KR20010093331A - 포유류의 생체 조직 내에서의 캡슐 형성을 위한폴리아크릴아미드 겔의 용도, 세포를 배양하는 방법, 및종양 질환과 당뇨병의 치료방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 의학의 용도, 상세하게는 종양세포에 대한 예방접종의 문제 및 당뇨병의 면역요법의 새로운 방법에 관한 것이다. 본 발명에서는 인간의 조직을 포함한 포유류의 조직에서 캡슐의 형성을 연루하는 세포배양을 위한 새로운 방법을 제안한다. 상기 캡슐은 폴리아크릴아미드 겔로 만들어지고 원하는 세포를 그 안에 주입한다. 본 발명은 오랜 시간동안 세포의 생존 능력을 유지하는 것을 확실히 한다.

Description

포유류의 생체 조직 내에서의 캡슐 형성을 위한 폴리아크릴아미드 겔의 용도, 세포를 배양하는 방법, 및 종양 질환과 당뇨병의 치료방법{Application of polyacrylamide gel for forming a capsule in the tissue of a mammal organism, method for cultivating cells and method for therapy of oncological diseases and the diabetes mellitus}

포유류의 장기, 조직, 세포 배양물의 이식의 문제는 수용 생체에서 "정착(take root)"을 위한 외인성의(xenogenous) 조직-및-세포 시약의 가능성과 연관된 어려움을 연루한다. 동종-, 이종- 및 외인성 이식조직을 이식하는 현재의 방법은 수여자에 대한 강력한 면역억제 치료 혹은 원래의 공정을 필요로 한다. 이러한 후자의 방법은 인간 및 동물의 태아들의 다양한 장기의 세포를 이식하는 방법을 포함한다, 즉 미성숙된 종 특이성의 효과가 이용된다. 그러한 방법으로, 예를 들어24-26 주의 인간 태아의 췌장의 소도세포(islet cell)를 랫트 실험에서 간의 실질 혹은 간문맥으로 이식한다.

세포를 도입하는 위치는 비장 수질 혹은 앞배면근육일 수도 있다. 유사한 방법에 의해 당뇨병 환자를 치료하는 케이스가 알려져 있다(Skaletskii N.N., "외인성 수여체인 생체에서 췌장의 소도세포를 배양하는 것의 생존에 대한 효과", All-Russian Conference on Transplantation of Organs, 1995, pp. 219-220(in Russian)).

불임을 치료하기 위해 남성에게 고환 조직으로 레이디히 세포를 이식하는 것은, 거부 반응이 혈액고환장벽(hematotesticular barrier)의 존재 때문에 일어나지 않기 때문에 흥미롭다(Zybin D.V, "이식기술에 의해 남성 성 영역의 기능부전을 갖는 환자를 치료하는 방법", RF 특허 2026643, 95.01.20).

상기한 방법 모두의 결과로서, 이식세포의 생존능력과 활성을 유지하는데 있어서 좋은 결과를 얻었다. 그러나, 전자의 방법은 단지 발생세포(embryonal cell)만을 사용하는 것을 가능케 하고 이것은 명확한 근거로 수많은 어려움을 연루하며, 후자의 세포치료방법은 단지 남성 개인에게만 적용가능하다고 입증된다.

생세포의 도움으로 종양의 예방접종과 백신요법이 알려져 있다. 적용된 세포는 하이브리도마 혹은 형질전환된 세포, 동종 혹은 자가이식편이다. 그러한 세포의 단점은 생체에서의 단시간 생존이고, 따라서 면역 효과이다(B.E. Souberbielle, M. Westby, S. Ganz, 및 J. kayaga, B16F10 흑색종 모델에서의 종양 예방접종에 대한 네가지 전략의 비교).

마이크로캡슐화를 이용한 췌장 소도(PIs)의 이식 방법이 당업계에 알려져 있다.

상기 방법은 알긴산 겔의 구체에 캡슐화된 (동종 혹은 외인성) PIs를 도입하는 것에 있다. 구체를 복강 내로 이식한다. 구체의 이식은 175일 동안 인슐린 요법을 대체하지만, 이런 경우 면역억제요법을 동시에 행한다. 소 PIs를 유도된 당뇨병을 갖는 랫트에게 면역억제 없이 투여한다. 정상혈당증이 수주에서 한달동안 유지된다.

상기 방법의 확실한 불편은 면역억제요법이 필수적이라는 것이다. in vitro에서 캡슐을 제조하는데 확실한 어려움이 있다(Lanza R.P., Esker D.M., 및 Marsh J.P., 당뇨병 설치류와 개에서의 마이크로캡슐화를 이용한 소도 이식 연구, J. Mol. Med., 1999 Jan. 77(1):206-10).

생세포의 도움으로 종양세포의 예방접종과 백신치료 방법이 또한 알려져 있다. 그것은 종양세포와 동종 수상세포(혹은 대식세포)의 하이브리도마을 생산하는 것에 있다. 얻어지는 하이브도마를 백신제제로서 사용한다.

그러나, 이런 방법은 수용 생체에 도입된 세포의 단시간 생존에 의해 유도되는 낮은 면역효과를 또한 특징으로 한다(Gajewsky T.F. 및 Fallarino F., 흑색종에서의 종양 항원-특이적 면역화의 합리적 발달. Therapeutic Immunology, 1997, 2, 211-225).

그러므로, 이식된 세포의 수명을 증가시켜서 결과적으로 면역억제요법이 불필요해질 뿐 아니라 면역효과를 증진시키기 위한 문제가 예나 지금이나 당해 기술분야의 화제이다.

전문가들은 당뇨병을 치료하는 방법이 또한 세포를 이식하는 문제의 긍정적 해결방법과 연관되어 있으며 그것의 성공적 해결이 여러 면에 있어서 치료방법의 원하는 유효성을 조장할 것이라는 것을 인식하고 있다.

예를 들어, 당뇨병을 치료하는 방법이 알려져 있는데, 그 당뇨병에 따라 양성 인간 인슐린종의 세포이식을 행하고, 췌장 β-세포를 함유하는 물질을 복직근 내로 이식한다(RF 특허 2004247).

그러나, 이식을 위해 β세포의 배양물을 사용할 때 섬유아세포의 성장의 우세와 싸우는 것과 연관되어 일어나는 문제 및 기능적 활성이 실질적으로 다양한 종양세포를 이식으로서 사용한다는 사실 때문에 요구되는 특정 비율의 인슐린종 세포 배양에 의한 인슐린 생산의 정확한 조절이 본 방법의 광범위한 사용에 장애를 준다.

췌장 β-세포를 함유하는 물질을 이식함으로써 당뇨병을 치료하는 방법이 또한 알려져 있다(RF 특허 2135193). 당뇨병을 치료하는 방법, 주요하게는 인슐린-의존성 당뇨병은 β-세포 이동 현상의 이용으로 생산되는 포유류의 췌장 β-세포를 함유하는 물질을 사용하여 이루어 진다.

췌장의 β-세포를 함유하는 물질을 다른 장기 혹은 조직으로 이식한다; 근육 내로, 복직근으로, 간장으로( 간실질 혹은 간문맥으로), 비장 수질로, 비장 동맥으로, 복강으로, 대망으로, 특이적으로 창조된 근육낭으로.

β-세포가 수용 생체에서 인슐린 공여체를 생산하는 동안의 짧은 기간은 이종원 세포의 거부 효과 때문에 상당한 면역억제 요법을 필요로 한다.

본 발명은 의학, 특히 면역학 및 면역종양학, 그리고 또한 당뇨병 주요하게는 인슐린 의존성 당뇨병의 치료에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 종양세포에 대한 예방접종과 종양질환의 백신요법의 문제 및 당뇨병을 치료하는 새로운 방법에 관한 것이다. 더욱이, 본 발명은 치료 방법의 사용을 위해 특별한 캡슐을 제안하는데, 이것 때문에 치료는 실질적으로 더욱 효과적이라고 증명된다.

도 1은 어린 돼지(열 1과 2)와 녹색 원숭이(green monkey)(열 3과 4)의 레이디히 세포를 이식한 Vistar-line 랫트의 혈청에서의 테스토스테론의 동역학을 나타낸다. 열 1 및 3은 대조군의 결과(피하로 세포를 도입한다), 열 2 및 4는 실험 결과(세포를 생성된 폴리아크릴아미드 캡슐에 도입한 것)를 보여준다.

본 발명은 상기한 문제점을 극복하는데 목적이 있다. 본 발명의 저자는 예상치 않게 수용 생체에서 이종의 세포를 포함한 이식세포의 생존능력을 장시간 유지하는 것이 그러한 세포치료의 필요가 있는 포유류(인간을 포함한) 생체에 in vivo로 생성되어 지는 폴리아크릴아미드 겔 캡슐을 사용함으로써 제공될 수 있다는 것을 발견하였다.

그러므로, 본 발명의 한 측면은 포유류 생체에서 in vivo로 거기에서 생성되는 폴리아크릴아미드 캡슐을 제조하기 위한 폴리아크릴아미드 겔의 용도이고, 그 캡슐은 후에 거기에 이식된 세포를 배양하는데 사용될 수 있다.

본 발명의 저자들에게는 예상치 않게, 상기 캡슐에 주입된 세포들은 장시간(100일 이상 까지) 동안 생존능력을 보유할 수 있고 치료에 필수적인 화합물을 생산해 낼 수 있다고 판명되었다.

그러므로, 본 발명의 또 다른 측면은 그러한 치료가 필요한 환자의 생체에 치료에 필수적인 세포를 배양하는 방법이다. 세포 배양은 폴리아크릴아미드 겔을 포유류의 생체에 주입하고; 포유류의 생체에 일정한 기간의 시간동안 겔 캡슐을 형성하고; 그리고 이식될 세포의 필요량을 상기 캡슐에 주입함으로써 진행된다.

환자의 체내에서 배양세포의 장시간 생존은 수많은 질병의 치료에 유용하다고 판명되고, 그것은 질병을 악화시키거나 발병시키는 생체내 결핍된 생물학적 활성 화합물을 생산하는 자가의 혹은 이종유래의 세포의 이식을 필요로 한다.

본 발명의 세 번째 측면은 보통의 환경 하에서 집중적인 면역억제 치료를 필요로 하는 항원으로 면역화가 지시되는 질병의 치료방법이다.

본 발명의 다음 측면은 당뇨병, 주요하게는 인슐린-의존성 당뇨병의 치료방법인데, 그 치료방법은 췌장 β-세포의 효과적인 양을 환자의 유기체에서 미리 형성된 폴리아크릴아미드 겔 캡슐에 도입하는 것에 있다.

본 발명의 또 하나의 측면은 백신 제제를 생산하기 위한 다음의 목적을 위해 포유류의 생체 내에서의 이종유래 세포(종양세포, 레이디히 세포, 등)의 배양과 변형 방법이다. "이종유래 세포의 변형"의 정의는 그 증식활성을 줄이고 생체에 대한 면역화 작용을 나타내는 것으로 이해해야 한다.

본 발명은 바람직한 구체예의 실시예에 의해 더욱 상세하게 개시될 것이고, 이러 실시예들은 실례로서 주어지는 것 뿐이므로 청구의 범위를 한정하기 위해 사용되어져서는 않된다. 당업자는 본 발명을 보완하거나 변형하기 위한 상당한 수의 가능성을 찾을 수 있을 것이고, 그것은 상기한 장점들을 보유할 것이며 본 발명의 청구범위 세트의 영역 내 일 것이다.

일반적인 형태에서 본 발명은 다음과 같이 행한다.

본 발명에 따른 결합-조직 캡슐을 예를 들어 폴리아크릴아미드 겔(PAAG)(1.0-5ml 부피로)을 동물, 예를 들어 Vistar-라인 랫트(1.0-3ml의 부피로) 혹은 C57BLACK 및 BALB/C 라인 마우스(0.5-1ml의 부피로) 혹은 인간과 같은 포유류(1.0-3ml의 부피로)에게 피하주사의 방식으로 하여 생성할 수 있다. 성이 다른 개체를 실험에 참가시킬 수도 있다. 사춘기 정도의 어린 돼지 및 녹색 원숭이의레이디히 세포 혹은 종양세포를 겔 캡슐에 도입할 수 있다. 피할로 세포를 주입하는 동물은 대조군으로 작용한다.

사춘기정도의 어린 돼지, 랫트, 및 녹색 원숭이 유래의 생존 가능 레이디히 세포의 현탁액을 세포를 위한 영양 기질 특히 표준 Eagle's 배지, 배지 199, Hanks' 용액의 성분을 함유하는 용액을 사용하여 제조한다.

당뇨병을 고생하는 환자들을 치료하는 제안된 방법의 핵심은 수용 생체에서 제공자의 췌장 β-세포에 의한 인슐린의 장기간 존재와 생산이며, 이것은 환자에게 폴리아크릴아미드 겔의 피하주사를 미리하고 이후에 형성된 캡슐에 β-세포를 이식함으로써 이루어진다.

β-세포의 이식을 위한 물질은 포유류(신생 돼지, 토끼, 사춘기 녹색 원숭이)의 췌장에서 얻는다. 배양은 표준 배지와 용액을 사용하여 행한다. β-세포를 활성상태로 유지하기 위해서는 췌장의 절약 효소 치료(sparing enzymatic treatment)방법이 적용되는데, 이 방법은 조직을 효소와 영양배지와 함께 번갈아 하며 접촉시키는 것에 있다. 상기 치료단계의 결과로서, 췌장조직의 단편과 β-세포를 원심분리하지 않고 배양용기에 넣는다. 공여자의 물질에 따라 트립신과 체놉신의 0.1-0.25% 용액을 다른 순서로 하여 조직의 분산을 수행한다. 조직의 효소치료는 "Biotech-m" 플라스크를 사용하여 배지와의 접촉 시 완성되는데, 그것은 마그네틱 테이블 상에서 현탁액에 조절된 교반을 제공한다.

결과물인 세포 물질을 환자에게 미리 피하에 투여된 폴리아크릴아미드 겔에 의해 형성된 결합-조직 캡슐에 주입한다. 세포의 양은 수여자의 질병의 심각정도에따른다.

하기 실시예들은 본 발명을 유효하게 수행하는 방법을 예시한다.

실시예 1

ml 당 5백만개의 세포 농도인 신생 돼지의 레이디히 세포 배양물 0.5ml 부피를 Vistar-라인 랫트 암컷에게 폴리아크릴아미드 겔 캡슐 내로 주입한다.

같은 라인, 성 및 인류학 데이타의 대조군 동물에게는 신생 돼지의 레이디히 세포배양물을 피하에 투여한다. 세포 배양물을 주입하기 전에, 동물의 혈청 내의 테스토스테론의 농도를 측정한다. 주입 이후에 혈청의 테스토스테론 농도 측정을 다른 시간 간격으로 7개월 동안 대조 및 실험동물 동시에 수행한다.

대조군과 실험동물의 숫자는 각각 2개체 였다. 도. 1(열 1 및 2, 각각)

실시예 2

ml 당 5백만 세포의 농도인 사춘기 녹색 원숭이의 레이디히 세포 배양물 0.5ml 부피를 Vistar-라인 랫트에게 폴리아크릴아미드 겔 캡슐 내로 주입한다.

같은 라인, 성 및 인류학 데이타의 대조군 동물에게는 사춘기 녹색 원숭이의레이디히 세포배양물을 피하에 투여한다. 세포 배양물을 주입하기 전에, 동물의 혈청 내의 테스토스테론의 농도를 측정한다. 주입 이후에 혈청의 테스토스테론 농도 측정을 다른 시간 간격으로 7개월 동안 대조 및 실험동물 동시에 수행한다.

대조군과 실험동물의 숫자는 각각 2개체 였다. 도. 1(열 1 및 2, 각각)

7개월의 관찰 후에 동물을 희생시키고 조직학적 검사를 행한다. 그것은 생존 가능한 레이디히 세포의 존재를 알려주었고, 그러므로 수여 생체에서 겔을 사용 시 외인- 및 이종유래의 세포의 생명 활성의 가능성에 관한 결론을 이끌어 낼 수 있다.

실시예 3

0.5ml 부피의 PAAG를 BALB/C 라인(6 개체)의 마우스 실험군에 투여한다. ml 당 백만 세포 농도의 쥐(murine) 흑색종 B-16의 종양세포 1ml 부피를 겔에 주입한다. ml 당 백만 세포 농도의 쥐(murine) 흑색종 B-16의 종양세포 1ml 부피를 BALB/C 라인(6 개체)의 마우스 대조군에 동시에 투여한다.

BALB/C 라인 마우스에서는 쥐 흑색종 B-16이 자라지 않는다는 것이 알려져 있다. 대조군 동물에서는 종양의 성장이 6개체 중 어느 한 마리에서도 관찰되지 않았다. 실험군 동물에서는, 촉진성 조사 방법으로 PAAG에서의 종양 성장이 관찰되었다. 겔에 쥐 흑색종 B-16을 갖는 실험동물을 60일이 지난 후, 희생시킨다. 종양세포가 있는 겔을 무균 환경 하에서 뽑아내고 10% 태아 혈청을 갖는 영양배지 RPMI-1640에 단일 층 배양을 한다. 종양세포를 갖는 캡슐의 단편을 중성 포르말린 용액에 고정하고, 조직학적 조사를 실시하였는데, 그것은 흑색종 세포의 더 고도한 분화 및 그것들에 의한 증식 활성의 손실에 관한 판단을 가능케 한다(표 1[1-2]).

표 1.

BALB/C 및 C57BLACK 라인의 마우스에서의 흑색종 B-16(쥐) 및 SKMEL 28(인간)의 성장의 비교

마우스 라인	종양주(tumor strain)	흑색종의 성장	수명	전이
BALB/C+GEL	B-16	+	60일(관찰 기간)	-
BALB/C	B-16	-	>관찰기간	-
C57BLACK+GEL	SKMEL28	+	>관찰기간	-
C57BLACK	SKMEL28	-	>관찰기간**	-

^*겔에서 자란 종양을 갖는 동물을 희생시킨다. 그것들로부터 유리된 종양세포를 다음 실험에서 사용한다(표 2).

^**마우스를 흑색종 B-16에 대한 면역을 평가하기 위한 실험에 더 사용한다(표 3).

실시예 4

실시예 1에서와 같이 제조된 ml당 백만의 세포농도를 갖는 세포 배양물 1ml를 C57BLACK 라인(6 개체)에 피하로 투여한다.

C57BLACK 라인의 마우스에서 쥐 흑색종 B-16의 종양이 100% 자라고, 동물의 사망이 20-25일 째에 100% 일어난다.

C57BLACK 대조군 그룹에게는 ml 당 백만의 세포농도를 갖는 쥐 흑색종 B-16 세포 배양물을 1ml 투여한다.

실험군 쥐에서 종양 성장 증후의 발현이 60에서 65일 후에 관찰되고, 대조군 쥐에서는 20-23일 후에 관찰된다(표 2).

표 2.

BALB/C 라인 마우스의 겔-캡슐에서 배양되어 C57BLACK 라인에 이식된 흑색종 B-16의 종양원 활성

숫자	종양주	종양 발현 시간	마우스의 수명	전이의 존재
1	BALB/C 라인의 겔 유래 흑색종(B-16-X)	30일	60일	+
2	B-16(대조군)	7일	22일	+

실시예 5

0.5ml 부피의 폴리아크릴아미드 겔을 C57BLACK 라인(6 개체)의 마우스에게 피하주사 한다. ml 당 100만의 세포농도를 갖는 인간 흑색종 SKMEL 세포 배양물 1ml를 겔에 주입한다.

같은 라인의 마우스 대조군(6 개체)에게 ml 당 100만의 세포농도를 갖는 인간 흑색종 SKMEL 세포 배양물 1ml를 피하로 투여한다.

인간 흑색종의 세포 배양물을 마우스에서 100% 자라지 않는다는 것이 알려져 있다. 실험군 동물에서 투여 후 15-20일째에 겔에서의 종양 성장을 촉진에 의해 측정한다. 대조군 동물에서는 어떤 종양 성장도 발견되지 않는다(표 1[3-4])

실시예 6

실시예 3에서 기술된 실험군 동물(6 개체)에게 ml당 백만 세포농도를 갖는 흑색종 B-16 1ml를 피하로 투여한다. C57BLACK 라인 마우스 대조군(6 개체)에게 ml당 백만 세포농도를 갖는 흑색종 B-16 1ml를 피하로 투여한다.

대조군 동물에서는 직경이 약 3-5cm 인 피하 흑색종이 7-15일째에 생성된다. 실험군 동물에서는 같은 기간동안 어떠한 종양 증후도 감지되지 않는다(표 3).

표 3. 마우스에 대한 인간 흑색종 SKMEL28의 면역원적 활성

숫자	종양주	종양 발현 시간	동물의 사망
5	B-16	-	>60일
6	B-16	7-15일	18-20일

그러므로, 상기에 나타난 결과는 in vivo PAAG에 이종 유래의 세포를 배양하는 방법은 종양세포의 증식활성이 낮아지고 배양세포가 생체에 면역 효과를 제공함으로써 예방접종과 백신요법에 사용될 수 있다는 것을 믿을 수 있는 근거를 부여한다.

실시예 7

37세 여성 환자 F.는 11년 전에 인슐린 의존성 당뇨병으로 진단 받았고 1년 후에 출산하였다. 임신이 신장질환에 의해서 임신기간의 후반부에 중독증으로 악화되었고 26kg 까지의 상당한 체중증가가 있었다. 질환의 특징은 모든 기간동안 불안정했고, 적절한 인슐린 치료를 행하는데 있어 상당한 노력이 필요했다. 외인성의 인슐린의 사용은 하루에 58 유니트에서 30유니트 까지 다양했다. 지난 2년의 기간동안 신장에서의 병리학적 변화를 진단하였는데, 당뇨성 신장질환으로 판명되었다. 요분석에서 단백뇨 상한선의 10-12배의 증가가 관찰된다. 동맥압은 170/110mmHg로 증가한다.

신상 토끼의 췌장세포의 배양물을 미리 형성된 캡슐에 배양물을 주사함으로써 상기 환자에게 피하로 투여하였다. 7일 후에 환자는 이미 전신상태, 구강 점막의 구갈이나 건조의 지각의 감소, 동맥압의 140/90mmHg 까지의 감소의 향상을 나타냈다. 15일 후에는 환자의 상태가 외인성 인슐리의 필요가 30 유니트에서 18 유니트로 줄었다(혈액 및 뇨조절). 30일 후에는 외인성 인슐린의 필요성이 하루에 12 유니트 까지 줄었고, 둘째 달이 다 가까워 졌을 때는 하루에 4 유니트 까지 줄었다.

환자의 상태를 12개월 동안 추적하였다. 신장 질환에 관한 아무런 임상적 징후가 감지되지 않았고, 동맥압은 연령 표준 내에 있었다. 환자를 당뇨 식이를 의무적으로 준수시키는 것과 함께 항-당뇨 제제의 경구투여 및 당화 혈색소 뿐 아니라 혈액의 당의 조절로 전환하였다.

실시예 8

52세 남성 환자 K.,는 강한 스트레스 상황의 환경 때문에 18세 이후로 인슐린-의존성 당뇨병으로 진단되었다. 상기 질환의 첫 특징은 불안정하게 심각했다. 외인성 인슐린의 투여량은 하루에 70 유니트에 달했다. 최근 몇 년에는 질병의 진행이 안정되었지만 스트레스 상황 및 식이 상의 실수 후에 상태의 악화가 일어났다.

최근 3년 동안에는 하지 혈관상태의 악화, 성욕의 감소, 발기부전 및 성교 질의 황폐가 관찰되었다. 하지 및 음경의 당뇨성 혈관병증으로 진단되었다. 최근 몇 년 동안 외인성 인슐린의 필요성은 하루에 20유니트에서 40유니트였다.

상기 환자에게 14일된 돼지에게 췌장세포 배양물을 미리 형성된 캡슐내로 주사하여 투여하였다. 2주 후에, 상기 환자는 전신상태의 호전을 보였다. 한달 후에는 외인성 인슐린의 필요성이 하루에 12유니트로 줄었다. 두달 후에는 이러한 필요성이 하루에 6유니트로 줄었다. 이식 4개월 후에는 환자를 항-당뇨 제제의 경구투여로 전환하였다. 환자의 성생활은 정상화되었고, 하지 혈관의 상태는 눈에 띄게 향상되었다.

조사된 환자의 주관적 객관적 증후, 혈액과 소변 검사의 부가적 방법의 데이터는 사람들에게 당뇨병을 치료하는 이런 방법의 높은 유효성을 말할수 있게 하며, 이것은 환자에 의해 투여된 외인성 인슐린의 상당한 감소 및 어떤 경우에는 심지어 인슐린 치료의 거부 조차에도 이르게 된다. 상기 방법은 면역억제 치료를 필요로 하지 않으며, 당뇨병의 이차적 합병증: 망막-, 신경-, 신장 질환의 위험을 낮춘다. 상기 방법은 환자의 삶의 질을 눈에 띄게 향상시키는 것을 가능케 한다. 대개, 치료효과는 10-20개월 지속되고, 질환의 심각도에 따라 다르다.

이식되는 세포의 양 또한 당뇨병 진해의 심각성, 특히 환자게 누여되는 외인성 인슐린의 양에 의존한다.

제안된 본 발명은 "폴리아크릴아미드 겔"을 사용하여 포유류의 생체내에 그것을 도입함으로써 in vivo 캡슐을 형성하게 하는 것을 가능케 하는데, 그 캡슐은 후에 이식을 위한 생존가능 세포로 주입되어 세포에 의해 생산되는 화합물로 치료하기 위해 요구되는 장시간 동안 생산자 세포를 배양하기 위한 챔버로서 작용한다, 이때 상기 화합물은 이러한 인공적으로 형성된 챔버에서 유리되어 환자의 생체에 바람직한 효과를 낳는다. 지시된 목적을 위한 폴리아크릴아미드 겔의 사용은 배양되는 세포를 장시간 동안 생존가능성을 유지케 하고 그럼으로써 지속된 치료효과를낳는다. 상기 사용은 면역억제 치료를 생략하는 것을 가능케 하고 실용 의학에서 매우 광범위한 적용을 찾을 수 있을 것이다.

Claims (11)

1. 생체에서의 부재나 결핍이 질병을 유도하고/거나 생체에서의 양의 증가가 병변을 겪고 있는 생체의 상태를 향상시키는데 공헌하는 생물학적 활성 성분을 생산하기 위해 의도된 동물의 자가 혹은 외인성 이식 세포를 장기간의 시간동안 배양하기 위해 의도된 캡슐을 포유류의 생체조직 내에서 형성시키기 위한 폴리아크릴아미드 겔의 용도.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 생체가 인간 생체인 것을 특징으로 하는 용도.
3. 제 2 항에 있어서, 상기 병변이 당뇨병인 것을 특징으로 하는 용도.
4. 제 1 항 내지 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이식세포가 췌장 β-세포인 것을 특징으로 하는 용도.
5. 제 4 항에 있어서, 상기 췌장세포가 신생 토끼 혹은 어린 돼지의 세포인 것을 특징으로 하는 용도.
6. 포유류에게 폴리아크릴아미드 겔을 미리 투여한 뒤 상기 겔에 포유류의 이종유래 혹은 자가 세포를 주입함으로써 살아 있는 생체 내에서 장기간의 시간동안 포유류의 이종유래의 세포를 배양하고 변형시킨 후 상기 세포를 백신 제제를 제조하기 위해 사용하는 방법.
7. 제 6 항에 있어서, 상기 이종유래의 세포로서 종양세포를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
8. 제 6 항에 있어서, 상기 이종유래의 세포로서 레이디히 세포를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
9. 제 6 항 내지 9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포의 변형은 그 증식 활성의 저하와 생체에 대한 면역화 효과에 있는 것을 특징으로 하는 방법.
10. 수여체에게 미리 폴리아크릴아미드 겔을 투여한 후, 치료학적으로 상당한 양의 췌장 β세포를 상기 겔에 이식하는 방법에 의해 당뇨병을 치료하는 방법.
11. 제 10 항에 있어서, 상기 β-세포가 신생 토끼 혹은 어린돼지의 세포인 것을 특징으로 하는 방법.