KR20000022630A - 테트라졸륨 화합물에 기초한 진단법 - Google Patents

테트라졸륨 화합물에 기초한 진단법 Download PDF

Info

Publication number
KR20000022630A
KR20000022630A KR1019990016786A KR19990016786A KR20000022630A KR 20000022630 A KR20000022630 A KR 20000022630A KR 1019990016786 A KR1019990016786 A KR 1019990016786A KR 19990016786 A KR19990016786 A KR 19990016786A KR 20000022630 A KR20000022630 A KR 20000022630A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
analyte
reagent
hemoglobin
dehydrogenase
test pad
Prior art date
Application number
KR1019990016786A
Other languages
English (en)
Inventor
오우양티안마이
유예웅슈
Original Assignee
리젠펠드 제임스
라이프스캔, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 리젠펠드 제임스, 라이프스캔, 인코포레이티드 filed Critical 리젠펠드 제임스
Publication of KR20000022630A publication Critical patent/KR20000022630A/ko

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/64—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving ketones
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/97—Test strip or test slide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/17—Nitrogen containing
    • Y10T436/173076—Nitrite or nitrate

Abstract

본 시약은 전혈(whole blood)같은 헤모글로빈을 함유하는 생체액 내의 피분석물의 농도를 측정하기에 적합하다. 본 시약은 피분석물에 대해 특이성을 갖는 탈수소효소, NAD, NAD 유도체, 피롤로-퀴놀린 퀴논 (PQQ) 또는 PQQ 유도체, 테트라졸륨 염료 전구체, 디아포라제 효소 또는 이의 유사물질, 및 아질산염을 포함한다. 본 시약은 피분석물 농도의 척도인 염료 형성을 초래한다. 아질산염은 헤모글로빈에 의해 비효소적으로 초래되는 방해성 염료 형성을 억제한다. 바람직하게는, 본 시약은 베타-히드록시부티레이트 같은 케톤체 측정용 건조 스트립에 사용된다.

Description

테트라졸륨 화합물에 기초한 진단법{Diagnostics based on tetrazolium compounds}
본 발명은 헤모글로빈을 함유하는 생체액내의 피분석물 농도의 측정이 가능하도록하는 진단 조성물에 관한 것이다. 본 조성물은 테트라졸륨 염료 전구체에 기초하고 있으며 헤모글로빈에 의해 유도된 테트라졸륨 염료 전구체의 환원을 억제하는 것을 포함한다.
지방 조직은 신체에서 가장 많은 에너지 저장 형태중의 하나이다. 지방 조직은 저장된 지방산을 순환계 내로 방출하여 우선 간에 의해 대사되도록 한다. 그과정에서, 지방은 소비되어 에너지가 방출되고 신체가 이용할수 있게 된다. 보통, 지방은 거의 소비되지 않고, 지방산은 이산화탄소와 물로 완전히 대사되며, 이런 전환은 신체의 정교한 pH 균형을 교란시키지 않는다. 그러나, 예를들어, 식이요법으로 인해 신체에 불충분한 양의 탄수화물이 존재하는 경우에는, 지방 소비 및 지방산 생성이 증가하여 유해한 수준에 이를수 있다. 식이요법자 이외에, 인슐린-의존 환자 는 손상된 탄수화물 대사 때문에 해를 입기 쉽다. 과도한 지방산이 신체의 에너지 수요량을 공급하기 위해 사용되면, 많은 양의 아세토아세테이트, 아세톤 및 베타-히드록시부티레이트가 생성된다. 이런 중간생성물은 케톤체(ketone body)라 불리며, 이런 환경은 케토아시도시스(ketoacidosis)로서 공지되어 있다.
케톤체는 지나치지 않은 경우에는, 보통 신체에 의해 다른 형태로 재순환 될 수 있다. 그러므로, 건강한 사람은 무시할수 있는 양의 이런 피분석물을 축적한다. 많은 양의 지방이 비교적 짧은 기간 내에 대사되고 있거나, 대부분의 에너지가 지방으로부터 유래되는 경우에는, 많은 양의 케톤체가 생성된다. 이런 지방 대사산물의 과도한 생성은 문제가 재빨리 교정되지 않으면, 어떤 신경계 질환을 일으킬 수 있다.
케톤체는 혈액 내에 존재하며, 역치 이상이 되면, 소변을 통해 배출된다. 이들은 현대의 임상 분석기에 의해 쉽게 탐지된다. 평균적으로, 베타-히드록시부티레이트, 아세토아세테이트 및 아세톤의 백분율은 각각 78%, 20% 및 2% 이다. 아세톤은 비교적 낮은 농도 및 높은 휘발성때문에 거의 측정되지 않는다. 대신에, 아세토아세테이트는 나이트로프루사이드 반응에 의해 정량적으로 측정되고 베타-히드록시부티레이트는 효소적 방법으로 정량된다. 아세토아세테이트 시험 스트립은 수십년간 이용되어 왔다. 이는 알데히드 및 케톤과의 나이트로프루사이드 이온 커플링 반응에 기초하고 있다. 알칼리성 소변 샘플 또는 혈청 시료를 나이트로푸루사이드와 수분 동안 반응시키면, 자줏빛이 나타난다. 색의 강도는 아세토아세테이트 농도를 나타낸다. 그러나, 아세톤은 시험에 간섭하여 더 높은 리딩을 초래한다. 더욱이, 환자가 케토아시도시스 에피소드로부터 회복할때, 소변 및 혈액 내의 아세토아세테이트 수준이 증가하여 진단을 어렵게 만든다.
베타-히드록시부티레이트 시험은 케톤체 농도를 모니터하는데 좀더 유용하다. 이는 베타-히드록시부티레이트를 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 (NAD) 보조인자의 존재하에 상응하는 탈수소효소로 산화시키는 것에 기초한다. (엄격히 말해서, D-베타-히드록시부티레이트만이 자연적으로 존재하고 산화되나, 본 명세서 및 첨부된 특허청구범위에서는 간략화하기 위해 "D"를 생략한다.) 산화하자마자, NADH가 생성되고, 이의 농도는 UV 분광계로 직접 측정할 수 있다. 그러므로, 스펙트럼의 상응하는 시그날 변화는 피분석물의 농도에 비례한다. 불행히도, NADH의 여기(excitation)가 UV 부위에서 일어난다; 따라서, 이런 방식의 탐지는 실험 도구를 위해서만 적합하다. 베타-히드록시부티레이트를 모니터하기 위한 또다른 방법은 NADH를 테트라졸륨 화합물로 산화시키는 것에 의한다.
테트라졸륨 화합물은 일반적으로 강염기 및 빛에 매우 민감하다. 따라서, 이 화합물의 완전성을 보장하기 위해서는 특별한 주의를 기울여야한다. 그럼에도불구하고, 테트라졸륨은 조직 대사 연구에서 중요한 역할을 해왔다. 예를들어, 이런류의 화합물은 세포내의 혐기성 산화 및 환원 반응을 탐지하는데 사용되어 왔다. 더욱이, 이들은 임상 진단법에서 흔히 사용된다. 상기 화합물은 전형적으로 환원제의 존재하에서 환원 반응을 일으켜서 진한 색깔의 포르마잔을 생성하는 흐린 색깔 또는 무색의 화합물이다. 아스코르빈산염, 설프하이드릴 또는 NADH, NADPH 및 PQQH2(환원된 PQQ - 피롤로 - 퀴놀린 퀴논)의 변이물 같은 환원제는 염료를 형성할수 있다.
임상 진단법에서, 이런 염료들은 혐기성 반응하에서, 이들의 모화합물인 NAD(P)+로부터 NAD(P)H가 형성되는 것을 모니터하기에 매우 귀중하다는 것이 밝혀졌다 (참조 예: 1994년 11월 1일에 발행된 미국 특허 제 5,360,595호, D. Bell et al.). 산화환원 반응은 빠르고 산소에 민감하지 않다. 생성된 염료 색깔은 매우 강하고 물에 잘 녹지 않는다.
원칙적으로, 테트라졸륨 염료 전구체는 전혈(whole blood)에서 케톤체 및 글루코스를 측정하기 위하여 사용될수 있다. 그러나, 혈액의 적혈구 내에 헤모글로빈이 포함되지 않으면, 테트라졸륨은 헤모글로빈(Fe(Ⅱ))에의해 비효소적으로 환원되어 유색의 포르마잔을 형성할수 있다. 따라서, 유리 헤모글로빈은 측정에 심각한 간섭을 초래한다. 사실상, 전형적인 케톤체 측정에서, 용혈 및 관심의 대상인 피분석물에 비해 유리 헤모글로빈이 많이 생성됨으로 인해 헤모글로빈으로부터의 간섭 시그날이 목적 시그날을 능가할 수 있다. 특히 정상 농도 이상에서, 글루코스 측정은 역으로 영향을 받지는 않는다. 높은 적혈구용적 샘플에서 또는 헤모글로빈 산화 반응이 더빨리 일어나는 고온에서 반응이 수행되는 경우에는 글루코스 측정에 대한 간섭도 또한 심각하다. 유리 헤모글로빈을 존재하게 하는 적혈구의 용혈은 쉽게 회피될 수 없으므로, 테트라졸륨을 분석용으로 사용하고자 한다면, 시험 전에 샘플로 부터 적혈구를 제거해야만 한다.
적혈구는 멤브레인 및 여과지로 여과하거나, 화학 약품으로 추출하거나 또는 두 방법의 결합에 의해 샘플로부터 제거될 수 있다. 전혈로부터 적혈구를 분리하기 위한 여과법은 비용이 많이 들고 좀 많은 샘플 양을 필요로 한다. 전혈 샘플로부터 적혈구를 제거하기 위하여 여과를 이용하는 혈액 케톤(베타-히드록시부티레이트) 시험의 예는 인디애나주 엘하르트의 GDS 다이아그노스틱스사로부터 구할수 있는 케토사이트R시험이다 (참조; Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd Ed., ed. by C. Burtis et al., W.B. Saunders Co., Philadelphia, PA, 1994, p.974). 이 시험에서 사용되는 "시험 카드"는 두개의 여과층을 가지는데, 이는 카드를 좀 비싸게 만들고 많은 (25㎕) 혈액 샘플을 필요로하게 한다. 더욱이, 혈액은 용혈되지 않아야 된다.
여과 및 화학약품 추출의 결합은 마일즈(Miles)로부터 구할수 있는 에임즈R글루코미터 앙코르™ (AmesRGlucometer Encore™) 혈액 글루코스 스트립에서 이용된다. 이 스트립은 적혈구의 간섭을 제거하기 위하여 여과 물질층 및 응집반응 보조물질(감자 렉틴)을 이용한다 (참조; Chu et al., European Pat. Appl. 0 638 805 A2, publ. Feb. 15, 1995).
헤모글로빈을 메트헤모글로빈으로 산화시키기 위하여 계 내로 산화제를 도입하는 것은 헤모글로빈의 간섭을 줄이는 또다른 방법이다. 페리시안화물이 헤모글로빈을 메트헤모글로빈으로 전환시키는 것으로 공지되어 있으나, 이는 또한 목적 생성물인 NADH를 파괴한다.
본 발명은 헤모글로빈을 함유하는 생체액내의 피분석물의 농도 측정용 시약을 제공한다. 이 시약은 다음을 포함한다:
a) 피분석물에 대해 특이성을 갖는 탈수소효소,
b) 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 (NAD), NAD 유도체, 피롤로-퀴놀린 퀴논 (PQQ) 또는 PQQ 유도체,
c) 테트라졸륨 염료 전구체,
d) 디아포라제 효소 또는 이의 유사물질, 및
e) 아질산염.
본 시약은 특히 피분석물 측정용 건조 시약 스트립을 형성하기 위해 하나 이상의 기질 위에 피복하기에 적합하다. 특히 바람직한 스트립은 다음을 포함한다:
a) 지지층,
b) 지지층 위에,
ⅰ) 피분석물에 대해 특이성을 갖는 탈수소효소,
ⅱ) 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(NAD), NAD 유도체, 피롤로-퀴놀린 퀴논 (PQQ) 또는 PQQ 유도체,
ⅲ) 테트라졸륨 염료 전구체 및
ⅳ) 디아포라제 효소 또는 이의 유사물질을 포함하는 피복물을 가지는 시험 패드, 및
c)시험 패드 위에, 아질산염으로 피복된 흡수성 상층.
본 발명은 피분석물 농도의 척도인 NADH, NAD(P)H 또는 PQQH2같은 보조인자의 환원 형태를 일정 농도로 생성시켜, 헤모글로빈을 함유하는 생체액(예: 전혈)내의 피분석물 농도 측정용 시약을 제공하는 것이다. 시약에 아질산염을 포함시키는 것은 환원된 보조인자 농도 측정에 헤모글로빈이 간섭하는 것을 극복하게 한다. 이는 비제한적으로 케톤체 및 글루코스의 측정에 특히 유용하다.
도 1은 본 발명의 시험 스트립의 투시도이다.
도 2는 본 발명의 또다른 시험 스트립의 조립도이다.
도 3은 본 발명의 또다른 시험 스트립의 조립도이다.
도 4는 본 발명의 케톤 분석 화학을 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명의 글루코스 분석 화학을 나타낸 그림이다.
도 6은 케톤 분석에 대한 헤모글로빈 억제제로서의 아질산염의 영향을 나타낸 그래프이다.
도 7은 글루코스 분석에 대한 헤모글로빈 억제제로서의 아질산염의 영향을 나타낸 그래프이다.
도 1은 지지체 14 위에 부착된 시험 패드 12로 이루어진 본 발명의 전형적인 시험 스트립 10을 나타낸다. 지지체는 - 예를들어, 폴리스티렌, 나일론 또는 폴리에스테르 같은 - 합성수지, 금속성 시트 또는 당업계에 공지된 어떤 다른 적당한 재료일수 있다. 시험 패드는 피분석물과 반응하여 색깔 변화를 일으키는 시약으로 피복된다. 시험 패드는 바람직하게는 여과지 또는 폴리머 멤브레인 같은 흡수성 재료를 포함한다. 그러나, 반응은 산소를 필요로하지 않으므로, 시험 패드는 합성수지 필름 같은 비흡수성 재료일 수 있다. 시약은 피분석물에 특이한 효소, 수소화물 전달제, 테트라졸륨 염료 전구체, 적당한 효소 보조인자 및 헤모글로빈 억제제를 포함한다. 임의적으로, 완충제 및 안정제가 더 큰 안정성을 위하여 포함된다.
도 2에서 보듯이, 시험 스트립은 또한 시험 패드 12 위에 상층 16을 가진 다층 구조일 수 있다. 이 구조에서, 시약은 두 층 사이로 나뉠 수 있다. 예를들어, 헤모글로빈 억제제는 임의적인 상층 16 위에 피복될수 있고 시약의 나머지는 시험패드 12위에 피복될 수 있다. 바람직하게는, 상층 16은 흡수성이고 전개층(spreading layer) 및 과잉 샘플을 흡수하는 흡수층으로서 작용한다. 샘플은 상층 16에 놓여져서 시험 패드 12를 통과한다. 피분석물 농도는 지지층 14를 통한 색깔 변화를 측정하거나, 또는 층 14의 인접한 반응 부위가 투명하지 않은 경우에 임의적인 윈도우나 통과 홀(through-hole) 18을 통한 색깔 변화를 측정함으로써 결정된다.
도 3에 나타낸 또다른 양태에서, 스페이서 20은 상층 16과 시험 패드 12를 분리한다. 스페이서 20은 바람직하게는 두 면 위에 접착 피복물을 갖는 (나타나 있지 않음) 비흡수성 합성수지 필름이다. 스페이서 20 내의 홈 22는 샘플이 입구 24로부터 측정 부위 26으로 흘러가는 모세관 통로를 제공한다. 흐름은 시험 패드 12의 표면과 인접층 또는 달리, 임의적인 구멍 18 사이의 공기 배출에 의존한다. 측정 부위 26에서의 색깔 변화는 임의적인 구멍/윈도우 18을 통해 모니터한다. 시약은 모두 시험 패드 12 위에 있거나, 달리 시험 패드와 비흡수층 14 및 16 중의 하나 또는 모두의 사이에서 나뉠수 있다. 따라서, 시약의 첫 부분은 시험 패드 위에 있고 시약의 두번째 부분은 비흡수층 중의 하나 또는 모두 위에 있을수 있다. 본 출원인이 시약을 "피복물" 또는 층 "위에"라고 말할때, 본 출원인은 시약이 층 내로 흡수될 가능성을 포함하고자 하는데, 특히 층이 흡수성인 경우에 그러하다.
본 발명으로 분석하기에 적합한 효소 및 상응하는 피분석물은 다음과 같다: 알코올용 알코올 탈수소효소, 포름알데히드용 포름알데히드 탈수소효소, 글루코스용 글루코스 탈수소효소, 글루코스-6-포스페이트용 글루코스-6-포스페이트 탈수소효소, 글루탐산용 글루타메이트 탈수소효소, 글리세롤용 글리세롤 탈수소효소, 베타-히드록시부티레이트용 베타-히드록시부티레이트 탈수소효소, 스테로이드용 히드록시스테로이드 탈수소효소, L-락테이트용 L-락테이트 탈수소효소, 루신용 루신 탈수소효소, 말산용 말레이트탈수소효소 및 피루브산용 피루베이트 탈수소효소.
적합한 효소 보조인자는 효소를 활성화하기 위하여 필요하다. 효소에 따라, 다음의 보조인자가 사용될 수 있다: 베타-니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(베타-NAD), 베타-니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트(베타-NADP), 티오니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드, 티오니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트, 니코틴아미드 1,N6-에테노아데닌 디뉴클레오티드, 니코틴아미드 1,N6-에테노아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트 및 피롤로-퀴놀린 퀴논 (PQQ). 효소의 존재하에, 피분석물은 보조인자를 환원시킨다.
염료-형성 과정에서 다음 단계는 환원된 보조인자로부터의 수소화물 추출이다. 이는 리포익 디하이드로지네이즈, 페레독신-NADP 환원효소, 리포아미드 탈수소효소 같은 디아포라제, 또는 페나진 메토설페이트 (PMS) 또는 멜돌라 블루 같은 유사물질에 의해 성취될 수 있다. 반응속도 및 안정성은 수소화물 전달제(transfer agent) 또는 "추출제(abstractor)"를 선택하기 위한 첫번째 요소이다. 예를들어, PMS는 보편적인 수소화물 추출제인데, 이는 PMS가 아래에 열거된 대부분의 테트라졸륨 화합물과 비교적 빠른 반응을 하기 때문이다. 이런 이유로,보조인자가 PQQ인 경우가 바람직하다. 그러나, PMS는 효소에 기초한 수소화물 추출제 보다 더 빛에 민감하다. 디아포라제는 좀더 안정하며, 이런 이유로 보조인자가 NAD인 경우가 바람직하다.
포획된 수소화물은 테트라졸륨 화합물(염료 전구체)에 전달되어 유색의 포르마잔을 형성한다. 이 고안에 가장 적합한 테트라졸륨 화합물은 다음과 같다: 2-(2′벤조티아졸릴)-5-스티릴-3-(4′-프탈히드라지딜) 테트라졸륨 (BSPT), 2-벤조티아졸릴-(2)-3,5-디페닐 테트라졸륨 (BTDP), 2,3-디(4-니트로페닐) 테트라졸륨 (DNP), 2,5-디페닐-3-(4-스티릴페닐) 테트라졸륨 (DPSP), 디스티릴 니트로블루 테트라졸륨 (DS-NBT), 3,3′-[3,3′-디메톡시-(1,1′-비페닐)-4,4′-디일]-비스[2-(4-니트로페닐)-5-페닐(-2H 테트라졸륨 (NBT), 3-(4,5-디메틸-2-티아졸릴)-2,5-디페닐-2H 테트라졸륨 (MTT), 2-페닐-3-(4-카복시페닐)-5-메틸 테트라졸륨 (PCPM), 테트라졸륨 블루(TB), 티오카바밀 니트로블루 테트라졸륨 (TCNBT), 테트라니트로블루 테트라졸륨 (TNBT), 테트라졸륨 바이올렛 (TV), 2-벤조티아조티아졸릴-3-(4-카복시-2-메톡시페닐)-5-[4-(2-설포에틸카바모일)페닐]-2H-테트라졸륨 (WST-4) 및 2,2′-디벤조티아졸릴-5,5′-비스[4-디(2-설포에틸)카바모일페닐]-3,3′-(3,3′-디메톡시-4,4′-비페닐렌)디테트라졸륨, 이나트륨염(WST-5). WST-5가 바람직한데, 이는 생체 샘플과 가장 조화를 이루는 수성 매질에 쉽게 용해되기 때문이다. 더욱이, 생성된 포르마잔 화합물은 자주색-푸른색 부위에서 강한 스펙트럼 흡수를 나타내고, 따라서 헤모글로빈으로부터의 배경 시그날을 교정할 필요성을 감소시킨다.
마지막으로, 헤모글로빈 억제제가 시약내에 존재하여 헤모글로빈과 테트라졸륨 화합물 사이의 바람직하지 못한 염료-형성 반응을 줄인다. 헤모글로빈 억제제의 역할은 헤모글로빈을 메트헤모글로빈으로 산화시키는 것인데, 메트헤모글로빈은 테트라졸륨이나 포르마잔과 반응하지 않는다. 놀랍게도, 아질산 나트륨, 아질산 칼륨 및 이의 유도체 같은 아질산염은 헤모글로빈을 억제하는데 매우 효과적이지만, 한편 환원된 보조인자(예: NADH 또는 PQQH2)를 파괴하지는 않는다. 아질산염은 고온에서 그리고 높은 적혈구용적 샘플로도 또한 효과적이다. 아질산 나트륨은 물에 잘 녹고,독성이 없으며, 비교적 저렴하기 때문에 바람직하다.
본발명의 시약은 쿠베트 내와 같은 습식 화학 방식에서 사용될수 있지만, 바람직한 양태에서 본 발명은 전혈 내의 베타-히드록시부티레이트 또는 글루코스 분석용 건조 스트립을 제공한다. 스트립은 멤브레인 시험 패드(membrane test pad),바람직하게는 나일론으로 이루어지는데, 이는 지지체와 상층 사이에 놓여진다. 지지체는 바람직하게는 폴리에스테르 시트이다. 상층은 당업계에 공지된 흡수성 물질일 수 있다. 바람직한 물질은 조지아주 페어번의 포렉스사로부터 구입할 수 있는 메틸 올레오일 타우레이트 나트륨으로 처리된 다공성 폴리에틸렌이다. 본 출원인은 이물질을 "포렉스(Porex)"라고 부른다. 시험 패드는 베타-히드록시부티레이트 탈수소효소(또는 글루코스 탈수소효소), NAD (또는 PQQ), 디아포라제(또는 PMS) 및 WST-5(표 1(또는 3), 하기)를 포함하는 시약을 포함한다. 포렉스 상층은 아질산염 시약을 포함한다(표 2).
작동에 있어서, 사용자는 포렉스 상층의 윗쪽 표면에 전혈 한방울을 떨어뜨린다. 전혈 또는 용혈된 혈액이 포렉스와 접촉하게 되면, 아질산 나트륨이 재구성되어 유리 헤모글로빈과 반응함으로써 헤모글로빈이 분석에 해를 끼치지 않도록한다. 생성된, 실질적으로 헤모글로빈이 없는 샘플은 모세관력 또는 중력에 의해 시험 패드 아래로 전달된다. 시험 패드 위에서,샘플은 연속반응을 시작하여 유색염료를 생성시키는데, 이 유색염료의 농도는 샘플 내의 피분석물의 농도에 비례하고 포토메터로 직접 측정될 수 있다. 도 4는 효소, NAD 및 디아포라제를 사용한 베타-히드록시부티레이트에 대한 반응을 나타낸다. 도 5는 효소, PQQ 및 PMS를 사용한 글루코스에 대한 반응을 나타낸다.
도 6은 모두 55%의 적혈구용적을 갖고 0 및 15 ㎎/㎗의 베타-히드록시부티레이트를 포함하며, 아질산염을 포함하거나 포함하지 않는 혈액 샘플의 시간에 따른 광밀도 변화를 나타낸다. NAD 계가 사용되었으며, 아질산염 농도는 5 g/㎗ 이었다. 아질산염의 부재하에, 헤모글로빈은 테트라졸륨을 환원하여 계속 염료 농도를 증가시키는데 이에 상응하여 광밀도가 증가한다. 헤모글로빈을 제거함으로써 (산화에 의해), 아질산염은 색깔 형성을 오직 샘플 내의 케톤체 (즉, 베타-히드록시부티레이트)로부터 유래한 것으로 제한한다. 그래프에 나타낸 데이타를 생성시키기 위해 사용된 스트립의 제조가 하기 실시예 1에 기술되어 있다.
도 7은 글루코스/PQQ 계에서 색깔-형성 반응에 대한 아질산염의 효과를 나타낸다. 혈액 샘플은 모두 60%의 적혈구용적을 갖고, 0 또는 100mg/㎗의 글루코스 및 0 또는 5 g/㎗의 아질산염을 포함했다. 글루코스가 없는 샘플을 35℃에서 반응시켰다.
그래프는 본 계가 35℃ 까지의 온도 및 60% 까지의 적혈구용적에서 효과적임을 나타낸다. 사용된 스트립의 제조는 하기 실시예 2에 기술되어 있다.
하기 실시예는 본 발명의 바람직한 양태를 설명한다. 실시예 1에서,피분석물은 베타-히드록시부티레이트이고 효소는 베타-히드록시부티레이트 탈수소효소 이다. 실시예 2에서, 피분석물은 글루코스이고 효소는 글루코스 탈수소효소이다. 본 조성물은 응용을 위해서 앞에 열거된 다른 피분석물-효소 결합으로 쉽게 변형될 수 있다(참조 예: Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd Ed.,ed. by C. Burtis et al., W.B. Saunders Co., Philadelphia, PA,1994, pp 976-978 & 1174-1175). 실시예는 어떤 방법으로든지 제한을 의도한 것은 아니다.
실시예 1
쿠노사(Cuno, Meriden, CT,USA)로부터 구입한 0.8㎛ 나일론 멤브레인을 표 1의 시약에 포화될 때까지 담갔다. 과량의 시약을 유리 막대로 부드럽게 제거했다. 생성된 멤브레인을 56℃ 오븐에서 10분간 건조시켰다. 포렉스(0.6 mm 두께)를 표 2의 아질산염 용액에 담근후에 100℃ 오븐에서 10 시간 동안 매달아 건조시켰다. 마지막으로, 멤브레인을 폴리에스테르 스톡(델라웨어주 윌밍톤 ICI America로부터 구입한 0.4 mm MelenexRpolyester) 및 아질산염을 침투시킨 포렉스 사이에 두었다.
실시예 2
첫번째 침액이 표 3의 시약인 것을 제외하고 실시예 1의 과정을 반복했다.
케톤체 시험 패드용 시약
성분 양
물 100 ml
트리스(히드록시메틸) 아미노메탄 (분자량 121, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) (6M HCl을 가해서 pH를 8.5로 조정했다) 1.2 gm
염화 나트륨 (분자량 56.44, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 560 mg
염화 마그네슘 (분자량 203, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마 ) 2.5 gm
PSSA, 폴리스티렌술폰산, 나트륨염 (분자량 70,000,미국 펜실베니아주 워링톤 폴리사이언시즈사) 3 gm
크로테인( 미국 뉴저지주 파시패니 크로다사) 3 gm
옥삼산, 나트륨염 (분자량 111.03, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 250 mg
테트로닉 1307 (미국 뉴저지주 마운트 올리브 BASF사) 2 gm
수크로스 ( 분자량 342.30, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 5 gm
NAD (분자량 663.4, N-7004, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 450 mg
D-3-히드록시부티레이트탈수소효소 (출처: 일본 토요보,Pseudomonas sp.,HBD-301,125 U/mg) 50,000 U
디아포라제(출처: 일본 토요보, B.Stearothermophilus, New, 1033 U/㎎) 340890 U
WST-5 (분자량 1331.37,일본 도진도) 1.8 gm
아질산염 시약
성분 양
10 mM 인산염 완충 식염수, pH 7.4, (P-3813, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 70 ml
에탄올 30 ml
아질산 나트륨 (분자량69, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 5 gm
폴리비닐피로딘 (분자량 40,000, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 200 mg
옥삼산, 나트륨염 (분자량 111,03, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 500 mg
글루코스 시험 패드용 시약
성분 양
물 100 ml
트리스(히드록시메틸)아미노메탄 ( 분자량 121, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) (6 M HCl을 가해 pH를 7.4로 조정) 1.2 gm
염화 나트륨 (분자량 56.44, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 560 mg
염화 마그네슘 (분자량 203, 미국 몬타나주 세인트루이스 시그마) 2.5 gm
PSSA, 폴리스티렌술폰산, 나트륨염 (분자량 70,000, 미국 펜실베니아주 워링톤 폴리사이언시즈사) 3 gm
크로테인 (미국 뉴저지주 파시패니 크로다사) 3 gm
옥삼산, 나트륨염 (분자량 111.03, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 250 mg
테트로닉 1307 (미국 뉴저지주 마운트 올리브 BASF사) 2 gm
수크로스(분자량 342.30, 미국 위스콘신주 밀워키 알드리히 케미칼스) 5 gm
PQQ (분자량 330,64682,플루카) 100㎎
글루코스 탈수소효소(291 U/㎎, 일본 토요보) 29100 U
페나진 메토설페이트 (분자량 306.34) 4 mg
WST-5(분자량 1331.37, 일본 도진도) 3.2 gm
본 발명으로 피분석물 농도의 척도인 NADH, NAD(P)H 또는 PQQH2같은 보조인자의 환원 형태를 일정 농도로 생성시켜, 헤모글로빈을 함유하는 생체액(예: 전혈)내의 피분석물 농도 측정용 시약을 제공할수 있다. 시약에 아질산염을 포함시켜 환원된 보조인자 농도 측정에 헤모글로빈이 간섭하는 것을 극복할 수 있다. 이는 비제한적으로 케톤체 및 글루코스의 측정에 특히 유용하다.

Claims (10)

  1. a) 피분석물에 대해 특이성을 갖는 탈수소효소,
    b) 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 (NAD), NAD 유도체, 피롤로-퀴놀린 퀴논 (PQQ) 또는 PQQ 유도체,
    c) 테트라졸륨 염료 전구체,
    d) 디아포라제 또는 이의 유사물질 및
    e) 아질산염을 포함하는, 헤모글로빈을 함유하는 생체액 내의 피분석물의 농도를 측정하기 위한 시약.
  2. 제 1항에 있어서, 피분석물이 베타-히드록시부티레이트이고 효소가 베타-히드록시부티레이트 탈수소효소인 시약.
  3. 제 1항에 있어서, 피분석물이 글루코스이고 효소가 글루코스 탈수소효소인 시약.
  4. 지지층 위에 제 1항의 시약의 피복물을 갖는 시험 패드가 있는 지지층을 포함하는, 헤모글로빈을 함유하는 생체액 내의 피분석물의 존재 및 양을 측정하기 위한 건조 시약 스트립.
  5. 제 1항의 시약의 첫번째 부분은 시험 패드 위에 있고 상기 시약의 두번째 부분은 지지층 및 상층 또는 두층 중의 한층 위에 있으며, 그 위에 시험 패드를 갖는 지지층 및 시험 패드를 덮어씌운 상층을 포함하는, 헤모글로빈을 함유하는 생체액 내의 피분석물의 존재 및 양을 측정하기 위한 건조 시약 스트립.
  6. 제 5항에 있어서, 상층 및 패드 사이에 모세관 통로를 제공하기 위하여 상층 및 시험 패드 사이에 스페이서 및 홈을 추가로 포함하는 스트립.
  7. 제 5항에 있어서,피분석물이 베타-히드록시부티레이트이고 효소가 베타-히드록시부티레이트 탈수소효소인 스트립.
  8. 제 5항에 있어서, 피분석물이 글루코스이고 효소가 글루코스 탈수소효소인 스트립.
  9. 제 5항에 있어서, 테트라졸륨 염료 전구체가 2,2'-디벤조티아졸릴-5,5'-비스[4-디(2-설포에틸)카바모일페닐]-3,3'-(3,3'-디메톡시-4,4'-비페닐렌)디테트라졸륨, 이나트륨염 (WST-5)인 스트립.
  10. a) 지지층,
    b) 지지층 위에,
    ⅰ) 피분석물에 대해 특이성을 갖는 탈수소효소,
    ii) 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 (NAD), NAD 유도체, 피롤로-퀴놀 린 퀴논 (PQQ) 또는 PQQ 유도체,
    iii) 테트라졸륨 염료 전구체, 및
    iv) 디아포라제 또는 이의 유사물질을 포함하는 피복물을 갖는 시험 패드, 및
    c) 시험 패드 위에, 아질산염으로 피복된 흡수성 상층을 포함하는, 헤모글로빈을 함유하는 생체액 내의 피분석물의 존재 및 양을 측정하기 위한 건조 시약 시험 스트립.
KR1019990016786A 1998-09-28 1999-05-11 테트라졸륨 화합물에 기초한 진단법 KR20000022630A (ko)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/161,876 US5902731A (en) 1998-09-28 1998-09-28 Diagnostics based on tetrazolium compounds
US9/161,876 1998-09-28
US09/282,083 US6200773B1 (en) 1998-09-28 1999-03-30 Diagnostics based on tetrazolium compounds
US9/282,083 1999-03-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20000022630A true KR20000022630A (ko) 2000-04-25

Family

ID=22583150

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019990009381A KR100570909B1 (ko) 1998-09-28 1999-03-19 테트라졸륨 화합물계 진단제
KR1019990016786A KR20000022630A (ko) 1998-09-28 1999-05-11 테트라졸륨 화합물에 기초한 진단법

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019990009381A KR100570909B1 (ko) 1998-09-28 1999-03-19 테트라졸륨 화합물계 진단제

Country Status (22)

Country Link
US (2) US5902731A (ko)
EP (2) EP0990705B1 (ko)
JP (2) JP2000093198A (ko)
KR (2) KR100570909B1 (ko)
CN (2) CN1155829C (ko)
AR (2) AR014718A1 (ko)
AT (2) ATE222961T1 (ko)
AU (2) AU754321B2 (ko)
BR (2) BR9901186A (ko)
CA (2) CA2265201A1 (ko)
DE (2) DE69902612T2 (ko)
DK (2) DK0990705T3 (ko)
ES (2) ES2183481T3 (ko)
HK (1) HK1026001A1 (ko)
IL (2) IL128905A (ko)
MY (2) MY117657A (ko)
NO (2) NO991185L (ko)
PT (2) PT990705E (ko)
RU (2) RU2225004C2 (ko)
SG (1) SG82610A1 (ko)
TW (2) TW558638B (ko)
ZA (2) ZA991906B (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102079783B1 (ko) * 2019-07-03 2020-02-21 주식회사 원드롭 생체 물질을 측정하기 위한 스트립

Families Citing this family (128)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6335203B1 (en) * 1994-09-08 2002-01-01 Lifescan, Inc. Optically readable strip for analyte detection having on-strip orientation index
US8071384B2 (en) 1997-12-22 2011-12-06 Roche Diagnostics Operations, Inc. Control and calibration solutions and methods for their use
US6391005B1 (en) 1998-03-30 2002-05-21 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth
US6656697B1 (en) * 1998-09-28 2003-12-02 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
US5902731A (en) * 1998-09-28 1999-05-11 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
US20050103624A1 (en) * 1999-10-04 2005-05-19 Bhullar Raghbir S. Biosensor and method of making
PL357180A1 (en) * 2000-03-28 2004-07-26 Lifescan, Inc. Reagent systems for detecting the presence of a reduced cofactor in a sample and methods for using the same
US6420128B1 (en) * 2000-09-12 2002-07-16 Lifescan, Inc. Test strips for detecting the presence of a reduced cofactor in a sample and method for using the same
EP1329721B8 (en) * 2000-09-28 2010-05-26 ARKRAY, Inc. Method of quantifying hemoglobin and method of measuring glycation ratio of hemoglobin
US8641644B2 (en) 2000-11-21 2014-02-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means
US6891685B2 (en) * 2001-05-17 2005-05-10 Sioptical, Inc. Anisotropic etching of optical components
ES2336081T3 (es) 2001-06-12 2010-04-08 Pelikan Technologies Inc. Dispositivo de puncion de auto-optimizacion con medios de adaptacion a variaciones temporales en las propiedades cutaneas.
DE60238119D1 (de) 2001-06-12 2010-12-09 Pelikan Technologies Inc Elektrisches betätigungselement für eine lanzette
US7025774B2 (en) 2001-06-12 2006-04-11 Pelikan Technologies, Inc. Tissue penetration device
US9226699B2 (en) 2002-04-19 2016-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface
US9795747B2 (en) 2010-06-02 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Methods and apparatus for lancet actuation
US7981056B2 (en) 2002-04-19 2011-07-19 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US9427532B2 (en) 2001-06-12 2016-08-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
WO2002100254A2 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet launching device integrated onto a blood-sampling cartridge
US8337419B2 (en) 2002-04-19 2012-12-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
DE60237463D1 (de) * 2001-11-16 2010-10-07 Roche Diagnostics Gmbh Flexibler sensor und herstellungsverfahren
US6586199B2 (en) * 2001-11-20 2003-07-01 Lifescan, Inc. Stabilized tetrazolium reagent compositions and methods for using the same
US6939685B2 (en) 2001-11-20 2005-09-06 Lifescan, Inc. Stabilized tetrazolium phenazine reagent compositions and methods for using the same
US6762035B1 (en) * 2002-02-04 2004-07-13 Surendra K. Gupta Method and test strips for the measurement of fat loss during weight loss programs
GB0204232D0 (en) * 2002-02-22 2002-04-10 Isis Innovation Assay
US6703216B2 (en) 2002-03-14 2004-03-09 The Regents Of The University Of California Methods, compositions and apparatuses for detection of gamma-hydroxybutyric acid (GHB)
WO2003079890A1 (en) * 2002-03-26 2003-10-02 Piet Moerman A method and apparatus for quantifying caloric balance using metabolic parameters to assist subjects on weight management
US7547287B2 (en) 2002-04-19 2009-06-16 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8221334B2 (en) 2002-04-19 2012-07-17 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8372016B2 (en) 2002-04-19 2013-02-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7892183B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7674232B2 (en) 2002-04-19 2010-03-09 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7976476B2 (en) 2002-04-19 2011-07-12 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7708701B2 (en) 2002-04-19 2010-05-04 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device
US7232451B2 (en) 2002-04-19 2007-06-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US9248267B2 (en) 2002-04-19 2016-02-02 Sanofi-Aventis Deustchland Gmbh Tissue penetration device
US7331931B2 (en) 2002-04-19 2008-02-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8267870B2 (en) 2002-04-19 2012-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation
US7229458B2 (en) 2002-04-19 2007-06-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7901362B2 (en) 2002-04-19 2011-03-08 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7297122B2 (en) 2002-04-19 2007-11-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US9314194B2 (en) 2002-04-19 2016-04-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US8360992B2 (en) 2002-04-19 2013-01-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7909778B2 (en) 2002-04-19 2011-03-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8702624B2 (en) 2006-09-29 2014-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Analyte measurement device with a single shot actuator
US8784335B2 (en) 2002-04-19 2014-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling device with a capacitive sensor
US7175642B2 (en) 2002-04-19 2007-02-13 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US8579831B2 (en) 2002-04-19 2013-11-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US9795334B2 (en) 2002-04-19 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7491178B2 (en) 2002-04-19 2009-02-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
ATE420367T1 (de) * 2002-06-07 2009-01-15 Arkray Inc Testverfahren mit einer oxidations- /reduktionsreaktion mit formazan
US7354732B2 (en) * 2002-06-14 2008-04-08 Arkray, Inc. Method of assay with sulfonic acid compound and nitro compound
JP3973160B2 (ja) * 2002-07-17 2007-09-12 アークレイ株式会社 スルホン酸化合物を用いたタンパク質の分解方法
US8574895B2 (en) 2002-12-30 2013-11-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels
US20040148942A1 (en) * 2003-01-31 2004-08-05 Capstone Turbine Corporation Method for catalytic combustion in a gas- turbine engine, and applications thereof
CN1756834B (zh) * 2003-02-24 2010-05-26 比南股份有限公司 干式化学、侧向流动重建流的层析酶驱动测定
US20040241779A1 (en) * 2003-02-24 2004-12-02 Piasio Roger N. Dry chemistry, lateral flow-reconstituted chromatographic enzyme-driven assays
US20040214345A1 (en) * 2003-04-23 2004-10-28 Matzinger David P. Ambidextrous capillary-filled test strip
US20040219691A1 (en) * 2003-04-29 2004-11-04 Shartle Robert J. Test strip with clear base support layer for visual perception of a liquid sample during application
ATE476137T1 (de) 2003-05-30 2010-08-15 Pelikan Technologies Inc Verfahren und vorrichtung zur injektion von flüssigkeit
DK1633235T3 (da) 2003-06-06 2014-08-18 Sanofi Aventis Deutschland Apparat til udtagelse af legemsvæskeprøver og detektering af analyt
WO2006001797A1 (en) 2004-06-14 2006-01-05 Pelikan Technologies, Inc. Low pain penetrating
US7645373B2 (en) 2003-06-20 2010-01-12 Roche Diagnostic Operations, Inc. System and method for coding information on a biosensor test strip
CA2529657C (en) 2003-06-20 2011-04-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Test strip with slot vent opening
US8148164B2 (en) 2003-06-20 2012-04-03 Roche Diagnostics Operations, Inc. System and method for determining the concentration of an analyte in a sample fluid
US8206565B2 (en) 2003-06-20 2012-06-26 Roche Diagnostics Operation, Inc. System and method for coding information on a biosensor test strip
US8058077B2 (en) 2003-06-20 2011-11-15 Roche Diagnostics Operations, Inc. Method for coding information on a biosensor test strip
US7718439B2 (en) 2003-06-20 2010-05-18 Roche Diagnostics Operations, Inc. System and method for coding information on a biosensor test strip
US7452457B2 (en) 2003-06-20 2008-11-18 Roche Diagnostics Operations, Inc. System and method for analyte measurement using dose sufficiency electrodes
US8071030B2 (en) * 2003-06-20 2011-12-06 Roche Diagnostics Operations, Inc. Test strip with flared sample receiving chamber
US8679853B2 (en) * 2003-06-20 2014-03-25 Roche Diagnostics Operations, Inc. Biosensor with laser-sealed capillary space and method of making
US7488601B2 (en) 2003-06-20 2009-02-10 Roche Diagnostic Operations, Inc. System and method for determining an abused sensor during analyte measurement
US7645421B2 (en) 2003-06-20 2010-01-12 Roche Diagnostics Operations, Inc. System and method for coding information on a biosensor test strip
EP1671096A4 (en) 2003-09-29 2009-09-16 Pelikan Technologies Inc METHOD AND APPARATUS FOR PROVIDING IMPROVED SAMPLE CAPTURING DEVICE
EP1680014A4 (en) 2003-10-14 2009-01-21 Pelikan Technologies Inc METHOD AND APPARATUS PROVIDING A VARIABLE USER INTERFACE
US7822454B1 (en) 2005-01-03 2010-10-26 Pelikan Technologies, Inc. Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration
EP1706026B1 (en) 2003-12-31 2017-03-01 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture
RU2006132051A (ru) 2004-02-06 2008-03-20 БАЙЕР ХЕЛТКЭР ЭлЭлСи (US) Окисляемые соединения в качестве внутреннего стандарта для биосенсоров и способ их применения
JP2005257354A (ja) * 2004-03-10 2005-09-22 Fuji Photo Film Co Ltd 一体型マイクロケミカルデバイス
US8828203B2 (en) 2004-05-20 2014-09-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Printable hydrogels for biosensors
US9775553B2 (en) 2004-06-03 2017-10-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
WO2005120365A1 (en) 2004-06-03 2005-12-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a fluid sampling device
US7569126B2 (en) 2004-06-18 2009-08-04 Roche Diagnostics Operations, Inc. System and method for quality assurance of a biosensor test strip
US20060024835A1 (en) 2004-07-30 2006-02-02 Matzinger David P Analytical test strip with control zone
US8080423B2 (en) * 2004-08-05 2011-12-20 Asahi Kasei Pharma Corporation Reagent containing protease reaction promoter and/or colorant stabilizer
WO2006023927A1 (en) * 2004-08-24 2006-03-02 Bayer Healthcare Llc Method for determining the concentration of analytes in samples by direct mediation of enzymes
CA2590944C (en) 2004-12-13 2016-02-02 Bayer Healthcare Llc Size self-limiting compositions and test devices for measuring analytes in biological fluids
WO2006064488A1 (en) * 2004-12-17 2006-06-22 Megazyme Ip Limited A kit for colorimetric assays of food and beverage analytes
US8652831B2 (en) 2004-12-30 2014-02-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte measurement test time
TW200642655A (en) * 2005-02-01 2006-12-16 Bayer Healthcare Llc Sensor and package
EP1741869A1 (en) 2005-07-08 2007-01-10 Cuhadaroglu Metal Sanayi Ve Pazarlama A.S. Doors, windows, curtain walls composed of high thermal insulated, wooden-aluminium composite profiles, and production method thereof
AR054851A1 (es) 2005-07-20 2007-07-18 Bayer Healthcare Llc Amperometria regulada
US8404100B2 (en) 2005-09-30 2013-03-26 Bayer Healthcare Llc Gated voltammetry
DE102006002165A1 (de) * 2006-01-17 2007-07-19 Merck Patent Gmbh Verfahren und Mittel zur enzymatischen Bestimmung von Acetat
AU2007207242B2 (en) 2006-01-19 2012-08-02 Lattec I/S Dry stick device and method for determining an analyte in a sample
AU2007207241B2 (en) 2006-01-19 2012-07-26 Lattec I/S A novel dry stick device construction and method for determining an analyte in a sample using said dry stick device
US7531319B2 (en) * 2006-08-31 2009-05-12 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Array for rapid detection of a microorganism
CN1996009B (zh) 2007-01-10 2010-05-19 博奥生物有限公司 一种用于多样品分析的微流体器件和使用方法
JP4697809B2 (ja) * 2007-02-22 2011-06-08 旭化成ファーマ株式会社 ロイコ色素の安定化方法
US20080297169A1 (en) * 2007-05-31 2008-12-04 Greenquist Alfred C Particle Fraction Determination of A Sample
WO2009076302A1 (en) 2007-12-10 2009-06-18 Bayer Healthcare Llc Control markers for auto-detection of control solution and methods of use
US20090219509A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Hiroshi Nomura Optical sensor with enhanced reflectance
US8008068B2 (en) * 2008-02-29 2011-08-30 Light Pointe Medical, Inc. Nonhemolytic optical sensor with enhanced reflectance
US8008037B2 (en) 2008-03-27 2011-08-30 Roche Diagnostics Operations, Inc. Matrix composition with alkylphenazine quaternary salt and a nitrosoaniline
WO2009126900A1 (en) 2008-04-11 2009-10-15 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for analyte detecting device
EP2295969B1 (en) * 2008-07-04 2016-05-18 Sekisui Medical Co., Ltd. Method for enhancing sensitivity or method for avoiding influence of hemoglobin in immunological measurement
US9375169B2 (en) 2009-01-30 2016-06-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system
AU2009347569A1 (en) * 2009-06-08 2011-12-15 Protea Biopharma N.V. Methods and kits for detecting, diagnosing and monitoring diseases
CN101865853B (zh) * 2010-03-16 2012-06-27 苏州市玮琪生物科技有限公司 一种稳定化的β-羟丁酸检测试纸及其制备方法
US8965476B2 (en) 2010-04-16 2015-02-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
CN103842523A (zh) * 2011-07-22 2014-06-04 阿赛斯生物股份有限公司 用于改善的侧向流动测定法的单一垫条及使用其的测试装置
CN102520198A (zh) * 2011-11-21 2012-06-27 宁波美康生物科技股份有限公司 乙醇浓度检测试剂盒及其制备方法
CN102520150A (zh) * 2011-12-08 2012-06-27 上海高丰医疗电器有限公司 一种伽马-羟基丁酸的测定诊断试纸及其制备方法
EP2636750A1 (en) * 2012-03-06 2013-09-11 Roche Diagniostics GmbH Compatible solute ectoine as well as derivatives thereof for enzyme stabilization
CN102636651A (zh) * 2012-04-06 2012-08-15 上海领潮生物科技有限公司 多项心肌标志物并行检测方法及系统、芯片试纸
US8921061B2 (en) * 2012-11-02 2014-12-30 Roche Diagnostics Operations, Inc. Reagent materials and associated test elements
US8920628B2 (en) * 2012-11-02 2014-12-30 Roche Diagnostics Operations, Inc. Systems and methods for multiple analyte analysis
WO2014087255A2 (en) * 2012-11-21 2014-06-12 Oslo Universitetssykehus Hf Systems and methods for monitoring biological fluids
US9121050B2 (en) 2013-03-15 2015-09-01 American Sterilizer Company Non-enzyme based detection method for electronic monitoring of biological indicator
US8858884B2 (en) 2013-03-15 2014-10-14 American Sterilizer Company Coupled enzyme-based method for electronic monitoring of biological indicator
CN104730230B (zh) * 2013-12-23 2016-08-17 上海复星医药（集团）股份有限公司 D-3-羟丁酸酶法检测试剂盒及其制备方法
JP6998658B2 (ja) * 2014-04-17 2022-01-18 ユニバーシティ オブ メリーランド， カレッジ パーク アミノ酸代謝異常の検出のためのデバイス、及びデバイスを使用する方法
EP3172570A4 (en) 2014-07-25 2017-12-27 Becton, Dickinson and Company Analyte test strip assays, and test strips and kits for use in practicing the same
JP6815335B2 (ja) 2016-02-04 2021-01-20 テルモ株式会社 血糖値測定試薬、血糖値測定チップ、及び血糖値測定装置セット
DK3423591T3 (da) * 2016-03-04 2024-01-29 Abbott Diabetes Care Inc NAD(P)-afhængige sensitive enzymer, elektroder og sensorer og fremgangsmåder til fremstilling og anvendelse deraf
KR101974645B1 (ko) * 2016-12-02 2019-05-02 에스디 바이오센서 주식회사 전체-헤모글로빈 및 포도당-6-인산 탈수소효소 동시 측정용 스트립, 그 제조방법 및 그 응용
CN108745429B (zh) * 2018-06-12 2023-11-24 南京岚煜生物科技有限公司 一种多通道快速检测微流体检测芯片
US11808708B2 (en) 2020-08-12 2023-11-07 F.A.T. Stats LLC Method for maintaining the health of a diabetic patient by preventing the occurrence of diabetic ketoacidosis

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62175197A (ja) * 1986-01-29 1987-07-31 Takara Shuzo Co Ltd Ｌ−フコ−スの定量方法
EP0239990A2 (en) * 1986-04-01 1987-10-07 Konica Corporation Analytical element
US4803158A (en) * 1983-03-08 1989-02-07 Kabushiki Kaisha Kyoto Daiichi Kagaku Composition used for the determination of beta-hydroxybutyric acid and a method for preparing the said composition
US4970171A (en) * 1987-11-09 1990-11-13 Miles Inc. Denaturant reagents for convenient determination of hemoglobin derivatives in blood
US5278047A (en) * 1989-04-25 1994-01-11 Lilja Jan E Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4254222A (en) * 1978-07-19 1981-03-03 Owen Oliver E Semi-quantitative assay of lactic acid and β-hydroxy butyrate
JPS60251895A (ja) * 1984-05-29 1985-12-12 Ube Ind Ltd ピロロキノリンキノンの製造方法
US5036000A (en) * 1986-12-16 1991-07-30 Enzymatics, Inc. Threshold color control system
US5236567A (en) * 1989-05-31 1993-08-17 Nakano Vinegar Co., Ltd. Enzyme sensor
US5126275A (en) * 1990-09-19 1992-06-30 Miles Inc. Analytical method using tetrazolium salt indicators having a reflectance plateau
US5510245A (en) * 1992-09-08 1996-04-23 Bayer Corporation Composition and method of assaying for ketone bodies
US5298144A (en) * 1992-09-15 1994-03-29 The Yellow Springs Instrument Company, Inc. Chemically wired fructose dehydrogenase electrodes
DE4311464A1 (de) * 1993-04-08 1994-10-13 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur kolorimetrischen Bestimmung eines Analyten mit einer PQQ-abhängigen Dehydrogenase
CA2127172C (en) * 1993-08-05 1998-07-14 Amy H. Chu Analyte detection device and process
US5360595A (en) * 1993-08-19 1994-11-01 Miles Inc. Preparation of diagnostic test strips containing tetrazolium salt indicators
US5902731A (en) * 1998-09-28 1999-05-11 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4803158A (en) * 1983-03-08 1989-02-07 Kabushiki Kaisha Kyoto Daiichi Kagaku Composition used for the determination of beta-hydroxybutyric acid and a method for preparing the said composition
JPS62175197A (ja) * 1986-01-29 1987-07-31 Takara Shuzo Co Ltd Ｌ−フコ−スの定量方法
EP0239990A2 (en) * 1986-04-01 1987-10-07 Konica Corporation Analytical element
US4970171A (en) * 1987-11-09 1990-11-13 Miles Inc. Denaturant reagents for convenient determination of hemoglobin derivatives in blood
US5278047A (en) * 1989-04-25 1994-01-11 Lilja Jan E Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102079783B1 (ko) * 2019-07-03 2020-02-21 주식회사 원드롭 생체 물질을 측정하기 위한 스트립
WO2021002643A1 (ko) * 2019-07-03 2021-01-07 주식회사 원드롭 생체 물질을 측정하기 위한 스트립

Also Published As

Publication number Publication date
IL129594A0 (en) 2000-02-29
AR014718A1 (es) 2001-03-28
US6200773B1 (en) 2001-03-13
US5902731A (en) 1999-05-11
ZA992952B (en) 2000-10-26
HK1026001A1 (en) 2000-12-01
KR100570909B1 (ko) 2006-04-14
NO992026D0 (no) 1999-04-28
PT990705E (pt) 2003-01-31
RU2225004C2 (ru) 2004-02-27
CN1155829C (zh) 2004-06-30
EP0990706B1 (en) 2002-09-04
CA2270334A1 (en) 2000-03-28
IL129594A (en) 2004-06-20
AU2037399A (en) 2000-03-30
BR9901431A (pt) 2000-05-09
KR20000022599A (ko) 2000-04-25
DE69902612D1 (de) 2002-10-02
DE69902730D1 (de) 2002-10-10
ATE223497T1 (de) 2002-09-15
NO992026L (no) 2000-03-29
BR9901186A (pt) 2000-03-28
IL128905A0 (en) 2000-02-17
ES2183481T3 (es) 2003-03-16
AR016241A1 (es) 2001-06-20
DK0990705T3 (da) 2002-11-25
EP0990705A1 (en) 2000-04-05
JP2000093198A (ja) 2000-04-04
AU754321B2 (en) 2002-11-14
NO991185D0 (no) 1999-03-11
DK0990706T3 (da) 2002-12-23
RU2225005C2 (ru) 2004-02-27
CN1249349A (zh) 2000-04-05
CA2265201A1 (en) 2000-03-28
MY116028A (en) 2003-10-31
TW594009B (en) 2004-06-21
MY117657A (en) 2004-07-31
EP0990705B1 (en) 2002-08-28
ZA991906B (en) 2000-10-11
DE69902730T2 (de) 2003-05-08
SG82610A1 (en) 2001-08-21
CN1249431A (zh) 2000-04-05
IL128905A (en) 2001-07-24
AU4474399A (en) 2000-03-30
AU763065B2 (en) 2003-07-10
ATE222961T1 (de) 2002-09-15
TW558638B (en) 2003-10-21
JP2000093199A (ja) 2000-04-04
ES2183482T3 (es) 2003-03-16
CN1142998C (zh) 2004-03-24
NO991185L (no) 2000-03-29
DE69902612T2 (de) 2003-04-03
PT990706E (pt) 2003-01-31
EP0990706A1 (en) 2000-04-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100570909B1 (ko) 테트라졸륨 화합물계 진단제
AU782774B2 (en) Diagnostics based on tetrazolium compounds
US5326697A (en) Composition and method of assaying for D-β-hydroxybutyrate
KR20030041810A (ko) 안정화된 테트라졸륨 시약 조성물 및 이의 사용방법
US5510245A (en) Composition and method of assaying for ketone bodies
MXPA99004096A (en) Diagnostic agent based on tetrazo compounds
MXPA99002507A (en) Diagnostic agent based on tetrazo compounds

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
NORF Unpaid initial registration fee