KR102380191B1 - 좁은잎천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 좁은잎천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 화장료 조성물은 여드름 유발균인 프로피오니박테리움 아크네스(P.acnes) 균의 성장을 억제하고 피지 생성 조절 인자인 PPAR-γ 및 SREBP-1의 발현을 억제하여 여드름 개선에 효과가 있다.

Description

좁은잎천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for improving acne containing Ficus erecta var. sieboldii extracts as active ingredient}

본 발명은 좁은잎천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용화장료 조성물에 관한 것이다.

여드름은 피지선을 따라 얼굴, 등, 가슴 등 신체 여러 부위에 발생되는 만성피부 질환으로 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes, P. acnes)의 증식에 의한 염증 유발, 남성호르몬에 의한 피지 분비의 증가, 유전적 요인 및 환경적 요인 등 다양한 원인에 의해 발생한다.

여드름은 특히 호르몬 분비가 왕성한 사춘기에 많이 발생하여 면포, 구진, 농포 등의 변병이 생기는 것을 특징으로 하며, 20대 초중반 이후 호르몬 분비가 감소하는 시기 여드름이 줄어들거나 사라지지만 현재 스트레스, 잘못된 식습관 등 여러 원인에 의해 성인 여드름이 증가하고 있다.

여드름 치료를 위해 일반적으로 경미한 경우에 피부에 도포하는 항생제를 처방 하나 심한 경우 경구 항생제, 코르티코스테로이드, 이소트레티노 등의 약물을 처방한다. 이런 약물의 경우 안전성 및 부작용에 대한 우려가 대두되고 있고, 현대사회의 피부 미용에 대한 관심 증가에 따라 여드름 개선 및 치료에 대한 안전하고 부작용이 적은 천연물을 이용한 개발에 관심이 높아지고 있다.

한국등록특허 제10-1583591호 (2016.01.04)에는, 좁은잎천선과 잎 추출물을 이용한 항염증제 조성물에 관하여 개시되어 있다. 한국등록특허 제10-1862035호 (2018.05.23)에는, 좁은잎천선과 복합 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 좁은입천선과 추출물 및 풍란 캘러스 배양 추출물로 구성된 복합추출물을 함유하는 화장료 조성물로 피부 미백 및 주름 개선 효능에 관하여 개시되어 있다.

본 발명은 여드름 개선에 효과적이며 안전한 천연물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 좁은잎천선과나무(Ficus erecta var.sieboldii) 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어, 상기 추출물은, 바람직하게는 용매로 60~80% 에탄올을 이용하여 추출한 것이 좋다.

본 발명의 화장료 조성물은, 바람직하게는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium Acnes) 균의 성장을 억제하는 것이 좋다.

본 발명의 화장료 조성물은, 바람직하게는 피지 생성 조절 인자인 PPAR-γ의 발현을 억제하는 것이 좋다.

본 발명의 화장료 조성물은, 바람직하게는 피지 생성 조절 인자인 SREBP-1의 발현을 억제하는 하는 것이 좋다.

본 발명의 화장료 조성물은 여드름 유발균인 프로피오니박테리움 아크네스(P.acnes) 균의 성장을 억제하고 피지 생성 조절 인자인 PPAR-γ 및 SREBP-1의 발현을 억제하여 여드름 개선에 효과가 있다.

도 1은 좁은잎천선과나무 추출물의 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium Acnes) 균의 성장 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 2는 좁은잎천선과나무 추출물의 PPAR-γ의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.
도 3은 좁은잎천선과나무 추출물의 SREBP-1의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.

본 발명은 좁은잎천선과나무(Ficus erecta var.sieboldii) 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

좁은잎천선과나무(Ficus erecta var.sieboldii)는 무화과속에 속하며 남해안 지방 특히 제주도에 주로 자생하는 식물로 젖꼭지 나무라고도 한다. 높이는 2~4m 정도로 자라는 낙엽 활엽 관목으로, 가지는 회백색이고 털이 없으며 잎은 좁은 피침형으로 가장자리가 밋밋하나 가끔 톱니가 있는 경우도 있다. 9~10월에 무화과를 닮은 자흑색의 열매가 열리고 식용이 가능하다. 예로부터 화습, 익기, 상처회복, 해독 등의 효능이 알려져 있으며 류마티스 관절염, 경폐, 타박상 등에 이용되어 왔다. 좁은잎천선과의 성분으로는 β-시토스테롤(β-sitosterol), 리놀레인산에틸(ethyl linoleate), α-아미린 아세테이트(α-amyrin acetate) 등이 보고되어 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 있어, 상기 추출물은, 바람직하게는 용매로 60~80% 에탄올을 이용하여 추출한 것이 좋다. 본 발명에서는 상기한 용매로 좁은잎천선과나무를 추출한 추출물을 이용한 결과, 프로피오니박테리움 아크네스(P.acnes)균의 성장 억제, 피지 생성 조절 인자인 PPAR-γ 및 SREBP-1의 발현 억제를 통해 피지 생성을 억제함으로써 뛰어난 여드름 개선 효과를 발휘하는 것을 확인할 수 있었다.

따라서, 본 발명의 화장료 조성물은, 바람직하게는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium Acnes) 균의 성장 억제, 피지 생성 조절 인자인 PPAR-γ 또는 SREBP-1의 발현 억제 중 선택되는 어느 하나의 효능을 가지는 것이 좋다.

여드름은 주로 모낭의 염증을 유발하는 호르몬, 피지생성, P.acnes 균 간의 상호작용에 의하여 발생하는데, 그 중 피지(지질)는 피부의 진피층에 위치하며 모낭에 붙어 있는 피지선에서 피지를 생성한다. 정상적인 경우 피지(지질)는 외부 유해균의 피부 침입을 막아주고 유, 수분 밸런스를 맞춰주는 피부 보호 역할을 한다. 그런데, 호르몬 불균형, 수면 부족, 스트레스 등에 의해 피지가 과도하게 생성될 경우 모공에 피지가 응고되거나 죽은 피부 세포, 여드름균 등이 모여 모낭을 막아 생성된 피지가 모공 밖으로 배출이 차단되게 되면 염증이 유발되고 P.acnes 균이 활성화되어 결국 여드름이 발생하게 된다.

또한, 피지선은 주로 얼굴, 앞가슴, 등, 목 등에 주로 분포하며 피지선에 존재하는 피지선 세포에서 피지(지질)가 생성되어 모공을 통해 분비된다. 지질 합성은 SREBP-1(sterol regulatory element-binding protein 1), PPARs(peroxisome proliferator-activated receptors) 및 FAS(fatty acid synthase) 등의 전자인자에 의해 조절된다. SREBP-1은 콜레스테롤, 지방산 및 인지질의 합성을 조절하는 전사인자이고, PPAR는 -α, -β/δ, -γ의 3가지 유형이 존재하며 그 중에서 PPAR-γ는 피지선 세포의 증식과 지질 생성을 촉진하는 전사인자이다. 이러한 전사인자의 조절은 피지 생성을 억제함으로써 여드름 증상의 개선 및 치료에 중요한 역할을 하는 것으로 보고 되어 있다.

한편, 본 발명에 있어, 상기 좁은잎천선과나무 추출물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.0001~30.0중량%가 함유되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 화장료 조성물 전체 중량에 대해서 0.01~10중량% 함유되는 것이 좋다. 좁은잎천선과나무 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만인 경우에는 여드름 예방 또는 개선 효과가 미미하고, 30.0중량% 초과할 경우 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과 증가가 보이지 않는다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 좁은잎천선과나무 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예 및 실험예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

[실시예 1 : 좁은잎천선과나무 에탄올 추출물의 제조]

좁은잎천선과나무 잎을 음건하여 파쇄한 후, 20배 중량의 70%(v/v)에탄올을 첨가하여 24시간 동안 상온에서 추출하였다. 이후, 추출물을 여과하고, 감압농축 및 동결건조하여 좁은잎천선과나무 에탄올 추출물을 제조하였다.

[실험예 1 : 본 발명 실시예 1 추출물의 P.acnes 균의 성장 억제 효과]

본 실험에서는 실시예 1 추출물의 여드름 유발균인 P.acnes 균의 성장에 대한 저해 효과를 확인하고자 하였다.

이를 위하여, 여드름 유발균으로 잘 알려져 있는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주를 이용하였고, 이를 10㎕ BHI의 액체배지에 접종하고, 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이렇게 활성화한 시험균액 0.2㎕를 첨가하여 고체배지 위에 고르게 펴지도록 멸균된 유리막대로 도포한 뒤, 페이퍼 디스크(paper disc)에 의한 한천배지 확산법(disc plate method)으로 측정하였다. 양성대조군으로 테트라사이클린(tetracycline)을 처리하였다. 본 발명 좁은잎천선과나무 추출물의 균 성장에 대한 실험 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

시료	농도	Clear zone (㎜)
실시예1 (%) (좁은잎천선과나무 추출물)	0.3	-
	1	7
	3	13
	5	17
Tetracycline (㎍/㎖)	100	25

실험 결과, 좁은잎천선과나무 추출물은 농도의존적으로 P.acnes 균의 성장을 억제하였다. 좁은잎천선과나무 추출물은 1%의 농도부터 7㎜의 성장저해환을 형성하였으며, 5%의 농도에서 최대 17㎜의 성장저해환을 형성하였다. 양성대조군인 테트라사이클린의 경우 25㎜의 성장저해환을 형성하였다 (도 1). 도 1은 좁은잎천선과나무 추출물의 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium Acnes) 균의 성장 억제 효과를 확인한 결과이다.

[실험예 2 : 좁은잎천선과나무 추출물의 PPAR-γ 발현 억제 효과]

본 실험에서는 좁은잎천선과나무 추출물의 피지 생성 억제 효과를 확인하기 위하여, 피지선 세포를 이용하여 피지 조절 인자인 PPAR-γ에 대한 본 발명 추출물의 영향을 확인하였다.

이를 위하여, 피지선 세포를 6웰 플레이트에 3 x 10⁵ cell/well로 분주하고 37^oC, 5% CO₂ 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 피지 생성을 촉진하기 위해 자극제로 리놀레산(linoleic acid)을 200μM의 농도로 처리하고 좁은잎천선과나무 추출물을 농도별로 희석하여 처리하였다.

이후, 24 시간 동안 37^oC, 5% CO₂ 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1× PBS로 한 번 세척한 후, 스크레퍼(scraper)로 긁어 세포를 수집하였다. 그 후, 세포용해버퍼(Cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA 어세이(assay)로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동시켰다.

겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고, 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 이후, 1× TTBS 용액으로 3회 세척하고 1차 항체를 4^oC에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1× TTBS로 3회 세척하고 ECL용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. 이는, Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 PPAR-γ의 발현 억제율(%)을 계산하여 하기 표 2에 나타내었다.

시료		PPAR-γ 발현 억제율(%)
실시예1 (㎍/㎖) (좁은잎천선과나무 추출물)	10	3.96
	30	48.65
	100	84.24

실험 결과, 본 발명의 좁은잎천선과나무 추출물은 농도의존적으로 PPAR-γ의 발현을 억제하였다. 30㎍/㎖의 농도부터 48.65%로 유의한 억제율을 보였으며, 100㎍/㎖의 농도에서 최대 84.24%의 높은 PPAR-γ의 발현 억제 효과를 나타내었다 (도 2). 도 2는 좁은잎천선과나무 추출물의 PPAR-γ의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.

[실험예 3 : 좁은잎천선과나무 추출물의 SREBP-1 발현 억제 효과]

본 실험에서는 본 발명의 좁은잎천선과나무 추출물의 피지 생성 억제 효과를 확인하기 위하여, 피지선 세포를 이용하여 피지 조절 인자인 SREBP-1에 대한 본 발명 추출물의 영향을 확인하였다.

이를 위하여, 피지선 세포를 6웰 플레이트에 3 x 10⁵ cell/well로 분주하고 37^oC, 5% CO₂ 배양기에서 하루 동안 세포를 안정화시켰다. 피지 생성을 촉진하기 위해 자극제로 리놀레산(linoleic acid)을 200μM의 농도로 처리하고 좁은잎천선과나무 추출물을 농도별로 희석하여 처리하였다.

이후, 24 시간 동안 37^oC, 5% CO₂ 배양기에서 반응시킨 후 단백질을 분리하였다. 상층액을 제거하고 1× PBS로 한 번 세척한 후, 스크레퍼(scraper)로 긁어 세포를 수집하였다. 그 후, 세포용해버퍼(Cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하고 BCA 어세이(assay)로 단백질을 정량한 후 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동시켰다.

겔 상의 분리된 단백질을 PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시키고, 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블로킹(blocking)하였다. 이후, 1× TTBS 용액으로 3회 세척하고 1차 항체를 4^oC에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, 1× TTBS로 3회 세척하고 ECL용액을 반응시켜 Chemi Doc 기기로 밴드를 검출하였다. 이는, Image J 1.47 software를 이용하여 수치화하였으며 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 SREBP-1의 발현 억제율(%)을 계산하여 하기 표 3에 나타내었다.

시료		SREBP-1 발현 억제율(%)
실시예1 (㎍/㎖) (좁은잎천선과나무 추출물)	10	2.25
	30	29.90
	100	69.52

실험 결과, 본 발명의 좁은잎천선과나무 추출물은 농도의존적으로 SREBP-1의 발현을 억제하였다. 30㎍/㎖의 농도부터 29.90%로 유의적인 억제율을 보였으며, 100㎍/㎖의 농도에서 최대 69.52%의 높은 SREBP-1의 발현 억제 효과를 나타내었다 (도 3). 도 3은 좁은잎천선과나무 추출물의 SREBP-1의 발현 억제 효과를 확인한 결과이다.

Claims (5)

1. 좁은잎천선과나무(Ficus erecta var.sieboldii) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하며, 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium Acnes) 균의 성장 및 피지 생성 조절 인자의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 추출물은,
   용매로 60~80% 에탄올을 이용하여 추출한 것을 특징으로 하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
   
3. 삭제
4. 제1항에 있어서,
   상기 피지 생성 조절 인자는,
   PPAR-γ인 것을 특징으로 하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 피지 생성 조절 인자는,
   SREBP-1인 것을 특징으로 하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.

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