KR102495343B1 - Cosmetic Composition for promoting hair growth or preventing hair loss with the extraco of Schisandra Chinensis Seed - Google Patents

Cosmetic Composition for promoting hair growth or preventing hair loss with the extraco of Schisandra Chinensis Seed Download PDF

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Abstract

본 발명은 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지 효과가 우수하다. The present invention relates to a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss comprising Schisandra seed extract, and the cosmetic composition containing the Schisandra seed extract of the present invention is excellent in promoting hair growth or preventing hair loss.

Description

오미자 씨앗 추출물을 포함하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물 {Cosmetic Composition for promoting hair growth or preventing hair loss with the extraco of Schisandra Chinensis Seed}Cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss containing Schisandra chinensis seed extract {Cosmetic Composition for promoting hair growth or preventing hair loss with the extraco of Schisandra Chinensis Seed}

본 발명은 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss, and more particularly, to a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss comprising an extract of Schizandra chinensis seeds.

일반적으로 모발의 기능은 두피를 보호하고 체온을 유지하는 등 외부 자극으로부터 인체를 보호하는 역할을 한다. 이러한 모발은 모낭에서 생성되며, 성장기 단계(anagen stage), 퇴화기 단계(catagen stage), 휴지기 단계(telogen stage)로 나뉘는 헤어 사이클(hair cycle)을 반복하며 모발의 성장과 유지 및 탈락을 조절한다.In general, the function of hair is to protect the human body from external stimuli, such as protecting the scalp and maintaining body temperature. These hairs are generated in hair follicles, and repeat the hair cycle divided into anagen stage, catagen stage, and telogen stage, and control the growth, maintenance, and loss of hair. .

두피에는 약 10만개의 모발이 있는데, 정상적으로 자라던 모발이 어떠한 이유에 의해서 빠지게 되어 모발이 결여되거나 그 수가 감소하여 생기게 된 상태를 탈모라 한다. 헤어 사이클은 호르몬, 스트레스, 질병, 환경오염, 흡연 등의 내·외적인 요인에 의해 변형 및 단축되며, 주기의 변화는 성장기 단계의 단축 및 초기 퇴화기 단계 진입, 휴지기 단계의 연장 등의 형태로 나타나게 된다. There are about 100,000 hairs on the scalp, and the hair that normally grows falls out for some reason, resulting in a lack of hair or a decrease in the number of hairs. The hair cycle is transformed and shortened by internal and external factors such as hormones, stress, disease, environmental pollution, and smoking. do.

모낭은 포유류동물에 존재하는 피부부속기관으로 내모근초(inner root sheath), 외모근초(outer root sheath), 모근(hair root), 모유두(hair dermal papilla), 모기질(hair matrix), 멜라닌형성세포(melanocyte) 등이 존재한다. 이 중 모유두세포는 모구(hair buld) 내 섬유아세포의 일종으로 세포의 증식을 통해 모발의 성장주기 및 남성형 탈모(androgenetic alopecia)에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 또한, 모유두세포의 성장인자인 IGF-1 및 VEGF의 발현을 증가시키고, 탈모 진행과정에서 감소하는 Wnt/β-catenin을 활성화하여 모발성장의 주기를 조절하는 것으로 알려져 있다. Hair follicles are skin appendages present in mammals and include the inner root sheath, outer root sheath, hair root, hair dermal papilla, hair matrix, and melanogenesis. cells (melanocytes) are present. Among them, dermal papilla cells are known to play an important role in the growth cycle of hair and androgenetic alopecia through cell proliferation as a type of fibroblasts in hair bulbs. In addition, it is known to regulate the cycle of hair growth by increasing the expression of IGF-1 and VEGF, growth factors of dermal papilla cells, and activating Wnt/β-catenin, which is reduced in the process of hair loss.

현재 모발의 성장을 촉진하는 약물로는 미국식품의약국(Food and Drug Administration, FDA)의 승인을 받은 minoxidil과 finasteride가 대표적이다. 그러나 약물요법은 장기간 사용해야 하고 심혈관계 장애, 피부자극, 피부염과 같은 여러 가지 부작용을 동반한다고 보고되어, 안전성 및 효능이 확보된 천연물의 개발이 시급한 실정이다.Currently, minoxidil and finasteride approved by the Food and Drug Administration (FDA) are representative drugs that promote hair growth. However, it has been reported that drug therapy requires long-term use and is accompanied by various side effects such as cardiovascular disorders, skin irritation, and dermatitis, and thus the development of natural products with safety and efficacy secured is urgently needed.

대한민국 등록특허 제10-0841923호 (2008.06.23)에는, 흑오미자(Schisandra nigra Max.) 물 및 에탄올 혼합 가용추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 발모 개선을 위한 약학조성물이 기재되어 있다.Korean Patent Registration No. 10-0841923 (2008.06.23) discloses a pharmaceutical composition for preventing hair loss and improving hair growth, which contains a mixed soluble extract of Schisandra nigra Max. in water and ethanol as an active ingredient. 대한민국 등록특허 제10-1981678호 (2019.05.17)에는, 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯 및 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물이 기재되어 있다.Korean Registered Patent No. 10-1981678 (2019.05.17), for promoting hair growth and preventing hair loss, containing mixed extracts of aloe, baeknyeoncho, Schisandra, aronia, cordyceps, zinnia mushroom and Penthorum chinense Pursh as active ingredients A cosmetic composition is described.

오미자 추출물을 이용한 모발성장촉진 및 탈모방지 조성물에 대해서는 상기에서 살펴본 바와 같이 여러 특허기술들이 이미 공지된 바가 있다. 하지만, 오미자 씨앗의 추출물을 이용한 모발성장촉진 및 탈모방지에 관한 조성물은 개발된 적이 없다. 따라서, 본 발명은 오미자 씨앗 추출물을 이용한 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물을 개발하여 제공하고자 한다. Regarding the composition for promoting hair growth and preventing hair loss using Schisandra chinensis extract, as described above, several patent technologies have already been known. However, a composition for promoting hair growth and preventing hair loss using an extract of Schizandra chinensis seeds has never been developed. Therefore, the present invention is to develop and provide a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss using Schizandra seed extract.

본 발명은 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss, comprising a seed extract of Schisandra chinensis.

본 발명의 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 오미자 씨앗은, 바람직하게 오미자에 정제수를 가하고, 셀룰라아제(Cellulase) 및 펙티나아제(Pectinase) 효소를 처리하여 수득된 것일 수 있다. In the cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss of the present invention, the seeds of Schizandra chinensis may be obtained by adding purified water to Schizandra chinensis, and treating with cellulase and pectinase enzymes.

본 발명의 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료 조성물은, 바람직하게 샴푸, 린스 및 헤어토닉 중 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것일 수 있다. In the cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss of the present invention, the cosmetic composition may preferably have a formulation selected from among shampoo, rinse and hair tonic.

본 발명의 오미자 씨앗 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지 효과가 우수하다. The cosmetic composition containing the seed extract of Schisandra chinensis of the present invention is excellent in promoting hair growth or preventing hair loss.

도 1은 오마지 씨앗 추출물 내 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 정성분석 결과이다.
도 2는 오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 모유두 세포 증식 평가 실험 결과이다. (도 2에서 유의성 표시인 '*'는 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린, 오미자씨앗추출물 각 샘플의 결과값에 대한 유의성 표시임)
도 3은 오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 IGF-1 발현 실험 결과이다. (도 3에서 유의성 표시인 '*'는 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린, 오미자씨앗추출물 각 샘플의 결과값에 대한 유의성 표시임)
도 4는 오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 VEGF 발현 실험 결과이다. (도 4에서 유의성 표시인 '*'는 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린, 오미자씨앗추출물 각 샘플의 결과값에 대한 유의성 표시임)
도 5는 오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 β-catenin 발현 실험 결과이다.
1 is a qualitative analysis result of gomisin N, gomisin A, and sujandrin in Omaji seed extract.
Figure 2 is the results of the dermal papilla cell proliferation evaluation test of Schizandra chinensis seed extract, gomisin N, gomisin A, and susandin. (In Figure 2, '*', which is a sign of significance, indicates the significance of the result values of each sample of Gomisin N, Gomisin A, Sujandrin, and Schisandra Seed Extract)
Figure 3 is the IGF-1 expression test results of the seed extract of Schizandra chinensis, gomisin N, gomisin A, and susandin. (In Figure 3, '*', which is a sign of significance, indicates the significance of the result values of each sample of Gomisin N, Gomisin A, Sujandrin, and Schizandra seed extract.)
Figure 4 is the VEGF expression test results of Schisandra seed extract, gomisin N, gomisin A, and susandin. (In Figure 4, '*', which is a sign of significance, indicates the significance of the result values of each sample of gomisin N, gomisin A, sujandrin, and Schizandra seed extract)
5 shows the results of β-catenin expression experiments of Schizandra seed extract, gomisin N, gomisin A, and susandin.

오미자(Schisandra Chinensis)는 오미자나무의 열매로 지름 약 1cm의 짙은 붉은 빛깔의 공 모양이다. 속에는 붉은 즙과 불그스레한 갈색 종자가 1 ~ 2개 들어있고, 그 씨의 바깥면은 광택이 있는 황갈색 ~ 어두운 적갈색이며 등쪽에 명확한 봉선이 있다. 껍질에는 신맛, 과육에는 단맛, 씨에는 맵고 쓴맛, 전체적으로 짠맛을 가지고 있어 5가지 맛이 모두 난다고 하여 붙여진 이름이다. Schisandra Chinensis is a fruit of the Schisandra chinensis tree and has a dark red ball shape with a diameter of about 1 cm. Inside, there are red juice and 1 or 2 reddish brown seeds, and the outer surface of the seeds is glossy yellowish brown to dark reddish brown, and there are clear seams on the back. It got its name because it has a sour taste in the skin, a sweet taste in the pulp, a spicy and bitter taste in the seed, and a salty taste overall.

오미자에 함유되어있는 주 성분으로는 슈잔드린(Schizandrin), 고미신(Gomisin) A, N, 슈잔드롤(Schizandrol), 에피고미신(Epigomisin), 프레고모이신(Pregomoisin), 데옥시슈잔드린(Deoxyschizandrin) 등이 있다. 오미자에 함유되어 있는 고미신 N은 분자량이 400.46이고 구조식은 C23H28O6이다. 고미신 A는 분자량이 416.47이고 구조식은 C23H28O7이다. 슈잔드린은 분자량이 432.52이고 구조식은 C24H32O7이다.The main components contained in Schisandra chinensis are Schizandrin, Gomisin A, N, Schizandrol, Epigomisin, Pregomoisin, and Deoxyschizandrin. etc. Gomisin N contained in Schizandra chinensis has a molecular weight of 400.46 and its structural formula is C 23 H 28 O 6 . Gomisin A has a molecular weight of 416.47 and the structural formula is C 23 H 28 O 7 . Susuzandrin has a molecular weight of 432.52 and the structural formula is C 24 H 32 O 7 .

오미자는 생진, 안신, 수한, 지갈, 지구, 해주독 등의 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 오미자에는 리그난(Lignan) 성분이 함유되어 있어 항노화·암발생 억제 효과, 인지력과 간기능 개선 효과 등의 약리 활성을 나타내는 것으로 보고되어 있다. Schisandra chinensis is known to have effects such as saengjin, ansin, suhan, jigal, earth, and haeju poison. It is reported that Schisandra chinensis contains lignan components, and thus exhibits pharmacological activities such as anti-aging and cancer suppression effects, and cognitive and liver function improvement effects.

본 발명은 상기와 같은 특징이 있는 오미자의 씨앗 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss, comprising the seed extract of Schisandra chinensis characterized as described above.

본 발명의 상기 오미자 씨앗 추출물은, 물, 탄소수 1 내지 4인 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용하여, 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 오미자 씨앗으로부터 추출될 수 있다. 바람직하게, 탄소수 1 내지 4인 알코올 내지 물을 사용하여 추출하는 것이 좋고, 가장 바람직하게는 95.0%(v/v) 순도의 에탄올을 사용하여 추출하는 것이 좋다.The Schisandra seed extract of the present invention is water, alcohol having 1 to 4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, hexane and mixtures thereof It can be extracted from Schizandra seeds through any one extraction method selected from solvent extraction, supercritical extraction and ultrasonic extraction using an extraction solvent selected from the group consisting of. Preferably, it is good to extract using alcohol or water having 1 to 4 carbon atoms, and most preferably, it is good to extract using 95.0% (v / v) pure ethanol.

본 발명의 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물에 있어서, 상기 오미자 씨앗은, 바람직하게 오미자에 정제수를 가하고, 셀룰라아제(Cellulase) 및 펙티나아제(Pectinase) 효소를 처리하여 수득된 것일 수 있다. 바람직하게, 상기 효소는 비스코자임 L(Viscozyme L)을 사용하는 것이 좋다. In the cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss of the present invention, the seeds of Schizandra chinensis may be obtained by adding purified water to Schizandra chinensis, and treating with cellulase and pectinase enzymes. Preferably, the enzyme is good to use viscozyme L (Viscozyme L).

본 발명의 실험 결과, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물은 고미신 N(Gomisin N), 고미신 A(Gomisin A), 슈잔드린(Schizandrin)을 함유하는 것으로 확인되었다. 그런데, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물은 추출물임에도 불구하고 단일화합물인 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린보다 모유두세포 증식 활성이 아주 낮게 나타나지는 않았다. 또한, IGF-1 발현능, VEGF 발현능에 있어서는 본 발명의 오미자 씨앗 추출물이 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린과 비슷하게 나타났다. 또한, β-catenin 발현능에 있어서, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물은 슈잔드린과 비슷하게 나타났고, 고미신 A에 비해서는 약간 낮게, 고미신 N에 비해서는 비교적 낮게 나타났다. 이와 같은 결과는 추출물임에도 불구하고 본 발명의 오미자 씨앗 추출물이, 단일 화합물인 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린과 비교하여 볼 때, 대등한 모발성장촉진 및 탈모방지 효능을 발휘하는 소재인 것으로 평가할 수 있었다. 또한, 분리정제 공정에 많은 시간과 비용이 소요됨을 고려할 때, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물은 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린에 비해 매우 경제적인 소재로 평가할 수 있다. As a result of the experiment of the present invention, it was confirmed that the Schizandra seed extract of the present invention contains Gomisin N, Gomisin A, and Schizandrin. However, even though the Schizandra chinensis seed extract of the present invention is an extract, the activity of dermal papilla cell proliferation was not significantly lower than that of single compounds, Gomisin N, Gomisin A, and Susjandrin. In addition, in terms of IGF-1 expression ability and VEGF expression ability, the Schizandra chinensis seed extract of the present invention was similar to gomicin N, gomisin A, and susandin. In addition, in terms of β-catenin expression ability, the Schizandra chinensis seed extract of the present invention appeared similar to sujandrin, slightly lower than gomicin A, and relatively lower than gomicin N. These results indicate that the Schizandra chinensis seed extract of the present invention, despite being an extract, is a material that exhibits equivalent hair growth promotion and hair loss prevention effects compared to single compounds, Gomisin N, Gomisin A, and Susjandrin. could evaluate In addition, considering that the separation and purification process takes a lot of time and money, the Schizandra chinensis seed extract of the present invention can be evaluated as a very economical material compared to gomisin N, gomisin A, and susandin.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 오미자 씨앗 추출물은 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 10 내지 10,000 ppm으로 함유되는 것이 좋다. 상기 추출물의 함량이 10 ppm 미만인 경우에는 모유두세포 증식 효과가 미미하며, 10,000 ppm이상인 경우에는 함유량 증가에 대한 모유두세포 증식 효과 증대 정도가 미미하고, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며, 경제적이지 않다. On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, the Schisandra seed extract is preferably contained in an amount of 10 to 10,000 ppm based on the total weight of the cosmetic composition. If the content of the extract is less than 10 ppm, the dermal papilla cell proliferation effect is insignificant, and if it is 10,000 ppm or more, the degree of dermal papilla cell proliferation effect increase for the content increase is insignificant, and there is a problem with the safety and stability of the formulation, and is not economical. not.

한편, 본 발명의 두발용 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 일 예로 샴푸, 린스, 헤어토닉 등으로 제형화 될 수 있다. 다만, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. On the other hand, the composition for hair of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, and may be formulated into, for example, shampoo, rinse, hair tonic, and the like. However, it is not necessarily limited thereto.

이하, 본 발명의 내용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the contents of the present invention will be described in more detail in the following examples. However, the scope of the present invention is not limited only to the following examples, and includes modifications of equivalent technical ideas.

[실시예 1: 오미자 씨앗 추출물의 제조][Example 1: Preparation of Schisandra Seed Extract]

(1) 오미자로부터 오미자 씨앗의 분리 (1) Separation of Schizandra seeds from Schizandra chinensis

오미자나무의 열매인 오미자 10% (w/v)에 정제수를 가한 후, 5% (v/v)의 비스코자임 L(Novozyme) 효소 용액을 첨가하여 50℃에서 12시간 동안 추출하였다. 상기 추출물을 400 메쉬(mesh) 여과포로 여과한 뒤, 멸균하고 실활 처리하여 오미자 씨앗을 수득하였다.After adding purified water to 10% (w/v) of Schisandra chinensis, the fruit of Schizandra chinensis, 5% (v/v) viscozyme L (Novozyme) enzyme solution was added and extracted at 50° C. for 12 hours. The extract was filtered through a 400 mesh filter cloth, sterilized and inactivated to obtain Schizandra chinensis seeds.

(2) 오미자 씨앗 추출물의 제조 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 분리 (2) Preparation of Schisandra Seed Extract and Separation of Gomisin N, Gomisin A, and Susuzandrin

상기에서 수득한 오미자 씨앗을 건조 및 분쇄하고, 상기 분쇄물 500 g에 95.0% 에탄올 5,000 g을 첨가하여 45℃에서 200 rpm의 속도로 교반하면서 6시간 동안 추출하였다. 추출용매를 2번 교체하여 상기 과정을 반복하였다. 상기 추출물을 8,000 rpm에서 15분 동안 원심분리하여 상등액을 취하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 55℃ 온도에서 감압 농축하여 오미자 씨앗 추출물 68.4 g을 수득하였다. 이를 분취 고속액체크로마토그라피로 정제하여 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린을 분리하여 하기 실험에서 사용하였다. 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린의 정성은 고속액체크로마토그라피를 이용하였고, 그 결과는 도 1로부터 확인하였다.The seeds of Schisandra chinensis obtained above were dried and pulverized, and 5,000 g of 95.0% ethanol was added to 500 g of the pulverized material, followed by extraction at 45° C. and stirring at a speed of 200 rpm for 6 hours. The process was repeated by replacing the extraction solvent twice. The extract was centrifuged at 8,000 rpm for 15 minutes to obtain the supernatant. Thereafter, 68.4 g of Schizandra chinensis seed extract was obtained by concentrating under reduced pressure at 55° C. in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser. This was purified by preparative high-performance liquid chromatography to separate gomicin N, gomicin A, and suzandrin, which were used in the following experiments. High performance liquid chromatography was used to evaluate the quality of gomicin N, gomicin A, and sujandrin, and the results were confirmed from FIG. 1.

[실험예 1: 모유두 세포 증식 평가][Experimental Example 1: Evaluation of dermal papilla cell proliferation]

본 실험예에서는 상기 실시예 1에서 제조된 오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린에 대하여 모유두세포에 대한 세포증식 효과를 측정하였다.In this experimental example, the cell proliferation effect on dermal papilla cells was measured for Schizandra chinensis seed extract prepared in Example 1, Gomisin N, Gomisin A, and Susjandrin.

인간 유래 모유두 세포(human follicle dermal papilla cells, HFDPC)를 1 × 104 cells/ml로 96 well plate에 분주하고, 37℃, 5% CO2 세포 배양기에서 24 시간 안정화시켰다. 이를 1% FBS를 함유한 DMEM 배지로 교환한 후 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 48 시간 반응시켰다. 그 다음 5 mg/ml 농도의 MTT 시약을 각 well에 20 ㎕씩 첨가하고 37℃, 5% CO2 세포 배양기에서 2 ~ 3 시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 각 well의 상층액을 모두 제거하고 DMSO 100 ㎕를 첨가하여 세포를 완전히 용해시킨 후 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 각 시료군의 세포 증식율을 계산하였다.Human-derived dermal papilla cells (human follicle dermal papilla cells, HFDPC) were dispensed into a 96 well plate at 1 × 10 4 cells/ml, and stabilized for 24 hours in a 37°C, 5% CO 2 cell incubator. After exchanging it with DMEM medium containing 1% FBS, the samples were diluted according to concentration and reacted for 48 hours. Then, 20 μl of MTT reagent at a concentration of 5 mg/ml was added to each well and reacted for 2 to 3 hours in a 37° C., 5% CO 2 cell incubator. After the reaction was completed, the supernatant of each well was removed, and 100 μl of DMSO was added to completely dissolve the cells, and the absorbance was measured at 550 nm. At this time, the positive control group used minoxidil, a hair growth promoting agent, and the cell proliferation rate of each sample group was calculated by comparing the absorbance value of the control group.

오미자 씨앗 추출물 및 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린에 대한 모유두 세포 증식 평가 실험 결과를 도 2에 도시하였다. 도 2에 도시된 바와 같이, 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린, 오미자 씨앗 추출물 모두 모유두 세포 증식 활성을 나타냄을 확인하였다. 다만, 고미신 N이 다른 실험군에 비해 보다 높은 모유두세포 증식율을 나타냈다.Fig. 2 shows the results of the dermal papilla cell proliferation evaluation test for Schizandra chinensis seed extract, gomisin N, gomisin A, and sujandrin. As shown in FIG. 2, it was confirmed that all of gomicin N, gomicin A, suzandrin, and Schizandra chinensis seed extract exhibited dermal papilla cell proliferation activity. However, Gomisin N showed a higher proliferation rate of dermal papilla cells compared to other experimental groups.

[실험예 2: 모발 성장인자 발현 촉진 효과][Experimental Example 2: Hair Growth Factor Expression Promotion Effect]

모유두세포를 1 × 105 cells/ml 농도로 96 well에 분주하고 37℃, 5% CO2 incubator에서 하루 동안 배양한 후 시료를 농도별로 처리하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 반응시켰다. 세포의 배양액을 이용하여 효소면역측정법(ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay)을 통해 측정하였다.Dermal papilla cells were dispensed into 96 wells at a concentration of 1 × 10 5 cells/ml and cultured for one day at 37°C, 5% CO 2 incubator, and then the samples were treated by concentration and reacted in a 37°C, 5% CO 2 incubator for 24 hours. . It was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using the cell culture medium.

세포 배양액에서 IGF-1 (Insuline-like growth factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor)의 발현을 ELISA kit를 이용하여 분석하였고, 450 nm에서 흡광도를 찍어 각각의 생성량을 도 3, 도 4에 나타내었다. 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하였다.The expression of IGF-1 (Insuline-like growth factor) and VEGF (Vascular endothelial growth factor) in the cell culture was analyzed using an ELISA kit, and the absorbance was taken at 450 nm, and the respective production amounts are shown in FIGS. 3 and 4 . At this time, the positive control group used minoxidil, a hair growth promoting agent.

실험 결과는 도 3과 도 4와 같았다. IGF-1 발현능, VEGF 발현능에 있어서 본 발명의 오미자 씨앗 추출물이 고미신 N, 고미신 A, 슈잔드린과 비슷하게 나타났다. The experimental results were the same as in FIGS. 3 and 4. In terms of IGF-1 expression ability and VEGF expression ability, the Schizandra chinensis seed extract of the present invention was similar to gomisin N, gomisin A, and suzandrin.

[실험예 3: Wnt/β-catenin 발현율 확인][Experimental Example 3: Confirmation of Wnt/β-catenin expression rate]

모유두세포를 2 × 105 cells/well 농도로 6 well에 분주하고 37℃, 5% CO2 incubator에서 하루 동안 배양한 후, 시료를 농도별로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 수거하여 용해시키고 BCA assay를 이용하여 단백질을 정량하였다. 정량한 단백질은 10% SDS-PAGE gel에서 전기영동 시킨 후 PVDF 멤브레인에 전이시켰다. 1차 항체(β-catenin, santa cruz, USA)를 4℃에서 오버나이트로 shaking 처리한 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2 시간 반응시켰다. 그 후, 1 × TBST로 3 번 세척하고 ECL 반응 kit를 이용하여 밴드를 확인하였다. 각 밴드의 강도(intensity)는 β-actin의 발현을 기준으로 정량하여 β-catenin 발현율을 계산하였으며, 이때 양성 대조군은 모발성장촉진제제인 미녹시딜(minoxidil)을 사용하여 도 5에 도시하였다.Dermal papilla cells were dispensed into 6 wells at a concentration of 2 × 10 5 cells/well and cultured in a 37°C, 5% CO 2 incubator for one day, and then the samples were treated by concentration and cultured for 24 hours. The cultured cells were collected and lysed, and proteins were quantified using BCA assay. The quantified proteins were electrophoresed on a 10% SDS-PAGE gel and then transferred to a PVDF membrane. After shaking the primary antibody (β-catenin, santa cruz, USA) overnight at 4°C, the HRP-conjugated secondary antibody was reacted at room temperature for 2 hours. After that, it was washed three times with 1 × TBST and the band was confirmed using an ECL reaction kit. The intensity of each band was quantified based on the expression of β-actin to calculate the β-catenin expression rate. At this time, the positive control was shown in FIG. 5 using minoxidil, a hair growth promoter.

도 5에서 보는 바와 같이, β-catenin 발현능에 있어서, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물은 슈잔드린과 비슷하게 나타났고, 고미신 A에 비해서는 약간 낮게 나타났다. 그리고 고미신 N에 비해서는 비교적 낮게 나타났다.As shown in FIG. 5, in terms of β-catenin expression ability, the Schisandra seed extract of the present invention appeared similar to Susuzandrin and slightly lower than that of Gomisin A. And compared to gomishin N, it appeared relatively low.

[제형예 1: 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 샴푸 조성물 제조][Formulation Example 1: Preparation of Shampoo Composition Containing Schizandra Seed Extract]

상기 실시예 1에서 수득한 오미자 씨앗 추출물이 5 중량% 포함된 탈모 방지용 조성물로서, 샴푸 제형으로 제조한 제형예 1을 하기 표 1에 나타냈다. 이때, 본 발명의 오미자 씨앗 추출물 (실시예 1)이 들어가지 않은 삼푸 제형을 비교예 1로 제조하였다. As a composition for preventing hair loss containing 5% by weight of Schizandra seed extract obtained in Example 1, Formulation Example 1 prepared as a shampoo formulation is shown in Table 1 below. At this time, a shampoo formulation without the Schisandra seed extract (Example 1) of the present invention was prepared in Comparative Example 1.

성분ingredient 제형예 1 (중량%)Formulation Example 1 (% by weight) 비교예 1 (중량%)Comparative Example 1 (% by weight) 오미자 씨앗 추출물
(실시예 1)
Schizandra Seed Extract
(Example 1)
5.05.0 --
다이소듐이디티에이Disodium EDT 0.030.03 0.030.03 폴리쿼터늄-10Polyquaternium-10 0.10.1 0.10.1 암모늄라우릴설페이트Ammonium Lauryl Sulfate 40.540.5 40.540.5 암모늄라우레스설페이트Ammonium Laureth Sulfate 15.515.5 15.515.5 코카미도프로필베타인Cocamidopropyl Betaine 6.06.0 6.06.0 프로필렌글라이콜propylene glycol 2.02.0 2.02.0 소듐크실렌설포네이트sodium xylene sulfonate 2.02.0 2.02.0 글라이콜다이스테아레이트Glycol Distearate 3.03.0 3.03.0 코카마이드이에이Cocamide FA 1.01.0 1.01.0 라우라마이드이에이Lauramide FA 1.01.0 1.01.0 살리실산salicylic acid 0.130.13 0.130.13 시메티콘Simethicone 3.03.0 3.03.0 방부제antiseptic 적량Appropriate amount 적량Appropriate amount incense 적량Appropriate amount 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance 잔량balance total 100.0100.0 100.0100.0

[실험예 4: 오미자 씨앗 추출물을 함유하는 제형예 1, 탈모 방지용 조성물의 탈모 방지 효과 확인][Experimental Example 4: Formulation Example 1 Containing Schizandra Seed Extract, Confirmation of Hair Loss Prevention Effect of Composition for Preventing Hair Loss]

본 실험예 4에서는 상기 제형예 1에서 제조한 샴푸의 탈모 방지 효과를 확인하였다.In Experimental Example 4, the hair loss prevention effect of the shampoo prepared in Formulation Example 1 was confirmed.

탈모 증세가 있다고 인식하는 성인 남성 20명을 무작위로 10명씩 2개 그룹(A, B)으로 나눈 뒤 실험군(A) 10명, 대조군(B) 10명으로 구성하여 4주 동안 실험을 진행하였다. A 그룹을 대상으로 제형예 1의 조성물, B 그룹을 대상으로 비교예 1의 조성물을 각각 2일 간격으로 사용하여 그 결과를 관찰하였다. 탈모 방지의 정도는 실험 종료 후 피시험자들이 평가 기준(-3:매우 악화, -2:악화, -1:약간 악화, 0:변화 없음, 1:약간 개선, 2:개선, 3:매우 개선)에 따라 관능 평가하도록 하여 아래 표 2에 나타내었다.After randomly dividing 20 adult males who recognized that they had hair loss into 2 groups (A and B) of 10 people each, the experiment was conducted for 4 weeks with 10 people in the experimental group (A) and 10 people in the control group (B). The composition of Formulation Example 1 for group A and the composition of Comparative Example 1 for group B were used at intervals of 2 days, respectively, and the results were observed. The degree of hair loss prevention was evaluated by the test subjects after the experiment was completed (-3: very worse, -2: worse, -1: slightly worse, 0: no change, 1: slightly improved, 2: improved, 3: very improved) According to the sensory evaluation, it is shown in Table 2 below.

피검자subject 탈모 방지의 정도Degree of hair loss prevention A 그룹
(제형예 1)
Group A
(formulation example 1)
B 그룹
(비교예 1)
group B
(Comparative Example 1)
1One 1One 00 22 33 -3-3 33 1One 00 44 22 -2-2 55 22 -1-One 66 00 -3-3 77 33 00 88 33 -1-One 99 22 00 1010 1One -2-2 평균average 1.81.8 -1.2-1.2

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 제형예 1의 조성물이 비교예 1의 조성물에 비하여 탈모 방지 효과가 뛰어난 것으로 나타났다.As shown in Table 2, the composition of Formulation Example 1 was found to have an excellent hair loss prevention effect compared to the composition of Comparative Example 1.

[제형예 2 : 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 린스 조성물][Formulation Example 2: Rinsing Composition Containing Schizandra Seed Extract]

아래 표 3의 함량에 따라 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 린스 조성물을 제형예 2로 제조하였다.According to the contents of Table 3 below, a rinse composition containing Schizandra seed extract was prepared in Formulation Example 2.

성분ingredient 제형예 2
(중량%)
Formulation Example 2
(weight%)
오미자 씨앗 추출물Schisandra Seed Extract 5.05.0 다이소듐이디티에이Disodium EDT 0.020.02 하이드록시에틸셀룰로오스Hydroxyethyl Cellulose 0.20.2 판테놀panthenol 0.050.05 프로필렌글라이콜propylene glycol 1.51.5 글리세린glycerin 2.02.0 세틸알코올cetyl alcohol 3.53.5 스테아릴알코올Stearyl Alcohol 1.51.5 글리세릴스테아레이트에스이Glyceryl Stearate SE 0.50.5 디메치콘dimethicone 1.51.5 방부제antiseptic 적량Appropriate amount incense 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance total 100.0 100.0

[제형예 3 : 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 헤어토닉 조성물][Formulation Example 3: Hair Tonic Composition Containing Schizandra Seed Extract]

아래 표 4의 함량에 따라 오미자 씨앗 추출물을 포함하는 헤어토닉 조성물을 제형예 3으로 제조하였다.According to the contents of Table 4 below, a hair tonic composition containing Schizandra seed extract was prepared in Formulation Example 3.

성분ingredient 제형예 3
(중량%)
Formulation Example 3
(weight%)
오미자 씨앗 추출물Schisandra Seed Extract 5.05.0 다이소듐이디티에이Disodium EDT 0.020.02 판테놀panthenol 0.50.5 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 10.010.0 에탄올ethanol 18.018.0 멘톨menthol 0.030.03 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 1.01.0 이미다졸리디닐우레아imidazolidinyl urea 0.20.2 바이오틴biotin 0.10.1 incense 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance total 100.0 100.0

Claims (3)

오미자 씨앗 추출물을 포함하며,
상기 오미자 씨앗 추출물은,
오미자에 정제수를 가하고, 셀룰라아제(Cellulase) 및 펙티나아제(Pectinase) 효소를 처리하여 수득된 오미자 씨앗을 건조 및 분쇄 후 추출한 것임을 특징으로 하는 모발 성장 촉진 또는 탈모 방지용 화장료 조성물.
It contains Schizandra seed extract,
The Schizandra seed extract,
A cosmetic composition for promoting hair growth or preventing hair loss, characterized in that the seeds of Schisandra chinensis obtained by adding purified water to Schisandra chinensis, and treating with cellulase and pectinase enzymes are extracted after drying and grinding.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
샴푸, 린스 및 헤어토닉 중 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cosmetic composition,
A cosmetic composition characterized in that it has a formulation of any one selected from shampoo, rinse and hair tonic.
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