KR102480824B1

KR102480824B1 - 스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis) 감염에 대한 백신 조성물

Info

Publication number: KR102480824B1
Application number: KR1020167035110A
Authority: KR
Inventors: 자나 세레; 크리스토프 바움스; 피터 발렌틴-웨이간드
Original assignee: 세바상뜨 아니말르 사
Priority date: 2014-05-30
Filing date: 2015-05-29
Publication date: 2022-12-22
Also published as: US20220401543A1; MY178365A; NZ726364A; EP3148576A1; RU2016146801A; DK3148576T3; US12036275B2; DE202015009979U1; MX2016015821A; AU2015265884A1; KR20170005855A; CN106561082A; US20170209561A1; EP3148576B8; JP6670304B2; EP2949340A1; RU2735101C2; CN106561082B; EP3795174A1; ZA201607627B

Abstract

본 발명에서는 IdeSsuis, rIdeSsuis, 이의 유사체 또는 단편으로 이루어진 그룹에서 선택된 폴리펩티드 또는 이를 암호화하는 폴리뉴클레오티드의 유효량을 포함하는 백신 조성물을 개시하고 있다. 본 발명에 따른 백신 조성물은 인간 또는 돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량예방(metaphylactic) 또는 치료적 처치방법(therapeutic treatment)에 사용될 수 있다.

Description

스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis) 감염에 대한 백신 조성물 {Vaccine composition against Streptococcus suis infection}

본 발명은 포유류, 특히 돼지 및 인간의 면역 및 보호를 위한 스트렙토코커스 수이스 (Streptococcus suis)에 대한 백신 조성물 및 이의 용도에 관한 것이다.

스트렙토코커스 수이스(Streptococcus suis , 이하 S. suis)는 돼지의 호흡기, 소화기 및 생식기에 서식한다. 또한, 스트렙토코커스 수이스(S. suis)는 수막염 (meningitis), 패혈증 (septicaemia), 관절염 (artthritis) 및 심내막염 (endocarditis)과 같은 다양한 병리현상을 유발하는 가장 중요한 돼지 병원균 중 하나이다.

스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염은 전세계 양돈 산업에서 큰 생산성 손실을 초래하고 있다. 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염을 치료하는 데에 일반적으로 항생제를 사용하고 있다. 그러나, 항생제 사용 감소에 관한 지속적인 논의와, 감염 재발이 자주 발생하는 점을 고려할 때, 항생제 사용을 대체할 수 있는 방제 조치의 필요성이 강조되고 있다. 유럽의 경우, 현재 허가된 백신은 없으나, 자가유래 박테린(autologous bacterin)이 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 자가유래 박테린의 주요 단점은, 동종 혈청형(autologous serotype)에 대해서만 보호효과를 가진다는 점이다. 그러나, 스트렙토코커스 수이스(S. suis)는 매우 다양한 종류를 가지는 유기체이며, 여러 다른 혈청형들이 새끼 돼지의 질병의 원인이 되고 있다. 특히 제2 혈청형 균주는 전 세계적으로 새끼 돼지의 질병에 중요한 역할을 하고 있다.

스트렙토코커스 수이스(S. suis) 제2 혈청형은, 아시아 지역의 성인에서 수막염(meningitis)을 일으키는 것으로 확인되어 있지만, 인간 사이에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 전염(transmission)은 현재까지 확인된 경우가 없다.

일반적으로, 감염(infection)은 초기 항원-특이적 면역글로불린 M(IgM) 반응을 유도하여 친화성 성숙(affinity maturation)과 동형 전환(isotype switching)을 유도합니다. 또한, 감염 이전에 존재하는 IgM 항체는 자연 발생적이며, 선천성 면역 (innate immunity)과 적응성 면역 (adaptive immunity)을 연결하는 주요한 고리 역할을 수행함에 있어서 중요하다.

돼지의 경우, IgD가 결핍되어 있기 때문에, IgM은 유일한 B 세포 수용체로서 단량체 막 IgM (mIgM)으로서 특히 중요하다. 또한, 신생 새끼 돼지에서의 IgM 합성은 IgG 및 IgA 합성보다 훨씬 일찍 시작된다. 초유(cholostrum)에 들어있는 IgM은, 보체 (complement)-매개 병원균 살생을 통한 병원균으로부터의 보호에 있어서 매우 중요하다. 따라서, IgM 항체는 여러 다른 종류의 병원균에 대한 방어에 있어서 중요하다.

스트렙토코커스 수이스(S. suis) 제2 혈청형의 다양한 병독성 또는 병독성-관련 인자들이 지금까지 확인되었는 데, 병원균이 식세포 활동(phagocytosis)으로부터 보호되는 데에 필수적인 병독성 인자 (virulence factor)로서 캡슐(capsule)이 유일하게 알려져 있다. 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 제2 혈청형의 표면-결합(surface-associated) 단백질 및 분비된(secreted) 단백질의 다수는, 다른 병원성 연쇄 구균(streptococci)의 상동 인자들과 동일하거나 매우 유사한 기능을 나타낸다. 스트렙토코커스 파이오제네스 (Streptococcus pyogenes), 스트렙토코커스 에퀴의 아종 에퀴 (Streptococcus equi subspecies equi) 및 스트렙토코커스 에퀴의 아종 주에피데미커스 (Streptococcus equi subspecies zooepidemicus)와 같은 다양한 인간 또는 동물 병원균들은, 서로 동족체(homologous)인 특이적인 IgG 엔도펩티다아제(endopeptidase)를 발현한다.

스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 특이적인 기능을 갖는 표면-결합 또는 분비 인자는 Seele 문헌 (참조: "Identification of a Novel Host-Specific IgM Protease in Streptococcus suis," Journal of Bacteriology, 195 : 930-940, 2013)에서 최초로 기재되었다. Seele의 문헌에서는, IdeSsuis로 명명된 IgM 프로테아제(protease)가 IgG 엔도펩티다아제로 작용하지 않는다는 것을 보여주었다. IgM 프로테아제는 세균 표면에서 옵손화(opsonising)하는 IgM을 분해(degrade)시킴으로써, 박테린으로 1차 접종된 (bacterin-primed) 새끼 돼지의 혈액에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 생존능을 증가시킨다. 상기 IdeSsuis는 IgM에 매우 특이적으로 작용하며, IgG 또는 IgA를 분해하지 않는다. 그러나, Seele 의 문헌에서는, IdeSsuis, rIdeSsuis, 이의 유사체 및 단편이 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염에 대한 효과적인 백신으로서 기능할 수 있다는 것에 관해서는 아무런 언급이 없다. IdeSsuis (IgM 프로테아제) 활성의 중화(neutralization)가 박테린(bacterin) 또는 옵손화 항체(opsonizing antibodies)를 유도하는 기타 다른 종류의 미래에 나올 백신의 보호 효능을 실질적으로 향상시킬 수 있을 가능성이 있다는 단순한 가정이 있을 뿐이다. 하지만, 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염에 대한 백신내에 IdeSsuis 및 관련 단백질이 유일한 면역 제제(exclusive immunizing agent)로 사용될 수 있다는 것에 대해서는 기재되어 있지 않다.

Baums 문헌에서는, 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 숙주 인자 및 세포와의 상호 작용에 기여하는 것으로 여겨지는 표면-결합 및 분비된 세균 인자를 기재하고 있다 (참조: Surface-associated and secreted factors of Streptococcus suis in epidemiology, pathologenesis and vaccine development, Animal Health Research Reviews, Volume 10, Issue 01, June 2009, pp 65-83). 상기 인자에 대한 기재내용은 아래와 같다: (i) 상기 인자의 실체(identification) 및 특징, (ii) 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에서의 상기 인자의 분포 및 (iii) 독성, 면역 반응 및 백신 접종에 있어서 상기 인자의 중요성. 이러한 검토내용은, 앞으로 해결해야 할 수많은 어려운 질문들이 있음을 강조하여 보여준다.

본 발명에 따라 해결하고자 하는 문제점은 당업계에 알려져있는 문제점들을 극복하고, 포유류, 특히 돼지 및 인간을 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염에 대해 면역시켜 보호하기위한 신규한 백신 조성물을 제공하는 것이다.

상기한 문제점은, 본 발명에 따라, 유효량의 하기의 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 폴리펩티드 또는 적어도 하나 이상의 벡터와 적어도 하나 이상의 약제학적 담체, 희석제 또는 보조제를 포함하는 백신 조성물을 제공함으로써 해결된다:

(a) IdeSsuis로 명명된 단백질, 이의 유사체(analogue) 또는 단편(fragment),

(b) rldeSsuis로 명명된 단백질, 이의 유사체 또는 단편,

(c) 단백질 IdeSsuis, 이의 유사체 또는 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 삽입된 벡터, 및

(d) 단백질 rldeSsuis, 이의 유사체 또는 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 삽입된 벡터.

본 발명에 사용되는 백신 조성물은 상기 (a) 또는 (b)에 정의된 적어도 하나 이상의 단독 폴리펩티드를 약제학적 담체, 희석제, 보조제 또는 이들의 혼합물과 함께 포함한다. 또한, 본 발명에 따른 백신은 상기 (c) 또는 (d)에 정의된 적어도 하나 이상의 단독 벡터를 약제학적 담체, 희석제, 보조제 또는 이들의 혼합물과 함께 포함할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 백신 조성물에서 상기 (a)의 IdeSsuis는

(a.a) 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열;

(a.b) 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열의 단편 또는 유사체;

또는

(a.c) IgM 프로테아제(protease) 활성을 갖는 상기 (a.a) 또는 (a.b)의 단편을 포함한다.

또한, 바람직하게는, 본 발명에 따른 백신 조성물에서 상기 (b)의 rldeSsuis 단백질은

(b.a) 서열 번호 2, 6 또는 7로 표시되는 아미노산 서열;

(b.b) 서열 번호 2, 6 또는 7로 표시되는 아미노산 서열의 단편 또는 유사체;

(b.c) 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열의 제1 내지 제34 위치의 아미노산이 결실된 아미노산 서열;

(b.d) 서열 번호 1로 표시되는 단백질 IdeSsuis의 아미노산 서열과 서열 상동성이 적어도 60 % 이상, 바람직하게는 적어도 70 % 이상, 가장 바람직하게는 적어도 85 % 이상인 아미노산 서열;

(b.e) IgM 프로테아제 활성을 갖는 (b.a), (b.b), (b.c) 또는 (b.d)의 단편; 또는

(b.f) 서열 번호 5로 표시되는 아미노산 서열 또는 이와 적어도 95 % 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 (b.a), (b.b), (b.c) 또는 (b.d)의 단편을 포함하거나 이로 이루어진다.

서열 번호 2로 표시되는 아미노산 서열은, 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 제1 내지 제34 위치의 아미노산 잔기(신호 펩티드)가 결실되는 대신에 HIS 태그(tag)가 첨가된 아미노산 서열을 나타낸다. 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열은 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 제2 혈청형 균주로부터 유도되었다.

서열 번호 6으로 표시되는 아미노산 서열은 서열 번호 2로 표시되는 아미노산 서열의 N 말단 서열을 나타낸다.

서열 번호 7 ("항원 rldeSsuisB2"라고도 칭함)은, 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 제7 혈청형 균주의 성숙한 ldeSsuis 단백질의 완전한 아미노산 서열을 포함하고, N 말단 HIS 태그를 추가로 포함한다. 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 제7 혈청형 균주의 IdeSsuis 단백질은, 이의 C 말단의 절반이 서열 번호 1과 비교하여 114개 아미노산 서열이 결손되어 있다는 점에서 차이가 있다. 서열 번호 7의 아미노산 중 제80 내지 제414 위치의 아미노산 잔기 (Mac-1 도메인으로 불리는 고도로 보존된 영역)는, 서열 번호 5로 표시되는 아미노산 서열과 97.9% 상응한다. 서열 번호 7과 서열 번호 1 사이의 전체적인 동일성은 96.4% (N 말단 HIS 태그 및 상기한 114개의 아미노산 갭을 고려하지 않은 경우)이다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "단편 또는 유사체"는 다음과 같이 정의된다:

"유사체 (analogue)"는 상기 개시된 아미노산 서열과 유사한 아미노산 서열로서, 본래의 아미노산 서열 (예를 들어, 서열 번호 1, 2, 6 또는 7로 표시되는 아미노산 서열)과 적어도 60% 이상, 바람직하게는 적어도 70% 이상 및 가장 바람직하게는 적어도 85% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열로서 간주된다. 또한, 95%와 같은 보다 높은 상동성도 본 출원에서 고려된다. 본 명세서에서 사용하고 있는 상동성 (holomogy)는 동일성(identity)을 의미한다. 이와 같이, 상기한 서열은 치환, 결실 또는 삽입에 기초하여 서로 상이할 수 있다.

동일성(identity)의 정도는, 예를 들어, 예상 임계값: 10, 단어 크기: 3, 매트릭스: BLOMSUM62, 갭 코스트: 존재: 11 확장: 1 및 조성 조정: 조건부 조성 스코어 매트릭스 조정과 같은 디폴트 파라미터를 가진 blastp 알고리즘을 사용하는 단백질 blast 프로그램 (BLAST는 National Library of Medicine의 등록상표임)으로 확인할 수 있다. 이 프로그램은 단백질 쿼리(query)를 사용하여 단백질 데이터베이스를 검색하는 데 사용할 수 있다. 동일성 (Identity)은 정렬된 쿼리와 데이터베이스 서열간의 정확한 매칭 정도를 나타낸다.

바람직하게는, 아미노산 "치환(substitution)"은 하나의 아미노산을 구조적 및/또는 화학적으로 유사한 성질을 갖는 다른 아미노산으로 대체 (즉, 보존적 아미노산 치환)의 결과이다. 아미노산 치환은, 관련된 아미노산 잔기의 극성, 전하, 용해도, 소수성, 친수성 및/또는 양친매성에서의 유사성에 기초하여 이루어질 수 있다. 예를 들어, 비극성 (소수성) 아미노산에는 알라닌, 류신, 이소류신, 발린, 프롤린, 페닐알라닌, 트립토판 및 메티오닌이 포함되고; 극성 중성 아미노산에는 글리신, 세린, 트레오닌, 시스테인, 티로신, 아스파라긴 및 글루타민이 포함되며; 양전하성 (염기성) 아미노산에는 아르기닌, 라이신 및 히스티딘이 포함되며; 음전하성 (산성) 아미노산에는 아스파르트산 및 글루탐산이 포함된다.

"삽입(insertions)" 또는 "결실(deletions)"은 일반적으로 약 1, 2 또는 3개의 아미노산 범위에서 이루어진다. 허용되는 편차는 재조합 DNA 기술을 사용하여 단백질에서 체계적으로 아미노산의 삽입 또는 결실을 시행하고, 이렇게 생성된 재조합 변이체의 활성을 분석함으로써 실험적으로 결정될 수 있다. 이러한 과정은 당업자에게는 일상적인 실험 이상의 것을 요구하지 않는다.

"유사체(analogue)"는, 대안적으로(alternatively) 또는 부가적으로(additionally), 상기 개시된 것들과 유사한 아미노산 서열로서, Mac-1 도메인의 고도로 보존된 영역 (서열 번호 5)을 포함하거나, 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열로 정의될 수 있다. 놀랍게도, 본 발명자들은 상기 도메인이 IdeSsuis 단백질의 예기치 않은 면역원성 활성을 주로 담당하고, 그 자체만으로 백신 접종된 동물에게 면역 보호를 제공하기에 충분하다는 것을 발견했다. 부분적으로 큰 아미노산 변이를 가짐으로써 최대 약 60%로까지 상동성이 떨어지는 다른 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)도 존재한다. 그러나, 고도로 보존된 Mac-1 도메인은 상이한 혈청형 사이에서도 작은 변이 (예를 들어, 제2 혈청형과 제7 혈청형간의 상동성은 97.9%)만을 나타낸다.

따라서, 본 발명에 따른 아미노산 (및 이를 암호화하는 핵산)은 Mac-1 도메인의 내부 서열보다 Mac-1 도메인의 외부 서열에서 보다 높은 수준의 변이를 나타내는 것으로 이해할 수 있다.

용어 "단편(fragment)"은 상기와 비슷한 방식으로 정의될 수 있다. 단편은, 유사체(analogue)에 비해 짧은 아미노산 서열 (약 400개 아미노산 미만)을 의미한다. 이러한 단편은, Mac-1 도메인의 고도로 보존된 부위 (서열 번호 5), 또는 이와 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어진다. 선택적으로(optionally), 단편은 IgM 프로테아제 활성을 갖는 것으로 정의될 수 있으나, 반드시 필수 요건은 아니다. 이들 단편은 본 발명에 따른 백신의 배타적 유효 성분(exclusive active ingredient)으로 사용될 수 있다.

따라서, 바람직한 실시 양태에서의 본 발명의 백신 조성물은, 서열 번호 5로 표시되는 아미노산 서열이거나, 또는 서열 번호 5로 표시되는 아미노산 서열과 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 단백질을 포함하거나(comprising), 이로 필수적으로 이루어거나(essentially consisting of), 이루어진다(consisting of). 보다 바람직한 양태에서는, 상기 단백질 (또는 이를 암호화하는 벡터)이 유일한 활성 또는 면역원성 성분이다.

백신 조성물과 관련하여, 본원에서 사용된 용어 "포함하는(comprising)"은 추가의 활성 또는 면역원성 성분이 존재할 수 있음을 의미한다. 용어 "이루어지는/구성되는(consisting of)"은 추가적인 성분이 존재하지 않음을 의미하며, 용어 "필수적으로 이루어지는/구성되는 (essentially consisting of)"은 특정 추가 성분이 존재할 수 있으나 백신의 필수적인 특성에 실질적으로 영향을 미치지 않는 성분 (즉, 비활성 또는 비-면역원성 성분)이 추가될 수 있음을 의미한다.

바람직한 예에서는, 본 발명은 서열 번호 1의 단백질 IdeSsuis의 아미노산 서열과 적어도 60% 이상, 적어도 70% 이상, 적어도 85% 이상 또는 적어도 95% 이상의 상동성을 가지고/가지거나, 서열 번호 5의 아미노산 또는 이와 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산을 포함하거나 이로 이루어지는, rIdeSsuis 단백질로 필수적으로 이루어진 백신 조성물을 제공한다.

상기 정의는, 상기 단백질을 코딩하는 본 발명의 핵산 서열에도 준용하여 적용될 수 있다. 상동성의 정의는 동일하고, 단편 길이는 약 1,200 개 미만의 핵산이 된다.

더욱 바람직한 본 발명의 양태에서는, 유효량의 상기 (a) 또는 (b)의 폴리펩티드의 단편이 하나 이상의 다른 단백질과의 융합 단백질의 일부인 백신 조성물이다.

바람직한 본 발명의 양태에서는, 상기 (c)의 폴리뉴클레오티드가 IdeSsuis로 정의된 단백질을 코딩하는 서열을 포함하는 본 발명에 따른 백신 조성물로서, 상기 IdeSsuis로 정의되는 단백질은

(a.a) 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열;

또는

(a.c) IgM 프로테아제(protease) 활성을 갖는 상기 (a.a) 또는 (a.b)의 단편이다.

본 발명에 따른 특히 바람직한 백신 조성물의 경우, 상기 폴리뉴클레오티드는

(c.a) 서열 번호 3으로 표시되는 서열 또는 이의 상보적 서열;

(c.b) 상기 (c.a)의 단편; 또는

(c.c) IgM 프로테아제 활성을 갖는 단백질을 코딩하는 (c.a) 서열의 단편을 포함하는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명에 따른 바람직한 백신 조성물에서는, 상기 (d)의 폴리뉴클레오티드가 rIdeSsuis로 정의된 아래의 단백질을 코딩하는 서열을 포함한다:

(b.a) 서열 번호 2로 표시되는 아미노산 서열;

(b.b) 서열 번호 2로 표시되는 아미노산 서열의 단편 또는 유사체;

(b.c) 서열 번호 1로 표시되는 아미노산 서열의 제1 내지 제34번 위치의 아미노산이 결실된 아미노산 서열;

(b.d) 서열 번호 1로 표시되는 단백질 IdeSsuis의 아미노산 서열과 적어도 60% 이상, 바람직하게는 적어도 70% 이상, 가장 바람직하게는 적어도 85% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열; 또는

(b.e) IgM 프로테아제 활성을 갖는 (b.a), (b.b), (b.c) 또는 (b.d)의 단편 및/또는,

(b.f) 서열 번호 5로 표시되는 아미노산 서열 또는 이와 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어지는 (b.a), (b.b), (b.c) 또는 (b.d)의 단편.

특히, 본 발명에 따른 바람직한 백신 조성물의 경우, 상기 폴리뉴클레오티드는

(d.a) 서열 번호 4, 8 또는 9로 표시되는 서열 또는 이의 상보적 서열;

(d.b) 상기 (d.a)의 단편; 또는

(d.c) IgM 프로테아제 활성을 갖는 단백질을 코딩하는 (d.a) 서열의 단편을 포함하는 것을 특징으로 한다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 백신 조성물에서 상기 폴리뉴클레오티드는 cDNA, DNA 또는 cRNA, RNA이다. 본원에서 용어 "핵산 서열"은 뉴클레오티드의 헤테로 중합체(heteropolymer) 또는 이 뉴클레오티드의 서열을 지칭한다. 본원에서 용어 "핵산" 및 "폴리뉴클레오티드"는 뉴클레오티드의 헤테로 중합체를 지칭하기 위해 본원에서 상호 교환적으로 사용된다.

또한, 바람직하게는, 본 발명에 따른 백신 조성물에서, 상기 폴리뉴클레오티드는 벡터의 발현조절 영역에 작동가능하게 연결되어 벡터내에 통합되어 있는 것을 특징으로 한다.

상기 발현 벡터는 바람직하게는 하나 이상의 조절 서열을 포함한다. 본원에서 용어 "발현 벡터"는 일반적으로 DNA (RNA) 서열로부터 소정의 폴리펩티드를 발현시키기 위한 플라스미드, 파지, 바이러스, 또는 벡터를 지칭한다. 발현 벡터는, (1) 유전자 발현에 있어서 조절 역할을 하는 유전자 요소, 예를 들어, 프로모터 또는 인헨서 (enhancer), (2) mRNA로 전사되고 단백질로 번역되는 구조적 또는 코딩 서열, 및 (3) 적절한 전사 개시 및 종결 서열의 조합체 (assembly)를 포함하는, 전사 유닛 (transcriptional unit)을 포함할 수 있다. 효모 또는 진핵 발현 시스템에서 사용하기 위한 구조 유닛(structural unit)은, 바람직하게는 숙주 세포에서 번역된 단백질이 세포외 분비가 될 수 있도록 하는 리더 서열(leader sequence)을 포함한다. 대안적으로(alternatively), 재조합 단백질이 리더 서열 또는 수송 서열(transport sequence)없이 발현되는 경우, N 말단 메티오닌 잔기를 포함할 수 있다. 이러한 아미노산 잔기는, 최종 생성물을 제공하기 위해 발현된 재조합 단백질로부터 후속적으로 절단되거나 절단되지 않을 수있다.

또한, 바람직하게는, 본 발명에 따른 백신 조성물은 생리학적으로 투여 가능한 형태로 제공되고, 근육 내, 정맥 내, 피하 또는 진피 주사용 또는 점막 투여에 적합하다. 정맥 내 투여가 덜 바람직하다는 것이 주목된다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 서열 번호 5의 아미노산 서열 또는 이 서열과 적어도 95% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 갖는 ldeSsuis의 단편에 관한 것이다. 서열 번호 5는 Mac-1 도메인의 고도로 보존된 부위에 상응한다. 이 Mac-1 도메인은 IgM 프로테아제 활성을 나타내지만, 면역원성 효과는 반드시 이 활성과 관련이 있는 것은 아니다. 예를 들어, 상기 프로테아제의 활성 중심부위가 Cys 잔기의 돌연변이 유발에 의해 불활성화된 서열 번호 5의 유사체가 본 발명의 범위에 포함된다. 이러한 경우에도 상기 유사체는 면역 반응을 유도하는 백신으로 효과적이다.

또한, 상기 아미노산 서열이 서열 번호 5와 적어도 95% 이상의 서열 상동성을 유지하는 경우, 상기 아미노산 서열은 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 대한 백신으로서 효과적일 수 있음이 밝혀졌다. 여기에는 단일 아미노산들의 치환, 삽입 또는 결실이 포함된다. 자연 발생 Mac-1 도메인은, 약간의 변형을 보이지만 5% 이상 차이가 나지는 않는 데, 즉 Mac-1 도메인에서 95% 이상의 상동성을 공유한다는 것이 밝혀졌다. 서로 다른 지리적 지역 (미국, 아시아, 유럽)에서 분리되고, 다른 숙주 유기체 (인간, 돼지)에서 유래된, 예시적인 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 서열을 수득하였다. 수득된 균주들은 여러 다른 혈청형 (제1 내지 제4 혈청형, 제7 내지 제9 혈청형, 제14 및 제16 혈청형, 및 혈청형 지정이 불가능한 균주)에 속하며, 아래의 표 1에 요약되어 있다.

단백질 ID	서열번호 5와의 상동성	균주	분리된 유기체	지리적 기원지	혈청형
WP_011922092	100%	05ZYH33 P1/7 S15W S12W	인간 돼지 돼지 돼지	중국 유럽 영국 영국	2 2 9 14
WP_044670034	100%	E10N E30Y	돼지 인간	베트남 베트남	2 2
WP_012775646	100%	JS14	돼지	중국	14
WP_044671938	99%	LS0C	돼지	영국	1
WP_002935529	98%	89-1591 D9 LL-S	돼지 돼지 돼지	캐나다 중국 영국	2 7 3
WP_015647040	98%	TL13	돼지	중국	16
WP_023370787	97%	T15 S97A S16Z	돼지 돼지 돼지	네델란드 영국 영국	2 4 8
WP_044678723	96%	LS1B	돼지	영국	혈청형 지정 불가

단백질 WP_044671938, WP_002935529, WP_015647040, WP_023370787 및 WP_044678723의 Mac-1 도메인에 대한 서열 정보는, 서열 번호 10 내지 서열 번호 14에 개시되어있으며, 서열 번호 5와의 서열 상동성이 95% 이상이기 때문에 본 발명의 단편 또는 동족체의 정의에 포함된다.

본 발명의 또 다른 양태는, 서열 번호 6 또는 7로 표시되는 아미노산 서열, 또는 서열 번호 6 또는 7의 아미노산 서열과 적어도 60% 이상, 바람직하게는 적어도 70% 이상, 적어도 85% 이상 또는 적어도 95% 이상의 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 rIsuSuis 단백질이다.

본 발명의 또 다른 양태는 상기 벡터로 형질 감염된 숙주 세포이다.

본 발명의 또 다른 양태는 벡터 또는 상이한 유기체, 각각 재조합 단백질의 발현에 적합한 조건하에서 형질 감염된 숙주 세포에서 게스트 항원(guest antigen)으로서 rIdeSsuis로 정의된 단백질을 생산하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 양태는 상기 정의된 IdeSsuis 또는 rIdeSsuis 단백질, 이의 유사체 또는 단편을 인식하는 항체이다.

상기 항체는 바람직하게는 폴리클론 항체, 모노클론 항체, 인간화 항체, 키메라 항체 및 합성 항체로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본원에서 용어 "항체"는 에피토프(epitope)에 선택적으로 결합하는 특정 능력을 갖는, 비-손상(intact) 항체 뿐만 아니라 항체 단편에 대해 사용된다. 상기 항체 단편으로는, Fab, F(ab ')₂ 및 Fv 항체 단편이 포함되며, 이에 한정되는 것은 아니다. 용어 "에피토프(epitope)"는 항체의 파라토프(paratope)가 결합할 수 있는 항원의 항원 결정인자(antigen determinant)를 의미한다. 에피토프 결정인자는, 일반적으로 분자의 화학적 활성 표면 그룹 (예를 들면, 아미노산 또는 당 잔기)으로 구성되며, 일반적으로 특정 물리적 특성 뿐만 아니라 3차원 구조를 나타낸다.

본 발명에 따른 항체는 임의의 공지된 절차에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 순수하고 완전한 IdeSsuis 이거나 rIdeSsuis 단백질 또는 이의 단편/유사체를 생산하여 면역원으로서 동물을 면역화시켜 특정 항체를 생산할 수 있다.

폴리클론 항체의 생산은 일반적으로 공지되어 있다. 구체적인 프로토콜은 예를 들면 Green 문헌 (Production of Polyclonal Antisera, Immunochemical Protocol (Manson editor), 1-5 페이지, Humana Press, 1992) 및 Coligan 문헌 (Production of Polyclonal Antisera in Rabbits, Rats, Mice and Hamsters, Current Protocols In Immunology, section 2.4.1, 1992)에서 볼 수 있다. 또한, 본 분야의 전문가들은 모노클론 항체 및 폴리클론 항체의 정제 및 농축과 관련한 다수의 기법들에 익숙하다 (참조: Coligan 등, Unit 9, Current Protocols in Immunology, Wiley Interscience, 1994).

모노클론 항체의 생산에 대해서도 일반적으로 잘 알려져있다. 예를 들면 하이브리도마 방법 (Kohler 및 Milstein, 1975, Nature, 256:495-497, Coligan 외, section 2.5.1 -2.6.7; Harlow 외, Antibodies:A Laboratory Manual, 726 페이지, Cold Spring Harbor Pub., 1988), 트리오마 기술, 인간 B 세포 하이브리도마 기술 (Kozbor 외, 1983, Immunology Today 4:72), 및 EBV 하이브리도마 기술 (Cole 외, 1985, Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., 77-96 페이지) 등을 사용하여 인간 모노클론 항체를 생산할 수 있다.

요약하면, 모노클론 항체는 본 발명에 따른 단백질을 함유하는 혼합물을 마우스에 주사함으로써 수득할 수 있다. 마우스에서의 항체 생산은 혈청 프로브를 통해 확인된다. 마우스가 충분한 항체가(antibody titer)를 가지는 경우, 마우스를 희생시키고 비장을 제거하여 B- 세포를 분리한다. B 세포는 골수종 세포(myeloma cells)와 융합하여 하이브리도마(hybridoma)를 얻는다. 수득한 하이브리도마를 클로닝하고, 클론을 분석한다. 본 발명에 따른 단백질에 대한 모노클론 항체를 포함하는 양성 클론을 선별하고, 하이브리도마 배양물로부터 항체를 단리한다. 모노클론 항체를 분리 및 정제하는 기술은 많이 알려져 있다. 이러한 기술의 예로는, 단백질 A 세파로스를 이용한 친화성 크로마토그래피, 크기-배제 크로마토그래피 및 이온 교환 크로마토그래피 등이 포함된다. 또한, 예를 들어 Coligan 외 문헌 (Section 2.7.1 내지 2.7.12 및 Section "Immunoglobulin G(IgG), Methods In Molecular Biology, Vol.10, 79-104 페이지, Humana Press, 1992)을 참조할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에서 인간화된(humanized) IdeSsuis 또는 rIdeSsuis 특이적 마우스 항체를 제공한다.

상기 항체는 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염으로 고통받는 인간 또는 동물 (돼지) 환자의 치료를 위한 비경구용 조성물의 일부를 형성할 수 있다. 하지만, 상기 항체는 예방 목적으로도 사용될 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 상기 기술된 항체를 생산하기 위해 상기 개시된 단백질을 사용하는 용도에 관한 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은, 돼지에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료적 처치(therapeutic treatment)를 수행하기 위해, 본 발명에 따른 백신 또는 비경구 조성물을 사용하는 것이다. 이는, 인간 환자에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방, 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료적 처치를 수행하기 위해, 본 발명에 따른 백신 또는 비경구 조성물을 사용하는 것도 포함된다.

특히, 본 발명에 따른 백신 조성물의 사용이 바람직한 데, 이로 인한 치료는 돼지에서 면역 반응을 유발하는 데, 이러한 면역 반응은 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 의해 생성된 단백질 IdeSsuis에 대한 체액성(humoral) 및 세포성(cellular) 반응의 활성화이다.

상기 치료(백신 접종)는, 적어도 한 차례 이상 또는 두 차례 이상의 면역 접종(immunization)이 포함된다. 돼지/인간 개체당 투여되는 총 투여량은 단백질 약 0.05 내지 2.0 mg이다.

본 발명에 따른 백신 조성물의 제조는 당업계에 공지되어 있으며, 당업자에게 공지된 참조문헌에 기재되어있다. 본 발명에 따른 백신 조성물의 제조를 위해, 아래에 기재된 약제학적으로 허용가능한 담체(carrier), 희석제(diluent) 또는 보조제(adjuvant)가 포함되며 이에 제한되지는 않는다: 미네랄 염 보조제 (예를 들면, 알럼-, 칼슘-, 철-, 지르코늄-기반 염 보조제), 계면활성(tensioactive) 보조제 (예를 들면, Quil A, QS-21, 기타 사포닌), 세균-유래 보조제 (예를 들면, N-아세틸 뮤라밀-L-알라닐-D-이소글루타민(MDP), 지질 다당류(LPS), 모노포스포릴 지질 A, 트레할로스 다이마이콜레이트(TDM), DNA, CpGs, 세균 독소), 보조제 에멀젼 (예를 들면, FIA, Montanide, Adjuvant 65, Lipovant), 리포솜 보조제, 폴리머 보조제 및 담체, 사이토킨 (예를 들면, 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자), 탄수화물 보조제, 살아있는 항원 전달 시스템 (예를 들면, 박테리아, 바이러스). 또한, 담체는 티탄 또는 중합체로 제조된 코팅 패치와 같은 건식 제제(dry formulation)를 포함 할 수 있다. 본원에 기재된 백신의 제형 및 투여 기술은 문헌 (Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 22판)에도 기재되어 있다.

따라서, 본 발명은 IdeSsuis 이거나 rIdeSsuis 또는 이의 단편으로 명명된 단백질; 발현 벡터에 통합된, 단백질 IdeSsuis 이거나 rIdeSsuis 또는 이의 단편을 발현하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 백신 조성물에 관한 것다. 바람직하게는, 상기 단백질은 재조합 단백질이다.

본 발명자들은 아래의 내용을 확인했다:

(a) 옵손화 항체(opsonising antibodies)의 유도는 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 보호 효능에 매우 중요하며;

(b) IdeSsuis는 백신 접종된 새끼 돼지의 혈액 중에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 생존을 촉진시킨다.

또한, 단독 항원으로서 단백질 rIdeSsuis을 사용하여 돼지에 백신을 접종함으로써 돼지가 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 감염되는 것을 방지할 수 있음을 본 발명자들이 보여주었다. 본 발명에 따라, rIdeSsuis을 이용한 백신접종을 통해, 중화 항체 (neutralizing antibodies)의 유도로 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 IdeSsuis IgM의 프로테아제에 의해 IgM이 절단되는 것을 방지한다.

본 발명에 따라, 재조합 단백질 rIdeSsuis 또는 이의 단편을 돼지에 백신 접종함으로써, 회복된(reconvalescent) 또는 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 박테린-접종된 새끼 돼지와 비교하여, 높은 역가(titer)의 중화 활성을 가진 IdeSsuis-특정 IgG 항체가 유도되었다. 또한, 아래의 실시예 1에 따르면, rIdeSsuis가 종래의 박테린 (bacterin) 백신에 비해 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 대해 보다 높은 면역성을 제공하는 것이 밝혀졌다.

또한, 본 발명자는 재조합 단백질 rIdeSsuis 또는 이의 유사체 또는 단편을 돼지에게 백신 접종시키면 혈액 내에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)의 생존을 감소시킨다는 것을 보여 주었다.

전술한 바와 같이, 본 발명의 하나의 중요한 측면은, 본원에서 정의된 상기 단백질, 핵산 및 이의 유사체 및 단편이 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염으로부터 보호되는 데에 유일한 면역원성 제제로서 사용될 수 있다는 놀라운 통찰력에 있다. 종래 기술에서 사용되어온 박테린(bacterin)과 같은 다른 활성 성분은 필요하지 않다. 이러한 점은 하기 실시예 2에 기재된 실험적 증거에 의해 뒷받침된다. 본 발명에 따른 백신은 위약/대조 백신에 비해 현저히 향상된 효능을 갖는다는 것이 입증되었다 (참조: 실시예 2의 제1 시험 및 제2 시험의 세균 살해 어세이 데이터, 도 3 및 도 4). 이러한 실험 결과로부터 도출할 수 있는 결론은 다음과 같다:

* rIdeSsuis (서열번호 2)는 상이한 여러 가지 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 대한 면역 보호를 제공한다;

* 고도로 보존된 Mac-1 도메인 (서열 번호 5)을 적어도 함유하는 단백질은 면역 보호를 제공하기에 충분하다;

* Mac-1 도메인 외부의 전체적인 서열이 제2 혈청형 균주의 상응하는 서열과 상이하더라도 (특정 서열 부분의 전체가 결실되어있을 지라도), 고도로 보존된 Mac-1 도메인 (서열 번호 5)을 적어도 함유하는 다른 혈청형의 IdeSsuis 단백질은 면역보호를 유도한다.

본 발명에 따라, 단백질 IdeSsuis 또는 rIdeSsuis 또는 이의 유사체/단편이 융합 단백질에 사용될 수도 있다. 융합 단백질은, 원래 별도의 단백질을 코딩하는두 개 이상의 유전자를 결합시켜 제조된다. 이러한 융합 유전자의 번역(translation)은, 원래의 단백질로부터 각각 유도된 기능을 갖는 단일 또는 다중 폴리펩티드를 생성한다. 현재 당업계 기술에 의하면, 융합 단백질은 목적으로 하는 단백질의 검출, 통합 또는 수송과 같은 특정 용도를 단순화시키는 데 종종 사용된다. 형광 현미경에 의한 검출을 위한 중요한 성분으로는, 목적하는 단백질에 융합된 녹색 형광 단백질(GFP)이 있다.

항원의 전달 및 면역원성을 향상시키기 위해 IdeSsuis에 융합될 수 있는 다른 단백질로는, 면역글로불린 FC 단편, 비-독성 콜레라 독소 CTA 서브유닛, 돌연변이된 열 민감성 독소, 바실러스 서브틸리스 포자 코팅 단백질(spore coat protein) 또는 박테리아 플라젤린(flagellin)이 있다. 바이러스 입자 또는 바이러스-유사 입자의 표면에서 IdeSsuis의 발현을 위해, 바이러스 또는 파지 (예를 들면, 변형된 백시니아 바이러스 앙카라(MVA) B형 간염 바이러스, 람다 파지, 또는 fd, M13 또는 fI와 같은 섬유형 박테리오파지)의 단백질과의 융합 단백질을 사용할 수 있다.

융합 단백질을 검출할 수 있는 또 다른 가능한 방법은, 친화 크로마토그래피, 웨스턴 블랏팅, 면역조직화학 또는 형광 현미경을 이행하여 융합 단백질을 생산하는 동안에 종종 사용되는 소위 단백질 태그(protein tags)를 사용하는 것이다. 단백질 태그는 일반적으로 HIS-Tag, myc-Tag, HA-Tag, Step-Tag, GST-Tag, maltose binding protein-Tag 또는 Thioredoxin-Tag와 같은 짧은 아미노산 서열이다.

본 발명에 따른 rIsuSsuis, 이의 단편 또는 유사체와 같은 재조합 단백질을 생산하는 방법은 당업자에게 공지되어 있고, 당업자에게 공지된 참조문헌에 의해 기재되어 있다. 일반적으로 숙주 세포는 재조합 단백질 생산을 위한 목적 단백질을 코딩하는 벡터로 형질 감염시키기 위해 사용된다. 일반적으로, 숙주 세포는 세균 (예를 들어, 대장균, 바실러스 또는 락토코커스 균주), 인간 (예를 들어, 293-T, HEK-293), 마우스 세포주, 곤충 세포주, 효모 세포 또는 식물 기반 시스템일 수 있다.

숙주세포 감염을 위해, 플라스미드 (예를 들어, pET, pQE), 바이러스, 파지 (예, 바큘로 바이러스, λ 파지 또는 섬유상 박테리오파지) 등의 발현벡터를 사용할 수 있다.

일반적으로, 백신 또는 비경구 조성물은 액체 용액 또는 현탁액의 형태로 주사제로 제조된다.

또한, 본 발명은, 피하, 정맥 내, 근육 내, 경피 또는 점막 투여용 백신 또는 비경구 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 백신은 돼지 또는 인간에서의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료적 처치(therapeutic treatment)를 수행하는 데 사용된다. 이러한 처치는 적어도 1회, 바람직하게는 2회의 면역 접종(immunization)을 포함한다. 1회의 면역 접종이 실제로 바람직하지만, 표준 면역접종은 일반적으로 1차 및 2차의 프라임-부스트 요법 (prime-boost regime), 즉 2회의 별개의 백신 접종을 포함한다. 2차의 부스트 백신접종은 일반적으로 1 내지 3주의 시간 프레임내에 시행되며, 바람직하게는 1차의 프라임 백신 접종 후 약 2주 후에 시행되는 것이 바람직하다. 각 백신접종의 투여량은 동일하거나 상이할 수 있으나, 양 백신의 투여량이 동일한 것이 바람직하다.

동물 또는 인간 환자에게 투여되어야하는 총 투여량은, 상기 정의된 IdeSsuis 또는 rIdeSsuis 단백질, 이의 유사체 또는 단편 약 0.05 내지 2 mg이며, 바람직하게는 0.1 내지 1.0 mg, 더욱 바람직하게는 약 0.5 mg이다. 이러한 투여량은, 1회의 백신 접종이 충분한 경우에는 1회 투여량으로 투여된다. 1회 이상의 백신접종이 이루어지는 경우, 총 투여량을 여러 개의 동일한 서브-투여량으로 분할하는 데, 예를 들어 2회의 백신 접종을 사용하는 경우에는 백신 접종의 개별적인 투여량은 약 0.025 내지 1.0 mg이 된다.

또한, 본 명세서에는 아래의 내용의 서열 목록이 첨부되어 있다.

서열번호 1은 단백질 IdeSsuis의 아미노산 서열을 표시한다.

서열번호 2는 신호 펩티드가 결실된 재조합 단백질 rIdeSsuis의 아미노산 서열을 표시한다.

서열번호 3은 IdeSsuis를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 표시한다.

서열번호 4는 rIdeSsuis를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 표시한다.

서열번호 5는 IdeSsuis의 MAC-1 도메인의 고도로 보존된 부위의 아미노산 서열을 표시한다.

서열번호 6은 rIdeSsuis 유사체 rIdeSsuis_homologue의 아미노산 서열을 표시한다.

서열번호 7은 rIdeSsuis 유사체 rIdeSsuisB2의 아미노산 서열을 표시한다.

서열번호 8은 rIdeSsuis 유사체 rIdeSsuis_homologue를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 표시한다.

서열번호 9는 rIdeSsuis 유사체 rIdeSsuisB2를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 표시한다.

서열번호 10은 WP_044671938의 제91 내지 제425 위치의 아미노산의 서열을 표시한다.

서열번호 11은 WP_002935529의 제91 내지 제425 위치의 아미노산의 서열을 표시한다.

서열번호 12는 WP_015647040의 제92 내지 제426 위치의 아미노산의 서열을 표시한다.

서열번호 13은 WP_023370787의 제92 내지 제426 위치의 아미노산의 서열을 표시한다.

서열번호 14는 WP_044678723의 제92 내지 제426 위치의 아미노산의 서열을 표시한다.

본 발명에서는 당업계에 알려져있는 문제점들을 극복하고, 포유류, 특히 돼지 및 인간을 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염에 대해 면역시켜 보호하기 위한 신규한 백신 조성물을 제공한다.

본 발명은 하기 도면을 참조하여 추가적으로 설명된다.
도 1에서는 돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis)를 이용한 백신접종 실험 시간표를 보여준다.
도 2에서는 도 1의 백신접종 실험으로 얻은 결과를 보여준다.
도 3에서는 위약(placebo)와 rIdeSsuis을 사용한 백신접종에 따른 세균 살해 어세이 다이어그램을 보여준다.
도 4에서는 rIdeSsuis 또는 rIdeSsuis 유사체와 대조군을 사용한 면역접종에 따른 세균 살해 어세이 다이어그램을 보여준다.

하기 실시예는 본 발명을 설명한다. 하기 실시예는 단지 본 발명의 바람직한 일 실시예로서 이해되어야 한다. 아래 실시예의 기재 범위로 본 발명이 제한되는 것은 아니다.

실시예 1

하기 실시예에서는 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 감염된 새끼 돼지에 백신 접종 실험(vaccination challenge experiment)을 수행한 후의 실험 데이터를 제공하고 있다.

서로 다른 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 혈청형 (즉, 제2 및 제9 혈청형) 및 감염 경로 (정맥내 및 비강내 감염)에 대해 백신 접종 실험을 준비하였다.

도 1에 간략히 기재된 바와 같이, 5주령 새끼 돼지를 rIdeSsuis 백신으로 1차 접종(prime vaccination)을 했다. 7주령이 되었을 때, 상기 새끼 돼지에 rIdeSsuis으로 추가 접종 (booster)하였고, 한 그룹에서는 근육 주사를 통해 박테린 (bacterin)을 추가적으로 1차 접종(prime vaccination)하였다 (도 1의 표 참조). 다른 1개의 그룹에서는 새끼 돼지가 7주령이 되었을 때 박테린(bacterin)으로 1차 접종만 하였고, 마지막 1개의 동물 그룹에서는 완충액(buffer)과 보조제(adjuvant)만으로 이루어진 위약(placebo)을 2회 접종하였다. 비강을 통한 2번째 면역 접종이 있은 지 2주 후, 새끼 돼지에 대해 감염도전 (challenge)을 했다. 상기 동물을 8 시간마다 관찰하였다. 동물의 복지를 위해, 급성 다발성 관절염 또는 심각한 수막염 증상을 보이는 경우뿐만 아니라 무감각증(apathy) 및 거식증(anorexia)을 나타내는 경우에는 상기 동물을 안락사시켰다.

감염이 있고나서 14일 경과후, 생존하는 모든 새끼 돼지를 희생시켰다.

본 실험을 통해, 재조합 단백질 rIdeSsuis 만을 사용하여 새끼 돼지에 면역 접종시키는 것만으로 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 제2 혈청형에 대한 감염으로부터 새끼 돼지를 보호하기에 충분한 것으로 밝혀졌다 (도 2 참조).

실시예 2

본 실시예에서는, 세균살해 분석(bactericidial analysis)을 사용하여 백신의 효과를 평가하였다. 본 실험에서는, 소정의 혈청형을 가지는 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균을 실험 동물의 혈액에 투여한 후에, 투여된 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균의 생존 여부를 결정하는 것을 포함하였다. 소정의 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균에 대한 보호효과를 가지는 항체가 실험 동물의 혈액내에 존재하는 경우, 그 세균은 2 시간의 인큐베이션 시간동안에 효과적으로 살해된다. 보호의 정도는 "생존 인자"(SF, survival factor)"로 명명하였고, 실험 동물의 혈액에 세균을 추가한 직후의 콜로니 수(colony count)와 120분 이후의 콜로니 수의 비율을 나타낸다. 생존 인자(SF)의 수치가 낮다는 것은, 실험 동물의 혈액 내에서 세균이 효율적으로 살해됨으로써 실험 동물을 효과적으로 보호한다는 것을 의미한다.

재조합 IdeSsuis 단백질 (서열번호 2), 재조합 IdeSsuisB2 단백질 (서열번호 7) 및 재조합 IdeSsuis_homologue 단백질 (서열번호 6)의 발현 및 정제는, 암피실린이 추가된 LB 배지(broth)에서 적합한 균주의 생장을 통해 수행되었다. 단백질 발현은 IPTG를 첨가하여 유도하였다. 기본 조건 (native conditions)하에서 Ni² ⁺-니트릴로트리아세트산 친화성 크로마토그래피에 의한 상기 재조합 단백질의 정제는, 제조업체 (Macherey-Nagel)에서 권장하는 방법에 따라 실시하였다.

새끼 돼지의 면역접종(immunization): 새끼 돼지를 대상으로 하여, 보조제로서 20%(v/v) Emulsigen을 포함하는 0.25 mg rIdeSsuis, 0.25 mg rIdeSsuisB2, 또는 0.5 mg rIdeSsuis_homologue를 함유하는 백신 1.5ml를 사용하여 1차(prime) 및 2차(booster) 접종을 하였다.

제1 시험:

두 마리 또는 네 마리의 한배새끼 (litter mates)를 각각 무작위로 2개의 시험군 (N = 9/그룹), 즉 제1 그룹 (대조군, 위약)과 제2 그룹 (서열번호 2의 rIdeSsuis으로 면역접종을 한 그룹)으로 나누었다. 상기 동물에 대한 면역접종 및 시험은 아래의 시험 계획에 따라 수행되었다:

그룹	돼지의 수	1차 면역접종	2차 면역접종	세균살해 어세이
1	9	위약 (PBS+보조제)	위약 (PBS+보조제)	제2 혈청형 (제10형 균주)	제9 혈청형 (A3286/94)
2	9	rIdeSsuis (0.25mg/돼지)	rIdeSsuis (0.25mg/돼지)	제2 혈청형 (제10형 균주)	제9 혈청형 (A3286/94)

도 3에서는 상기 실험의 결과를 보여준다.

대조군 (위약)은 백신 접종군에 비해 더 높은 생존 인자(survival factor) 수치를 나타내었다. 제2 혈청형 균주의 IdeSsuis 단백질의 전체 서열을 포함하는 재조합 항원 rIdeSsuis(서열 번호 2) (면역접종된 그룹)는 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 제2혈청형 및 제9 혈청형을 모두 효과적으로 살해하는 항체를 유도하였다.

제2 시험:

네 마리의 한배새끼 (litter mates)를 각각 무작위로 4개의 시험군 (N = 6/그룹, 단 그룹 4는 N= 5), 즉 제1 그룹 (대조군, 면역접종 하지않은 그룹), 제2 그룹 (서열번호 6의 rIdeSsuis-homologue로 면역접종한 그룹), 제3 그룹 (제7 혈청형 균주로부터 유래된 rIdeSsuis (rIdeSsuisB2; 서열번호 7)로 면역접종한 그룹), 제4 그룹 (서열번호 2로 면역접종한 그룹)으로 나누었다. 상기 동물에 대한 면역접종 및 시험은 아래의 시험 계획에 따라 수행되었다:

그룹	돼지의 수	1차 면역접종	2차 면역접종	세균살해 어세이
1	6	면역접종 없음	면역접종 없음	S. suis 제9 혈청형 균주A3286/94
2	6	rIdeSsuis_homologue (0.5mg/돼지)	rIdeSsuis_homologue (0.5mg/돼지)	S. suis 제9 혈청형 균주A3286/94
3	6	rIdeSsuisB2 (0.25mg/돼지)	rIdeSsuisB2 (0.25mg/돼지)	S. suis 제9 혈청형 균주A3286/94
4	5	rIdeSsuis (0.25mg/돼지)	rIdeSsuis (0.25mg/돼지)	S. suis 제9 혈청형 균주A3286/94

도 4에서는 상기 시험의 결과를 보여준다.

상기 결과에서는, 3가지의 백신 접종 그룹에 비해 대조군 (제1 그룹)에서 생존 인자 (survival factor) 수치가 상당히 높게 나타났다. 고도로 보존된 MAC-1 도메인 (IgM의 프로테아제 도메인)을 포함하는 N 말단 단편만을 함유하는 재조합 항원 rIdeSsuis_homologue (제2 그룹)는, 항체를 유도하여 대조군에 비해 세균 살해능이 월등히 우수하였다. 제2 그룹의 결과는 제4 그룹의 결과와 비교될 수 있다. 제2 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균의 성숙한 IdeSsuis 단백질의 완전한 아미노산 서열을 포함하는 항원 rIdeSsuis는, 항체를 유도하여 혈액 내에서 제9 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균의 생존을 크게 저하시켰다. 제9 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 세균의 생존은 항원 rIdeSsuisB2 (제3 그룹)에 의해 유도되는 항체에 의해 더 심하게 저하되었다.

rIdeSsuisB2 (서열 번호 7)은 제7 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 균주의 성숙한 IdeSsuis 단백질의 완전한 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호 1과 비교할 때에 114개의 아미노산이 부족하여 C 말단의 절반 부위가 상이하다. 서열번호 7의 제80 내지 제414 위치의 아미노산 (소위, 고도로 보존된 Mac-1 부위)은 서열번호 5와 97.9% 상응한다. 서열번호 7과 서열번호 1의 나머지 C 말단 부위의 상동성은 96.4%이다.

상기 실험 결과를 통해 도출할 수 있는 결론은 다음과 같다:

rIdeSsuis (서열 번호 2)는 상이한 혈청형의 스트렙토코커스 수이스(S. suis)에 걸쳐 면역 보호(immune protection)를 제공하고;

고도로 보존된 Mac-1 도메인을 적어도 포함하는 아미노산은 면역 보호를 제공하기에 충분하며;

비록 고도로 보존된 Mac-1 도메인 외부의 전체적인 서열이 제2 혈청형 균주의 것과 상이할 지라도 (특정 서열 부분이 완전히 결실되어 있다고 할지라도), 고도로 보존된 Mac-1 도메인을 적어도 포함하는 다른 종류의 혈청형의 IdeSsuis 단백질은 면역 보호를 유도한다.

<110> IDT Biologika GmbH <120> Vaccine composition against Streptococcus suis infection <130> IP16-0011 <150> EP 14170637.4 <151> 2014-05-30 <160> 14 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1141 <212> PRT <213> Streptococcus suis <400> 1 Met Asn Ile Gln Glu Arg Phe Ser Leu Arg Lys Ser Ala Val Gly Leu 1 5 10 15 Val Ser Val Ser Leu Leu Cys Ala Ile Tyr Thr Ser Thr Val Ala Ala 20 25 30 Asp Thr Val Val Thr Gly Val Asn Glu Ile Ile Glu Glu Ser Gln Val 35 40 45 Lys Asp Glu Val Ser Ile Glu Ser Glu Lys Asn Glu Ser Leu Asp Gly 50 55 60 Ser Asn Ile Glu Ile Val Glu Glu Ile Ala Asp Asn Ile Pro Ser Pro 65 70 75 80 Val Ile Ala Glu Gly Glu Val Ala Val Glu Met Lys Val Asp Arg Gly 85 90 95 Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr Glu Val Thr Thr Ser Glu 100 105 110 Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys Glu Ile Leu Asn Gln Thr 115 120 125 Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg Gln Ile Ile Trp Ala His 130 135 140 Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser Gly Gly Phe Val Lys Glu 145 150 155 160 Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala Pro Phe Glu Ala Gly Lys 165 170 175 Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn Ala Ser Phe Ile Asp Leu 180 185 190 Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn Met Val His Trp Trp Leu 195 200 205 Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Gly 210 215 220 Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile Thr Asp Leu Arg Arg Tyr 225 230 235 240 Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser Arg Val Phe Asp Met Phe 245 250 255 Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly Phe Val Ser Asp Ala Leu 260 265 270 Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro Lys Ala Gln Gly Gly Val 275 280 285 Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp Ser Arg Gly Gly Phe Phe 290 295 300 Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr Asn Arg Ile Phe Ser Gly 305 310 315 320 Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg Thr Val Leu Glu Ser Lys 325 330 335 Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu Gly Tyr Ala Thr His Ile 340 345 350 Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn Gln Gly Lys Ile Lys Ala 355 360 365 Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln Glu Gln Ile Gly Leu Lys 370 375 380 Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly Asn Pro Arg Leu Asn Asn 385 390 395 400 His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu Leu Asp Tyr Val His Thr 405 410 415 Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu Glu Tyr Phe Asn Pro Leu Ala 420 425 430 Lys Ala Lys Glu Thr Ala Ser Gln Thr Leu Ala Asp Thr Lys Lys Ala 435 440 445 Leu Asp Leu Ser Ile Gln Gly Gln Ser Glu Leu Pro Glu Ser Met Arg 450 455 460 Leu Ile Tyr Leu Glu Lys Leu Asn Asn Leu Tyr Asn Gln Gly Ile Leu 465 470 475 480 Ser Ile Gln Lys Ala Glu Ser Ser Glu Met Leu Ser Gly Ala Leu Glu 485 490 495 Asn Gly Leu Asn Ser Leu Lys Ser Leu Asp Phe Pro Ile Ser Glu Val 500 505 510 Gly Asn Ala Leu Ala Pro Asp Leu Pro Val Gly Asp Arg Ser Thr Val 515 520 525 Ser Asp Val Asp Ser Leu Ser Ser Gln Glu Thr Ser Ser Thr Asn Leu 530 535 540 Glu Ala Asp Thr Glu Asn Ala Gly Ile Ile Ala Asp Gly Thr Asn Gln 545 550 555 560 Leu His Phe Pro Val Glu Ala Gln Thr Thr Ser Ser Val Glu Ala Glu 565 570 575 Gly Asp Asn Val Phe Glu Gln Glu Ala Asp Thr Leu Pro Ile Ile Ile 580 585 590 Glu Asn Lys Asp Glu Phe Gly Ser Glu Leu Ser Arg Asn Met Gln Thr 595 600 605 Ser Glu Thr Asp Ser Leu Val Val Ala Val Glu Glu Asp Val Lys Asn 610 615 620 Asp Glu Val Ala Gln Val Glu Glu Leu Leu Glu Ser Glu Lys Val Glu 625 630 635 640 Asn Gln Ser Ser Glu Leu Leu Ser Asp Thr Leu Ile Val Glu Ser Ala 645 650 655 Asn Asp Lys Glu Glu Asp Arg Val Glu Ala Val Val Ser Glu Gln Pro 660 665 670 Asp Ser Ile Pro His Gln Asn Val Glu Ile Ser Leu Val Glu Pro Thr 675 680 685 Asn Val Glu Thr Glu Thr Val Val Thr Pro Ile Asn Asp Ala Ala Thr 690 695 700 Pro His Gly Ser Pro Thr Tyr Ile Asp Asn Ser Val Thr Glu Ser Val 705 710 715 720 Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala Gly Glu Thr Glu Ile 725 730 735 Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr Asn Val Glu Thr Glu Thr Val 740 745 750 Val Thr Pro Val Asn Asp Val Ala Thr Pro His Gly Ser Pro Thr Tyr 755 760 765 Ile Asp Asn Ser Val Thr Glu Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp 770 775 780 Ser Ile Gln Ala Gly Glu Thr Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu 785 790 795 800 Ser Thr Asn Val Glu Thr Glu Thr Val Val Thr Pro Val Asn Asp Val 805 810 815 Ala Thr Pro His Gly Ser Pro Thr Tyr Ile Asp Asn Ser Val Thr Glu 820 825 830 Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala Gly Glu Thr 835 840 845 Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr Ser Val Glu Ala Glu 850 855 860 Leu Val Asp Asn Ser Glu Ile His Ala Ala Thr Ser Ser Val Thr Pro 865 870 875 880 Cys Gly Ser Ser Ala Tyr Ala Asp Gly Ser Thr Thr Glu Ser Val Ala 885 890 895 Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Thr Gly Asn Thr Glu Ile Ala 900 905 910 Glu Pro Thr Ser Ser Lys Ser Thr Asn Val Glu Ala Ala Ser Val Asp 915 920 925 Asn Ser Glu Ile His Ala Asp Ala Ser Leu Thr Ala Val Ser Ser Val 930 935 940 Asn Leu Asp Asn Pro Val Ile Glu Pro Val Ala Ile Ser Leu Ile Gly 945 950 955 960 Ser Lys Arg Asp Thr Asn Ala Glu Val Glu Val Ser Ser Leu Ser Lys 965 970 975 Arg Glu Val Arg Lys Thr Asn Thr Asp Gly Leu Ile Ser Val Gln Ser 980 985 990 Lys Val Ile Lys Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Leu Ala Glu Ala Gly 995 1000 1005 Ser Pro Leu Leu Glu Ala Thr Ile Ala Gln Ser Ser Asn Ser Asn Ser 1010 1015 1020 Thr Glu Ile Gly Met Ser Tyr Gln Asn Thr Val Leu Leu Glu Ser Asn 1025 1030 1035 1040 Asn Thr Glu Arg Gln Val Ser Lys Ala Glu Ile Val Met Glu His Lys 1045 1050 1055 Glu Thr Glu Leu Val Glu Thr Val Ser Ser Ala Ser Glu Pro Val Val 1060 1065 1070 Leu Val Glu Asn Ile Ser Gln Thr Ser Asn Asn Thr Ile Glu Ser Gly 1075 1080 1085 Lys Asn Met Gly Val Gln Ser Gln Ala Gly Ala Lys Gln Ile Leu Gly 1090 1095 1100 Val Glu Gln Ser Ser Lys Val Ser Thr Pro Thr Ser Arg Gln Ile Met 1105 1110 1115 1120 Gly Val Gly Leu Leu Thr Leu Val Leu Gly Ser Ala Leu Gly Leu Leu 1125 1130 1135 Lys Lys Arg Arg Lys 1140 <210> 2 <211> 1130 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> rIdeSsuis <400> 2 Met Ala His His His His His His Val Gly Thr Gly Ser Asn Asp Asp 1 5 10 15 Asp Asp Lys Ser Pro Asp Pro Val Val Thr Gly Val Asn Glu Ile Ile 20 25 30 Glu Glu Ser Gln Val Lys Asp Glu Val Ser Ile Glu Ser Glu Lys Asn 35 40 45 Glu Ser Leu Asp Gly Ser Asn Ile Glu Ile Val Glu Glu Ile Ala Asp 50 55 60 Asn Ile Pro Ser Pro Val Ile Ala Glu Gly Glu Val Ala Val Glu Met 65 70 75 80 Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr Glu 85 90 95 Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys Glu 100 105 110 Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg Gln 115 120 125 Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser Gly 130 135 140 Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala Pro 145 150 155 160 Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn Ala 165 170 175 Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn Met 180 185 190 Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr Leu 195 200 205 Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile Thr 210 215 220 Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser Arg 225 230 235 240 Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly Phe 245 250 255 Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro Lys 260 265 270 Ala Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp Ser 275 280 285 Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr Asn 290 295 300 Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg Thr 305 310 315 320 Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu Gly 325 330 335 Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn Gln 340 345 350 Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln Glu 355 360 365 Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly Asn 370 375 380 Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu Leu 385 390 395 400 Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu Glu Tyr 405 410 415 Phe Asn Pro Leu Ala Lys Ala Lys Glu Thr Ala Ser Gln Thr Leu Ala 420 425 430 Asp Thr Lys Lys Ala Leu Asp Leu Ser Ile Gln Gly Gln Ser Glu Leu 435 440 445 Pro Glu Ser Met Arg Leu Ile Tyr Leu Glu Lys Leu Asn Asn Leu Tyr 450 455 460 Asn Gln Gly Ile Leu Ser Ile Gln Lys Ala Glu Ser Ser Glu Met Leu 465 470 475 480 Ser Gly Ala Leu Glu Asn Gly Leu Asn Ser Leu Lys Ser Leu Asp Phe 485 490 495 Pro Ile Ser Glu Val Gly Asn Ala Leu Ala Pro Asp Leu Pro Val Gly 500 505 510 Asp Arg Ser Thr Val Ser Asp Val Asp Ser Leu Ser Ser Gln Glu Thr 515 520 525 Ser Ser Thr Asn Leu Glu Ala Asp Thr Glu Asn Ala Gly Ile Ile Ala 530 535 540 Asp Gly Thr Asn Gln Leu His Phe Pro Val Glu Ala Gln Thr Thr Ser 545 550 555 560 Ser Val Glu Ala Glu Gly Asp Asn Val Phe Glu Gln Glu Ala Asp Thr 565 570 575 Leu Pro Ile Ile Ile Glu Asn Lys Asp Glu Phe Gly Ser Glu Leu Ser 580 585 590 Arg Asn Met Gln Thr Ser Glu Thr Asp Ser Leu Val Val Ala Val Glu 595 600 605 Glu Asp Val Lys Asn Asp Glu Val Ala Gln Val Glu Glu Leu Leu Glu 610 615 620 Ser Glu Lys Val Glu Asn Gln Ser Ser Glu Leu Leu Ser Asp Thr Leu 625 630 635 640 Ile Val Glu Ser Ala Asn Asp Lys Glu Glu Asp Arg Val Glu Ala Val 645 650 655 Val Ser Glu Gln Pro Asp Ser Ile Pro His Gln Asn Val Glu Ile Ser 660 665 670 Leu Val Glu Pro Thr Asn Val Glu Thr Glu Thr Val Val Thr Pro Ile 675 680 685 Asn Asp Ala Ala Thr Pro His Gly Ser Pro Thr Tyr Ile Asp Asn Ser 690 695 700 Val Thr Glu Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala 705 710 715 720 Gly Glu Thr Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr Asn Val 725 730 735 Glu Thr Glu Thr Val Val Thr Pro Val Asn Asp Val Ala Thr Pro His 740 745 750 Gly Ser Pro Thr Tyr Ile Asp Asn Ser Val Thr Glu Ser Val Ala Thr 755 760 765 Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala Gly Glu Thr Glu Ile Ala Glu 770 775 780 Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr Asn Val Glu Thr Glu Thr Val Val Thr 785 790 795 800 Pro Val Asn Asp Val Ala Thr Pro His Gly Ser Pro Thr Tyr Ile Asp 805 810 815 Asn Ser Val Thr Glu Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile 820 825 830 Gln Ala Gly Glu Thr Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr 835 840 845 Ser Val Glu Ala Glu Leu Val Asp Asn Ser Glu Ile His Ala Ala Thr 850 855 860 Ser Ser Val Thr Pro Cys Gly Ser Ser Ala Tyr Ala Asp Gly Ser Thr 865 870 875 880 Thr Glu Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Thr Gly 885 890 895 Asn Thr Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Lys Ser Thr Asn Val Glu 900 905 910 Ala Ala Ser Val Asp Asn Ser Glu Ile His Ala Asp Ala Ser Leu Thr 915 920 925 Ala Val Ser Ser Val Asn Leu Asp Asn Pro Val Ile Glu Pro Val Ala 930 935 940 Ile Ser Leu Ile Gly Ser Lys Arg Asp Thr Asn Ala Glu Val Glu Val 945 950 955 960 Ser Ser Leu Ser Lys Arg Glu Val Arg Lys Thr Asn Thr Asp Gly Leu 965 970 975 Ile Ser Val Gln Ser Lys Val Ile Lys Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser 980 985 990 Leu Ala Glu Ala Gly Ser Pro Leu Leu Glu Ala Thr Ile Ala Gln Ser 995 1000 1005 Ser Asn Ser Asn Ser Thr Glu Ile Gly Met Ser Tyr Gln Asn Thr Val 1010 1015 1020 Leu Leu Glu Ser Asn Asn Thr Glu Arg Gln Val Ser Lys Ala Glu Ile 1025 1030 1035 1040 Val Met Glu His Lys Glu Thr Glu Leu Val Glu Thr Val Ser Ser Ala 1045 1050 1055 Ser Glu Pro Val Val Leu Val Glu Asn Ile Ser Gln Thr Ser Asn Asn 1060 1065 1070 Thr Ile Glu Ser Gly Lys Asn Met Gly Val Gln Ser Gln Ala Gly Ala 1075 1080 1085 Lys Gln Ile Leu Gly Val Glu Gln Ser Ser Lys Val Ser Thr Pro Thr 1090 1095 1100 Ser Arg Gln Ile Met Gly Val Gly Leu Leu Thr Leu Val Leu Gly Ser 1105 1110 1115 1120 Ala Leu Gly Leu Leu Lys Lys Arg Arg Lys 1125 1130 <210> 3 <211> 3426 <212> DNA <213> Streptococcus suis <400> 3 atgaacattc aagaacgatt ttctttgaga aaatccgcgg ttggcttggt ctcagtctct 60 ttgctatgtg ctatttatac atccactgtt gctgccgata cagttgttac aggagtgaat 120 gaaataattg aagaatcaca agtcaaggat gaggtatcta ttgaatcaga aaaaaatgaa 180 tccctagatg gttctaatat tgaaattgta gaggaaatag cagacaacat cccatcacct 240 gttatcgctg aaggggaagt agcggtagag atgaaagttg acagagggac cgagaatgta 300 gtttctagaa atgatacaga agttacgacg agcgagcaaa atcagataga ggttactgag 360 acaaaagaaa ttttgaatca gaccagttat caaacggaga gtggcgagca acgacaaatt 420 atatgggccc atggaattac tcctcctgca atggaacaaa gcggtggttt tgtaaaggaa 480 aagtatggag actatttaaa ctatacagcg ccatttgagg ctggaaaagg ctactatgat 540 accaataaga gtctgaatgc ttcatttatt gaccttaatc tttgttttgc agctgtgtct 600 tcaaacatgg tacattggtg gttggaacag aatagttcct atgttgagcg atatctcaaa 660 gaaaaaaagg gtacagtaaa tgttgaagaa aactacgcaa taacggactt acggcgctat 720 attaattcat tccaaaatca acaaaatagt cgagtttttg atatgttcaa aacttactat 780 ggttatcgta caaatggttt tgtatcagat gccttggttg acttgtttat taacggatat 840 aaacctaagg cacagggcgg tgtcaatctg gaagatagcc agttagtacc agatagtagg 900 ggtggctttt tctacgacgt tttcaaagag aaaaaactga caaatcgaat ttttagtggt 960 agttatgagc ggtttggtga ggatgttcga actgttttgg aaagcaaagg attactcggc 1020 ttaacttata gaacattagg ttatgcaacg catattgtga cggtatgggg tgctgagtac 1080 gacaatcaag gtaagattaa ggctgtctat atcacagatt ctgatgatca acaagaacaa 1140 attggtttga agcgtatggg aatcactcgt gatgcttccg gaaatccacg tttgaataat 1200 catatgaaaa ataattcagc tggagcgctt ttggattatg tccatacaat ccgtctgggt 1260 caagacttat gggaagaata tttcaatccg cttgcaaaag ccaaagaaac agctagtcag 1320 acattagccg atacaaagaa ggcgttggat ttgtctattc aaggacaatc tgaattgcca 1380 gaatcaatgc gactgattta tcttgaaaaa ctaaataatc tctataatca aggaattcta 1440 tctattcaaa aggcagaaag ttctgagatg ctaagtggtg cattggaaaa tggtttaaat 1500 agtttaaaga gtttagattt tcctatttca gaagttggaa atgctttggc accagattta 1560 ccagtaggtg atcgctcaac ggtttcagat gttgattctc tatcatctca agaaacaagt 1620 tccacaaatt tggaagcaga cacagagaat gcaggtatta ttgcagatgg taccaatcaa 1680 ttgcattttc cagtggaggc ccaaacgaca tcttcagtag aggctgaggg agataatgtt 1740 tttgaacaag aggcagatac attaccaata attattgaaa acaaggatga atttggttca 1800 gaactatcaa gaaacatgca aacgtcagaa acggattcgc tagtagtagc tgttgaagaa 1860 gatgtgaaaa atgatgaggt agcccaagtt gaagagcttc ttgaatcaga aaaagttgaa 1920 aatcagagtt cggaacttct gtcagacacc ctaatcgtag agagtgcaaa tgacaaagaa 1980 gaagatagag tggaggcggt tgtttctgaa caaccagact caataccaca tcaaaatgta 2040 gaaatctctc ttgtagaacc aacgaatgtc gaaactgaaa ctgtggtcac tcctattaat 2100 gatgcagcta ctcctcatgg ttccccgacg tatatagata attccgtaac tgaatctgta 2160 gctactccac ttgaaaaaga ctccattcaa gccggggaga cagagattgc agaaccaacc 2220 tcgagcgaat caacgaatgt cgaaactgaa actgtggtca ctcctgttaa tgatgtagct 2280 actcctcatg gttccccgac gtatatagat aattccgtaa ctgaatctgt agctactcca 2340 cttgaaaaag actccattca agccggagag acagaaattg cagaaccaac ctcgagcgaa 2400 tcaacgaatg tcgaaactga aactgtggtc actcctgtta atgatgtagc tactcctcat 2460 ggttccccga cgtatataga taattccgta actgaatctg tagctactcc acttgaaaaa 2520 gactccattc aagccgggga gacagagatt gcagaaccaa cctcgagcga atcaactagt 2580 gttgaagctg aacttgtcga caattctgaa attcatgcag ctacctcttc agttactccc 2640 tgtggctcct cggcatatgc agatggttcc acaactgaat ctgtagccac tccgcttgaa 2700 aaagactcca ttcagactgg aaatacagaa attgcagaac caacctcgag caaatcaact 2760 aatgtagaag ctgcatctgt cgacaattct gaaattcatg cagatgcctc tctaactgct 2820 gtttcatcag ttaatctgga taatccagtg attgaaccag tagctatctc ccttatcggt 2880 tctaagaggg acacgaatgc agaagtagaa gtttcttcat tatcgaaaag agaggttaga 2940 aaaacaaata ctgacgggct aatctctgtt caatcaaaag ttattaagaa agaattgcta 3000 gaatcaagct tagcagaagc agggtctcca ttgctagaag ccaccattgc tcagtcttca 3060 aactcaaata gtactgagat aggtatgagc tatcagaata ctgtgttatt agagtctaat 3120 aatacagagc gtcaggtgtc taaagcagaa attgttatgg aacacaagga gacagagtta 3180 gttgaaacgg tttcatctgc ttctgagcct gtagtgctcg tagaaaatat ctcacaaacc 3240 tcaaataata ctattgaatc tggtaagaat atgggagttc aatctcaagc aggtgcaaaa 3300 caaattttag gcgtagaaca atcttcgaaa gtaagtacac ctacttcaag acagattatg 3360 ggagtcggtc tattgactct tgttcttggt agtgctttag gtttgttaaa gaaaagacgt 3420 aagtaa 3426 <210> 4 <211> 3393 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence encoding rIdeSsuis <400> 4 atggcacatc accaccacca tcacgtgggt accggttcga atgatgacga cgacaagagt 60 ccggatccag ttgttacagg agtgaatgaa ataattgaag aatcacaagt caaggatgag 120 gtatctattg aatcagaaaa aaatgaatcc ctagatggtt ctaatattga aattgtagag 180 gaaatagcag acaacatccc atcacctgtt atcgctgaag gggaagtagc ggtagagatg 240 aaagttgaca gagggaccga gaatgtagtt tctagaaatg atacagaagt tacgacgagc 300 gagcaaaatc agatagaggt tactgagaca aaagaaattt tgaatcagac cagttatcaa 360 acggagagtg gcgagcaacg acaaattata tgggcccatg gaattactcc tcctgcaatg 420 gaacaaagcg gtggttttgt aaaggaaaag tatggagact atttaaacta tacagcgcca 480 tttgaggctg gaaaaggcta ctatgatacc aataagagtc tgaatgcttc atttattgac 540 cttaatcttt gttttgcagc tgtgtcttca aacatggtac attggtggtt ggaacagaat 600 agttcctatg ttgagcgata tctcaaagaa aaaaagggta cagtaaatgt tgaagaaaac 660 tacgcaataa cggacttacg gcgctatatt aattcattcc aaaatcaaca aaatagtcga 720 gtttttgata tgttcaaaac ttactatggt tatcgtacaa atggttttgt atcagatgcc 780 ttggttgact tgtttattaa cggatataaa cctaaggcac agggcggtgt caatctggaa 840 gatagccagt tagtaccaga tagtaggggt ggctttttct acgacgtttt caaagagaaa 900 aaactgacaa atcgaatttt tagtggtagt tatgagcggt ttggtgagga tgttcgaact 960 gttttggaaa gcaaaggatt actcggctta acttatagaa cattaggtta tgcaacgcat 1020 attgtgacgg tatggggtgc tgagtacgac aatcaaggta agattaaggc tgtctatatc 1080 acagattctg atgatcaaca agaacaaatt ggtttgaagc gtatgggaat cactcgtgat 1140 gcttccggaa atccacgttt gaataatcat atgaaaaata attcagctgg agcgcttttg 1200 gattatgtcc atacaatccg tctgggtcaa gacttatggg aagaatattt caatccgctt 1260 gcaaaagcca aagaaacagc tagtcagaca ttagccgata caaagaaggc gttggatttg 1320 tctattcaag gacaatctga attgccagaa tcaatgcgac tgatttatct tgaaaaacta 1380 aataatctct ataatcaagg aattctatct attcaaaagg cagaaagttc tgagatgcta 1440 agtggtgcat tggaaaatgg tttaaatagt ttaaagagtt tagattttcc tatttcagaa 1500 gttggaaatg ctttggcacc agatttacca gtaggtgatc gctcaacggt ttcagatgtt 1560 gattctctat catctcaaga aacaagttcc acaaatttgg aagcagacac agagaatgca 1620 ggtattattg cagatggtac caatcaattg cattttccag tggaggccca aacgacatct 1680 tcagtagagg ctgagggaga taatgttttt gaacaagagg cagatacatt accaataatt 1740 attgaaaaca aggatgaatt tggttcagaa ctatcaagaa acatgcaaac gtcagaaacg 1800 gattcgctag tagtagctgt tgaagaagat gtgaaaaatg atgaggtagc ccaagttgaa 1860 gagcttcttg aatcagaaaa agttgaaaat cagagttcgg aacttctgtc agacacccta 1920 atcgtagaga gtgcaaatga caaagaagaa gatagagtgg aggcggttgt ttctgaacaa 1980 ccagactcaa taccacatca aaatgtagaa atctctcttg tagaaccaac gaatgtcgaa 2040 actgaaactg tggtcactcc tattaatgat gcagctactc ctcatggttc cccgacgtat 2100 atagataatt ccgtaactga atctgtagct actccacttg aaaaagactc cattcaagcc 2160 ggggagacag agattgcaga accaacctcg agcgaatcaa cgaatgtcga aactgaaact 2220 gtggtcactc ctgttaatga tgtagctact cctcatggtt ccccgacgta tatagataat 2280 tccgtaactg aatctgtagc tactccactt gaaaaagact ccattcaagc cggagagaca 2340 gaaattgcag aaccaacctc gagcgaatca acgaatgtcg aaactgaaac tgtggtcact 2400 cctgttaatg atgtagctac tcctcatggt tccccgacgt atatagataa ttccgtaact 2460 gaatctgtag ctactccact tgaaaaagac tccattcaag ccggggagac agagattgca 2520 gaaccaacct cgagcgaatc aactagtgtt gaagctgaac ttgtcgacaa ttctgaaatt 2580 catgcagcta cctcttcagt tactccctgt ggctcctcgg catatgcaga tggttccaca 2640 actgaatctg tagccactcc gcttgaaaaa gactccattc agactggaaa tacagaaatt 2700 gcagaaccaa cctcgagcaa atcaactaat gtagaagctg catctgtcga caattctgaa 2760 attcatgcag atgcctctct aactgctgtt tcatcagtta atctggataa tccagtgatt 2820 gaaccagtag ctatctccct tatcggttct aagagggaca cgaatgcaga agtagaagtt 2880 tcttcattat cgaaaagaga ggttagaaaa acaaatactg acgggctaat ctctgttcaa 2940 tcaaaagtta ttaagaaaga attgctagaa tcaagcttag cagaagcagg gtctccattg 3000 ctagaagcca ccattgctca gtcttcaaac tcaaatagta ctgagatagg tatgagctat 3060 cagaatactg tgttattaga gtctaataat acagagcgtc aggtgtctaa agcagaaatt 3120 gttatggaac acaaggagac agagttagtt gaaacggttt catctgcttc tgagcctgta 3180 gtgctcgtag aaaatatctc acaaacctca aataatacta ttgaatctgg taagaatatg 3240 ggagttcaat ctcaagcagg tgcaaaacaa attttaggcg tagaacaatc ttcgaaagta 3300 agtacaccta cttcaagaca gattatggga gtcggtctat tgactcttgt tcttggtagt 3360 gctttaggtt tgttaaagaa aagacgtaag taa 3393 <210> 5 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Partial sequence of Mac-1 domain <400> 5 Met Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Ala Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335 <210> 6 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> rIdeSsuis_homologue <400> 6 Met Ala His His His His His His Val Gly Thr Gly Ser Asn Asp Asp 1 5 10 15 Asp Asp Lys Ser Pro Asp Pro Val Val Thr Gly Val Asn Glu Ile Ile 20 25 30 Glu Glu Ser Gln Val Lys Asp Glu Val Ser Ile Glu Ser Glu Lys Asn 35 40 45 Glu Ser Leu Asp Gly Ser Asn Ile Glu Ile Val Glu Glu Ile Ala Asp 50 55 60 Asn Ile Pro Ser Pro Val Ile Ala Glu Gly Glu Val Ala Val Glu Met 65 70 75 80 Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr Glu 85 90 95 Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys Glu 100 105 110 Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg Gln 115 120 125 Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser Gly 130 135 140 Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala Pro 145 150 155 160 Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn Ala 165 170 175 Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn Met 180 185 190 Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr Leu 195 200 205 Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile Thr 210 215 220 Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser Arg 225 230 235 240 Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly Phe 245 250 255 Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro Lys 260 265 270 Ala Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp Ser 275 280 285 Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr Asn 290 295 300 Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg Thr 305 310 315 320 Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu Gly 325 330 335 Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn Gln 340 345 350 Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln Glu 355 360 365 Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly Asn 370 375 380 Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu Leu 385 390 395 400 Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu Glu Tyr 405 410 415 Phe Asn Pro Leu Ala Lys Ala Cys Arg Ser Thr Ser Leu Arg Pro His 420 425 430 Ser Ser Leu Val Lys Lys Pro Leu Leu Arg Asn Leu Asn Ala Ser Thr 435 440 445 Trp Thr Arg Leu Leu Ala Gln Leu Asn 450 455 <210> 7 <211> 1016 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> rIdeSsuisB2 <400> 7 Met Ala His His His His His His Val Gly Thr Gly Ser Asn Asp Asp 1 5 10 15 Asp Asp Lys Ser Pro Asp Pro Val Val Thr Gly Val Asn Glu Ile Ile 20 25 30 Glu Glu Ser Gln Val Lys Asp Glu Val Ser Ile Glu Ser Glu Lys Asn 35 40 45 Glu Ser Leu Asp Gly Ser Asn Ile Glu Ile Val Glu Glu Ile Ala Asp 50 55 60 Asn Ile Pro Ser Pro Val Ile Ala Glu Gly Glu Val Ala Val Glu Met 65 70 75 80 Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr Glu 85 90 95 Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys Glu 100 105 110 Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg Gln 115 120 125 Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser Gly 130 135 140 Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala Pro 145 150 155 160 Phe Lys Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn Ala 165 170 175 Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn Met 180 185 190 Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr Leu 195 200 205 Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Gly Glu Asn Tyr Ala Ile Thr 210 215 220 Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asp Ser Phe Gln Asp Gln Gln Asn Ser Arg 225 230 235 240 Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly Phe 245 250 255 Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro Lys 260 265 270 Val Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp Ser 275 280 285 Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr Asn 290 295 300 Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg Thr 305 310 315 320 Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu Gly 325 330 335 Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn Gln 340 345 350 Gly Lys Ile Arg Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln Glu 355 360 365 Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly Asn 370 375 380 Pro Arg Leu Asn Asn His Val Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu Leu 385 390 395 400 Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu Glu Tyr 405 410 415 Phe Asn Pro Phe Ala Lys Ala Lys Glu Ile Ala Ser Gln Ile Leu Ala 420 425 430 Asp Arg Lys Lys Ala Leu Val Leu Ser Ile Gln Gly Gln Ser Glu Leu 435 440 445 Pro Glu Ser Met Arg Leu Ile Tyr Leu Glu Lys Leu Asn Asn Leu Tyr 450 455 460 Asn Gln Gly Ile Leu Ser Ile Gln Lys Thr Glu Ser Ser Glu Met Leu 465 470 475 480 Ser Gly Ala Leu Glu Asn Gly Leu Asn Ser Leu Lys Ser Leu Asp Phe 485 490 495 Pro Ile Ser Glu Val Gly Asn Ala Leu Ala Pro Asp Leu Ser Val Gly 500 505 510 Asp Arg Ser Thr Val Ser Asp Val Asp Ser Leu Ser Ser Gln Glu Thr 515 520 525 Ser Ser Thr Asn Leu Glu Ala Asp Thr Glu Asn Ala Gly Ile Ile Ala 530 535 540 Asp Gly Thr Asn Gln Leu His Phe Pro Val Glu Ala Gln Thr Thr Ser 545 550 555 560 Ser Val Glu Ala Glu Gly Asp Asn Val Phe Glu Gln Glu Ala Asp Thr 565 570 575 Leu Pro Ile Ile Ile Glu Asn Lys Asp Glu Phe Gly Ser Glu Leu Ser 580 585 590 Gly Asn Met Gln Thr Ser Glu Thr Asp Ser Leu Val Val Ala Val Glu 595 600 605 Glu Asp Val Lys Asn Asp Glu Val Asp Gln Val Glu Lys Leu Leu Glu 610 615 620 Ser Glu Lys Val Glu Asn Gln Ser Ser Glu Leu Leu Ser Asp Thr Leu 625 630 635 640 Ile Val Glu Gly Ala Asn Asp Lys Glu Glu Asp Arg Val Glu Ala Val 645 650 655 Val Ser Glu Gln Pro Asp Ser Ile Pro His Gln Asn Val Glu Ile Ser 660 665 670 Pro Val Glu Pro Met Asn Val Glu Thr Glu Ser Val Val Thr Pro Ile 675 680 685 Asn Asp Ala Ala Thr Pro His Gly Phe Pro Met Tyr Ile Asp Asn Ser 690 695 700 Val Thr Glu Ser Val Ala Thr Pro Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala 705 710 715 720 Gly Glu Thr Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Glu Ser Thr Ser Val 725 730 735 Glu Ala Glu Leu Val Asp Asn Ser Glu Ile His Ser Ala Thr Ser Ser 740 745 750 Val Thr Pro Arg Gly Ser Ser Ala Tyr Ala Asp Ser Ser Thr Thr Glu 755 760 765 Ser Val Ala Thr Leu Leu Glu Lys Asp Ser Ile Gln Ala Gly Glu Thr 770 775 780 Glu Ile Ala Glu Pro Thr Ser Ser Lys Ser Thr Asn Val Glu Ala Ala 785 790 795 800 Ser Val Asp Asn Ser Glu Ile His Ala Asp Thr Ser Leu Thr Ala Val 805 810 815 Ser Ser Val Asn Leu Asp Asn Pro Val Ile Glu Pro Val Ala Ile Pro 820 825 830 Leu Ile Gly Ser Lys Arg Asp Thr Asn Ala Glu Val Glu Val Ser Ser 835 840 845 Leu Ser Lys Arg Glu Val Arg Lys Pro Asn Thr Glu Gly Leu Ile Ser 850 855 860 Val Gln Ser Lys Val Ile Lys Lys Glu Leu Leu Glu Ser Ser Leu Val 865 870 875 880 Glu Ala Gly Ser Pro Leu Leu Glu Ala Thr Ile Ala Gln Ser Ser Asn 885 890 895 Ser Asn Ser Thr Glu Ile Gly Met Ser Tyr Gln Asn Thr Val Leu Leu 900 905 910 Glu Ser Asn Asn Thr Glu Arg Gln Val Ser Lys Ala Glu Ile Val Ile 915 920 925 Glu His Lys Glu Thr Glu Leu Val Glu Thr Val Ser Ser Ala Ser Glu 930 935 940 Pro Val Val Leu Val Glu Asn Ile Ser Gln Thr Ser Asn Asn Thr Ile 945 950 955 960 Glu Ser Gly Lys Asn Met Gly Val Gln Ser Gln Ala Gly Ala Lys Gln 965 970 975 Ile Leu Gly Ile Glu Gln Ser Ser Lys Val Ser Thr Pro Thr Ser Arg 980 985 990 Gln Ile Met Gly Val Gly Leu Leu Thr Leu Val Leu Gly Ser Ala Leu 995 1000 1005 Gly Leu Leu Lys Lys Arg Arg Lys 1010 1015 <210> 8 <211> 1374 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence encoding rIdeSsuis_homologue <400> 8 atggcacatc accaccacca tcacgtgggt accggttcga atgatgacga cgacaagagt 60 ccggatccag ttgttacagg agtgaatgaa ataattgaag aatcacaagt caaggatgag 120 gtatctattg aatcagaaaa aaatgaatcc ctagatggtt ctaatattga aattgtagag 180 gaaatagcag acaacatccc atcacctgtt atcgctgaag gggaagtagc ggtagagatg 240 aaagttgaca gagggaccga gaatgtagtt tctagaaatg atacagaagt tacgacgagc 300 gagcaaaatc agatagaggt tactgagaca aaagaaattt tgaatcagac cagttatcaa 360 acggagagtg gcgagcaacg acaaattata tgggcccatg gaattactcc tcctgcaatg 420 gaacaaagcg gtggttttgt aaaggaaaag tatggagact atttaaacta tacagcgcca 480 tttgaggctg gaaaaggcta ctatgatacc aataagagtc tgaatgcttc atttattgac 540 cttaatcttt gttttgcagc tgtgtcttca aacatggtac attggtggtt ggaacagaat 600 agttcctatg ttgagcgata tctcaaagaa aaaaagggta cagtaaatgt tgaagaaaac 660 tacgcaataa cggacttacg gcgctatatt aattcattcc aaaatcaaca aaatagtcga 720 gtttttgata tgttcaaaac ttactatggt tatcgtacaa atggttttgt atcagatgcc 780 ttggttgact tgtttattaa cggatataaa cctaaggcac agggcggtgt caatctggaa 840 gatagccagt tagtaccaga tagtaggggt ggctttttct acgacgtttt caaagagaaa 900 aaactgacaa atcgaatttt tagtggtagt tatgagcggt ttggtgagga tgttcgaact 960 gttttggaaa gcaaaggatt actcggctta acttatagaa cattaggtta tgcaacgcat 1020 attgtgacgg tatggggtgc tgagtacgac aatcaaggta agattaaggc tgtctatatc 1080 acagattctg atgatcaaca agaacaaatt ggtttgaagc gtatgggaat cactcgtgat 1140 gcttccggaa atccacgttt gaataatcat atgaaaaata attcagctgg agcgcttttg 1200 gattatgtcc atacaatccg tctgggtcaa gacttatggg aagaatattt caatccgctt 1260 gcaaaagcct gcaggtcgac aagcttgcgg ccgcactcga gtctggtaaa gaaaccgctg 1320 ctgcgaaatt tgaacgccag cacatggact cgtctactag cgcagcttaa ttaa 1374 <210> 9 <211> 3051 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence encoding rIdeSsuisB2 <400> 9 atggcacatc accaccacca tcacgtgggt accggttcga atgatgacga cgacaagagt 60 ccggatccag ttgttacagg agtgaatgaa ataattgaag aatcacaagt caaggatgag 120 gtatctattg aatcagaaaa aaatgaatcc ctagatggtt ctaatattga aattgtagag 180 gaaatagcag acaacatccc atcacctgtt atcgctgaag gggaagtagc ggtagagatg 240 aaagttgaca gagggaccga gaatgtagtt tctagaaatg atacagaagt tacgacgagc 300 gagcaaaatc agatagaggt tactgagaca aaagaaattt tgaatcagac cagttatcaa 360 acggagagtg gcgagcaacg acaaattata tgggcccatg gaattactcc tcctgcaatg 420 gaacaaagcg gtggttttgt aaaggaaaag tatggagact atttaaacta tacagcgcca 480 tttaaggcag gaaaaggcta ttatgatacc aataaaagtc tcaatgcttc atttattgac 540 cttaacctat gttttgcagc cgtgtcttcc aacatggtac attggtggtt ggaacagaat 600 agttcctatg ttgagcgata tctcaaagaa aaaaagggta cagtaaatgt tggggaaaac 660 tatgcaataa cggacctacg tcgctatatt gattcgttcc aggatcagca aaatagtcga 720 gtctttgata tgttcaaaac ttactacggt tatcgtacaa atggttttgt gtcagatgcc 780 ctagttgact tgtttattaa tggatataaa cctaaggtac agggtggtgt caatctggaa 840 gatagccagt tagtaccaga tagtaggggt ggctttttct acgacgtttt caaagagaaa 900 aaactgacaa atcgtatttt tagtggtagc tatgagcgtt ttggtgagga tgttcgaact 960 gttttggaga gcaaaggatt actcggtcta acttatagaa cattaggcta tgcaacgcat 1020 attgtgacgg tatggggtgc tgagtacgat aatcaaggta agattagggc tgtctatatc 1080 actgattccg atgatcaaca agaacaaatt ggtttgaagc gtatgggaat cactcgtgat 1140 gcttctggaa atccgcgttt gaataatcat gtgaaaaata attcagctgg ggcgcttttg 1200 gattatgtcc atacaatccg tcttggtcaa gacttatggg aagaatattt caatccgttc 1260 gcaaaagcca aagaaatagc tagtcagata ctagctgata gaaagaaggc gttggttctg 1320 tctattcaag gacaatctga attgccagaa tcaatgcggc tgatttatct tgaaaaacta 1380 aataatctct ataatcaagg gattctatct attcaaaaga cagaaagttc tgagatgcta 1440 agtggtgcat tggaaaatgg tttaaatagt ttaaagagtt tagattttcc tatttcagaa 1500 gttggaaatg ctttggcacc agatttatca gtaggtgatc gctcaacggt ttcagatgtt 1560 gattctctat catctcaaga aacaagttcc acaaatttgg aagcagacac agagaatgca 1620 ggtattattg cagatggtac caatcaattg cattttccag tggaggccca aacgacatct 1680 tcagtagagg ctgagggaga taatgttttt gaacaagagg cagatacatt accaataatt 1740 attgaaaaca aggatgaatt tggttcagaa ctatcaggaa acatgcaaac gtcagaaacg 1800 gattcgctag tagtagctgt tgaagaagat gtgaaaaatg atgaggtaga ccaagttgaa 1860 aagcttcttg aatcagaaaa agttgaaaat cagagttcgg aacttctgtc agacacccta 1920 atcgtagagg gtgcaaatga caaagaagaa gatagagtgg aggcggttgt ttctgaacaa 1980 ccagactcaa taccacatca aaatgtagaa atctctcctg tagaaccaat gaatgtcgaa 2040 actgaatctg tggtcactcc tattaatgat gcagctactc ctcatggttt cccgatgtat 2100 atagataatt ccgtaactga atctgtagct actccacttg aaaaagactc cattcaagcc 2160 ggagagacag aaattgcaga accaacctcg agcgaatcaa ctagtgttga agctgaactt 2220 gtcgacaatt ctgaaatcca ttcagctacc tcttcagtta ctccccgtgg ttcctcggca 2280 tatgcagata gttccacaac tgaatctgta gctactctgc ttgaaaaaga ctccattcag 2340 gctggagaga cagaaattgc agaaccaacc tcgagcaaat caactaatgt cgaagctgca 2400 tctgtcgaca attctgaaat tcatgcagat acctctctaa ctgctgtttc atcagtcaat 2460 ctggataatc cagtgattga accagtagct atccccctta tcggttctaa gagggacacg 2520 aatgcagaag tggaagtttc ttcattatcg aaaagagagg ttagaaaacc aaatactgaa 2580 gggctaatct ctgttcaatc aaaagttatt aagaaagaat tgctagaatc aagcttagta 2640 gaagcagggt ctccattgct agaagccacc attgctcagt cttcaaactc aaatagtact 2700 gagataggta tgagctatca gaatactgtg ttattagagt ctaataatac agagcgtcag 2760 gtgtctaaag cagaaattgt tatagaacac aaggagacag agttagttga aacggtttca 2820 tctgcttctg agcctgtagt gctcgtagaa aatatctcac aaacctcaaa taatactatt 2880 gaatctggta agaatatggg agttcaatct caagcaggtg caaaacaaat tttaggcata 2940 gaacaatctt cgaaagtaag tacacctact tcaagacaga ttatgggagt cggtctattg 3000 actcttgttc ttggtagtgc tttaggtttg ttaaagaaaa gacgtaagta a 3051 <210> 10 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acids 91 to 425 of WP_044671938 <400> 10 Met Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Lys Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Gly Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asp Ser Phe Gln Asp Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Val Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335 <210> 11 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acids 91 to 425 of WP_002935529 <400> 11 Met Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Thr 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Ser Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Lys Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Gly Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asp Ser Phe Gln Asp Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Val Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Arg Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Val Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335 <210> 12 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acids 92 to 426 of WP_015647040 <400> 12 Met Lys Val Asp Arg Gly Thr Glu Asn Val Val Ser Arg Asn Asp Lys 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Ser Glu Lys Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Asn Ser Thr Val Asn Val Gly Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Ala Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Val Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335 <210> 13 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acids 92 to 426 of WP_023370787 <400> 13 Met Lys Ser Asp Asn Gly Asp Glu Asn Ala Val Ser Arg Asp Asp Ser 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Asn Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Gln Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Ile Trp Ala His Gly Ile Thr Pro Pro Ala Met Glu Gln Ser 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Ile Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Ser Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser His Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335 <210> 14 <211> 335 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acids 92 to 426 of WP_044678723 <400> 14 Met Asn Ser Asp Asn Gly Asp Glu Asn Val Val Ser Arg Asp Asp Ser 1 5 10 15 Glu Val Thr Thr Asn Glu Gln Asn Gln Ile Glu Val Thr Glu Thr Lys 20 25 30 Glu Ile Leu Asn Tyr Thr Ser Tyr Gln Thr Glu Ser Gly Glu Gln Arg 35 40 45 Gln Ile Val Trp Ala Tyr Gly Ile Thr Pro Pro Val Met Glu Gln Lys 50 55 60 Gly Gly Phe Val Lys Glu Lys Tyr Gly Asp Tyr Leu Asn Tyr Thr Ala 65 70 75 80 Pro Phe Glu Ala Gly Lys Gly Tyr Tyr Asp Thr Asn Lys Ser Leu Asn 85 90 95 Ala Ser Phe Ile Asp Leu Asn Leu Cys Phe Ala Ala Val Ser Ser Asn 100 105 110 Met Val His Trp Trp Leu Glu Gln Asn Ser Ser Tyr Val Glu Arg Tyr 115 120 125 Leu Lys Glu Lys Lys Gly Thr Val Asn Val Glu Glu Asn Tyr Ala Ile 130 135 140 Thr Asp Leu Arg Arg Tyr Ile Asn Ser Phe Gln Asn Gln Gln Asn Ser 145 150 155 160 Arg Val Phe Asp Met Phe Lys Thr Tyr Tyr Gly Tyr Arg Thr Asn Gly 165 170 175 Phe Val Ser Asp Ala Leu Val Asp Leu Phe Ile Asn Gly Tyr Lys Pro 180 185 190 Lys Ala Gln Gly Gly Val Asn Leu Glu Asp Ser Gln Leu Val Pro Asp 195 200 205 Ser Arg Gly Gly Phe Phe Tyr Asp Val Phe Lys Glu Lys Lys Leu Thr 210 215 220 Asn Arg Ile Phe Ser Gly Ser Tyr Glu Arg Phe Gly Glu Asp Val Arg 225 230 235 240 Thr Val Leu Glu Ser Lys Gly Leu Leu Gly Leu Thr Tyr Arg Thr Leu 245 250 255 Gly Tyr Ala Thr His Ile Val Thr Val Trp Gly Ala Glu Tyr Asp Asn 260 265 270 Gln Gly Lys Ile Lys Ala Val Tyr Ile Thr Asp Ser Asp Asp Gln Gln 275 280 285 Glu Gln Ile Gly Leu Lys Arg Met Gly Ile Thr Arg Asp Ala Ser Gly 290 295 300 Asn Pro Arg Leu Asn Asn His Met Lys Asn Asn Ser Ala Gly Ala Leu 305 310 315 320 Leu Asp Tyr Val His Thr Ile Arg Leu Gly Gln Asp Leu Trp Glu 325 330 335

Claims

유효량의 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열 중 제1 내지 제34 위치의 아미노산이 결실된 아미노산 서열의 단백질; 및
하나 이상의 약학적 담체, 희석제 또는 보조제를 포함하는 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염에 대한 백신 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 단백질이 유일한 활성 또는 면역원성 성분인 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
삭제
제1항 또는 제4항에 있어서, 단백질의 총량이 약 0.05 내지 2 mg인 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
삭제
삭제
삭제
제1항 또는 제4항에 있어서, 백신 조성물이 생리학적으로 투여가능한 제형 형태로 제공되고, 근육내, 정맥내, 피하 또는 경피 주사 또는 점막 투여에 적합한 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
제6항에 있어서, 백신 조성물이 생리학적으로 투여가능한 제형 형태로 제공되고, 근육내, 정맥내, 피하 또는 경피 주사 또는 점막 투여에 적합한 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
삭제
삭제
돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료(therapeutic treatment)에 사용하기 위한 제1항 또는 제4항에 따른 백신 조성물.
제14항에 있어서, 돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방, 대량 예방 또는 치료는 적어도 1회 이상의 면역접종을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료(therapeutic treatment)에 사용하기 위한 제6항에 따른 백신 조성물.
제16항에 있어서, 돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방, 대량 예방 또는 치료는 적어도 1회 이상의 면역접종을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방(prophylactic), 대량 예방(metaphylactic) 또는 치료(therapeutic treatment)에 사용하기 위한 제10항에 따른 백신 조성물.
제18항에 있어서, 돼지에서 스트렙토코커스 수이스(S. suis) 감염의 예방, 대량 예방 또는 치료는 적어도 1회 이상의 면역접종을 포함하는 것을 특징으로 하는 백신 조성물.
삭제
삭제
삭제
삭제