CN109745249A - 鹿油混合提取物的提取方法和含有该提取物的化妆品组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及鹿油混合提取物的提取方法和含有该提取物的化妆品组合物。含有本发明的鹿油混合提取物的化妆品组合物具有优异的抗炎，皮肤保湿能力，胶原形成能力和皮肤再生能力，并且当其包含在化妆品中时对皮肤更有益。另外，与常规的提取鹿油混合提取物的方法相比，根据本发明的提取鹿油混合提取物的方法，虽然纯化过程简单，但是可以获得独特的无异味鹿油提取物，可以增加对化妆品的适用性。

Description

鹿油混合提取物的提取方法和含有该提取物的化妆品组合物
技术领域
本发明涉及一种鹿油混合提取物的提取方法和含有该提取物的化妆品组合物。
背景技术
鹿分布在世界各地，它们分为约16属，46种，150至200亚种，它们的大小非常多样，从体重约1.5公斤的非常小的鹿到800公斤以上的大型鹿均有。一般来说，鹿的实用价值主要在于鹿茸，鹿茸是一种典型的保健食品原料，虽然在某些情况下使用部分的鹿肉，即鹿肉，但是尚未开发出使用鹿骨及其副产品的产品，因此有必要开发使用它们的新的高附加值产品。
作为鹿的副产品，可以从鹿肉的脂肪中提取出来的鹿油，即“鹿油”产品已经实现应用。
专利文献1是使用鹿肉尝试产品应用的代表性实例。
即，专利文献1涉及一种使用鹿肉制造中药灌肠的方法，更具体地说，该使用鹿肉制造中药灌肠的方法公开了通过将10～15重量％的黄芩粉、10～15重量％的覆盆子粉、10～15重量％的青梅原液、15～20重量％的洋葱、10～13重量％的大蒜、10～13重量％的辣椒、3～5重量％的枣、10～13重量％的梨、3～5重量％的蛋清与4～6重量％的姜、10～13重量％的小葱混合并粉碎，获得5～10重量％的天然香料汁；将50～70重量％的鹿肉和25～40重量％的猪肉脂肪混合成原料肉，并将原料肉粉碎为5～20mm的碎肉，以形成碎肉的碎肉形成步骤；由通常的30～35重量％的石菖蒲浓缩液、30～35重量％的原地浓缩液，25～35重量％的白茯神浓缩液和5～15重量％的甘草组成的浓缩液以上述碎肉重量的5～10重量％；将上述天然香料汁以上述碎肉重量的5～10重量％，进一步混合后，使用天日盐浸渍至0.8盐度的盐渍步骤；和在盐渍步骤之后，将混合物在0～3℃的低温下熟成20～30小时，然后填充在套管中，依次将混合物在55℃下加热10～30分钟、在60℃下加热10～30分钟、在70℃下加热10～30分钟之后，在60％湿度下以60℃的温度热烫20～40分钟，在0～5℃冷却水中冷却，然后进行真空包装。
但是，专利文献1中所公开内容的问题在于还包括其他草药成分，不能充分利用鹿肉自身的实用价值。
另一方面，鹿油的特性，即“鹿油”富含维生素和矿物质，与其他动物脂肪不同，不饱和脂肪酸的含量高达50％至55％，有益于人体皮肤。
直到最近，已经尝试将鹿油的这种特性应用于诸如化妆品等产品中。
然而，实际上由于从鹿的脂肪中提取的油的特殊气味，对这些化妆品适用性的研究没有活跃进行。因此，进行了除臭相关的研究，提出了使用活性白土或活性炭进行除臭的技术，在这种情况下，除臭工序在高温下进行会引起鹿油的氧化或鹿油的成分变化等问题，此外在提纯过程中，必须伴随除去用于除臭的酸性粘土或活性炭的工序，从而存在提纯成本增加的问题。
另外，从鹿脂中提取的鹿油通过纯化过程制造成纯油形式，在纯化过程中经历脱胶和脱氧脱酸。一般来说，在脱胶的过程中主要用对人体有害的磷酸和盐酸，在脱氧脱酸过程中使用苛性钠对酸的残留物进行处理和中和，即使进行上述脱胶和脱氧脱酸，在去除鹿油的令人不快的气味方面仍然存在限制。
因此，真实情况是迫切需要一种能够增加具有高实用价值的鹿油对作为化妆品领域产品的适用性的技术。
现有技术文献
专利文献
(专利文献1)专利文献1：大韩民国注册韩国授权专利第10-1355563号
发明内容
技术问题
本发明为了解决现有技术中的上述问题，提供一种化妆品组合物，其包含鹿油混合提取物。更具体地，本发明提供一种包括从鹿的脂肪中提取的鹿油混合提取物，从而对皮肤显示更好的有益效果的化妆品组合物。
此外，本发明还提供了一种鹿油混合提取物的提取方法。
解决问题的技术手段
本发明提供一种包括从鹿的脂肪中提取的鹿油混合提取物的化妆品组合物。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于缓解皮肤炎症性疾病。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述皮肤炎症性疾病选自粉刺、特应性皮炎、过敏性皮炎、牛皮癣、脂溢性皮炎、接触性皮炎、系统性红斑狼疮、湿疹、痱子和荨麻疹中的一种。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于皮肤保湿。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于提升皮肤弹力。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于皮肤再生。
并且，本发明提供的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物的剂型选自溶液、凝胶、固体、糊剂、乳剂、悬浮液、乳液、微乳剂、微胶囊、微粒、脂质体、非离子卵泡分散剂、霜、爽肤水、润肤乳、粉末、喷雾、膏、面膜、洁面剂、肥皂、油、蜡、遮瑕棒和气雾剂中至少一种。
本发明提供一种鹿油混合提取物的提取方法，包括：步骤(A)：从鹿的脂肪中制备原料鹿油；步骤(B)：对所述原料鹿油进行第一皂化反应，并使用多酚化合物进行第一纯化过程，得到第一纯化鹿油；步骤(C)：对获得的所述第一纯化鹿油进行酯化反应，得到第二纯化鹿油；和步骤(D)：对获得的所述第二纯化鹿油进行第二皂化反应，得到第三纯化鹿油。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(A)中，洗涤鹿的脂肪后，与水混合，并在80～120℃加热和搅拌3～5小时。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(B)中的第一皂化反应，相对于每100重量份的所述原料鹿油，分别添加10重量份至500重量份纯化水，0.01重量份至5重量份氢氧化钾和1重量份至50重量份乙醇进行。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(B)中的多酚化合物是含有多酚化合物的干燥植物中所含的多酚化合物，相对于每100重量份的原料鹿油，所述含有多酚化合物的干燥植物的加入量为1至20重量份。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述含有多酚化合物的干燥植物可以是选自由辣木、绿茶、橡子和仙人掌组成的组中的至少一种。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(C)中的酯化反应是通过添加酸催化剂和醇，并加热和搅拌来进行。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，相对于每100重量份第一纯化鹿油，所述酸催化剂和醇的加入量分别为，1重量份至10重量份酸催化剂和5重量份至50重量份的醇。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(D)中的第二皂化反应是，相对于100重量份的第二纯化鹿油，分别加入10重量份至300重量份的纯化水和0.005重量份至1重量份的氢氧化钾进行。
并且，本发明提供的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，还包括从获得的所述第三纯化鹿油中除去水分的步骤(E)。
发明的效果
含有本发明的鹿油混合提取物的化妆品组合物具有优异的抗炎，皮肤保湿能力，胶原形成能力和皮肤再生能力，并且当其包含在化妆品中时对皮肤更有益。另外，与常规的提取鹿油混合提取物的方法相比，根据本发明的提取鹿油混合提取物的方法，虽然纯化过程简单，但是可以获得完全去除特殊异味的鹿油提取物，可以增加对化妆品的适用性。
附图的简要说明
附图是为了向本领域技术人员对本发明内容进行更详细地说明，但是本发明的技术构思不限于此。
图1为根据本发明的一个实施例的鹿油混合提取物的提取方法的流程图。
图2为根据本发明的另一个实施例的鹿油混合提取物的提取方法的流程图。
图3显示了根据本发明的实验例1中的HPTLC的结果。
图4显示了根据本发明的实验例1中DEAE-Sephadex A-25柱色谱分析的结果。
图5显示了根据本发明的实验例1中唾液酸的定量分析结果。
图6显示了为了验证含有根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品制剂的效果而制造的化妆品。
图7是用于证实含有根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品的抗炎作用而使用的小鼠的观察图。
图8是将上述观察结果以炎症指数表示的图表。[橙色：二硝基氯苯(DNCB)处理组的炎症指数，黄色：当对二硝基氯苯(DNCB)处理组用不含鹿油的霜涂抹时的炎症指数，绿色：当对二硝基氯苯(DNCB)处理组用含鹿油的霜涂抹时的炎症指数]。
图9和图10显示了确认含有根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品的保湿效果和胶原形成效果的结果。
图11和图12显示了确认包含根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品的诱导皮肤再生能力的结果。
图13和图14显示了用于确认含有根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品的诱导皮肤再生能力的利用H&E组织染色法的结果。
具体实施方式
在下文中，将详细描述包含根据本发明的鹿油混合提取物的化妆品组合物，然而，含有鹿油混合提取物的化妆品组合物的范围不受以下描述的限制。
本发明涉及化妆品组合物。更具体地，本发明涉及包含鹿油混合提取物的化妆品组合物。
如本文所用，术语“鹿油”是指可以从鹿身上获得的油，更具体地是指从屠宰的鹿肉中含有脂肪的部位，即脂肪肉中获得的油，它可以被解释为意指从脂肪肉获得的油，优选除了包括内脏脂肪在内的脂肪肉。
根据本发明的化妆品组合物包含鹿油混合提取物。
如后所述，鹿油混合提取物包含具有优异的抗炎，皮肤保湿能力，胶原形成能力和皮肤再生能力的物质，因此可以以各种形式应用于化妆品中。
在本发明的一个实施方式中，化妆品组合物可用于缓解皮肤炎症性疾病。
皮肤炎症性疾病，不受特别限定，例如可以是选自粉刺、特应性皮炎、过敏性皮炎、牛皮癣、脂溢性皮炎、接触性皮炎、系统性红斑狼疮、湿疹、痱子和荨麻疹中的一种。
在本发明的另一个实施方式中，化妆品组合物可用于皮肤保湿。
根据本发明的化妆品组合物，其中含有的鹿油混合油提取物中包含各种脂肪酸和物质，该物质中含有能够良好地维持皮肤保湿的物质，因此具有优异的皮肤保湿能力。
在本发明的另一个实施方式中，化妆品组合物可以用于增强皮肤弹性。
根据本发明的化妆品组合物，其中含有的鹿油混合提取物中含有各种脂肪酸和物质，并且由于该物质中含有能够在皮肤中诱导胶原形成的物质，因此可以增强皮肤弹性。
在本发明的另一个实施方式中，化妆品组合物可以用于皮肤再生。
根据本发明的化妆品组合物，其中含有的鹿油混合提取物中含有各种脂肪酸和物质，由于这些物质含有促进皮肤再生的成分，因此具有优异的皮肤再生能力。
本发明的化妆品组合物可以制备成本领域常规生产的任何制剂，例如可以制备成溶液、凝胶、固体、糊剂、乳剂、悬浮液、乳液、微乳剂、微胶囊、微粒、脂质体、非离子卵泡分散剂、霜、爽肤水、润肤乳、粉末、喷雾、膏、面膜、洁面剂、肥皂、油、蜡、遮瑕棒或气雾剂。
当本发明的化妆品组合物的剂型是膏剂，霜剂或凝胶剂时，载体成分可以是使用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅胶、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌。
当本发明的化妆品组合物的剂型是粉末或喷雾剂时，载体成分可以使用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末，特别是在喷雾的情况下，还可以包括诸如氯氟碳氢化合物、丙烷/丁烷或二甲醚的推进剂。
当本发明的化妆品组合物的剂型是溶液或乳液时，载体成分使用溶剂(甘油或戊二醇)，增溶剂或润滑剂，例如是乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂肪酸酯、聚乙二醇或脱水山梨糖醇的脂肪酸酯。
当本发明的化妆品组合物的剂型是悬浮液时，载体成分可以使用诸如水、乙醇或丙二醇的液体稀释剂，诸如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯和聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯的悬浮液、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂或黄蓍等。
当本发明的化妆品组合物的剂型是含界面活性剂的清洁剂时，载体成分可使用脂族醇硫酸盐、脂族醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸钠、咪唑烷衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰胺基甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯。
此外，当根据本发明的化妆品组合物的剂型是蜡时，除了上述鹿油混合提取物之外，该组合物还可以包含甘油、戊二醇、甲基葡萄糖-20、烟酰胺、1,2-己二醇和纯化水等成分。
本发明还涉及鹿油混合提取物的提取方法。
图1为根据本发明的一个实施例的鹿油混合提取物的提取方法的流程图。
参照图1，更具体地说，所述鹿油混合提取物的提取方法包括：步骤(A)：从鹿的脂肪中制备原料鹿油；步骤(B)：对原料鹿油进行第一皂化反应，并使用多酚化合物进行第一纯化过程，得到第一纯化鹿油；步骤(C)：对获得的第一纯化鹿油进行酯化反应，得到第二纯化鹿油；和步骤(D)：对获得的第二纯化鹿油进行第二皂化反应，得到第三纯化鹿油。
下面对本发明的鹿油混合提取物的提取方法的各步骤分别进行说明。
根据本发明的提取鹿油混合提取物的方法可包括步骤(A)由鹿的脂肪中制备原料鹿油。
在步骤(A)中，洗涤鹿的脂肪后，与水混合，并在80～120℃加热和搅拌3～5小时。
更具体地，在步骤(A)中，原料鹿油不是纯化的，并且可以从屠宰的鹿肉的脂肪中提取。例如，从屠宰的鹿肉中，选择具有良好脂肪堆积的脂肪肉部位并洗涤以去除脂肪肉表面或屠宰的鹿肉上沾着的异物质，并且洗涤的脂肪肉和水以1：1的重量比混合，并在80至120℃的温度下加热约3至5小时，以从脂肪肉中提取液化的鹿油。
在步骤(A)中，即制备原料鹿油的步骤，优选包括上述方法，但不特别限于此，例如，可以使用如热压缩等多种方法提取。
根据本发明的鹿油混合提取物的提取方法可包括步骤(B)对原料鹿油进行第一皂化反应，并使用多酚化合物进行第一纯化过程，得到第一纯化鹿油。
本说明书中的术语“第一”，“第二”，“第三”等仅用于清楚的目的，而不应结合术语“顺序”来解释。
步骤(B)中的第一次皂化反应可以是相对于每100重量份的原料鹿油，分别以10重量份至500重量份纯化水、0.01重量份至5重量份氢氧化钾和1重量份至50重量份乙醇的比例添加后进行。所述纯化水、氢氧化钾和乙醇的含量不特别限于上述范围，例如还可以是，按照10重量份至500重量份的纯化水，30重量份至350重量份的纯化水或50重量份至200重量份的纯化水；0.01至5重量份的氢氧化钾，0.05重量份至1重量份的氢氧化钾或0.1重量份至0.5重量份的氢氧化钾；和1重量份至50重量份的乙醇，5重量份至35重量份的乙醇或5重量份至10重量份的乙醇的比例添加。
此外，步骤(B)中的多酚化合物是含有多酚化合物的干燥植物中含有的多酚化合物，相对于每100重量份的原料鹿油，所述含有多酚化合物的干燥植物的加入量为5重量份至10重量份。作为该含量的另一个实例，含有多酚化合物的干燥植物可以是相对于每100重量份的鹿油，以1重量份至20重量份，2.5重量份至15重量份或5重量份至10重量份的比例添加。
更具体地，进行第一皂化反应和使用多酚化合物的第一纯化过程，从原料鹿油中除去原料鹿油的异味成分，以获得第一纯化鹿油。在第一纯化过程中，可以向原料鹿油中加入含有纯化水、氢氧化钾、乙醇和多酚化合物的干燥植物，并且可以将通过添加产生的第一混合物在约80至120℃的温度加热和搅拌。
此外，含有多酚化合物的干燥植物可以是选自由辣木、绿茶、橡子和仙人掌组成的组中的至少一种，但不限于此。
更具体地，可以在加热和搅拌第一混合物期间，从干燥的植物中提取作为抗氧化剂的多酚化合物。干燥植物中的辣木中含有的绿原酸、绿茶中含有的儿茶素、橡子中含有的单宁以及仙人掌中含有的黄酮类化合物等都是属于多酚化合物，这些多酚化合物在80℃以上的高温下很好地洗脱，但在超过120℃的温度下由于变形可能会降低抗氧化效果等，因此加热温度优选为80至120℃。
优选相对于100重量份的原料鹿油，加入5至10重量份的干燥植物。此时，为了提高多酚化合物的提取效率和提取的多酚化合物的抗氧化效果，添加的绿茶的含量可以分别小于辣木橡子和仙人掌中的各自的含量。
与干燥植物一起加入第一混合物中的乙醇可以促进多酚化合物的提取，并通过在第一混合物中形成醇饱和状态来抑制原料鹿油的水解，从而最小化或者预防中性脂质的损失。为此目的，基于100重量份的原料鹿油，乙醇的加入量优选为5重量份至10重量份。当向100重量份的原料鹿油中加入少于5重量份的乙醇时，不仅多酚化合物的提取效率降低，而且第一混合物的醇饱和状态也不能保持，导致未从原料鹿油中游离的中性脂质的损失；如果乙醇的加入量大于10重量份，由于一部分游离脂肪酸可能转化为酯并残留，其分离的过程可能会变得很复杂。
提取的多酚化合物可以与原料鹿油中所含的异味成分的分子的醛和低级脂肪酸反应，从而改变异味成分的特性。更具体地，多酚化合物中包含的多个羟基可以与作为异味成分的醛和低级脂肪酸组合，以使异味成分失活。通过该反应，可以除去原料鹿油的异味成分。另外，其中包含的多酚化合物可通过吸附、离子反应或交联除去原料鹿油中所含的碳化物的色素。
在向第一混合物中加入氢氧化钾的情况下，第一皂化反应可用于除去原料鹿油中存在的游离脂肪酸。例如，在第一纯化过程中，原料鹿油中的游离脂肪酸可以通过与氢氧化钾反应转化为脂肪酸盐，转化的脂肪酸盐可以通过后面描述的油-水分离被吸收到水相层中并从原料鹿油中除去。
通常，原料鹿油的酸值可以在1至5的范围内测量。酸值的单位是中和1g油脂中存在的游离脂肪酸所消耗的氢氧化钾的量，以mg KOH/g油计。例如，除去酸值为5的1g油脂中存在的所有游离脂肪酸所需的氢氧化钾的量为5mg。
因此，在100重量份原料鹿油中可以含有0.1重量份至0.5重量份的氢氧化钾，以除去原料鹿油中存在的游离脂肪酸。如果氢氧化钾的含量小于0.1重量份，则不能够完全中和原料鹿油中的游离脂肪酸，会有残留；如果氢氧化钾的量超过0.5重量份，则进行中性脂质的水解，进行皂化反应，纯化率会降低。
基于100重量份的原料鹿油，第一混合物中的纯化水的含量可以为50重量份至200重量份。基于100重量份的原料鹿油，当纯化水小于50重量份时，由于第一皂化反应的反应性降低，游离脂肪酸的去除效率可能降低；当纯化水超过200重量份时，需要加入大量的乙醇，由于可能导致酯化反应的副反应，这是不合适的，因此原料鹿油与纯化水的混合重量比可以优选为1：1。
在加热和搅拌第一混合物后，可以通过过滤器等去除第一混合物中干燥植物的残余物。此后，将第一混合物静置约1小时至2小时以分离油相层和水相层，然后通过洗涤或减压蒸发除去水相层，可以获得从原料鹿油中除去异味成分(例如，游离脂肪酸、醛和/或低级脂肪酸)的第一纯化鹿油。在这种情况下，第一纯化鹿油可含有灭活的异味成分与结合的多酚化合物，从而防止由于抗氧化功能引起的细小皱纹和老化，在皮肤深处的抗菌作用可以帮助改善皮肤问题。
根据另一个实施方式，第一纯化过程可包括向原料鹿油中加入纯化水、氢氧化钾、乙醇和多酚化合物以制备第一混合物，然后在40至80℃下加热和搅拌。在第一纯化过程中，可以直接使用提取的多酚化合物，而不是如上所述添加干燥的植物并从中提取多酚化合物。第一混合物在40至80℃的温度下加热和搅拌期间，可能发生第一皂化反应和原料鹿油的异味成分与多酚化合物的反应，结果是可以除去原料鹿油中含有的游离脂肪酸、醛和/或低级脂肪酸。
在步骤(B)中基本上加入的多酚化合物的含量没有特别限制，例如，相对于100重量份的原料鹿油，多酚化合物的量可以是1重量份至20重量份，2.5重量份至15重量份，或5重量份至10重量份。当从上述干燥植物中提取多酚化合物时，绿茶提取物的含量可分别小于辣木提取物、橡子提取物和仙人掌提取物的含量，以增加抗氧化效果。例如，辣木提取物、绿茶提取物、橡子提取物和仙人掌提取物的重量比可为约1：0.2至0.4：1至1.2：1，但不特别限于此。在这种情况下，可以省略在第一纯化过程中除去干燥植物残余物的步骤。
根据本发明的鹿油混合提取物的提取方法可以进一步包括步骤(C)，将获得的第一纯化鹿油进行酯化反应以获得第二纯化鹿油。
步骤(C)中的酯化反应可以通过添加酸催化剂和醇，并加热和搅拌来进行。
能够获得第二纯化鹿油的第二纯化过程可以通过酯化反应除去第一纯化鹿油中所含的磷脂。
根据一个实施方式，第二纯化过程可包括通过向第一纯化鹿油中加入酸催化剂和醇来制备第二混合物，然后在60至80℃的温度下加热和搅拌的步骤。
在第二温度下加热并搅拌第二混合物期间，第一纯化鹿油中含有的磷脂通过酯化反应转化为亲水性，并从非极性油相转移至极性醇相(或醇层)。例如，通过第一纯化鹿油中含有的磷脂和醇的酯化反应，可以将包含具有磷脂亲水性的取代基的部分从亲脂性甘油三酯结构中脱离，磷脂可以变成不含磷的亲脂性甘油二酯，含有磷成分的部分可以溶解在醇中，从非极性油相(甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯、脂肪酸烷基酯)中分离而主要存在于亲水性醇相中。
相对于100重量份的第一纯化鹿油，上述酸催化剂和醇的添加量分别为，酸催化剂为1重量份至10重量份，2重量份至8.5重量份或3重量份至7重量份；醇为5重量份至50重量份，10重量份至40重量份或20重量份至30重量份。
更具体地，第二纯化过程中使用的酸催化剂和醇可分别包括柠檬酸和乙醇。在这种情况下，基于100重量份的第一纯化鹿油，柠檬酸的含量优选为3重量份至7重量份；基于100重量份的第一纯化鹿油，乙醇的含量可以是20重量份至30重量份。这是因为柠檬酸和/或乙醇的含量太低或太高，磷脂的去除效率会降低。
第二纯化过程不限于上述实施方式，例如在另一个实施方式中，即在第二纯化过程中使用的醇可以是选自甲醇、乙醇、丙醇或丁醇中的任何一种、两种或更多种的混合物。
当通过加热和搅拌第二混合物将第一纯化鹿油中含有的磷脂转移到醇层时，可以通过重力分离或离心分离将第二混合物分离成油相层和醇层。此后，通过洗涤或减压蒸发除去第二混合物的醇层，可以获得已从第一纯化鹿油中除去磷脂的第二纯化鹿油。在醇层的去除过程中，可以一起除去第二混合物中的剩余酸催化剂。
根据本发明的鹿油混合提取物的提取方法可以进一步包括步骤(D)，将获得的第二纯化鹿油进行第二皂化反应以获得第三纯化鹿油。
更具体地，在根据本发明的鹿油混合混合物的提取方法中，对通过第二纯化过程获得的第二纯化鹿油进行第三纯化过程，获得已从第二纯化鹿油中除去游离脂肪酸的第三纯化鹿油。
可以通过第二皂化反应除去残留在第二纯化鹿油中的游离脂肪酸来进行第三纯化过程。
根据一个实施方式，第三纯化过程可包括：通过向第二纯化鹿油中加入纯化水和氢氧化钾制备第三混合物，在60至80℃的温度下加热和搅拌，在加热并搅拌第三混合物期间，第二纯化鹿油中的游离脂肪酸可通过与氢氧化钾反应转化为脂肪酸盐，并且转化的脂肪酸盐可以通过后面描述的油水分离被吸收到水相层中，并从第二纯化鹿油中除去。
基于100重量份的第二纯化鹿油，步骤(D)中的第二皂化反应可以分别以纯化水10重量份至300重量份，35重量份至200重量份或50重量份至100重量份的添加量，氢氧化钾0.005重量份至1重量份，0.01重量份至0.5重量份，或0.05重量份至0.1重量份的添加量进行。
更具体地，第三混合物中包含的纯化水和氢氧化钾的重量优选在上述范围内，由于第二纯化鹿油中包含的游离脂肪酸的量小于原料鹿油中包含的游离脂肪酸的量，在第三纯化过程(即，第二皂化反应)中使用的氢氧化钾的量可以小于在第一纯化过程(即，第一皂化反应)中使用的氢氧化钾的量。例如，第二纯化鹿油的酸值可以是0.5至1，因此优选地，在第三纯化过程中，相对于每100重量份的第二纯化鹿油，可能需要0.05重量份至0.1重量份的氢氧化钾。
在完成第三混合物的加热和搅拌之后，进行第三混合物的油相层和水相层的分离以及水相层的除去过程，以获得从第二纯化鹿油中除去游离脂肪酸的第三纯化鹿油。第三混合物的油相层和水相层的分离以及水相层的除去过程与第一纯化过程中描述的相同。在该实施方式中获得的第三纯化鹿油在室温下可以是液态，并且如果获得的第三纯化鹿油是固相，则优选通过另外的步骤进行液化以液化第三纯化鹿油。
根据本发明的鹿油混合提取物的提取方法可以进一步包括步骤(E)，从获得的第三纯化鹿油中除去水分。
图2为根据本发明的另一个实施例的鹿油混合提取物的提取方法的流程图。
参照图2，更具体地，可以另外进行用于去除残留在第三纯化鹿油中的水分的脱水过程。
根据一个实施方式，脱水过程可包括将脱水剂添加到第三纯化鹿油中，然后在40至50℃的温度下反应。脱水剂没有特别限制，但可包括例如硫酸钠、氯化钠、碳酸钙、氯化钾或沸石。
通过脱水过程除去第三纯化鹿油中的残留水分，可以抑制最终获得的纯化鹿油的脂肪氧化，并且可以延长纯化鹿油的保质期。在脱水过程完成后，除去脱水剂以获得除去第三纯化鹿油的残余水分的最终的纯化鹿油。
根据本发明的鹿油混合提取物的提取方法，与传统的鹿油提取物的提取方法相比，虽然纯化工艺简单，但是能够获得特定的气味被完全除去的鹿油提取物，因此可以增加对化妆品的适用性，含有提取的鹿油混合提取物的化妆品组合物具有优异的抗炎、皮肤保湿能力、胶原形成能力和皮肤再生能力，当其包含在化妆品等中时对皮肤有更有益的效果。
在下文中，将参考具体实施例更详细地描述本发明。然而，这些实施例仅用于说明目的，并且本发明的范围不限于这些实施例。
[实验例1]确定鹿油成分中神经节苷脂的存在和类型
确认了鹿油中具有真正抗炎作用的为人们所知的神经节苷脂的存在和存在时的类型。
1.1鹿油中神经节苷脂的分离过程
对于鹿油原料，申请人使用直接制备的鹿油，并通过Folch(1957)和Suzuki(1965)的改进方法将糖脂与鹿油分离。首先，通过用35倍体积的70％乙醇在60℃下加热8小时来提取鹿油，过滤并浓缩。向该浓缩液中分配氯仿-甲醇-0.88％KCl溶液，并将糖脂从水溶液层的上层分离。收集上层液，然后用含有相同体积的0.88％KCl的溶液洗涤下层液，合并水溶液层并浓缩。透析浓缩液后，用Sephadex G-50柱色谱法(Stephan和Baiba，1985)纯化糖脂。此时，通过测量206nm处的洗脱的溶液的吸光度，收集活性级分并在蒸馏水中透析(MWCO：500,1000)并冻干。
1.2溶剂提取法分离神经节苷脂
透析后使用溶剂从冻干样品中分离神经节苷脂。
1.3高效薄层色谱(HPTLC)
使用HPTLC板在4℃下进行。作为展开溶剂的溶剂A，使用适合于高极性糖脂分离的溶剂氯仿/甲醇/0.2％CaCl2水溶液(55：45：10v/v/v)，溶剂B使用氯仿/甲醇/2.5N NH4OH(60：35：8v/v/v)。作为染色方法，使用苔黑酚-氯化铁硫酸溶液，并通过在120℃加热15至20分钟，使唾液酸及包含其的神经节苷脂染色。HPTLC的结果如图3所示。
1.4DEAE-Sephadex A-25柱色谱
为了通过溶剂提取法获得的神经节苷脂的类型分析，基于离子交换和部分吸附，通过柱色谱分析F6馏分。凝胶为DEAE-Sephadex A-25凝胶，洗脱速率为1ml/min，按5ml分级。
1.5唾液酸定量
为了通过神经节苷脂中存在的唾液酸的量对F6馏分进行定量，使用高碘酸盐-间苯二酚法(Jourdian等，1971)在630n处测量唾液酸的吸光度。作为标准物质，使用游离唾液酸。
[实验例2]确认含鹿油化妆品剂型的抗炎效果
测试了含有鹿油的化妆品的霜剂型的抗炎效果。
首先，将下面[表1]中所示的原料(成分)和比例进行混合，以制备霜剂型的化妆品(参见图6)。
[表1]
序号 原料名 功能 比例
1 鹿油 皮肤调理 41.6
2 甘油 溶剂 41.5
3 戊二醇 溶剂 6.1
4 甲基葡萄糖-20 保湿剂 6
5 烟酰胺 皮肤调理 2
6 1,2-己二醇 — 1
7 纯化水 — 定量
在诱导小鼠的慢性炎症的二硝基氯苯(DNCB)以2天的间隔施用28天以诱导慢性炎症，然后将含鹿油的化妆品剂型从第28天开始以2天的间隔处理28天。
定期观察小鼠，其结果如图7所示。
参照图7，在用诱导慢性炎症的二硝基氯苯(DNCB)处理的小鼠中，诱导了炎症，经证实，当用含有鹿油的霜化妆品剂型以2天的间隔处理时，在约14天时有所改善，并证实经过大约28天时改善了90％以上。
图8是以作为炎症指数表示的上述观察结果的图表。[橙色：二硝基氯苯(DNCB)处理组的炎症指数，黄色：当对二硝基氯苯(DNCB)处理组用不含鹿油的霜涂抹时的炎症指数，绿色：当对二硝基氯苯(DNCB)处理组用含鹿油的霜涂抹时的炎症指数]。
[实验例3]确认含鹿油化妆品剂型的保湿效果和胶原形成效果
进行实验以证实在实验例2中制备的含鹿油化妆品剂型的保湿效果和胶原形成效果。
为了确认保湿效果和胶原形成效果，将包含鹿油的霜化妆品和不包含鹿油的霜化妆品(未包含)经28天涂抹在小鼠皮肤上后，在小鼠的皮肤组织中进行马松铬染色(Massonchrome staining)，以确认胶原形成诱导能力。同时，使用已知形成胶原蛋白的上皮生长因子(EGF)处理的作为对照组(M ock)。此外，在上述霜化妆品含鹿油的情况下，鹿油的浓度分别为10％和30％。
皮肤组织的观察结果如图9所示。
此外，上述观察结果以数字方式表示，并在图10中以图表方式示出。
作为图9和图10的分析结果，随着鹿油含有浓度的增加，发现胶原形成水平与用上皮生长因子处理的实验组几乎相似。
[实验例4]确认含鹿油化妆品剂型的诱导皮肤再生能力
进行实验以证实在实验例2中制备的含鹿油的霜化妆品的诱导皮肤组织再生能力。
为了确认诱导皮肤组织再生的能力，在小鼠背部形成自然愈合的情况下引起炎症或留下疤痕的大小的伤口后，用不含鹿油的灭菌霜(对照组，C on)和含有鹿油的灭菌霜(实验组，DF)处理约14天，观察伤口愈合情况。
上述观察结果如图11所示。
另外，伤口愈合的观察结果数字化并在图12中示出。
对于图11和图12所示的分析结果，证实当用含有鹿油的灭菌霜(DF)处理时，伤口愈合得更整齐，并且在愈合期间炎症进一步缓解(图11中的黑色箭头所示)。
进一步地，通过H&E组织染色法分析受伤小鼠的皮肤组织。
上述分析结果如图13所示。
此外，将图13的分析结果数字化并在图14中示出。
对于图13和图14所示的分析结果，当处理空白对照组(Con)，即不含鹿油的灭菌霜时，皮肤厚度太厚并且形成具有不规则排列的粗糙组织，当处理实验组(DF)，即含鹿油的灭菌霜时，证实表皮很薄并且形成了具有规则排列的组织。
即，确认了根据本发明的实验组中的皮肤再生能力。
本领域普通技术人员将理解，实施例的前述描述是出于说明性目的，并且本领域技术人员可以在不脱离本发明的精神或本质特征的情况下容易地修改本发明。因此，应理解，上述实施例在所有方面都是说明性的而非限制性的。例如，被描述为单一形式的各部件可以分散实施，同样被描述为分散的部件也可以以组合的形式实施。
本发明的范围由所附权利要求而不是上述的详细说明所限定，并且从权利要求的含义和范围及其等同物得出的所有改变或修改形式应被解释为包括在本发明的范围内。

Claims (16)

1.一种化妆品组合物，包括从鹿的脂肪肉中提取的鹿油混合提取物。
2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于缓解皮肤炎症性疾病。
3.根据权利要求2所述的化妆品组合物，其特征在于，所述皮肤炎症性疾病选自由粉刺、特应性皮炎、过敏性皮炎、牛皮癣、脂溢性皮炎、接触性皮炎、系统性红斑狼疮、湿疹、痱子和荨麻疹组成的组中的一种。
4.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于皮肤保湿。
5.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于提升皮肤弹力。
6.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物用于皮肤再生。
7.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述化妆品组合物的剂型选自由溶液、凝胶、固体、糊剂、乳剂、悬浮液、乳液、微乳剂、微胶囊、微粒、脂质体、非离子卵泡分散剂、霜、爽肤水、润肤乳、粉末、喷雾、膏、面膜、洁面剂、肥皂、油、蜡、遮瑕棒和气雾剂组成的组中的至少一种。
8.一种鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，包括：
步骤(A)：从鹿的脂肪肉中制备原料鹿油；
步骤(B)：对所述原料鹿油进行第一皂化反应，并使用多酚化合物进行第一纯化过程，得到第一纯化鹿油；
步骤(C)：对获得的所述第一纯化鹿油进行酯化反应，得到第二纯化鹿油；和
步骤(D)：对获得的所述第二纯化鹿油进行第二皂化反应，得到第三纯化鹿油。
9.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(A)中，洗涤鹿的脂肪肉后，与水混合，并在80～120℃加热和搅拌3～5小时。
10.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(B)中的第一皂化反应，相对于100重量份的所述原料鹿油，分别添加10重量份至500重量份纯化水，0.01重量份至5重量份氢氧化钾和1重量份至50重量份乙醇进行。
11.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(B)中的多酚化合物是含有多酚化合物的干燥植物中所含的多酚化合物，相对于100重量份的原料鹿油，所述含有多酚化合物的干燥植物的加入量为1重量份至20重量份。
12.根据权利要求10所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述含有多酚化合物的干燥植物是选自由辣木、绿茶、橡子和仙人掌组成的组中的至少一种。
13.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(C)中的酯化反应是通过添加酸催化剂和醇，并加热和搅拌来进行。
14.根据权利要求13所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，相对于100重量份第一纯化鹿油，所述酸催化剂和醇分别以1重量份至10重量份酸催化剂和5重量份至50重量份的醇的量添加。
15.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤(D)中的第二皂化反应是通过向100重量份的第二纯化鹿油中分别加入10重量份至300重量份的纯化水和0.005重量份至1重量份的氢氧化钾进行。
16.根据权利要求8所述的鹿油混合提取物的提取方法，其特征在于，还包括从获得的所述第三纯化鹿油中除去水分的步骤(E)。
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