KR102533519B1 - 키나아제 jak 저해제로서 피라졸[1,5-a]피리미딘 유도체 - Google Patents

키나아제 jak 저해제로서 피라졸[1,5-a]피리미딘 유도체 Download PDF

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Abstract

하기 일반식 (I)의 화합물 또는 이의 산 부가 염으로서, 여기서 R1은 할로겐 및 C1-C3 알콕실로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐, 또는 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴로서, 이것은 -NH2, 할로겐, 알킬 C1-C4, 알콕실 C1-C3, 및 N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환된다. 상기 화합물은 키나아제 JAK1/JAK3 저해제의 활성을 가지며, 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료에서 사용될 수 있다.

Description

키나아제 JAK 저해제로서 피라졸[1,5-A]피리미딘 유도체
본 발명은 티로신 키나아제 JAK, 특히 JAK1/JAK3, 저해제의 활성을 나타내는 신규한 화합물인 피라졸로[1,5-a]피리미딘 유도체에 관한 것이다. 상기 화합물은 키나아제 JAK1 및 JAK3과 관련된 병인(pathogenesis)에서 질환의 치료에 사용될 수있다. 특히, 상기 화합물은 면역학적 반응 조절인자, 예를 들어 장기 이식 분야의 면역억제제로서 사용될 수 있으며, 자가 면역성 질환 및 염증성 질환의 치료에서 사용될 수 있다.
야누스 키나아제(Janus kinases) JAK는 JAK-STAT 신호 전달 경로에서 사이토 카인 및 케모카인의 유도된 신호의 세포내 전달(intracellular transduction)에 관여하는 비-수용체성 티로신 키나아제의 패밀리이다. 이들은 STAT 단백질의 활성화 및 유전자 전사의 개시, 특히 염증 매개체를 암호화하는 유전자에서 중요한 역할을 한다. 세포에서 전사 인자 STAT의 활성은 그것의 인산화 수준에 의존한다. 세포에서 인산화 수준의 증가는 키나아제 JAK 활성에 의존하며; 키나아제의 저해는 STAT 단백질의 인산화 및 전사 활성의 감소와 결과적으로 조절된 유전자의 발현 감소를 유발한다. 따라서, 키나아제 JAK 저해제는 자가 면역성 질환의 기초가 되는 염증 상태의 유도 및 유지를 담당하는 특정 신호 전달 경로를 차단한다. 염증성 질환의 전개 및 임상 경과에 관여하는 사이토카인이 JAK-STAT 경로를 활성화시키는 것이 반복적으로 확인되었고, 후자는 류마티스 관절염, 건선 및 천식과 같은 질환의 전개 및 임상 경과에서 중요한 요소가 된다. 전-염증성(pro-inflammatory) 사이토카인에 의해 유도된 림프구 T에서 JAK 키나아제의 자극은 STAT 전사 인자의 활성화로 이어진다. 이것은 면역글로불린 E의 생산을 향상시키기 위해 림프구 B를 자극하는 림프구 T의 분화에 영향을 미치고 호산구의 점증 및 성숙(eosinophils recruitment and maturation)을 담당하여, 이것은 국소 염증 반응의 전개를 일으킨다. STAT 인자의 인산화를 차단함으로써, 키나아제 JAK 저해제는 림프구 T 집단의 분화 및 염증 반응을 저해할 수 있고, 이에 따라 염증성 질환의 치료에서 유용할 수 있다.
JAK 패밀리는 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2의 4개로 공지된 구성원(members)을 포함한다. 키나아제 JAK1, JAK2 및 TYK2는 편재하여(ubiquitously) 발현되는 반면, 키나아제 JAK3은 주로 조혈 세포에서 발현된다. 따라서 JAK3 저해의 효과는 면역계로 제한될 것으로 여겨진다. JAK3은 막-관통성 γc 수용체를 통해 인터류킨류 IL2, IL4, IL7, IL9, IL15 및 IL21에 의해 활성화된다. JAK3과 유사하게, JAK1은 IL-2 수용체와 관련되고 JAK3과 함께 IL-2 신호 전달 캐스케이드(signalling cascade)를 매개하여 T 세포 증식을 조절한다. JAK1은 또한 염증 반응과 관련된, IL-6 및 IFN-감마 신호 전달에서 역할을 한다. JAK3 및/또는 JAK1 저해제는 면역 학적 반응 조절제, 특히 장기 이식에서 이식 거부 반응을 예방하고 자가 면역성 질환 및 염증성 질환의 치료에 사용되는 약제를 찾는데 있어서 관심있는 표적이다.
키나아제 JAK1 및/또는 JAK3 저해, 특히 JAK2에 대하여 선택적인, 활성을 나타내는 화합물을 찾고 있다.
WO 2014/039595A1호는 JAK2에 대해 선택적인 JAK3 및/또는 JAK1 저해제 및 만성 염증성 질환 및 자가 염증성 질환의 치료를 위한 잠재적인 약제로서 하기 화학식의 이미다조[1,2-b]피리다진-6-카복사미드 코어를 갖는 화합물을 개시한다:
Figure 112019118729710-pct00001
WO 2012/125893호는 JAK2에 대해 선택적인 JAK3 및/또는 JAK1 저해제 및 만성 염증성 질환 및 자가 염증성 질환의 치료를 위한 잠재적인 약제로서 하기 화학식의 피롤로[1,2-b]피리다진-6-카복사미드 코어를 갖는 화합물을 개시한다:
Figure 112019118729710-pct00002
WO 2012/125886호는 JAK2에 대해 선택적인 JAK3 및/또는 JAK1 저해제 및 만성 염증성 질환 및 자가 염증성 질환의 치료를 위한 잠재적인 약제로서 하기 화학식의 피롤로[1,2-b]피리다진-6-카복사미드 코어를 갖는 화합물을 개시한다:
Figure 112019118729710-pct00003
WO 2011/014817호는 특정 화합물로서 개시되어 있는, 피롤로[1,2-b]피리다진-6-카복사미드 코어를 갖는 하기 화학식의 단지 유도체인 비시클릭 헤테로시클릭 코어를 갖는 JAK3 저해제 화합물을 개시한다:
Figure 112019118729710-pct00004
US 2010/0105661호는 바람직하지 않거나 비정상적인 사이토카인 신호 전달과 관련된 질환에 사용하기 위한 키나아제 JAK3 저해제로서 하기 화학식의 피롤로[2,3-b]피리딘 코어를 갖는 화합물을 개시하고 있다:
Figure 112019118729710-pct00005
발명의 요약
염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료에 잠재적으로 유용할 수 있는 높은 효능 및/또는 선택성의 키나아제 JAK 저해 능력을 나타내는 신규한 화합물에 대한 요구가 존재한다. 이러한 문제는 본 발명에 의해 해결된다.
본 발명의 목적은 하기 일반식 (I)의 화합물 또는 이의 산 부가 염으로서:
Figure 112019118729710-pct00006
여기서 R1은 하기를 나타낸다:
- 할로겐 및 C1-C3 알콕시로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐;
또는
- 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원(membered) 헤테로아릴로서, 이것은
- NH2,
- 할로겐,
- 알킬 C1-C4,
- 알콕실 C1-C3, 및
- N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴;
로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환되는 것인, 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴이다.
화학식 (I)의 화합물은 JAK2에 대한 키나아제 JAK3 및/또는 JAK1의 선택적인 저해 능력을 가지며, 자가 면역성 질환 및 염증성 질환의 치료에 사용될 수 있다.
추가의 양태에서, 본 발명은 또한 약제(medicament)로서 사용하기 위한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 또한 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 또한 자가 면역성 질환 및 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 용도에 관한 것이다.
추가의 양태에서, 본 발명은 또한 포유동물 대상체(mammal subject)에서 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료 방법에 관한 것으로서, 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 치료학적 유효량을 상기 대상체에 투여하는 단계를 포함한다.
추가의 양태에서, 본 발명은 또한 포유동물 대상체에서 자가 면역성 질환 및 염증성 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
발명의 상세한 설명
본 발명의 바람직한 실시 형태는 하기의 상세한 설명 및 첨부된 특허 청구 범위에 기재되어 있다. 본 발명의 다양한 양태는 본 명세서에서 보다 상세하게 정의된다. 이와 같이 정의된 각각의 양태는 달리 명확하게 지시되지 않는 한 임의의 다른 양태 또는 양태들과 조합될 수 있다. 특히, 바람직하거나 유리한 것으로 표시된 임의의 특징은 바람직하거나 유리한 것으로 표시된 임의의 다른 특징 또는 특징들과 조합될 수 있다.
"실시 형태 중 하나" 또는 "실시 형태"에 대한 설명 전체에 대한 언급은 이 실시 형태와 관련하여 설명되는 특정의 특징, 구조 또는 특성이 본 발명의 적어도 하나의 실시 형태에 포함되는 것을 의미한다. 따라서, 본 설명의 다양한 부분에서 "일 실시 형태에서" 또는 "실시 형태에서" 라는 어구의 존재는 반드시 동일한 것과 관련된 것은 아니지만, 가능할 수도 있다. 또한, 특정의 특징, 구조 또는 특성이 하나 이상의 실시 형태에서, 본 개시의 당업자에게 이해될 수 있는 임의의 적절한 방식으로 조합될 수 있다. 또한, 본 명세서에 기술되는 일부 실시 형태는 다른 실시 형태에 포함되는 일부이며 다른 특징들을 포함하지 않지만, 다양한 실시 형태의 특징들의 조합은 본 발명의 범위에 포함되고 실시 형태의 다양한 예들을 형성할 수 있는데, 이것은 당업자에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 첨부된 특허 청구 범위에서, 청구된 실시 형태 중 임의의 것이 임의의 조합으로 사용될 수 있다.
첫번째 양태에서, 본 발명은 하기 일반식 (I)의 화합물 또는 이의 산 부가 염을 제공한다:
Figure 112019118729710-pct00007
여기서 R1은 하기를 나타낸다:
- 할로겐 및 C1-C3 알콕시로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐; 또는
- 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴로서, 이것은
- NH2,
- 할로겐,
- 알킬 C1-C4,
- 알콕실 C1-C3, 및
- N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴;
로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환되는 것인, 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴.
본 발명의 일 실시 형태에서, R1이 할로겐 원자 및 C1-C3 알콕실로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐을 나타낸다.
본 발명의 일 실시 형태에서, R1이 1개 또는 2개의 할로겐 원자, 바람직하게는 1개 또는 2개의 불소 원자로 치환된 페닐을 나타낸다. 유리하게는, R1은 1개의 불소 원자로 치환된 페닐을 나타낸다. 또한 유리하게는, R1은 2개의 불소 원자로 치환된 페닐을 나타낸다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, R1이 1개 또는 2개의 C1-C3 알콕실기, 바람직하게는 메톡시기로 치환된 페닐을 나타내며, 특히, 2-메톡시페닐, 4-메톡시페닐 및 5-메톡시페닐, 특히 4-메톡시페닐 및 5-메톡시페닐을 함유하는 1개의 메톡시기로 치환된 페닐을 나타낸다.
본 발명의 일 실시 형태에서, R1은 1개의 할로겐 원자, 바람직하게는 1개의 불소 원자, 및 1개의 C1-C3 알콕시기, 특히 메톡시로 치환된 페닐을 나타낸다. 유리하게는 R1은 1개의 불소 원자 및 1개의 메톡시기로 치환된 페닐을 나타낸다. 이러한 치환의 예로는 2-플루오로-5-메톡시페닐 및 2-플루오로-4-메톡시페닐, 특히 2-플루오로-5-메톡시페닐을 들 수 있다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, R1은 1개 또는 2개의 질소 원자를 포함하는 6-원 헤테로아릴을 나타내는 것으로서, 이것은 NH2; 할로겐; C1-C4 알킬; C1-C3 알콕실; 및 N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환된다.
일 실시 형태에서, R1은 비치환된 6-원 헤테로아릴, 특히 피리디닐 또는 피리미디닐을 나타낸다.
다른 실시 형태에서, R1은 6-원 헤테로아릴, 특히 피리디닐 또는 피리미디닐을 나타내는 것으로서, 이것은 NH2; 할로겐; C1-C4 알킬; C1-C3 알콕실; 및 N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된다.
특히, 상기에서 언급된 6-원 헤테로아릴, 바람직하게는 피리디닐 또는 피리미디닐은, NH2; 할로겐, 특히 불소; C1-C4 알킬, 특히 메틸 또는 에틸; C1-C3 알콕실, 특히 메톡실 또는 에톡실; 및 N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴, 특히 4-모르폴리닐로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환된다. 유리하게는, 실시 형태에서, 상기에서 언급된 R1은 피리딘-2-일, 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일을 나타내거나, 또는 R1은 피리미딘-2-일 또는 피리미딘-5-일을 나타낸다.
특히, 상기에서 언급된 6-원 헤테로아릴은 피리디닐, 특히 피리딘-2-일, 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일이고, 이것은 C1-C3-알콕실, 특히 메톡실 또는 에톡실로 치환된다.
특히, 상기에서 언급된 6-원 헤테로아릴은 피리디닐, 특히 피리딘-2-일, 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일이고, 이것은 메톡실로 치환된다.
특히, 상기에서 언급된 6-원 헤테로아릴은 피리미디닐, 특히 피리미딘-2-일 또는 피리미딘-5-일이고, C1-C3-알콕실, 특히 메톡실 또는 에톡실로 치환된다.
정의
본 명세서에서 단독으로 또는 다른 치환기의 일부로서 사용되는 용어 "알킬"은 단일의 탄소-탄소 결합과 연결된 직쇄 또는 분기쇄를 가지며 정의에서 지시된 탄소 원자 수를 갖는 탄화수소기에 관한 것으로서, 예를 들면 C1-C4 또는 C1-C3이다. 탄소 원자 다음에 주어진 수는 상기 기에 포함될 수 있는 탄소 원자의 수에 관한 것이다. 따라서, 예를 들어, C1-C4-알킬은 1개 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 알킬을 의미하고, C1-C3 알킬은 1개 내지 3개의 탄소 원자를 갖는 알킬을 의미한다. C1-C3 알킬기는 메틸, 에틸, n-프로필, 및 이소-프로필이고, C1-C4 알킬기는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 2차-부틸, 및 3차-부틸이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로시클릴"은 헤테로시클릭기로부터 유도된 치환기, 즉 표시된 수(indicated number)의 고리-원(ring members) 및 표시된 수 및 종류의 헤테로원자를 갖는 지환족 포화 탄화수소기에 관한 것이다. "헤테로시클릴"은, 예컨대 모르폴리닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라히드로피라닐 및 디옥사닐, 특히 피페리디닐, 모르폴리닐 및 피롤리디닐과 같은 산소(O) 및 질소(N)로부터 선택된 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 포화 헤테로시클릭 고리를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 헤테로아릴기로부터 유도된 치환기, 즉 표시된 수의 고리-원 및 표시된 수 및 종류의 헤테로원자를 갖는 방향족 탄화수소 시클릭기에 관한 것이다. 6-원 헤테로아릴은 특히 피리디닐, 피리다지닐, 피리 미디닐 및 피라지닐, 특히 피리디닐 및 피리미디닐을 포함한다.
할로겐은 불소 (F), 염소 (Cl), 브롬 (Br) 또는 요오드 (I) 원자, 특히 불소 원자에 관한 것이다.
본 발명의 화학식 (I)의 화합물의 산 부가 염은 특히 약제학적으로 허용가능한 무기 또는 유기산을 갖는 염을 포함한다. 약제학적으로 허용가능한 염이 바람직하다. 염기성 질소 원자를 포함하는 화합물과 약제학적으로 허용가능한 염을 형성할 수 있는 무기산 및 유기산은 당업계에 잘 알려져있다. 무기산을 갖는 염은 특히 염산, 브롬화수소산, 황산 (VI), 질산 (V), 및 인산 (V)의 염을 들 수 있다. 유기산을 갖는 염은 특히 메탄술폰산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 벤젠술폰산, 나프탈렌디술폰산, 아세트산, 프로피온산, 락트산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 푸마르산, 말레산 및 벤조산의 염을 들 수 있다. 본 발명의 범위에는 또한 본 발명의 화합물의 제조, 분리 및 정제 공정에서 중간체로서 특히 유용한 약제학적으로 허용되는 것 이외의 염이 포함된다는 것을 이해해야 한다.
산 부가 염은 일반적으로 공지된 방식으로 제조될 수 있다. 전형적으로, 화학식 (I)의 화합물, 예를 들어 유기 용매 중의 용액에서 메탄올성 또는 에탄올성 수용액과 같은 수용성 또는 수용성-알코올성 용액에서 산과 반응하고, 침전된 염은 여과, 세척 및 건조와 같은 통상적인 방식으로 분리된다.
본 발명의 특정 화합물은 무기산 및 유기산 부가 염을 포함하는, 하기의 화합물 및 이의 산 부가 염의 군으로부터 선택된다:
1) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(4-메톡시페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
2) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-플루오로-5-메톡시페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
3) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
4) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
5) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-에톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
6) (R)-2-(6-아미노피리딘-3-일)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
7) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-모르폴리노피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
8) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
9) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-에톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
10) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-플루오로피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
11) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
12) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메틸피리딘-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
13) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-모르폴리노피리딘-4-일)-피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
14) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 히드로클로라이드.
추가의 측면에서, 본 발명은 약제로서 사용하기 위한 상기 정의된 바와 같은 그리고 어느 하나의 실시 형태에 따른 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
추가의 측면에서, 본 발명은 약제학적 부형제와 조합한, 유효 성분(active ingredient)으로서 상기 정의된 바와 같은 그리고 어느 하나의 실시 형태에 따른 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
키나아제 JAK1/JAK3 저해제로서, 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물은 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료를 위해 유용할 수 있다.
따라서, 본 발명은 인간을 포함하는, 포유동물에서 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물에 관한 것이다.
따라서, 본 발명은 인간을 포함하는, 포유동물에서 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 인간을 포함하는, 포유동물에서 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료 방법에 관한 것으로서, 이것은 치료학적 유효량의 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물 또는 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 상기 포유동물에 투여하는 단계를 포함한다.
만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환은 연결 조직의 전신성 질환, 특히 류마티스 관절염, 반응성 관절염, 건선성 관절염, 강직성 척추염, 전신성 홍반 루푸스(systemic lupus erythematosus), 피부경화증(scleroderma); 비-특이적 염증성 장질환(non-specific inflammatory bowel diseases), 특히 크론병(Crohn disease) 및 궤양성 대장염; 부신 질환(adrenal glands diseases), 특히 다발성 경화증 및 근무력증(myasthenia); 피부 질환, 특히 건선; 및 천식을 들 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 장기 이식에서 이식 거부 반응의 예방을 위한 용도를 찾을 수 있다.
본 발명의 화합물은 반응식(Scheme) 1에 제시된 방법에 의해 제조될 수 있다.
다음의 약어가 사용된다:
AcOEt - 에틸 아세테이트; Boc - 3차-부톡시카보닐기; CN - 니트릴기; (COCl)2 - 옥살릴 클로라이드; Et - 에틸; EtO - 에톡실; LiOH - 수산화리튬; Me - 메틸; MeCN - 아세토니트릴; MS-ESI - 전기분무 질량 분석기; m/z - 질량 대 전하 비율; NH4OH - 수성 암모니아, 암모니아수; NMR - 핵자기 공명; Pd/C - 탄소 상의 팔라듐; POCl3 - 인(V) 옥시클로라이드; TFA -트리플루오로 아세트산.
반응식 1
Figure 112019118729710-pct00008
반응식 1에 나타난 바와 같이, 화학식 (I)의 화합물은 화학식 II의 5-아미노-3-브로모-1H-피라졸로부터 출발하여 제조된다.
화학식 II의 화합물을 환류 온도에서의 아세트산 중에서 1 내지 2 몰 당량의 양으로 사용된 디에틸 2-(에톡시-메틸렌)-말로네이트 III으로 고리화시켜, 화학식 IV의 피라졸로[1,2-b]피리미딘을 수득한다.
화학식 IV의 화합물에서 히드록시기는, 인(V) 옥시클로라이드, 인 펜타클로라이드, 티오닐 클로라이드, 바람직하게는 인(V) 옥시클로라이드와 같은 시약을 2 내지 30 몰 당량의 양으로 사용하여, 트리에틸아민, 디이소프로필-에틸아민, 피리딘, 퀴놀린, N,N-디메틸아닐린과 같은 아민을, 1 내지 5 몰 당량의 양으로 존재 하에서 또는 아민의 부재 하에서, 테트라에틸암모늄, 테트라부틸암모늄 또는 벤질트리에틸암모늄 브로마이드 또는 클로라이드와 같은 염을 1 내지 3 몰 당량의 양으로 첨가하거나 또는 첨가하지 않고, 비양성자성 용매 예컨대 아세토니트릴, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 톨루엔, 디메틸포름아미드, 메틸렌 클로라이드, 클로로포름 중에서 또는 용매의 부재 하에서, 60 내지 120℃에서 또는 환류에서, 염소로 치환된다.
화학식 V의 화합물은 WO 2014/039595 A1호(중간체 4)에 기재된 절차에 따라 수득된, 3차-부틸 (R)-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트 VI를 1 내지 1.5 몰 당량의 양으로 사용하고, 트리에틸아민, N,N-디이소프로필에틸아민 또는 피리딘과 같은 아민을 1 내지 3 몰 당량의 양으로 존재 하에서, 0 내지 30℃에서 반응시켜, 화학식 VII의 화합물을 수득한다.
이어서, 화학식 VII의 화합물에서 에스테르기는, 염기 예컨대 금속 수산화물, 바람직하게는 수산화리튬을 2 내지 10 몰 당량의 양으로 사용하여, 용매의 혼합물, 예컨대 물/알코올, 바람직하게는 물/메탄올 중에서, 20 내지 80℃, 바람직하게는 40 내지 55℃에서, 가수분해되어 산 VIII을 수득한다.
화학식 VIII의 화합물은 2-단계 공정으로 화학식 IX의 상응하는 아미드로 전환된다. 제1 단계에서, 산 클로라이드는 0 내지 30℃에서 촉매량의 디메틸포름아미드와 함께, 2 내지 4 몰 당량의 옥살릴 클로라이드와의 반응에서 제조된다. 후속적으로, 산 클로라이드를 0 내지 30℃에서 5 내지 20 몰 당량의 양으로 수성 암모니아와 반응시킨다.
화학식 IX의 화합물에서 아민 보호 3차-부톡시카보닐기는 0 내지 30℃에서 디클로로메탄 용액 중에 10 내지 40 몰 당량의 양으로 트리플루오로 아세트산을 사용하여 제거되어 화학식 X의 화합물을 수득한다.
이어서, 화학식 X의 화합물을 6-클로로피리다진-3-카르보니트릴을 1 내지 1.5 몰 당량의 양으로 사용하고, 아민 예컨대 트리에틸아민, N,N-디이소프로필에틸아민 또는 피리딘을 2 내지 10 몰 당량의 양으로 존재 하에서, 비양성자성 용매 예컨대 디메틸포름아미드 또는 디클로로메탄 또는 양성자성 용매 예컨대 메탄올 또는 에탄올 중에서 아릴화시켜(arylated), 화학식 XI의 화합물을 수득한다.
마지막 단계에서, 화학식 XI의 화합물은, 상응하는 보론산 XIIa 또는 화학식 XIIb의 보론산 피나콜 에스테르를 1 내지 2 몰 당량의 양으로, 팔라듐 촉매, 예컨대 팔라듐(II) 아세테이트, 비스(디벤질리덴아세톤)-팔라듐(0), [1,1'-비스(디페닐포스핀)페로센]팔라듐(II) 디클로라이드 디클로로메탄 부가물, 또는 기타 통상적인 스즈키 반응 촉매를 0.05 내지 0.2 몰 당량의 양으로, 무기 염기, 예컨대 탄산 나트륨, 탄산 칼륨 또는 탄산 세슘, 인산 나트륨 또는 인산 칼륨, 수산화 리튬, 수산화 나트륨 또는 수산화 칼륨, 또는 유기 염기 예컨대 나트륨 3차-부탄올레이트 또는 칼륨 3차-부탄올레이트를, 1 내지 3 몰 당량의 양으로 첨가하고, 고용체 또는 수성 용액으로 사용하여, 용매 예컨대 톨루엔, 크실렌, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 에탄올, 지방족 알코올 C3 내지 C6, 디메틸포름아미드 또는 디메톡시에탄 중에서, 80 내지 140℃, 바람직하게는 환류 온도에서, 스즈키 커플링 반응으로 반응시킨다.
화학식 VI의 화합물(3차-부틸 (R)-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트)은 반응식 3에 따라 US2005/182095 A1호 및 WO2014/039595 A1호에 기재된 절차에 따라 수득될 수 있다.
화학식 VI의 화합물은 2 내지 3 몰 당량의 양으로 사용되는 메틸화제, 예컨대 요오도메탄과의 반응에서 시판되는 3차-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 XVIII로부터 수득될 수 있는데, 이것은 염기, 예컨대 수소화 나트륨, 나트륨 메탄올레이트, 나트륨 3차-부탄올레이트, n-부틸리튬, 탄산칼륨, 바람직하게는 수소화 나트륨을 2 내지 3 몰 당량으로 사용하여, 비양성자성 용매, 예컨대 테트라히드로퓨란, 톨루엔, 디클로로메탄, 아세토니트릴, 바람직하게는 테트라히드로퓨란 중에서 반응하여, 3차-부틸 3,3-디메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 XIX를 수득한다.
다음 단계에서, 화학식 XIX의 화합물은 2-단계 환원성 아민화 반응으로 전환된다.
우선, 화학식 XIX의 화합물은 (R)-1-페닐에탄-1-아민 XX을 1 내지 2 몰 당량의 양으로 사용하여 반응시키고, 선택적으로 산 예컨대 파라-톨루엔술폰산, 벤젠술폰산 또는 황산, 바람직하게는 파라-톨루엔술폰산을 0.05 내지 1 몰 당량의 양으로 사용하고, 비양성자성 용매 예컨대 톨루엔, 벤젠 또는 크실렌, 바람직하게는 톨루엔을, 공비 증류를 위한 딘-스타크 트랩(Dean-Stark trap)이 장착된 반응기에서의 환류 온도에서, 화학식 XXI의 3차-부틸 (R)-3,3-디메틸-4-((1-페닐에틸)이미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하는데, 이것은 분리 없이 다음 반응에 사용된다.
이어서, 화학식 XXI의 화합물과의 반응 혼합물을 -78 내지 0℃의 온도로 냉각시키고, 알코올, 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 바람직하게는 에탄올, 및 환원제, 예컨대 나트륨 보로하이드라이드, 나트륨 시아노보로하이드라이드 또는 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드를 2 내지 3 몰 당량의 양으로 첨가하여 화학식 XXII의 (R)-3,3-디메틸-4-(((R)-1-페닐에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득한다.
마지막 단계에서, 화학식 XXII의 화합물에서 1-페닐에틸기 보호 아민기를 제거한다. 1-페닐에틸기는 0.01 내지 0.02 몰 당량의 양으로 사용된, 수소 및 Pd/C 촉매를 사용하여, 용매 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소-프로판올, 바람직하게는 에탄올 중에서 환원에 의해 제거되어, 화학식 VI의 화합물 즉, 3차-부틸 ((R)-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트를 수득한다.
화학식 II의 화합물(5-아미노-3-브로모-1H-피라졸)은 시판되고 있다. 또한, 『J. Org. Chem. 1986, 51, 4656-4660』 및 『J. Med. Chem. 2010, 53, 1238-1249』에 기재된 절차를 사용하여 1H-피라졸 XIV로부터 반응식 2에 제시된 방법에 의해 수득할 수 있다.
Figure 112019118729710-pct00009
본 발명은 또한 약제학적으로 허용가능한 부형제와의 혼합물로, 유효 성분으로서 상기에서 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 화학식 (I)의 화합물이 상기 언급된 장애 및 질환의 치료에서 화학적 화합물로서 투여될 수 있지만, 그러나 일반적으로 본 발명의 화합물 또는 약제학적으로 허용가능한 운반체(들) 및 보조 물질(들)과 조합한 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물의 형태로 사용될 수 있다.
상기 언급된 장애 및 질환의 치료에서, 본 발명의 상기 약제학적 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 바람직하게는 경구적, 비경구적 또는 흡입 경로에 의해 투여될 수 있고, 투여의 의도된 경로에 따라 의술(medicine)에서 사용을 위해 결정된 제제의 형태일 수 있다.
경구 투여를 위한 조성물은 고형 또는 액상 제제의 형태를 가질 수 있다. 고형 제제는 예컨대, 결합제 (예를 들면, 전호화된(pregelatinised) 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로오스); 필러 (예를 들면, 락토오스, 사카로오스, 카복시메틸셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스 또는 인산수소칼슘); 붕괴제 (예를 들면, 크로스포비돈, 옥수수 전분 또는 전분 글리콜산 나트륨); 윤활제 (예를 들면, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 실리카); 습윤제 (예를 들면, 나트륨 라우릴설페이트)와 같은 약제학적으로 허용가능한 불활성 부형제로부터 전통적인 방식으로 생산된, 예를 들면, 정제 또는 캡슐의 형태를 가질 수 있다. 정제는 예컨대, 단순 코팅, 지연된/방출-조절 코팅 또는 장용성 코팅과 같은 당업계에서 잘 공지된 코팅에 의해 코팅될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제는 예를 들면, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있거나, 또는 사용 전에 물 또는 기타 적절한 운반체(vehicle) 중에서 재구성을 위한 건조 고형 제품의 형태를 가질 수 있다. 이러한 액상 제제는 예컨대 현탁화제 (예를 들면, 소르비톨 시럽, 셀룰로오스 유도체 또는 수소첨가 식용유), 유화제 (예를 들면, 레시틴 또는 아카시아 검), 비수용성 부형제 (예를 들면, 만델릭 오일, 오일 에스테르, 에틸 알코올 또는 분별화된 식물성 오일), 및 보존제 (예를 들면, 메틸 또는 프로필 p-히드록시벤조에이트 또는 소르브산)과 같은 약제학적으로 허용가능한 불활성 부형제로부터 전통적인 수단을 이용하여 제조될 수 있다. 제제는 또한 적절한 완충 제제, 착향료, 착색료 및 감미료를 포함할 수 있다.
경구 투여를 위한 제제는 당업자에게 공지된 방법을 사용하여 유효 화합물의 방출된 조절을 얻기 위하여 제형화 될 수 있다.
투여의 비경구 경로는 근육내 및 정맥내 주사 뿐만 아니라 정맥내 주입에 의한 투여를 포함한다. 비경구 투여를 위한 조성물은, 예를 들면, 단위 제형, 예컨대 앰플 또는 보존제가 첨가된 다복용량(multi-dosage) 용기의 형태를 가질 수 있다. 조성물은 예컨대, 현탁액, 용액 또는 유성 또는 수성 운반체 내의 유화액의 형태를 가질 수 있으며, 예컨대 현탁제제, 안정화제, 및/또는 분산제와 같은 부형제를 포함할 수 있다. 그 대신에, 상기 유효 성분은 적절한 담체, 예를 들면, 멸균, 주사용 증류수에서의 사용 전에 재구성을 위한 분말로서 제형화될 수 있다.
흡입 경로를 통한 투여용 조성물은 흡입 형태일 수 있고 분무 (nebulization)에 의해 투여될 수 있다. 이러한 제제는 에어로졸로서 투여되는 활성 화합물 및 보조 물질(들), 즉, 가스 중에 현탁된 고형 또는 액상 물질의 미세하게 분할된 소입자 시스템을 포함한다. 분무에 사용되는 보조 물질은 예를 들어 등장화제로서의 염화나트륨, pH 조절제 및 안정화제로서의 무기산 및 수산화물, 방부제로서의 벤잘코늄 클로라이드, 완충제로서의 시트르산 나트륨, 계면 활성제로서의 폴리소르베이트 80, 보조 용매로서의 에탄올 및 프로필렌 글리콜 및 산화 방지제로서의 황산염(VI)일 수 있다. 흡입 경로에 의한 투여를 위한 제제는 가압 흡입기 또는 건조 분말 흡입기의 형태를 가질 수 있다.
본 발명의 화합물을 사용하는 치료 방법은 본 발명의 화합물의 치료학적 유효량, 바람직하게는 약제학적 조성물의 형태로 이러한 치료를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물의 제안된 복용량은 일회량 또는 분할량에서, 일일 0.1 내지 약 1000 mg이다. 다양한 요인, 예를 들면, 특정 화합물, 지시, 투여 방식, 환자의 연령 및 건강 상태에 의해 결정될 수 있는 원하는 생물학적 효과를 얻기 위한 필요 복용량의 선택은 당업자에게 명확할 수 있고, 이러한 정확한 복용량은 결국 주치의에 의해 결정될 수 있다.
실시예
하기 실시예들은 예시 목적을 위한 것이며 본 발명의 화합물의 제조에서 사용되는 중간체의 합성에 사용되는 통상적인 합성 방법에 따른다.
중간체
본 발명의 화합물의 제조를 위한 중간체는 하기에 기재된 바와 같이 제조되었다.
중간체 P1 . 화합물 VI 3차 -부틸 ( R )-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트
Figure 112019118729710-pct00010
단계 A: 화합물 XIX - 3차-부틸 3,3-디메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트
Figure 112019118729710-pct00011
0℃로 냉각된, 테트라히드로퓨란 (1000 mL) 중에 3차-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 XVIII (50.0 g, 246 mmol)의 용액에, 수소화 나트륨(파라핀유 중 60% 현탁액, 21.6 g, 541 mmol)을 소량씩(portionwise) 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물에 테트라히드로퓨란 (60 mL) 중의 요오도메탄 (34 mL, 541 mmol) 용액을 15분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 추가로 2 시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액(500 mL)을 혼합물에 첨가 하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 염수로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4) 감압 하에서 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 용리액: 헥산:AcOEt = 9:1, v/v)로 정제하였다. 고온의 헥산으로부터 결정화함으로써 생성물을 정제하였다. 생성물을 백색 결정으로 수득하였다(39.8 g, 175 mmol), 수율 71%. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.62 (t, J=6.4 Hz, 1H), 3.39 (s, 1H), 2.42 (t, J=6.4 Hz, 1H), 1.46-1.39 (m, 6H), 0.99 (s, 3H).
단계 B: 화합물 XXII - 3차-부틸 (R)-3,3-디메틸-4-(((R)-1-페닐에틸)-아미노)피페리딘-1-카복실레이트
Figure 112019118729710-pct00012
톨루엔 (1500 mL) 중의 3차-부틸 3,3-디메틸-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 XIX (100 g, 418 mmol)의 용액에 (R)-1-페닐에탄-1-아민 XX (59.7 mL, 460 mmol) 및 파라-톨루엔술폰산 (0.80 g, 4.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 공비 딘-스타크 트랩 하에 24 시간 동안 환류 교반하였다. 이렇게 하여 얻어진 화합물 XXI를 함유하는 혼합물을 분리 없이, -70℃로 냉각시키고, 에탄올(100mL)을 첨가하고 나트륨 보로하이드라이드 (19.0 g, 502 mmol)를 소량씩 첨가하였다. 온도를 서서히 실온으로 올리면서 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물에 물(300 mL)을 첨가하였고 부피를 1/3로 농축시켰다. 혼합물을 AcOEt (2 x 300 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 건조시키고(Na2SO4) 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액 헥산:AcOEt = 9:1, v/v)로 정제하였다. 생성물은 48%의 수율로 무색 오일(67.3 g, 418 mmol)로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.37-7.25 (m, 4H), 7.22-7.15 (m, 1H), 3.85-3.70 (m, 1H), 3.72 (q, J=6.5 Hz, 1H), 3.58-3.42 (m, 1H), 2.70-2.40 (m, 2H), 2.16 (dd, 1H, J=10.7, 6.51 Hz, 1H), 1.44 (s, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.22 (d, J=6.5 Hz, 3H), 1.18-1.02 (m, 1H), 0.92 (s, 3H), 0.76 (s, 3H).
단계 C: 화합물 VI - 3차-부틸 (R)-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트
Figure 112019118729710-pct00013
에탄올(1150 mL) 중의 3차-부틸 (R)-3,3-디메틸-4-(((R)-1-페닐에틸)아미노)-피페리딘-1-카복실레이트 XXII (44.9 g, 135 mmol)의 탈기된 용액에 10% Pd/C (4.0 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 베드(bed of Celite)를 통해 여과하였고 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액: AcOEt 대 AcOEt:메탄올 = 50:50, v/v)로 정제하였다. 생성물을 86%의 수율로 무색 오일(26.5 g, 116 mmol)로서 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.20-3,88 (m, 1H), 3.85-3.53 (m, 1H), 2.95-2.70 (m, 1H), 2.60-2.45 (m, 1H), 2.50 (dd, J=10.9, 4.2 Hz, 1H), 1.68-1.54 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.45-1.32 (m, 1H), 1.13 (bs, 2H), 0.93 (s, 3H), 0.82 (s, 3H).
중간체 P2 : ( R )-2-브로모-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 (화합물 XII )
Figure 112019118729710-pct00014
단계 1: 에틸 2-브로모-7-히드록시피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실레이트 IV
Figure 112019118729710-pct00015
아세트산(200 mL) 중의 5-아미노-3-브로모-1H-피라졸 II (20.0 g, 121 mmol)의 용액에 디에틸 에톡시메틸렌말로네이트 III (25.9 mL, 127 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 교반하면서 환류 가열하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 침전된 고체를 여과하였고, 에탄올 및 디에틸 에테르로 세척하였다. 생성물을 수율 81%을 갖는 크림색 고체(27.9 g, 97.4 mmol)로서 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C9H7BrN3O3 [M-H]- = 284.0, 측정치 284.0. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.37 (s, 1H), 6.15 (s, 1H), 4.50 (bs, 1H), 4.14 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.24 (t, J=7.1 Hz, 3H).
단계 2: 에틸 2-브로모-7-클로로피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실레이트 V
Figure 112019118729710-pct00016
단계 1에서 얻은 에틸 2-브로모-7-히드록시피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실레이트 IV (9.34 g, 32.6 mmol) 및 아세토니트릴 (180 mL) 중의 테트라부틸암모늄 클로라이드 (18.9 g, 65.3 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (22.9 mL, 163 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 인(V) 옥시클로라이드 (30.4 mL, 326 mmol)를 15분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 교반하면서 환류 가열하였다. 실온으로 냉각 한 후, 반응 혼합물을 포화 탄산나트륨 및 얼음의 혼합물에 부었다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 300 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액: 헵탄:AcOEt = 9:1 내지 8:2, v/v)로 정제하였다. 생성물을 69%의 수율로 담황색의 비정질 고체(6.86 g, 22.5 mmol)로서 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C9H8BrClN3O2 [M+H]+ = 303.9, 측정치 303.9. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.49 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.46 (t, J=7.1 Hz, 3H).
단계 3: 에틸 (R)-2-브로모-7-((1-(3차-부톡시카보닐)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실레이트 VII
Figure 112019118729710-pct00017
트리에틸아민 (8.05 mL, 57.7 mmol)을 단계 2에서 얻어진 에틸 2-브로모-7-클로로피라졸로[1,5-a]피리디민-6-카복실레이트 VI (5.86 g, 19.2 mmol)의 아세토니트릴 (150 mL)용액에 첨가하였다. 이어서, 아세토니트릴 (30 mL) 중의 3차-부틸 (R)-4-아미노-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트 VI (중간체 P1) (4.61 g, 20.2 mmol)의 혼합 용액에 15분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반한 다음 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 AcOEt (100 mL)에 용해시켰고 물 (100 mL)을 첨가하였다. 상 분리 후, 수성 상을 AcOEt (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 염수로 세척하였고, 건조시키고(Na2SO4) 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액: 헵탄:AcOEt = 95:5 내지 85:15, v/v)로 정제하였다. 생성물을 수율 85%을 갖는 크림색의 비정질 고체(8.08 g, 16.3 mmol)로서 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C21H31BrN5O4 [M+H]+ = 496.2, 측정치 496.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.84 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.70 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.32 (t, J=8.6 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.20-3.95 (m, 1H), 3.93-3.65 (m, 1H), 3.13-2.93 (m, 1H), 2.90-2.70 (m, 1H), 2.08-1.95 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.41 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H).
단계 4: (R)-2-브로모-7-((1-(3차-부톡시카보닐)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실산 VIII
Figure 112019118729710-pct00018
에탄올 (200 mL) 및 물 (50 mL)의 혼합물 중에 단계 3에서 얻어진 에틸 (R)-2-브로모-7-((1-(3차-부톡시카보닐)-3,3-디메틸로피페리딘-4-일)-아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실레이트 VII (8.06 g, 16.2 mmol)의 용액에 수산화리튬 (3.41 g, 81.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 90분 동안 교반하면서 가열 하였다. 실온으로 냉각한 후, 에탄올을 감압 하에서 혼합물로부터 증발시켰다. 잔사에 물(100 mL)을 첨가한 후, 백색 고체가 침전될 때까지 1M 염산 수용액을 첨가 하였다. 고체를 여과하였고 물로 세척하고 건조시켰다. 이어서, 고체를 디클로로 메탄에 용해시키고, 건조시키고(Na2SO4) 감압 하에 증발시켰다. 97%의 수율로 크림색의 고체(7.37 g, 15.7 mmol)로서 수득된 미가공 생성물(Raw product)을 다음 단계에서 정제없이 사용하였다.
단계 5: 3차-부틸 (R)-4-((2-브로모-6-카르바모일피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)-아미노)-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트 IX
Figure 112019118729710-pct00019
단계 4로부터의 미가공 (R)-2-브로모-7-((1-(3차-부톡시카보닐)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)-피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복실산 VIII (7.37 g, 15.7 mmol)을 아르곤 분위기 하에서 건조 디클로로메탄 (200 mL)에 용해시켰다. 냉각 후, 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 옥살릴 클로라이드 (2.72 mL, 31.5 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 디메틸포름아미드(0.5 mL)를 점적(drop) 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 감압 하에서 증발시켰다. 잔사를 건조 디클로로메탄 (200 mL)에 용해시켰다. 혼합물에 25% 수성 암모니아(24.2 mL, 157 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 디클로로메탄을 감압 하에서 증발시켰다. 잔사에 물(200 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 AcOEt (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 증발시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액: 디클로로메탄:메탄올 = 97:3, v/v)로 정제하였다. 생성물을 수율 71%를 갖는 백색 결정(5.21 g, 11.1 mmol)으로 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C19H28BrN6O3 [M+H]+ = 467.1, 측정치 467.1. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.72 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.04 (bs, 2H), 5.27 (t, J=8.4 Hz, 1H), 4.20-3.93 (m, 1H), 3.90-3.63 (m, 1H), 3.15-2.90 (m, 1H), 2.90-2.67 (m, 1H), 2.02 (dq, J=7.3, 3.4 Hz, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.08 (s, 3H), 0.99 (s, 3H).
단계 6: (R)-2-브로모-7-((3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]-피리미딘-6-카복사미드 X
Figure 112019118729710-pct00020
디클로로메탄 (80 mL) 중의 단계 5로부터의 3차-부틸 (R)-4-((2-브로모-6-카르바모일피라졸로[1,5-a]피리미딘-7-일)아미노)-3,3-디메틸피페리딘-1-카복실레이트 IX (5.21 g, 11.1 mmol)의 용액에 트리플루오로 아세트산 (8.53 mL, 111 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 감압 하에서 증발시켰다. 잔사에 물(100 mL)을 첨가한 다음 pH = 12가 될 때까지 6 M 수산화나트륨을 첨가하였다. 혼합물로부터 백색 고체가 침전되었다. 혼합물을 AcOEt (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기상을 합하였고, 건조시키고(Na2SO4), 증발시켰다. 수율 100%를 갖는 백색 고체(4.09 g, 11.1 mmol)로 수득된 미가공 생성물을 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 7: (R)-2-브로모-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 XII
Figure 112019118729710-pct00021
단계 6으로부터의 미가공 (R)-2-브로모-7-((3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]-피리미딘-6-카복사미드 XI (2.05 g, 5.58 mmol)를 아르곤 분위기 하에서 건조 디메틸포름아미드 (50 mL)에 용해시켰다. 이 용액에 트리에틸아민 (3.91 mL, 27.9 mmol)에 이어서 6-클로로피리다진-3-카르보니트릴(963 mg, 6.69 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하면서 80℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 100 mL의 물을 첨가하고 혼합물을 AcOEt (3 x 100 mL)로 추출 하였다. 유기상을 합하였고, 건조시키고, 감압 하에서 증발시켰다. 잔사에 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고 감압 하에서 증발시켰다. 이것을 2회 반복하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 용리액: 디클로로메탄:메탄올 = 98:2, v/v)로 정제하였다. 생성물을 89%의 수율로 담황색 고체(2.35 g, 4.99 mmol)로서 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C19H21BrN9O [M+H]+ = 470.1, 측정치 470.1. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.06 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.50 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.04 (bs, 2H), 5,49 (dd, J=10.6, 4.2 Hz, 1H), 4.48 (d, J=13,3 Hz, 1H), 4,29 (d, J=13.6 Hz, 1H), 3.40 (ddd, J=13.6, 9.4, 3.3 Hz, 1H), 3.17 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.26 (dq, J=11.3, 3.6 Hz, 1H), 1.96-1.80 (m, 1H), 1.11 (s, 3H), 1.10 (s, 3H).
본 발명의 화합물은 하기 실시예에 기재된 바와 같이 일반적인 절차에 따라 중간체 P2 및 각각의 보론산 XIIa 또는 보론산 피나콜 에스테르 XIIb로부터 제조하였다.
일반적인 절차: 쉬링크 플라스크(Schlenk flask)에서의 탈기된 디옥산 (20 mL / 1 mmol P2) 중의 (R)-2-브로모-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 (중간체 P2) (1 eq.), [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로-팔라듐(II) 디클로로메탄 착물 (0,1 eq.) 및 각각의 보론산 (2 eq) 또는 보론산 피나콜 에스테르의 혼합물에 탈기된 2M 수성 인산 칼륨 (3 eq.) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 통과하여 아르곤을 15분 동안 퍼지하였다(purged). 플라스크를 꼭 닫고 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하면서 120℃로 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였고, 셀라이트 베드를 통해 여과하고 감압 하에서 농축시켰다. 유성의 잔사를 컬럼 크로마토그래피(실리카겔: 용리액: 헥산:AcOEt)로 정제하여 생성물을 얻었다.
실시예 1)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(4-메톡시-페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00022
화합물 P2 (51 mg, 0.11 mmol) 및 (4-메톡시페닐)보론산 (33, mg, 0.22 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체(29 mg, 0.058 mmol)로서 수율 53%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C26H28N9O2 [M+H]+ = 498.2, 측정치 498.2. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.51 (s, 1H), 7.92 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.66 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.67-7.47 (m, 2H), 7.35 (d, J=9.9 Hz, 1H), 7.03 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.71 (s, 1H), 5.82-5.70 (m, 1H), 4.67-4.55 (m, 1H), 4.42-4.25 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.50-3.38 (m, 1H), 3.21 (d, J=14.3 Hz, 1H), 2.42-2.27 (m, 1H), 2.05-1.85 (m, 1H), 1.12 (s, 6H).
실시예 2)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-플루오로-5-메톡시페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00023
화합물 P2 (47 mg, 0.10 mmol) 및 (2-플루오로-5-메톡시-페닐)보론산 (34 mg, 0.20 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체(25 mg, 0.049 mmol)로서 수율 49%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C26H27FN9O2 [M+H]+ = 516.2, 측정치 516.2. 1H　NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.22 (bs, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.19 (bs, 1H), 7.87 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.59 (dd, J=5.8, 3.2 Hz, 1H), 7.55 (bs, 1H), 7.49 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J=10.6, 9.2 Hz, 1H), 7.06 (dt, J=9.0, 3.5 Hz, 1H), 6.88 (d, J=3.3 Hz, 1H), 5.58-5.46 (m, 1H), 4.68 (d, J=13.7 Hz, 1H), 4.33 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.34-3.24 (m, 1H), 3.13 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.36-2.24 (m, 1H), 1.92-1.74 (m, 1H), 1.05 (s, 3H), 1.04 (s, 3H).
실시예 3)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00024
화합물 P2 (50 mg, 0.11 mmol) 및 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘 (45 mg, 0.22 mmol)을 사용하여 황색 무정형 고체 (40 mg, 0.085 mmol)로서 수율 78%로 수득하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C24H25N10O [M+H]+ = 469.2, 측정치 469.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.23 (d, J=6.2 Hz, 1H), 9.26 (dd, J=2.0, 0.5 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.65 (dd, J=4.7 Hz, 1H), 8.41 (dt, J=8.0, 1.9 Hz, 1H), 8.17 (bs, 1H), 7.87 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.56 (ddd, J=7.9, 4.8, 0.7 Hz, 1H), 7.53 (bs, 1H), 7.49 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.58-5,47 (m, 1H), 4.63 (d, J=12.2 Hz, 1H), 4.33 (d, J=14.0 Hz, 1H), 3.44-3,34 (m, 1H), 3.22 (d, J=13.5 Hz, 1H), 2.32-2,20 (m, 1H), 1.90-1,74 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 1.03 (s, 3H).
실시예 4)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00025
화합물 P2 (47 mg, 0.10 mmol) 및 (6-메톡시피리딘-3-일)보론산 (31 mg, 0.20 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (33 mg, 0.066 mmol)로서 수율 66%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C25H27N10O2 [M+H]+ = 499.2, 측정치 499.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.20 (d, J=5.9 Hz, 1H), 8.87 (d, J=1.3 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.32 (dd, J=8.6, 1.7 Hz, 1H), 8.14 (bs, 1H), 7.87 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.50 (bs, 1H), 7.49 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.98 (d, J=8.7 Hz, 1H), 5.58-5.45 (m, 1H), 4.62 (d, J=12.3 Hz, 1H), 4.33 (d, J=13.4 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.44-3.34 (m, 1H), 3.22 (d, J=13.6 Hz, 1H), 2.31-2.,19 (m, 1H), 1.90-1.72 (1H), 1.04 (s, 3H), 1.02 (s, 3H).
실시예 5)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-에톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리디민-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00026
화합물 P2 (53 mg, 0.11 mmol) 및 (6-에톡시피리딘-3-일)보론산 (37 mg, 0.22 mmol)을 사용하여 크림색 무정형 고체(34 mg, 0.066 mmol)로서 수율 60%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C26H29N10O2 [M+H]+ = 513.2, 측정치 513.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.26 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.74 (s, 2H), 8.04 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.46 (d, J=9.5 Hz, 1H), 6.91 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.84 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.21 (bs, 2H), 5.78-5.65 (m, 1H), 4.53 (d,J=12.9 Hz, 1H), 4.42 (t, J=7.1 Hz, 2H), 4.32 (d, J=13.6 Hz, 1H), 3.44 (t, J=11.5 Hz, 1H), 3.19 (d, J=13.9 Hz, 1H), 2.36 (d, J=11.2 Hz, 1H), 2.06-1.86 (m, 1H), 1.44 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1.16 (s, 6H).
실시예 6)
(R)-2-(6-아미노피리딘-3-일)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00027
화합물 P2 (48 mg, 0.10 mmol) 및 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘-2-아민 (44 mg, 0.20 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (22 mg, 0.046 mmol)로서 수율 46%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C24H26N11O [M+H]+ = 484.2, 측정치 484.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.03-10.91 (m, 1H), 8.56 (dd, J=2.3, 0.7 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.08 (dd, J=2.4, 0.7 Hz, 1H), 7.96 (dd, J=8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.49 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.66 (ddd, J=8.7, 2.1, 0.7 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 5.67 (dd, J=10.3, 3.8 Hz, 1H), 4.53 (d, J=13.7 Hz, 1H), 4.30 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.48-3.35 (m, 2H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2.03-1.86 (m, 1H), 1.14 (s, 6H).
실시예 7)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-모르폴리노피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00028
화합물 P2 (51 mg, 0.11 mmol) 및 4-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘-2-일)모르폴린 (58 mg, 0.20 mmol)을 사용하여 크림색 무정형 고체 (20 mg, 0.036 mmol)로서 수율 33%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C28H32N11O2 [M+H]+ = 554.3, 측정치 554.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.87 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.78 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.97 (dd, J=8.9, 2.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.90 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.73 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.94 (bs, 2H), 5.71 (ddd, J=10.3, 8.9, 4.2 Hz, 1H), 4.52 (d, J=13.3 Hz, 1H), 4.29 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.88-3.82 (m, 4H), 3.64-3.57 (m, 4H), 3.49-3.37 (m, 1H), 3.17 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.42-2.30 (m, 1H), 1.94 (ddd, J=15.2, 11.7, 4.6 Hz, 1H), 1.14 (s, 6H).
실시예 8)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00029
화합물 P2 (53 mg, 0.11 mmol) 및 (2-메톡시피리미딘-5-일)보론산 (34 mg, 0.22 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (42 mg, 0.084 mmol)로서 수율 76%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C24H26N11O2 [M+H]+ = 500.2, 측정치 500.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.18 (d, J=8.1 Hz, 1H), 9.03 (s, 2H), 8.63 (s, 1H), 7.46 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.13 (bs, 2H), 5.72-5.57 (m, 1H), 4.52 (d, J=12.7 Hz, 1H), 4.33 (d, J=13.7 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.42 (t, J=10.9 Hz, 1H), 3.17 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.42-2,24 (m, 1H), 2,06-1,90 (m, 1H), 1.16 (s, 3H), 1.15 (s, 3H).
실시예 9)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-에톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00030
화합물 P2 (50 mg, 0.11 mmol) 및 (2-에톡시피리미딘-5-일)-보론산 (37 mg, 0.22 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (17 mg, 0.033 mmol)로서 수율 30%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C25H28N11O2 [M+H]+ = 514.2, 측정치 514.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 9.00 (s, 2H), 8.54 (s, 1H), 7.45 (d, J=9.5 Hz, 1H), 6.90 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.04 (bs, 2H), 5.70-5,58 (m, 1H), 4.50 (q, J=7.0 Hz, 3H), 4.32 (d, J=13.6 Hz, 1H), 3.41 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.16 (d, J=13.6 Hz, 1H), 2.34 (d, J=10.5 Hz, 1H), 2,10-1,94 (m, 1H), 1.47 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.14 (s, 3H).
실시예 10)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-플루오로피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00031
화합물 P2 (47 mg, 0.10 mmol) 및 (6-플루오로피리딘-3-일)보론산 (28 mg, 0.20 mmol)을 사용하여 크림색 무정형 고체 (38 mg, 0.078 mmol)로서 수율 78%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 [M+H]+ = 487.2, 측정치 487.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.79 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.29 (ddd, J=8.3, 7.8, 2.5 Hz, 1H), 7.48 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.09 (dd, J=8.5, 2.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.65 (dd, J=10.4, 4.1 Hz, 1H), 4.52 (d, J=13.3 Hz, 1H), 4.31 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.50-3.34 (m, 1H), 3.18 (d, J=13.8 Hz, 1H), 2.40-2,28 (m, 1H), 2.06-1.88 (m, 1H), 1.15 (s, 6H).
실시예 11)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00032
화합물 P2 (201 mg, 0.43 mmol) 및 2-메톡시-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘 (202 mg, 0.86 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (144 mg, 0.29 mmol)로서 수율 67%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C25H27N10O2 [M+H]+ = 499.2, 측정치 499.2. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.32 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.65 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.94 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.87 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.60 (bs, 1H), 7.57 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.62-5.50 (m, 1H), 4.73 (d, J=11.9 Hz, 1H), 4.42 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.52-3.40 (m, 1H), 3.28 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.35 (d, J=9,7 Hz, 1H), 1.98-1.80 (m, 1H), 1.11 (s, 3H), 1.10 (s, 3H).
실시예 12)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메틸-피리딘-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00033
화합물 P2 (49 mg, 0.10 mmol) 및 2-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)피리딘 (44, mg, 0.20 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체(20 mg, 0.050 mmol)로서 수율 41%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C25H27N10O [M+H]+ = 483.2, 측정치 483.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.89 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.62 (d, J=5.4 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.66-7.57 (m, 2H), 7.46 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.92 (d, J=9.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.86-5.61 (m, 3H), 4.58 (d, J=13.0 Hz, 1H), 4.33 (d, J=13.6 Hz, 1H), 3.44 (t, J=12.3 Hz, 1H), 3.19 (d, J=13.6 Hz, 1H), 2.6 (s, 3H), 2.40 (dd, J=13.4, 3.7 Hz, 1H), 2.07-1.90 (m, 1H), 1.16 (s, 6H).
실시예 13)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-모르폴리노피리딘-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00034
화합물 P2 (52 mg, 0.11 mmol) 및 (2-모르폴리노피리딘-4-일)-보론산 (46 mg, 0.22 mmol)을 사용하여 백색 무정형 고체 (30 mg, 0.054 mmol)로서 수율 49%로 제조하였다. MS-ESI: (m/z) 계산치 C28H32N11O2 [M+H]+ = 554.3, 측정치 554.2. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.05 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.29 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.49 (d, J=9.6 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=5.2, 1.1 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.97 (d, J=9.7 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.68 (dd, J=10.3, 4.0 Hz, 1H), 4.55 (d, J=13.4 Hz, 1H), 4.28 (d, J=13.8 Hz, 1H), 3.91 - 3.84 (m, 4H), 3.64 - 3.56 (m, 4H), 3.43-3,31 (m, 1H), 3.18 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.05-1.89 (m, 1H), 1.15 (s, 6H).
실시예 14)
(R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드
Figure 112019118729710-pct00035
37% 염산 수용액 (170 μl, 2.01 mmol, 1.0 eq)을 아세톤 (10 mL) 중의 (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 (100 mg, 0.201 mmol)의 용액에 첨가하였다. 침전된 백색 고체를 여과하였고, 아세톤으로 세척한 후 건조시켜 생성물(90 mg, 0.168 mmol)을 수율 84%로 수득하였다. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.20 (d, J=6.6 Hz, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.57 (bs, 1H), 7.95-7.78 (m, 4H), 7.50 (d, J=9.8 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.94 (d, J=9,8 Hz, 1H), 5.70-5.50 (m, 1H), 4.63 (d, J=13.2 Hz, 1H), 4.35 (d, J=13.7 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.39 (t, J=11.3 Hz, 1H), 3.23 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.35-2.22 (m, 1H), 1.95-1.77 (m, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.05 (s, 3H).
본 발명의 화합물의 생물학적 활성
인비트로 (In vitro) JAK 키나아제 저해 분석
본 발명의 화합물의 효과는 다음에 기재된 키나아제 JAK 저해 분석을 사용하여 인비트로에서 분석하였다.
테스트된 화합물을 100% DMSO에 용해시키고, 수득된 스톡 용액을 반응 완충액(50 mM Tris pH 7.5, 10 mM MgCl2, 0.25 mM EGTA, 0.1 mM Na3VO4, 0.01% Triton X-100, 2.5 mM DTT)에서 연속 희석하였다(serially diluted). 재조합 키나아제 JAK1 (ProQinase), JAK2, 또는 JAK3 (Carna Biosciences)를 희석 완충액(50 mM Tris-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% Triton X-100, 1 mM DTT)에서 최종 농도 3 ng/μL (JAK1), 0.1 ng/μL (JAK2), 또는 0.2 ng/μL (JAK3)로 희석시켰다. 5 μL의 얻어진 화합물의 용액 및 5 μL의 각각의 키나아제 용액을 96-웰 플레이트의 웰에 첨가하였다. 테스트된 화합물과 효소 사이의 상호 작용을 개시하기 위하여, 플레이트를 400 rpm에서 오비탈식 교반(orbital stirring)하면서 플레이트-써모 쉐이커(Plate-Thermo-Shaker)에서 25℃에서 10분 동안 배양하였다. 음성 대조군의 웰은 테스트된 화합물 및 키나아제를 제외하고 상기에서 언급된 바와 같은 모든 시약을 함유하였고, 양성 대조군의 웰은 테스트된 화합물들을 제외하고 상기에서 언급된 바와 같은 모든 시약을 함유하였다. 15 μL의 하기의 용액을 첨가하여 효소 반응을 개시하였다 : 5x 농축 반응 완충액(50 mM Tris pH 7.5, 10 mM MgCl2, 0.25 mM EGTA, 0.1 mM Na3VO4, 0.01 % Triton X-100, 2.5 mM DTT), 물, 30 μM ATP 및 특히 키나아제: JAK1 - 60 μM 펩티드 IRS-1 (Enzo), JAK2 또는 JAK3 - 10 μM 펩티드 IGF-1Rtide (Lipopharm). 이어서, 플레이트를 플레이트-써모 쉐이커에서 400 rpm에서 오비탈식 교반하면서 1시간 동안 25℃에서 배양하였다. 이어서, 효소 반응에서 형성된 ADP의 검출을 ADP-Glo 키나아제 분석 키트(Promega)를 사용하여 수행하였다. 이 목적을 위해, 96-웰 플레이트의 웰에 25 μL의 ADP-Glo 시약을 첨가하고, 플레이트를 400 rpm에서 오비탈식 교반하면서 플레이트-써모 쉐이커에서 25℃에서 40분 동안 배양하였다. 이어서, 96-웰 플레이트의 웰에 50 μL의 키나아제 검출 시약을 첨가하고 플레이트를 400 rpm에서 오비탈식 교반하면서 플레이트-써모 쉐이커에서 25℃에서 30분 동안 배양하였다. 배양 후, Victor x Light 루미노미터 (Perkin Elmer, Inc.)를 사용하여 발광 강도를 측정하였다.
테스트된 화합물을 다양한 농도로 함유하는 웰들 및 대조군 웰들에서의 발광 측정에 기초하여, IC50 값을 측정하였다. 이러한 값들은 비선형 회귀 분석법(non-linear regression method)을 사용하여 곡선의 점들을 피팅하고(fitting), Graph Pad software v. 5.03으로 측정되었다. 각각의 화합물을 각각의 대조군의 3개 이상의 웰을 사용하여 2개의 96-웰 플레이트 상에서 6회 이상 반복(6 웰)하여 테스트하였다.
본 발명의 선택된 화합물들에 대한 키나아제 JAK 저해 활성의 평균 결과가 하기 표 1에 제시되어있다. 제시된 데이터는 본 발명의 화합물이 키나아제 JAK2에 비하여 JAK1 및 JAK3 키나아제를 우선적으로 저해할 수 있음을 나타낸다.
실시예 번호 JAK1 IC50 [nM] JAK2 IC50 [nM] JAK3 IC50 [nM]
1 1.80 19.01 1.2
2 3.74 59.28 3.77
3 4.47 31.15 1.58
4 2.67 27.66 2.67
5 8.08 34.38 1.8
6 0.38 2.98 0.16
7 0.75 3.40 0.19
8 8.54 26.77 2.24
9 47.48 89.61 18.75
10 2.37 12.82 0.6
11 0.05 1.18 0.03
12 0.51 5.05 0.29
13 0.51 2.82 0.2
인 비트로의 TF-1 세포 생존 능력에 대한 분석
본 발명의 화합물의 활성 효과는 하기 기재된 세포 생존 능력 분석을 사용하여 인 비트로에서 테스트하였다.
테스트된 화합물을 100% DMSO에 용해시키고, 수득된 스톡 용액을 OptiMEM 배지(환원된 혈청 배지 - Thermo Fisher Scientific)에서 연속 희석하였다. 5 ng/mL IL-3 또는 20 ng/mL IL-4의 존재 하에 배양 배지(80% RPMI 1640 + 20% FBS)에서 TF-1 세포(DSMZ 번호: ACC 334)를 96-웰 플레이트 상에 웰 당 90 μl의 부피, 웰 당 10,000개의 세포로 침착시켰다(deposited). 96-웰 플레이트의 웰에 10 μL의 상기 화합물의 10 X 스톡 용액을 제조하였다. 96-웰 플레이트 상의 세포를 화합물과 함께 37℃, 5% CO2에서 72시간 동안 배양하였다. 이어서, ATPlite 키트 (Perkin Elmer)를 사용하여 세포의 생존 능력을 측정하였다. 이 목적을 위해, 96-웰 플레이트의 웰에 50 μL의 용해 완충액(포유동물 세포 용해 용액)을 첨가하고 플레이트를 600 rpm에서 오비탈식 교반하면서 플레이트-써모 쉐이커에서 25℃에서 10분 동안 배양하였다. 이어서, 96-웰 플레이트의 웰에 50 μL의 기질(기질 용액)을 첨가하였고, 600 rpm에서 오비탈식 교반하면서 플레이트-써모 쉐이커에서 어두운 곳에서 15분 동안 배양하였다. 배양 후, Victor x Light 루미노미터 (Perkin Elmer, Inc.)를 사용하여 발광 강도를 측정하였다.
다양한 농도 및 대조군 웰에서 테스트된 화합물을 함유하는 웰에서 발광 강도 측정에 기초하여 EC50 값을 측정하였다. 이러한 값들은 비선형 회귀 분석법을 사용하여 곡선의 점들을 피팅하고, Graph Pad software v. 5.03으로 측정되었다. 각각의 화합물을 각각의 대조군의 3개 이상의 웰을 사용하여 2개의 96-웰 플레이트 상에서 6회 이상 반복(6 웰)하여 테스트하였다.
본 발명의 선택된 화합물들에 대한 IL-3 (JAK2 활성화) 또는 IL-4 (JAK1/JAK3 활성화)의 존재 하에 세포 TF-1의 생존 저해 활성의 평균 결과는 하기 표 2에 제시되어 있다. 제시된 데이터는 본 발명의 화합물이 JAK 키나아제를 저해할 수 있고, 키나아제 JAK2 저해에 비하여 보다 강력한 JAK1/JAK3 키나아제 저해를 나타낸다.
실시예 번호 JAK2 JAK1,3 JAK2/JAK1,3
IL3
[nM]		 IL4
[nM]		 비율
1 836.9 350.4 2.4
2 1199 242.1 5
3 - - -
4 707 69 10,3
5 - - -
6 3327 361.4 9.2
7 282.6 36.1 7.8
8 2025 203,4 10
9 - - -
10 1285 111.6 11.5
11 451.3 61.13 7.4
12 360.9 31.1 11.6
13 1121 201.7 5.6
인 비트로 에서 림프구 T에 의한 TNFα 및 INFγ 생성의 저해에 대한 분석
본 발명의 화합물의 활성은 하기에 기재된 인 비트로 분석을 사용하여 테스트되었다.
테스트된 화합물을 100% DMSO에서 용해시키고, 수득된 스톡 용액을 OptiMEM 배지(환원된 혈청 배지 - Thermo Fisher Scientific)에서 연속 희석하였다. 인간 말초 혈액(human peripheral blood)으로부터 얻은 백혈구 탑코트 층(leukocyte top coat layer)으로부터 림프구를 분리하였다(isolated). 말초 혈액 단핵세포의 분리는 CD4+ T 세포 분리 키트를 사용한 림프구 분리 및 T 세포 활성화/팽창 키트(Miltenyi Biotec)를 사용한 활성화를 사용하여, Ficoll-Paque + Leucosept 경사법(gradient method)을 사용하여 수행되었다. 배양 배지(90% RPMI 1640 + 10% FBS) 내의 분리된 세포들을 450 μL/웰, 300,000개/웰에서 12-웰 플레이트 상에 체질하였고, 테스트된 화합물의 50 μL의 제조된 10X 스톡 용액을 첨가하였다. 분비된 사이토 카인의 레벨을 측정하기 위하여 48 시간 후 상청액을 수집하였다. 측정하기 전에, 세포를 1000 g, 10분 동안 원심분리 하였다. LEGENDplex 인간 Th 사이토카인 키트를 사용하여 흐름 세포측정기(flow cytometer) FACS Calibur로 측정을 수행하였다. 결과는 대조군 세포들과 관련하여 림프구 T에 의해 분비된 TNFα 및 INFγ 사이토카인의 저해 백분율로서 표 3에 제시되어 있다.
실시예 번호 TNFα 저해, % INFγ 저해, %
10 nM 100 nM 1000 nM 10 nM 100 nM 1000 nM
4 57.1 78.7 95.3 80.9 86.5 95.6
7 60.6 76.0 98.5 73.6 74.6 98.1
11 57.4 88.1 88.5 88.8 93.5 81.4
12 76.2 75.8 95.4 86.2 88.0 93.0
인 비트로 STAT6 인산화 저해 분석
본 발명의 화합물의 활성은 하기에 기재된 인 비트로 분석을 사용하여 테스트되었다.
테스트된 화합물을 100% DMSO에서 용해시키고, 수득된 스톡 용액을 OptiMEM 배지(환원된 혈청 배지 - Thermo Fisher Scientific)에서 연속 희석하였다. 20 ng/mL에서 IL-4의 존재 하에 배양 배지(80% RPMI 1640 + 20% FBS) 중 TF-1 세포 (DSMZ 번호: ACC 334)를 900 μl/웰, 700,000개의 세포/웰에서 12-웰 플레이트 상에 체질하였다. 12-웰 플레이트의 웰에 100 μL의 수득된 10X 용액의 화합물을 첨가하였다. 12-웰 플레이트 상의 세포들을 테스트된 화합물과 37℃, 5% CO2에서 1 시간 동안 배양하였다. 이어서, 세포를 PBS로 세척하고, EDTA, 프로테아제 및 포스파타아제 저해제가 첨가된 RIPA 완충액에 용해시키고(lysed), 얼음에서 5분 동안 배양하였다. 단백질 농도는 Pierce BCA 단백질 분석 키트(Thermo Fisher Scientific)를 사용하여 측정하였다. 단백질 용해물을 8% 폴리아크릴아미드 겔 상에서 전기영동(SDS-PAGE)에 의해 분리한 다음, 니트로셀룰로오스 막 상에서 습식 전사(wet-transferred)하고, 테스트된 단백질을 항체 제조업체의 지시에 따라 검출하였다.
화학발광 강도 밀도측정 분석의 측정에 기초하여, 다양한 농도에서 테스트된 화합물로 처리된 세포들에 대하여 얻어진 결과들을 대조군 세포들에 대하여 얻은 것과 비교하였고, IC50 값을 측정하였다.
이러한 값들은 비선형 회귀 분석법을 사용하여 곡선의 점들을 피팅하고, Graph Pad software v. 5.03으로 측정되었다. 각각의 화합물을 3회 이상 반복하여 테스트하였다. 본 발명에서 선택되는 화합물에 대한 IL-4(JAK1/JAK3 활성화)의 존재 하에서의 TF-1 세포 중의 STAT6 단백질 인산화의 저해 활성의 평균 결과는 하기 표 4에 제시되어 있다.
실시예 번호 IC50 [nM]
4 442.0
7 115.8
11 114.5
12 149.8
13 214.8

Claims (14)

  1. 하기 일반식 (I)의 화합물 또는 이의 산 부가 염:
    Figure 112019118729710-pct00036

    여기서 R1은 하기를 나타낸다:
    - 할로겐 및 C1-C3 알콕시로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐;
    또는
    - 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원(membered) 헤테로아릴로서, 이것은
    - NH2,
    - 할로겐,
    - 알킬 C1-C4,
    - 알콕실 C1-C3, 및
    - N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴;
    로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환되는 것인, 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴.
  2. 청구항 1에 있어서, R1이 할로겐 및 C1-C3 알콕실로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐을 나타내는 것인, 화합물.
  3. 청구항 1에 있어서, R1이 1개 또는 2개의 질소 원자를 갖는 6-원 헤테로아릴을 나타내는 것으로서, 이것은
    - NH2,
    - 할로겐,
    - 알킬 C1-C4,
    - 알콕실 C1-C3, 및
    - N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴
    로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 비치환되는 것인, 화합물.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 헤테로아릴이 피리디닐인 것인, 화합물.
  5. 청구항 3에 있어서, 상기 헤테로아릴이 피리미디닐인 것인, 화합물.
  6. 청구항 4 또는 청구항 5에 있어서, 상기 헤테로아릴이 알킬 C1-C4, 알콕실 C1-C3, 및 N 및 O로 구성되는 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로시클릴로 구성되는 군으로부터 선택되는 치환기로 치환되는 것인, 화합물.
  7. 청구항 4에 있어서,
    피리디닐; 또는
    피리딘-2-일 또는 피리딘-3-일 또는 피리딘-4-일이 C1-C3 알콕실로 치환되는 것인, 화합물.
  8. 청구항 5에 있어서, 피리미디닐 또는 피리미딘-5-일이 C1-C3 알콕실로 치환되는 것인, 화합물.
  9. 청구항 1에 있어서, 하기로 구성되는 군으로부터 선택되는 것인, 화합물:
    1) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(4-메톡시페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    2) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-플루오로-5-메톡시페닐)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    3) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    4) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    5) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-에톡시피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    6) (R)-2-(6-아미노피리딘-3-일)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸-피페리딘-4-일)아미노)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    7) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-모르폴리노피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    8) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    9) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-에톡시피리미딘-5-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    10) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-플루오로피리딘-3-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    11) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    12) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-메틸피리딘-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    13) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(2-모르폴리노피리딘-4-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드;
    14) (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)-아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]피리미딘-6-카복사미드 히드로클로라이드.
  10. 청구항 9에 있어서, 화합물이 (R)-7-((1-(6-시아노피리다진-3-일)-3,3-디메틸피페리딘-4-일)아미노)-2-(6-메톡시피리딘-2-일)피라졸로[1,5-a]-피리미딘-6-카복사미드 또는 이의 산 부가 염인 것인, 화합물.
  11. 만성 염증성 질환 및 자가 면역성 질환의 치료에 사용하기 위한 유효 성분(active ingredient)으로서 청구항 1 내지 청구항 5 및 청구항 7 내지 청구항 10 중 어느 한 항에서 정의된 화합물을 포함하는, 약제학적 조성물.
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 삭제
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008519059A (ja) 2004-11-04 2008-06-05 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼのインヒビターとして有用なピラゾロ［１，５−α］ピリミジン
WO2008084861A1 (ja) 2007-01-12 2008-07-17 Astellas Pharma Inc. 縮合ピリジン化合物
WO2014039595A1 (en) 2012-09-06 2014-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridazine jak3 inhibitors and their use for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA05002571A (es) 2002-09-04 2005-09-08 Schering Corp Pirazolopirimidinas como inhibidores de cinasa dependientes de ciclina.
WO2005077369A1 (en) 2004-02-05 2005-08-25 Schering Corporation Piperidine derivatives useful as ccr3 antagonists
UA110324C2 (en) * 2009-07-02 2015-12-25 Genentech Inc Jak inhibitory compounds based on pyrazolo pyrimidine
KR20120085738A (ko) 2009-07-31 2012-08-01 바이오크리스트파마슈티컬즈,인코포레이티드 야누스 키나제 억제제로서의 피롤로 ［1,2-ｂ］ 피리다진 유도체
MX2012004020A (es) * 2009-10-20 2012-05-08 Cellzome Ltd Analogos de heterociclilo pirazolopirimidina como inhibidores de jak.
US8987268B2 (en) * 2011-03-17 2015-03-24 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolopyridazine JAK3 inhibitors and their use for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases
WO2012125886A1 (en) 2011-03-17 2012-09-20 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolopyridazine jak3 inhibitors and their use for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases
UA111854C2 (uk) * 2011-09-07 2016-06-24 Інсайт Холдінгс Корпорейшн Способи і проміжні сполуки для отримання інгібіторів jak
PL407081A1 (pl) * 2014-02-05 2015-08-17 Celon Pharma Spółka Akcyjna Pochodne pirazolo[1,5-a]pirymidyny jako inhibitory kinazy JAK-2

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008519059A (ja) 2004-11-04 2008-06-05 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼのインヒビターとして有用なピラゾロ［１，５−α］ピリミジン
WO2008084861A1 (ja) 2007-01-12 2008-07-17 Astellas Pharma Inc. 縮合ピリジン化合物
WO2014039595A1 (en) 2012-09-06 2014-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridazine jak3 inhibitors and their use for the treatment of inflammatory and autoimmune diseases

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