KR102634733B1 - 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명에 따른 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법은 (A) 정제수와 금화규의 줄기, 잎, 꽃, 및/또는 뿌리 중 최소한 하나 이상을 포함하는 제1 용액의 준비 단계; (B) 추출 용매로서의 제2 용액을 준비하는 단계; (C) 상기 제1 용액과 상기 제2 용액을 혼합하여 50 내지 100 MPa의 압력으로 초고압 추출을 수행하는 단계; 및 (D) 상기 단계 (C)에서 얻은 혼합 용액을 원심분리하는 단계를 포함하고, 상기 제2 용액은 (B-1) 에탄올, 이소프로필 알코올, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 아세톤, 디메틸에틸케톤, 또는 수산화나트륨 중에서 단독 또는 2 이상의 혼합된 베이스 용액, (B-2) 셀룰라아제, (B-3) 베타인, 및 (B-4) 시트로넬릭산을 포함하는 것을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법 및 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로 본 발명은 금화규로부터 높은 수율로 콜라겐을 추출할 수 있고, 추출된 콜라겐으로 피부 보습과 탄력을 개선할 수 있는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 콜라겐은 피부와 연골 등과 같은 인체 내의 결합조직을 구성하는 섬유 단백질이다. 이와 같은 콜라겐은 통상 동물로부터 추출한 동물성 콜라겐과 식물로 부터 추출한 식물성 콜라겐으로 구분된다.
동물성 콜라겐은 돈피(pigskin) 또는 우피(cowhide)를 선별하여 선처리, 세척, 탈염, 정제 등의 단계를 거치면서 추출된다. 이와 같은 동물성 콜라겐은 분자량이 크기 때문에 피부에 흡수가 잘 되지않는 단점이 있다. 한편, 대한민국 공개특허공보 제10-1999-0033721호에서는 어류로부터 피부에 흡수가 잘 될 수 있는 수용성 콜라겐을 추출하는 방법에 대하여 개시하고 있다. 어류에서 추출된 콜라겐은 돈피나 우피로부터 추출된 콜라겐 보다는 흡수가 잘되는 장점은 있지만 피부 흡수나 노화, 탄력 등의 개선과 관련해서는 식물성 콜라겐이 더 우수하다는 평가를 받고 있다.
이러한 식물성 콜라겐의 추출 방법과 관련하여, 특히 금화규로부터 콜라겐을 추출하여 화장품이나 건강 기능 식품 등으로 응용하는 사례가 최근에 증가하고 있다. 금화규(학명: Hibiscus Manihot L.)는 쌍떡잎 식물로 아욱목, 아욱과, 추규속, 금화규종의 한해살이 식물이다. 금화규는 골드 히비스커스, 황촉규, 황금해바라기 등의 이름으로 불리기도 한다. 금화규의 뿌리, 줄기, 잎, 꽃 등이 약용으로 사용되고 있으며, 플라보노이드, 올레산, 비타민E, 셀레늄 등의 성분이 있다.
대한민국 등록특허 제10-2505942호에서는 금화규로부터 추출한 식물성 콜라겐을 포함한 발효 추출물의 제조 방법에 대하여 개시하고 있다. 이 특허에서는 금화규를 발효시키는 과정이 있기 때문에 제조 시간이 많이 걸리고, 실험실에서 추출하기에는 적합하지만 상업적인 대량 생산에 적용 가능하기는 어려울 것으로 평가된다.
대한민국 등록특허 제10-1783469호에서는 금화규로부터 콜라겐을 추출하기 위하여, 알칼리성 수용액에 금화규를 분산시키고 중화제를 투입하여 식물성 콜라겐 층을 분리해내는 기술에 대하여 개시하고 있다. 그러나, 알칼리성 수용액에 분산시키는 시간이 매우 많이 소요되는 문제가 있다.
이에 본 발명에서는 금화규로부터 콜라겐을 보다 간소화된 공정에 의하여 추출하면서도 생산성을 높일 수 있으며, 콜라겐의 추출 수율이 높은 추출 방법 및 이를 이용한 화장료 조성물을 제안하고자 한다.
본 발명의 목적은 수율이 높고 간소화된 공정으로 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 금화규 유래 콜라겐을 포함하여 항산화 및 보습 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 상기 목적 및 기타 내재되어 있는 목적은 아래 설명하는 본 발명에 의하여 모두 용이하게 달성될 수 있다.
본 발명에 따른 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법은
(A) 정제수와 금화규의 줄기, 잎, 꽃, 및/또는 뿌리 중 최소한 하나 이상을 포함하는 제1 용액의 준비 단계;
(B) 추출 용매로서의 제2 용액을 준비하는 단계;
(C) 상기 제1 용액과 상기 제2 용액을 혼합하여 50 내지 100 MPa의 압력으로 초고압 추출을 수행하는 단계; 및
(D) 상기 단계 (C)에서 얻은 혼합 용액을 원심분리하는 단계;
를 포함하고, 상기 제2 용액은
(B-1) 에탄올, 이소프로필 알코올, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 아세톤, 디메틸에틸케톤, 또는 수산화나트륨 중에서 단독 또는 2 이상의 혼합된 베이스 용액, (B-2) 셀룰라아제, (B-3) 베타인, (B-4) 시트로넬릭산을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에서, 상기 제2 용액은 (B-5) 올레인산을 더 포함하여도 좋다.
본 발명에서, 상기 제2 용액의 상기 베이스 용액(B-1) 100 중량부에 대하여,
상기 셀룰라아제(B-2) 0.1 내지 0.5 중량부;
상기 베타인(B-3) 0.1 내지 0.3 중량부;
상기 시트로넬릭산(B-4) 0.2 내지 0.8 중량부; 및
삭제
로 포함하여도 좋다.
본 발명에서, 상기 제2 용액은 (B-5) 올레인산을 3 중량부 이하로 더 포함하여도 좋다.
본 발명에서, 상기 단계 (D)는
상기 단계 (C)에서 얻은 혼합 용액을 1차 원심분리하여 고형분을 제거하는 단계(D-1)와,
상기 고형분이 제거된 혼합 용액과 이온수를 1:2의 부피부로 혼합하는 단계(D-2)와,
상기 혼합 용액과 이온수의 혼합액을 2차 원심분리하는 단계(D-3);
로 이루어지는 것이 바람직하다.
본 발명에서, 상기 제1 용액에 함유된 상기 금화규의 입자 크기는 100 내지 150 메쉬인 것이 좋다,
본 발명에 따른 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법에 따라 제조된 콜라겐을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물도 본 발명에 포함된다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 콜라겐은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.1 내지 5 중량%로 포함되어도 좋다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 향료, 산화방지제, 색소, 탈크, 색조, 보존제, 유화제, 오일 첨가제, 또는 산도 조절제 중에서 하나 이상을 더 포함하여도 좋다.
본 발명의 화장료 조성물은, 크림, 로션, 스킨로션, 에센스, 겔, 스프레이, 현탁액, 또는 오일의 형태로 제조될 수 있다.
본 발명은 수율이 높으면서도 간소화된 공정으로 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법과, 금화규 유래 콜라겐을 포함하여 항산화 및 보습 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 발명의 효과를 갖는다.
본 발명에 따른 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법은 (A) 금화규를 포함하는 제1 용액의 준비 단계, (B) 추출 용매로서의 제2 용액을 준비하는 단계, (C) 초고압 추출 단계, 및 (D) 원심분리 단계를 포함한다.
(A) 제1 용액의 준비
정제수 100 중량부와, 금화규의 줄기, 잎, 꽃, 및/또는 뿌리를 세척하여 건조한 재료 1 내지 11 중량부를 분쇄기에 넣고 분쇄하여 제1 용액을 준비한다. 정제수 100 중량부에 대하여 금화규를 11 중량부를 초과하여 부가할 경우 용액의 점도가 높아져 분쇄시 저향이 증가되어 분쇄 효율이 떨어지고, 추출 시간이 단축될 수 있지만 추출 수율이 낮아질 수 있다. 1 중량부 미만으로 부가하는 경우에는 용액의 점도가 너무 낮아 분쇄 시간이 길어지며 추출 시간은 짧아지지만 추출물의 양이 적어 생산성이 저하될 수 있다.
이하, 본 명세서에서 금화규는 금화규의 줄기, 잎, 꽃, 및/또는 뿌리 중의 어느 하나 또는 2 이상의 혼합물을 말하는 것으로 사용한다.
본 발명에서 제1 용액에 함유된 분쇄된 금화규의 입자 크기는 100 내지 150 메쉬의 크기인 것이 바람직하다. 분쇄기의 종류에 따라 상이할 수 있지만, 금화규의 잎과 꽃은 30분 이내의 분쇄로 100 내지 150 메쉬의 입자 크기로 된다. 줄기나 뿌리의 경우 건조 상태에 따라 1 시간 이상 분쇄하여야 할 수도 있다.
본 발명에서는 제1 용액을 아래 설명하는 제2 용액과 혼합하여 초고압 추출을 통해 금화규로부터 콜라겐을 추출한다.
(B) 제2 용액의 준비
본 발명에서 사용되는 제2 용액은 (B-1) 에탄올, 이소프로필 알코올, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 아세톤, 디메틸에틸케톤, 또는 수산화나트륨 중에서 단독 또는 2 이상의 혼합된 베이스 용액, (B-2) 셀룰라아제, (B-3) 베타인, (B-4) 시트로넬릭산, 및/또는 (B-5) 올레인산을 혼합하여 제조된다.
셀룰라아제(cellulase)(B-2)는 세포벽의 주요 구성 성분인 셀룰로오스를 분해하는 효소이다. 식물 세포벽의 주요 구성인 셀룰로오스는 매우 단단하고 강한 구조를 가지고 있기 때문에 셀룰라아제가 용매추출 과정에서 콜라겐을 추출하는데 도움을 줄 수 있다. 본 발명에서 셀룰라아제(B-2)는 베이스 용액 100 중량부에 대하여 0.1 내지 0.5 중량부로 사용한다.
베타인(betaine)(B-3)은 아미노산과 구조가 유사한 단백질 화합물로, 자연에서 다양한 식품에 포함되어 있다. 본 발명에서 베타인은 콜라겐을 추출하는데 수율을 높이는 역할을 하는 것으로 기대된다. 본 발명에서 베타인(B-3)은 베이스 용액 100 중량부에 대하여 0.1 내지 0.3 중량부로 사용된다.
시트로넬릭산(citronellic acid)(B-4)은 카르복실산의 하나로 레몬향을 가지고 있다. 농축된 구연산과 시트로넬 알데하이드로부터 합성할 수 있으나 본 발명에서는 상업적으로 입수 가능한 시트로넬릭산을 사용하여도 좋다. 본 발명에서 시트로넬릭산은 콜라겐을 추출하기 위한 용매 추출 공정을 보조하는 역할을 한다. 본 발명에서 시트로넬릭산(B-4)은 베이스 용액 100 중량부에 대하여 0.2 내지 0.8 중량부로 사용된다.
삭제
올레인산(oleic acid)(B-5)은 지방산의 일종으로 식물성 오일 등에 함유되어 있다. 본 발명에서 올레인산(B-5)은 선택적 성분으로 사용되며, 사용되는 경우 베이스 용액 100 중량부에 대하여 3 중량부 이하로 사용된다.
본 발명의 제2 용액은 상기 성분들을 상온에서 교반기에 투입하여 약 10 내지 30 분 정도 혼합하여 제조한다.
(C) 초고압 추출
본 발명의 초고압 추출 단계(C)에서는 제1 용액과 제2 용액을 혼합비 1:1(중량비)로 혼합하여 초고압 추출기에 넣고 가압하여 0.5 내지 2시간 동안 추출을 수행하는 단계이다. 이때 혼합 용액에 가하는 압력은 50 내지 100 MPa 범위이다.
초고압 추출기의 온도는 상온에서 수행하는 것이 바람직하며, 25 내지 40 ℃의 온도 범위에서 수행하는 것이 더욱 바람직하다. 용매 추출의 주용매인 제1 용액과 보조제인 제2 용매를 통해 고온에서 가열하지 아니하고도 초고압 용매 추출이 가능하여 제조에 소요되는 에너지를 절감할 수 있다.
(D) 원심분리
본 발명에 따른 콜라겐의 추출 방법의 원심분리 단계(D)에서는 2 회의 원심분리를 수행한다.
먼저, 단계(C)에서 초고압 추출기로부터 초고압 추출을 수행하고 얻은 혼합 용액을 원심분리기(decanter)에 넣고 6,000 내지 10,000 rpm으로 10 내지 30 분간 1차 원심분리하여 고형분을 제거한다(단계 (D-1)).
고형분이 제거된 상등액(equilibrium solution)과 이온수를 1:2 의 부피비로 혼합한다(단계 (D-2)).
상등액과 이온수의 혼합액을 원심분리기에 투입하여 10,000 내지 50,000 rpm으로 10 내지 30분간 2차 원심분리한다(단계 (D-3)). 본 발명에서 사용되는 이온수는 물의 전기분해나 필터링 과정을 거쳐 이온을 포함하고 있는 용액을 말한다.
원심분리 후에 액상의 콜라겐을 얻을 수 있다. 액상의 콜라겐은 화장료 조성물에 바로 응용할 수 있다.
금화규 유래 콜라겐을 포함한 화장료 조성물
본 발명에 따른 추출 방법에 따라 금화규로부터 추출된 콜라겐을 포함하는 화장료 조성물의 제조가 가능하다. 본 발명에 따라 제조된 콜라겐은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.1 내지 5 중량%로 포함할 수 있다. 또한, 향료, 산화방지제, 색소, 탈크, 색조, 보존제, 유화제, 오일 첨가제, 산도 조절제 등 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 기술자가 적용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 금화규 유래 콜라겐을 포함한 화장료 조성물은 크림, 로션, 스킨로션, 에센스, 겔, 스프레이, 현탁액, 오일 등 다양한 제형으로 응용이 가능하다. 본 발명에 따른 금화규 유래 콜라겐은 항산화 효과와 보습 효과가 뛰어난 것을 알 수 있는데 아래 실시예를 통해 상세히 기술한다.
이하에서 실시예를 통하여 본 발명의 구체적인 구성과 효과에 대하여 보다 상세히 설명하기로 한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 위한 것이며 본 발명의 범위를 한정하기 위한 것은 아니다.
실시예
실시예 1 내지 실시예 5
정제수 1 L에 아래 표 1의 함량에 따라 건조된 금화규를 혼합하여 제1 용액을 준비하였다. 사용된 금화규의 부위는 꽃, 잎과 줄기의 혼합, 뿌리의 세 종류로 하였다.
[표 1]
베이스 용액(B-1)으로 에탄올 1 kg에 아래 표 2의 함량(단위: g)에 따라 셀룰라아제(B-2), 베타인(B-3), 시트로넬릭산(B-4) 및 올레인산(B-5)을 25 ℃에서 교반기에 투입후 20 분간 혼합하여 제2 용액을 제조하였다.
[표 2]
이렇게 준비된 제1 용액과 제2 용액을 각각 1 kg 씩 혼합하여 초고압 추출기에 투입하고 25 ℃의 온도, 100 MPa의 압력으로 1 시간동안 추출하였다. 추출된 용액을 원심분리기에 넣어 8,500 rpm 으로 15 분간 원심분리한 다음, 고형분을 제거하였다. 고형분이 제거된 상등액 0.5 L와 이온수 1 L를 혼합하고 원심분리기에서 20,000 rpm으로 20 분간 다시 원심분리를 수행하여 콜라겐이 함유된 최종 추출물을 얻었다.
비교실시예 1
비교실시예 1에서는 건조된 금화규 꽃을 분말형태로 100 g을 준비하여, pH 10의 수산화 나트륨 수용액 500 ml 에 넣고 2 시간 동안 30 ℃에서 교반하여 주었고, 이후 구연산 수용액 500 ml를 섞어 pH 7.5 로 중화한 다음 원심분리기에 넣고 1,000 rpm에서 30분 동안 교반하여 콜라겐 층이 함유된 추출물을 분리해 냈다. 이렇게 추출한 추출물의 콜라겐 등의 각종 성분 분석을 수행하였다.
콜라겐 및 유리아미노산 함량 분석
콜라겐 함량 분석은 다음과 같이 수행하였다. 실시예 1~5 및 비교실시예 1에서 얻은 추출물 1 g에 6 N의 염산(HCl)을 10 ㎖를 가하여 섞은 다음, 100 ℃에서 24 시간 동안 가수분해하였다. 표준용액인 트랜스-4-하이드록시-L-프롤린(trans-4-hydroxy-L-proline)으로 5 ㎎/㎖의 저장용액(stock solution)을 만들어 가수분해가 완료된 추출물과 함께 유리관에 각각 나누어 담고, 각각의 유리관에는 2 N의 수산화나트륨(NaOH) 용액 900 ㎕와 클로라민-T(chrolamine-T) 900 ㎕를 부가하여 30분간 반응시켰다. 이후 원심분리기에 반응물을 넣고 12,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음, 700 ㎕의 EHR(ehrich) 시약을 넣어 62.5 ℃에서 40 분간 반응시킨 다음, 상온에서 550 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정하였다.
또한, 콜라겐을 구성하고 있는 유리아미노산은 글라이신(glycine), 프롤린(proline), 글루탐산(glutamic acid), 알라닌(alanin)으로 알려져 있으므로, 이들 성분과 기타 여러 아미노산의 함량을 측정하여 유리아미노산 분석을 실시하였다. 실시예 1~5 및 비교실시예 1에서 얻은 각각의 추출물 1 ㎖를 취하여 5 %의 트리클로로아세트산(trichloroactic acid)을 넣어 희석하고 100,000 rpm에서 10 분간 원심분리한 후 상등액을 0.2 ㎛의 멤브레인 필터로 여과 후 아미노산 자동분석기(히타치 사의 모델명 L-8900)로 정량분석하였다. 분석 결과는 아래 표 3에 나타내었다(단위는 ㎎/㎖).
[표 3]
플라보노이드 및 총당함량 분석
플라보노이드(flavonoid)는 항산화, 항염, 항균, 항바이러스를 함유하는 것으로 다양한 물질이 알려져 있다. 상기 실시예 1~5 및 비교실시예 1에서 얻은 각각의 추출물 500 ㎕에 메탄올 1.5 ㎛, 10 % 알루미늄클로라이드 100 ㎕, 1M 포타슘아세테이트 100 ㎕, 증류수 2.8 ㎖를 부가하고 상온에서 40분간 반응시킨 후, 액체크로마토그래피-질량분광법(liquid chromatography-mass spectrometry)으로 플라보노이드의 일종인 루틴 하이드레이트(rutin hydrate)와 퀘세틴산(quercetin acid), 그리고 플라보노이드의 항산화 작용을 증진시키는 것으로 알려진 갈산(gallic acid), 플라보노이드의 일종인 플라보노이드 아미드(phenolic amide)의 구성성분 중의 하나인 쿠마린산(coumaric acid)의 함량을 분석하여 아래 표 4에 나타내었다.
또한, 실시예 1~5 및 비교실시예 1에서 얻은 각각의 추출물 500 ㎕에 5% 페놀용액 500 ㎕, 황산 2 ㎖를 넣고 상온에서 15분간 반응 후 총당함량을 페링 시약(Fehling's agent)을 통해 측정하여 표 4에 함께 정리하였다(단위는 ㎎/g).
[표 4]
항산화 활성 실험
실시예 1~5와 비교실시예 1에서 얻은 추출물의 황산화 활성을 측정하기 위해 실시예 1 내지 5에 따른 추출물과 라돈 자유기인 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)가 항산화 능력이 높은 물질일수록 DPPH와 결합하는 양이 적어지는 원리를 이용하기 위해 DPPH 용액을 이용하여 항산화 활성을 측정하였다. 0.2 mM DPPH 용액 100 ㎕에 실시예 1~5와 비교실시예 1에 따른 추출물 100 ㎍/㎖을 35 ℃에서 1 시간동안 반응시킨 후 517 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정하고, 항산화 활성율을 % 단위로 산출하여 아래 표 5에 나타내었다.
[표 5]
피부 보습 효과 실험
에센스 형태의 화장품 시료를 제조하기 위하여 정제수 1,000 g에 점도증진제 50 g, 글리세롤 폴리메틸아크릴 20 g, 1,3-부틸로노글리콜 50 g, 카스트오일 0.4 g, 피부 유연제 20 g, 글리세린 50 g을 천천히 교반하면서 실시예 1~5 및 비교실시예 1에 따른 각각의 추출물을 30 g 씩 부가하여 에센스 형상의 화장품 시료를 제조하였다.
제조된 각각의 시료를 이용하여 자발적인 실험 참가자인 40 대 여성 10 명을 선정하여, 실시예 1~5 및 비교실시예 1의 6 종의 화장품 시료를 팔과 다리 부위에 매일 도포하고, 도포하기 전의 피부 수분 함량과 30일 동안 매일 도포한 후의 피부 수분함량을 측정하여 수분 증가율을 계산하였다. 피부 수분 함량은 피부 수분 함량 측정장치인 코네오미터(corneometer)를 이용하였다. 10 명의 각 부위에 대한 피부 수분함량 증가율을 평균하여 표 6에 정리하였다.
실시예 1~5 및 비교실시예 1에 따른 화장품 시료의 피부의 수분 증발을 억제하는 효과를 확인하기 위해, 건성 피부를 가진 50 대 나이의 여성 10 명을 섭외하여, 팔과 다리 부위에 피부의 수분량을 3 회에 걸쳐 측정한 후, 실시예 1~5 및 비교실시예 1의 화장품 시료를 각각 4 주간 매일 1 회씩 도포한 후 수분 증발량 측정기(TewameterTM)를 이용하여 증발하는 수분의 양을 측정하고, 그 비율을 계산하여 표 6에 정리하였다.
[표 6]
상기 표 6에서와 같이, 본 발명에 따른 금화규 유래 화장료 조성물의 경우, 항산화 효과, 피부 보습력 개선 등의 효과를 확인할 수 있었다.
이상에서 설명한 본 발명의 설명은 본 발명의 이해를 위하여 예를 들어 설명한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 정하고자 하는 것이 아님을 유의하여야 한다. 본 발명의 범위는 첨부된 청구범위에 의하여 정하여지며, 이 범위 내에서 본 발명의 단순한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 보호범위에 속하는 것으로 이해되어야 한다.
Claims (10)
- (A) 정제수와 금화규의 줄기, 잎, 꽃, 및/또는 뿌리 중 최소한 하나 이상을 포함하는 제1 용액의 준비 단계;
(B) 추출 용매로서의 제2 용액을 준비하는 단계;
(C) 상기 제1 용액과 상기 제2 용액을 혼합하여 50 내지 100 MPa의 압력으로 초고압 추출을 수행하는 단계; 및
(D) 상기 단계 (C)에서 얻은 혼합 용액을 원심분리하는 단계;
를 포함하고, 상기 제2 용액은
(B-1) 에탄올, 이소프로필 알코올, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 아세톤, 디메틸에틸케톤, 또는 수산화나트륨 중에서 단독 또는 2 이상의 혼합된 베이스 용액, (B-2) 셀룰라아제, (B-3) 베타인, 및 (B-4) 시트로넬릭산을 포함하는 것을 특징으로 하는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법. - 제1항에 있어서, 상기 제2 용액은 (B-5) 올레인산을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 제2 용액의 상기 베이스 용액(B-1) 100 중량부에 대하여,
상기 셀룰라아제(B-2) 0.1 내지 0.5 중량부;
상기 베타인(B-3) 0.1 내지 0.3 중량부;
상기 시트로넬릭산(B-4) 0.2 내지 0.8 중량부; 및
로 포함하는 것을 특징으로 하는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법. - 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 단계 (D)는
상기 단계 (C)에서 얻은 혼합 용액을 1차 원심분리하여 고형분을 제거하는 단계(D-1)와,
상기 고형분이 제거된 혼합 용액과 이온수를 1:2의 부피부로 혼합하는 단계(D-2)와,
상기 혼합 용액과 이온수의 혼합액을 2차 원심분리하는 단계(D-3);
로 이루어지는 것을 특징으로 하는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법. - 제1항에 있어서, 상기 제1 용액에 함유된 상기 금화규의 입자 크기는 100 내지 150 메쉬인 것을 특징으로 하는 금화규로부터 콜라겐을 추출하는 방법.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
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-
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