KR102392112B1 - 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이 방법으로 제조된 주스 - Google Patents

사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이 방법으로 제조된 주스 Download PDF

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Abstract

본 발명은 (a) 당근을 세척한 후, 블랜칭한 후, 착즙하는 단계; (b) 사과즙과 상기 (a) 단계의 당근즙을 4:6 내지 6:4의 부피비로 혼합하는 단계; (c) 상기 (b) 단계의 혼합물 65 내지 95 중량%와 레드비트 착즙액 5 내지 35 중량%를 혼합하는 단계; (d) 유산균을 상기 (c) 단계의 혼합물 100 중량부에 대하여 0.001 중량부 내지 0.01 중량부가 되도록 첨가하는 단계; (e) 상기 (d) 단계의 발효는 혼합물을 25 내지 35℃에서 8 내지 14 시간 동안 수행하는 단계; (f) 상기 (e) 단계의 발효물을 60 내지 70℃에서 30분 이상 살균하여 유산균을 실활시키는 단계; (g) 상기 (f) 단계의 유산균 실활 발효물을 여과시켜 여과액을 얻는 단계; 및 (h) 상기 (g) 단계의 여과액을 살균하는 단계;를 포함하는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이에 의해 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제공한다.

Description

사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이 방법으로 제조된 주스{Method for producing lactic acid bacteria fermented juice containing apples, beets, and carrots, and Juice prepared by the method}
본 발명은 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이 방법으로 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스에 관한 것이다.
당근은 비타민 A와 비타민 C가 많고, 맛이 달아 나물·김치·샐러드 및 서양 요리에 많이 이용되고 있다. 뿌리 작물인 당근은 특유의 흙취 및 풋내로 인하여 주스 형태로 가공하기 어려운 점이 있었다.
사과는 알칼리성 식품으로, 칼로리가 적고, 몸에 좋은 성분인 비타민 A와 비타민 C, 칼륨, 칼슘, 나트륨 등의 무기물과 식이섬유를 다량으로 함유하고 있다. 사과의 비타민 C는 피로물질을 제거해주며, 피부미용에 좋고, 칼륨은 몸속의 염분을 배출시켜 고혈압 예방과 치료에 도움을 준다. 사과의 식이섬유는 혈관에 쌓이는 유해 콜레스테롤을 몸밖으로 내보내고 유익한 콜레스테롤을 증가시켜 동맥경화를 예방해주고, 수용성 식이섬유인 펙틴 또한 위액의 점도를 높히고 악성 콜레스테롤을 내보내어 급격한 혈압상승을 억제해준다. 사과에 함유된 케세틴은 폐기능을 강하게 하여 담배연기나 오염물질로부터 폐를 보호해주고, 페놀산은 체내의 불안정한 유해산소를 무력화시켜 뇌졸중을 예방한다. 또한 사과의 과육은 잇몸건강에 좋으며, 사과산은 어깨결림을 감소해주는 효과가 있다.
상술한 바와 같이 사과에는 몸에 좋은 성분이 많이 함유되어 있다. 그러나 음료 형태로 가공할 경우 기존의 사과즙은 사과와 물을 혼합하여 중탕으로 가열시킨 후 사과즙을 제조하는 경우가 많아 몸에 좋은 성분이 파괴되어 순수한 사과즙 원액 제공에는 한계가 있었다.
빨간 무라고도 불리는 비트(Beet)는 풍부한 영양소를 가지고 있으며, 비트에 포함된 붉은 색소 베타인(Betaine)은 근력과 지구력을 향상시켜주며, 세포 손상을 억제하고 항산화 작용을 가져 암 예방, 염증 완화 등의 효과를 가지고 있다. 또한, 철분과 비타민이 다량 함유되어 있어 적혈구의 생성을 돕고, 혈액을 깨끗하게 해주어 월경불순이나 갱년기 여성에게도 좋으며, 위 손상을 막아주고 위 점막을 보호해주고 식이섬유가 많아 변비 해소에도 좋은 효능을 가지고 있다. 비트는 영양소를 살리기 위해 생것 그대로 샐러드나 생채로 먹으면 좋은데, 비트 특유의 비린맛과 쓴맛 때문에 섭취하는데 어려움이 있다.
상기에서 설명된 바와 같이, 당근, 사과 및 비트는 인체에 유익한 성분을 다량으로 포함하고 있어서, 이들을 함께 주스로 제조하여 음용할 수 있다면 매우 바람직할 것이다. 그러나, 상기 성분들은 각각 주스로 섭취하기 쉽지 않은 점을 갖는다. 그러므로, 이들 성분들을 영양소의 파괴를 최소화한 상태로 맛있게 음용할 수 있는 방법의 개발이 요구되고 있다.
그러나, 종래에 알려진 기술들은 당근의 흙취 및 풋내, 중탕에 의한 사과의 영양소 파괴, 및 비트 특유의 비린맛과 쓴맛에 대한 문제를 해결할 수 있는 방법을 제시하고 있지 못한 실정이다.
대한민국 특허공개 제10-2009-0037051호
본 발명은 종래 기술의 상기와 같은 문제를 해소하기 위하여 안출된 것으로서,
당근의 흙취 및 풋내, 중탕에 의한 사과의 영양소 파괴, 및 비트 특유의 비린맛과 쓴맛에 대한 문제를 해결하여, 남녀노소 누구나 맛있게 섭취할 수 있는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이에 의해 제조된 주스를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은
(a) 당근을 세척한 후, 블랜칭한 후, 착즙하는 단계;
(b) 사과즙과 상기 (a) 단계의 당근즙을 4:6 내지 6:4의 부피비로 혼합하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 혼합물 65 내지 95 중량%와 레드비트 착즙액 5 내지 35 중량%를 혼합하는 단계;
(d) 유산균을 상기 (c) 단계의 혼합물 100 중량부에 대하여 0.001 중량부 내지 0.01 중량부가 되도록 첨가하는 단계;
(e) 상기 (d) 단계의 발효는 혼합물을 25 내지 35℃에서 8 내지 14 시간 동안 수행하는 단계;
(f) 상기 (e) 단계의 발효물을 60 내지 70℃에서 30분 이상 살균하여 유산균을 실활시키는 단계;
(g) 상기 (f) 단계의 유산균 실활 발효물을 여과시켜 여과액을 얻는 단계; 및
(h) 상기 (g) 단계의 여과액을 살균하는 단계;를 포함하는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은,
상기 제조방법에 의해 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제공한다.
본 발명의 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법 및 이에 의해 제조된 주스는 당근의 흙취 및 풋내, 중탕에 의한 사과의 영양소 파괴, 및 비트 특유의 비린맛과 쓴맛에 대한 문제를 해소하여 남녀노소 누구나 맛있게 섭취할 수 있는 주스를 제공한다.
특히, 유산균 발효에 의해 상기 각 성분들의 단점들을 해소하고, 최적의 pH 및 향상된 기호도를 제공하며, 베타카로틴, 총안토시아노사이드, 유기산 및 식이섬유의 함량을 향상시켜서 영양성분을 증가시킨 주스를 제공한다.
도 1은 본 발명의 시험예 3에서 실시된 발효시간에 따르는 주스의 pH 변화를 나타낸 그래프이며,
도 2는 본 발명의 시험예 4에서 실시된 발효시간에 따르는 주스의 기호도 변화를 나타낸 그래프이다.
이하에서 본 발명을 자세하게 설명한다.
본 발명의 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법은
(a) 당근을 세척한 후, 블랜칭한 후, 착즙하는 단계;
(b) 사과즙과 상기 (a) 단계의 당근즙을 4:6 내지 6:4의 부피비로 혼합하는 단계;
(c) 상기 (b) 단계의 혼합물 65 내지 95 중량%와 레드비트 착즙액 5 내지 35 중량%를 혼합하는 단계;
(d) 유산균을 상기 (c) 단계의 혼합물 100 중량부에 대하여 0.001 중량부 내지 0.01 중량부가 되도록 첨가하는 단계;
(e) 상기 (d) 단계의 발효는 혼합물을 25 내지 35℃에서 8 내지 14 시간 동안 수행하는 단계;
(f) 상기 (e) 단계의 발효물을 60 내지 70℃에서 30분 이상 살균하여 유산균을 실활시키는 단계;
(g) 상기 (f) 단계의 유산균 실활 발효물을 여과시켜 여과액을 얻는 단계; 및
(h) 상기 (g) 단계의 여과액을 살균하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 (a) 단계의 블랜칭은 70 내지 100℃ 바람직하게는 80 내지 90℃에서 실시되며, 블랜칭 시간은 5분 내지 15분일 수 있다.
상기 (b) 단계는 혼합물을 80 내지 110℃에서 2분 내지 10분간 살균하는 단계를 더 포함할 수 있다.
상기 (c) 단계에서는 상기 (b) 단계의 혼합물 70 내지 90 중량%와 레드비트 착즙액 10 내지 30 중량%를 혼합하는 것이 더욱 바람직할 수 있다. 상기 레드 비트 착즙액의 첨가는 상기 (b) 단계의 혼합물의 온도를 낮추는 역할도 수행한다.
상기 (c) 단계 후에 예냉기를 사용하여 혼합물을 냉각시킬 수 있으며, 상기 냉각후에 혼합물을 발효 탱크로 이송시킬 수 있다.
상기 (d) 단계의 유산균은 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophiles), 및 비피도박테리움 애니멀리스 락티스 BB-12(Bifidobacterium animalis spp. Lactis BB-12) 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있다. 특히, 상기 3종의 유산균을 1 : 0.8~1.2 : 0.8~1.2로 혼합하여 사용하는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명에서 상기 유산균 발효는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 향과 풍미를 증진시킨다.
상기 (d) 단계의 유산균은 상기 (c) 단계의 배합액의 일부용액을 취출하여 완전히 용해시킨 후, 투입하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 유산균 발효 단계는 유산균 발효 주스에 포함되는 베타카로틴 및 총안토시아노사이드의 함량을 증가시키는 역할을 한다. 이러한 성분의 증가는 아래의 시험예 1에서 확인된다. 또한, 상기 유산균 발효 단계는 유기산 및 식이섬유의 함량을 증가시키는 역할을 한다. 이러한 성분의 증가는 아래의 시험예 2에서 확인된다.
상기 (f) 단계의 유산균 실활은 살아있는 유산균뿐만 아니라 유산균의 사균체의 경우에도 살아있는 유산균처럼 생리적 기능성, 특히 면역 조절기능을 보유하고 있는 것에 기초하여 수행된다. 그러므로 유산균에 의한 효능을 본 발명의 발효 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스에서도 기대할 수 있다.
상기 (e) 단계의 발효는 혼합물을 30 내지 35℃에서 수행하는 것이 바람직할 수 있다. 또한, 발효시간은 10 내지 12 시간 동안 수행하는 것이 더욱 바람직할 수 있다. 상기와 같은 조건에서 가장 우수한 기호도가 제공된다.
상기 (e) 단계에서 발효는 발효물의 pH가 4 내지 5가 되도록 수행하는 것이 바람직하다.
상기 (h) 단계의 살균은 110 내지 130℃에서 수행할 수 있으며, 바람직하게는 120 내지 127℃에서 수행하는 것이 바람직할 수 있다.
또한, 상기 방법으로 제조된 주스는 스파우트 충진기를 이용하여 70 내지100℃를 유지하면서 Hot filling에 의해 용기에 충진시킬 수 있다. 또한, 상기 충진 이후, 100 내지 110℃에서 10분 이상 살균을 수행할 수도 있다.
본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 (c) 단계에서는 아티초크 에탄올 추출물 3 내지 7 중량%를 더 혼합할 수 있다. 본 발명자들은 상기 아티초크 에탄올 추출물이 항균 활성을 갖는 것을 발견하여 본 발명에 적용하였다.
상기 아티초크는'엉겅퀴'라는 뜻의 그리스어 skolymos에서 유래된 국화과 식물로 꽃차례와 꽃머리를 포함하는 전체식물이며 주로 북아메리카, 남미, 미국 캘리포니아, 중국에서 재배된다. 아티초크는 다른 채소 품종과 비교하였을 때 칼로리가 낮으면서 식이섬유 함량이 높아 다이어트에 도움이 될 수 있으며, 특히 수용성 식이섬유소인 이눌린이 풍부하여 배변활동을 원활히 하고, 혈액 내 콜레스테롤 수치를 낮추는 효능이 있다. 특히 페놀성 물질인 시나린(cynarin)은 콜레스테롤을 저하시키고, 신장과 간 기능 대사에 효과가 있다. 또한 비타민과 미네랄의 공급원으로 알려져 있다.
상기 아티초크 에탄올 추출물이 포함되는 경우, 유산균 발효 주스의 항균성이 향상되어 보관안정성 및 안전성이 향상될 수 있다.
본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 (c) 단계에서 람브탄 껍질 에탄올 추출물 3 내지 7 중량%를 더 혼합할 수 있다.
상기 람부탄(Rambutan)은 인도네시아어로 "람붓(Rambut)"은 '털'을 뜻한다. 빨간색과 노란색이 있는데 노란색이 더 달고 맛있다. 껍질을 손으로 쏙 까면 투명한 속살이 나오는데 단맛이다.　
본 발명자들은 상기 람브탄 껍질 에탄올 추출물이 항균 활성을 갖는 것을 발견하여 본 발명에 적용하였다. 상기 람브탄 껍질 에탄올 추출물이 포함되는 경우, 유산균 발효 주스의 항균성이 향상되어 보관안정성 및 안전성이 향상될 수 있다.
특히, 상기에서 아티초크 에탄올 추출물과 람브탄 껍질 에탄올 추출물이 4:6 내지 6:4의 중량비로 혼합되어 첨가되는 경우, 항균 활성에 시너지 효과가 얻어지는 것이 확인되었다.
또한, 본 발명은
상기의 제조방법으로 제조된 맛과 영양이 풍부한 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제공한다.
이하에서, 제조예 및 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나, 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 하기의 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다. 하기의 실시예는 본 발명의 범위 내에서 당업자에 의해 적절히 수정, 변경될 수 있다.
실시예 1: 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조
(a) 당근을 세척한 후, 85℃에서 블랜칭한 후, 통채로 갈아서 착즙하였다(cold press).
(b) 사과즙과 상기 (a) 단계의 당근즙을 5:5의 부피비로 혼합한 후, 90℃에서 5분간 살균하고 냉각시켰다.
(c) 상기 (b) 단계의 혼합물 80 중량%와 레드비트 착즙액 20 중량%를 혼합하고, 예냉기를 사용하여 냉각시킨 후, 발효 탱크로 이송시켰다.
(d) 상기 (c)단계의 혼합물 100 중량부에 대하여 0.004 중량부의 유산균을 상기 혼합물 일부용액을 취출하여 완전히 용해시킨 후, 발효 탱크에 첨가하였다.
상기 유산균은 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophiles), 및 비피도박테리움 애니멀리스 락티스 BB-12(Bifidobacterium animalis spp. Lactis BB-12)를 1:1:1의 중량비로 혼합한 것을 사용하였다.
(e) 상기 (d) 단계의 발효는 혼합물을 30±3℃에서 12 시간 동안 발효 탱크 내에서 수행하였다. 이후, pH 및 관능이 적절한 것을 확인 한 후, 발효를 완료하였다.
(f) 상기 (e) 단계의 발효물을 65℃에서 30분 이상 살균하여 유산균을 실활시켰다.
(g) 상기 (f) 단계의 유산균 실활 발효물을 40 메시 채로 여과시켜 여과액을 얻었다.
(h) 상기 (g) 단계의 여과액을 124±3℃초 이상 살균시켜서 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제조하였다.
다음으로, 상기에서 제조된 주스를 스파우트 충진기를 이용하여 90℃를 유지하면서 Hot filling에 용기에 충진시켰다. 이후, 105℃에서 10분 이상 살균하였다.
실시예 2 내지 6 및 비교예 1: 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조
상기 실시예 1에서 발효시간을 0(비교예 1), 6(실시예 2), 8(실시예 3), 10(실시예 4), 12(실시예 1), 14(실시예 5), 및 24(실시예 6) 시간으로 변경하면서 발효시킨 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제조하였다.
실시예 7: 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조
실시예 1의 상기 (c) 단계에서 레드비트 착즙액의 함량을 15 중량%로 줄이고, 아티초크 에탄올 추출물 5 중량%를 더 혼합한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제조하였다.
<아티초크 에탄올 추출물의 제조>
아티초크 분말 1 kg에 70 부피% 농도의 에탄올 10 리터를 혼합한 후, 교반기를 이용하여 60~80℃에서 교반속도 300rpm으로 3시간 동안 교반하여 추출용액을 제조하였다.
다음으로 상기 추출용액을 부직포 여과지를 이용하여 1차 여과한 뒤, 1차 여과액을 규조토필터를 사용하여 침전물이 생기지 않도록 2차 여과하였다.
회수한 2차 여과액을 농축기를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 아티초크 에탄올 추출물을 수득하였다.
실시예 8: 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조
실시예 7에서 상기 레드비트 착즙액의 함량을 10 중량%로 더 줄이고, 람브탄 껍질 에탄올 추출물 5 중량%를 더 혼합한 것을 제외하고는 실시예 7과 동일한 방법으로 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스를 제조하였다.
<람브탄 껍질 에탄올 추출물의 제조>
람부탄(Rambutan) 껍질을 세절하여 1 kg에 70 부피% 농도의 에탄올 10 리터를 혼합한 후, 교반기를 이용하여 60~80℃에서 교반속도 300rpm으로 3시간 동안 교반하여 추출용액을 제조하였다.
다음으로 상기 추출용액을 부직포 여과지를 이용하여 1차 여과한 뒤, 1차 여과액을 규조토필터를 사용하여 침전물이 생기지 않도록 2차 여과하였다.
회수한 2차 여과액을 농축기를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 람브탄 껍질 에탄올 추출물을 수득하였다.
시험예 1: 발효 전,후 베타카로틴 및 총안토시아노사이드 분석
비교예 1 및 실시예 1에서 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 베타카로틴 및 총안토시아노사이드를 분석하여 하기 표 1에 나타내었다.
분석항목 비교예 1 실시예 1
베타카로틴(mg/100g) 1.16 1.19
총안토시아노사이드(mg/g) 0.02 0.04
시험예 2. 발효 전,후 유기산 및 식이섬유 분석
비교예 1 및 실시예 1에서 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 유기산 및 식이섬유를 분석하여 하기 표 2에 나타내었다.
분석항목 비교예 1 실시예 1
젖산(mg/g) 불검출 3.63
옥살산(mg/g) 6.47 6.7
주석산(mg/g) 불검출 0.11
호박산(mg/g) 2.7 2.79
개미산(mg/g) 불검출 0.34
식이섬유(%) 0.14 0.15
시험예 3. 발효시간에 따르는 pH 변화 분석
비교예 1 및 실시예 1 내지 6에서 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 발효시간에 따르는 pH를 측정하고, 그 결과를 하기 표 3 및 도 1에 나타내었다.
실시예 1 실시예2 실시예3 실시예 4 실시예 5 실시예 6 비교예 1
발효시간(h) 12 6 8 10 14 24 0
pH 4.42 4.63 4.65 4.58 4.23 4.11 4.65
시험예 4. 발효시간에 따르는 기호도 변화 분석
비교예 1 및 실시예 1 내지 6에서 제조된 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 발효시간에 따르는 기호도를 다음과 같은 방법으로 평가하였다.
성인 남녀 총 10명을 피험자로 선정하여 블라인딩 테스트를 실시하였다. 상기 피험자들은 비교예 1 및 실시예 1 내지 6의 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 맛을 보고, 기호도에 따라 0점에서 5점 점수를 부여하게 하고, 이들 결과의 평균을 내에 그 결과를 하기 표 4 및 도 2에 나타내었다.
실시예 1 실시예2 실시예3 실시예 4 실시예 5 실시예 6 비교예 1
발효시간(h) 12 6 8 10 14 24 0
기호도 점수
(평균)		 4.5 3.5 4 4.3 4.1 3.1 3.0
상기 시험결과로부터, 발효시간에 따라 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 맛에 대한 기호도는 변화하며, 발효시키지 않은 비교예 1의 주스와 비교하여 발효를 진행한 실시예들의 기호도가 크게 향상된 것을 확인할 수 있다.
특히, 도 2에서 확인되는 바와 같이, 발효시간이 8 내지 14 시간인 경우, 예측하기 어려운 정도의 기호도 상승을 나타냈다. 가장 우수한 기호도는 12시간(실시예 1) 발효 주스인 것으로 확인되었다.
구체적으로, 본 발명의 실시예의 주스는 적절한 유산균 발효시간에 따라 풍미와 산미가 적절히 조화되고, 뿌리 채소 특유의 흑 취가 감소되어 기호도가 향상된 것으로 확인되었다.
시험예 5. 아티초크 에탄올 추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물의 안전성 확인
실험동물은 4주령 Sprague-Dawley종 수컷 흰쥐(Central Lab animal, Seoul, Korea)를 환경이 조절된 사육실(기온 20℃ 습도 55%, 12시간 dark/light cycle)에서 펠렛형 고형사료(Jeil animal feed Co., Daejeon, Korea)로 2주간 사육하여 평균 체중이 200g 정도로 성장한 6주령의 쥐를 사용하여 상기 아티초크 에탄올 추출물(실시예 7 제조) 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 8 제조)의 독성테스트를 실시하였다.
구체적으로, 상기 4주령의 쥐 각각 5 마리씩에게 상기 아티초크 에탄올 추출물(실시예 7 제조) 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 8 제조)을 1일 30ml씩을 펠렛형 고형사료(Jeil animal feed Co., Daejeon, Korea)와 함께 4주간 급여하면서 독성을 평가하였다.
상기 독성평가결과, 실험에 참여한 쥐 중 한 마리도 폐사하지 않고, 10마리 모두 4주간 건강을 유지한 것으로 확인되었다.
시험예 6: 항균활성 측정
아티초크 에탄올 추출물(실시예 7 제조) 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 8 제조) 및 이들의 혼합 추출물(1:1 중량비)의 항균 활성을 다음과 같은 방법으로 평가하였다.
대표적인 식중독균(Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Campylobacter jejuni, Escherichia coli, Escherichia coli O-157, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Salmonella thypimurium, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica)을 사용하였다.
상기 세균류를 멸균된 TSB 배지 10㎖에 배양물 50㎕를 접종하여 30℃에서 24±1 시간 계대배양하였다. 이 배양물의 농도는 microplate reader 흡수파장 655㎚에서 Abs 0.6±0.1이 유지되었다. 계대배양 한 실험균을 멸균증류수로 10-3배로 희석하여 원판확산법을 실시하였다. 즉, 희석균주를 멸균면봉에 묻혀 4?L 두께의 평판배지에 확산 도말하고 멸균된 8?L(두께 1?L) 여지를 올려 상기 아티초크 에탄올 추출물(실시예 7 제조), 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 8 제조) 및 아티초크 에탄올 추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물(1:1 중량비)을 각각 50㎕를 주입하였다. 20분 정도 충분히 흡입시킨 후 30에서 24±1 시간 배양하고 생육환을 확인하였다.
상기 항균활성은 여지를 포함한 투명대의 크기를 측정하여 평가하고, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
균주명 균주번호a 항균활성(mm)b
아티초크 에탄올 추출물(실시예 2 제조) 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 3 제조) 아티초크 에탄올 추출물+람브탄 껍질 에탄올 추출물
세균류 Bacillus cereus KCTC 1012 15 13 16
Bacillus subtilis KCCM 1021 15 16 17
Campylobacter jejuni KCCM 41772 16 15 17
Escherichia coli ATCC 25922 15 16 17
Escherichia coli O-157 ATCC 43888 16 14 16
Listeria monocytogenes ATCC 15313 15 14 16
Pseudomonas aeruginosa KCTC 1750 15 15 16
Staphylococcus aureus ATCC 25923 16 15 17
Salmonella enteritidis KCCM 11862 15 15 16
Salmonella thypimurium ATCC 13076 15 16 16
Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 15 15 17
Yersinia enterocolitica ATCC 23715 16 16 18
㈜ a: ATCC American Type Culture Collection, KCTC 한국생명공학연구원 생물자원센터; KCCM (사)한국종균협회
b: 투명대의 크기(직경 mm)
상기 표 5에서 확인되는 바와 같이, 아티초크 에탄올 추출물(실시예 7 제조) 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물(실시예 8 제조)은 모두 전체 세균류들에 대하여 우수한 항균활성을 나타냈다.

Claims (8)

  1. (a) 당근을 세척한 후, 블랜칭한 후, 착즙하는 단계;
    (b) 사과즙과 상기 (a) 단계의 당근즙을 4:6 내지 6:4의 부피비로 혼합하는 단계;
    (c) 상기 (b) 단계의 혼합물 80 중량%와 레드비트 착즙액 10 중량%와 아티초크 에탄올 추출물 5 중량%와 람브탄 껍질 에탄올 추출물 5 중량%를 혼합하여, 냉각시킨 후, 발효 탱크로 이송하는 단계;
    (d) 유산균을 상기 (c) 단계의 혼합물 100 중량부에 대하여 0.001 중량부 내지 0.01 중량부가 되도록 발효 탱크에 첨가하는 단계;
    (e) 상기 (d) 단계의 혼합물을 30±3℃에서 12 시간 동안 발효 탱크 내에서 발효시키는 단계;
    (f) 상기 (e) 단계의 발효물을 60 내지 70℃에서 30분 이상 살균하여 유산균을 실활시키는 단계;
    (g) 상기 (f) 단계의 유산균 실활 발효물을 여과시켜 여과액을 얻는 단계; 및
    (h) 상기 (g) 단계의 여과액을 살균하는 단계;를 포함하며,
    상기 (d) 단계에서 유산균은 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophiles), 및 비피도박테리움 애니멀리스 락티스 BB-12(Bifidobacterium animalis spp. Lactis BB-12)를 1:1:1의 중량비로 혼합한 것을 특징으로 하는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 (d) 단계의 유산균은 상기 (c)단계의 혼합액의 일부용액을 취출하여 완전히 용해시킨 후, 투입하는 것을 특징으로 하는 사과, 비트, 및 당근을 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제1항에 있어서,
    상기 (b) 단계의 혼합물을 80 내지 110℃에서 2분 내지 10분간 살균하는 단계를 더 포함하는 유산균 발효 주스의 제조방법.
  7. 삭제
  8. 삭제
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Grind apples, carrots and beets as it is the golden recipe for ABC juice..., Facebook (2020.5.6), Internet (https://www.facebook.com/100317985016357/videos/169202177752996/?__so__=channel_tab&__rv__=all_videos_card) *
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