KR102571953B1

KR102571953B1 - 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물, 이의 제조 방법 및 응용

Info

Publication number: KR102571953B1
Application number: KR1020207028442A
Authority: KR
Inventors: 창 샤오; 메이 거; 린가오 뤼안; 웨이 웨이; 싱 시아; 민 라오; 칭치엔 멍; 민위 루오
Original assignee: 샹하이 라이이 센터 포 바이오파마수티컬 알앤디 코., 엘티디.; 제 쟝 메더신 코.,엘티디.
Priority date: 2018-03-06
Filing date: 2019-03-04
Publication date: 2023-08-28
Also published as: CN108409837A; WO2019170046A1; KR20210011907A; JP2021515809A; JP7339288B2; US11696937B2; CN108409837B; EP3763728A1; US20210093691A1; EP3763728A4

Abstract

본 발명은 일반식 (Ⅰ)로 표시되는 글리코펩티드계 화합물을 충족시키는 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물을 공개하고,

본 발명은 상기 글리코펩티드계 화합물의 제조 방법 및 응용을 더 공개한다. 시험을 통해, 2세대 글리코펩티드계 약물인 오리타반신에 비해, 본 발명의 글리코펩티드계 항생제 화합물이 약제 내성 균주, 특히 MRSA 또는 VRE에 대해 더욱 높은 억제 활성을 갖는 것을 발견하였고; 추가적인 시험을 통해, 본 발명의 절대부분 글리코펩티드계 화합물이 오리타반신보다 더욱 높은 안전성을 구비하며 다양한 박테리아성 감염으로 인한 예컨대 피부와 연조직 감염, 뇌막염, 농독증, 폐렴, 관절염, 복막염, 기관지염, 축농증 등 질환을 치료 또는 예방하는 약물의 제조에 사용될 수 있음을 발견하였다.

Description

약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물, 이의 제조 방법 및 응용

본 발명은 약물 화학 합성 기술분야에 속하는 것으로, 구체적으로 감염 질환을 치료하는 약물로 사용될 수 있는 신규한 글리코펩티드계 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 종류의 화합물의 제조 방법 및 응용에 관한 것이다.

감염성 질환은 줄곧 인류가 직면한 주요 질환 중 하나로, 중국에서, 감염성 질환의 치료는 언제나 중요하고 까다로운 문제인 바, 박테리아 약제 내성 상황은 선진국보다 더욱 심각하고, 다양한 약제 내성 박테리아에 대한 저항성을 갖는 약물의 요구도 선진국보다 높다. 사실상, 임상에서 항생제에 대한 사용을 아주 잘 제어하더라도, 약제 내성 박테리아는 여전히 조금씩 나타난다. 따라서, 인류와 박테리아 감염의 투쟁은 장기적이고 지속적이다. 지난 세기말에 선진국은 약제 내성 박테리아에 대한 저항성 관련 연구 지출을 크게 절감한 배경 하에, "슈퍼박테리아”로 인한 치사 사건은 다시 사회적으로 박테리아 감염 문제에 대한 우려를 발생시켰다. 글리코펩티드계 화합물은 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA)을 포함한 박테리아에 대해 고도의 억제 활성을 갖는 화합물로, 이의 대표적인 약물은 반코마이신이다. 하지만, 임상 응용에 따라, 반코마이신에 대해 약제 내성인 장구균(VRE), 및 반코마이신의 활성을 저하시키는 MRSA 균이 나타났다. 기존의 글리코펩티드계 화합물의 구조에 대한 변형을 통해, 일련의 신규 구조의 화합물을 얻을 수 있는데, 이러한 신규 화합물은 약제 내성 박테리아에 대해 저항성을 가질 수 있고, 안전성 등 측면에서 잠재적인 우세를 가지고 있다. 많은 반코마이신계 화합물 및 다른 글리코펩티드계 화합물은, 예컨대 참조 특허 US6635618B2, US6392012B1, US5840684, US8420592B2, WO0039156A1, WO0183521A2, WO2011019839A2, EP0435503A1 등에서 공개된 글리코펩티드계 화합물, 참조 문헌 Bioorg Med Chem Lett, 2003, 13(23):4165-4168, Curr Med Chem, 2001, 8(14):1759-1773 및 Expert Opin Invest Drugs, 2007, 16(3):347-357 등에서 보도된 글리코펩티드계 화합물과 같이 본 기술분야에서 공지된 것이다.

기존에 보도된 바와 같이, 중국 발명 등록 특허 CN101928331A에서 신규 글리코펩티드계 화합물을 공개하였고, 이의 구조는 본 발명의 구조 Ⅱ 화합물과 같으며, 이의 구조 특징은 펩티드 골격 4-부위 및 6-부위 아미노산 잔기에 모두 반코글리코사민을 구비하고, 화합물 Ⅱ는 통상적인 글리코펩티드에 비해 완전히 새로운 구조를 가지며, 반코마이신보다 더욱 높은 박테리아 내성 활성을 갖는 것이다. 본 발명의 연구는 기존의 연구를 바탕으로 하여 이의 구조에 대한 변형을 계속하여 최적화함으로써, 특징이 돌출한 신규 화합물을 얻었다.

본 발명의 발명자는 중국 특허 CN101928331A에 기재된 화합물을 원료로 사용하고 이를 화학적으로 개선시켜 개선된 글리코펩티드계 항생제 화합물을 얻었다. 시험을 통해, 2세대 글리코펩티드계 약물인 오리타반신에 비해, 본 발명의 글리코펩티드계 항생제 화합물이 약제 내성 균주, 특히 MRSA 또는 VRE에 대해 더욱 높은 억제 활성을 갖는 것을 발견하였고; 추가적인 시험을 통해, 본 발명의 절대부분 글리코펩티드계 화합물이 오리타반신보다 더욱 높은 안전성을 구비하며 다양한 박테리아성 감염으로 인한 예컨대 피부와 연조직 감염, 뇌막염, 농독증, 폐렴, 관절염, 복막염, 기관지염, 축농증 등 질환을 치료 또는 예방하는 약물의 제조에 사용될 수 있음을 발견하였다.

본 발명의 첫 번째 목적은 일반식 Ⅰ로 표시되는 글리코펩티드계 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 충족시키는 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물을 제공하는 것이고,

여기서,

R은 식 ―A―D―E―G로 표시되며; 여기서,

A는 벤젠 고리이고;

D는 ―O―, 또는 ―S―, 또는 ―NH―이며;

E는 ―(CH₂)_m―이고, 여기서, m은 1 내지 3이며;

G는 구조식 이고; 여기서, L은 수소, 메틸, 할로겐, 트리플루오로메틸, 메톡시 중 어느 하나이다.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, R은 4-벤질옥시페닐, 4-페네톡시페닐, 4-페닐프로폭시페닐, 4-(4'-메틸벤질옥시)페닐, 4-(4'-클로로벤질옥시)페닐, 4-(4'-메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-플루오로페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페네톡시)페닐, 4-(4'-브로모페네톡시)페닐, 4-(3'-브로모페네톡시)페닐, 4-(4'-트리플루오로메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-메톡시메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페닐프로폭시)페닐, 4-벤질티오페닐, 4-(4'-클로로벤질티오)페닐, 4-(4'-클로로페네틸티오)페닐, 4-벤질아미노페닐, 4-(4'-메틸벤질아미노)페닐, 4-(4'-클로로벤질아미노)페닐, 4-페네틸아미노페닐, 4-(4'-클로로페네틸아미노)페닐, 4-(4'-트리플루오로메틸페네틸아미노)페닐, 4-(4'-메톡시페네틸아미노)페닐, 4-암페타미노페닐 및 4-(4'-클로로암페타미노)페닐을 포함한다.

본 발명의 두 번째 목적은 활성 성분으로서 상기 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물을 포함하는 약물 제제를 제공하는 것이다. 상기 제제는 주사제, 경구 투여 제제, 링거 주사제 또는 외용 제제이다. 정맥 주사, 피하 주사 또는 경구 투여 방식을 통해 치료가 필요한 환자에게 투여할 수 있다. 경구 투여에 사용할 경우, 예컨대 정제, 분제 또는 캡슐 등 고체 제제로 제조될 수 있고; 주사에 사용할 경우, 주사액으로 제조될 수 있다. 외용으로 사용할 경우, 연고, 분말제로 제조되거나 담체에 탑재될 수 있다. 본 발명의 약물 제제의 다양한 제제는 의학 분야에서 통상적인 방법으로 제조될 수 있고, 여기서, 활성 성분인 글리코펩티드계 화합물의 중량 백분율은 0.1 % ~ 99.9 %이고, 바람직하게, 중량 백분율은 0.5 % ~ 90 %이다.

상기 약물 제제를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 일반 용량(dose)은 반코마이신, 노르반코마이신 및 오리타반신의 기존 용량을 참조할 수 있는데, 예를 들어, 성인에 0.1 ~ 2.0 g/d를 투여할 수 있고, 구체적으로 환자의 연령 및 병세 등에 따라 변할 수 있다. 본 발명의 글리코펩티드계 화합물은 통상적인 방법으로 연산염과 같은 염으로 제조될 수 있다.

본 발명의 세 번째 목적은 상기 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물의 제조 방법을 제공하는 것이다.

하기 내용은 본 발명의 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물을 제조하는 대표적인 방법이다. 상기 글리코펩티드계 화합물의 제조는 이러한 방법에 한정되지 않는 바, 물론, 다른 방법으로 진행될 수 있다. 전형적이거나 바람직한 과정 조건(예를 들어, 반응 용매, 반응 온도, 재료 투입 몰비 등)을 제공하였지만, 달리 규정되지 않은 한 다른 과정 조건도 사용할 수 있음을 이해할 수 있다. 최적의 과정 조건은 사용되는 특정 반응물 또는 용매에 따라 다를 수 있지만, 본 기술분야의 통상의 기술자는 관용적인 과정 조건에 의해 이러한 조건을 용이하게 확정할 수 있다.

이 밖에, 본 기술분야의 통상의 기술자에게 있어서 자명한 것은, 통상적인 보호기는 일부 작용기가 불필요한 반응에 참여하는 것을 방지하기 위해 필요하거나 수요되는 것일 수 있다. 특정 작용기의 적합한 보호기 및 이러한 작용기 보호와 탈보호의 적합한 조건의 선택은 본 기술분야에서 숙지된 것이다. 필요에 따라, 본문에서 예를 든 이외의 다른 보호기를 사용할 수 있다. 예를 들어, 다양한 보호기와 이들의 도입 또는 제거는 T. W. Greene and G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd, Wiley, New York, 1999 및 여기서 인용된 참조 문헌에 기재되어 있다.

본 발명에서, 상기 일반식 Ⅰ화합물은 하기와 같은 합성 경로에 의해 제조될 수 있다.

(1) D가 ―O― 또는 ―S―일 경우, 구체적으로, R이 4-벤질옥시페닐, 4-페네톡시페닐, 4-페닐프로폭시페닐, 4-(4'-메틸벤질옥시)페닐, 4-(4'-클로로벤질옥시)페닐, 4-(4'-메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-플루오로페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페네톡시)페닐, 4-(4'-브로모페네톡시)페닐, 4-(3'-브로모페네톡시)페닐, 4-(4'-트리플루오로메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-메톡시메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페닐프로폭시)페닐, 4-벤질티오페닐, 4-(4'-클로로벤질티오)페닐 및 4-(4'-클로로페네틸티오)페닐일 경우, 구조식 Ⅱ로 표시되는 화합물과 알데히드, 보란 tert-부틸아민을 반응시켜 일반식 Ⅰ로 표시되는 화합물을 얻는다.

일반적으로, 상기 반응은 하기와 같이 진행된다. 한 가지 또는 몇 가지 유기 용매(예를 들어, DMF, DMSO, 메탄올, 에탄올 등), 바람직하게, DMF와 메탄올의 혼합 용매를 사용하여, 과량의 아민(일반적으로, 약 2 당량), 예를 들어 DIEA의 존재 하에, 약 0 ℃ 내지 약 100 ℃의 온도, 바람직하게, 65 ℃의 온도에서, 화합물 Ⅱ과 약 0.5 당량 내지 약 2.5 당량, 바람직하게, 1.3 당량의 알데히드를 약 0.5 시간 내지 약 4 시간 동안 혼합한 후, 반응물을 약 0 ℃ 내지 약 40 ℃, 바람직하게, 실온까지 냉각시킨 다음, 반응물에 과량의 산(일반적으로, 3 당량), 예를 들어 트리플루오로아세테이트를 넣고, 보편적으로 정의된 환원제(예를 들어, 나트륨 보로히드라이드, 나트륨 시아노보로히드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로히드라이드, 보란 tert-부틸아민, 보란피리딘 등), 바람직하게, 보란 tert-부틸아민(일반적으로, 2 당량)을 넣는다. 다음, 반응이 거의 완성될 때까지 반응물을 약 0 ℃ 내지 약 100 ℃, 바람직하게, 실온에서 혼합한다. 반응이 완성되면, 통상적인 분리 정제 공정으로 일반식 Ⅰ 화합물을 얻는데, 예를 들어, 실리카겔, 이온 교환 수지, 폴리머 필러, C18 제조 액상, 용매 침전, 결정법 등, 바람직하게, 폴리머 필러를 사용하여 분리 정제를 진행한다.

상기 반응이 완성된 후, 숙지된 방법 및 보편적으로 적용되는 시약을 이용하여 산물에 존재하는 임의의 보호기를 제거하는데, 예를 들어, 유기산, 무기산, 유기염기, 무기염기, 촉매 수소화, 염기 가수분해 등 수단, 바람직하게, 유기염기, 예를 들어, 디에틸아민을 사용하여 산물 중의 Fmoc 보호기를 제거한다. 반응이 완성되면, 통상적인 분리 정제 공정으로 일반식 Ⅰ 화합물을 얻는데, 예를 들어, 실리카겔, 이온 교환 수지, 폴리머 필러, C18 제조용 액체 크로마토그래피, 용매 침전, 결정법 등, 바람직하게, 폴리머 필러를 사용하여 분리 정제를 진행한다.

상기 경로 과정에 적합한 알데히드, 반응 시약 및 정제 장치는 모두 상업적으로 획득 가능하다.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 알데히드는 4-벤질 옥시벤즈알데히드, 4-페네톡시벤즈알데히드, 4-페닐프로폭시벤즈알데히드, 4-(4'-메틸벤질옥시)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로벤질옥시)벤즈알데히드, 4-(4'-메틸페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-플루오로페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-브로모페네톡시)벤즈알데히드, 4-(3'-브로모페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-트리플루오로메틸페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-메톡시메틸페네톡시)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로페닐프로폭시)벤즈알데히드, 4-벤질티오벤즈알데히드, 4-(4'-클로로벤질티오)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로페네틸티오)벤즈알데히드, 4-(N-Fmoc-벤질아미노)벤즈알데히드, 4-(4'-메틸-N-Fmoc-벤질아미노)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로-N-Fmoc-벤질아미노)벤즈알데히드, 4-(N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드, 4-(4'-클로로-N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드, 4-(4'-트리플루오로메틸-N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드, 4-(4'-메톡시-N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드, 4-(N-Fmoc-암페타미노)벤즈알데히드 및 4-(4'-클로로-N-Fmoc-암페타미노)벤즈알데히드 중 어느 하나로부터 선택된다.

본 발명의 네 번째 목적은 약제 내성 박테리아 감염성 질환을 치료하는 약물의 제조에서 상기 글리코펩티드계 화합물의 응용을 제공하는 것이다.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 약제 내성 박테리아는 그람 양성 약제 내성 박테리아이다.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 약제 내성 박테리아는 메티실린 내성 황색 포도상 구균 또는 반코마이신 내성 장구균이다.

시험을 통해, 2세대 글리코펩티드계 약물인 오리타반신에 비해, 본 발명의 글리코펩티드계 항생제 화합물이 약제 내성 균주, 특히 MRSA 또는 VRE에 대해 더욱 높은 억제 활성을 갖는 것을 발견하였고; 추가적인 시험을 통해, 본 발명의 절대부분 글리코펩티드계 화합물이 오리타반신보다 더욱 높은 안전성을 구비하며 다양한 박테리아성 감염으로 인한 예컨대 피부와 연조직 감염, 뇌막염, 농독증, 폐렴, 관절염, 복막염, 기관지염, 축농증 등 질환을 치료 또는 예방하는 약물의 제조에 사용될 수 있음을 발견하였다.

이하, 구체적인 실시예와 결부시켜 본 발명을 더 설명한다. 아래 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하지 않음을 이해해야 한다.

본 발명에서, 아래 약어는 하기와 같은 의미를 가진다. 정의되지 않은 약어는 이의 보편적으로 허용되는 의미를 가지고, 달리 설명되지 않은 한, 모든 실온은 모두 20℃ ~ 30℃인 온도를 의미한다.

DIEA: N,N-디이소프로필에틸아민

DMF: N,N-디메틸포름아미드

DMSO: 디메틸설폭시드

ESI: 전자 분무 이온화 질량 분석

Fmoc: 9-플루오렌메톡시카르보닐

H: 시간(hour)

LD₅₀: 반수 치사량

MRSA: 메티실린 내성 황색 포도상 구균

MIC: 최소 저지 농도

MS: 질량 스펙트럼

TFA: 트리플루오로아세테이트

VRE: 반코마이신 내성 장구균

본 발명에서, 언급된 시작 화합물 Ⅱ을 얻는 방법은 중국 특허 CN101928331A의 특허 출원 서류에 기재된 방법을 참조할 수 있고, 본 발명에서의 다른 원료, 재료 및 장치 등은 모두 상업적으로 획득 가능하다.

이하 실시예에서, 역상 폴리머 필러 Uni PS25-300 및 Uni PSA30-300을 사용하여, 합성하여 얻은 조품을 정제한다. 조품을 메탄올(또는 아세토니트릴) 수용액에 용해시킨 후, 필러가 담긴 유리 크로마토그래피 컬럼에 샘플 로딩하고, 샘플 로딩 유속은 1배 칼럼 부피/h이다. 샘플 로딩이 끝난 후, 메탄올(또는 아세토니트릴) 수용액으로 1 h 동안 사전 세척한 다음, TFA를 함유한 메탄올(또는 아세토니트릴) 수용액으로 용리하고, 용리 유속은 1.5 배 칼럼 부피/h이다. 1배 칼럼 부피로 용리한 후 용리액을 수집하기 시작하고, 용리액을 농축 건조시킨 후 각 샘플의 순수한 제품을 얻는다.

이하 실시예에서, 달리 규정되지 않은 한, 용리액의 비율은 모두 부피 백분율을 의미하고, 수율은 모두 몰 수율을 의미한다.

이하 실시예에서 언급한 각 화합물의 구조는 표 1과 같다.

[표 1] 각 화합물의 구조

실시예 1. 화합물 1의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-벤질 옥시벤즈알데히드(0.085 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65℃ →에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 1(0.28 g의 백색 고체, 수율: 52 %)을 얻는다.

C₈₇H₁₀₀Cl₂N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1786.61, 실제 측정 값: m/z=1787.60 [M+H]⁺.

실시예 2. 화합물 2의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-페네톡시벤즈알데히드(0.09 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 2(0.31 g의 백색 고체, 수율: 57 %)를 얻는다.

C₈₈H₁₀₂Cl₂N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1800.63, 실제 측정 값: m/z=1801.63 [M+H]⁺.

실시예 3. 화합물 3의 제조

화합물 Ⅱ(1.0 g, 0.6 mmol)을 15 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.2 mL, 1.2 mmol) 및 4-페닐프로폭시벤즈알데히드(0.2 g, 0.8 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.14 mL, 1.8 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.1 g, 1.2 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 메틸 tert-부틸에테르(70 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 3(0.65 g의 백색 고체, 수율: 60 %)을 얻는다.

C₈₉H₁₀₄Cl₂N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1814.64, 실제 측정 값: m/z=1815.64 [M+H]⁺.

실시예 4. 화합물 4의 제조

화합물 4의 제조 방법은 화합물 1의 제조 방법과 동일하고, 사용되는 알데히드를 4-(4'-메틸벤질옥시)벤즈알데히드로 대체한다. 화합물 4(0.3 g의 백색 고체, 수율: 56 %)를 얻는다.

C₈₈H₁₀₂Cl₂N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1800.63, 실제 측정 값: m/z=1801.63[M+H]⁺.

실시예 5. 화합물 8의 제조

화합물 Ⅱ(1.0 g, 0.6 mmol)을 15 mL의 DMF-에탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.2 mL, 1.2 mmol) 및 4-(4'-클로로페네톡시)벤즈알데히드(0.21 g, 0.8 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.14 mL, 1.8 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.1 g, 1.2 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 메틸 tert-부틸에테르(70 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 8(0.55 g의 백색 고체, 수율: 50 %)을 얻는다.

C₈₈H₁₀₁Cl₃N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1834.59, 실제 측정 값: m/z=1835.60 [M+H]⁺.

실시예 6. 화합물 10의 제조

화합물 Ⅱ(1.0 g, 0.6 mmol)을 15 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.2 mL, 1.2 mmol) 및 4-(3'-브로모페네톡시)벤즈알데히드(0.24 g, 0.8 mmol)를 넣어, 65 ℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.14 mL, 1.8 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.1 g, 1.2 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 메틸 tert-부틸에테르(70 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 10(0.65 g의 백색 고체, 수율: 58 %)을 얻는다.

C₈₈H₁₀₁BrCl₂N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1878.54, 실제 측정 값: m/z=1879.54 [M+H]⁺.

실시예 7. 화합물 11의 제조

화합물 11의 제조 방법은 화합물 8의 제조 방법과 동일하고, 사용되는 알데히드를 4-(4'-트리플루오로메틸페네톡시)벤즈알데히드로 대체한다. 화합물 11(0.68 g의 백색 고체, 수율: 61 %)을 얻는다.

C₈₉H₁₀₁Cl₂F3N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1868.62, 실제 측정 값: m/z=1869.64 [M+H]⁺.

실시예 8. 화합물 12의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-(4'-메톡시메틸페네톡시)벤즈알데히드(0.1 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65 ℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 12(0.22 g의 백색 고체, 수율: 40 %)를 얻는다.

C₈₉H₁₀₄Cl₂N₁₀O₂₈ 분자량 계산 값: 1830.64, 실제 측정 값: m/z=1831.64 [M+H]⁺.

실시예 9. 화합물 13의 제조

화합물 13의 제조 방법은 화합물 12의 제조 방법과 동일하고, 사용되는 알데히드를 4-(4'-클로로페닐프로폭시)벤즈알데히드로 대체한다. 화합물 13(0.31 g의 백색 고체, 수율: 56 %)을 얻는다.

C₈₉H₁₀₃Cl₃N₁₀O₂₇ 분자량 계산 값: 1848.61, 실제 측정 값: m/z=1849.62 [M+H]⁺.

실시예 10. 화합물 16의 제조

화합물 Ⅱ(1.0 g, 0.6 mmol)을 15 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.2 mL, 1.2 mmol) 및 4-(4'-클로로페네틸티오)벤즈알데히드(0.22 g, 0.8 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.14 mL, 1.8 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.1 g, 1.2 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 메틸 tert-부틸에테르(70 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 16(0.55 g의 백색 고체, 수율: 50 %)을 얻는다.

C₈₈H₁₀₁Cl₃N₁₀O₂₆S 분자량 계산 값: 1850.57, 실제 측정 값: m/z=1851.57 [M+H]⁺.

실시예 11. 화합물 18의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-(4'-메틸-N-Fmoc-벤질아미노)벤즈알데히드(0.18 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65℃ →에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 디에틸아민(1 mL)을 넣어 3 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 18(0.24 g의 백색 고체, 수율: 44 %)을 얻는다.

C₈₈H₁₀₃Cl₂N₁₁O₂₆ 분자량 계산 값: 1799.65, 실제 측정 값: m/z=1800.65 [M+H]⁺.

실시예 12. 화합물 20의 제조

화합물 20의 제조 방법은 화합물 18의 제조 방법과 동일하고, 사용되는 알데히드를 4-(N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드로 대체한다. 화합물 20(0.35 g의 백색 고체, 수율: 65 %)을 얻는다.

실시예 13. 화합물 21의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-(4'-클로로-N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드(0.19 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 디에틸아민(1 mL)을 넣어 3 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 21(0.2 g의 백색 고체, 수율: 36 %)을 얻는다.

C₈₈H₁₀₂Cl₃N₁₁O₂₆ 분자량 계산 값: 1833.61, 실제 측정 값: m/z=1834.60 [M+H]⁺.

실시예 14. 화합물 23의 제조

화합물 23의 제조 방법은 화합물 21의 제조 방법과 동일하고, 사용되는 알데히드를 4-(4'-메톡시-N-Fmoc-페네틸아미노)벤즈알데히드로 대체한다. 화합물 23(0.3 g의 백색 고체, 수율: 55 %)을 얻는다.

C₈₉H₁₀₅Cl₂N₁₁O₂₇ 분자량 계산 값: 1829.66, 실제 측정 값: m/z=1830.65 [M+H]⁺.

실시예 15. 화합물 25의 제조

화합물 Ⅱ(0.5 g, 0.3 mmol)을 10 mL의 DMF-메탄올(1:1, v/v)로 균일하게 교반하고, DIEA(0.1 mL, 0.6 mmol) 및 4-(4'-클로로-N-Fmoc-암페타미노)벤즈알데히드(0.2 g, 0.4 mmol)를 넣어, 65℃에서 2 h 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키며, TFA(0.07 mL, 0.9 mmol) 및 보란 tert-부틸아민(0.05 g, 0.6 mmol)을 넣어 실온에서 계속하여 2 h 동안 교반한 다음, 디에틸아민(1 mL)을 넣어 3 h 동안 교반하고, 반응액에 메틸 tert-부틸에테르(50 mL)를 넣어, 흡인 여과하여 침전을 수집하며, 잔여물을 역상 폴리머 필러로 정제하고, 메탄올-0.04 %의 TFA 수용액(1:4, v/v)으로 용리하며, 농축 건조시킨 후 화합물 25(0.36 g의 백색 고체, 수율: 65 %)를 얻는다.

C₈₉H₁₀₄Cl₃N₁₁O₂₆ 분자량 계산 값: 1847.62, 실제 측정 값: m/z=1848.63 [M+H]⁺.

실시예 16. 염화(salify) 실시예

50 mg의 화합물 8을 1 mL의 포화 염화수소 메탄올 용액에 넣고, 실온에서 교반하며, 동결 건조시켜, 백색 고체인 50 mg의 화합물 8의 염산염을 얻는다.

이 밖에, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산, 포름산, 초산, 프로피온산, 옥살산, 말론산, 호박산, 푸마르산, 말레산, 젖산, 사과산, 주석산, 구연산, 피크린산, 메탄술폰산, 아스파르트산 또는 글루타민산으로 상기 포화 염화수소 메탄올 용액 중의 염화수소를 각각 대체하여 대응되는 염을 얻는다.

실시예 17. 제제 실시예

본 실시예는 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하지 않음을 이해해야 한다. 용어 "활성 성분”은 본 발명의 화합물, 용매화물, 이의 호변 이성질체, 광학 이성질체, 프로드러그, 약학적으로 허용 가능한 염 등을 의미한다.

하기와 같은 방식으로 정맥내 제제를 제조할 수 있다.

활성 성분: 100 mg

등장성 식염수: 1000 mL

상기 성분의 용액은 일반적으로 1 mL/분의 속도로 환자에게 정맥내 투여된다.

실시예 18. 화합물의 세균 발육 억제 활성 측정

표 1의 화합물에 대해 세균 발육 억제 활성 측정을 진행하되, 최소 저지 농도 값(MIC)을 기록하고, 측정 방법은 "중화인민공화국약전”(2015년 판)에서 제공된 방법을 참조한다. MRSA 검출균은 ATCC로부터 구매하고, VRE 검출균은 상하이 화산 병원 임상 분리 약제 내성 균주 07-W3-45로부터 유래되며, 공지된 항생제인 오리타반신(인산염)은 대조약이고, 비교 시험 결과는 표 2와 같다.

동시에, 표 1의 화합물의 제브라피시(Zebrafish) 독성 실험을 진행하였다. 야생 AB계 제브라피시를 랜덤으로 선택하여 6-웰판에 놓고, 각각 50 ng/꼬리, 100 ng/꼬리, 150 ng/꼬리, 200 ng/꼬리 및 250 ng/꼬리인 용량으로 각 피험 샘플에 정맥 주사한 동시에, 정상 대조군 및 용매 대조군(인산 수용액)을 설정하였다. 실험 과정에서, 매일 제브라피시의 사망 상황을 관찰 기록하고 죽은 제브라피시를 제거한다. 72 h 동안 처리한 후, 제브라피시의 사망 상황을 통계한다. 제브라피시에 대한 시험에 제공되는 각 시약의 LD₅₀을 각각 계산한다. 결과를 표 2에 병합한다.

[표 2] MRSA, VRE에 대한 표 1의 각 화합물의 MIC(μg/ mL) 제브라피시 LD₅₀

모든 샘플에 대해 인산염 방식으로 제브라피시 독성 실험을 진행하였다.

표 2로부터 알 수 있는 바, 2세대 글리코펩티드계 약물인 오리타반신에 비해, 본 발명의 화합물은 약제 내성 균주 MRSA 또는 VRE에 대해 더욱 높은 억제 활성 또는 더욱 작은 독성, 더욱 높은 안전성을 구비한다.

이상 본 발명의 구체적인 실시예를 상세하게 설명하였지만, 이는 단지 예시적인 것으로, 본 발명은 이상 설명된 구체적인 실시예에 한정되지 않는다. 본 기술분야의 통상의 기술자에게 있어서, 본 발명에 대해 진행한 임의의 균등한 수정 및 대체도 모두 본 발명의 범위에 속해야 한다. 따라서, 본 발명의 정신 및 범위를 벗어나지 않는 전제 하에 진행한 균등한 변환 및 수정은 모두 본 발명의 범위 내에 포함되어야 한다.

Claims

메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 및 반코마이신 내성 장구균(VRE)의 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물로서,
일반식 Ⅰ로 표시되는 글리코펩티드계 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 충족시키고,

상기 일반식 Ⅰ에서,
R은 식 ―A―D―E―G로 표시되며;
A는 벤젠 고리이고;
D는 ―O― 또는 ―NH―이며;
E는 ―(CH₂)_m―이고, m은 1 내지 3이며;
G는 구조식 이고; 여기서 L은 할로겐, 트리플루오로메틸, 메톡시 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물.
제1항에 있어서,
R은 4-(4'-클로로벤질옥시)페닐, 4-(4'-플루오로페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페네톡시)페닐, 4-(4'-브로모페네톡시)페닐, 4-(3'-브로모페네톡시)페닐, 4-(4'-트리플루오로메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-메톡시메틸페네톡시)페닐, 4-(4'-클로로페닐프로폭시)페닐, 4-(4'-클로로벤질아미노)페닐, 4-(4'-클로로페네틸아미노)페닐, 4-(4'-트리플루오로메틸페네틸아미노)페닐 및 4-(4'-클로로암페타미노)페닐 중 어느 하나로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물.
약물 제제로서,
활성 성분으로서 제1항에 따른 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 및 반코마이신 내성 장구균(VRE)의 약제 내성 박테리아 활성에 대한 저항성을 갖는 글리코펩티드계 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 또는 반코마이신 내성 장구균(VRE)의 약제 내성 박테리아 감염성 질환 치료용 약물 제제.
제3항에 있어서,
상기 제제는 주사제, 경구 투여 제제, 링거 주사제 또는 외용 제제인 것을 특징으로 하는 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 또는 반코마이신 내성 장구균(VRE)의 약제 내성 박테리아 감염성 질환 치료용 약물 제제.
제3항에 있어서,
상기 글리코펩티드계 화합물의 중량 백분율은 0.1 % ~ 99.9 %인 것을 특징으로 하는 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 또는 반코마이신 내성 장구균(VRE)의 약제 내성 박테리아 감염성 질환 치료용 약물 제제.
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