KR102503542B1 - 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함하는 피부 개선용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명의 실시예에 따라, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물이 제공된다.

Description

오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함하는 피부 개선용 조성물{COMPOSITION FOR IMPROVING SKIN COMPRISING MIXTURE OF OREGANO EXTRACT AND CENTELLA ASIATICA-DERIVED EXOSOME}
본 발명은 피부 개선용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함함으로써, 항염, 피부 보습 등의 효과가 우수한 피부 개선용 조성물에 관한 것이다.
엑소좀(Exosome)이란 세포 내부에서 분비되어 세포 외부 공간으로 방출되는 나노 크기의 세포외소포(Extracellular vesicle)를 의미한다. 이러한 엑소좀은 모체가 되는 세포 내부의 단백질, 지질, 대사물질 및 핵산 등의 물질을 유사하게 포함하고, 세포 사이에서 상기 물질들의 전달자 역할을 한다. 최근 들어 이러한 세포 사이에서 물질을 전달하는 엑소좀의 기능을 활용하여, 약물이나 백신 등을 표적 기관에 전달하는 기술 등이 개발되고 있으나, 피부 미용 분야에 엑소좀을 활용하는 연구는 다소 미진한 상태이다.
한편, 피부 미용 업계에서 케미컬 프리 움직임과 비건 화장품에 관한 요구가 대두됨에 따라, 이러한 요구를 충족시킬 수 있도록 다양한 형태의 천연 추출물을 함유하는 피부 개선용 조성물이 개발되고 있다. 이러한 천연 추출물은 피부에 자극을 유발하지 않으며, 안전성 및 피부 독성 제거 측면에서 우수한 효과가 있다.
최근에는 다양한 천연 추출물의 기능을 부여하기 위해 이종 이상의 천연 추출물을 혼합한 형태의 혼합물을 활용하는 연구가 진행되고 있다. 그러나 이처럼 추출물과 추출물을 혼합할 경우, 침전, 제형 불안정, 사용감 저하 등의 문제가 발생하고, 이와 같은 문제를 최소화하기 위하여 특정 물질을 제거할 경우 효능이 떨어지는 문제가 있다.
따라서, 다양한 천연 추출물의 유효성분을 포함하면서도 제형이 안정적으로 유지되며, 나아가 이러한 천연 추출물들의 효능을 피부에 잘 전달할 수 있는 피부 개선용 조성물의 개발이 필요하다.
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함함으로써, 유효성분들을 효율적으로 피부에 전달하여 항염, 피부 보습 등에 우수한 효과를 갖는 피부 개선용 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
본 발명의 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재들로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 실시예에 따라, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물이 제공된다.
또한, 상기 오레가노 추출물 대비 상기 병풀 유래 엑소좀의 중량비는 1 : 0.1 내지 10일 수 있다.
또한, 상기 조성물은, NO(Nitric Oxide)의 생성을 억제할 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 히알루론산의 생성을 촉진할 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 항염 및 피부 보습 중 적어도 하나의 효과가 우수할 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 화장료 조성물일 수 있다.
본 발명의 실시예에 따라, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물의 제조 방법이 제공된다. 상기 방법은, 오레가노를 용매로 추출하여 오레가노 추출물을 수득하는 단계; 병풀로부터 엑소좀을 분리하여 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계; 및 상기 오레가노 추출물 및 상기 병풀 유래 엑소좀을 혼합하는 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 혼합하는 단계는, 상기 오레가노 추출물 대비 상기 병풀 유래 엑소좀의 중량비를 1 : 0.1 내지 10으로 하여 혼합할 수 있다.
또한, 상기 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계는, 병풀을 정제수에 부유시켜 원심 분리한 후 1차 상등액을 수득하는 단계; 상기 1차 상등액을 원심 분리한 후 2차 상등액을 수득하는 단계; 상기 2차 상등액을 원심 분리한 후 엑소좀을 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계; 상기 2차 상등액을 재원심 분리한 후 추가 엑소좀을 2차 펠렛층에 가라앉히는 단계; 및 상기 1차 펠렛층 및 상기 2차 펠렛층을 정제수에 재부유시켜 엑소좀을 분리하는 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 오레가노 추출물을 수득하는 단계는, 60 내지 70℃의 조건에서 2 내지 3시간 동안 열수 추출하여 수행될 수 있다.
본 발명에 따르면, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함함으로써, 세포 내에 포함된 유효성분들을 효율적으로 피부에 전달하여 항염, 피부 보습 등에 우수한 효과를 제공할 수 있다.
본 발명에 따르면, 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀을 단독으로 포함하는 경우에 비하여 산화질소를 보다 효율적으로 억제하고, 히알루론산의 생성을 촉진할 수 있다.
또한, 본 발명은 식물성 추출물과 식물에서 유래한 엑소좀을 혼합 사용한 것으로, 제형 안정성이 우수하고, 식물성 추출물의 효능을 피부에 효과적으로 전달하여 피부 개선 효능이 우수하다.
또한, 본 발명의 피부 개선용 조성물은 식물성 천연 성분을 이용한 것으로, 피부에 과도한 자극을 유발하지 않고 부작용 없이 안전하게 사용할 수 있다.
본 발명의 상세한 설명에서 인용되는 도면을 보다 충분히 이해하기 위하여 각 도면의 간단한 설명이 제공된다.
도 1은 본 발명의 실시예 및 비교예에 따른 항염 효능 평가와 관련된 도면이다.
도 2는 본 발명의 실시예 및 비교예에 따른 피부 보습 효능 평가와 관련된 도면이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다. 또한, 본 발명의 실시예를 설명함에 있어, 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 실시예에 대한 이해를 방해한다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다. 또한, 이하에서 본 발명의 실시예들을 설명할 것이나, 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정되거나 제한되지 않고 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있다.
본 발명의 피부 개선용 조성물은, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함할 수 있다.
오레가노(Origanum Vulgare; Oregano)는 쌍떡잎식물 꿀풀과 오레가노속에 속하는 식물로, 다양한 비타민, 미네랄, 페놀산, 플라보노이드 등의 성분이 함유되어 있고, 항산화, 항염, 항균 등의 활성을 갖는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 '오레가노 추출물'은 용매를 이용하여 오레가노를 추출한 것을 의미한다. 추출물 제조에 이용되는 '오레가노'는, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거치지 않은 원물이거나 분쇄 또는 마쇄 과정을 거친 절단물일 수 있고, 오레가노의 뿌리, 잎, 가지, 줄기, 꽃, 열매 및 뿌리 껍질 등 모든 부위를 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노 추출 시 이용되는 '용매'는, 물일 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니고, 당해 기술 분야에서 적용 가능한 다양한 용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 예를 들어, 추출 용매로 물(또는 증류수); 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글라이콜, 프로필렌글라이콜, 메틸프로판다이올, 1,2-헥산다이올 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노 추출물의 추출 방법은, 열수 추출, 침지 추출, 환류 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 고온 추출, 고압 추출 또는 초음파 추출 등의 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출 방법을 이용할 수 있다. 이때, 오레가노 추출물은 추출, 분획 또는 정제 등 각각의 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획물, 그들의 희석액, 농축액을 모두 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노 추출물은, 액상의 형태일 수도 있고, 액상의 추출물을 건조한 고형 형태이거나, 고형 형태의 추출물을 분쇄한 분말 형태일 수 있다. 이때, 건조 방식은 분무건조, 동결건조, 진공건조, 열풍건조 등 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 다양한 방식이 적용될 수 있다.
본 발명에서는 병풀로부터 분리한 엑소좀을 오레가노 추출물과 혼합 사용함으로써 유효성분들을 효율적으로 피부에 전달하여 피부 개선용 조성물의 효능을 증가시킬 수 있다.
병풀(Centella Asiatica)은 미나리과 병풀속 식물로, 트리테르페노이드 사포닌, 트리테르펜, 플라보노이드, 아시아티코사이드 등의 성분이 함유되어 있고, 위 점막 보호, 항바이러스, 소염, 항우울, 항종양 등의 활성을 갖는 것으로 알려져 있다.
'엑소좀(Exosome)'은 세포 내부에서 분비되어 세포 외부 공간으로 방출되는 나노 크기의 세포외소포(Extracellular vesicle)를 의미한다. 일반적으로 이러한 엑소좀은 모체가 되는 세포 내부의 단백질, 지질, 대사물질 및 핵산 등의 물질을 유사하게 포함하고, 세포 사이에서 상기 물질들의 전달자 역할을 한다.
'병풀 유래 엑소좀'이란, 병풀 또는 병풀 식물세포에서 분비되는 막 구조의 소포체를 분리한 것으로, 예를 들어, 병풀의 잎, 가지, 줄기, 꽃, 열매, 뿌리 및 뿌리 껍질 등에서 유래된 것일 수 있고, 구체적으로 병풀의 건초에서 유래된 것일 수 있다.
실시예에 따라, 병풀로부터 엑소좀을 분리하는 방법으로는, 초원심 분리(Ultracentrifugation)를 이용할 수 있으며, 초원심 분리는 초고속 원심분리기로 1회 이상, 구체적으로 2회 이상으로 원심 분리함으로써 수행될 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니고, 분별 원심 분리(Differential Centrifugation), 등밀도 원심 분리(Equilibrium Density Centrifugation), 밀도 구배(Density Gradient), 여과(Filtration), 투석(Dialysis), 자유 유동 전기이동(Free-flow Electrophoresis) 등의 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법을 이용하여 수행될 수 있다.
본 발명의 피부 개선용 조성물은, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합하여 수득된 혼합물을 포함할 수 있다. 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물은 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀을 단독으로 사용하는 것에 비해, 항염 및 피부 보습 중 적어도 하나의 효과가 우수할 수 있다.
또한, 오레가노 추출물과 병풀 추출물을 단순 혼합하여 사용할 경우, 제형의 침전, 분리 등의 제형 불안정이 발생하는 문제점이 나타날 수 있으나, 본 발명은 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함하여 상기와 같은 문제점을 최소화할 수 있다. 이에 더하여, 병풀 유래 엑소좀에 의하여 세포 내 유효성분들을 피부에 보다 효율적으로 전달할 수 있어 항염, 피부 보습, 사용감 등의 효능은 향상될 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물에서, 오레가노 추출물 대비 병풀 유래 엑소좀의 중량비는 1 : 0.1 내지 10일 수 있고, 구체적으로 1 : 0.1 내지 3일 수 있고, 더 구체적으로 1 : 0.5 내지 2일 수 있다. 오레가노 추출물 대비 병풀 유래 엑소좀을 상기와 같은 중량비로 포함하는 경우, 엑소좀 내에 함유되는 단백질의 양이 증가하고, 항염, 피부 보습 등의 효과가 향상될 수 있다. 구체적으로, 오레가노 추출물 대비 병풀 유래 엑소좀의 중량비가 1 : 0.5 내지 2일 경우, 엑소좀 내에 고함량의 단백질이 170㎍/mL 이상으로 함유되고 세포 내 유효성분들을 보다 효율적으로 전달하여 항염, 피부 보습의 효과가 극대화될 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명에 따른 피부 개선용 조성물에서, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물은 조성물 총 중량 대비 10 내지 90 중량％로 포함될 수 있고, 구체적으로 30 내지 50 중량％로 포함될 수 있다. 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물이 상기 범위 내로 포함될 경우, 본 발명이 의도한 효과가 도출되며, 제형 안전성을 만족할 수 있고, 비용 대비 효과의 측면에서도 상기 범위로 사용하는 것이 적절할 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명에 따른 피부 개선용 조성물은 산화질소(NO, Nitric Oxide)의 생성을 억제할 수 있다. 산화질소는 산화질소의 합성효소(Nitric Oxide Synthase, NOS)의 작용에 의하여 L-아르기닌(L-arginine)으로부터 합성되는 물질을 의미한다. 일반적으로 산화질소는 iNOS(Induced NOS)에 의하여 과다 생성되며, 슈퍼옥사이드(Superoxide)와 반응하여 형성된 퍼옥시니트라이트(Peroxynitrite)는 강력한 산화제로 작용하여 세포에 손상을 입힘으로써 염증과 암 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다.
본 발명의 피부 개선용 조성물은 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함함으로써, 산화질소의 생성을 효과적으로 억제시켜 항염의 효능을 제공할 수 있다. 본 발명에서 '항염'은 염증을 억제하는 효능을 의미하는 것으로, 피부에 항염 작용이 이루어질 경우 염증성 여드름, 트러블 등이 개선될 수 있고, 기타 염증성 피부 질환이 개선될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명에 따른 피부 개선용 조성물은 히알루론산(Hyaluronic Acid)의 생성을 촉진할 수 있다. 히알루론산은 글리코사미노글리칸(Glycosaminoglycans)의 일종으로 글루쿠론산과 N-아세틸글루코사민 잔기가 반복적으로 연결되어 있는 사슬모양의 고분자 다당류 물질을 의미한다. 일반적으로 체내에 존재하는 히알루론산은 주로 각질형성세포와 섬유아세포에 의해 합성되며, 피부의 히알루론산은 노화와 함께 감소되어 수분 함유량 감소, 피부 탄력 저하 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다.
본 발명의 피부 개선용 조성물은 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 포함함으로써, 히알루론산의 생성을 효과적으로 촉진시켜 피부 보습의 효능을 제공할 수 있다. 본 발명에서 '피부 보습'은 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 효능을 의미하는 것으로, 피부의 주름 개선, 탄력 증가 등에 도움을 줄 수 있다. 또한, 본 발명에서 '피부'는 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로서, 얼굴 또는 바디 등의 체표를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피를 포함하는 광범위한 개념이다.
이와 같이, 본 발명의 피부 개선용 조성물은, 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀을 단독으로 포함하거나, 천연 추출물들을 단순 혼합한 것에 비하여 항염, 피부 보습 등의 효능이 매우 우수한 특징이 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 조성물은, 화장료 조성물, 약학적 조성물 등으로 활용될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 화장료 조성물은, 영양 크림, 에센스, 앰플과 같은 기능성 화장품이나, 화장수, 로션, 페이스트 등의 기초 화장품으로 제조될 수 있다. 이 외에도, 비누, 세정제, 클렌징 크림, 클렌징 워터 등으로 제조되거나, 립스틱, 립밤, 마스카라, 블러셔, 쉐이딩, 하이라이터, 메이크업 베이스, 파운데이션, 팩트, 컨실러, 스킨커버 등과 같은 색조 화장품으로 제조될 수 있다. 또한, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤 등과 같은 모발 세정 제품으로 제조될 수도 있다. 또한, 예를 들어, 팩, 하이드로젤 슬리밍패치 등과 같이 피부에 부착되는 제품으로 제조되거나, 미스트, 에어로졸 등과 같이 피부에 분사되는 제품으로 제조될 수도 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 화장료 조성물은, 본 발명의 주된 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 당업계에서 통상적으로 사용되는 다른 성분, 예를 들면, 점증제, pH 조절제, 등장화제, 계면활성제, 안정화제, 보존제, 방부제, 자외선 흡수제, 살균제, 보습제, 차단제, 산화 방지제, 유기 안료, 무기 안료, 향료, 비타민 등을 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니며, 본 발명의 화장료 조성물의 제형에 따라 다양한 성분들을 더 포함할 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물이 페이스트, 크림 또는 젤의 제형으로 제형화될 경우, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물을 더 포함할 수 있다.
또한, 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물이 파우더 또는 스프레이의 제형으로 제형화될 경우, 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄하이드록사이드, 칼슘실리케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물을 더 포함할 수 있으며, 비누의 제형으로 제형화될 경우, 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스터 염, 지방산 단백질 하이드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등을 더 포함할 수 있다.
다른 예로, 본 발명의 화장료 조성물이 용액 또는 유탁액의 제형으로 제형화될 경우, 용매, 용해화제 또는 유탁화제, 예를 들어, 물, 에탄올, 아이소프로필알코올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글라이콜, 부틸렌글라이콜 등을 더 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명은 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다. 실시예에 따라, 피부 질환은, 염증성 질환 및 피부 건조성 질환 중 적어도 하나일 수 있다.
예를 들어, 염증성 질환은, 아토피성 피부염, 지루성 피부염, 건성 피부염, 접촉 피부염, 화폐상 피부염 등의 피부염 외에도 여드름, 벌레 물림, 두드러기 등으로 인한 염증 등을 포함할 수 있다. 또한, 예를 들어, 피부 건조성 질환은, 피부 건조증, 건성 습진, 건선 및 색소성 건피증 등을 포함할 수 있다. 즉, 본 발명의 약학적 조성물은, 항염, 피부 보습의 활성을 갖는 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함하기 때문에, 상기 피부 질환을 개선 또는 치료하는 등의 다양한 용도로 제조될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 약학적으로 허용 가능한 염을 더 포함할 수 있다. 여기서 '약학적으로 허용 가능한 염'은, 화합물이 투여되는 유기체에 심각한 자극을 유발하지 않고 화합물의 생물학적 활성과 물성들을 손상시키지 않는 염일 수 있다.
예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염은, 무기산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 또는 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산, N-아세틸시스테인 등을 포함하는 유기산으로부터 형성될 수 있다.
또한, 예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염은, 무기 염기 또는 유기 염기를 자유 산에 첨가하여 제조될 수 있다. 무기 염기로부터 유도된 염은, 비제한적으로 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘 염 등을 포함할 수 있다. 유기 염기로부터 유도된 염은, 비제한적으로 1차, 2차 및 3차 아민, 자연적으로 발생하는 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어, 아이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 에탄올아민, 리신, 아르기닌, N-에틸피페리딘, 피페리딘, 폴리이민 수지 등의 염을 포함한다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 약학적으로 허용 가능한 담체(carrier) 또는 첨가제를 더 포함할 수 있다. 여기서 '약학적으로 허용 가능한 담체'는, 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용 또는 처방 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않으며, 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물일 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 고형 제제 또는 액상 제제로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 고형 제제로 제형화될 경우, 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등을 더 포함할 수 있고, 액상 제제로 제형화될 경우, 물, 프로필렌글라이콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등을 더 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 더 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 고형 제제는, 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 산제는, 본 발명의 유효성분인 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물과 유당, 전분, 미결정 셀룰로오스 등의 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는, 본 발명의 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물과 담체, 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필셀룰로오스 등의 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한, 정제는, 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 치료해야 할 질환 또는 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은, 투여 경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약학적으로 허용 가능한 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은, 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있으며, 약학적 조성물의 투여 형태, 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있고, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 형태는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 단독으로 또는 기타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. 또한, 예를 들어, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 방식은, 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여뿐만 아니라, 질환 부위에 조성물을 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물은 다음의 방법을 통해 제조될 수 있다.
우선, 오레가노를 용매로 추출하여 오레가노 추출물을 수득할 수 있다. 본 발명의 오레가노 추출물을 수득하는 단계는, 원료를 준비하는 단계; 오레가노 및 용매를 혼합하는 단계; 및 오레가노를 추출하는 단계를 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 원료를 준비하는 단계는, 오레가노를 생물로 준비한 다음, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거쳐 절단시킴으로써 수행될 수 있다. 다만, 원료로서 사용되는 오레가노는, 분쇄 과정을 거친 절단물로 한정하는 것은 아니고, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거치지 않은 원물일 수도 있다. 또한, 오레가노의 잎, 씨앗, 가지, 줄기, 꽃, 열매, 뿌리 및 뿌리 껍질 등 모든 부위를 포함할 수 있다. 예를 들어, 오레가노의 잎 부분을 세척하여 물기를 제거한 뒤 분쇄하여 사용할 수 있으며, 이때, 오레가노는 채취한지 7일 이내의 것을 사용할 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노 및 용매를 혼합하는 단계는, 용매로서 물을 사용함으로써 수행될 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니고, 당해 기술 분야에서 적용 가능한 다양한 용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 예를 들어, 오레가노 및 용매를 1 : 20의 중량비로 혼합할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니고, 본 발명의 주된 효과를 해치지 않는 범위 내에서 오레가노 및 용매의 혼합 비율을 조절할 수 있다.
실시예에 따라, 오레가노를 추출하는 단계는, 오레가노를 열수 추출함으로써 수행될 수 있다. 다만, 추출 방법은, 열수 추출에 한정하지 않으며, 침지 추출, 환류 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 고온 추출, 고압 추출 또는 초음파 추출 등의 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출 방법을 이용할 수 있다.
예를 들어, 오레가노 추출물은, 60 내지 70℃의 조건에서 2 내지 3시간 동안 열수 추출하여 수득될 수 있다. 추출 용매와의 혼합 비율, 추출 온도 또는 추출 시간은 이에 한정되는 것은 아니나, 상기 범위를 벗어날 경우에는 추출 조건이 맞지 않아 충분한 항염 효과 및 피부 보습 효능을 나타낼 수 없을 뿐만 아니라, 추출 성분의 효능이 떨어질 수 있다.
부가적으로, 오레가노 추출물을 냉장 및 여과하는 과정이 더 이루어질 수 있다. 예를 들어, 추출된 액상의 오레가노 추출물을 냉장 상태에서 3시간 동안 열을 식히고, 바틀 탑 필터(Bottle Top Filter)를 이용하여 오레가노 추출물을 여과할 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니고, 실온 상태에서 추출물의 열을 식히거나, 여과포 또는 여과지 등을 이용하여 추출물을 여과하는 등 당업계에서 사용되는 다양한 방법을 통하여 추출물을 여과할 수 있다. 이와 같은 여과 과정이 수행됨에 따라, 오레가노 추출물 외의 잔여물은 걸러내어 오레가노 추출물의 순도를 높이고, 오레가노 추출물의 오염은 최소화할 수 있다.
부가적으로, 용매를 이용하여 추출된 액상의 추출물을 건조하여 고형 형태로 제조하거나, 고형 형태의 추출물을 분쇄하여 분말 형태로 제조하는 등 후가공 처리가 더 이루어질 수 있다. 이때, 건조 방식은 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 다양한 방식이 적용될 수 있다. 또한, 오레가노 추출물을 감압 증류하거나, 농축시키는 등 다양한 방식으로 제조 또는 가공될 수 있다.
다음으로, 병풀로부터 엑소좀을 분리하여 병풀 유래 엑소좀을 수득할 수 있다. 이때, 원료로서 사용되는 병풀은 정제수로 세척한 후 물기를 제거한 것을 사용할 수 있으며, 채취한지 7일 이내의 것을 사용할 수 있다. 또한, 병풀의 잎, 가지, 줄기, 꽃, 열매, 뿌리 및 뿌리 껍질 등 모든 부위를 원료로서 준비할 수 있고, 예를 들어, 병풀의 전초 부분을 원료로서 준비할 수 있다.
본 발명의 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계는, 1차 상등액을 수득하는 단계; 2차 상등액을 수득하는 단계; 엑소좀을 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계; 추가 엑소좀을 2차 펠렛층에 가라앉히는 단계; 및 엑소좀을 분리하는 단계를 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 1차 상등액을 수득하는 단계는, 병풀을 정제수에 부유시켜 원심분리기를 이용하여 원심 분리함으로써 수행될 수 있으며, 원심 분리된 후 상등액만을 수득함으로써 죽은 세포 또는 이물질을 분리, 제거할 수 있다. 예를 들어, 병풀을 3,000 내지 4,000g의 중력 가속도로 20 내지 30분 동안 원심 분리하여 1차 상등액을 수득할 수 있다.
부가적으로, 1차 상등액을 수득하는 단계를 수행하기 이전에, 병풀에 정제수를 넣고 분쇄한 후 분쇄물을 안정화하는 과정이 더 이루어질 수 있다. 예를 들어, 병풀 및 정제수를 1 : 20의 비율로 혼합하여 병풀을 분쇄하고, 약 4℃의 온도에서 약 24시간 동안 분쇄물을 안정화할 수 있다. 다만, 정제수와의 혼합 비율, 안정화 온도, 안정화 시간은 이에 한정하지 않으며, 본 발명의 주된 효과를 해치지 않는 범위 내에서 변경할 수 있다. 이와 같은 안정화 과정을 통하여 병풀로부터 보다 효율적으로 엑소좀을 추출할 수 있다.
실시예에 따라, 2차 상등액을 수득하는 단계는, 원심분리기를 이용하여 1차 상등액을 원심 분리함으로써 수행될 수 있으며, 원심 분리된 후 상등액만을 수득함으로써 죽은 세포 또는 잔여물을 분리, 제거할 수 있다. 예를 들어, 1차 상등액을 10,000 내지 15,000g의 중력 가속도로 20 내지 30분 동안 원심 분리하여 2차 상등액을 수득할 수 있다.
부가적으로, 2차 상등액을 수득하는 단계를 수행한 이후에, 2차 상등액을 여과하는 단계가 더 이루어질 수 있다. 예를 들어, 여과포 또는 바틀 탑 필터(Bottle Top Filter)를 이용하여 2차 상등액을 여과할 수 있다. 이와 같은 과정을 통하여 원심 분리한 후 2차 상등액만을 수득함으로써 죽은 세포 및 잔여물을 1차적으로 제거할 수 있으며, 2차 상등액을 여과함으로써 잔여물을 2차적으로 제거하여 병풀로부터 추출되는 엑소좀의 수율을 향상시킬 수 있다.
실시예에 따라, 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계는, 2차 상등액을 초고속 원심분리기를 이용하여 원심 분리하여 엑소좀을 가라앉힘으로써 수행될 수 있다. 예를 들어, 2차 상등액을 100,000 내지 150,000g의 중력 가속도로 2 내지 4시간 동안 원심 분리함으로써 엑소좀을 펠렛층으로 가라앉힐 수 있다.
실시예에 따라, 2차 펠렛층에 가라앉히는 단계는, 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계 이후 남은 2차 상등액을 초고속 원심분리기를 이용하여 재원심 분리함으로써 수행될 수 있다. 이와 같은 과정을 통하여 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계에서 수득하지 못한 엑소좀을 추가적으로 수득함으로써, 병풀 유래 엑소좀의 수율을 향상시킬 수 있다. 예를 들어, 남은 2차 상등액을 100,000 내지 150,000g의 중력 가속도로 2 내지 4시간 동안 원심 분리함으로써 추가 엑소좀을 펠렛층으로 가라앉힐 수 있다.
본 발명의 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계는, 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계 및 2차 펠렛층에 가라앉히는 단계에서 매우 높은 중력 가속도(100,000 내지 150,000g의 중력 가속도)로 원심 분리하기 이전에, 1차 상등액을 수득하는 단계에서 매우 낮은 중력 가속도(3,000 내지 4,000g의 중력 가속도)로 분리한 다음, 2차 상등액을 수득하는 단계에서 다소 낮은 중력 가속도(10,000 내지 15,000g의 중력 가속도)로 분리하기 때문에 엑소좀의 순도를 향상시킬 수 있다.
실시예에 따라, 엑소좀을 분리하는 단계는, 1차 펠렛층 및 2차 펠렛층을 정제수에 재부유시킴으로써 수행될 수 있다. 예를 들어, 1차 펠렛층 및 2차 펠렛층에 증류수를 넣고 재부유한 후, 파이펫(Pipette) 또는 볼텍스(Vortex)를 이용하여 병풀 유래 엑소좀을 분리 및 수득할 수 있다.
본 발명의 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물의 제조 방법에서, 오레가노 추출물을 수득하는 단계와 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계의 공정 순서는 중요하지 않으며, 작업자의 작업 상황에 맞게 수득 공정의 순서를 변경 적용할 수 있다. 오레가노 추출물과 병풀 유래 엑소좀의 수득 단계는 동시에 수행될 수도 있다.
최종적으로, 수득한 오레가노 추출물과 병풀 유래 엑소좀을 혼합하여 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 제조할 수 있다. 이때, 혼합 비율을 적절히 조절하여 항염, 피부 보습 등의 효능을 극대화시킬 수 있다. 예를 들어, 오레가노 추출물 대비 병풀 유래 엑소좀의 중량비를 1 : 0.1 내지 10으로 혼합할 수 있고, 구체적으로 1 : 0.1 내지 3으로, 더 구체적으로 1 : 0.5 내지 2로 혼합할 수 있다. 해당 중량비로 혼합하는 경우, 항염, 피부 보습의 효과가 극대화될 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니다.
이와 같은 방법으로 제조된 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물은 피부 개선용 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있다. 본 발명의 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물은 제형 안정성 또는 피부 안정성 등을 유지하면서도 유효성분들을 효율적으로 피부에 전달할 수 있어 항염 및 피부 보습의 효능을 증가시킬 수 있다. 또한, 피부 개선용 조성물 뿐만 아니라, 염증성 질환을 예방하는 항염용, 피부 건조성 질환을 예방하는 피부 보습용 등 치료 및 증상 개선을 위한 다양한 용도의 약학적 조성물로도 제조될 수 있다.
[실험예]
이하에서, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 실시예를 다음과 같이 나타내었으나, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
실시예 및 비교예의 제조
(1) 오레가노 추출물의 준비
오레가노를 세척한 뒤 분쇄하고 오레가노 50g에 1000mL의 용매를 혼합하여 60 내지 70℃의 조건에서 3시간 동안 열수 추출하였다. 이후, 열수 추출한 추출액을 냉각 및 여과하여 오레가노 추출물을 수득하였다.
(2) 병풀 유래 엑소좀의 준비
병풀 전초에 중량비 20배의 증류수를 넣고 분쇄한 후 4℃의 온도에서 24시간 동안 분쇄물을 안정화한 뒤, 병풀을 정제수에 부유시키고 원심분리기를 이용하여 3,000 내지 4,000g의 중력 가속도로 20 내지 30분 동안 원심 분리하여 1차 상등액을 수득하였다. 이후, 1차 상등액을 원심분리기를 이용하여 10,000 내지 15,000g의 중력 가속도로 20 내지 30분 동안 원심 분리하여 2차 상등액을 수득하고, 2차 상등액을 여과한 뒤, 초고속 원심분리기를 이용하여 100,000 내지 150,000g의 중력 가속도로 2 내지 4시간 동안 원심 분리함으로써 엑소좀을 1차 펠렛층으로 가라앉혔다. 남은 2차 상등액을 초고속 원심분리기를 이용하여 100,000 내지 150,000g의 중력 가속도로 2 내지 4시간 동안 재원심 분리하여 추가 엑소좀을 2차 펠렛층으로 가라앉힌 뒤, 1차 펠렛층 및 2차 펠렛층을 정제수에 재부유시켜 병풀 유래 엑소좀을 분리 및 수득하였다.
(3) 실시예 1 내지 3 및 비교예 1, 2의 제조
수득한 오레가노 추출물과 병풀 유래 엑소좀을 하기 표 1에 기재된 중량비로 혼합하여 실시예 1 내지 3을 제조하였다.
또한, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합 여부에 따른 효과를 비교하기 위하여, 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀 1종만을 단독으로 포함하는 비교예 1 및 2를 제조하였다.
Figure 112022063656093-pat00001
실험예: 병풀 유래 엑소좀의 정량 분석, 단백질 농도 분석, 항염 및 피부 보습 효능 실험
(1) 실험예 1: 병풀 유래 엑소좀의 정량 분석 및 단백질 농도 분석
상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 2에 대하여 나노 입자 추적 분석(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)을 이용하여 병풀 유래 엑소좀의 정량을 분석하고, 브래드 포드 실험 방법을 이용하여 단백질의 농도를 분석하여 표 2에 나타내었다.
구체적인 실험 방법은 다음과 같다.
병풀 유래 엑소좀의 정량 분석의 경우, 실시예 1 내지 3 및 비교예 2에 대하여 나노 입자 추적 분석기(Nanoparticle Tracking Analyzer; Zetaview TWIN, Particle Metrix 이용) 및 추적 분석기의 분석 프로그램(Zetaview software 이용)을 이용하여 병풀 유래 엑소좀의 평균 입자 크기 및 단위 부피당 입자 수를 측정하였다.
단백질의 농도의 경우, 실시예 1 내지 3 및 비교예 2의 시료 각각 40㎍와 브래드 포드 시약 150㎕를 96well plate에서 혼합한 후, 호일로 빛을 차단한 상태에서 5분 동안 반응시켰다. 이후, Microplate reader 장비를 이용하여 595nm의 파장에서 흡광도를 측정하여, 시약과 함께 제공된 BSA(Bovine Serum Albumin)으로 표준 곡선(Standard Curve)을 통해 측정된 흡광도를 기초로 단백질의 농도를 측정하였다.
Figure 112022063656093-pat00002
실험 결과, 실시예 1 내지 3 및 비교예 2의 평균 입자 크기, 단위 부피당 입자 수는 차이가 크지 않으나, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합하여 포함하는 실시예 1 내지 3이 병풀 유래 엑소좀만을 단독으로 포함하는 비교예 2에 비하여 단백질의 농도가 증가하는 것을 알 수 있었다.
특히, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 1 : 2의 비율로 혼합한 실시예 2의 단백질의 농도는 290㎍/mL 이상으로, 비교예 2에 비하여 약 2.1배 증가한 수치인 것으로 확인되었다.
즉, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합 사용할 경우, 단백질을 포함하는 유효성분의 농도가 높아져 보다 효율적으로 유효성분들을 피부에 전달하며, 이와 같은 효과는 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 비율에 따라 더욱 향상될 수 있다는 것을 알 수 있었다.
(2) 실험예 2: 항염 효능 평가
상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1, 2에 대하여 NO assay을 통하여 항염의 효능을 평가하여 그 결과를 표 3 및 도 1에 나타내었다.
구체적인 실험방법은 다음과 같다.
1％ 페니실린/스크렙토마이신 및 10％ FBS(Fetal Bovine Serum)가 포함된 DMEM 배지를 이용하여 RAW264.7 세포주를 24well plate에 1.0 × 104cell/well씩 동일하게 분주하고 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양된 RAW264.7 cell에 실시예 및 비교예의 시료를 50㎍/mL의 농도로 각각 배지와 혼합한 후, 각 well에 1mL씩 처리 후 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 동안 반응시켰다. 이때, NO를 발현시키는 염증 유발인자인 리포 다당류(Lipopolysaccharide, LPS)를 1㎍/mL의 농도로 같이 처리하여 반응시켰다. 이후, 각 well의 상등액만을 따로 취한 뒤 각 well에 Nitric Oxide Detection Kit를 이용하여 배양액 중 100mL를 96well plate에 처리하고 Griess 시약 A(N-1-Naphthylethylenediamine(NEDHC)) 50㎕ 및 Griess 시약 B(Sulfanilamide) 50㎕를 각각 처리하여 10분 동안 반응시켰다. ELISA(Bio-Rad, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. NO의 양은 질산나트륨(NaNO2)의 농도별 표준곡선과 비교하여 산출하였고, 항염 효과는 100 - [{NO conc.(μM)비교군2 or 실험군}/{NO conc.(μM)비교군1} × 100] 식으로 도출하였다. 산화질소는 염증 유발인자이기 때문에 산화질소의 억제 활성이 높게 측정될수록 항염 효능이 높게 평가될 수 있다.
Figure 112022063656093-pat00003
실험 결과, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합하여 포함하는 실시예 1 내지 3이 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀만을 단독으로 포함하는 비교예 1 및 2에 비하여 NO의 억제 활성이 높게 측정됨에 따라 항염의 효능이 우수함을 확인하였다.
특히, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 1 : 2의 비율로 혼합한 실시예 2가 비교예 1에 비하여 항염 효능이 약 10배 이상, 비교예 2에 비하여 약 3배 이상 우수함을 알 수 있었다.
즉, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합 사용할 경우, 보다 효율적으로 항염의 활성을 갖는 유효성분들을 피부에 전달하기 때문에 항염의 효능이 극대화되며, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 비율에 따라 항염의 효능 더욱 향상될 수 있다는 것을 알 수 있었다.
(3) 실험예 3: 피부 보습 효능 평가
상기 실시예 1 내지 3 및 비교예 1, 2에 대하여 히알루론산의 활성 정도를 통하여 피부 보습의 효능을 평가하여 그 결과를 표 4 및 도 2에 나타내었다.
구체적인 실험 방법은 다음과 같다.
진피 세포(Dermal Fibroblasts; HDF)에 실시예 및 비교예의 시료를 적정 농도로 처리한 후 배양하였다. 이후, 배지를 수거하고 Hyaluronan ELISA 키트(HA-ELISA, K-1200, Echelon 사)를 이용하여 ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)를 수행한 뒤 배지로 분비된 히알루론산의 양을 측정하였다. 히알루론산은 수분 함유량과 연관된 지표이기 때문에 히알루론산의 합성량이 높게 측정될수록 피부 보습 효능이 높게 평가될 수 있다.
Figure 112022063656093-pat00004
실험 결과, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합하여 포함하는 실시예 1 내지 3이 오레가노 추출물 또는 병풀 유래 엑소좀만을 단독으로 포함하는 비교예 1 및 2에 비하여 히알루론산의 합성량이 높게 측정됨에 따라 피부 보습의 효능이 우수함을 확인하였다.
특히, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 1 : 2의 비율로 혼합한 실시예 2가 비교예 1에 비하여 피부 보습의 효능이 약 2.7배 이상, 비교예 2에 비하여 약 1.7배 이상 우수함을 알 수 있었다.
즉, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀을 혼합 사용할 경우, 보다 효율적으로 피부 보습의 활성을 갖는 유효성분들을 피부에 전달하기 때문에 피부 보습의 효능이 극대화되며, 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 비율에 따라 피부 보습의 효능 더욱 향상될 수 있다는 것을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명의 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (10)

  1. 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물을 유효성분으로 포함하고,
    상기 오레가노 추출물 대비 상기 병풀 유래 엑소좀의 중량비는 1 : 0.1 내지 10인 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 조성물.
  2. 삭제
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은, NO(Nitric Oxide)의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은, 히알루론산의 생성을 촉진하는 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은, 항염 및 피부 보습 중 적어도 하나의 효과가 우수한 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 조성물.
  6. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은, 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는, 피부 개선용 조성물.
  7. 오레가노 추출물 및 병풀 유래 엑소좀의 혼합물의 제조 방법으로서,
    오레가노를 용매로 추출하여 오레가노 추출물을 수득하는 단계;
    병풀로부터 엑소좀을 분리하여 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계; 및
    상기 오레가노 추출물 및 상기 병풀 유래 엑소좀을 혼합하는 단계를 포함하고,
    상기 혼합하는 단계는, 상기 오레가노 추출물 대비 상기 병풀 유래 엑소좀의 중량비를 1 : 0.1 내지 10으로 하여 혼합하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  8. 삭제
  9. 제 7 항에 있어서,
    상기 병풀 유래 엑소좀을 수득하는 단계는,
    병풀을 정제수에 부유시켜 원심 분리한 후 1차 상등액을 수득하는 단계;
    상기 1차 상등액을 원심 분리한 후 2차 상등액을 수득하는 단계;
    상기 2차 상등액을 원심 분리한 후 엑소좀을 1차 펠렛층에 가라앉히는 단계;
    상기 2차 상등액을 재원심 분리한 후 추가 엑소좀을 2차 펠렛층에 가라앉히는 단계; 및
    상기 1차 펠렛층 및 상기 2차 펠렛층을 정제수에 재부유시켜 엑소좀을 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  10. 제 7 항에 있어서,
    상기 오레가노 추출물을 수득하는 단계는, 60 내지 70℃의 조건에서 2 내지 3시간 동안 열수 추출하여 수행되는 것을 특징으로 하는, 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR102127254B1 (ko) * 2020-04-20 2020-07-07 (주)내츄럴코리아 천연추출물을 포함하는 피부 미백 및 보습용 화장료 조성물
KR102159394B1 (ko) * 2019-10-04 2020-09-24 (주)에스디생명공학 바다제비집에서 유래된 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 조성물
KR102265811B1 (ko) * 2021-04-09 2021-06-16 주식회사 에이바이오머티리얼즈 분산성 및 안정성이 우수한 병풀 유래 엑소좀의 정제방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102159394B1 (ko) * 2019-10-04 2020-09-24 (주)에스디생명공학 바다제비집에서 유래된 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 상태 개선용 조성물
KR102127254B1 (ko) * 2020-04-20 2020-07-07 (주)내츄럴코리아 천연추출물을 포함하는 피부 미백 및 보습용 화장료 조성물
KR102265811B1 (ko) * 2021-04-09 2021-06-16 주식회사 에이바이오머티리얼즈 분산성 및 안정성이 우수한 병풀 유래 엑소좀의 정제방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물

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