CN110612302B - 作为激酶JAK抑制剂的吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物 - Google Patents

作为激酶JAK抑制剂的吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物 Download PDF

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Abstract

通式(I)的化合物或其酸加成盐，其中R1表示被一或两个取代基取代的苯基，所述取代基选自卤素和C1‑C3烷氧基、或具有1或2个氮原子的6元杂芳基，所述6元杂芳基是未取代的或被选自‑NH2、卤素、C1‑C4烷基、C1‑C3烷氧基和含有1或2个选自N和O的杂原子的6元杂环基中的取代基取代。所述化合物具有激酶JAK1/JAK3抑制剂的活性并且可以用于治疗慢性炎症性疾病和自身免疫疾病。

Description

作为激酶JAK抑制剂的吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物
发明领域
本发明涉及新型化合物，即显示出酪氨酸激酶JAK(尤其是JAK1/JAK3)抑制剂的活性的吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物。所述化合物可以用于治疗发病机制涉及激酶JAK1和JAK3的疾病。特别地，所述化合物可以用作免疫反应调节剂(例如，用作移植学领域中的免疫抑制剂)，以及用于治疗自身免疫疾病和炎症性疾病。
现有技术
Janus激酶JAK是非受体酪氨酸激酶的家族，其涉及细胞因子和趋化因子诱导信号在JAK-STAT信号传导途径中的细胞内转导。它们在STAT蛋白质的激活和基因转录的起始、尤其是编码炎症介质中起重要作用。细胞中的转录因子STAT的活性取决于其磷酸化水平。细胞中的磷酸化水平的增加取决于激酶JAK活性；激酶的抑制引起STAT蛋白质的磷酸化和转录活性的降低，并且因此导致调节基因的表达降低。因此，激酶JAK抑制剂阻断了负责诱导和维持位于自体免疫疾病下的炎症状态的特定信号传导途径。已经反复证实，在炎症性疾病的发展和临床过程中所涉及的细胞因子激活JAK-STAT途径，这使得后者在此类疾病如类风湿性关节炎、牛皮癣和哮喘的发展和临床过程中是重要的要素。由促炎性细胞因子诱导的淋巴细胞T中的JAK激酶的刺激导致STAT转录因子的激活。这影响刺激淋巴细胞B的淋巴细胞T的分化，以增强免疫球蛋白E的产生并且负责嗜酸性粒细胞募集和成熟，这导致局部炎症反应的发展。由于阻断STAT因子的磷酸化，激酶JAK抑制剂可以抑制淋巴细胞T群体的分化和炎症反应，并且因此可以用于治疗炎症性疾病。
JAK家族包括4个已知成员，JAK1、JAK2、JAK3和TYK2。激酶JAK1、JAK2和TYK2被普遍表达，而激酶JAK3主要在造血细胞中表达。因此，认为JAK3抑制的作用将局限于免疫学系统。JAK3通过白介素IL2、IL4、IL7、IL9、IL15和IL21经由跨膜γc受体激活。类似于JAK3，JAK1与IL-2受体结合并且与JAK3一起介导IL-2信号级联以调节T细胞增殖。JAK1还在与炎症反应相关的IL-6和IFN-γ信号传导中起作用。JAK3和/或JAK1抑制剂是可以发现用作免疫反应调节剂的药物研究中的令人感兴趣的靶标，特别是用于防止在移植中的移植排斥以及用于治疗自身免疫疾病和炎症性疾病中。
研究表现出激酶JAK1和/或JAK3抑制的活性的化合物，特别是对JAK2是选择性的化合物。
WO 2014/039595A1公开了具有以下式的咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-甲酰胺核的化合物
Figure BDA0002267187560000021
作为对于JAK2具有选择性的JAK3和/或JAK1抑制剂以及用于治疗慢性炎症和自身免疫疾病的潜在药物。
WO2012/125893公开了具有以下式的吡咯并[1,2-b]-哒嗪-6-甲酰胺核的化合物
Figure BDA0002267187560000022
作为对于JAK2具有选择性的JAK3和/或JAK1抑制剂以及用于治疗慢性炎症和自身免疫疾病的潜在药物。
WO2012/125886公开了具有以下式的吡咯并[1,2-b]-哒嗪-6-甲酰胺核的化合物
Figure BDA0002267187560000023
作为对于JAK2具有选择性的JAK3和/或JAK1抑制剂以及用于治疗慢性炎症和自身免疫疾病的潜在药物。
WO2011/014817公开了具有以下式的双环杂环核的JAK3抑制剂
Figure BDA0002267187560000031
只有具有吡咯并[1,2-b]哒嗪-6-甲酰胺核的衍生物被公开为具体化合物。
US2010/0105661公开了具有以下式的吡咯并[2,3-b]吡啶核的化合物
Figure BDA0002267187560000032
作为用于与不期望或异常的细胞因子信号转导相关的疾病的激酶JAK3抑制剂。
发明概述
对可以潜在地用于治疗炎症和自身免疫疾病、表现出激酶JAK抑制能力的具有高功效和/或选择性的新化合物存在需求。本发明解决了这个问题。
本发明的目的是通式(I)的化合物或其酸加成盐
Figure BDA0002267187560000033
(I)
其中R1表示：
-被选自卤素和C1-C3烷氧基中的一或两个取代基取代的苯基；
或者
-具有1或2个氮原子的6元杂芳基，其是未取代的或被选自以下的取代基取代：
-NH2，
-卤素，
-C1-C4烷基，
-C1-C3烷氧基，以及
-包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
式(I)的化合物具有相对于JAK2选择性抑制激酶JAK3和/或JAK1的能力，并且可以用于治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病。
在另一方面，本发明还涉及用作药物的如以上定义的式(I)的化合物。
在另一方面，本发明还涉及包含如以上定义的式(I)的化合物的药物组合物。
在另一方面，本发明还涉及如以上定义的式(I)的化合物用于制备用于治疗自身免疫疾病和炎症性疾病的药物的用途。
在另一方面，本发明还涉及治疗哺乳动物受试者中的自身免疫疾病和炎症性疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的如以上定义的式(I)的化合物。
在另一方面，本发明还涉及用于治疗哺乳动物受试者的自身免疫疾病和炎症性疾病的方法中的如以上定义的式(I)的化合物。
发明详述
在以下详述和所附权利要求中描述了本发明的优选实施方案。本文更详细地定义了本发明的各个方面。除非另外明确指示，否则所定义的方面中的每一个可以与任何其他方面组合。特别地，被指示为优选或有利特征的任何特征可以与被指示为优选的有利特征的任何其他特征组合。
在整个说明书中对“一个实施方案”或者“实施方案”的提及意指与该实施方案有关的特定特征、结构或特性被包括在本发明的至少一个实施方案中。因此，短语“在一个实施方案中”或“在实施方案中”在本申请描述的各个部分的任何出现不必要涉及相同情况，而是可以。此外，如本公开内容的领域的技术人员将理解，特定特征、结构或特性可以以任何适合的方式组合在一个或多个实施方案中。此外，尽管本文描述的一些实施方案包含在其他实施方案中包括的一些但非其他特征，但如本领域技术人员将理解，各种实施方案的特征的组合可以由本发明的范围涵盖并且形成实施方案的各种实例。例如，在所附权利要求中，任何所要求保护的实施方案可以以任何组合来使用。
在第一方面，本发明提供以下式(I)的化合物或其酸加成盐
Figure BDA0002267187560000051
其中R1表示：
-被选自卤素和C1-C3烷氧基中的一或两个取代基取代的苯基；或者
-具有1或2个氮原子的6元杂芳基，其是未取代的或被选自以下的取代基取代：
-NH2,
-卤素，
-C1-C4烷基，
-C1-C3烷氧基，以及
-包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
在本发明的一个实施方案中，R1表示被选自卤素原子和C1-C3烷氧基中的一或两个取代基取代的苯基。
在本发明的一个实施方案中，R1表示被一或两个卤素原子、优选一或两个氟原子取代的苯基。有利地，R1表示被一个氟原子取代的苯基。同样有利地，R1表示被两个氟原子取代的苯基。
在本发明的另一个实施方案中，R1表示被一或两个C1-C3烷氧基(优选甲氧基，特别是一个甲氧基)取代的苯基，包括2-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基和5-甲氧基苯基，特别是4-甲氧基苯基和5-甲氧基苯基。
在本发明的一个实施方案中，R1表示被一个卤素原子(优选一个氟原子)和一个C1-C3烷氧基(尤其是甲氧基)取代的苯基。有利地，R1表示被一个氟原子和一个甲氧基取代的苯基。此类取代的实例包括2-氟-5-甲氧基苯基和2-氟-4-甲氧基苯基，尤其是2-氟-5-甲氧基苯基。
在本发明的另一个实施方案中，R1表示包括1或2个氮原子的6元杂芳基，其是未取代的或被选自以下的取代基取代：NH2；卤素；C1-C4烷基；C1-C3烷氧基；以及包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
在一个实施方案中，R1表示未取代的6元杂芳基，特别是吡啶基或嘧啶基。
在另一个实施方案中，R1表示6元杂芳基，特别是吡啶基或嘧啶基，其被选自以下的取代基取代：NH2；卤素；C1-C4烷基；C1-C3烷氧基；以及包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
特别地，上述6元杂芳基(优选吡啶基或嘧啶基)被选自以下的取代基取代：NH2；卤素，尤其是氟；C1-C4烷基，尤其是甲基或乙基；C1-C3烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；以及包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基，尤其是4-吗啉基。有利地，在上述实施方案中，R1表示吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基，或者R1表示嘧啶-2-基或嘧啶-5-基。
特别地，上述6元杂芳基是被C1-C3-烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基取代的吡啶基，尤其是吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基。
特别地，上述6元杂芳基是被甲氧基取代的吡啶基，尤其是吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基。
特别地，上述6元杂芳基是被C1-C3-烷氧基、尤其是甲氧基或乙氧基取代的嘧啶基，尤其是嘧啶-2-基或嘧啶-5-基。
定义
如本文所用的术语“烷基”单独或作为另一个取代基的一部分涉及具有直链或支链、与碳-碳单键连接、并且具有在定义中指示的碳原子数的烃基，例如C1-C4或C1-C3。随碳原子给出的数涉及可以包含在基团中的碳原子数。因此，例如，C1-C4-烷基意指具有1至4个碳原子的烷基，并且C1-C3烷基意指具有1至3个碳原子的烷基。C1-C3烷基是甲基、乙基、正丙基和异丙基，并且C1-C4烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。
如本文所用的术语“杂环基”是指衍生自杂环基的取代基，其为具有指示数量的环成员和指示数量和类型的杂原子的脂环族饱和烃基。“杂环基”包括含有选自氧(O)和氮(N)中的1或2个杂原子的6-元饱和杂环，例如吗啉基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基和二噁烷基，特别是哌啶基、吗啉基和吡咯烷基。
如本文所用的术语“杂芳基”是指衍生自杂芳基的取代基，其为具有指示数量的环成员和指示数量和类型的杂原子的芳香族烃环基团。6-元杂芳基特别地包括吡啶基、哒嗪基、嘧啶基和吡嗪基，尤其是吡啶基和嘧啶基。
卤素涉及氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)原子，尤其是氟原子。
本发明的式(I)的化合物的酸加成盐特别地涵盖与药物可接受的无机酸或者有机酸形成的盐。优选的是药物可接受的盐。可以与包含碱性氮原子的化合物形成药物可接受的盐的无机酸和有机酸在本领域是熟知的。与无机酸形成的盐特别地包括盐酸、氢溴酸、硫(VI)酸、硝(V)酸和磷(V)酸的盐。与有机酸形成的盐特别地包括甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。应理解，本发明还包括在其范围内除了药物可接受的盐以外的盐，尤其在本发明的化合物的制备、分离和纯化的过程中可用作中间体。
可以以通常已知的方式制备酸加成盐。典型地，式(I)的化合物(例如在有机溶剂中的溶液中)与酸水溶液或醇水溶液(例如甲醇或乙醇水溶液)中的酸反应，并且以常规方式分离沉淀的盐，例如通过过滤、洗涤和干燥。
本发明的特定化合物选自以下化合物及其酸加成盐，包括无机酸加成盐和有机酸加成盐。
1)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
2)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-氟-5-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
3)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
4)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
5)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-乙氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
6)(R)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
7)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
8)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
9)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-乙氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
10)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
11)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
12)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲基吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
13)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-吗啉代吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
14)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺盐酸盐。
在另一方面，本发明还涉及如以上定义并且根据任一个所示的实施方案用作药物的式(A)的化合物。
在另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含如以上定义并且根据任一个所示的实施方案作为活性成分的式(A)的化合物与药物赋形剂组合。
作为激酶JAK1/JAK3抑制剂，如以上定义的式(A)的化合物可以用于治疗慢性炎症性疾病和自身免疫疾病。
因此，本发明涉及用于治疗哺乳动物受试者(包括人)中的慢性炎症性疾病和自身免疫疾病的方法中的如以上定义的式(I)的化合物。
因此，本发明涉及用于制备药物的如以上定义的式(I)的化合物的用途，所述药物用于治疗哺乳动物受试者(包括人)中的慢性炎症性疾病和自身免疫疾病的方法中。
本发明还涉及治疗哺乳动物(包括人)中的慢性炎症性疾病和自身免疫疾病的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的如以上定义的式(I)的化合物、或包含如以上定义的式(I)的化合物的药物组合物。
慢性炎症性疾病和自身免疫疾病包括结缔组织的系统性疾病，特别是类风湿性关节炎、反应性关节炎、银屑病关节炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮、硬皮病；非特异性炎症性肠病，特别是克罗恩病和溃疡性结肠炎；肾上腺疾病，特别是多发性硬化和肌无力；皮肤病，尤其是银屑病；以及哮喘。
本发明的化合物还可以发现用于在移植中预防移植排斥。
可以通过方案1中所示的方法制备本发明的化合物。
使用以下缩写：
AcOEt-乙酸乙酯；Boc-tert-丁氧基羰基；CN-氰基；(COCl)2-乙二酰氯；Et-乙基；EtO-乙氧基；LiOH-氢氧化锂；Me-甲基；MeCN-乙腈；MS-ESI-电喷射质谱；m/z-质荷比；NH4OH-氨水；NMR-核磁共振；Pd/C-碳载钯；POCl3-氯氧化磷(V)；TFA-三氟乙酸。
方案1
Figure BDA0002267187560000101
如方案1所示，由式II的5-氨基-3-溴-1H-吡唑开始制备式(I)的化合物。
用2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯III在回流温度下在乙酸中以1至2摩尔当量的量使用，使式II的化合物环化，以获得式IV的吡唑并[1,2-b]嘧啶。
在存在1至5摩尔当量的量的胺(例如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、喹啉、N,N-二甲基苯胺)或不存在胺下，在添加1至3摩尔当量的量的盐(例如四乙铵、四丁铵、或苄基三乙基溴化铵或苄基三乙基氯化铵)或没有盐的情况下，在非质子溶剂(例如乙腈、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿)中或没有溶剂的情况下，在60℃至120℃或回流下，使用2至30摩尔当量的量的此类试剂(例如，氯氧化磷(V)、五氯化磷、亚硫酰氯，优选氯氧化磷(V))用氯取代式IV的化合物中的羟基。
在存在1至3摩尔当量的量的胺(例如三乙胺、N,N-二异丙基乙胺或吡啶)下，在0℃至30℃下，将式V的化合物与根据WO 2014/039595 A1中描述的程序获得的(R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯VI(中间体4)反应，以获得式VII的化合物。
然后，使用2至10摩尔当量的量的碱(例如金属氢氧化物，优选氢氧化锂)在溶剂的混合物(例如，水/醇，优选水/甲醇)中在20℃至80℃、优选40℃至55℃下使式VII的化合物中的酯基团水解，以获得酸VIII。
将式VIII的化合物以两步法转化成相应的式IX的酰胺。在第一步中，在2至4摩尔当量的量的乙二酰氯与催化量的二甲基甲酰胺于0℃至30℃下的反应中制备酰氯。随后，将酰氯与5至20摩尔当量的量的氨水在0℃至30℃下反应。
使用10至40摩尔当量的量的三氟乙酸在二氯甲烷溶液中在0℃至30℃下去除式IX的化合物中的保护胺的叔丁氧羰基，以获得式X的化合物。
然后，在存在2至10摩尔当量的量的胺(例如三乙胺、N,N-二异丙基乙胺或吡啶)下，在非质子溶剂(例如，二甲基甲酰胺或二氯甲烷)或质子溶剂(例如，甲醇或乙醇)中，使用1至1.5摩尔当量的量的6-氯哒嗪-3-甲腈使式X的化合物芳化，以获得式XI的化合物。
在最后的步骤中，在存在0.05至0.2摩尔当量的量的钯催化剂(例如醋酸钯(II)、双(二亚苄基丙酮)钯(0)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯化物二氯甲烷加成物、或其他常规Suzuki反应催化剂)下，在添加1至3摩尔当量的量的无机碱(例如碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯、磷酸钠或磷酸钾、氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)或有机碱(例如叔丁醇钠或叔丁醇钾)作为固体或作为水溶液使用的情况下，在溶剂(例如甲苯、二甲苯、四氢呋喃、二噁烷、乙醇、脂肪族醇C3至C6、二甲基甲酰胺或二甲氧基乙烷)中，在80℃至140℃、优选在回流温度下，使式XI的化合物在Suzuki偶联反应中与1至2摩尔当量的量的式XIIb的相应硼酸XIIa或硼酸频哪醇酯反应。
可以根据US2005/182095A1和WO2014/039595 A1中描述的程序根据方案3来获得式VI的化合物((R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)。
在非质子溶剂(例如四氢呋喃、甲苯、二氯甲烷、乙腈，优选四氢呋喃)中存在以2至3摩尔当量的量使用的碱(例如氢化钠、甲醇钠、叔丁醇钠、正丁基锂、碳酸钾，优选氢化钠)下，可以由商购获得的4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯XVIII在与以2至3摩尔当量的量使用的甲基化试剂(例如碘甲烷)的反应中获得式VI的化合物。
在下一步骤中，在两步还原胺化反应中转化式XIX的化合物。
首先，任选地在非质子溶剂(例如甲苯、苯或二甲苯，优选甲苯)中存在以0.05至1摩尔当量的量使用的酸(例如对甲苯磺酸、苯磺酸或硫酸，优选对甲苯磺酸)下，在具有用于共沸蒸馏的Dean-Stark分水器中在回流温度下，使式XIX的化合物与以1至2摩尔当量的量使用的(R)-1-苯基乙烷-1-胺XX反应，以获得式XXI的(R)-3,3-二甲基-4-((1-苯基乙基)亚氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，其未经分离用于其他反应。
然后，将具有式XXI的化合物的反应混合物冷却至-78℃至0℃的温度，并且以2至3摩尔当量的量添加醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇，优选乙醇)和还原剂(例如硼氢化钠、氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)，以获得式XXII的(R)-3,3-二甲基-4-(((R)-1-苯基乙基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。
最后的步骤中，去除式XXII的化合物中的保护胺基团的1-苯基乙基。使用以0.01至0.02摩尔当量的量使用的氢和Pd/C催化剂在溶剂(例如甲醇、乙醇、异丙醇，优选乙醇)中通过还原去除1-苯基乙基，以获得式VI的化合物，即((R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯。
式II的化合物(5-氨基-3-溴-1H-吡唑)可商购获得。还可以通过方案2所示的方法使用J.Org.Chem.1986,51,4656-4660和J.Med.Chem.2010,53,1238-1249中描述的方法由1H-吡唑XIV获得。
Figure BDA0002267187560000131
本发明还提供了药物组合物，其包含作为活性成分的如以上定义的式(I)的化合物，所述式(I)的化合物与药物可接受的赋形剂形成混合物。
在上述疾病和病症的治疗中，可以将本发明的式(I)的化合物施用为化合物，然而将通常以包含本发明的化合物或其药物可接受的盐与药物可接受的载体和辅助物质组合的药物组合物的形式进行使用。
在上述疾病和病症的治疗中，本发明的药物组合物可以通过任何适合的途径施用，优选口服、胃肠外或吸入途径，并且本发明的药物组合物的形式将会是根据预期施用途径而设计用于医药疗的制剂。
用于口服施用的组合物可以具有固体或液体制剂的形式。固体制剂可以具有，例如，由药物可接受的非活性赋形剂通过常规方式生产的片剂或胶囊的形式，所述赋形剂例如粘合剂(例如，预凝胶化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)；填充剂(例如乳糖、蔗糖、羧甲基纤维素、微晶纤维素或磷酸氢钙)；崩解剂(例如交联聚维酮、玉米淀粉或羟基乙酸淀粉钠)；润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石或二氧化硅)；润湿剂(例如月桂基硫酸钠)。片剂可以涂布有本领域熟知的包衣，例如简单包衣、迟释/控释包衣或肠溶包衣。用于口服施用的液体制剂可以是例如，溶液、糖浆或悬浮液的形式，或者可以具有用于使用前在水或其他合适媒介物中重构的干燥固体产物的形式。这类液体制剂可以使用常规手段由药物可接受的非活性赋形剂来制备，所述赋形剂例如悬浮剂(例如山梨醇糖浆、纤维素衍生物或氢化的食用油)；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水媒介物(例如扁桃油(mandelicoil)、油酯、乙醇或分馏的植物油)；以及防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。制剂也可以包含适合的缓冲剂、调味剂、着色剂和甜味剂。
用于口服施用的制剂可以使用本领域技术人员已知的方法配制以使活性化合物受控释放。
胃肠外施用途径包括通过肌内注射和静脉内注射以及静脉输注的施用。用于胃肠外施用的组合物可以，例如，具有单位剂型的形式，例如添加有防腐剂的安瓶或多剂量容器。组合物可以具有诸如在油性或水性媒介物中的悬浮液、溶液或乳液的形式，并且可以包含诸如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂的赋形剂。或者，活性成分可以配制为用于使用前在合适载体(例如无菌、无热源水)中重构的粉末。
用于经由吸入途径施用的组合物可以具有吸入形式，并且通过雾化施用。这类制剂包含作为气雾剂施用的活性化合物和辅助物质，所述气雾剂即悬浮在气体中的精细分散的固体或液体物质小颗粒的系统。用于雾化的辅助物质可以例如，作为等渗剂的氯化钠，作为pH调节剂和稳定剂的无机酸和氢氧化物，作为防腐剂的苯扎氯铵，作为缓冲剂的柠檬酸钠，作为表面活性剂的聚山梨醇酯80，作为共溶剂的乙醇和丙二醇，以及作为抗氧化剂的硫酸盐(VI)。通过吸入途径施用的制剂可以具有压力吸入器或干燥粉末吸入器的形式。
使用本发明化合物治疗的方法将包括向需要这类治疗的对象施用治疗有效量的本发明化合物，优选地以药物组合物的形式施用。
本发明化合物的建议剂量为每天0.1mg至约1000mg，以单剂量或多剂量形式。对于本领域技术人员将显而易见的是，选择获得期望生物效果所需的剂量将取决于许多因素，例如具体化合物、适应证、施用方式、患者的年龄和身体状况，并且精确剂量将由负责医生最终确定。
实施例
以下实施例用于示例性目的，并且存在用于合成用于制备本发明的化合物的中间体的常规合成方法。
中间体
如以下描述制备用于制备本发明的化合物的中间体。
中间体P1.化合物VI(R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002267187560000151
步骤A：化合物XIX-3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002267187560000161
向4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯XVIII(50.0g,246mmol)在冷却至0℃的四氢呋喃(1000mL)中的溶液逐份添加氢化钠(在石蜡油中的60％悬浮液，21.6g,541mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。向该混合物在15分钟期间滴加在四氢呋喃(60mL)中的碘甲烷(34mL,541mmol)溶液。将反应混合物在0℃下进一步搅拌2小时。将饱和氯化铵溶液(500mL)添加至混合物。将混合物用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并且在减压下蒸发。将残余物用柱色谱法(硅胶，洗脱液：己烷:AcOEt＝9:1,v/v)纯化。通过结晶从热的己烷重纯化产物。获得呈白色晶体状的产物(39.8g,175mmol)，产率71％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.62(t,J＝6.4Hz,1H),3.39(s,1H),2.42(t,J＝6.4Hz,1H),1.46-1.39(m,6H),0.99(s,3H)。
步骤B：化合物XXII-(R)-3,3-二甲基-4-(((R)-1-苯基乙基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002267187560000162
向3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯XIX(100g,418mmol)在甲苯(1500mL)中的溶液添加(R)-1-苯乙烷-1-胺XX(59.7mL,460mmol)和对甲苯磺酸(0.80g,4.2mmol)。将反应混合物在共沸Dean-Stark分水器中在回流下搅拌24小时。然后将由此获得的含有化合物XXI的混合物在其未分离的情况下冷却至-70℃，添加有乙醇(100mL)，并且分批添加硼氢化钠(19.0g,502mmol)。将反应混合物搅拌3小时，同时将温度缓慢升至室温。将混合物添加有水(300mL)并且浓缩至其体积的1/3。将混合物用AcOEt(2×300mL)萃取。将有机相合并，干燥(Na2SO4)并且在减压下蒸发。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液己烷:AcOEt＝9:1,v/v)纯化。获得呈无色油状的产物(67.3g,418mmol)，并且产率为48％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.37-7.25(m,4H),7.22-7.15(m,1H),3.85-3.70(m,1H),3.72(q,J＝6.5Hz,1H),3.58-3.42(m,1H),2.70-2.40(m,2H),2.16(dd,1H,J＝10.7,6.51Hz,1H),1.44(s,1H),1.36(s,9H),1.22(d,J＝6.5Hz,3H),1.18-1.02(m,1H),0.92(s,3H),0.76(s,3H)。
步骤C：化合物VI-(R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002267187560000171
向(R)-3,3-二甲基-4-(((R)-1-苯基乙基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯XXII(44.9g,135mmol)在乙醇(1150mL)中的脱气溶液添加10％Pd/C(4.0g)。将反应混合物在室温、氢气氛下搅拌20小时。将混合物通过硅藻土床过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液：AcOEt到AcOEt:甲醇＝50:50,v/v)纯化。获得呈无色油状的产物(26.5g,116mmol)，并且产率为86％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.20-3,88(m,1H),3.85-3.53(m,1H),2.95-2.70(m,1H),2.60-2.45(m,1H),2.50(dd,J＝10.9,4.2Hz,1H),1.68-1.54(m,1H),1.45(s,9H),1.45-1.32(m,1H),1.13(bs,2H),0.93(s,3H),0.82(s,3H)。
中间体P2：(R)-2-溴-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡 唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(化合物XII)
Figure BDA0002267187560000172
步骤1：2-溴-7-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯IV
Figure BDA0002267187560000173
向5-氨基-3-溴-1H-吡唑II(20.0g,121mmol)在乙酸(200mL)中的溶液添加乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯III(25.9mL,127mmol)。将反应混合物加热回流并且搅拌20小时。然后使混合物冷却至室温，将沉淀的固体过滤，用乙醇和乙醚洗涤。获得呈奶油状固体的产物(27.9g,97.4mmol)，产率81％。MS-ESI：C9H7BrN3O3(m/z)计算值[M-H]-＝284.0，实测值284.0。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),6.15(s,1H),4.50(bs,1H),4.14(q,J＝7.1Hz,2H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：2-溴-7-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯V
Figure BDA0002267187560000181
将三乙胺(22.9mL,163mmol)添加至在步骤1中获得的2-溴-7-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯IV(9.34g,32.6mmol)和四丁基氯化铵(18.9g,65.3mmol)在乙腈(180mL)中的溶液。随后在15分钟期间滴加氯氧化磷(V)(30.4mL,326mmol)。将反应混合物加热回流并且搅拌20小时。在冷却至室温后，将反应混合物倾入饱和碳酸钠和冰的混合物中。将混合物用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并且在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液：己烷:AcOEt＝9:1至8:2,v/v)纯化。获得淡黄色无定形固体状的产物(6.86g,22.5mmol)，产率69％。MS-ESI:C9H8BrClN3O2(m/z)计算值[M+H]+＝303.9，实测值303.9。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.97(s,1H),6.90(s,1H),4.49(q,J＝7.1Hz,2H),1.46(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3:(R)-2-溴-7-((1-(叔丁氧基羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯VII
Figure BDA0002267187560000182
将三乙胺(8.05mL,57.7mmol)添加至在步骤2中获得的2-溴-7-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯VI(5.86g,19.2mmol)的乙腈(150mL)溶液。随后，向混合物在15分钟期间滴加(R)-4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯VI(中间体P1)(4.61g,20.2mmol)在乙腈(30mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌20小时，并且然后在减压下浓缩。将残余物溶于AcOEt(100mL)中并且添加水(100mL)。在相分离后，用AcOEt(2×100mL)萃取水相。将有机相合并，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并且在减压下蒸发。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液：庚烷:AcOEt＝95:5至85:15,v/v)纯化。获得呈奶油状无定形固体的产物(8.08g,16.3mmol)，产率85％。MS-ESI:C21H31BrN5O4(m/z)计算值[M+H]+＝496.2，实测值496.2。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ9.84(d,J＝8.8Hz,1H),8.70(s,1H),6.47(s,1H),5.32(t,J＝8.6Hz,1H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),4.20-3.95(m,1H),3.93-3.65(m,1H),3.13-2.93(m,1H),2.90-2.70(m,1H),2.08-1.95(m,1H),1.80-1.65(m,1H),1.48(s,9H),1.41(t,J＝7.1Hz,3H),1.09(s,3H),1.00(s,3H)。
步骤4:(R)-2-溴-7-((1-(叔丁氧基羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸VIII
Figure BDA0002267187560000191
向在步骤3中获得的(R)-2-溴-7-((1-(叔丁氧基羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯VII(8.06g,16.2mmol)在乙醇和水的混合物中的溶液添加氢氧化锂(3.41g,81.2mmol)。将混合物在55℃下加热并且搅拌90分钟。在冷却至室温后，将乙醇在减压下从混合物中蒸发。向残余物添加水(100mL)，并且随后添加1M盐酸水溶液直至白色固体沉淀。将固体过滤，用水洗涤并且干燥。然后将固体溶于二氯甲烷，干燥(Na2SO4)并且在减压下蒸发。将产率为97％、作为奶油状固体获得的粗产物(7.37g,15.7mmol)未经纯化用于下一步骤。
步骤5:(R)-4-((2-溴-6-氨基甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯IX
Figure BDA0002267187560000201
将来自步骤4的粗制(R)-2-溴-7-((1-(叔丁氧基羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸VIII(7.37g,15.7mmol)在氩气氛下溶于无水二氯甲烷(200mL)中。在将混合物冷却至0℃后，添加乙二酰氯(2.72mL,31.5mmol)。然后添加二甲基甲酰胺(0.5mL)的液滴。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。随后将反应混合物在减压下蒸发。将残余物溶于无水二氯甲烷(200mL)中。向混合物添加25％氨水(24.2mL,157mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，并且在减压下蒸发二氯甲烷。向残余物添加水(200mL)。将混合物用AcOEt(3×200mL)萃取。将有机相合并，干燥(Na2SO4)并且在减压下蒸发。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液：二氯甲烷:甲醇＝97:3,v/v)纯化。获得呈白色晶体状的产物(5.21g,11.1mmol)，产率71％。MS-ESI：C19H28BrN6O3(m/z)计算值[M+H]+＝467.1，实测值467.1。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.72(d,J＝9.0Hz,1H),8.35(s,1H),6.45(s,1H),6.04(bs,2H),5.27(t,J＝8.4Hz,1H),4.20-3.93(m,1H),3.90-3.63(m,1H),3.15-2.90(m,1H),2.90-2.67(m,1H),2.02(dq,J＝7.3,3.4Hz,1H),1.80-1.65(m,1H),1.47(s,9H),1.08(s,3H),0.99(s,3H)。
步骤6:(R)-2-溴-7-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺X
Figure BDA0002267187560000202
向来自步骤5的(R)-4-((2-溴-6-氨基甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)氨基)-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯IX(5.21g,11.1mmol)在二氯甲烷(80mL)中的溶液添加三氟乙酸(8.53mL,111mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将挥发物在减压下蒸发。向残余物添加水(100mL)，并且然后添加6M氢氧化钠直至pH＝12。从混合物中沉淀白色固体。将混合物用AcOEt(3×100mL)萃取。将有机相合并，干燥(Na2SO4)并且蒸发。将产率为100％、作为白色固体获得的粗产物(4.09g,11.1mmol)未经进一步纯化用于下一步骤。
步骤7：(R)-2-溴-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺XII
Figure BDA0002267187560000211
将来自步骤6的粗制(R)-2-溴-7-((3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺XI(2.05g,5.58mmol)在氩气氛下溶于无水二甲基甲酰胺(50mL)中。向所述溶液添加三乙胺(3.91mL,27.9mmol)并且然后添加6-氯哒嗪-3-甲腈(963mg,6.69mmol)。将反应混合物在80℃下加热并且搅拌1小时。在冷却至室温下，添加100mL的水并且用AcOEt(3mL×100)萃取混合物。将有机相合并，干燥并且在减压下蒸发。向残余物添加甲苯(50mL)并且在减压下蒸发。将此重复两次。将残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液：二氯甲烷:甲醇＝98:2,v/v)纯化。获得淡黄色固体状的产物(2.35g,4.99mmol)，产率89％。MS-ESI：C19H21BrN9O(m/z)计算值[M+H]+＝470.1，实测值470.1。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ11.06(d,J＝8.3Hz,1H),8.44(s,1H),7.50(d,J＝9.7Hz,1H),6.99(d,J＝9.7Hz,1H),6.45(s,1H),6.04(bs,2H),5,49(dd,J＝10.6,4.2Hz,1H),4.48(d,J＝13,3Hz,1H),4,29(d,J＝13.6Hz,1H),3.40(ddd,J＝13.6,9.4,3.3Hz,1H),3.17(d,J＝13.7Hz,1H),2.26(dq,J＝11.3,3.6Hz,1H),1.96-1.80(m,1H),1.11(s,3H),1.10(s,3H)。
由中间体P2和相应的硼酸XIIa或硼酸频哪醇酯XIIb根据以下实施例中所述的一般程序制备本发明的化合物。
一般程序：向Schlenk烧瓶中的(R)-2-溴-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(中间体P2)(1当量)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(0.1当量)和相应的硼酸(2当量)或硼酸频哪醇酯在脱气的二噁烷(20mL/1mmol P2)中的混合物，添加脱气的2M磷酸钾(3当量)水溶液。将氩气通过反应混合物吹扫15分钟。紧闭烧瓶，将反应混合物加热至120℃并且搅拌3小时。然后将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，通过硅藻土床过滤并且在减压下浓缩。将油状残余物通过柱色谱法(硅胶：洗脱液：己烷:AcOEt)纯化以获得产物。
实施例1)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000221
使用化合物P2(51mg,0.11mmol)和(4-甲氧基苯基)硼酸(33,mg,0.22mmol)制备，呈白色无定形固体(29mg,0.058mmol)，产率53％。MS-ESI：C26H28N9O2(m/z)的计算值[M+H]+＝498.2，实测值498.2。1HNMR(300MHz,CD3OD)δ8.51(s,1H),7.92(d,J＝8.7Hz,2H),7.66(d,J＝9.7Hz,1H),7.67-7.47(m,2H),7.35(d,J＝9.9Hz,1H),7.03(d,J＝8.6Hz,2H),6.71(s,1H),5.82-5.70(m,1H),4.67-4.55(m,1H),4.42-4.25(m,1H),3.85(s,3H),3.50-3.38(m,1H),3.21(d,J＝14.3Hz,1H),2.42-2.27(m,1H),2.05-1.85(m,1H),1.12(s,6H)
实施例2)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-氟-5-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000222
由化合物P2(47mg,0.10mmol)和(2-氟-5-甲氧基苯基)硼酸(34mg,0.20mmol)制备，呈白色无定形固体(25mg,0.049mmol)，产率49％。MS-ESI：C26H27FN9O2(m/z)计算值[M+H]+＝516.2，实测值516.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.22(bs,1H),8.67(s,1H),8.19(bs,1H),7.87(d,J＝9.7Hz,1H),7.59(dd,J＝5.8,3.2Hz,1H),7.55(bs,1H),7.49(d,J＝9.8Hz,1H),7.33(dd,J＝10.6,9.2Hz,1H),7.06(dt,J＝9.0,3.5Hz,1H),6.88(d,J＝3.3Hz,1H),5.58-5.46(m,1H),4.68(d,J＝13.7Hz,1H),4.33(d,J＝13.5Hz,1H),3.85(s,3H),3.34-3.24(m,1H),3.13(d,J＝13.7Hz,1H),2.36-2.24(m,1H),1.92-1.74(m,1H),1.05(s,3H),1.04(s,3H)。
实施例3)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000231
由化合物P2(50mg,0.11mmol)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡啶(45mg,0.22mmol)获得，呈黄色无定形固体(40mg,0.085mmol)，产率78％。MS-ESI：C24H25N10O(m/z)计算值[M+H]+＝469.2，实测值469.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.23(d,J＝6.2Hz,1H),9.26(dd,J＝2.0,0.5Hz,1H),8.65(s,1H),8.65(dd,J＝4.7Hz,1H),8.41(dt,J＝8.0,1.9Hz,1H),8.17(bs,1H),7.87(d,J＝9.7Hz,1H),7.56(ddd,J＝7.9,4.8,0.7Hz,1H),7.53(bs,1H),7.49(d,J＝9.8Hz,1H),7.13(s,1H),5.58-5,47(m,1H),4.63(d,J＝12.2Hz,1H),4.33(d,J＝14.0Hz,1H),3.44-3,34(m,1H),3.22(d,J＝13.5Hz,1H),2.32-2,20(m,1H),1.90-1,74(m,1H),1.04(s,3H),1.03(s,3H)。
实施例4)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000241
由化合物P2(47mg,0.10mmol)和(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸(31mg,0.20mmol)制备，呈白色无定形固体(33mg,0.066mmol)，产率66％。MS-ESI：C25H27N10O2(m/z)计算值[M+H]+＝499.2，实测值499.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.20(d,J＝5.9Hz,1H),8.87(d,J＝1.3Hz,1H),8.63(s,1H),8.32(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),8.14(bs,1H),7.87(d,J＝9.7Hz,1H),7.50(bs,1H),7.49(d,J＝9.7Hz,1H),7.01(s,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,1H),5.58-5.45(m,1H),4.62(d,J＝12.3Hz,1H),4.33(d,J＝13.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.44-3.34(m,1H),3.22(d,J＝13.6Hz,1H),2.31-2.,19(m,1H),1.90-1.72(1H),1.04(s,3H),1.02(s,3H)。
实施例5)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-乙氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000242
由化合物P2(53mg,0.11mmol)和(6-乙氧基吡啶-3-基)硼酸(37mg,0.22mmol)制备，呈奶油状无定形固体(34mg,0.066mmol)，产率60％。MS-ESI：C26H29N10O2(m/z)计算值[M+H]+＝513.2，实测值513.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.74(s,2H),8.04(d,J＝8.3Hz,1H),7.46(d,J＝9.5Hz,1H),6.91(d,J＝9.6Hz,1H),6.84(d,J＝8.6Hz,1H),6.77(s,1H),6.21(bs,2H),5.78-5.65(m,1H),4.53(d,J＝12.9Hz,1H),4.42(t,J＝7.1Hz,2H),4.32(d,J＝13.6Hz,1H),3.44(t,J＝11.5Hz,1H),3.19(d,J＝13.9Hz,1H),2.36(d,J＝11.2Hz,1H),2.06-1.86(m,1H),1.44(t,J＝7,1Hz,3H),1.16(s,6H)。
实施例6)
(R)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000251
由化合物P2(48mg,0.10mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡啶-2-胺(44mg,0.20mmol)制备，呈白色无定形固体(22mg,0.046mmol)，产率46％。MS-ESI：C24H26N11O(m/z)计算值[M+H]+＝484.2，实测值484.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.03-10.91(m,1H),8.56(dd,J＝2.3,0.7Hz,1H),8.40(s,1H),8.08(dd,J＝2.4,0.7Hz,1H),7.96(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.63(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.49(d,J＝9.6Hz,1H),6.98(d,J＝9.7Hz,1H),6.66(ddd,J＝8.7,2.1,0.7Hz,2H),6.62(s,1H),5.67(dd,J＝10.3,3.8Hz,1H),4.53(d,J＝13.7Hz,1H),4.30(d,J＝13.1Hz,1H),3.48-3.35(m,2H),2.42-2.30(m,1H),2.03-1.86(m,1H),1.14(s,6H)。
实施例7)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000252
由化合物P2(51mg,0.11mmol)和4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡啶-2-基)吗啉(58mg,0.20mmol)制备，呈奶油状无定形固体(20mg,0.036mmol)，产率33％。MS-ESI：C28H32N11O2(m/z)计算值[M+H]+＝554.3，实测值554.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.87(d,J＝8.8Hz,1H),8.78(d,J＝2.1Hz,1H),8.42(s,1H),7.97(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),7.44(d,J＝9.6Hz,1H),6.90(d,J＝9.7Hz,1H),6.73(d,J＝8.8Hz,1H),6.67(s,1H),5.94(bs,2H),5.71(ddd,J＝10.3,8.9,4.2Hz,1H),4.52(d,J＝13.3Hz,1H),4.29(d,J＝13.5Hz,1H),3.88-3.82(m,4H),3.64-3.57(m,4H),3.49-3.37(m,1H),3.17(d,J＝13.7Hz,1H),2.42-2.30(m,1H),1.94(ddd,J＝15.2,11.7,4.6Hz,1H),1.14(s,6H)。
实施例8)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000261
由化合物P2(53mg,0.11mmol)和(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸(34mg,0.22mmol)制备，呈白色无定形固体(42mg,0.084mmol)，产率76％。MS-ESI：C24H26N11O2(m/z)计算值[M+H]+＝500.2，实测值500.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.18(d,J＝8.1Hz,1H),9.03(s,2H),8.63(s,1H),7.46(d,J＝9.6Hz,1H),6.91(d,J＝9.6Hz,1H),6.80(s,1H),6.13(bs,2H),5.72-5.57(m,1H),4.52(d,J＝12.7Hz,1H),4.33(d,J＝13.7Hz,1H),4.10(s,3H),3.42(t,J＝10.9Hz,1H),3.17(d,J＝13.7Hz,1H),2.42-2,24(m,1H),2,06-1,90(m,1H),1.16(s,3H),1.15(s,3H)。
实施例9)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-乙氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000271
由化合物P2(50mg,0.11mmol)和(2-乙氧基嘧啶-5-基)硼酸(37mg,0.22mmol)制备，呈白色无定形固体(17mg,0.033mmol)，产率30％。MS-ESI：C25H28N11O2(m/z)计算值[M+H]+＝514.2，实测值514.2。H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.07(d,J＝8.8Hz,1H),9.00(s,2H),8.54(s,1H),7.45(d,J＝9.5Hz,1H),6.90(d,J＝9.7Hz,1H),6.76(s,1H),6.04(bs,2H),5.70-5,58(m,1H),4.50(q,J＝7.0Hz,3H),4.32(d,J＝13.6Hz,1H),3.41(t,J＝11.4Hz,1H),3.16(d,J＝13.6Hz,1H),2.34(d,J＝10.5Hz,1H),2,10-1,94(m,1H),1.47(t,J＝7.1Hz,3H),1.15(s,3H),1.14(s,3H)。
实施例10)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000272
由化合物P2(47mg,0.10mmol)和(6-氟吡啶-3-基)硼酸(28mg,0.20mmol)制备，呈奶油状无定形固体(38mg,0.078mmol)，产率78％。MS-ESI:(m/z)计算值[M+H]+＝487.2，实测值487.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.06(d,J＝8.8Hz,1H),8.79(d,J＝2.4Hz,1H),8.44(s,1H),8.29(ddd,J＝8.3,7.8,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝9.7Hz,1H),7.09(dd,J＝8.5,2.8Hz,1H),6.95(d,J＝9.7Hz,1H),6.74(s,1H),5.65(dd,J＝10.4,4.1Hz,1H),4.52(d,J＝13.3Hz,1H),4.31(d,J＝13.5Hz,1H),3.50-3.34(m,1H),3.18(d,J＝13.8Hz,1H),2.40-2,28(m,1H),2.06-1.88(m,1H),1.15(s,6H)。
实施例11)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000281
由化合物P2(201mg,0.43mmol)和2-甲氧基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡啶(202mg,0.86mmol)制备，呈白色无定形固体(144mg,0.29mmol)，产率67％。MS-ESI：C25H27N10O2(m/z)计算值[M+H]+＝499.2，实测值499.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.32(d,J＝8.8Hz,1H),8.73(s,1H),8.65(d,J＝5.1Hz,1H),8.24(s,1H),7.94(d,J＝9.8Hz,1H),7.93(s,1H),7.87(d,J＝5.1Hz,1H),7.60(bs,1H),7.57(d,J＝9.8Hz,1H),7.21(s,1H),5.62-5.50(m,1H),4.73(d,J＝11.9Hz,1H),4.42(d,J＝13.5Hz,1H),3.52-3.40(m,1H),3.28(d,J＝13.7Hz,1H),2.64(s,3H),2.35(d,J＝9,7Hz,1H),1.98-1.80(m,1H),1.11(s,3H),1.10(s,3H)。
实施例12)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲基吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000282
由化合物P2(49mg,0.10mmol)和2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡啶(44,mg,0.20mmol)制备，呈白色无定形固体(20mg,0.050mmol)，产率41％。MS-ESI：C25H27N10O(m/z)实测值[M+H]+＝483.2，实测值483.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ10.89(d,J＝8.5Hz,1H),8.62(d,J＝5.4Hz,1H),8.36(s,1H),7.66-7.57(m,2H),7.46(d,J＝9.6Hz,1H),6.92(d,J＝9.5Hz,1H),6.85(s,1H),5.86-5.61(m,3H),4.58(d,J＝13.0Hz,1H),4.33(d,J＝13.6Hz,1H),3.44(t,J＝12.3Hz,1H),3.19(d,J＝13.6Hz,1H),2.6(s,3H),2.40(dd,J＝13.4,3.7Hz,1H),2.07-1.90(m,1H),1.16(s,6H)。
实施例13)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-吗啉代吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000291
由化合物P2(52mg,0.11mmol)和(2-吗啉代吡啶-4-基)硼酸(46mg,0.22mmol)制备，呈白色无定形固体(30mg,0.054mmol)，产率49％。MS-ESI：C28H32N11O2(m/z)实测值[M+H]+＝554.3，实测值554.2。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.05(d,J＝8.2Hz,1H),8.48(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.49(d,J＝9.6Hz,1H),7.20(dd,J＝5.2,1.1Hz,1H),7.12(s,1H),6.97(d,J＝9.7Hz,1H),6.78(s,1H),5.68(dd,J＝10.3,4.0Hz,1H),4.55(d,J＝13.4Hz,1H),4.28(d,J＝13.8Hz,1H),3.91–3.84(m,4H),3.64–3.56(m,4H),3.43-3,31(m,1H),3.18(d,J＝13.7Hz,1H),2.45–2.30(m,1H),2.05-1.89(m,1H),1.15(s,6H)。
实施例14)
(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002267187560000292
将盐酸的37％水溶液(170μl,2.01mmol,1.0当量)添加至(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺(100mg,0.201mmol)在丙酮(10mL)的溶液。将沉淀的白色固体过滤，用丙酮洗涤并且干燥以获得产率为84％的产物(90mg,0.168mmol)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.20(d,J＝6.6Hz,1H),9.00(s,1H),8.57(bs,1H),7.95-7.78(m,4H),7.50(d,J＝9.8Hz,1H),7.04(s,1H),6.94(d,J＝9,8Hz,1H),5.70-5.50(m,1H),4.63(d,J＝13.2Hz,1H),4.35(d,J＝13.7Hz,1H),3.98(s,3H),3.39(t,J＝11.3Hz,1H),3.23(d,J＝13.7Hz,1H),2.35-2.22(m,1H),1.95-1.77(m,1H),1.08(s,3H),1.05(s,3H)。
本发明的化合物的生物活性
体外JAK激酶抑制测定
使用以下描述的激酶JAK抑制测定在体外分析本发明的化合物的作用。
将测试化合物溶于100％DMSO中并且将获得的储备溶液在反应缓冲液(50mM TrispH 7.5,10mM MgCl2,0.25mM EGTA,0.1mMNa3VO4,0.01％曲拉通X-100,2.5mM DTT)中连续稀释。将重组激酶JAK1(ProQinase)、JAK2或JAK3(Carna Biosciences)在稀释缓冲液(50mMTris-HCl pH 7.5,150mM NaCl,10％丙三醇，0.05％曲拉通X-100,1mM DTT)中稀释至最终浓度3ng/μL(JAK1)、0.1ng/μL(JAK2)或0.2ng/μL(JAK3)。将5μL获得的化合物溶液和5μL各个激酶溶液添加至96孔板的孔内。为了引发测试化合物与酶之间的相互作用，将所述板在板-Thermo-振动器中以400rpm在轨道搅拌的情况下在25℃下孵育10分钟。阴性对照的孔含有以上提及的所有试剂但是不含测试化合物和激酶，并且阳性对照的孔含有以上提及的所有试剂以及测试化合物。通过添加15μL以下溶液引发酶反应：5倍浓缩的反应缓冲液(50mMTris pH 7.5,10mM MgCl2,0.25mM EGTA,0.1mM Na3VO4,0.01％曲拉通X-100,2.5mMDTT)、水、30μM ATP和特别是激酶：JAK1–60μM肽IRS-1(Enzo)、JAK2或JAK3–10μM肽IGF-1Rtide(Lipopharm)。然后，将所述板在板-Thermo-振动器中以400rpm在轨道搅拌的情况下在25℃下孵育1小时。然后使用ADP-Glo激酶测定盒(Promega)进行在酶反应中形成的ADP的检测。对于此目的，向96孔板的孔内添加25μL的ADP-Glo试剂，并且将所述板在板-Thermo-振动器中以400rpm在轨道搅拌的情况下在25℃下孵育40分钟。然后向96孔板的孔内添加50μL的激酶检测试剂，并且将所述板在板-Thermo-振动器中以400rpm在轨道搅拌的情况下在25℃下孵育30分钟。在孵育后，使用Victor x光亮度计(Perkin Elmer,Inc.)测量发光强度。
基于含有各种浓度的测试化合物的孔和对照孔中的亮度测量，确定IC50值。用Graph Pad软件v.5.03使用非线性回归方法通过拟合曲线的点来确定这些值。使用各个对照的至少3个孔在两组96孔板上以至少6次重复(6个孔)测试各个化合物。
本发明所选化合物的激酶JAK抑制活性的平均结果示于以下表1中。所示的数据显示出本发明的化合物能够相对于激酶JAK2优先地抑制JAK1和JAK3激酶。
表1.
实施例编号 JAK1 IC<sub>50</sub>[nM] JAK2 IC<sub>50</sub>[nM] JAK3 IC<sub>50</sub>[nM]
1 1.80 19.01 1.2
2 3.74 59.28 3.77
3 4.47 31.15 1.58
4 2.67 27.66 2.67
5 8.08 34.38 1.8
6 0.38 2.98 0.16
7 0.75 3.40 0.19
8 8.54 26.77 2.24
9 47.48 89.61 18.75
10 2.37 12.82 0.6
11 0.05 1.18 0.03
12 0.51 5.05 0.29
13 0.51 2.82 0.2
在体外测定TF-1细胞活力
使用以下描述的细胞活力测定在体外测试本发明的化合物的活性的作用。
将测试化合物溶于100％DMSO中并且将获得的储备溶液在OptiMEM培养基(减少的血清培养基-Thermo Fisher Scientific)中连续稀释。将培养基(80％RPMI 1640+20％FBS))中的TF-1细胞(DSMZ编号：ACC 334)在存在5ng/mL IL-3或20ng/mL IL-4下以每个孔90μl的体积、每个孔10000个细胞沉积在96孔板上。向96孔板的孔中添加10μL制备的10倍化合物储备溶液。使96孔板上的细胞在37℃、5％CO2下用所述化合物孵育72小时。随后，使用ATPlite盒(PerkinElmer)测量细胞的活力。对于此目的，将50μL裂解缓冲液(哺乳动物细胞裂解溶液)添加至96孔板的孔中，并且将所述板在板thermo-振动器中以600rpm在轨道搅拌的情况下在25℃下孵育10分钟。然后向96孔板的孔中添加50μL底物(底物溶液)，并且在板thermo-振动器中以600rpm在轨道搅拌的情况下在黑暗中孵育15分钟。在孵育时间后，使用Victor x光亮度计(Perkin Elmer,Inc.)测量孔中的发光强度。
基于含有各种浓度的测试化合物的孔和对照孔中的亮度强度测量，确定IC50值。用Graph Pad软件v.5.03使用非线性回归方法通过拟合曲线的点来确定这些值。使用各个对照的至少3个孔在两组96孔板上以至少6次重复(6个孔)测试各个化合物。
在存在IL-3(JAK2激活)或IL-4(JAK1/JAK3激活)下，本发明所选化合物的抑制细胞TF-1的活力的活性的平均结果示于以下表2中。所示的数据显示出本发明的化合物能够抑制JAK激酶，并且可以看见相对于激酶JAK2更有效地JAK1/JAK3激酶抑制。
表2
Figure BDA0002267187560000321
Figure BDA0002267187560000331
在体外测定通过淋巴细胞对TNFα和INFγ产生的抑制
使用以下描述的体外测定测试本发明的化合物的活性。
将测试化合物溶于100％DMSO中并且将获得的储备溶液在OptiMEM培养基(减少的血清培养基-Thermo Fisher Scientific)中连续稀释。从由人外周血获得的白血球顶部涂层中分离淋巴细胞。使用Ficoll-Paque+Leucosept梯度方法进行外周血单核细胞的分离，并且使用CD4+T细胞分离盒进行淋巴细胞分离，以及使用T细胞激活/扩增盒(MiltenyiBiotec)进行激活。将培养基(90％RPMI 1640+10％FBS)中的分离细胞以450μL/孔、300000/细胞接种于12孔板中，并且添加50μL制备的10倍测试化合物的储备溶液。在48小时后，收集上清液用于测定分泌的细胞因子的水平。在测定前，将细胞以1000g离心10分钟。使用LEGENDplex人Th细胞因子盒用流式细胞仪FACSCalibur进行测定。结果以相对于对照细胞通过淋巴细胞T分泌的TNFαi INFγ细胞因子的抑制百分比示于表3中。
表3
Figure BDA0002267187560000332
在体外测定STAT6磷酸化抑制
使用以下描述的体外测定测试本发明的化合物的活性。
将测试化合物溶于100％DMSO中并且将获得的储备溶液在OptiMEM培养基(减少的血清培养基-Thermo Fisher Scientific)中连续稀释。将培养基(80％RPMI 1640+20％FBS)中的TF-1细胞(DSMZ编号：ACC 334)在存在20ng/mL的IL-4下以90μl/孔、700000个细胞/孔接种在12孔板上。向12孔板的孔中添加100μL获得的10倍化合物溶液。使12孔板上的细胞在37℃、5％CO2下用测试化合物孵育1小时。随后，将细胞用PBS洗涤，在添加有EDTA、蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中裂解，并且在冰上孵育5分钟。使用PierceBCA蛋白质测定盒(Thermo Fisher Scientific)检测蛋白质浓度。通过电泳(SDS-PAGE)在8％聚丙烯酰胺凝胶上分离蛋白质裂解物，然后湿转移在硝酸纤维素膜上，并且根据抗体制造商的说明书检测测试蛋白质。
基于化学发光强度的测量，进行光密度分析，将用各种浓度的测试化合物处理细胞获得的结果与对照细胞获得的那些相比，并且测定IC50值。
用Graph Pad软件v.5.03使用非线性回归方法通过拟合曲线的点来确定这些值。在至少3次重复中测试各个化合物。在存在IL-4(JAK1/JAK3激活)下，本发明所选化合物的抑制TF-1中的STAT6蛋白质磷酸化的活性的平均结果示于以下表4中。
表4
实施例编号 IC<sub>50</sub>[nM]
4 442.0
7 115.8
11 114.5
12 149.8
13 214.8

Claims (14)

1.通式(I)的化合物或其酸加成盐
Figure FDA0003562340000000011
其中R1表示：
-被选自卤素和C1-C3烷氧基中的一或两个取代基取代的苯基；或者
-具有1或2个氮原子的6元杂芳基，其是未取代的或被选自以下的取代基取代：
-NH2，
-卤素，
-C1-C4烷基，
-C1-C3烷氧基，以及
-包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R1表示被选自卤素和C1-C3烷氧基中的一个或两个取代基取代的苯基。
3.如权利要求1所述的化合物，其中R1表示具有1或2个氮原子的6元杂芳基，其是未取代的或被选自以下的取代基取代：
-NH2，
-卤素，
-C1-C4烷基，
-C1-C3烷氧基，以及
-包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基。
4.如权利要求3所述的化合物，其中所述杂芳基为吡啶基。
5.如权利要求3所述的化合物，其中所述杂芳基为嘧啶基。
6.如权利要求4或5所述的化合物，其中所述杂芳基被选自C1-C4烷基、C1-C3烷氧基和包含选自N和O中的1或2个杂原子的6元杂环基中的取代基取代。
7.如权利要求4所述的化合物，其中吡啶基被C1-C3烷氧基取代。
8.如权利要求7所述的化合物，其中所述吡啶基是吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基。
9.如权利要求5所述的化合物，其中嘧啶基被C1-C3烷氧基取代。
10.如权利要求9所述的化合物，其中所述嘧啶基是嘧啶-5-基。
11.如权利要求1所述的化合物，选自以下：
1)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
2)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-氟-5-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
3)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
4)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
5)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-乙氧基吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
6)(R)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
7)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-吗啉代吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
8)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
9)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-乙氧基嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
10)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
11)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
12)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-甲基吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
13)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(2-吗啉代吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺；
14)(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺盐酸盐。
12.如权利要求11所述的化合物，其为(R)-7-((1-(6-氰基哒嗪-3-基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)氨基)-2-(6-甲氧基吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酰胺或其酸加成盐。
13.药物组合物，包含作为活性成分的权利要求1至12中任一项所述的化合物。
14.权利要求1至12中任一项所述的化合物在制备用于治疗慢性炎症性疾病和自身免疫疾病的药物中的用途。
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