및 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-글리신 (0.36 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕한 후, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 지탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(1,1- 디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL),CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과하고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이 유성미정제물을 Et₂O (5 mL)를 이용하여 분말화하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척한 후, HPLC에 의해 분석하고 HPPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 플러피한 고체 (18.0 mg; 0.012 mmol)로서 L74를 얻었다. 수율 8%.

실시예 III-도3A-E

L67의 합성

요약: (3β,5β)-3-아미노-12-옥소콜라-24-노산 메틸 에스테르 A의 NaOH를 이용한 가수분해는 대응 산 B를 제공하였고, 후속하여 이것을 Fmoc-글리신과 반응시켜서 중간체 C를 얻었다. 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN [7-14][SEQ ID NO:1])를 이용하여 작용화 된 링크 아미드 수지를 후속적으로 C, 및 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L67을 얻었다. 총 수율: 5.2%.

A. 합성 (3β,5β)-3-아미노-12-옥소콜라-24-노산,(B) (도3A)

NaOH (6.6 mL; 6.6 mmol)의 1M 용액을 45℃에서 MeOH(15 mL) 중 (3β, 5β)-3-아미노-12-옥소콜라-24-노산 메틸 에스테르 A (2.1 g; 5.1 mmol)의 용액에 적가하였다. 45℃에서 3시간 교반 후, 혼합물을 25 mL로 농축시킨 다음 H₂0 (25 mL) 및 1 M HC1 (8 mL)을 첨가하였다. 침전된 고체를 여과시키고, H₂0(2 x 30 mL)로 세척하고 진공 건조 시켜서 백색 고체 (1.7 g; 4.4 mmol)로서 B를 얻었다. 수율88%.

B. (3β,5β)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-12-옥소콜라-24-노산( C )의 합성(도 3A)

트리부틸아민 (0.7 mL; 3.1 mmol)을 0℃에서 교반된 THF(25 mL) 중 N-α- Fmoc-글리신 (0.9 g; 3.1 mmol)의 용액에 적가하였다. 이소부틸 클로로포르메이트(0.4 mL; 3.1 mmol)를 그 후에 첨가하고, 10분 후에, 트리부틸아민 (0.6 mL; 2.6 mmol) 및 DMF(30 mL) 중 (3β,5β)-3-아미노-12-옥소콜라-24-노산 B (1.0 g; 2.6 mmol)의 현탁액을 1 시간에 걸쳐서 냉각 용액 내로 적가하였다. 혼합물이 가온되도록 허용하고 6시간 후 용액을 40 mL로 농축시킨 다음, H₂0 (50 mL) 및 1 N HC1 (10 mL)을 첨가하였다(최종 pH: 1.5). 침전된 고체를 여과하고, H₂0 (2 x 50 mL)로 세척하고, 진공 겆조 시키고 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체(1.1 g; 1.7 mmol)로서 C를 얻었다. 수율 66%.

C. L6 (N-[(3β,5β)-3-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10- 테트라아자시클로도데-l-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노l-12,24-디옥소콜라-24-닐]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드)의 합성 (도 3B 및 3E).

수지 D (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시켰고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β,5β)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노]-12-옥소콜라-24-노산 C (0.80 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19mL ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl(0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4.5시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이것을 Et₂0 (20 mL)로 분말화 하였다.

실시예IV-도 4A-H

L63 및 L64의 합성

요약: (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 메틸 에스테르의 NaOH를 이용한 가수분해는 중간체 2b를 제공하였으며, 후속하여 이것을 Fmoc-글리신과 반응시켜서 3b를 얻었다. 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 (BBN [7-14][SEQ ID NO:1])를 이용하여 작용화 된 링크 아미드 수지를 3b와 반응시킨 다음 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L64를 얻었다. 동일한 과정을 반복하여 사전에 이용가능한 중간체 2b로부터 출발하여 L63을 얻었다. 총 수율:각각 9 및 4%.

A. (3β,5β,7α,12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산,( 2b )의 합성 (도 4A)

NaOH (130 mL; 0.13 mol)의 1M 용액을 45℃에서 가열된 MeOH(300 mL) 중 (3 0, 50, 7a, 12a)-3-아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 메틸 에스테르 lb (42.1 g; 0.10 mol)의 용액에 적가하였다. 45℃에서3시간 교반한 후, 혼합물을 150 mL로 농축시키고 H₂0(350 mL)를 첨가하였다. CH₂C1₂(2x100 mL)를 이용하여 추출한 후 수성 용액을 200 mL로 농축시키고 1 M HCl (150 mL)을 첨가하였다. 침전된 고체를 여과하고, H₂0 (2 x 100 mL)로 세척하고 및 진공 건조 시켜서 백색 고체 (34.8 g; 0.08 mol)로서 2b를 얻었다. 수율 80%.

B. (3β,5β,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-12-히드록시콜라-24-노산, ( 3a )의 합성 (도4A)

트리부틸아민 (4.8 mL; 20.2 mmol)을 0℃에서 교반된 THF(120 mL) 중 N-α- Fmoc-글리신 (6.0 g; 20.2 mmol)의 용액에 적가하였다. 이소부틸클로로포르메이트(2.6 mL; 20.2 mmol)을 그 후에 첨가하고, 10 분 후, 트리부틸아민 (3.9 mL; 16.8 mmol) 및 DMF (120 mL) 중 (3β, 5β, 12α)-3-아미노-12-히드록시콜라-24-노산 2a (6.6 g; 16.8 mmol)의 현탁액을 냉각된 용액 내로 1시간에 걸쳐서 적가하였다. 혼합물을 가온되도록 허용하고 6시간 후 용액을 150 mL로 농축시킨 후, H2O(250 mL) 및 1N HC1 (40 mL)를 첨가하였다(최종 pH: 1.5). 침전된 고체를 여과하고, H₂O (2 x 100 mL)로 세척하고, 진공건조 시키고 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체(3.5 g; 5.2 mmol)로서 3a를 얻었다. 수율 31%.

C. (3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노] 아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산,( 3b )의 합성 (도 4A)

트리부틸아민 (3.2 mL; 13.5 mmol)을 0℃에서 교반된 THF(80 mL) 중 N-α- Fmoc-글리신 (4.0 g; 13.5 mmol)의 용액에 적가하였다. 이소부틸클로로포르메이트(1.7 mL; 13.5 mmol)를 그후에 첨가하고, 10분 후, 트리부틸아민 (2.6 mL; 11.2 mmol) 및 DMF (80 mL) 중 (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 3a (4.5 g; 11.2 mmol)의 현탁액을 1시간에 걸쳐서 냉각된 용액 내로 적가하였다. 혼합물을 가온되도록 허용하고 6 시간 후 용액을 120 mL로 농축시키고 H₂0 (180 mL) 및 1 N HC1 (30 mL)을 첨가하였다(최종 pH: 1.5). 침전된 고체를 여과하고, H₂O (2 x 100 mL)로 세척하고, 진공 건조 시키고 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체(1.9 g; 2.8 mmol)로서 3a를 얻었다. 수율 25%.

대안적인 방법에 있어서, (3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산, (3b)는 다음과 같이 제조될 수 있다:

후속하여 N-히드록시숙신이미드 (1.70 g, 14.77 mmol) 및 DIC (1.87 g, 14.77 mmol)를 디클로로메탄(15 mL) 내 Fmoc-Gly-OH (4.0 g, 13.45 mmol)의 교반된 용액으로 첨가하였다; 결과의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 형성된 N,N'-디이소프로필우레아를 여과에 의해 제거하고 고체를 에테르(20 mL)로 세척하였다. 휘발성 물질을 제거시키고 형성된 고체 Fmoc-Gly-숙신이미딜 에스테르를 에테르(3 x 20 mL)로 세척하였다. 이어서 Fmoc-Gly-숙신이미딜 에스테르을 건조 DMF (15 mL)에 재용해시키고 3-아미노데옥시담즙산 (5.21 g, 12.78 mmol)을 깨끗한 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하고, 물(200 mL)를 첨가하고 침전된 고체를 여과하고, 물로 세척하고, 건조하였으며 실리카 겔 크로마토그래피(TLC (실리카): (Rf :0.50, 실리카 gel,CH2C12/CH30H, 9: 1) (eluant:CH2C12/CH3OH (9: 1) )에 의해 정제하여 무색 고체로서 (3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산을 얻었다. 수율: 7.46 g (85 %).

D. L63 (N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]-12-히드록시-24-옥소콜라-24-닐]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드)의 합성 (도4B)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)을 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 헌탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β,5β,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9- 일메톡시) 아미노] 아세틸] 아미노-12-히드록시콜라-24-노산 3a (0.82 g ; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL ; 1. 2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고서, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0. 79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,1-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 혼합물을 24 시간 동안 실온에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL),CH₂C1₂(5 x 7 mL)로 세척한 다음 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 상기 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂O(5 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척한 후, 분석하고 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 플러피한 고체(12.8 mg; 0.0073 mmol)로서 L63을 얻었다. 수율 9%.

E. L64 (N-[(3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]-7,12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드)의 합성 (도 4C)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA(7 mL) 내 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 20분 동안 교반하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β, 5β, 7α, 12α)-3- [[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 3b (0.81 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린으로 세척하고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가한 후 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함게 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이 미정제물을 Et₂O (5 mL)를 이용하여 분말화하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척하였다. 후속하여 그것을 H₂0 (20 mL)에 용해시키고, Na₂C0₃(0. 10 g;0.70 mmol)를 첨가하였다; 결과의 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이 용액을 HPLC에 의해 정제하고, 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 플러피한 고체(3.6 mg; 0.0021 mmol)로서 L64를 얻었다. 수율 4%.

실시예V-도5A-E

L71 및 L72의 합성

요약: 생성물을 2단계에 있어서 얻었다. 제 1 단계는 상기 논의된 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN[7-14] [SEQ ID NO: 1])(적절한 측쇄 보호기를 가짐)의 고체 상 합성이었다. 제 2 단계는 다른 링커들을 이용하여 커플링한 후 DOTA tri-t-부틸 에스테르를 이용하여 작용화 하는 것이었다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 최종 생성물을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 총 수율 3-9%.

A. 봄베신[7-14] 작용화 및 절단 과정 (도 5A 및 5D)

수지 B (0.5g ; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-링커-OH (1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19mL ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 이어서 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 낸 후, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl C (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC(0. 19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂Cl₂(5 x 7 mL)로 세척한 후 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과하고 여과액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻고, 그것을 에테르(5 mL)로 분말화하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 에테르(5 x 5 mL)로 세척한 다음, 분석 HPLC에 의해 분석하고 예비 HPLC의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켰다.

B. 생성물

1. L71 (4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]메틸]벤조일-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드)

생성물을 백색 플러피한 고체(7.3 mg; 0.005 mmol)로서 얻었다. 수율 7.5%.

2. L72 ( Trans -4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]메틸]시클로헥실카르보닐-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드)

생성물을 백색 플러피한 고체(7.0 mg ; 0.005 mmol)로서 얻었다. 수율 4.8%.

C. Trans -4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]시클로헥산카르복실산, ( D ) (도 5E)

1,4-디옥산(40 mL) 중 N-(9-플루오레닐메톡시카르보닐옥시)숙신이미드(4.4 g; 14.0 mmol)의 용액을 0℃까지 냉각된 10% Na2CO3(30 mL) 중 trans-4-(아미노메틸)시클로헥산카르복실산 (2.0 g; 12.7 mmol)의 용액에 적가하였다. 상기 혼합물이 주변 온도로 가온되도록 허용한 다음 실온에서 1시간 교반한 후 최종 pH가 2일 때 까지 1N HC1 (32 mL)로 처리하였다. 결과의 용액을 n-BuOH (100 mL)로 추출하였다; 휘발성 물질을 제거하고 미정제물 잔기를 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체(1.6 g; 4.2 mmol)로서 D를 얻었다. 수율 33%.

실시예 VI-도 6A-F

L75 및 L76의 합성

요약: 2개의 생성물을 2개의 링커 E 및 H와 함께 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂ (BBN [7-14] [SEQ ID NO:1])(A)의 커플링에 의해 얻은 후, DOTA 트리-t-부틸 에스테르를 이용하여 작용화하였다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 최종 생성물을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 총 수율: 8.5% (L75) 및 5.6% (L76).

A. 2-[(1,3-디히드로-1,3-디옥소-2H-이소인돌-2-일)메틸]벤조산, ( C ) (도 6A)

생성물을 문헌(Bornstein, J; Drummon, P. E.; Bedell, S. F. Org Synth. Coll. Vol. IV 1963, 810-812)에 보고된 과정에 따라서 합성하였다.

B. 2-(아미노메틸)벤조산, ( D ) (도 6A)

메틸아민 (6.14 mL; 7.1 mmol)의 40% 용액을 2-[(1,3-디히드로-1,3-디옥소-2H-이소인돌-2-일)메틸]벤조산 C (2 g ; 7.1 mmol)에 첨가한 후 EtOH (30 mL)를 첨가하였다. 실온에서 5분 교반한 후 반응 혼합물을 50℃에서 가열하였다. 2.5시간 후, 혼합물을 냉각시키고 용매를 감압하에서 증발시켰다. 조 생성물을 50 mL의 무수 에탄올에 현탁시키고 현탁액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 고체를 여과시키고 EtOH로 세척하여 2-(아미노메틸) 벤조산 D (0.87 g; 5.8 mmol)를 얻었다. 수율 81%.

C. 2-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]벤조산, ( E ) (도

6A)

생성물을 문헌(Sun, J-H.; Deneker, W. F. Synth. Commun. 1998,28, 4525-4530)에 보고된 과정에 따라 합성하였다.

D. 4-(아미노메틸)-3-니트로벤조산, ( G ) (도 6B)

4-(브로모메틸)-3-니트로벤조산(3.2 g; 12.3 mmol)을 EtOH (300 mL) 중 8% NH₃에 용해시키고 결과의 용액을 실온에서 교반하였다. 22시간 후 용액을 증발시키고 잔여물을 H₂0 (70 mL)에 현탁시켰다. 상기 현탁액을 15분 동안 교반하고 여과시켰다. 수집된 고체를 H₂0 (40 mL)에 현탁시키고 25% aq. NH₄0H (pH 12)의 몇방울을 첨가하여 용해시킨 후, 용액의 pH를 6 N HCl의 첨가에 의해 6으로 조절하였다. 침전된 고체를 여과하고, 그 다음 MeOH (3 x 5 mL), 및 Et₂0 (10 mL)로 세척하고 진공 건조 시켜서(1.3 kPa; P₂0₅) 엷은 갈색 고체(1.65 g; 8.4 mmol)로서 4-(아미노메틸)-3-니트로벤조산을 얻었다. 수율 68%.

E. 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-니트로벤조산, ( H )(도 6B)

4-(아미노메틸)-3-니트로벤조산 G (0.8 g; 4 mmol)를 10% aq. Na₂CO₃ (25 mL) 및 1,4-디옥산 (10 mL)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시켰다. 1,4-디옥산(10 mL) 중 9-플루오레닐메틸 클로로포르메이트(Fmoc-Cl) (1.06 g; 4 mmol)의 용액을 20분 동안 적가하였다. 0-5℃에서 2시간 및 10℃에서 1시간 경과 후 반응 혼합물을 여과하고 용액을 1N HCl의 첨가에 의해 pH5로 산화하였다. 침전물을 여과시키고, H₂O (2 x 2 mL)로 세척하고 진공하에서(1.3 kPa;P₂0₅) 건조시켜서 백새 고체(1.6 g; 3.7 mmol)로서 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-니트로벤조산을 얻었다. 수율 92%.

F. L75 (N-[2-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]메틸]벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드) (도 6C)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 용액을 비워 내고 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 2-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]벤조산, E (0.45 g; 1.2 mmol),N 히드록시벤조트리아졸 (HOBT) (0.18 g; 1.2mmol), N,N'- 디이소프로필카르보디이미드 (DIC) (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였으며, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속하여 수지를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하였고, 용액을 비워 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (DOTA 트리-t-부틸 에스테르) (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT(0. 18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40mL ; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1, 4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)을 수지에 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 실온에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 상기 수지를 4.5시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과하고 여과액을 갑압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 이것을 Et₂O (20 mL)로 세척하여 침전물을 얻었다. 결과의 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O(3×20 mL)로 세척하여 백색 고체로서 L75 (190 mg ; 0.13 mmol)를 얻었다. 수율 44%.

G. L76 (N-[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-l-실]아세틸]아미노]메틸]-3-니트로벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드) (도 6D)

수지 A(0. 5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨갛아ㅕㅆ다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-니트로벤조산, H (0.50 g;1. 2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC(0. 19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였으며, 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. DOTA 트리-t-부틸 에스테르 (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC(0. 19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL),CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 상기 수지를 4.5시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이것을 Et₂O (20 mL)로 분말화하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하여 고체(141 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 미정제물의 일부인 37 mg을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 하여 백색 고체로서 L76을 얻었다. 수율 9%.

실시예 VII-도 7A-C

L124의 합성

요약: 4-시아노페놀 A를 에틸 브로모아세테이트 및 아세톤 중 K₂CO₃와 반응시켜서 중간체 B를 얻었고, 이것을 NaOH로 가수분해시켜서 대응 산 C로 하였다. EtOH/CHCl₃ 내에서 355 kPa에 있어서 C와 H₂ 및 PtO₂의 연속적인 수소화는 대응 아미노산 D를 제공하였으며, 이것을 FmocOSu로 직접 보호화하여 E를 얻었다. 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val- Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN[7-14][SEQ ID NO:1])를 이용하여 작용화 된 링크 아미드 수지를 E와 반응시킨 후 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L124를 얻었다. 총 수율: 1.3%

A. (4-시아노페녹시) 아세트산 에틸 에스테르, ( B )의 합성 (도 7A)

생성물을 문헌(ArchimbaμLt, P.; LeClerc, G.; Strosberg, A. D.; Pie트리-Rouxel, F. PCT Int. Appl. WO 980005,1998)에서 보고된 과정에 따라서 합성하였다.

B. (4-시아노페녹시)아세트산, ( C ) (도 7A)

NaOH (7.6 mL; 7.6 mmol)의 1N 용액을 MeOH (15 mL) 중 (4-시아노페녹시)아세트산 에틸 에스테르 B (1.55 g ; 7.6 mmol)에 적가하였다. 1시간 후 용액을 1 N HCl (7.6mL ; 7.6 mmol)로 산화하고 증발시켰다. 잔여물을 물(20 mL)로 처리하고 CHCl₃ (2 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 상을 증발시키고 미정제물을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 (4-시아노페녹시) 아세트산 C (0.97 g; 5.5 mmol)를 얻었다. 수율 72%.

C. [4-[[[9H-플루오렌-9- 일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]페녹시] 아세트산, ( E ) (도 7A)

PtO₂ (150 mg)을 EtOH (147 mL) 및 CHC13 (3 mL) 중 (4-시아노페녹시) 아세트산 C (1.05 g; 5.9 mmol)의 용액에 첨가하였다. 현탁액을 수소 분위기 (355kPa ; 20℃)하에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 Celite® 패드에 통과시키고 용액을 진공하에서 증발시켰다. 잔여물을 속성 크로마토크래피에 의해 정제하여 산 D(0.7 g)를 얻었고, 이것을 0℃에서 H₂0 (10 mL),MeCN (2 mL) 및 Et₃N (0.6 mL)에 용해시킨 다음, MeCN (22 mL) 중 N-(9-플루오레닐메톡시카르보닐옥시)숙신이미드(1.3 g; 3.9 mmol)의 용액을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후 반응 혼합물을 1 N HCl (10 mL)로 처리하고 침전된 고체를 여과하고 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 [4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]페녹시]아세트산 E (0.56g ; 1.4 mmol)를 얻었다. 총 수율 24%.

D. L124 (N-[[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-l-실]아세틸]아미노]메틸]페녹시]아세틸]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L- 메티오닌아미드)의 합성 (도 7B)

수지 A (480 mg; 0.29 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 20분 동안 교반하고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. [4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]페녹시]아세트산 E (480 mg; 1.19 mmol), N-히드록시벤조트리아졸 (HOBT) (182 mg; 1.19 mmol), N,N'-디이소프로필카르보디이미드(DIC)(185μL ; 1.19 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였으며, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속하여 수지를 10분 동안 DMA(6 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하였고, 용액을 비워 내고 DMA(6 mL) 내 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (750 mg; 1.19 mmol), HOBT (182 mg; 1.19 mmol), DIEA (404μL ; 2.36 mmol), DIC (185μL ; 1.19 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10- 테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (6 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 용액을 비워 내고, 수지를 DMA (2 x 7 mL), CH₂Cl₂(5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과하고 여과액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻었으며, 이것을 Et₂0 (5 mL)를 이용하여 분말화하였다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하였고 Et₂O (5 x 5 mL)로 세척하여 고체(148 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 미정제물의 일부 65 mg을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 하여 백색 고체(15 mg; 0.01 mmol)로서 L124(도 7C)를 얻었다. 수율 7.9%.

실시예 VIII-도 8A-C

L125의 합성

요약: 4-(브로모메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 A를 DMF에서 NaN₃와 반응시켜서 중간체 아지드 B를 얻었으며, 후속하여 이것을 Ph₃P 및 H₂0를 이용하여 환원시켜서 아민 C를 얻었다. C와 NaOH의 가수분해는 산 D를 얻었고, 그것을 FmocOSu로 직접 보호하여 E를 얻었다. 옥타펩티드 Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH₂(BBN [7-14] [SEQ ID NO:1])(A)를 이용하여 작용화 된 링크 아미드 수지를 E와 반응시킨 후 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L125를 얻었다. 총 수율: 0.2%.

A. 4-(아지도메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르, ( B )의 합성 (도8A)

DMF (90 mL) 중 4-(브로모메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 (8 g; 31 mmol) 및 NaN₃ (2 g; 31 mmol)를 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거시키고 조생성물을 EtOAc (50 mL)에 용해시켰다. 용액을 물 (2 x 50 mL)로 세척하고 건조시켰다. 휘발성 물질을 증발시켜 4-(아지도메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 (6.68 g; 30 mmol)를 얻었다. 수율 97%.

B. 4-(아미노메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르,( C ) (도 8A)

트리페닐포스핀 (6.06 g; 23 mmol)을 THF (50 mL) 중 (4-아지도메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 B(5 g; 22 mmol)의 용액에 첨가하였고: 수소 진화 및 백색 고체의 형성이 관찰되었다. 혼합물을 실온에서 질소 하에서 교반하였다. 24 시간 후 트리페닐포스핀 (0.6 g; 2.3 mmol)을 첨가하였다. 24시간 후 아지드가 소모되었고 H₂0 (10 mL)를 첨가하였다. 4시간 후 백색 고체가 사라졌다. 혼합물을 3시간 동안 45℃에서 가열하고 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 건조상태로 증발시켰고 미정제물을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 4-(아미노메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 C (1.2 g ; 6.1 mmol)를 얻었다. 수율 28%.

C. 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-메톡시벤조산,( E ) (도 8A)

NaOH (6.15 mL; 6.14 mmol)의 1 N 용액을 40℃에서 가열된 MeOH(25 mL) 중 4-(아미노메틸)-3-메톡시벤조산 메틸 에스테르 C (1.2 g; 6.14 mmol)의 용액에 적가하였다. 45℃에 8시간 교반한 후 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. NaOH (0.6 mL; 0.6 mmol)의 1N 용액을 첨가하고 혼합물을 4시간 동안 40℃에서 가열하였다. 용액을 농축시키고, 1 N HCl (8 mL; 8 mmol)로 산화하고, EtOAc (2 x 10 mL)로 추출한 후 수성 층을 15 mL로 농축시켰다. 이 용액(pH 4.5)을 0℃에서 냉각시키고 Et₃N (936 μL ; 6.75 mmol)를 첨가하였다(pH 11). MeCN (30 mL) 중 N-(9-플루오레닐메톡시카르보닐옥시) 숙신이미드 (3.04 g; 9 mmol)를 적가하였고(최종 pH 9) 백색 고체를 침전시켰다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후 고체를 여과하고, 1N HCl (15 mL)에 현탁ㅌ시키고 현탁액을 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과하여 백색 고체(275 mg; 0.7 mmol)로서 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-메톡시벤조산 E를 얻었다.

여과액을 진공하에서 증발시키고 결과의 백색 잔여물을 1N HCl (20 mL)에 현탁시키고 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 산 E(198 mg; 0.5 mmol)를 더 얻었다. 총 수율 20%.

D. L125 (N-[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]메틸]-3-메톡시벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드) (도 8B)

수지 A (410 mg; 0.24 mmol)를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시켰고, 용액을 비워 내고 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]메틸]-3-메톡시벤조산 E (398 mg; 0.98 mmol), HOBT (151 mg; 0.98 mmol), DIC (154 L ; 0.98 mmol) 및 DMA (6 mL)를 수지에 첨가하였고; 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였으며, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(6 mL) 중 50% 모르폴린과 함게 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA(6 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (618 mg; 0.98 mmol), HOBT (151 mg; 0.98 mmol), DIC(154 μL ; 0.98 mmol), DIEA(333 μL ; 1.96 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (6 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였고, 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂(5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과하고 용액을 감압하에 증발시켜서 유성 미정제물을 제공하였으며, 이것을 Et₂O (5 mL)를 이용하여 분말화하였다. 결과의 침전물을 원심분리에 의해 수집하고, Et₂O(5 x 5 mL)로 세척하였으며, HPLC에 의해 분석하고 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 하여 백색 고체(15.8 mg; 0.011 mmol)로서 L125(도 8C)를 얻었다. 수율 4.4%.

실시예 IX-도 9A-9D

L146, L233, L234, 및 L235의 합성

요약: 생성물을 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH₂(BBN[7-14])(A)로부터 개시되는 몇개의 단계에서 얻었다. 시약 B를 이용하여 최종 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L146, L233, L234 및 L235을 얻었다. 총 수율: 각각 10%, 11%, 4.5%, 5.7%.

A. 3-[[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노벤조산, B (도 9A)

THF (20 mL) 중 3-아미노벤조산 (0.5 g; 3.8 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (DIEA) (0.64mL ; 3.8 mmol)의 용액을 THF (10 mL) 중 Fmoc-글리신 클로라이드 (1.2 g; 4.0 mmol) (3) 및 CH₂Cl₂ (10 mL)의 용액에 적가하였다. 실온에서 24시간 동안 교반한 후 1 M HCl (50 mL)을 첨가하였다(최종 pH: 1.5). 침전물을 여과하고, H₂0 (2 x 100 mL)로 세척하고, 진공 건조 시켰으며 CHCl₃/CH₃0H (1:1)로부터 결정화하여 백색 고체 (0.7 g ; 1.6 mmol)로서 B를 얻었다. 수율 43%.

B. N-[3-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-l-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L233 (도9D)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 용액을 비워 내고 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다.

현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 3-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노벤조산, B (0.50 g;1. 2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고 혼합물을 실온에서 6시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하였고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl₂ (0.79 g; 1.2 mmol)(5), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 DOTA tri-t-부틸 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하였고 진공 건조시켰다. 수지를 4.5 시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하여 고체(152 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(50 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 L233 (17.0 mg; 11.3 x10-3 mmol)을 얻었다. 수율 11%.

C. N-[4-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]페닐아세틸]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L- 메티오닌아미드, L146 (도 9D)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시켰고, 용액을 쏟아 내고 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 쏟아 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-4-아미노페닐아세트산 (0.45 g; 1.2 mmol), HOBt (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 6시간 동안 진탕하였고, 쏟아 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 쏟아 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 쏟아 내고 수지를DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-글리신 (0.36 g; 1.2 mmol), HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 DIEA (0.40 mL; 2.4 mmol)를 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 진탕하였으며, 쏟아 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 쏟아 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 쏟아 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBt (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2mmol), DIEA (0.40mL ; 2.4 mmol)와의 DOTA tri-t-부틸 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하였고, 쏟아 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4.5시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과하고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 침전물을 원심분리에 의하여 수집하고 Et₂0 (3 x 20 mL)로 세척하여 고체(203 mg)을 얻었고, 이것을 JPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(50 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조하여 백색 고체로서 L146 (11.2 mg; 7.4 x 10-3 mmol)을 얻었다. 수율 10%.

D. 6-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노나프토산, C (도 9B)

THF (20 mL) 중 6-아미노나프토산 (500 mg; 2.41 mmol); 및 DIEA (410μL 2.41 mmol)의 용액을 CH₂Cl₂/THF 1:1 (10 mL) 중 Fmoc-글리신 클로라이드(760 mg ; 2.41 mmol)의 용액에 적가하고 실온에서 교반하였다. 24시간 후 용매를 진공 하에서 증발시켰다. 잔여물을 0.5 N HCl (50 mL)로 처하고 1시간 동안 교반하였다. 침전된 백색 고체를 여과시키고 건조시켰다. 백색 고체를 메탄올(30 mL)에 현탁시키고 5분 동안 끓인 후, 여과시켜서 생성물 C (690 mg; 1.48 mmol)를 얻었다. 수율 62%.

E. N-[6-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]나프토일-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L234

수지 A (500 mg ; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 용액을 비우고 DMA(7 mL) 중 신선한 50 % 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. 6-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노나프토산 C (560 mg; 1.2 mmol), HOBT (184 mg; 1.2 mmol), DIC (187gL ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 6시간 동안 진탕하였으며, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(6 L) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl(757 mg; 1.2 mmol), HOBT (184 mg; 1.2 mmol), DIC (187μL ; 1.2 mmol), 및 DIEA (537μL ; 2.4 mmol)와의 DOTA tri-t-부틸 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 플라스크 내에서 진탕시켰고, 비워 내고 수지를 DMA (2 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4.5 시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0(20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂0 (3 x 20 mL)를 이용하여 세척하여 고체(144 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(54 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 L234(8 mg ; 5.1x10^-3 mmol)을 얻었다. 수율 4.5%.

F. 4-[[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]메틸아미노]벤조산, D (도 9C)

THF (20 mL) 중 4-N-메틸아미노나프토산 (500 mg; 3.3 mmol) 및 DIEA(562 μL 3.3 mmol)의 용액을 CH₂Cl₂/THF 1:1 (10 mL) 중 Fmoc-글리신 클로라이드(1.04 g; 3.3 mmol)의 용액에 첨가하고 실온에서 교 L아ㅕㅆ다. 24시간 후 용매를 감압하에서 증발시켰다. 잔여물을 0.5 N HCl (30 mL)로 처리하고 3시간 동안 0℃에서 교반하였다. 침전된 백색 고체를 여과시키고 건조시켰다. 미정제물을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 D (350 mg; 0.81 mmol)를 얻었다. 수율 25%.

G. N-[4-[[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]메틸아미노]벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L235 (도9D)

수지 A (500 mg; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하였고, 용액을 비워 내고 DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[[[9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]-N-메틸]아미노-벤조산 D (510 mg; 1.2 mmol), HOBT (184 mg; 1.2 mmol), DIC (187 p, L ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가항고, 혼합물을 실온에서 6시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA(7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA(7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl(757 mg; 1.2 mmol), HOBT (184 mg; 1.2 mmol), DIC(187 μL ; 1.2 mmol), 및 DIEA (537μL, 2.4 mmol)와의 DOTA 트리-t-부틸 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 플라스크 내에서 진탕하고 비워 내고 수지를 DMA (2 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 4.5시간 동안 진탕하였다. 수지를 여과하고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다.

침전물을 원심분리에 의해 수집하였고 Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하여서 고체 (126 mg)를 얻었고 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(53 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 L235 (11 mg; 7.2 x10^-3 mmol)를 얻었다. 수율 5.7%.

실시예 X-도 10A-B

L237의 합성

요약: 1-포르밀-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 (A)를 pH3에서 벤질 클로로포르메이트를 이용하여 선택적으로 보호하여 B를 얻었으며, 이것을 t-부틸 브로모아세테이트로 알킬화하고 히드록실아민 히드로클로라이드로 탈포르밀화 하여 D를 얻었다. P(OtBu)₃ 및 파라포름알데히드와의 반응은 E를 얻었고, 이것을 수소화에 의해 탈보호하고 벤틸 브로모아세테이트를 이용하여 알킬화 하여 G를 얻었으며, 이것을 최종적으로 수소화하여 H를 얻었다. 옥타펩티드 GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH₂ (BBN[7-14])(A)를 이용하여 작용화 된 링크 아미드 수지를 후속하여 Fmoc-4-아미노벤조산, Fmoc-글리신 및 H와 반응시켰다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L237을 제공하였다. 총 수율 0.21%.

A. 7-포르밀-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1-카르복실산 페닐메틸 에스테르 디히드로클로라이드, B (도 10A)

l-포르밀-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 A (14 g ; 69.9 mmol)을 H₂0 (100 mL)에 용해시키고 12 N HCl (11 mL)을 pH3 까지 첨가한 후 1,4-디옥산(220 mL)을 첨가하였다. 1,4-디옥산 (15 mL) 중 벤질클로로포르메이트(13.8 g; 77 mmol)의 용액을 3.5시간 내에 천천히 적가하였으며, pH계(pHstat)를 이용하여 2 N NaOH (68.4 mL)의 연속적 첨가에 의해 pH3으로 반응 혼합물을 일정하게 유지시켰다. 첨가의 마지막에 반응물을 1시간 동안 교반한 후 n-헥산 (4 x 100 mL)및 ⁱPr₂O (4 x 100 mL)로 세척하였다. 수성 상을 10 N NaOH (6.1 mL)의 첨가에 의해 pH13으로 하였고 CHCl₃ (4 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 상을 소금물(100 mL)로 세척하고, 건조 시키고(Na₂S0₄), 여과시키고 증발시켰다. 유성 잔여물을 아세톤(200 mL)에 용해시키고 6 N HCl (26 mL)을 첨가하였다. 침전된 고체를 여과시키고 아세톤(2 x 50 mL)으로 세척하고 진공상태에서 건조 시켜서 백색 결정성 고체로서 화합물 B (23.6g ; 58 mmol)를 얻었다. 수율 83%.

B. 4-(페닐메톡시)카르보닐-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,7-디아세트산 비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르, D (도10A)

H₂0 (450 mL) 및 1 N NaOH (74 mL; 74 mmol) 중 B (14.4 g; 35.3 mmol)의 용액을 20분 동안 교반한 후 CHCl₃ (4 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 증발시켜서 유성 잔여물(12.3 g)을 얻었으며, 이것을 CH₃CN (180 mL) 및 N-에틸디이소프로필아민 (DIEA) (15 mL; 88.25mmol)에 용해시켰다. CH₃CN (15 mL) 중 t-부틸 브로모아세테이트(16.8 g; 86.1 mmol)의 용액을 2.5시간 내에 상기 용액에 적가하였다. 실온에서 20시간 후 용매를 증발시키고 유성 잔여물을 CHCl₃ (150 mL)에 용해시키고 및 H₂0 (5 x 100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고(Na₂S0₄), 여과시키고 건조한 상태로 증발시켜서 황색 오일로서 C를 얻었다. 미정제 C(22 g)를 EtOH(250 mL)에 용해시키고, NH₂OH·HCl (2. 93g ; 42.2 mmol)을 첨가하고 용액을 환류로 가열하였다. 48시간 후 용매를 증발시키고 잔여물을 CH₂Cl₂ (250 mL)에 용해시키고, H₂0 (3 x 250 mL)로 세척한 후 소금물(3 x 250 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na₂S0₄), 여과시키고 증발시켰다. 유성 잔여물(18.85 g)을 속성 크로마토그래피에 이해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 수집하고 증발시켜서 유리질의 백색 고체(17.62 g)를 얻었으며, 이것을 H₂0 (600 mL) 및 1 N NaOH (90 mL; 90 mmol)에 용해시키고 CHCl₃ (3 x 250 ml)로 추출하였다. 유기 층을 건조시키고(Na₂S0₄) 증발시켜서 오일로서 D (16.6 g; 31 mmol)를 얻었다. 수율 88%.

C. 4-(페닐메톡시)카르보닐-10-[[비스(1,1-디메틸에톡시)포스피닐]메틸]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,7-디아세트산 비스(1,1-디메틸에틸)에스테르, E (도 10A)

화합물 D (13.87 g; 26 mmol), P(OtBu)₃(7.6 g; 28.6 mmol) (10) 및 파라포름알데히드 (0.9 g; 30 mmol)를 60℃에서 가열하였다. 16시간 후 P(OtBu)₃(1 g; 3.76 mmol) 및 파라포름알데히드 (0.1 g; 3.33 mmol)를 더 첨가하였다. 반응물을 60℃에서 또 다른 20시간 동안 가열한 후 80℃에서 8시간 동안 진공 상태에서 가열하여 휘발성 불순물을 제거하였다. 미정제물을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 오일로서 E (9.33 g ; 8 mmol)를 얻었다. 수율 31%.

D. 7-[[비스(l,1-디메틸에톡시)포스피닐]메틸]-1,4,7,1O-테트라아자시클로도데칸-1,4,10-트리아세트산 1-페닐메틸 4,10-비스(l,l-디메틸에틸)에스테르, G (도10A)

CH₃0H (160 mL) 중 E (6.5 g; 5.53 mmol)의 용액에 5% Pd/C(1 g; 0.52 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에서 교 L아ㅕㅆ다. 4시간 후 (H₂ 165 mL; 6.7 mmol을 소비함) 혼합물을 Millipore^® 필터 (FT 0.45μm)를 통하여 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켰다. 미정제물(5.9 g)을 속성 크로마토그래피에 의해 정제하여 오일로서 F (4.2 g)를 얻었다. CH₃CN (8 mL)에 용해된 벤질 브로모아세테이트(1.9 g; 8.3 mmol)를 1시간 내에 CH₃CN (40 mL) 및 DIEA (1.5 mL; 8.72 mmol) 중 F (4.2 g)의 용액에 적가하였다. 실온에서 36시간 후 용매를 증발시키고 잔여물(5.76 g)을 CHCl₃(100 mL)에 용해시키고 , H₂0 (2 x 100 mL)로 세척한 후 소금물(2 x 70 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고(Na₂S0₄), 여과시키고 증발시켰다. 미정제물(5.5 g)을 속성 크로마토그래피에 의해 2번 정제하고, 단편을 수집하여 건조한 상태로 증발시켜서 오일로서 G (1.12 g; 1.48 mmol)를 얻었다. 수율 27%.

E. 7-[[비스(1,1-디메틸에톡시)포스피닐]메틸]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,10-트리아세트산 4,10-비스(l,1-디메틸에틸)에스테르, H (도 10A)

5% Pd/C (0.2 g; 0.087 mmol)을 CH₃0H (27 mL) 중 G (1.12 g; 1.48 mmol)의 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 질소 분위기 하에서 교반하였다. 2시간 후 ( H₂ 35 mL; 1.43 mmol을 소비함) 혼합물을 Millipore^® 필터(FT 0.45μm)를 통하여 여과시키고 용액을 건조한 상태로 증발시켜서 엷은 황색 오일로서 H(.94 g; 1.41 mmol)를 얻었다. 수율 97%.

F. N-[4-[[[[[4,10-비스(카르복시메틸)-7-(디히드록시포스피닐)메틸-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]아세틸]아미노]벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L 237 (도10B)

수지 A (330 mg; 0.20 mmol)(17)를 10분 동안 DMA(5 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA(5 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 5 mL)로 세척하였다. Fmoc-4-아미노벤조산(290 mg, 0.80 mmol), HOBT (120 mg; 0.80 mmol), DIC (130IlL ; 0.80 mmol) 및 DMA (5 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 5 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (5 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (5 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 5 mL)로 세척하였다. Fmoc-글리신(240 mg; 0.8 mmol), HATU(310 mg; 0.8 mmol) 및 DIEA (260μL ; 1.6 mmol)를 DMA (5 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 5 mL)로 세척하였다. 후속하여 수지를 10분 동안 DMA (5 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (5 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 5 mL)로 세척하였다. H (532 mg ; 0.80 mmol), HOBT (120 mg; 0.80 mmol), DIC (130μL ; 0.80 mmol), 및 DIEA(260 μL ; 1.6 mmol) 및 DMA (5 mL)를 수지에 첨갛아ㅕㅆ다. 혼합물을 실온에서 40시간 동안 플라스크 내에서 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 5 mL), CH₂Cl₂ (5 x 5 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕하였다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂O(20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O(3 x 20 mL)로 세척하여 고체(90 mg)를 얻어서, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(50 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 L237 (6 mg; 3.9 x10^-3 mmol)을 얻었다. 수율 3.5%.

실시예 XI-도11A-B

L238 및 L239의 합성

요약: 생성물을 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH₂(BBN[7-14])(A)로부터 출발하는 몇가지 단계에서 얻었다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L238 및 L239를 얻었다. 총 수율: 각각 14 및 9%.

A. N,N-디메틸글리실-L-세릴-[S-[(아세틸아미노)메틸]]-L-시스테이닐- 글리실-4-아미노벤조일-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L238 (도11A)

수지 A (0.5g ; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진통시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-4-아미노벤조산(0.43 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18g ; 1.2 mmol), DIC (0.19mL ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. Fmoc-글리신 (0.36 g; 1.2 mmol), HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)을 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-S-아세트아미도메틸-L-시스테인(0.50 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-O-t-부틸-L-세린(0.46 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다.

상기 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. N,N-디메틸글리신 (0.12 g; 1.2 mmol), HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)을 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL),CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4.5시간 동안 시약 B(25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하여 고체(169 mg)을 얻어서, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(60 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 시켜서 백색 고체로서 L238 (22.0 mg; 0.015 mmol)을 얻었다. 수율 14%.

B. N,N-디메틸글리실-L-세릴-[S-[(아세틸아미노)메틸]]-L-시스테이닐-글리실-(3β,5β,7α,12α)-3-아미노-7,12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L239 (도11B)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 용액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β,5β,7α,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 B (0.82 g; 1.2 mmol) (7), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-S-아세트아미도메틸-L-시스테인 (0.50 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로, 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-O-t-부틸-L-세린 (0.46 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N, N-디메틸글리신 (0.12 g ; 1.2 mmol), HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)을 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하였다.

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 용액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. (3β,5β,7α,12α)-3-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-7,12-디히드록시콜라-24-노산 B (0.82 g; 1.2 mmol) (7), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-S-아세트아미도메틸-L-시스테인 (0.50 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로, 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N-α-Fmoc-O-t-부틸-L-세린 (0.46 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. N, N-디메틸글리신 (0.12 g ; 1.2 mmol), HATU (0.46 g; 1.2 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)을 DMA (7 mL)에서 15분 동안 교반한 후 용액을 수지에 첨가하였다.

실시예 XII-도12A-F

L240, L241, L242의 합성

요약: 생성물을 링크 아미드 수지 상에서 옥타펩티드 GlnTrpAlaValGlyHisLeu MetNH₂(BBN[7-14])(A)로부터 출발하는 몇가지 단계에서 얻었다. 시약 B를 이용하여 절단 및 탈보호 한 후 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L240, L241, 및 L242을 얻었다. 총 수율: 각각 7.4, 3.2, 1.3%.

A. 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-메톡시벤조산 A (도12A)

THF (20 mL) 중 4-아미노-3-메톡시벤조산(1.0 g; 5.9 mmol); 및 N-에틸디이소프로필아민(1.02 mL 5.9 mmol)의 용액을 CH₂Cl₂/THF 1:1 (20 mL) 중 Fmoc-글리실클로라이드(1.88 g; 5.9 mmol)의 용액에 적가하고 N₂ 하에서 실온에서 교반하였다. 3시간 후 용매를 진공 하에서 증발시키고, 잔여물을 0.5 N HCl(50 mL)로 처리하고, 0℃에서 1시간 동안 교반한 후 여과시키고 건조시켰다. 백색 고체를 MeOH(30 mL)에서 현탁시키고 1시간 동안 교반한 후, 여과 시키고 CHCl₃/헥산 1:4(75 mL)의 용액에 현탁시켰다. 현탁액을 여과시켜거 백색 고체(1.02 g; 2.28 mmol)로서 화합물 A를 얻었다. 수율 39%.

B. N-[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]글리실]아미노]-3-메톡시벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-l-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드 L240

수지 A (0. 5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-메톡시벤조산, A (0.50 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5시간 동안 진탕하였고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL: 1.2 mmol), N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)과의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 4.5시간 동안 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂O (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 20 mL)로 세척하여 고체(152 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(52 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편ㅇ르 동결건조 하여 백색 고체로서 L240 (12.0 mg; 7.8 x10^-3 mmol)을 얻었다. 수율 7.4%.

C. 4-아미노-3-클로로벤조산 C (도12B)

1 N NaOH (11 mL; 11 mmol)을 45℃에서 MeOH (20 mL) 중 메틸 4-아미노-3- 클로로벤조에이트(2 g; 10.8 mmoli)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 45℃에서 5시간 동안 교반하고 실온에서 밤새 두었다. 1N NaOH를 더 첨가하고 (5 mL; 5 mmol) 반응물을 45℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 농축시킨 후 1N HCl(16 ml)를 첨가하였다. 고체 침전물을 여과하고 건조시켜서 백색 고체(1,75 g; 10.2 mmol)로서 4-아미노-3-클로로벤조산, C를 얻었다. 수율 94.6%.

D. 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-클로로벤조산, D (도 12B)

THF (50 mL) 중 4-아미노-3-클로로벤조산 (1.5 g; 8.75 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (1.46 mL 8.75 mmol)를 CH₂Cl₂/THF 1:1 (30 mL) 중 Fmoc-글리실클로라이드(2.76 g; 8.75 mmol)의 용액에 적가하고 N₂ 하에서 실온에서 교반하였다. 3시간 후 용매를 진공하에서 증발시켰다. 잔여물을 0.5N HCl(50 mL)로 처리하고, 여과시키고 건조시켰다.

백색 고체를 MeOH (30 mL)에 현탁시키고 1시간 동안 교반한 후, 여과시키고 건조시켜서 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-클로로벤조산 (2.95 g; 6.5mmol)을 얻었다. 수율 75%.

E. N-[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,1O테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]글리실]아미노]3-클로로벤조일]L-글루타미닐-L-트립토필-1-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드 L241 (도 12E)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕시키고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-클로로벤조산, D (0.54 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다.

후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕시켰다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.79 g; 1. 2 mmol), HOBT (0.18 g ; 1. 2 mmol), DIC (0.19 mL. 1.2 mmol), N- 에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 40시간 동안 진탕시키고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL),CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 4.5시간 동안 진탕시켰다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유정 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂0 (5 x 20 mL)로 세척하여 고체(151 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(56 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결 건조 하여 백색 고체로서 L241 (5.6 mg; 3.6x 10^-3 mmol)를 얻었다. 수율 3.2%.

F. 4-[[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노]아세틸]아미노-3-메틸벤조산, E(도12C)

THF (30 mL) 중 4-아미노-3-메틸벤조산 (0.81 g; 5.35 mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민 (0.9 mL 5.35 mmol)의 용액을 CH₂Cl₂/THF 1:1 (20 mL) 중 Fmoc-글리실클로라이드(1.69 g; 5.35 mmol)의 용액에 적가하고 N₂ 하에서 실온에서 교반하였다. 3시간 후 용매를 진공하에서 증발시켰다. 잔여물을 HCl 0.5 N (50mL)로 처리하고 0℃에서 3시간 동안 교반한 후 여과시키고 건조시켰다. 백색 고체를 MeOH (50 mL)에 현탁시키고 1시간 동안 교반한 후, 여과시키고 건조시켜서 화합물 E (1.69 g; 3.9 mmol)를 얻었다. 수율 73%.

G. N-[4-[[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]글리실]아미노]3-메틸벤조일]L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드 L242 (도 12F)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)을 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 상기 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[[(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노]아세틸]아미노-3-메틸벤조산, E (0.52 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA(5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 또 다른 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. NaCl (0.76 g; 1.2 mmol), HOBT (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol),N 에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol)와의 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세트산 트리스(l,l-디메틸에틸) 에스테르 부가생성물 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하였다.

상기 혼합물을 실온에서 40시간 동안 교반하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL), CH₂C1₂ (5 x 7 mL)로 세척하고 진공 건조 시켰다. 수지를 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 4.5시간 동안 진탕하였다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂O (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂0 (5 x 20mL)로 세척하여 고체 (134 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(103 mg) 을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결건조 하여 백색 고체로서 L242 (4.5 mg; 2.9 x10^-3 mmol)를 얻었다. 수율 1.3%.

실시예 XIII-도 13A-C

L244의 합성

요약 : 생성물을 링크 아미드 수지 (A) 상에서 옥타펩티드GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH₂ (BBN[7-14])로부터 출발하는 몇가지 단계에서 얻었다. DOTA 트리-t-부틸 에스테르와의 최종 커플링 단계는 링커-봄베신[7-14]의 시약 B를 이용한 절단 및 탈보호 후 용액 상에서 수행된다. 미정제물을 예비 HPLC에 의해 정제하여 L244를 얻었다. 총 수율: 0.4%.

A. N,N'-(이미노디-2,1-에탄디일)비스[2,2.2-트리플루오로아세타미드], A (도 13A)

트리플루오로아세트산 에틸 에스테르 (50 g; 0.35 mol)를 THF (180 mL) 중 디에틸렌트리아민(18 g; 0.175 mol)의 용액 속으로 1시간 동안 0℃에서 떨어뜨렸다. 실온에서 20시간 후, 혼합물을 유성 잔여물(54 g)으로 증발시켰다. 오일을 Et2O(50 mL)로부터 결정화시키고, 여과시키고, 냉각된 Et₂O (2 x 30 mL)로 세척하고 건조 시켜서 백색 고체(46 g;0.156 mol)로서 A를 얻었다. 수율 89%.

B. 4-[N,N'-비스[2-(트리플루오로아세틸)아미노에틸]아미노]-4-옥소부탄산, B (도 13A)

숙신 무수물 (0.34 g ; 3.4 mmol)을 실온에서 THF (5 mL) 중 A (1 g; 3.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 28시간 후 미정제물을 잔여물(1.59 g)로 농축시키고, ,EtOAc (2 x 10 mL) 및 1 N HCl(2 x 15 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na₂S0₄상에서 건조시키고, 여과시키고 증발시켜서 유성 잔여물(1.3 g)을 얻었으며, 이것을 속성 크로마토그래피(5)에 의해 정제하여 오일(0.85 g; 2.15 mmol)로서 B를 얻었다. 수율 63%.

C. 4-[N,N'-비스[2-[(9-H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]아미노에틸]아미노]-4-옥소부탄산, D (도 13A)

숙신 무수물 (2 g; 20 mmol)을 실온에서 THF (25 mL) 중 A (5 g; 16.94 mmol)의 용액을 첨가하였다. 28시간 후 미정제물을 잔여물(7 g)으로 농축시키고, 에틸 아세테이트(100 mL)에 세척하고 1 N HC1 (2 x 50 mL)에 세척하였다. 유기 층을 Na₂S0₄상에서 건조시키고, 여과시키고 증발시켜서 유성 잔여물(6.53 g)으로서 미정제 B를 얻었다. 2 N NaOH (25 mL)를 EtOH (35 mL) 내 미정제 B(5 g)의 현탁액에 첨가하여 실온에서 1시간 후 완전한 용액을 얻었다. 20시간 후 용매를 증발시켜서 오일(8.48 g)로서 C를 얻었다. 1,4-디옥산 (30 mL) 내 9-플루오레닐메틸 클로로포르메이트(6.54 g, 25.3 mmol)를 0℃에서 1시간 내에 10% aq. Na₂C0₃(30 mL) 내 C의 용액에 떨어뜨렸다. 20시간 후 실온에서 젤라틴의 현탁액을 얻었고 여과시켜서 백색 고체(3.5 g) 및 황색 용액을 얻었다. 용액을 증발시키고 잔존 수성 용액을 H₂0 (150 mL)에 희석하고 EtOAc (70 mL)로 추출하였다. 신선한 EtOAc (200 mL)를 수성 상에 첨가하여, 현탁액을 얻고 이것을 0℃로 냉각시키고 농축 HCl을 이용하여 pH2로 산화하였다. 유기 층을 중성 pH가 될 때까지 H₂0 (5 x 200 mL)로 세척한 후, 건조시켜서 유리질 고체(6.16 g)를 얻었다. 화합물을 1시간 동안 n-헥산(60 mL)에 현탁시키고, 여과시켜서 백색 고체(5.53 g, 8.54 mmol)로서 D를 얻었다. 총 수율 50%.

D. N-[4-[[4-[비스[2-[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-l,4,7,10-테트라아자시클로도데-1-실]아세틸]아미노]에틸]아미노-l,4-디옥소부틸]아미노]벤조일]-L-글루타미닐-L-트립토필-L-알라닐-L-발릴-글리실-L-히스티딜-L-류실-L-메티오닌아미드, L244(도 13B)

수지 A (0.5 g; 0.3 mmol)를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 고형 상 펩티드 합성 용기 내에서 진탕하고, 용액을 비워 내고 DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하였다. 현탁액을 또 다른 20분 동안 교반한 후 용액을 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 4-[N,N'-비스[2-[(9-H-플루오렌-9-일 메톡시)카르보닐]아미노에틸]아미노]-4-옥소 부탄산(777.3 mg; 1.2 mmol), HOBT (184 mg; 1.2 mmol), DIC (187μL ; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 40시간 동안 진탕하고, 비워 내고 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척하였다. 후속적으로 수지를 10분 동안 DMA (7 mL) 중 50% 모르폴린과 함께 진탕시키고, 용액을 비워 내고, DMA (7 mL) 중 신선한 50% 모르폴린을 첨가하고 혼합물을 20분 동안 진탕하였다. 용액을 비워 내고 수지를 DMA (2 x 7 mL) 및 CH₂Cl₂(5 x 7 mL)로 세척한 후 그것을 시약 B (25 mL)와 함께 플라스크 내에서 4.5시간 동안 진탕하였다. 수지를 여과시키고 용액을 감압하에서 증발시켜서 유성 미정제물을 얻은 후 Et₂0 (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂O (5 x 20 mL)로 세척하여 백색 고체(140 mg)로서 F를 얻었다. DOTA 트리-t-부틸 에스테르 (112 mg; 0.178 mmol) HATU (70 mg; 0.178 mmol) 및 DIEA (60μL ; 0.356 mmol)를 DMA (3 mL) 및 CH₂C1₂ (2 mL) 중 F (50 mg; 0.0445 mmol)의 용액에 첨가하고 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 미정제물을 증발시켜서 감소된 부치(1 mL)로 하고 4.5시간 동안 시약 B(25 mL)와 함께 진탕하였다. 용매의 증발 후, 잔여물을 Et₂O (20 mL)로 처리하여 침전물을 얻었다. 상기 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 Et₂0 (5 x 20 mL)로 세척하여 베이지색 고체(132 mg)를 얻었으며, 이것을 HPLC에 의해 분석하였다. 소정량의 미정제물(100 mg)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 단편을 동결 건조하여 백색 고체로서 L244 (도 13C) (3.5 mg; 1.84 x 10^-3 mmol)를 얻었다. 수율 0.8%.

실시예 XIV - 실시예 XLII L201 - L228 를 위한 일반적인 실험

수동 커플링

6.0 당량의 적절하게 보호된 아미노산을 각각 6.0 당량 의 HOBT와 디C로 처리하고 반응 용기밖에서 활성화시켰다. NMP 중의 이 활성화 카르복실산을 그후 아민을 함유하는 수지로 이동시키고 반응을 4-6 시간동안 수행하고 그후 수지를 배출시키고 건조시켰다.

Fmoc-Gly-OH의 4-아미노벤조산 및 아미노비페닐카르복실산 아미드로의 특별한 커플링 :

Fmoc-Gly-OH (10.0 당량)를 NMP 중의 HATU (10.0 당량) 및 디EA (20.0 당량 ) (10 mL의 NMP이 1 중량 그램의 아미노산에 대해 사용되었다)로 처리하고 아민 로딩된 수지를 함유하는 용기로 이동시키기 전에 용액을 10-15분동안 실온에서 교반하였다. 용액의 부피를 수지의 매 그램에 대해 15.0 ml로 만들었다. 커플링을 20시간동안 실온에서 계속하였고 수지를 모든 반응물에서 배출시켰다. 이 과정을 한번더 반복하고 그후 다음단계로 이동하기 전에 NMP으로 세척하였다.

D03A 모노아미드의 제조 :

8.0 당량의 DOTA 모노산을 NMP에 용해시키고 8.0 당량의 HBTU 및 16.0 당량의 디EA으로 처리하였다. 이 용액을 15분간 실온에서 교반하고 그후 수지위의 아민으로 이동시키고 커플링을 24시간 실온에서 계속하였다. 수지를 그후 배출시키고, 세척하고 그후 펩티드를 분할하고 정제하였다.

수지로부터 미정제 펩티드의 분할 및 정제:

수지를 시약 B (15.0 ml/g)에 현탁시키고 4시간동안 실온에서 진탕하였다. 수지를 그후 배출시키고 2 x 5 mL의 시약 B으로 다시 세척하고 이전의 여과액과 조합시켰다. 여과액을 그후 감압하에서 실온에서 페이스트/액체로 농축시키고 25.0 mL의 무수 에테르로 가루화하였다 (사용된 수지의 매 그램에 대해). 현탁액을 그후 원심분리하고 에테르 층을 가만히 따랐다. 이 과정을 두번 더 반복하고 에테르 세척후의 무색의 침전물을 예비 HPLC에 의해 정제하였다.

실시예 XIV-도 21

L201 의 합성

0.5 g의 Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-M-수지 (0.4 mmol/g, 0.5g, 0.2 mmol) (수지 A)의 합성을 사용하였다. 아미노산 유닛의 나머지를 일반적인 과정에서 기술된 바와 같이 첨가하여 (1R)-1-(비스 {2-[비스 (카르복시메틸) 아미노에틸} 아미노) 프로판-3- 카르복실산-1-카르복실-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L201)을 제조하였다, 수율: 17.0 mg (5.4%)

실시예 XV-도 22A 및 22B

L202 의 합성

4-Fmoc-히드라지노벤조산 (도 22A)의 합성 :

물 (100 ml) 중의 4-히드라지노벤조산 (5.0 g, 32.9 mmol)의 현탁액을 세슘 카보네이트 (21.5 g, 66.0mmol)로 처리하였다. THF (25 mL) 중의 Fmoc-Cl (9.1 g, 35.0 mmol)을 1시간에 걸쳐서 교반하면서 상기 용액에 적가하였다. 용액을 첨가후 4시간 더 교반하였고 반응 혼합물을 약 75 mL으로 농축시켰고 에테르 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 에테르 층을 버리고 수성 층을 2N HC1으로 산성화하였다. 분리된 고체를 여과시키고, 물 (5 x 100 mL)로 세척하고 그후 아세토니트릴로부터 재결정화하여 생성물(화합물 B)을 무색의 고체로서 수득하였다.

수율: 11.0 g(89%). ¹H NMR (DMSO-d6) :δ 4.5 (m,1H,Ar-CH ₂-CH), 4.45 (m, 2H,Ar-CH₂) 6.6 (bs, 1H, Ar-H), 7.4-7. 9 (m, 9, Ar-H 및 Ar-CH), 8.3 (s, 2H,Ar-H), 9.6 (s, 2H, Ar-H). M. S. -m/z 373.2 [M-H]

0.5 g의 Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-M-수지 (0.4 mmol/g, 0.5g, 0.2 mmol) (수지 A)를 사용하였다.

아미노산 유닛을 화합물 B을 포함하여, 일반적인 과정에서 기술된 바와 같이 첨가하여, N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸]아미노]-4-히드라지노벤조일-1- 글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L202) (도 22B)을 제조하였다, 수율: 25.0 mg (8.3%)

실시예 XVI-도 23A 및 도 23B

L203 의 합성

4-Boc-아미노벤질 벤조에이트 화합물 B 도 23A의 제조:

건조 아세토니트릴 (10.0 mL)중의 4-boc-아미노벤조산 (0.95 g, 4.0 mmol) 의 현탁액을 분말화 세슘 카보네이트 (1.3 g, 4.0 mmol)으로 처리하고 질소하에서 격렬하게 교반하였다. 브롬화벤질 (0.75 g, 4.4 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 20시간동안 질소하에서 환류하였다. 반응 혼합물을 그후 빙냉수 (200 mL)안에 붓고 분리된 고체를 여과시키고 물 (5 x 50 mL)로 세척하였다. 미정제 물질을 그후 수성 메탄올로부터 재결정화시켜 무색의 고체로서 생성물을 수득하였다(화합물 B). 수율: 0.8 g(61%). ¹H NMR (CDC1₃) :δ 1.5 (s, 9H, Tertiary 메틸s), 5.4 (s, 2H,Ar-CH ₂ ), 7.4 (m, 7H,Ar-H) 및 8.0 (m, 2H,Ar-H). M.S.-m/z 326.1[M+H].

4-아미노벤질 벤조에이트 화합물 C 도 23A:

4-Boc-아미노벤질 벤조에이트 (0.8 g, 2.5 mmol)는 TFA (25부피%)를 함유하는 DCM (20 mL)에 용해시키고 2시간동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 100.0 g의 분쇄된 얼음 안에 붓고 pH가 약 8.5에 도달할 때까지 포화 나트륨 바이카보네이트 용액으로 중화하였다. 유기 층을 분리시키고 수성 층을 DCM (3 x 20 mL) 으로 추출하고 모든 유기 층들을 조합하였다. DCM 층을 그후 1 x 50 mL의 포화 나트륨 바이카보네이트, 물 (2 x 50 mL)로 세척하고 건조시켰다 (황산나트륨). 용매의 제거는 무색의 고체 (화합물 C)를 산출하였고 이것을 더 정제하지 않고 다음 단계로 가져갓다. 수율: 0.51 g(91%). ¹HNMR (CDCl₃) :δ 5.3 (s, 2H,Ar-CH ₂), 6.6 (d, 2H, Ar-H, j =1.0 Hz), 7.4 (m,5H,Ar-H, J= 1.0 Hz) 및 7.9 (d, 2H, Ar-H,J= 1. 0 Hz).

4-(2-클로로아세틸) 아미노벤질 벤조에이트 화합물 D 도 23A:

아민 (0.51 g, 2.2 mmol)을 건조 디메틸아세트아미드 (5.0 mL)에 용해시키고 얼음에서 냉각시켰다. 염화 클로로아세틸(0.28 g, 2.5 mmol)을 주사기를 통해 적가하였고 용액을 실온까지 올리고 2시간동안 교반하였다. 추가의, 2.5 mmol의 염화 클로로아세틸을 첨가하고 2시간 더 계속해서 교반하였다. 반응 혼합물을 그후 빙냉수 (100 mL)안에 부었다. 침전된 고체를 여과시키고 물로 세척하고 그후 헥산/에테르로부터 재결정화하여 무색의 고체 (화합물 D)를 수득하였다. 수율: 0.38 g (56%). ¹H NMR (CDC1₃) :δ 4. 25 (s, 2H,CH₂-C1), 5.4 (s, 2H,Ar-H), 7.4(m, 5H,Ar-H), 7.6 (d, 2H,Ar-H), 8.2 (d, 2H,Ar-H) 및 8. 4 (s,1H,-CONH).

ter-부틸2- {1, 4,7, 10-테트라아자-7,10-비스{ [(tert-부틸) 옥시카르보닐] 메틸}-4-[(N-{4- [벤질옥시카르보닐] 페닐} 카바모일] 시클로도데실} 아세테이트, 화합물 E 도 23A:

D03A-트리-t-부틸 에스테르. HCl (5.24 g, 9.5 mmol)를 30.0 mL 의 건조 아세토니트릴 및 무수 칼륨 카보네이트 (2.76 g, 20 mmol)를 첨가하고 30분동안 교반하였다. 건조 아세토니트릴 (20.0 mL)중의 클로로아세트아미드 D (2.8 g, 9.2 mmol)를 그후 상기 혼합물에 10 min동안 적가하였다. 반응 혼합물을 그후 밤새 교반하엿다. 용액을 여과시키고 그후 감압하에서 페이스트로 농축시켰다. 페이스트 를 약 200.0 mL의 물에 용해시키고 5 x 50 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 조합된 유기 층을 물 (2 x 100 mL)로 세척하고 건조시켰다 (황산나트륨).

용액을 여과시키고 감압하에서 페이스트로 증발시켰고 페이스트를 플래시 실리카 겔 (600.0 g) 위에서 크로마토그래피하였다. DCM 중의 5% 메탄올로의 용출은 생성물을 용출시켰다. TLC위에서 균질한 모든 소부분들을 모으고 증발시켜 무색의 고무를 수득하였다. 고무를 이소프로필에테르 및 DCM으로부터 재결정화하여 화합물 E를 제조하였다. 수율: 4.1 g(55%). ¹H NMR (CDC1₃) :δ 1.5 (s, 27H, 메틸s), 2.0-3. 75 (m, 24H,NCH ₂), 5.25 (d, 2H,Ar-CH ₂), 7.3 (m,5H,Ar-H), 7.8 (d, 2H, Ar-H) 및 7.95 (d, 2H, Ar-H). M. S. -m/z 804.3 [M+H].

화합물 E를 제조하기 위한 상기 산 E의 환원, 도 23A:

상기 (1.0 g, 1.24 mmol)로부터 벤질 에스테르 E를 메탄올-물 혼합물(10.0 mL, 95: 5)에 용해시키고 탄소 상 팔라듐을 첨가하였다(10%, 0.2 g). 용액을 그후 8시간동안 50.0 psi에서 Parr 장치를 사용하여 수소화하였다. 용액에서 촉매를 여과해버리고 그후 감압하에서 농축시켜 무색의 보풀 고체 F를 수득하였다. 그것은 더 정제되지 않앗고 즉시 다음 단계로 보내졌다. MS:m/z 714.3 [M+Na].

L203의 제조 도 23B

상기 산 F은 위에서 기술한 표준 커플링 과정을 사용하여 상기로부터수지 [H-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1- M-수지] 수지 A 및 F에서 아민으로 커플링되었다. 0.5 g (0.2 mmol)의 수지는 31.5 mg의 최종 정제된 펩티드 (10.9%) N[(3 β,5β,12α)-3-[[[4,7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1- 히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L203)를 산출하였다 (도 23B).

실시예 XVII-도 24

L204 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.5 g, 0.2 mmol) (수지 A)를 사용하였다.

Fmoc-Gly-OH를 먼저 로딩하고 이어서 표준 커플링 조건을 채용하는 상기 과정으로부터 F (도 23A). 수율: 24.5 mg (8.16%)의 N-[(3β, B, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일]아세틸]아미노]-4-아미노벤조일-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L204) (도 24).

실시예 XVIII -도 25

L205 의 합성

Fmoc-6-아미노니코틴산^l 은 문헌에 기술된 바와 같이 제조하였다 ("치료 사용을 위한 디아실히드라진 compiounds의 합성". Hoelzemann,G. ; Goodman, S. (Merck 특허 G. m. b. H.., GerMany). Ger. Offen.2000, 16 pp. CODEN: GWXXBX DE 19831710 Al20000120) 미리로딩된 Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.5 g, 0.2 mmol) 수지 A으로 커플링하고, 이어서 상기와 같이 다른 아미노 기로 커플링하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-4-아미노벤조일-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L205)을 제조하였다, 수율: 1. 28 mg (0.4%).

실시예XIX-도 26A 및 26B

L206 의 합성

4'-Fmoc-아미노-3'-메틸비페닐-4-카르복실산 B:

아미노산(0. 41 g, 1.8 mmol)을 10. 0 mL의 물 중의 세슘 카보네이트 (0.98 g, 3.0 mmol)의 용액에 용해시켰다. "사람 혈청 알부민에 대한 감소된 친화도를 갖는 디플루니살 유사체의 합리적인 설계" Mao, H. et al J. Am. Chem. Soc.,2001, 123 (43), 10429-10435 참조. 이 용액을 얼음 욕에서 냉각시키고 THF (10.0 mL)중의 Fmoc-Cl (0.52 g, 2.0 mmol)의 용액을 격렬한 교반과 함께 적가하였다. 첨가후에, 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용액을 그후 2NHC1로 산성화하였다. 침전된 고체를 여과시키고 물 (3 x 20 mL)로 세척하고 공기 건조시켰다. 미정제 고체를 그후 아세토니트릴로부터 재결정화시키겨 무색의 보풀 고체 B 도 26A를 수득하였다. 수율: 0.66 g(75%). ¹H NMR (DMSO-d₆):δ 2.2 (s, Ar-Me), 4.25 (t, 1H,Ar-CH,j =5Hz), 4.5 (d, 2H,O-CH2, j = 5.0 Hz), 7.1 (bs, 1H, CONH), 7.4-8. 0 (m, 8H,Ar-H) 및 9.75 (bs, 1H, -COOH). M. S.: m/z 472.0 [M-H].

상기로부터 산 B는 표준 커플링 조건을 가지고 Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.2g, 0.08 mmol) 수지 A로 커플링되었다. 추가의 기는 상기와 같이 첨가되어 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]- [4'-아미노-2'-메틸 비페닐-4-카르복실]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-E-류실-L 메티오닌아미드 (L206)을 제조하였다. 수율 30.5 mg (24%)

실시예XX-도 27A-B

L207 의 합성

위에서 기술한 과정을 사용하여 3'-Fmoc-아미노-비페닐-3-카르복실산을 대응하는 아민으로부터 제조하였다. "3-메틸-4-니트로벤제넨디아조늄 아세테이트와 메틸 벤조에이트와의 반응에 의한 3'-메틸-4-'- 니트로비페닐카르복실산의 합성, Boyland, E. 및 Gorrod, J. , J. Chem. Soc. , Abstracts(1962), 2209- 11.0 참조. 7G의 아민은 0.81 g의 Fmoc-유도체 (58%)를 수득하였다(화합물 B, 도 27A). ¹H NMR (DMSO-d6): δ4. 3 (t, 1H, Ar-CH), 4.5 (d, 2H, O-CH2), 7.25-8. 25 (m, 16H, Ar-H) 및 9.9 (s, 1H,-COOH). M. S. -m/z 434 [M-H]

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.2g, 0.08 mmol) 수지 A 를 상기 산 B와 상기의 추가의 기에 커플링시켰다(도 27B). 29.0 mg의 N-[(3β,5β,12α)-3- [[[[ [4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노] - [3'-아미노-비페닐-3-카르복실]-1-글루타미닐-1-트립토필- L-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L207)를 제조하였다(23%).

실시예XXI -도 28

L208 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지(0. 2g, 0.08 mmol) A 를 탈블로킹하고 커플링제로서 HATU 를 사용하여 테레프탈산에 커플링하였다. 수지에서 결과의 산을 디C 및 NHS로 활성화시키고 그후 에틸렌디아민에 커플링하였다. DOTA- 모노산을 최종적으로 수지위에서 아민에 커플링하였다. N-[(3β,5β,12α)-3-[[[[[4, 7, 10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] 아세틸] 아미노]- [1,2- 디아미노에틸-테레프탈릴]-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 (L208)를 17.5 mg (14%)의 수율을 위해 제조하였다.

실시예XXII-도 29A-B

L209 의 합성

Boc-Glu (G-OBn)-G-OBn:

Boc-글루탐산 (5.0 g, 20.2 mol)을 THF (50.0 mL)에 용해시키고 얼음욕에서 0℃로 냉각시켰다. HATU (15.61 g, 41.0 mmol)과 이어서 디EA (6.5 g, 50.0 mmol)을 첨가하였다.

반응 혼합물을 0℃에서 30분동안 교반하였다. 글리신의 벤질 에스테르 [8.45 g, 50 mmol, 벤질 글리신 염산염을 나트륨 카보네이트로 중화함으로써 그리고 DCM으로 추출하고 용매 제거에 의해 발생됨]를 THF (25.0 mL)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 RT으로 가져가고 20시간동안 실온에서 교반하였다. 모든 휘발성물질 을 감압하에서 제거하였다. 잔기를 포화 나트륨 카보네이트 용액(100 mL)으로 처리하고 에틸 아세테이트 (3 x100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 조합하고 1NHC1 (2x 100mL)과 물 (2 x 100 mL)로 세척하고 건조시켰다 (황산나트륨).

용액을 여과시키고 용매를 감압하에서 제거하여 페이스트를 수득하였고 이것을 플래시 실리카 겔 위에서 크로마토그래피하였다(500.0 g). DCM 중의 2% 메탄올로 용리하여 무색의 페이스트로서 생성물을 산출하였다 (화합물 B, 도 29A). 수율: 8.5 g (74.5%). ¹H NMR(CDC1₃) :δ1.4 (s, 9H,-CH ₃s), 2.0-2. 5 (m,4H,-CH-CH 및 CO-CH), 4.2 (m,5H, N-CH-CO), 5.15 (s, 4H,Ar-CH), 5.45 (bs, 1H, Boc-NH), 7.3 (m,1OH, Ar-H) 및 7.6 (2bs, 2H, CONH). M. S. -m/z 564.1 [M+H]. 분석적 HPLC 잔류 시간-8.29 min ( 15분에 걸쳐서 > 97% 순수한, 20-65% B).

H-Glu (G-OBn)-G-OBn :

상기로부터 완전히 보호된 글루탐산 유도체 (1.7 g, 3.2 mmol) B를 DCM/TFA (4: 1,20 mL)에 용해시키고 TLC (2h)에서 출발 물질이 사라질 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 빙냉 포화 나트륨 바이카보네이트 용액 (200 mL)에 붓고 유기층을 분리시키고 수성 층을 2 x 50mL의 DCM으로 추출하였고 유기 층으로 조합하였다. DCM 층을 포화 나트륨 바이카보네이트 (2 x100 mL), 물 (2 x 100 mL)으로 세척하고 건조시켰다(황산나트륨). 용액을 여과시키고 감압하에서 증발시켯고 잔여물을 진공하에서 건조시켜 유리를 수득하였고 (화합물 C, 도 29A) 이것을 더 정제하지 않고 다음 단계로 가져갔다. 수율:0. 72 g (95%). M.S.-m/z 442.2 [M+H].

(DOTA-트리-t-부틸)-Glu-(G-OBn)-G-OBn :

무수 DCM (10.0 mL)중의 상기로부터 아민 C(1.33 g, 3 mmol)를 in was added to an 활성화 용액 of DOTA-트리-t-부틸 에스테르 [2.27 g, 3.6 mmol을 HBTU, 1.36 g, 3.6 mmol 및 디EA 1.04 g, 8 mmol 으로 처리하고 25 mL의 건조 DCM중에서 30분동안 실온에서 교반하였고 ] 20시간동안 실온에서 교반하였다]. 반응 혼합물을 200 mL의 DCM으로 희석시켰고 포화 나트륨 카보네이트 (2 x 150 mL)으로 세척하고 건조시켰다 (황산나트륨). 용액을 여과시키고 용매를 감압하에서 제거하여 갈색 페이스트를 수득하였다.

미정제 생성물은 플래시 실리카 겔(500. 0 g)위에서 크로마토그래피하였다. DCM 중의 2% 메탄올로 용리하여 생성물을 무색의 고무로서 제공하였다(화합물 D, 도 29A).

수율: 1.7 g (56.8%). ¹H NMR(CDC1₃):δ 1.3 및 1.4 (2s,9H, 3 메틸 각각은 자유 염기와 DOTA의 나트륨 부가생성물로부터), 2.0-3. 5 (m, 20H,N-CH2s 및 -CH-CH2 및 CO-CH2), 3.75-4. 5 (m, 13H,N-CH2-CO), 5.2 (m, 4H, Ar-CH2) 및 7.25 (m,l OH, Ar-H).

M. S.m/z-1018. 3[M+Na] 및 996.5 [M+H] 및 546.3 [M+Na+H] /2. HPLC-잔류 시간: 11.24 min( 30분에 걸쳐서 > 90%, 20-80% B ).

(DOTA-트리-t-부틸)-Glu-(G-OH)-G-OH :

상기로부터 비스 벤질 에스테르 (0. 2 g, 0.2 mmol)를 메탄올-물 (20 mL, 9: 1)에 용해시키고 10% Pd/C 촉매(0.4 g, 50% by wt. 물)의 존재하에서 50 psi에서 수소화하였다. 출발 물질이 HPLC와 TLC에서 사라진 후에(4h), 용액에서 촉매를 여과해버리고 용매를 감압하에서 제거하고 잔여물을 고진공하에서 약 20동안 건조시켜( < 0. 1 mm) 무색의 포말로서 생성물을 수득하였다 (화합물 E, 도 29A). 수율:0. 12 g (73.5%). ^lH NMR (DMSO-d6) :δ 1.3 및 1.4 (2s, 9H 자유 염기의 메틸과 DOTA의 나트륨 부가생성물에 해당함), 1.8-4. 7 (m, 33H,NCH ₂s,COCH ₂ 및 CH-CH ₂ 및 NH-CH-CO), 8.1, 8.2 및 8.4 (3bs, NHCO). M. S.:m/z-816.3 [M+H] 및 838.3 [M+Na]. HPLC 잔류 시간: 3.52 min (30분에 걸쳐 20-80% B, > 95% 순수한).

H-8-아미노-3,6-디옥사옥타노일-8-아미노-3,6-디옥사옥타노일-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-하이s-Leu-Met-NH₂ :

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.5 g, 0.2 mmol) A를 탈블로킹하고 2회 이어서 8-아미노-3,6-디옥사옥탄산으로 커플링하여 예비 HPLC 정제 후에 상기 탈보호된 펩티드 (화합물 F, 도 29B)를 수득하였다. 수율: 91.0 mg (37%).

HPLC 잔류 시간: 8.98 min ( 10분에 걸쳐 > 95% 순도, 10-40% B). M. S.: m/z- 1230.6 [M+H], 615.9 [M+2H] /2.

상기로부터 비스-산 E 및 아민 F의 용액 상 커플링 (도 29B)

비스-산 (13.5 mg, 0.0166 mmol) E 를 100μL의 건조 아세토니트릴에 용해시키고 NHs(4.0 mg, 0.035 mmol) 및 디C (5.05 mg, 0.04 mmol) 으로 처리하고 24시간동안 실온에서 교반하였다. 상기 활성화 산에, 유리 아민 F(51. 0 mg, 0.41 mmol) [포화 나트륨 바이카보네이트으로 처리하고 그 용액을 냉동 건조하여 보풀 고체로서 아민을 수득함에 의한 TFA 염으로부터 발생됨]을 첨가하고 이어서 100μL 의 NMP를 첨가하고 교반을 40시간동안 더 실온에서 계속하였다. 용액을 무수 에테르 (10 mL)로 희석하고 침전물을 원심분리에 의해 수집하고 2 x 10 mL 의 무수 에테르로 다시 세척하였다. 미정제 고체를 그후 예비 HPLC 에 의해 정제하여 생성물을 7.5 mg (14.7%)의 수율과 함께 도 29B에서와 같은 무색의 보풀 고체 L209 로서 수득하였다.

실시예XXIII-도 30A-B

L210 의 합성

H-8-아미노옥타노일-8-아미노옥타노일-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-하이s-Leu-Met-NH₂ : 이는 또한 화합물 F 도 29B의 경우와 정확하게 동일한 방식으로 하지만 1-아미노옥탄산을 사용하여 제조되었고, 아민 (화합물 B, 도 30A)을 예비 HPLC에 의해 정제하였다. 수율: 95.0 mg (38.9%). HPLC 잔류 시간: 7.49 min (10.0분에 걸쳐서 > 95% 순도 ;10-40% B ). M. S.:m/z-1222. 7 [M+H], 611.8[M+2H]/2.

(DOTA-트리-t-부틸)-Glu-(G-OH)-G-OH (0.0163 g, 0.02 mmol)을 L209의 경우와 같이 100μL의 아세토니트릴 중에서 그것의 비스-NHS 에스테르로 변환하고 유리 염기, lOOμL의 NMP중의 화합물 B (60.0 mg, 0.05 mmol)로 처리하고, 반응을 40h동안 계속하였고 그후 워크업하고 상기와 같이 정제하여 11.0 mg (18%)의 수율을 위해 L210 도 30B를 제조하였다.

실시예XXIV-도 31

L211 의 합성

표준 프로토콜을 사용하여 0.2 g의 Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.08 mmol)로부터 제조하였음. N- [(3β,5β,12α)-3- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L211를 4.7 mg (3.7%)의 수율로 제조하였다(도31).

실시예 XXV - 도 32

L212 의 합성

표준 프로토콜에 의해 수지에서 서열을 건설함으로써 Rink Amide Novagel 수지 (0.47 mmol/g, 0.2 g, 0.094 mmol)로부터 제조됨. N- [(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노] -글리실-4-아미노벤조일-1-글루타밀-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 L212을 25.0 mg (17.7%)의 수율을 위해 제조되었다(도 32).

실시예XXVI-도 33

L213 의 합성

Fmoc-Met-2-클로로트리틸 클로라이드 수지 (NovaBioChem, 0.78 mmol/g, 0.26 g, 0.2 mmol)로부터 제조되었고 서열의 나머지는 표준 방법론을 사용하여 건설되었다. N[(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실- L-히스티딜-1-류실-1-메티오닌 L213을 49.05 mg (16.4%)의 수율을 위해서 제조하였다(도 33).

실시예 XXVII-도 34

L214 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.2 g, 0.08 mmol) A를 사용하여 표준 조건을 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7, 10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L214을 제조하였다. 8.5 mg의 생성물 (6.4%)을 얻었다(도 34).

실시예XXVIII-도 35

L215의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.2 g, 0.08 mmol) A를 사용하여 N[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-아르기닐-1-류실-글리실-1- 아스파르기닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 L215를 제조하였다. 9. 2 mg (5.5%)을 수득하였다(도 35).

실시예 XXIX-도 36

L216 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 (0.2 g, 0.08 mmol) A를 사용하여 N[(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-아르기닐-1-티로시닐-글리실-1- 아스파르기닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1- 메티오닌아미드 L216을 제조하였다. 25.0 mg (14.7%)을 얻었다. (도 36).

실시예 XXX-도 37

L217 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W(Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 A (0.2g, 0.08 mmol)를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일]아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-리실-1-티로시닐-글리실-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드 L217을 제조하였다. 58. 0 mg (34.7%)을 수득하였다(도 37).

실시예XXXI -도 38

L218 의 합성

Fmoc-Q (Trt)-W (Boc)-A-V-G-H (Trt)-1-M-수지 A (0.2g, 0.08 mmol)을 사용하였다. Fmoc- Lys(ivDde)은 리신의 도입을 위해 채택하였다. 선형 서열이 완성된 후에, DMF 중의 10% 히드라진을 사용하여 리신의 보호 기를 제거하였다(2 x 10 mL; 10 min 각각 그후 세척함). 아미노산의 나머지는 그후 필요한 펩티드 서열을 완성하기 위해서 "일반적인" 섹션에서 기술된 과정을 사용하여 도입되었다. 40.0 mg (23.2%)의 수율로 얻어진 도 38에서 L218.

실시예 XXXII-도 39

L219 의 합성

4-술파밀부티릴 AM Novagel 수지를 사용하였다(1.1 mmol/g; 0.5 g; 0.55 mmol). 제 1 아미노산은 -20℃에서 20시간동안 이 수지 위로 로딩하였다. 서열의 나머지는 정상 커플링 과정을 이용하여 완성되었다. 세척한 후에, 수지는 20.0 eq.의 요오도아세토니트릴 및 10.0 당량의 디EA으로 20시간동안 알킬화하였다. 수지는 그후 액체를 배출시키고 세척하고 그후 20시간동안 5.0 mL의 THF중에서 2.0 eq.의 펜틸아민으로 분할하였다. 수지는 그후 2 x 5. 0 mL의 THF으로 세척하였고 모든 여과액을 조합하였다. THF은 그후 감압하에서 증발시키고 잔여물은 그후 10.0 mL 의 시약 B로 탈블로킹하였고 펩티드 N- [(30, 5p, 12cc)-3- [[[4, 7,10- 트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로 do dec-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4- 아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1- 히스티딜-1-류실-아미노펜틸, L219을 이전에 기술한 바와 같이 정제하였다. 28.0 mg (2.8%)를 얻었다(도 39).

실시예XXXIII-도 40

L220 의 합성

NovaSyn TGR (0.25mmol/g ; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-D- 알라닐-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, L220를 제조하였다. 31.5 mg (41.4%)을 수득하였다(도 40).

실시예XXXIV-도 41

L221 의 합성

NovaSyn TGR (0.25 mmol/g; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-[(3β,5β,12α)-3- [[[4,7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-D-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-류신아미드, L221를 제조하였다. 28. 0 mg (34.3%)를 얻었다(도 41).

실시예XXXV-도 42

L222 의 합성

NovaSyn TGR (0.25mmol/g ; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A가 사용되어 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-D-티로시닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-베타알라닐-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1-노르류신아미드, L222을 제조하였다. 34. 0 mg (40.0%)가 얻어졌다(도 42).

실시예 XXXVI-도 43

L223 의 합성

NovaSyn TGR (0.25 mmol/g; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-페닐알라닐-1-글루타미닐-1-트립토필-1- 알라닐-1-발릴-베타알라닐-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1-노르류신아미드, L223를 제조하였다. 31. 2 mg(37. 1%)를 얻었다(도 43).

실시예XXXVII-도 44

L224 의 합성

NovaSyn TGR (0.25 mmol/g; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7, 10-트리스 (카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-글리실-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1-류신아미드, L224를 제조하였다. 30.0 mg (42.2%)을 얻었다(도 44).

실시예XXXVIII-도 45

L225 의 합성

NovaSyn TGR (0.25mmol/g ; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A 를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로dodec-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-류실-1-트립토필-1-알라닐-1-발리닐-글리실-1-세리닐-1-페닐알라닐-1-메티오닌아미드, L225를 제조하였다. 15. 0 mg (20.4%) 를 얻었다(도 45).

실시예XXXIX-도 46

L226 의 합성

NovaSyn TGR (0.25 mmol/g; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1,4, 7,10-테트라아자시클로도데스-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-히스티딜-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, L226를 제조하였다. 40. 0 mg (52.9%)를 얻었다(도 46).

실시예XL -도 47

L227 의 합성

NovaSyn TGR (0.25mmol/g ; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A를 사용하여 N-N-[(3β, 5β, 12α)-3-[[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로dodec-1-일] 아세틸] 아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-류실-1-트립토필-1-알라닐-1-트레오닐l-글리실- L-히스티딜-1-페닐알라닐-1-메티오닌아미드 L227를 제조하였다. 28. 0 mg (36.7%) 를 수득하였다(도 47).

실시예XLI-도 48

L228 의 합성

NovaSyn TGR (0.25 mmol/g; 0.15 g, 0.05 mmol) 수지 A 를 사용하여 N-[(3β, 5β, 12α)-3- [[[4, 7,10-트리스 (카르복시메틸)-1, 4,7,10-테트라아자시클로dodec-1-일] 아세틸]아미노]-글리실-4-아미노벤조일-1-글루타미닐-1-트립토필-1-알라닐-1-히스티딜-1-페닐알라닐-1-메티오닌아미드, L228를 제조하였다. 26. 0 mg (33.8%)을 수득하였다 (도 48).

실시예 XLII -추가의 GRP 화합물의 합성

A. 4,4'-아미노메틸비페닐카르복실산(B2) 및 3, 3'-아미노메틸비페닐카르복실산(B3)의 제조를 위한 일반적인 과정:

1.메틸-히드록시메틸비페닐카복실레이트 :

시중에서 입수가능한 (Aldrich 화학 Co.) 4- 히드록시메틸페닐붕산 또는 3-히드록시메틸페닐붕산 (1.0 g, 6.58 mmol)을 용액이 균질해질때까지 이소프로판올 (10 mL)과 2M 나트륨 카보네이트 (16 mL)와 함께 교반하였다.

용액은 용액을 통해 질소를 통과시킴으로써 탈가스시켰고 그후 고체 메틸-3-브로모벤조에이트, 또는 메틸-4-브로모벤조에이트 (1.35 g, 6.3 mmol)로 처리하고 이어서 Pd (0) 촉매{[(C₆H₅)₃P]₄Pd; 0.023g, 0.003 mmol}로 처리하였다. 반응 혼합물을 TLC 분석 (2-3 h)에 의해 결정된 바와 같이, 출발 브로모벤조에이트가 소비될 때까지 환류에서 질소하에서 유지하였다. 반응 혼합물은 그후 250 mL의 물로 희석하고 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 조합하고 포화 나트륨 바이카보네이트 용액 (2 x 50 mL)으로 세척하고 건조시켰다(Na₂SO₄). 용매를 감압하에서 제거하고 잔여물을 플래시 실리카 겔 (100 g) 위에서 크로마토그래피하였다. 헥산중에 40% 에틸 아세테이트로 용리하여 고체 또는 오일로서 생성물을 산출하였다.

수율 :

B2-0.45g(31%) ; m.p.-170-171℃.

B3-0.69 g (62%); 오일.

¹H NMR (CDC1₃) δ B2-3.94 (s, 3H,-COOCH₃), 4.73 (s, 2H,-CH2-Ph), 7.475 (d, 2H, J= 5Hz), 7.6 (d, 2H, J = 10 Hz), 7.65 (d, 2H, J = 5Hz) 및 8.09 (d, 2H, J = 10 Hz).

M. S. -m/e-243. 0 [M+H]

B3-3.94 (s, 3H,-COOCH₃), 4.76 (s, 2H,-CH₂-Ph), 7.50 (m, 4H), 7.62 (s, 1H), 7.7 (s, 1H), 8.00 (s,1H) 및 8.27(s,1H).

M.S.-m/e-243. 2 [M+H]

2.아지도메틸비페닐 카복실레이트 :

건조 디클로로메탄 (10 mL)중의 상기 비페닐 알코올 (2.0 mmol)을 얼음중에 냉각시키고 디페닐포스포릴 아지드 (2.2 mol) 및 DBU (2.0 mmol)으로 처리하고 질소하에서 24시간동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 유기 층을 조합하고 0.5 M 시트르산 용액 (2 x 25 mL), 물 (2 x 25 mL)로 성공적으로 세척하고 건조시켰다(Na₂S0₄). 용액을 여과시키고 감압하에서 증발시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 4, 4'-아이소머는 헥산/에테르로부터 결정화하고 3,3'-아이소머는 이소프로필 에테르로 가루화하고 모든 불순물을 제거하였다; 생성물은 TLC 분석에서 결정될 때 균질하였고 더 나아간 정제는 필요하지 않았다.

수율:

메틸-4-아지도메틸-4-비페닐카르복실레이트-0.245 g (46%); m.p.-106-108℃.

메틸-4-아지도메틸-4-비페닐카르복실레이트-0.36 g (59%, 오일)

¹H NMR (CDC1₃) δ-4, 4'-아이소머-3.95 (s, 3H,-COOCH3), 4.41 (s, 2H,-CH2N3), 7.42 (d, 2H, J = 5 Hz), 7.66 (m, 4H) 및 8.11 (d,2H, J = 5 Hz)

3,3'-아이소머-3. 94 (s, 3H,-COOCH₃), 4.41 (s, 2H,-CH2N3), 7.26-7. 6 (m,5H), 7.76 (d,1H, J = 10 Hz), 8.02 (d,1H, J = 5 Hz) 및 8.27 (s,1H).

3. 비페닐카복실레이트의 메틸 에스테르의 가수분해 :

약 4 mmol의 메틸 에스테르는 20 mL의 2M 수산화리튬 용액으로 처리하고 용액이 균질해질때까지 교반하였다 (20-24 h).

수성 층을 2 x 50 mL의 에테르로 추출하였고 유기 층을 버렸다. 수성 층을 그후 0.5 M 시트르산으로 산성화하고 침전된 고체를 여과시키고 건조하였다. 다른 정제는 필요없고 산을 다음 단계로 가져갔다.

수율:

4,4'-아이소머-0. 87 g의 메틸 에스테르는 0.754 g의 산(86.6%)을 산출하였다 ; m.p.-205-210℃

3,3'-아이소머-0. 48 g의 메틸 에스테르는 0.34 g의 산(63.6%)을 제공하엿다; m. p. -102-105℃.

¹H NMR (DMSO-d₆) δ : 4,4'-아이소머-4. 52 (s, 2H,-CH2N3), 7.50 (d, 2H, J = 5 Hz), 7.9 (m, 4H), 및 8.03 (d, 2H, J = 10 Hz)

3,3'-아이소머-4. 54 (s, 2H,-CH₂N₃), 7.4 (d, 1H, J = 10 Hz), 7.5-7. 7 (m, 4H), 7.92 (ABq, 2H) 및 8.19 (s, 1H).

4. 아지드의 아민으로의 환원:

이것을 고상에서 수행하였고 아민을 절대 분리하지 않았다. 아지도카르복실산을 표준 펩티드 커플링 프로토콜을 사용하여 수지위로 로딩하였다. 세척후에, 아지드를 함유하는 수지는 THF/물 중의 20 당량의 트리페닐포스핀(95: 5)으로 24 시간동안 진탕하였다. 용액을 양의 압력의 질소 하에서 배출시키고 그후 표준 세척 과정으로 세척하였다. 결과의 아민은 다음 커플링에서 채택되었다.

5.(3β, 5β, 7a, 12a)-3- [{ (9H-플로우렌-9일메톡시) 아미노]아세틸} 아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-산:

트리부틸아민 (3.2 mL); 13.5 mmol)을 0℃에서 교반된 THF (80mL)중의 Fmoc-글리신 (4.0 g, 13.5 mmol)의 용액에 적가하였다.

이소부틸클로로포르메이트 (1.7 mL; 13.5 mmol)를 그후에 첨가하고, 10분 후에, DMF (80 mL)중의 트리부틸아민 (2.6 mL; 11.2 mmol) 및 (3 , 5, B, 7a, 12a)-3-아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-산 (4.5 g; 11.2 mmol)의 현탁액을 1시간에 걸쳐, 냉각된 용액에 적가하였다. 혼합물을 주위 온도까지 데우고 6시간 후에, 용액을 120 mL로 농축시키고, 그후 물 (180 mL)과 1NHC1(30 mL)을 첨가하였다(최종 pH 1.5).

침전된 고체를 여과시키고, 물 (2 x 100 mL)로 세척하고, 진공 건조시키고 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 클로로포름/메탄올 (8: 2)으로 용리하여 무색의 고체로서 생성물을 산출하였다.

수율: 1.9 g (25%). TLC:R_f 0. 30 (CHC1₃/MeOH/NH₄0H-6:3:1).

화합물의 시험관내 및 생체내 테스트

실시예 XLIII : PC3 세포주에서 GRP 리셉터에 대한 시험관내 결합 분석평가- 도 14 A-B

잠재적인 납 화합물을 확인하기 위해서, GRP-R에 대해 높은 친화도를 갖는 화합물을 확인하는 시험관내 분석평가를 사용하였다. 사람 전립샘 암으로부터 유도된 PC3 세포주가 세포 표면 위에서 GRP-R의 높은 발현을 나타내기 때문에, 96-웰 플레이트 형태에서 방사선 리간드 결합 분석평가가 개발되었고 ¹²⁵I-BBN의 GRP-R 양성 PC3 세포에 대한 결합 및 본 발명의 화합물이 이 결합을 억제하는 능력을 측정하기 위해 입증되었다. 이 분석평가는 ¹²⁵I-BBN의 GRP-R의 결합을 억제하는, RP527 리간드, L134 리간드 (대조군) 및 본 발명의 화합물에 대한 IC₅₀를 측정하는데 사용되었다. (RP527 N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-5-아미노펜탄산-BBN (7-14) [SEQ. ID. NO:1], 이는 MS = 1442.6 및 IC50-0.84을 가진다). Van de Wiele C, Dumont F et al.,테크네튬-99m RP527, GRP 리셉터- 발현 악성종양의 시각화를 위한 GRP 유사체: 실행가능성 연구. Eur. J. Nucl. Med. , (2000) 27; 1694-1699.;L134=D03A-모노아미드-8-아미노-옥탄산-BBN (7-14) [SEQ. ID. NO:1], 이것은 MS=1467.0를 가진다. L134는 D03A 모노아미드-아미노옥타닐-BBN [7-14]이다.

방사선리간드 결합 플레이트 분석평가는 BBN 및 BBN 유사체에 대해서 (시중에서 입수가능한 BBN 및 L1을 포함) 및 또한 방사선리간드로서^99mTc RP527를 사용하여 확인하였다.

A. 물질 및 방법:

1. 세포 배양:

PC3 (사람 전립샘 암 세포주)를 American Type Culture Collection으로부터 입수하였고 조직 배양 플라스크에서 (Corning) RPMI 1640에서 배양하였다. 이 성장 배지은 최종 농도의 페니실린- 스트렙토마이신 (100 units/mL), 및 펀지존 (0. 25μg/mL)에 대해서 10% 열 비활성화 FBs(Hyclone,SH30070.03), 10 mM HEPEs(GibcoBRL, 15630-080), 및 항생물질/항진균제(GibcoBRL, 15240-062)으로 보충하였다. 모든 배양은 37℃에서 5%C0₂/95% 공기를 함유하는 습윤화 분위기에서 유지되었고, 지시된 0.05% 트립신/EDTA (GibcoBRL 25300-054)을 사용하여 일상적으로 통과되었다. 실험을 위한 세포들은 96-웰 백색/투명 바닥 마이크로타이터-플레이트(Falcon Optilux-1) 또는 96-웰 블랙/투명 콜라겐 I 셀웨어 플레이트 (Beckton 디ckinson Biocoat) 중의 하나에서 2.0x10⁴/웰 의 농도로 플레이팅되었다. 결합 연구를 위해 플레이팅 1 또는 2일후에 플레이트를 사용하였다.

2. 결합 완충제:

20mM HEPES, 0.1% BSA (w/v), 0.5 mM PMSF (AEBSF), 바시트라신 (50 mg/500 ml), pH 7.4로 보충된 RPMI 1640.

¹²⁵I-BBN (담체 없는, 2200Ci/mmole)를 Perkin-Elmer로부터 얻었다.

B. PC3 셀에서 GRP-R에 대한 1251-BBN로의 경쟁 분석평가:

A 96-웰 플레이트 분석평가를 사용하여 ^l25I-BBN의 사람 GRP-R에 대한 결합을 억제하기 위한 본 발명의 다양한 화합물의 IC₅₀ 를 결정하였다. 하기의 일반적인 과정은 다음과 같았다:

시험된 모든 화합물은 결합 완충제에 용해시키고 적절한 희석을 또한 결합 완충제에서 수행하였다. 분석평가를 위한 PC3 세포(사람 전립샘 암 세포주)는 96-웰 백색/투명 바닥마이크로타이터 플레이트 (Falcon Optilux-I) 또는 96 웰 블랙/투명 콜라겐 I 셀웨어 플레이트 (Beckton 디ckinson Biocoat)중의 하나에서 2.0x10⁴/웰의 농도에서 플레이팅하였다. 플레이트는 플레이팅 1 또는 2일 후에 결합 연구에 사용하였다. 플레이트는 분석평가 전에 군집도 (> 90% 군집)를 체크하였다. 분석평가를 위해서, RP527 또는 L134 리간드, (대조군), 또는 본 발명의 화합물을 1.25x10^-9 M 내지 5xlO^-9M 범위의 농도에서, ^l25I-BBN (25,000 cpm/웰)로 공-배양하였다. 이들 연구는 웰당 75μl의 분석평가 부피로 수행하였다. 각 데이타 점에 대해서 3중 웰을 사용하였다. 적절한 용액을 첨가한 후에, 플레이트를 1시간동안 4℃에서 배양하여 리간드-리셉터 착체의 내재화를 방지하였다. 배양은 200μl의 얼음-냉각 배양 완충제의 첨가에 의해 종결되었다. 플레이트를 5 시간 세척하고 블로팅 건조시켰다. 방사능은 LKB CompuGamma 카운터 또는 마이크로플레이트 섬광 카운터를 사용하여 검출되었다.

RP527 (대조군) 및 L70, 본 발명의 화합물에 대한 경쟁 결합 곡선은 도 14A-B에서 찾아볼 수 있다. 이들 데이타는 RP527 대조군의 IC50이 2.5nM이고 L70, 본 발명의 화합물의 그것은 5nM라는 것을 보여준다. L134 대조군의 IC50은 5nM였다. 시험된 본 발명의 그러한 화합물의 IC50 값은 상기 표 1-3에서 찾아볼 수 있고, 그들이 대조군의 그것과 필적한다는 것을 보여주고 따라서 생체내 리셉터 갖는 세포에 의해 섭취를 허용하는 리셉터에 대한 충분한 친화도를 가질 것으로 예상될 것이다.

C. 내재화 & 유출 분석평가 :

이들 연구는 96-웰 플레이트에서 수행되었다. 혈청 단백질을 제거하기 위해 세척한 후에, 125I-BBN, l77Lu-LI 34 또는 방사선표지된 본 발명의 화합물로 37℃에서 40분동안 PC3 세포를 배양하였다. 배양은 200㎕ 의 얼음-냉각 결합 완충제의 첨가에 의해 멈추었다. 플레이트는 결합 완충제로 두번 세척하였다. 표면-결합된 방사선리간드를 제거하기 위해, 세포를 2분동안 0.2M 아세트산 (염수중), pH 2.8 로 배양하였다.

플레이트를 원심분리하고 산 세척 배지를 수집하여 흡수되지 않은 방사능의 양을 결정하였다. 세포를 수집하여 내재화된 ¹²⁵1-BBN의 양을 결정하고, 모든 샘플을 감마 카운터에서 분석하였다. 내재화 분석평가에 대한 데이타는 최종 시점에서 얻어진 카운트와, 다양한 시점에서 얻어진 카운트를 비교함으로써 표준화되었다 (T40 min).

유출 연구에 대해서, ¹²⁵I-BBN 또는 본 발명의 방사선표지화 화합물로 37℃에서 40분동안 PC3 세포를 로딩한 후에, 미결합 물질을 세척해버렸고, 내재화의 %를 상기와 같이 결정하였다. 세포를 그후 37℃에서 0.5, 1, 2, 또는 3시간에서 3시간이하동안 결합 완충제에 재현탁시켰다.

초기 로딩 수준에 대해 남아있는 내재화 양을 상기와 같이 결정하였고 표 5에 기록된 퍼센트 유출을 계산하기 위해 사용하였다.

이들 데이타는 본 발명의 화합물이 대조군과 유사한 범위까지 내재화되고 PC3 세포에 의해 보유된다는 것을 보여준다.

실시예 XLIV-Tc-표지화 GRP 화합물의 제조.

표 6에 확인된 본 발명의 화합물의 펩티드 용액은 0.1% 수성 TFA중의 1mg/mL 의 농도에서 제조되었다. 염화제1석 용액을 1 N HC1중의 SnCl₂. 2H₂0 (20 mg/mL)에 용해시킴으로써 제조되었다. 20㎍의 SnCl₂. 2H₂0/100μL을 함유하는 주석 글루코네이트 용액을 SnCl₂ 용액 (10 μL)의 알리콧을 물중에 13 mg의 나트륨 글루코네이트를 용해함으로써 제조된 나트륨 글루코네이트 용액에 첨가함으로써 제조되었다. 히드록시프로필 감마 시클로덱스트린[HP-γ-CD] 용액을 1 mL의 물 중에 50 mg의 HP-γ-CD를 용해함으로써 제조하였다.

아래에서 확인된 ^{99 m}Tc 표지화 화합물을 비표지화 화합물(20g), 50μL의 HP-γ-CD 용액, 100μL의 Sn-글루코네이트 용액 및 20내지 50μL의 99mTc 퍼테크네테이트 (5 내지 8 mCi, Syncor)의 20 μL의 용액을 혼합함으로써 제조되었다.

최종 부피는 약 200μL이었고 최종 pH는 4.5-5였다. 반응 혼합물을 15 내지 20분동안 100℃에서 가열하였고 그후 역상 HPLC에 의해 분석하여 반사선화학 순도 (RCP)를 결정하였다. 원하는 생성물 피크는 HPLC에 의해 분리되었고, 5 mg/mL 아스코르브산, 16 mg/mL HP-γ-CD 및 50 mM 포스페이트 완충제, pH 4.5를 함유하는 안정화 완충제안으로 수집하였고, 스피드 진공을 사용하여 아세토니트릴을 제거하였다. 분석 및 정제를 위해 사용된 HPLC 시스템은 다음과 같았다: C 18 Vydac 칼럼, 4.6 x 250 mm, 수성 상: 물중의 0.1 % TFA, 유기 상: 아세토니트릴중의 0.085% TFA .

유속: 1 mL/min. 개별적인 펩티드의 성질에 따라, 20%-25% 아세토니트릴/0.085% TFA에서의 등용매 용리를 사용하였다.

라벨링 결과가 표 6에 요약되어 있다.

1: 모든 화합물을 N,N'-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly 금속 킬레이터와 접합시켯다. 리간드의 Acm 보호된 형태를 사용하였다. 따라서, L2의 99mTc 착체를 제조하는데 사용된 리간드는 N,N'-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-RJQWAVGHLM이었다.

Acm 기는 Tc로 킬레이트화하는 동안 제거하였다.

2: 서열에서, "J"는 8-아미노-3,6-디옥사옥탄산을 의미하고 "a"는 D-알라닌을 말한다.

3: 초기 RCP 측정은 가열 직후와 HPL 정제 직전에 취했다.

4: 스피드 진공을 통해 HPLC 분리 및 아세토니트릴 제거 후에 RCP 를 결정하였다.

실시예 XLV-세포 결합을 위한 ^l77 Lu-L64의 제조 및 생물분포 연구:

이 화합물은 90℃에서 15 min동안 0.05N HCl (MURR) 중의 10μg L64 리간드 (물중의 1 mg/mL 용액의 10μL), 100 L 암모늄 아세테이트 완충제 (0.2M, pH 5.2) 및 ~1-2 mCi의 LuC1₃ 를 배양함으로써 합성되었다. 자유 ¹⁷⁷Lu는 물중의 20μL의 1% Na₂EDTA. 2H₂O (Aldrich) 용액을 첨가함으로써 청소되었다. 결과의 방사선화학 순도 (RCP)는 -95%였다. 방사선표지 생성물을 30 분에 걸쳐서 68% A/32% B 내지 66% A/34% B의 기울기와 함께, YMC Basic C8 칼럼 [4.6 x 150 mm], 30℃의 칼럼 온도 및 1 mL/min의 유속을 사용하는 HPLC에 의해, 미표지화 리간드 및 다른 불순물로부터 분리시켰고, 이때 A는 시트레이트 완충제 (0.02M, pH 3.0)이고, B는 80%CH₃CN/20% CH₃0H이다. 분리된 화합물은 -100% 의 RCP과 23.4 분의 HPLC 잔류 시간을 가졌다.

생물분포 및 세포 결합 연구를 위한 샘플은 1000μL의 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3, 1% 아스코르브산, 및 0.1 % HSA을 함유)안으로 원하는 HPLC 피크를 수집함으로써 제조되었다. 수집된 용출액중에 유기 용리제를 30분동안 원심분리 농축에 의해 제거하였다. 세포 결합 연구를 위해서, 정제된 샘플은 세포-결합 배지로 시험관내 연구의 30 분이내에 1.5 μCi/mL의 농도까지 희석시켰다. 생물분포 연구를 위해서, 샘플은 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3, 1% 나트륨 아스코르브산 및 0. 1% HSA을 함유함)으로 생체내 연구의 30 분이내에 50μCi/mL의 최종 농도까지 희석시켰다.

실시예 XLVI - 방사선치료 연구를 위한 ¹⁷⁷ Lu-L64의 제조:

이 화합물은 85℃에서 10분동안 70μg L64 리간드 (물중 70μL의 1 mg/mL 용액 ), 200μL 암모늄 아세테이트 완충제 (0.2M, pH 5.2) 및 0. 05N HCl(MURR)중의 ~30-40 mCi의 ¹⁷⁷LuCl₃ 을 배양함으로써 합성되었다. 실온으로 냉각한 후에, 자유 177Lu는 20μL의 물 중의 2% Na₂EDTA. 2H₂0 (Aldrich) 용액을 첨가함으로써 청소되었다. 결과의 방사선화학 순도 (RCP)는 ~95%였다. 방사선표지 생성물은 1 mL/min 의 유속에서 물, 50% 아세토니트릴/물 및 그후 1 g/L 수성 암모늄 아세테이트 용액으로 순차적으로 용출시킨 300VHP 음이온 교환 칼럼 (7.5 x 50 mm) (Vydac)을 사용하여, HPLC에 의해 비표지화 리간드 및 다른 불순물로부터 분리되었다. 원하는 화합물은 50% CH₃CN으로 칼럼으로부터 용출시키고 5% 아스코르브산, 0.2% HSA, 및 0.9% (v: v) 벤질 알코올을 함유하는 ~1 mL의 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3)와 혼합시켰다. 분리된 소부분의 유기 부분은 40분 동안 스핀 진공에 의해 제거되었고, 농축된 용액 (~20-25 mCi)을 5% 아스코르브산, 0.2% HSA, 및 0.9% (v: v) 벤질 알코올을 함유하는 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3)를 사용하여, 생체내 연구의 30 분 이내에 7.5 mCi/mL의 농도로 조절하였다. 결과의 화합물은 > 95%의 RCP를 가졌다.

실시예 XLVII- ¹¹¹ In-L64의 제조 :

이 화합물은 85℃에서 30분동안 10μg L64 리간드 (0.01 NHC1중의 2 mg/mL 용액의 5μL), 60μL 에탄올, 0. 05N HCl(80μL) 중의 1.12 mCi의 ¹¹¹InCl₃ 및 155μL 나트륨 아세테이트 완충제(0.5M, pH 4.5)를 배양함으로써 합성되었다. 자유 ¹¹¹In 는 20μL의 물중의 1% Na2EDTA. 2H₂0 (Aldrich) 용액을 첨가함으로써 청소되었다. 결과의 방사선화학 순도 (RCP)는 87%였다. 방사선표지 생성물은 Vydac C18 칼럼, [4.6x250 mm], 50℃의 칼럼 온도 및 1.5 mL/min의 유속을 사용하여, PLC에 의해, 20분에 걸쳐서 75% A/25% B 내지 65% A/35% B의 기울기와 함께, 미표지화 리간드 및 다른 불순물로부터 분리되었고, 이때 A는 물중의 0.1% TFA이고, B는 아세토니트릴중의 0.085% TFA이다. 이 시스템으로, ¹¹¹In-L64 에 대한 잔류 시간은 15.7 min이다. 분리된 화합물은 96.7%의 RCP를 가졌다.

실시예 XLVIII- ^l77 Lu-Ll34의 제조(대조군)

펩티드의 원액을 L134 리간드 (US 출원 공보 No. 2002/0054855 및 WO 02/87637에서 기술된 바와 같이 제조됨, 둘다 참고문헌으로 포함됨)을 0.01 N HCl중에 1 mg/mL의 농도까지 용해시킴으로써 제조하였다. 나타낸 순서로 하기의 시약을 혼합함으로써 ¹⁷⁷ Lu-L134 를 제조하였다.

0.2 MNH40Ac, pH 6.8 100 μl

펩티드 스톡, 0.01 N HCl 중의 1 mg/mL 5μl

0.05MHC1중의 ^l77LuCl₃ (MURR) 1.2μl (1.4 mCi)

반응 혼합물을 85℃에서 10분동안 배양하였다. 수조에서 실온으로 냉각한 후에, 20μl의 1% EDTA 용액과 20μl의 EtOH를 첨가하였다. 화합물을 C18 칼럼 (VYDAC Cat# 218TP54)을 사용하여 1 mL/min의 유속으로 21 내지 25% B 의 기울기로 20분에 걸쳐 용출된 HPLC에 의해 분석하였고, 이때 A는 0.1% TFA/H₂0이고 B는 0. 1%TFA/CH₃CN이다). ¹⁷⁷Lu-L134가 97.1% 수율 (RCP)로 형성되었고 이 시스템에서 ~16.1분의 잔류 시간을 가졌다.

실시예 XLIX - ^l77 Lu - L63 의 제조

이 화합물을 ^l77Lu-Ll34에 대해 기술한 바와 같이 제조하였다. 화합물은 HPLC에 의해서 1 mL/min의 유속으로 20분에 걸쳐 30-34% B의 기울기를 갖고 용출된 C18 칼럼 (VYDAC Cat # 218TP54)을 사용하여 분석되었다(이때 용매는 A. 0.1% TFA/H₂0이고 B는 0.1%TFA/CH₃CN이다). 형성된 ^l77Lu-L63 은 97.8%의 RCP와 이 시스템에서 ~14. 2 min의 잔류 시간을 가졌다.

실시예 L-세포 결합을 위한 ^l77 Lu-L70의 제조 및 생물분포 연구:

이 화합물은 위에서 기술된 과정에 따라 제조되었지만, L70 (실시예 II의 리간드)을 대신 사용했다. 정제를 YMC Basic C8 칼럼 (4.6 x 150 mm), 40분에 걸쳐 80% A/20% B 내지 75% A/25% B의 기울기를 가지고, 30℃의 칼럼 온도 및 1 mL/min의 유속을 사용하여, 수행하였고, 이때 A는 시트레이트 완충제 (0.02M, pH 4.5)이고, B는 80% CH₃CN/20% CH₃0H이다. 분리된 화합물은 -100%의 RCP와 25.4 min의 HPLC 잔류 시간을 가졌다.

실시예 LI-방사선치료 연구를 위한 ^l77 Lu - L70 의 제조 :

이 화합물은 L64에 대해 위에서 기술한 바와 같이 제조되었다.

실시예LII-세포 결합 및 생물분포 연구를 위한 ¹¹¹ In-L70의 제조 :

이 화합물은 85℃에서 30분동안 10μg L70 리간드 (0.01 NHCl중의 10μL 의 1 mg/mL 용액), 180μL 암모늄 아세테이트 완충제 (0.2M, pH 5.3), 0.05N HCl (61μL, Mallinckrodt) 중의 1.1 mCi 의 ¹¹¹InCl₃ 및 50μL의 염수를 배양함으로써 합성되었다. 자유 ¹¹¹In는 20μL의 물중의 1%Na₂EDTA. 2H₂0 (Aldrich) 용액을 첨가함으로써 청소되었다. 결과의 방사선화학 순도 (RCP)는 86%였다. 방사선표지 생성물은 하기 표에 열거된 기울기와 함께, Vydac 강한 음이온 교환 칼럼 [7.5 x 50 mm]에 연결된 카트리지, 30℃의 칼럼 온도와 1 mL/min의 유속을 사용하여, HPLC에 의해, 미표지화 리간드 및 다른 불순물로부터 분리되었고, 이때 A는 물중의 0.1 mMNaOH이고, pH 10.0, B는 물중의 1 g/L 암모늄 아세테이트 이고, pH 6.7이고 C는 아세토니트릴이다. 이 시스템을 가지고, ¹¹¹In-L70에 대한 잔류 시간은 15 min인 반면 L70 리간드에 대한 잔류 시간은 27 내지 28 min이다. 분리된 화합물은 96%의 RCP를 가졌다.

생물분포 및 세포 결합 연구를 위한 샘플은 원하는 HPLC 피크를 500μL 의 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3, 5% 아스코르브산,1 mg/mL L-메티오닌 및 0.2% HSA 함유)안으로 수집함으로써 제조되었다. 수집의 유기 부분은 30분동안 스핀 진공에 의해 제거되었다. 세포 결합 연구를 위해, 정제된, 농축된 샘플을 시험관내 연구의 30 분이내에 사용하였다. 생물분포 연구를 위해서, 샘플은 생체내 연구의 30 분 이내에 10μCi/mL 의 최종 농도로 시트레이트 완충제 (0.05 M, pH 5.3, 5% 나트륨 아스코르브산 및 0.2% HSA 함유)로 희석되었다.

실시예LIAI-생체내 약동학 연구

A. 트레이서 용량 생물분포:

저 용량 약동학 연구 (예를 들어, 생물분포 연구)를 제노이식된, PC3 종양-갖는 나체 마우스([Ncr]-Foxnl < nu > )중의 아래에서 확인된 본 발명의 화합물을 사용하여 수행하였다. 모든 연구에서, 마우스에게 200μCi/kg에서 100μL의 ^l77Lu-표지화 시험 화합물을 기(n=3-4)당 1 및 24 시간의 거주 시간을 갖고 i. v.투여하였다. 조직을 적절한 표준을 갖고 LKB 1282 CompuGamma 카운터에서 분석하였다.

L64 와 L70의 주사후에 혈액, 간 및 신장에서 방사능의 분포는 대조군 화합물, L134의 그것과 유사한 반면, L64 와 L70 둘다에 대해서 1 및 24시간에서 종양에서의 섭취는 훨씬 더높다. L63는 또한 초기 시간에서 혈액과 간 값이 증가되었지만 높은 종양 섭취를 나타냈다. 마우스 췌장, GRP 리셉터를 가지는 것으로 알려진 정상 기관 에서의 섭취는 L134에 대해서보다 L64, L70 및 L63 에 대해서 훨씬 더높다.

실시예 LIV-리셉터 서브타입 특이성

현재, GRP 리셉터 패밀리의 4 포유동물 구성원이 알려져있다: GRP-선호 리셉터 (GRP-R), 뉴로메딘-B 선호 리셉터 (NMB-R), 봄베신 리셉터 서브타입 3 (BB3-R) 및 BB4 리셉터 서브타입. ^l77Lu-L245의 리셉터 서브타입 특이성이 연구되었다 결과는 ¹⁷⁷Lu-L245는 특이적으로 GRP- R 및 NMB-R에 결합하고, BB3-R에 대한 친화도가 거의 없음을 나타낸다.

L245 [^l77Lu-L24]의 루테튬 착체의 서브타입 특이성(위에서 기술한 바와 같이 제조됨)은 Reubi et al. ,"사람 암에서 봄베신 리셉터 서브타입: 유니버살 방사선리간드 (125)I- [D-TYR (6), 베타-ALA, PHE (13), NLE (14)]봄베신 (6-14)으로의 검출", Clin. 암 Res. 8: 1139-1146 (2002) 에서 기술된 과정과 이전에 GRP 리셉터의 오직 하나의 서브타입을 발현하는 것으로 밝혀진 조직 샘플을 사용하여, 시험관내 리셉터 자동방사선투과검사법에 의해 결정되었다. 사람 돌창자 암양종 조직을 NMB-R에 대한 공급원으로, GRP-R에는 사람 전립샘 암종을 그리고 BB3-R 서브타입 리셉터에는 사람 기관지 암양종을 사용하였다. GRP-R의 모든 3 서브셋에 결합하는 유니버살 리간드, ¹²⁵I- [DTyr⁶, βAla¹¹, Phe¹³, Nle^l4]-BBN (6-14)로 알려진 화합물은, 양성 대조군으로서 사용되었다. 하기의 결과를 볼수 있었다.

이들 결과는 L245 유도체가 주로 GRP-R을 발현하는 사람 전립샘 암종에 잘 결합될 것으로 예상된다는 것을 암시한다. 그들은 또한 L245 유도체가 정상 사람 췌장(이것은 주로 BB3-R 리셉터를 발현한다)에, 또는 BB3-R 리셉터 서브타입을 주로 발현하는 암에 잘 결합할 것으로 예상되지 않는다는 것을 암시한다.

실시예 LV -방사선치료 연구

A. 단기간 효능 연구:

PC3 종양-갖는 나체 마우스 모델을 사용하여 방사선치료 연구를 수행하였다 . 본 발명의 Lu-177 표지화 화합물 L64 , L70 , L63 및 치료 대조군 화합물 L134을 미처리 대조군에 비교하였다.(각각의 처리군에 대해서 n=12 및 미처리 대조군에 대해서 n=36). 첫번째 연구에 대해서, 무균 조건하에서 마우스에 100μ L 의 본 발명의 ^l77Lu-표지화 화합물을 30mCi/kg에서 i. v, 또는 s. c. 투여하였다.

피험자들은 장벽 환경에 30일 이하동안 수용하였다. 체중 및 종양 크기(캘리퍼 측정에 의해)를 연구의 지속기간동안 일주당 3 시간 각 피험체에서 수집하였다.

이른 종결을 위한 기준은 다음을 포함하였다: 죽음; 20%과 같거나 더 큰 총 체중의 손실 (TBW); 2cm³ 와 동일하거나 더 큰 종양 크기. 결과는 도 15A에 도시된다. 이들 결과는 L70, L64 또는 L63으로 처리된 동물이 아무런 처리가 주어지지 않은 대조군 동물보다 그리고 동일한 용량의 L134이 주어진 그러한 동물들 보다 증가된 생존을 가진다는 것을 보여준다.

L64 및 L70를 가지고, 동일한 용량을 사용하지만 화합물(n=46)당 더 많은 동물들을 사용하고 그들을 더 오래동안 따르면서, 반복된 연구를 수행하였다. 반복 연구의 결과가 도 15B에 나와있다. 이전과 동일한 대조군에 대해(n=36), L64와 L70 처리 모두는 상당히 증가된 생존(p < 0.0001)을 제공하고 L70는 L64보다 더 우수하다(pO.079).

실시예 LVI

분절 커플링을 사용하여 L64와 L70의 대안적인 제조

화합물 L64 및 L70은 일반적으로 A-D (도 19)으로 나타낸 중간체의 수집을 채택하여 제조될 수 있고, 그들자체는 고체 및 용액 상 펩티드 합성의 업계에서 알려진 표준 방법에 의해 제조된다. 여기에 참고문헌에 의해 포함되는 (합성 펩티드s-A User's Guide 1992, Grant, G. , Ed. WH. Freeman Co. , NY, Chap 3 및 Chap 4 pp 77-258; Chan, W. C. 및 White, P. D. Fmoc 고상 펩티드 합성에서의 기본적인 과정-A Practical Approach 2002, Chan, W. C. 및 White, P. D. Eds Oxford University Press, New York, Chap. 3 pp 41-76 ; Barlos, K 및 Gatos, G. Fmoc 고상 펩티드 합성에서의 수렴 펩티드 합성-A Practical Approach 2002, Chan, W. C. 및 White, P. D. Eds Oxford University Press, New York, Chap. 9 pp 216-228.)

이들 방법은 고상으로 또는 용액중에 Aloc, Boc, Fmoc 또는 벤질옥시카르보닐-기반 펩티드 합성 전략 또는 그 방법들의 판단적절하게 선택된 조합을 포함한다. 주어진 단계를 위해 채택될 중간체는 분자에서 각 위치에 대해 적절한 보호기의 선택에 기반하고, 이는 도 1에 나타낸 군의 열거로부터 선택될 수 있다. 통상의 당업자들은 또한 대안적인 보호기로 구성된, 펩티드 합성 방법론과 호환가능한 중간체가 또한 채택될 수 있고 상기에 나타낸 보호기에 대해 열거된 옵션들은 예증으로서의 역할을 하고 포괄적이지는 않는다는 것을 이해할 것이며, 그러한 대안은 당업계에 잘 알려져있다.

이는 접근법을 개략적으로 보여주는 도 20에서 상세하게 예증된다. L64의 합성에서 나타낸 C1의 위치에서 중간체 C2의 치환은 동일한 합성 전략이 적용될 때, L70을 제공한다.

실시예 LVII - 도 49 및 50

L69의 합성

요약: (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오익 산 A와 Fmoc-Cl과의 반응은 중간체 B를 산출했다. GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH₂ (BBN[7-14])(A)와 함께 작용하는 Rink 아미드 수지는 B, Fmoc-8-아미노3,6-디옥사옥타노익 산 및 DOTA 트리-t-부틸 에스테르와 순차적으로 반응했다. 시약 B와 함께 분해 및 탈보호 시킨 후, 조생성물을 제조용 HPLC로 정제하여 L230 B 24280을 산출했다. 총괄 수득률: 4.2%.

A. (3β, 5β, 7α, 12α)-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오익 산, B (도 49)

1,4-디옥산(18 mL)중의 9-플루오렌일메톡시카르보닐 클로라이드 (1.4 g; 5.4 mmol)용액을, 한방울씩 0℃에서 저어진 10% 수성 Na₂CO₃ (30 mL) 및 1,4-디옥산 (18 mL)중의 (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오익 산 A (2.0 g; 4.9 mmol)(3)의 현탁액에 첨가했다. 6 시간 동안 실온에서 저은 후에, H2O (100 mL)를 첨가했고, 수성상을 Et₂O (2 x 90 mL)로 세척하고, 그 다음에 2 M HCl (15 mL)를 첨가했다(최종 pH: 1.5). 침전 고체를 여과시켰고, H₂O(3 x 100 mL)로 세척하고, 진공건조시키고, 그 다음에 플래시 크로마토그래피로 세정하여 백색 고체(2.2 g; 3.5 mmol)인 B를 산출했다. 수율 71%.

B. N-[(3β, 5β, 7α, 12α)-3-[[[2-[2-[[[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도덱-1-일]아세틸]아미노]에톡시]에톡시]아세틸]아미노]-7,12-디히드록시-24-옥소콜란-24-일]-1-글루타민일-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, L69 (도 50)

수지 A(0.5 g; 0.3 mmol)를 고상 펩티드 합성 용기에서 DMA(7 ml)중의 50% 모포린과 함께 10 분 동안 교반시키고, 용액을 분출세척세척시키고, DMA(7 ml)중의 신선한 50% 모포린을 첨가했다. 현탁액을 20 분 동안 더 젓고, 용액을 분출세척세척시키고, 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척했다. (3β, 5β, 7α, 12α)-3-(9H-플루오렌-9-일메톡시)아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오익 산, B (0.75 g; 1.2 mmol), N-히드록시벤조트리아졸(HOBt)(0.18 g; 1.2 mmol), N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (DIC)(0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가했고, 24시간 동안 실온에서 혼합물을 교반시키고, 비워서 DMA(5 x 7 mL)와 함께 수지를 세척했다. 그 다음에 수지를 10 분 동안 DMA (7 ml)중에 50% 모포린과 함께 교반시키고, 용액을 비우고, DMA (7 mL)중의 신선한 50% 모포린을 첨가하고, 20 분동안 더 혼합물을 교반시켰다. 용액을 비우고, 수지를 DMA (5 x 7 mL)와 함께 세척했다. Fmoc-8-아미노-3,6-디옥사옥타노익 산 (0.79 g; 1.2 mmol), HOBt (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가했다. 혼합물을 3 시간동안 실온에서 교반시키고, 비우고, DMA (5 x 7 mL)로 세척했다. 그 다음에 수지를 10 분 동안 DMA (7 mL) 중의 50% 모포린과 함께 교반시키고, 용액을 분출세척 세척시키고, DMA (7 mL) 중의 신선한 50% 모포린을 첨가했고, 20 분 동안 혼합물을 더 교반시켰다. 용액을 분출세척 세척시키고, 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척시켰고, NaCl (0.79 g; 1.2 mmol)을 가진 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7,10-테트라아세틱 산 트리스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 부가물, HOBt (0.18 g; 1.2 mmol), DIC (0.19 mL; 1.2 mmol), N-에틸디이소프로필아민 (0.40 mL; 2.4 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가했다. 혼합물을 24 시간 동안 실온에서 교반시키고, 비워서, DMA (5 x 7 mL), CH2Cl2 (5 x 7 mL)로 수지를 세척하여 진공건조시켰다. 수지를 플라스크에서 시약 B (25 mL)(2)와 함께 4.5 시간 동안 교반시켰다. 수지를 여과시키고, 용액을 감압하에서 증발시켜서 Et₂O (20 mL)로 처리한 후에 침전을 형성하는 기름 조생성물을 산출했다. 침전물을 원심분리로 수집하고, Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하여 HPLC로 분석된 고체(248 mg)를 산출했다. 조생성물(50 mg)의 양을 제조용 HPLC로 세정했다. 생성물을 함유한 부분을 동결건조하여 백색 고체로서 L69 (6.5 mg; 3.5 x 10-³ mmol)를 산출했다. 수율 5.8%

실시예 LVIII - 도 51

L144의 합성

요약: 옥타펩티드 GlnTrpAlaValGlyHisLeuMetNH2 (BBN[7-14])(A)와 작용하는 Rink 아미드 수지를 4-[2-히드록시-3-[4,7,10-트리스[2-(1,1-디메틸에톡시)-2-옥소에틸]-1,4,7,10-테트라자시클로도덱-1-일]프로폭시]벤조익 산과 반응시켰다. 분해 및 시약 B(2)와의 탈보호를 시킨 이후에 제조용 HPLC로 조생성물을 세정하여 L144를 산출했다. 총괄 수득률:12%.

A. N- [4-[2-히드록시-3-[4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도덱-]-일]프로폭시]벤조일]-1-글루타민일-1-트립토필-1-알라닐-1-발릴-글리실-1-히스티딜-1-류실-1-메티오닌아미드, L144 (도 51)

수지 A(0.4 g; 0.24 mmol)을 고상 펩티드 합성 용기에서 10 분 동안 DMA (7 mL)중의 50% 모포린과 함께 교반시키고, 용액을 분출세척 세척시키고, DMA(7 mL) 중의 신선한 50% 모포린을 첨가했다. 현탁액을 20 분 동안 더 저었고, 그 다음에 용액을 분출세척 세척하여 수지를 DMA (5 x 7 mL)로 세척했다. 4-[2-히드록시-3-[4,7,10-트리스[2-(1,1-디메틸에톡시)-2-옥소에틸]-1,4,7,10-테트라자시클로도덱-1-일]프로폭시]벤조익 산 B (0.5 g; 0.7 mmol), HOBt (0.11 g; 0.7 mmol), DIC (0.11 mL; 0.7 mmol), N-에틸디이소프로필아민(0.24 mL; 1.4 mmol) 및 DMA (7 mL)를 수지에 첨가했다. 혼합물을 24 시간 동안 실온에서 교반시키고, 비워서 DMA (5 x 7 mL), CH₂Cl₂ (5 x 7 mL)로 수지를 세척하고 진공건조시켰다. 수지를 플라스크에서 4.5 시간 동안 시약 B (25 mL)(2)와 함께 교반시켰다. 수지를 여과시켰고, 용액을 감압하에서 증발시켜서 Et₂O (20 mL)로 처리한 후 침전을 형성할 수 있는 기름 조생성물을 산출했다. 침전물을 원심분리로 수집하고, Et₂O (3 x 20 mL)로 세척하고, HPLC로 분석된 고체(240 mg)를 산출했다. 조생성물 (60 mg)의 양을 제조용 HPLC로 세정했다. 생성물을 함유한 부분을 동결건조하여 백색고체인 L144 (10.5 mg; 7.2 x 10-³ mmol)를 산출했다. 수율 12%.

Claims (87)

1. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

   상기식에서

   M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, 광학 라벨 또는 금속 킬레이터이고,

   N은 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

   Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

   P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

   G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

   이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 비-알파 아미노산이다.
2. 제 1항에 있어서, G는 작용제 또는 작용제 활성을 주는 펩티드인 것을 특징으로 하는 화합물.
3. 제 1항에 있어서, 비-알파 아미노산은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

   8-아미노-3,6-디옥사옥탄산;

   N-4-아미노에틸-N-1-아세트산; 및

   화학식 NH₂-(CH₂CH₂0)n-CH₂CO₂H 또는 NH₂-(CH₂CH₂0)n-CH₂CH₂C0₂H을 갖는 폴리에틸렌 글리콜 유도체 이때 n = 2 내지 100.
4. 제 1항에 있어서, 금속 킬레이터는 DTPA, DOTA, D03A,HP-D03A, EDTA, TETA, EHPG, HBED, NOTA, DOTMA, TETMA, PDTA, TTHA, LICAM, MECAM, 또는 및 CMDOTA로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
5. 제 1항에 있어서, 금속 킬레이터는

   N,N-디메틸Gly-Ser-Cys ;

   N,N-디메틸Gly-Thr-Cys ;

   N,N-디에틸Gly-Ser-Cys ; 및

   N,N-디벤질Gly-Ser-Cys

   로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
6. 제 1항에 있어서, 금속 킬레이터는

   N,N-디메틸Gly-Ser-Cys-Gly ;

   N,N-디메틸Gly-Thr-Cys-Gly ;

   N,N-디에틸Gly-Ser-Cys-Gly; 및

   N,N-디벤질Gly-Ser-Cys-Gly

   로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
7. 제 1항에 있어서, 하기로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1 이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Glu-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Dala-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Glu-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1 이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Dala-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3- 디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3- 디아미노프로피온산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Asp- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Ser- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Arg- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-8-아미노- 3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-2,3- 디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Lys- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-Asp-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-2,3-디아미노프로피온산 BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-1-피페라진아세트산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-4-히드록시프롤린-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-4-아미노proline-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Lys-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Arg-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Ser-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Asp-8-아미노3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-Gly-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-Gly-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3- 디아미노프로피온산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-Gly-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1.
8. 제 1항에 있어서, 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Lys-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Arg-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Asp-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Ser-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Glu-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Dala-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Glu-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Dala-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3-디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Asp-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3-디아미노프로피온산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Asp-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-8-아미노- 3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-2,3- 디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-Asp-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-2,3-디아미노프로피온산 BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-N-1-피페라진아세트산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-4-히드록시프롤린-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-4-아미노proline-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Lys-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Arg-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Ser-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-Asp-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Asp-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Ser-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Arg-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-2,3-디아미노프로피온산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Lys-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   N,N-디메틸글리신-Ser-Cys-Gly-2,3-디아미노프로피온산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-Gly-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1.
9. 제 1항에 있어서, 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

   D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-비페닐알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-디페닐알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-4-벤조일페닐알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-5-아미노펜탄산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-D-페닐알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

   D03A-모노아미드-8-아미노옥탄산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1.
10. 제 1항, 제 2항 또는 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 광학 라벨은 유기 발색단, 유기 형광발색단, 광-흡수 화합물, 광-반사 화합물, 광-산란 화합물 및 생물발광 분자로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
11. 환자에게, M이 진단 방사선핵종과 복합된 금속 킬레이터인 청구항 1항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
12. 환자에게 진단 방사선핵종과 복합된 청구항 8항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
13. 환자에게 M이 광학 라벨인 청구항 1항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
14. 환자에게 청구항 10항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
15. 청구항 1항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징제의 제조 방법.
16. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 7,8 또는 9항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
17. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 4항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
18. 청구항 제 7, 8 또는 9항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 방사선 치료제의 제조 방법.
19. 청구항 4항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 방사선 치료제의 제조 방법.
20. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

    상기식에서

    M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, 광학 라벨 또는 금속 킬레이터이고,

    N은 0,알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

    Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

    P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

    G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

    이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 치환 담즙산이다.
21. 제 20항에 있어서, G는 작용제 또는 작용제 활성을 주는 펩티드인 것을 특징으로 하는 화합물.
22. 제 20항에 있어서, 치환 담즙산은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

    3β-아미노-3-데옥시콜산;

    (3β, 5β)-3-아미노콜란-24-오 산;

    (3β, 5β,12α)-3-아미노-12-히드록시콜란-24-오 산;

    (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오 산 ;

    Lys-(3,6,9)-트리옥사운데칸-1, 11-디카르보닐-3,7-디데옥시-3-아미노콜산);

    (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7-히드록시-12-옥소콜란-24-오 산; 및

    (3β, 5β, 7α)-3-아미노-7-히드록시콜란-24-오 산.
23. 제 20항에 있어서, M은 DTPA, DOTA, D03A,HPD03A, EDTA, TETA 및 CMDOTA으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
24. 제 20항에 있어서, M은 EHPG 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
25. 제 20항에 있어서, M은 5-Cl-EHPG, 5-Br-EHPG, 5-Me-EHPG, 5-t-Bu-EHPG, 및5-sec-Bu-EHPG으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
26. 제 20항에 있어서, M은 벤조디에틸렌트리아민펜타아세트산 (벤조-DTPA) 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
27. 제 20항에 있어서, M은 디벤조-DTPA, 페닐-DTPA, 디페닐-DTPA, 벤질-DTPA, 및 디벤질 DTPA으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
28. 제 20항에 있어서, M은 HBED 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
29. 제 20항에 있어서, M은 적어도 3 탄소 원자 및 적어도 두개의 헤테로원자(O 및/또는 N)를 함유하는 고대고리 화합물이고, 이 거대고리 화합물은 하나의 고리, 또는 헤테로 고리 원소에서 함께 결합된 둘 또는 세 고리로 이루어질 수 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
30. 제 20항에 있어서, M은 벤조-DOTA, 디벤조-DOTA, 및 벤조-NOTA, 벤조-TETA, 벤조-DOTMA, 및 벤조-TETMA로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
31. 제 20항에 있어서, M은 1,3-프로필렌디아민테트라아세트산 (PDTA) 및 트리에틸렌테트라아민헥사아세트산 (TTHA)의 유도체; 1,5, 10-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)-트리카테콜레이트 (LICAM) 및 1, 3,5-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)아미노메틸벤젠 (MECAM)의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
32. 제 20항에 있어서, 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:

    DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β)-3-아미노콜란-24-오 산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 12α)-3-아미노-12-히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-Gly-Lys-(3,6, 9)-트리옥사운데칸-l, 11-디카르보닐-3, 7-디데옥시-3-아미노콜산)-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    (3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-오 산-3,6,9-트리옥사운데칸-1, 11-디카르보닐 Lys(D03A-모노아미드-Gly)-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-12-옥소콜란-24-오 산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-1-아미노-3,6-디옥사옥탄산-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12- 디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1.
33. 제 20항, 제 21항 또는 제 22항 중 어느 한 항에 있어서, 광학 라벨은 제한없이, 유기 발색단, 유기 형광발색단, 광-흡수 화합물, 광-반사 화합물, 광-산란 화합물 및 생물발광 분자로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
34. 환자에게, M이 진단 방사선핵종과 합성된 금속 킬레이터인 청구항 20항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
35. 환자에게 청구항 32항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
36. 환자에게, M이 광학 라벨인 청구항 20항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
37. 환자에게 청구항 33항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
38. 청구항 20항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징제의 제조 방법.
39. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 20항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
40. 청구항 20항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 방사선 치료제의 제조 방법.
41. BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1인, 화합물 DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7,12- 디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14).
42. 환자에게, BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO: 1인 진단 방사선핵종과 복합된 D03A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)을 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미지 방법.
43. 주사가능한 매체에 D03A-모노아미드-Gly-4- 아미노벤조산-BBN (7-14)을 포함하는 화합물(상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이다)을 첨가하는 단계를 포함하는 진단 이미징제의 제조 방법.
44. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 41항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
45. 청구항 41항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 방사선 치료제의 제조 방법.
46. BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO: 1인, 화합물 dD03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14).
47. BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO: 1인, 진단 방사선핵종과 복합된 D03A- 모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14)을 포함하는 진단 이미징제를 환자에게 투여하는 단계,

    및 상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
48. D03A-모노아미드-Gly-4- 아미노벤조산-BBN (7-14)을 포함하는 화합물(상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이다)을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징제를 제조하는 방법.
49. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 46항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
50. 청구항 46항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 방사선 치료제의 제조 방법.
51. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

    상기식에서

    M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, 광학 라벨 또는 금속 킬레이터이고,

    N은 0, 알파 아미노산, 고리기를 갖는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

    Ｏ는 알파 아미노산 또는 고리 기를 갖는 비-알파 아미노산이고;

    P는 0, 알파 아미노산, 고리 기를 갖는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

    G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

    이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 고리 기를 갖는 비-알파 아미노산이다.
52. 제 51항에 있어서, G는 작용제 또는 작용제 활성을 주는 펩티드인 것을 특징으로 하는 화합물.
53. 제 51항에 있어서, 고리기를 갖는 비-알파 아미노산은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

    4-아미노벤조산;

    4-아미노메틸 벤조산 ;

    트랜스-4-아미노메틸시클로헥산 카르복실산;

    4-(2-아미노에톡시) 벤조산;

    이소니페코트산;

    2-아미노메틸벤조산;

    4-아미노-3-니트로벤조산;

    4-(3-카르복시메틸-2-케토-1-벤지미다졸릴)-피페리딘 ;

    6-(피페라진-1-일)-4-(3H)-퀴나졸리논-3-아세트산 ;

    (2S,5S)-5-아미노-1, 2,4, 5,6, 7-헥사히드로-아제피노 [3,21-하이] 인돌- 4-온-2-카르복실산;

    (4S, 7R)-4-아미노-6-아자-5-옥소-9-티아비시클로 [4.3. 0] 노난-7- 카르복실산;

    3-카르복시메틸-1-페닐-1, 3,8-트리아자스피로 [4.5] 데칸-4-온;

    N1-피페라진아세트산;

    N-4-아미노에틸-N-1-아세트산;

    (3 S)-3-아미노-1-카르복시메틸카프로락탐 ; 및

    (2S, 6S, 9)-6-아미노-2-카르복시메틸-3,8-디아자비시클로-[4, 3,0]-노난-1, 4-디온.
54. 제 51항에 있어서, M은 DTPA, DOTA, D03A, HPD03A, EDTA, 및 TETA으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
55. 제 51항에 있어서, M은 EHPG 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
56. 제 51항에 있어서, M은 5-Cl-EHPG, 5-Br-EHPG, 5-Me-EHPG, 5-t-Bu-EHPG, 및 5-sec-Bu-EHPG으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
57. 제 51항에 있어서, M은 벤조디에틸렌트리아민펜타아세트산 (벤조-DTPA) 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
58. 제 51항에 있어서, M은 디벤조-DTPA, 페닐-DTPA, 디페닐-DTPA, 벤질-DTPA, 및 디벤질 DTPA로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
59. 제 51항에 있어서, M은 HBED 및 그것의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
60. 제 51항에 있어서, M 은 적어도 3 탄소 원자 및 적어도 두개의 헤테로원자(O 및/또는 N)를 함유하는 고대고리 화합물이고, 이 거대고리 화합물은 하나의 고리, 또는 헤테로 고리 원소에서 함께 결합된 둘 또는 세 고리로 이루어질 수 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
61. 제 51항에 있어서, M은 벤조-DOTA, 디벤조-DOTA, 및 벤조-NOTA, 벤조-TETA, 벤조-DOTMA, 및 벤조-TETMA로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
62. 제 51항에 있어서, M은 1,3-프로필렌디아민테트라아세트산 (PDTA) 및 트리에틸렌테트라아민헥사아세트산 (TTHA)의 유도체; 1,5, 10-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)-트리카테콜레이트 (LICAM) 및 1, 3,5-N,N', N"-트리스 (2,3-디히드록시벤조일)아미노메틸벤젠 (MECAM)의 유도체로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.

    표 3을 참조하시오.
63. 제 51항에 있어서, 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 것을 특징으로 하는 화합물.

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸 벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥실 카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-(2-아미노에톡시) 벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-Gly-이소니페코트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은

    SEQ. ID NO : 1;D03A-모노아미드-2-아미노메틸벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸-3-니트로벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-1-나프틸알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-(3-카르복시메틸-2-케토-1-벤지미다졸릴-피페리딘-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-6-(피페라진-1-일)-4-(3H)-퀴나졸리논-3-아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-(2S, 5 S)-5-아미노-1, 2,4, 5,6, 7-헥사히드로-아제피노 [3,21-하이] 인돌-4-온-2- 카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-(4S, 7R)-4-아미노-6-아자-5-옥소-9-티아비시클로 [4.3. 0] 노난-7-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-N,N-디메틸글리신-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO :1 ;

    D03A-모노아미드-3-카르복시메틸-1-페닐-1, 3,8-트리아자스피로 [4.5] 데칸-4-온-BBN (7- 14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-Nl-피페라진아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1;

    D03A-모노아미드-N-4-아미노에틸-N-1-피페라진아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-(3S)-3-아미노-1-카르복시메틸카프로락탐-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-(2S, 6S, 9)-6-아미노-2-카르복시메틸-3,8-디아자비시클로- [4, 3,0]-노난-1, 4-디온-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-5-아미노펜타noicacid-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-D-페닐알라닌- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸벤조산-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-벤조일-(L)-페닐알라닌-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1- 카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-Arg-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-Lys-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-디페닐알라닌- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-1-나프틸알라닌- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-8-아미노-3,6- 디옥사옥탄산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-Ser-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-2,3- 디아미노프로피온산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1;

    DO3A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-비페닐알라닌- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-(2S, 5S)-5-아미노- 1,2, 4,5, 6,7-헥사히드로-아제피노 [3,21-하이] 인돌-4-온-2-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-8-아미노-3,6-디옥사옥탄산-페닐알라닌-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-페닐알라닌- BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-8-아미노옥탄산-트랜스-4-아미노메틸시클로헥산-1-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4'-아미노메틸-비페닐-1-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-3'-아미노메틸-비페닐-3-카르복실산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    CMDOTA-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO : 1;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸페톡시아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1 ;

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노페닐아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    HPD03A-4-페톡시-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-3-아미노메틸벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이고;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸페닐아세트산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고;

    D03A-모노아미드-4-아미노메틸-3-메톡시벤조산-BBN (7-14) 상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1

    Boa-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly,-4-히드라지노벤조일-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-4-아미노벤조산-Gly-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-6-아미노니코틴산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-4'-아미노-2'-메틸 비페닐-4-카르복실산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-3'-아미노비페닐-3-카르복실산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-1, 2-디아미노에틸-페테프탈산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-EWAVGHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QWAVGHLM-OH

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-(D)-Phe-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QRLGNQWAVGHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QRYGNQWAVGHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QKYGNQWAVGHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-구조식 참조

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-(D)-Phe-QWAVGHL-NH-펜틸

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QWSVaHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-(D)-Phe-QWAVGHLL-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-(D)-Tyr-QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-Phe-QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QWAGHFL-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-LWAVGSFM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-HWAVGHLM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-LWAVGSFM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-QWAVGHFM-NH₂

    D03A-모노아미드-Gly-3-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-6-아미노나프토산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-4-메틸아미노벤조산-BBN (7-14)

    Cm4pmlOd2a-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14).

    N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    N,N-디메틸글리신-Ser-Cys(Acm)-Gly-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-3-메톡시-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-3-chloro-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-3-메틸-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    D03A-모노아미드-Gly-3-히드록시-4-아미노벤조산-BBN (7-14)

    (D03A-모노아미드)2-N,N'-Bis(2-아미노에틸)-숙시남산-BBN (7-14).
64. 제 51항, 제 52항 또는 제 53항 중 어느 한 항에 있어서, 광학 라벨은 유기 발색단, 유기 형광발색단, 광-흡수 화합물, 광-반사 화합물, 광-산란 화합물 및 생물발광 분자로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
65. 환자에게, M이 진단 방사선핵종과 합성된 금속 킬레이터인 청구항 51항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
66. 환자에게 청구항 63항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
67. 환자에게, M이 광학 라벨인 청구항 51항의 화합물을 포함하는 진단 이미징제를 투여하는 단계 및

    상기 환자를 이미징하는 단계를 포함하는 이미징 방법.
68. 청구항 51항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징제의 제조 방법.
69. 치료 방사선핵종과 복합된 청구항 51항의 화합물을 포함하는 방사선치료제를 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 치료 방법.
70. 청구항 51항의 화합물을 포함하는 물질을 주사가능한 매체에 첨가하는 단계를 포함하는, 진단 이미징제의 제조 방법.
71. 하기의 단계들을 포함하는, D03A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노- 7,12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)의 합성 방법(상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이다).

    (a) 고상 펩티드 합성 용기에서, 수지와 적어도 하나의 펩티드 형성 성분을 포함하는 용액을 진탕하는 단계,

    (b) 상기 용액을 분출세척하는 단계, 및

    (c)상기 수지를 DMA으로 세척하는 단계,

    이때 상기 적어도 하나의 펩티드 형성 성분은 DMA 모르폴린, (3β, 5β, 7α, 12α)-3- [[( 9H-플루오렌-9-일메톡시) 아미노] 아세틸] 아미노-7,12- 디히드록시콜란-24-오 산, HOBT, DIC, HATU 또는 그것의 혼합물을 포함하고,

    이때 단계 (a), (b) 및 (c)의 각각은 화합물 D03A- 모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)이 얻어질때까지 반복되고, 이때 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이다.
72. 하기 단계들을 포함하는, D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산- BBN (7-14)의 합성 방법(상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이다).

    (a) 고상 펩티드 합성 용기 또는 반응 블록에서, 수지 및 적어도 하나의 펩티드 형성 성분을 포함하는 용액을 진탕하는 단계,

    (b)상기 용액을 분출세척하는 단계, 및

    (c) 상기 수지를 DMA으로 세척하는 단계,

    이때 상기 적어도 하나의 펩티드 형성 성분은 DMA, 모르폴린, Fmoc-4-아미노벤조산, HOBT, DIC, HBTU, HATU 또는 그것의 혼합물을 포함하고,

    이때 단계 (a), (b) 및 (c)의 각각은 화합물 D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14)이 얻어질때까지 반복되고, 이때 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1 이다.
73. DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12- 디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)을 표지화하는 방법(상기식에서 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO: 1이다)으로서,

    DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노-7, 12- 디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14) 이때 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고,

    암모늄 아세테이트,

    ¹⁷⁷LuCl₃ 또는 ¹¹¹InCl₃으로 구성되는 군으로부터 선택된 방사성 금속 전구체,

    HC1

    을 포함하는 제 1 용액을 배양하는 단계, 및

    상기 제 1 용액에 Na₂EDTA·2H₂0과 물을 포함하는 제 2 용액을 첨가하여 95%이상의 방사성화학 순도를 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
74. D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7- 14)을 표지화하는 방법(상기식에서 BBN (7-14)(서열은 SEQ. ID NO:1이다)으로서,

    D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산-BBN (7-14) 이때 BBN (7-14) 서열은 SEQ. ID NO:1이고,

    암모늄 아세테이트,

    ¹⁷⁷LuCl₃ 또는 ¹¹¹InCl₃으로 구성되는 군으로부터 선택된 방사성 금속 전구체,

    HC1

    을 포함하는 제 1 용액을 배양하는 단계, 및

    상기 제 1 용액에 Na₂EDTA·2H₂0과 물을 포함하는 제 2 용액을 첨가하여 95%이상의 방사성화학 순도를 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
75. 시약으로의 어떠한 필요한 추가의 처리로 개별적인 아미노산, 보호된 아미노산 또는 변형된 아미노산을 커플링함으로써, 또는 용액에서의 커플링 단계 전 또는 후의 공정에 의해, BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO: 1인, DO3A-모노아미드-Gly-(3β, 5β, 7α, 12α)-3-아미노- 7,12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)을 합성하는 방법.
76. 시약으로의 어떠한 필요한 추가의 처리와 조합된 변형된, 보호된, 미보호된 또는 다르게는 가변 펩티드 단편의 분절 커플링에 의해 또는 용액중 커플링 단계 전 또는 후의 공정에 의해 또는 고상으로 또는 조합된 용액 및 고상 합성 단계 및 방법을 통해, BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO:1인, D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산- BBN (7-14)을 합성하는 방법.
77. 시약으로의 어떠한 필요한 추가의 처리로 개별적인 아미노산 보호된 아미노산 또는 변형된 아미노산의 커플링에 의해, 또는 용액중 커플링 단계 전 또는 후의 공정에 의해, BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO: 1인, D03A-모노아미드-Gly-(3 P, 50, 7a,12a)-3-아미노- 7,12-디히드록시콜란-24-오 산-BBN (7-14)을 합성하는 방법.
78. 시약으로의 어떠한 필요한 추가의 처리와 조합된 변형된, 보호된, 미보호된 또는 다르게는 가변 펩티드 단편의 분절 커플링에 의해 또는 용액중 커플링 단계 전 또는 후의 공정에 의해 또는 고상으로 또는 조합된 용액 및 고상 합성 단계 및 방법을 통해, BBN (7-14) 서열이 SEQ. ID NO:1인, D03A-모노아미드-Gly-4-아미노벤조산- BBN (7-14)을 합성하는 방법.
79. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

    상기식에서

    M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, D03A이고,

    N은 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

    Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

    P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

    G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

    이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 8-아미노-3,6-디옥사옥탄산이다.
80. 제 79항에 있어서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 QWAVGHLM-OH, QRLGNQWAVGHLM-NH₂, QRYGNQWAVGHLM-NH₂, QKYGNQWAVGHLM-NH₂, QWAVGHL-NH-펜틸,QWSVaHLM-NH₂, QWAVGHLL-NH₂, QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂ QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂, QWAGHFL-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, HWAVGHLM-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, 및 QWAVGHFM-NH₂으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
81. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

    상기식에서

    M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, D03A이고,

    N은 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

    Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

    P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

    G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

    이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 (3β, 5β, 12α)-3-아미노-12-히드록시콜란- 24-오 산이다.
82. 제 81항에 있어서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 QWAVGHLM-OH, QRLGNQWAVGHLM-NH₂, QRYGNQWAVGHLM-NH₂, QKYGNQWAVGHLM-NH₂, QWAVGHL-NH-펜틸, QWSVaHLM-NH₂, QWAVGHLL-NH₂, QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂ QWAV-Bala-HF-Nle- NH₂, QWAGHFL-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, HWAVGHLM-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, 및 QWAVGHFM-NH₂으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
83. 일반식 M-N-Ｏ-P-G 의 화합물.

    상기식에서

    M은 선택적으로 방사선핵종과 복합된, D03A이고,

    N은 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결 기이고;

    Ｏ는 알파 또는 비-알파 아미노산이고;

    P는 0, 알파 또는 비-알파 아미노산 또는 다른 연결기이고,

    G는 GRP 리셉터 표적화 펩티드이며,

    이때 N, Ｏ 또는 P 중 적어도 하나는 4-아미노벤조산이다.
84. 제 -항에 있어서, GRP 리셉터 표적화 펩티드는 QWAVGHLM-OH, QRLGNQWAVGHLM-NH₂, QRYGNQWAVGHLM-NH₂, QKYGNQWAVGHLM-NH₂, QWAVGHL-NH-펜틸, QWSVaHLM-NH₂, QWAVGHLL-NH₂, QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂ QWAV-Bala-HF-Nle-NH₂, QWAGHFL-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, HWAVGHLM-NH₂, LWAVGSFM-NH₂, 및 QWAVGHFM-NH₂으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
85. M이 광선요법에 유용한 광학 라벨인 제 1항, 20항 또는 51항 중 어느 한 항의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 광선요법의 방법.

    표 4에서의 정정을 참조하시오.
86. 제 51항에 있어서, 하기로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-W-A-V-a-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-L-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-NH-펜틸

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-y-Q-W-A-V-Bala-H-F-Nle-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-f-Q-W-A-V-Bala-H-F-Nle-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-W-A-V-Gly-H-F-1-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-W-A-V-Gly-NMeHis-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-1-W-A-V-Gly-S-F-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-H-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-1-W-A-T-Gly-H-F-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-W-A-V-Gly-H-F-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-R-1-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-R-Y-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-4-아미노벤조산-Q-K-Y-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    Pglu-Q-Lys <RTI (DOTA-Gly-4-아미노벤조산)-1-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-W-A-V-a-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-L-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-f-Q-W-A-V-Gly-H-1-NH-펜틸

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-y-Q-W-A-V-Bala-H-F-Nle-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-f-Q-W-A-V-Bala-H-F-Nle-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-W-A-V-Gly-H-F-1-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-W-A-V-Gly-NMeHis-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-1-W-A-V-Gly-S-F-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-H-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-1-W-A-T-Gly-H-F-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-W-A-V-Gly-H-F-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-R-1-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-R-Y-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산-Q-K-Y-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2

    Pglu-Q-Lys(DOTA-Gly-3-아미노-3-데옥시콜산)-1-Gly-N-Q-W-A-V-Gly-H-1-M-NH2
87. 제 16,17,39,44,49 또는 69항 중 어느 한 항에 있어서, 화학요법제 또는 다른 치료제를 투여하는 것을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.