KR20030032605A

KR20030032605A - 비브리오 메치니코프 유도체로부터 얻어진 단백질분해효소및 이를 포함하는 세탁용 세제 조성물

Info

Publication number: KR20030032605A
Application number: KR1020010064520A
Authority: KR
Inventors: 진기홍; 전성후; 이현환; 노현모
Original assignee: 씨제이 주식회사
Priority date: 2001-10-19
Filing date: 2001-10-19
Publication date: 2003-04-26
Also published as: US20030096723A1; WO2003033690A1; JP2003183696A; CA2463171A1; EP1304372A1; CN1325640C; CN1412306A; US6987087B2

Abstract

비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)유도체인 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii) 케이에스1, 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii) 케이에스1(pDSBCm), 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii) 케이에스1(pSBCm) 및 이의 모주인 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii) 알에이취 530 엔-4-8균주로부터 획득된, 특유의 생화학적특성을 가지는 단백질 분해 효소 및 이를 포함하는 세탁용 세제 조성물에 관한 것이다.

Description

비브리오 메치니코프 유도체로부터 얻어진 단백질분해효소 및 이를 포함하는 세탁용 세제 조성물{Protease obtained from Vibrio metschinikovii derivatives and thereof detergent compositions}

본 발명은 비브리오 메치니코프 유도체에 관한 것으로 구체적으로 비브리오메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1, 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1(pDSBCm), 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1(pSBCm) 및 이의 모주인 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)알에이취 530 엔-4-8균주로부터 획득된 단백질 분해 효소의 생화학적 특성 및 이를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.

세제 세탁용 효소는 수십년간 분말 세탁세제 혹은 액상 세탁세제에 첨가되어 단백질성 오염이나 지방질성 오염, 전분성 오염을 효과적으로 제거하는 기능을 하여 왔다. 최근 환경공해를 유발하는 요인으로 지적되어온 인산염 및 독성이 강한 계면활성제의 사용량을 줄이면서 발생되는 세정력을 보강하기 위해, 세탁세제용 효소는 그 사용량이 증대되고 있다.

세탁세제용 효소는 단백질 분해효소 및 지방질 분해효소 외에 의류의 보푸라기를 제거하여 보푸라기에 의한 퇴색효과를 없애주는 섬유질 분해효소도 있으나 전 세계적으로 널리 사용되는 효소는 단백질 분해효소이다. 이들 효소들은 또한 자동 식기 세척기용 세제에도 첨가되어 그 세정력을 높이는 역할을 하기도 한다.

현재까지 상품화된 단백질 분해효소는 대부분 바실러스 종(Bacillusspecies)에서 생산되고 있으나, 미합중국 특허 제5,472,865호에는 덴드리피엘라 아레나리아(Dendryphiella arenaria)또는 덴드리피엘라 살리나(Dendryphiella salina)같은 불완전균류(Fungi Imperfecti)에서 알카라인 프로티에이즈(alkaline protease)를 제조하였다는 보고도 있다.

또한 WO 88/03947에는 방선균인 노카디옵시스 다손빌레이(Nocardiopsisdassonvillei)로부터 저온 활성형 단백질 분해효소의 제조방법에 관한 보고도 있다. 이와 같은 연구 경향의 이유는 기존의 바실러스(Bacillus) 유래의 단백질 분해효소들은 그 효소적 특징이 매우 유사하고 유기용매나 저온에서 활성이 낮은 단점이 있기 때문이다.

현재 시판되고 있는 노보자임(Novozymes)사나 제넨코(Genencor)사의 세제용 단백질 분해효소는 서구형 세탁조건에 적합한 효소, 즉 고온활성형 단백질 분해효소이며, 저온수를 사용하는 한국 및 동남아의 세탁조건에는 적합하지 않은 효소로 알려져 있다. 노보자임사에서 개발한 저온활성형 단백질 분해효소인 사비나제(Savinase) 및 이의 같은 유형의 효소인 제넨코사의 막사칼(Maxacal)도 실제로는 20 내지 25℃에서 활성이 매우 낮은 문제점이 있었다.

이를 해결하기 위하여 본 출원인에 의하여 출원된 대한민국 특허출원 94-21000, 98-15971, 2000-41212와, WO 00/61769등에서 이미 저온활성형 단백질 분해효소를 생산하는 균주인 비브리오 메치니코프 알에이취530 엔-4-8 및 이로부터 개발된 우수균주들과 이들의 제조방법, 주 효소의 생화학적 특성, 유전자 구조 및 그 염기서열등에 대하여 개시된 바 있다.

본 발명에서는 기존의 세탁 세제용 단백질 분해효소의 단점을 극복하기 위하여, 본 출원인에 의해 출원된 대한민국 특허출원 94-21000, 98-15971, 2000-41212와, WO 00/61769등에서 명시된 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1, 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1(pDSBCm), 비브리오메치니코프(Vibrio metschinikovii)케이에스1(pSBCm) 및 이의 모주인 비브리오 메치니코프(Vibrio metschinikovii)알에이취 530 엔-4-8균주로부터 획득된 단백질 분해 효소의 세제내 안정도, 세정력이 향상된 생화학적특성을 규명하고, 이에 대한 세제 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

도 1은 본 발명의 농축 액체효소(Vaps)에 대한 pH의 영향을 나타낸 그래프이다.

도 2는 본 발명의 농축 액체효소(Vaps)에 대한 온도의 영향을 나타낸 그래프이다.

도 3은 고농축 액체세제 내에서의 농축 액체효소(Vaps) 및 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)의 보존 안정도를 나타내는 그래프이다.

도 4는 각종 계면활성제가 본 발명의 단백질 분해효소의 세정력에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.

도 5는 본 발명의 단백질 분해효소의 농도별 세정력을 시험한 그래프이다.

도 6은 본 발명의 단백질 분해효소의 온도별 세정력을 시험한 그래프이다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위해 본 발명은 분자량이 10,000 내지 300,000를 가지며, 기질을 아조카제인(azocasein)으로 하고, 작용온도 40 내지 55℃에서 pH가 10 내지 12인 특징들을 가지는 비브리오 메치니코프 알에이취 유도체로부터 얻어진 단백질 분해효소(Vaps)를 제공하고, 보다 구체적으로는 상기 비브리오 메치니코프 알에이취 유도체가 비브리오 메치니코프 케이에스1(KS1), 비브리오 메치니코프 케이에스1(pDSBCm), 비브리오 메치니코프 케이에스1(pSBCm) 또는 이의 모주인 비브리오 메치니코프 알에이취 530 엔-4-8균주 중에서 1 이상 선택된 균주로부터 얻어진 것을 특징으로 하는 단백질 분해효소(Vaps)를 제공한다.

아울러 본 발명은 상기 단백질 분해효소(Vaps)를 포함하는, 세탁세제로 허용가능한 안정화제 및 계면활성제가 첨가된 세탁용 세제 조성물을 제공한다.

이하 본 발명을 실현하기 위한 구체적인 단계를 설명하면 다음과 같다.

<시험균주>

본 발명에 사용된 균주인 비브리오 메치니코프 케이에스1는 국제공개번호 WO 00/61769에 명시된 균주로서 국제기탁기관인 한국 종균협회에 1998년 12월 5일, 수탁번호 KCCM-10141으로 기탁되었으며, 비브리오 메치니코프 케이에스1(pSBCm)는 동기관에 1998년 12월 5일, 수탁번호 KCCM-10142으로 기탁되었으며, 국제출원 PCT/KR01/01232에 기재된 비브리오 메치니코프 케이에스1(pDSBCm)는 동 기관에 2001년 7월 12일, 수탁번호 KCCM-10292으로 기탁되었다.

이들 균주들은 대한민국 특허출원번호 2000-41212에 명시된 비브리오 메치니코프 알에이취530 엔-4-8균주(한국 종균협회에 1998년 2월 23일, 수탁번호 KFCC-11030으로 기탁)에서 유래된 균주들로, 그람음성 통성혐기성균(facultative anaerobe)이다.

<균주의 배양>

위에서 언급한 균주들은 호기성 환경에서도 성장이 되지만 산소 공급량이 균주의 성장 및 단백질 분해효소의 생산성에 큰 영향을 미친다. 배양온도는 25 내지 35℃ 범위의 온도가 적당하며 일반적으로 알려진 배지인 LB(Luria Britani Broth사 제품, 효모 추출물(Yeast extract) 0.5%, 염화나트륨(NaCl) 1%, 트립톤(Tryptone) 1%)에 소디움 카보네이트 완충액(Sodium carbonate buffer, pH10.5)를 최종 50mM되게 첨가했을 경우 그 성장이 좋다. 또한 성장에 필요한 적정 pH는 8.0 내지 10이며, pH 7이하에서는 성장이 늦추어 진다.

적절한 탄소 공급원으로는 주로 글루코로스(Glucose)가 포함된 옥수수 침지액(CSL, Corn Steep Liquor)로서 0.5 내지 1%가 적당하다. 또한 질소 공급원으로 첨가되는 대두밀(soybean meal), 소맥 글루텐 밀(wheat gluten meal) 등에 포함된 미량의 탄수화물이 적절한 탄소공급원으로 이용된다.

질소공급원으로는 주로 유기 질소공급원(organic source)으로서대두밀(soybean meal), 소맥 글루텐 밀(wheat gluten meal), 참치 추출물(tuna extract), 목화씨분말(cotten seed flour), 땅콩 밀(peanut meal), 옥수수 침지액(CSL), 효모 추출물(yeast extract), 감자 단백질(potato protein)을 주로 사용하였으며, 무기 질소공급원(inorganic source)으로는 요소(urea), 암모니움 설페이트(ammonium sulfate)를 적량 사용하였다. 그 적정 함량은 질소공급원(nitrogen source)을 3 내지 4%(w/v)되게 사용하고, 무기 질소공급원(inorganic nitrogen source)은 미량(0.2% 이하)사용 하였다.

<효소의 활성 측정>

단백질 분해효소 활성 측정은 국제공개번호 WO 00/61769에 명시된 방법을 사용하였다. 기질로 사용한 것은 아조카제인(azocasein) 2g을 100㎖(50mM 소디움 카보네이트 완충액(Sodium carbonate buffer), pH 10.5)에 용해하고 이 용액 1㎖을 40℃에서 10분간 예온한다. 또한 같은 완충액(buffer)에 적절하게 희석한 효소액을 준비하고 예온시킨 기질과 1:1로 혼합하여 40℃에서 30분간 반응시킨 후 10% 트리클로로아세트산(trichloroacetic acid)를 총 반응액과 1:1되게 가하여 반응을 중지시킨다. 이 용액을 4℃, 12,000rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 1㎖을 취하고 여기에 0.5N 수산화나트륨(NaOH)을 1㎖ 첨가하여 O.D. 440nm에서 흡광도를 측정한다.

<효소의 분리, 정제, 농축>

단백질 분해효소 생산균주 비브리오 메치니코프 케이에스1 및 유전자 재조합 균주인 비브리오 메치니코프 케이에스1(pDSBCm)를 생산배지에서 발효시킨 후, 100메쉬(mesh) 정도의 체로 고형분을 제거시키고, 연속원심분리기 혹은 드럼 여과기(Drum Filtrator)를 이용하여 균체를 제거하였다. 이 액에 5 내지 8%의 암모니움 설페이트(ammonium sulfate)를 첨가하여 녹이고, 원심분리하여 고분자 단백질 및 불필요한 이물질을 제거한다. 다시 50%의 암모니움 설페이트(ammoniunm sulfate)를 가하여 녹이고, 압축 여과기(press filtrator)에 통과시켜 염(salt)을 제거하였다. 여기에서 얻어진 효소액을 다시 초여과(ultrafiltration)하여 분자량이 10,000내지 300,000 사이의 효소액(이하 'Vaps'라 칭한다)을 획득하였다.

이렇게 정제, 농축된 효소액으로 하기의 방법과 같이 효소의 생화학적 특성을 조사하였으며, 고농축 액체 세탁세제(HDL)에 첨가하여 그 효소 안정도를 조사하였고, 각종 계면활성제 및 이들의 혼합물에서의 세정력을 시험하였다.

<세정력 시험>

각종 계면활성제 및 이의 혼합물이 효소에 미치는 영향을 조사하기 위하여 여러 가지 조건(효소농도별, 작용 농도별)에서 세정력 시험을 실시하였으며, 세정력 시험을 위한 조건은 하기의 표 1과 같다. 세정력 실험은 먼저 각 오염포를 가로, 세로 5cm x 5cm 크기로 자른 후 터그-오-토미터(Terg-O-tometer) 한 구에 5장씩 넣고, 표 1에 제시된 조건으로 세탁을 하였다. 세탁후 탈수하여 3번 헹군 후 오염포를 자연건조 시킨후 다림질하여 세정력차이를 구하였다.

항목	시험조건
세척기	Terg-O-Tometer
회전속도	100rpm
온도	40℃
세척시간	10분
세척 pH	10.5(50mM 소디움 카보네이트 필터)
계면활성제 사용량	3,000 ppm
단백질 분해효소 사용량	9PU/ml
오염포	AS-10, EMPA-116, 크기 : 5cm x 5cm

이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 상세히 설명한다. 다만 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 이들만으로 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 균배양 시험

상기에 언급한 알칼리성 단백질 분해효소 생산균주 중에서 한 주를 종배양배지(표 2)에 접종하여 30℃에서 20시간 배양하고, 5ℓ-발효조(fermentor)에 1% 접종(transfer)하여 약 40시간 배양하였다. 이때 본 배양 배지의 조성은 표 2에 명시하였으며 5ℓ-발효조(fermentor)의 가동 액량은 3ℓ로 하였다.

	종배양 배지함량(%)	본 배양 배지함량(%)
대두밀(Soybean Meal)	0.2	1
땅콩분(Peanut powder)	0.1	0.5
감자 단백질(Potato protein)	0.3	0.5
옥수수 침지액(CSL)	0.2	1
효모 추출물(Yeast Extract)	0.2	0.3
염화나트륨(NaCl)	0.5	0.5

배양시의 폭기(aeration)는 0.5 내지 0.7 vvm으로 하였으며, 교반속도는 500내지 600rpm 으로 하였다. 최종 배양액의 활성은 배양액을 12,000rpm에서 5분간 원심분리하고 그 상등액의 활성을 측정하였다. 그 결과 약 3,500PU/㎖의 단백질 분해효소 활성이 확인되었다.

<실시예 2> 배양액의 회수, 정제, 농축

30ℓ 발효조 2기에서 회수한 배양액 40ℓ을 우선 200메쉬(mesh)의 체에 통과시켜 큰 고형분을 제거하였다. 이 용액에 암모니움 설페이트(ammonium sulfate)를 5 내지 8%되게 첨가하여 30분간 교반한 후, 연속원심분리기로 원심분리(15,000rpm, 4℃)하여 균체 및 거대분자 물질들을 제거하였다. 또, 다른 방법으로 미세여과기(microfiltrator, 1㎛, 0.45㎛)을 이용하여 균체를 제거하였다.

이렇게 얻어진 용액의 순도를 높이기 위해 다시 암모니움 설페이트(ammonium sulfate)를 50%되게 처리하여 그 침전물을 증류수로 녹여 회수하고, 회수액을 다시 초여과(ultrafiltration)하여 분자량 10,000 내지 300,000 사이의 효소들만 농축하였으며 이를 'Vaps'라고 명명하였다. 그 결과 활성이 200,000PU/㎖이 되는 효소액 약 150㎖을 얻었다.

<실험예 1> 단백질 분해효소의 최적 pH와 최적온도의 조사

단백질분해효소의 생화학적 특성인 최적 활성 pH와 온도를 조사하였다. 최적 활성 pH의 조사를 위해서 pH 6 내지 12까지 각 pH 범위의 완충용액을 제조하여 단백질분해효소의 활성을 측정하였다. pH 6, 7, 8은 인산일수소나트륨(Na₂HPO₄)과 인산이수소나트륨(NaH₂PO₄)을 사용하여 용액을 제조하였으며, pH 9, 10은 붕산(Boric acid)과 염화칼륨(KCl)을 pH 11, 12는 인산일수소나트륨(Na₂HPO₄)과 수산화나트륨(NaOH)을 사용하여 용액을 제조하였다. pH에 대한 최적 활성조사는 기질을 각 pH의 용액에 용해시킨 후 40℃에서 10분간 예온한 후, 여기에 효소를 첨가하여 10분간 반응시키고 효소활성을 측정하였다. 최적 활성 온도의 조사는 25℃, 30℃, 40℃, 50℃, 55℃, 60℃, 70℃에서 하였으며, 50mM 소디움 카보네이트 완충액(Sodium Carbonate buffer, pH 10.5)에 용해시킨 아조카제인 기질에 Vaps를 적량 첨가하여 10분간 반응시켜 그 활성을 측정하였다.

그 결과 Vaps의 최적 pH 범위는 10 내지 11이며(도 1, 최대활성도를 100%으로 하여 상대활성도를 측정하였다), 최적 반응온도는 45 내지 55℃(도 2, 최대활성도를 100%으로 하여 상대활성도를 측정하였다)이었다.

<실험예 2> 고농축 액체 세제(HDL)내에서의 농축효소(Vaps) 안정도

실시예 2에서 제조된 농축 액체효소가 고농축 액체세제(HDL)에서 어느 정도의 안정도를 유지하는 지를 시험하였다. 고농축 액체 세제의 원료처방은 표 3과 같으며, 주 계면활성제로 음이온인 선형 알킬벤젠 설포네이트(LAS, Linear Alkylbenzene Sulfonate, 이하 LAS라 한다), 알파-올레핀 설포네이트 나트륨염(AOS-Na, α-olefin Sulfonate Sodium salt, 이하 AOS-Na라 한다), 소디움 라우릴 에테르 설포네이트(SLES, Sodium Lauryl Ether Sulfate, 이하 SLES라 한다)를 사용하였으며, 효소 안정화제로 글리세롤(glycerol), 에틸렌글리콜(ethylene glycol), 염화칼슘 이수화물(CaCl₂·2H₂O), 붕산나트륨(Sodium borate), 포름산나트륨(sodium formate)을 사용하였다. 효소안정도의 대조 효소로 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)를 사용하였으며, 40℃ 배양기(incubator)에서 28일간 보존하며 주 1회 잔존활성을 조사하였다(도 3). 그 결과 효소 안정화제가 첨가된 경우 Vaps가 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)보다 약 5 내지 10%정도 더 안정하였으며, 효소안정화제가 없는 상태에서도 Vaps는 그 안정도가 높았다.

농축 액체 세탁세제(HDL)

성분	함량
선형 알킬벤젠 설포네이트(LAS)알파-올레핀 셀포네이트 나트륨염(AOS-Na)소디움 라우릴 에테르 설포네이트(SLES)	11.5%7%11.3%	음이온계면활성제
글리세롤(Glycerol)에틸렌 글리콜(Ethylene glycol)염화칼슘 이수화물(CaCl₂·2H₂O)붕산나트륨(Na-Borate)포름산 나트륨(Na-Formate)	17.7%8%4.4mM88.8mM44.4mM	효소안정화제
니트릴로트리아세트산 나트륨(NTA-Na)	0.23%
Vaps서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)	0.5%0.5%	단백질분해효소
탈이온수	100.0%까지

<실험예 3> 각종 계면활성제가 단백질분해효소의 세정력에 미치는 영향

실시예 2에서 제조된 단백질 분해효소(Vaps)에 대해 각종 계면활성제가 단독 또는 복합으로 존재할 경우 세정력에 어떠한 영향을 미치는 가를 조사하였다. 계면활성제로는 음이온인 LAS, AOS, SLES와 비이온인 폴리옥시에틸렌(POE, Polyoxyethlene)(7eo)를 사용하였다. 두 가지의 오염포를 사용하여 다음과 같은 조건으로 세정력 시험을 하였다.

농도별 효소 세정력

	세제최종농도	1M 소디움 카보네이트완충액(pH 10.5)	효소액(A, B)	CaCO₃	탈이온수
배치 1	4,000 ppm	50mM	0%	50ppm	최종 1ℓ
배치 2	4,000 ppm	50mM	0.001%	50ppm	최종 1ℓ
배치 3	4,000 ppm	50mM	0.002%	50ppm	최종 1ℓ
배치 4	4,000 ppm	50mM	0.003%	50ppm	최종 1ℓ
배치 5	4,000 ppm	50mM	0.004%	50ppm	최종 1ℓ
온도 40℃, 인공오염포(EMPA 116, AS-10)

온도별 효소 세정력

	세제최종농도	1M 소디움카보네이트완충액(pH 10.5)	작용온도(℃)	CaCO₃	탈이온수
배치 1	4,000 ppm	50mM	20	50ppm	최종 1ℓ
배치 2	4,000 ppm	50mM	30	50ppm	최종 1ℓ
배치 3	4,000 ppm	50mM	40	50ppm	최종 1ℓ
효소(A, B)농도 0.004%, 인공오염포(EMPA 116, AS-10)

각종 계면활성제에서의 세정력시험 결과, 선형 알킬벤젠 설포네이트(LAS)의 존재하에서 Vaps의 세정력이 매우 약하였으나, 선형 알킬벤젠 설포네이트를 비이온 계면활성제 POE(7eo)와 1:1의 비율로 혼합하여 세정력을 시험한 결과, 그 세정력이 모두 회복되었다. 특히 비이온 계면활성제 및 SLES존재 하에서는 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)보다 Vaps가 우수한 세정력을 보였다(도 4).

또한 각종 계면활성제의 혼합물이 효소의 세정력에 미치는 영향을 조사하기 위하여 상기 표 4의 조성처럼 LAS, SLES, AOS, POE(7eo)를 1:1:1:1의 비율로 혼합(최종 4,000ppm)한 세제로 세정력 시험을 하였다. 그 결과 AS-10 오염포를 사용하였을 경우 Vaps는 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)에 비해 상대적으로 우수한 세정력을 보였으며, EMPA-116오염포에서는 비슷한 세정력을 나타냈다(도 5).

또한 상기 표 5에서와 같은 조건으로 온도별 세정력을 시험한 결과, Vaps가 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)보다 저온(20℃)에서 약 6%정도 우수한 세정력을 보였고, 고온(40℃)에서는 비슷한 세정력을 보였다(도 6).

효소농도에 대한 세정력차이를 조사한 결과 효소농도가 증대될수록 세정력도증대 되었으며, AS-10 오염포에서는 적은 농도(0.001%)에서 Vaps가 서브틸리신 칼스버그(subtilisin Carlsberg)보다 6% 더 우수한 세정력을 보였다.

이상에서 본 바와 같이 본 발명은 세정력 및 효소 안정도가 증가된 단백질 분해효소 및 이를 포함하는 세탁용 세제조성물을 제공하는 유용한 발명인 것이다.

Claims

분자량이 10,000 내지 300,000를 가지며, 기질을 아조카제인(azocasein)으로 하고, 작용온도 40℃ 내지 55℃에서 pH가 10 내지 12인 특징들을 가지는 비브리오 메치니코프 알에이취 유도체로부터 획득된 단백질 분해효소(Vaps).
제 1항에 있어서,

상기 비브리오 메치니코프 알에이취 유도체는 비브리오 메치니코프 케이에스1(KS1), 비브리오 메치니코프 케이에스1(pDSBCm), 비브리오 메치니코프 케이에스1(pSBCm) 또는 이의 모주인 비브리오 메치니코프 알에이취 530 엔-4-8 균주중에서 선택된 1이상의 균주로부터 획득된 것을 특징으로 하는 상기 단백질 분해효소(Vaps).
제 1항의 단백질 분해효소(Vaps)에 세탁세제로 허용가능한 안정화제 또는 계면활성제가 첨가된 것을 특징으로 하는 세탁용 세제 조성물.
제 3항에 있어서,

상기 계면활성제가 선형 알킬벤젠 설포네이트(LAS), 알파-올레핀 설포네이트 나트륨염(AOS), 소디움 라우릴 에테르 설포네이트(SLES)중에서 1 이상 선택되는 것을 특징으로하는 상기 세탁용 세제 조성물.
제 3항에 있어서,

상기 안정화제가 글리세롤, 에틸렌 글리콜, 염화칼슐 이수화물, 붕산나트륨, 포름산 나트륨중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 상기 세탁용 세제 조성물.