KR101363028B1 - 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방, 개선 또는 치료용 화장용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 한련초 추출물 및 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선 및 항균 조성물에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 여드름 개선용 화장용 조성물은 각 성분을 단독으로 사용한 경우에 비해 여드름 유발균 대한 탁월한 억제효과 및 5α-리덕타제를 효과적으로 억제하는 활성을 가져 우수한 여드름 개선 및 치료 효과를 나타내므로 여드름 개선용 화장용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방, 개선 또는 치료용 화장용 조성물{A cosmetic composition for the prevention, improvement or treatment of acne vulgaris comprising the mixture of extract of Melissa officinalis, Citrus bergamia, leaves of Mentha arvensis, Eclipta prostrata and Hovenia dulcis Thunb}

본 발명은 항균 효과를 갖는 화장용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 허브 추출물 및 지구자 혼합물을 포함하는 여드름 예방, 개선 및 치료용 화장용 조성물에 관한 것이다.

여드름(acne vulgaris)은 15세에서 40세 사이에 발생하는 피부질환으로, 특히 사춘기에 흔한 질환으로 알려져있다. 주로 얼굴, 가슴, 등, 어깨 등에 발생하는 폐쇄성(whiteheads) 또는 개방성(blackheads), 면포(comedo), 구진(papule), 농포(pustule), 결절(nodule) 등의 병변을 특징으로 하는 모피지선에서 발생하는 만성 염증성 질환으로 정의된다. 여드름의 종류로는 흔히 보는 여드름으로서 보통 여드름이 있는데, 이는 심상성 여드름이라고도 하며, 특징으로는 전형적인 면포와 여러 종류의 발진이 섞여 나타난다. 켈로이드성 여드름(acnekeloidalis)은 고름 같은 분비물이 여기저기서 분출되는 큰 농양이나 고름 주머니, 그리고 염증성 결절 등이 특징적으로 나타나는데 여드름 중 가장 심한 형태에 속한다.

여드름의 발병 원인은 아직도 명확히 규명되어 있지 않으나, 유전적 요인과 환경적 요인을 배제한다면 다음의 세 요인에 의해 발병하는 것으로 알려져 있다.

첫째, 피지가 비정상적으로 과잉 분비되는 경우이다. 과도한 피지분비는 남성 호르몬인 테스토스테론(testosterone)과 밀접한 관계가 있는데, 테스토스테론이 피부 세포내의 5알파-리덕타아제에(5α-reductase) 의해 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone ;DHT)으로 전환되어 피지분비 세포의 활성을 증진시킴으로써 피지 분비를 촉진시키는 것으로 알려져 있다(Rosenfield RL et al., The American Journal of Medicine, 16,pp 80~88, 1995).

둘째, 모낭 벽이 과각화하여 모공이 폐쇄되는 경우이다. 생성된 피지는 피부 밖으로 원활하게 배출되어야 하지만, 모낭의 과각화로 인하여 모공이 막히면 피지의 원활한 배출이 억제되므로 모낭 내에 피지가 정체되어 미세면포를 형성하게 된다. 이 상태가 여드름 발병의 초기 단계이다.

셋째, 모낭내 정체된 피지가 모낭내 상주하는 혐기성 세균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생장을 촉진시킴으로써 여드름 병변을 악화시키는 경우이다. 피지선 내에 여드름균이 증식됨에 따라 피지를 구성하는 트리글리세라이드(triglyceride)가 자유 지방산(free fatty acid)으로 전환되어 자극원(irritants)으로 작용하거나, 면포 유발성(comedogenic) 물질로 작용함으로써 여드름 생성을 촉진시키게 되고, 이에 따라 염증 반응까지 수반하게 된다(Sergio Nacht, Cosmetics Toiletries, 101, pp 47-55,1986).

P. acnes는 그람 양성 혐기성 세균으로 0.3~1.3㎛×1~10㎛이고 균체 일부가 팽대하며 균단은 뾰족하고 다형성이고 V자 배열을 하고 있다. 정상 성인의 피지선에서 80%까지 검출되는 정상 균총의 하나이나 피지분비가 많은 모공 주변 등에 분포하며 표피성 포도상 구균과 함께 피부에 존재하면서 여드름 등과 같은 모낭염 등 피부질환을발생과 증상을 악화시키는 원인균이 되기도 한다. P. acnes는 피지를 주 영양원으로 하며, 피지의 주성분인 중성지방을 지방산과 글리세롤로 분해하며, 이때 생성된 유리 지방산은 피부에 심한 자극을 주어 모낭벽이나 모공주위의 세포에 염증을 일으킨다. 또한 이 균에 의해 자극을 받은 상피세포는 각질세포 생성이 증가하여 정체 과각화가 이루어져 여드름의 초기단계인 미세면포를 형성하며, 계속하여 각질과 피지가 분해됨으로서 모낭벽이 얇아지고, P. acnes를 탐식한 백혈구가 분비하는 가수분해효소의 작용에 의해 모낭벽이 파열되고 모근 내용물이 진피내로 유리되어 염증반응이 가속화된다(이경숙 등, 한국의류산업학회지 8(5), 571-576, 2006).

P. acnes 외에 일반적인 피부 상재균 중 피부에 염증을 유발할 수 있는 세균으로는 Staphylococcus epidermidis(S. epidermidis), Malassezia furfur( M. furfur) 등이 알려져 있다. 여드름 병변에서 분리되는 대표적인 세균은 P. acnes이지만, S. epidermidis와 같은 다른 균들도 분리되는 것으로 알려져 있다. Malassezia 속의 균들은 오랫동안 피부에 서식하는 균류로, 특정 조건에서 피부 등의 표면 감염을 일으키는 원인이 될 수 있고 이식환자 등에서는 기회주의 병원체가 될 수 있다(손호용 등, 한국미생물생명공학회지 34(3), 265-272, 2006).

S. epidermidis는 그람양성 세균에 속하는 Staphylococcus 속 중 하나이다. S. epidermidis의 콜로니는 일반적으로 작고, 흰색에서 노란색이며, 철야(overnight) 배양 후 지름 1~2mm 정도로 자란다. 사람과 동물의 피부에서 자주 발생하며, 점막에서도 나타난다. 호기성 호흡이나 발효에 의해 성장하며 혐기성에서도 생존할 수 있다. 항생제인 노보바이오신(Novobiocin)에 민감하나, 페니실린(penicillin)과 메티실린(methicillin) 등의 다양한 항생제에는 내성이 있다. S.epidermidis는 일반적으로 비병원성 균이지만 면역계나 유치(留置)도뇨관 환자에게는 감염을 일으키는 주요한 원인이 된다. 많은 변종들은 의료 보철물의 표면에 접착하여 균막을 형성한다고 알려져 있다(장영식 등, Staphylococcusepidermidis 각막염의 역학조사, 대한안과학회지 43(4), 665-671, 2002).

Malassezia furfur(M. furfur)는 두꺼운 다층의 세포벽을 가지는 다형태의 친지방성 미생물로 콜로니는 작고 황갈색이며 선명한 테두리를 가지고 있다. Malassezia furfur는 이스트에 속하며, 보통 인간을 포함한 동물 피부표면에 있다. 감염이 되면 등이나 가슴 부위의 저색소침착증(hypopigmentation)이 일어날 수 있다. 생존하기 위해서는 지방이 필요하며, 따라서 머리가죽, 얼굴, 상반신 등의 대부분이 피지선에 흔하게 존재한다. 자라는 속도가 너무 빠를 때는 세포의 자연 재생이 흐트러져 긁으면 비듬이 발생한다 (김영주 등, 한국미생물생명공학회지 33(3), 236-239, 2005).

따라서 여드름은 피지의 과잉생성, 모공의 과각질화 및 프로피오니박테리움 아크네스의 작용, 염증 유도로 이어지는 복합적인 인자에 의해 발병하는 질환으로 본다.

따라서 현재 여드름 치료 및 완화 효과에 대한 평가방법도 전술한 작용 기전을 토대로 하여, 피지분비조절, 과각화 억제, 여드름 균에 대한 항균력 및 여드름 균에 의해 형성된 염증의 완화효과를 평가하는 방법이 이용되고 있다(Madli Puhvel, Cosmetics Toiletries, 98, pp 117-119, 1983)

현재까지 여드름을 치료 또는 완화시키기 위한, 여드름의 치료제는 피지 과잉생산 억제, 모낭벽의 과각화 방지, P.acnes의 증식억제 및 염증반응의 방지 측면에서 개발되고 있다. 그러나 현재 사용되고 있는 에리쓰로마이신(erythromycin), 이소트레티노닌(isotretinoin), 벤조일 페록사이드(benzoyl peroxide), 비타민에이산(vitamin A acid), 트리클로산(triclosan) 및 아젤라산(azelaic acid) 등의 약물들은 구순염, 점막 건조감, 최기 형성, 기미 또는 혈전증의 부작용과 함께 항생제 내성균주의 출현이나 치료 중단 시의 재발 등의 문제점 등 많은 문제점이 있는 것으로 알려져 있다.

한편, 레몬밤(Melissa Officinalis leaf extract)은 지중해 연안이 원산지로 지중해 동부 지방과 서아시아, 흑해연안, 중부 유럽증지에서 자생하는 밀원식물 이다. 레몬과 유사한 향을 가지고 이 향은 감정을 편안하게 진정시켜주며 심장박동수를 낮춰 혈압을 낮춘다. 해독작용과 지사능, 진정, 건위, 강장, 신경 고양 등에 효능이 있으며 식용으로도 이용된다. 민트처럼 퍼져 자라는 레몬밤은 본래의 줄기를 베어내면 새로운 줄기가 차례로 나오기 때문에 가지와 잎은 언제라도 수확이 가능하다. 레몬밤은 해독작용, 진통효과가 있어 생리통을 억제하고 생리촉진에도 효과가 있다. 특히, 레몬밤 정유(essential oil)에는 생리활성 물질인 폴리페놀 화합물(polyphenol compounds)이 많이 함유되어 있다.

또한, 베르가못(bergamot)는 쌍떡잎식물 이판화군 쥐손이풀목 운향과의 상록관목이다. 베르가못 정유(essential oil)는, 무색의 액체로 신선하고 톡쏘는 향을 가진 시트러스계 오일이며, 마음을 안정시켜주고 호흡기능을 돕고 정신적인 스트레스로 인한 긴장된 근육을 풀어주는 효과가 있다.

또한, 박하잎은 박하(Mentha arvensis L. var. piperascens MALINV.)의 전초 또는 잎이다. 지상부에는 멘톨, 이소멘톤, 네오멘톨, 피넨, 캄펜, L-리모넨 등과 고비점 성분으로서 감마-헥세놀페닐아세테이트, 박하유의 주성분인 멘톨은 도포제, 진통제, 흥분제, 건위제 등으로 약용하고 치약, 사탕, 잼, 화장품, 담배 등에 향료나 청량제로 사용한다.

또한, 한련초(Eclipta prostrate)는 높이 10~70cm되는 국화과의 한해살이 초본이다. 우리 나라 제주도, 남부지방, 중부지방의 콩밭에 많이 발생하는 식물이다. 예로부터 혈류량 촉진, 진통, 면역, 피부염, 모발 성장 촉진 및 피부가 갈라지는 피부염에도 공개특허 10-2009-0091547 효과가 있는 것으로 알려져 있다

또한, 지구자(Hovenia Dulcis Fruit)는 헛개나무의 열매이다. 일명 호깨나무, 지구자나무라고 불린다. 지구자는 간보호 및 사염화메탄 주사로 야기된 간독성 과정을 개선하는 효과가 알려져 있다. 그뿐 아니라 지구자를 포함하는 조성물이 인지개선에 효과가 있음이 알려져 있다.

이에 본 발명자들은 부작용이 적으며 여드름의 치료에 효과적인 천연물 추출물의 조합을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 허브 추출물 및 지구자 추출물를 유효성분으로 함유하는 여드름 예방, 개선 또는 치료용 화장용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 한련초 추출물, 박하잎 추출물 및 지구자 추출물를 유효성분으로 함유하는 여드름 예방, 개선 또는 치료용 화장용 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 구체예는 허브 추출물과 지구자 추출물를 유효성분으로 포함하는 여드름 예방, 개선 또는 치료용 조성물울 제공한다.

또한, 본 발명의 상기 조성물이 적용될 수 있는 "여드름"은 당업계에서 여드름으로 통칭되는 모든 피부 질환, 또는 여드름과 유사한 기전을 통해 발명되는 모든 피부 질환을 포함하며, 예컨대, 집합성 여드름, 일반적 여드름, 응괴 여드름(congoblate acne), 화장품 사용에 의한 여드름, 디터지칸 여드름(acne dtergicans), 청춘기 여드름, 섬광모양의 여드름(acne fulminans), 절성 여드름(acne furunculoid), 할로겐에 의한 여드름, 경결성 여드름, 켈로이드성 여드름, 물리적 자극에 의한 여드름(mechanical acne), 약물성 여드름, 괴사성 여드름, 속립성 여드름, 신생아 여드름(acne neonatorum), 지성 여드름(acne oil), 구진성 여드름, 적창(pomade acne), 월경전 여드름, 주사 여드름(acne rosacea), 모창성 여드름, 열대성 여드름(tropical acne), 중독성 여드름(acne venenata), 및 심상성 여드름 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 허브는 레몬밤, 베르가못, 박하잎 및 한련초로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있으나, 목적에 따라서 두 종류 이상의 허브를 혼합하여 이용할 수 있으며, 4가지의 허브를 모두 이용하는 것이 가장 바람직하다.

상기 허브 추출물과 상기 지구자 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 혼합될 수 있으며, 동일한 량으로 혼합되어 사용되는 것이 바람직하다. 특히, 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물을 모두 함유할 경우 각각 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 3 ~ 5 : 3 ~ 5 : 3 ~ 5 : 3 ~ 5 : 3 ~ 5의 중량비율로 혼합될 수 있다. 혼합 비율은 이에 한정되지 않으며, 목적에 따라 다양한 혼합비율로 이용될 수 있다.

상기 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법, 즉, 통상적인 온도와 압력 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. 본 발명의 허브 또는 지구자 추출물 제조에 사용될 수 있는 추출용매로는 예를 들면, 물, 탄소수 C₁ 내지 C₃의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜 등의 추출용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용 가능하다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 허브 건조 중량의 1 내지 15배 정도이며, 5 내지 12배 일 수 있으며, 10배 일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한, 추출방법으로는 열 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등을 사용할 수 있으며, 1회 또는 다수회 반복하여 추출시켜 사용할 수 있다. 또한, 추출온도는 허브 또는 지구자의 유용성분의 유효활성이 제거되지 않을 정도의 온도이면, 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 상온에서 침적시켜 추출한다.

본 발명의 허브 추출물 및 지구자 혼합 추출물은 여드름 원인균으로 알려진 프로피온박테리움 아크네(Propionbacterium acnes), 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococus epidermidis) 및 말라세지아 펄펄(Malassezia furfur)에 대해 항균활성을 갖는다(표 2 내지 4, 및 도 1 내지 3),

또한, 본 발명의 허브 조성물과 지구자 혼합 추출물은 5α-리덕타제 억제 활성을 갖는다(표 5 및 도 4). 따라서, 본 발명의 조성물은 5α-리덕타제에 의해 유발되는 피부질환 개선 용도로 사용될 수 있다. 특히, 본 발명의 조성물은 5α-리덕타제의 활성화를 통해 생성되는 다이하이드로 테스토스테론에 의해 유발되는 피지 분비 억제용 화장용 조성물로 이용될 수 있다. 또한, 본 발명의 상기 조성물은 여드름, 및 지루성 피부염 등의 피지 분비 관련 질환 개선을 위한 화장용 조성물, 특히 여드름 개선 및 완화용 화장용 조성물로 이용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 피지 분비 억제 및 여드름 완화의 목적으로 사용될 수 있는데, 이때, 상기 조성물이 적용될 수 있는 범위는 피지선이 발달한 부위이면, 특별히 제한되지 않으며, 바람직하게는 피지 분비가 많은 얼굴, 두피 또는 등 부위에 적용된다.

또한, 본 발명의 일구체예는 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 한련초 추출물에서 선택되는 하나 이상의 허브 추출물과 지구자 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 주름 개선 및 피부 탄력 증진용 화장품을 제공한다. 상기 혼합 추출물은 전체 중량비에서 1 내지 30 중량%로 함유될 수 있으며, 5 내지 20 중량%로 함유될 수 있다.

특히, 가장 바람직하게는 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 한련초 추출물 및 지구자 추출물을 함유할 수 있다. 상기 추출물의 함량은 목적하는 제품에 따라 달라질 수 있으나, 1~10 : 1~10 : 1~10 : 1~10의 비율로 함유될 수 있으며, 바람직하게는 3~5 : 3~5 : 3~5 : 3~5의 중량비율로 함유될 수 있다.

본 발명의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 상기 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이크림, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명에 의한 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 한련초 추출물 및 지구자 추출물의 조합 추출물을 함유하는 화장용 조성물은 여드름 유발 균주의 생장 억제에 효과적이며, 피지를 생성하는 5α-리덕타제를 효과적으로 억제하여 여드름 예방, 개선 및 치료에 유용하게 이용할 수 있다.

도 1은 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물 및 그의 혼합물의 S. epidermidis균의 성장 억제 활성을 도시한 것이다.
도 2는 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물 및 그의 혼합물의 P. acnes균의 성장 억제 활성을 도시한 것이다.
도 3은 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물 및 그의 혼합물의 M. furfur균의 성장 억제 활성을 도시한 것이다.
도 4는 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물 및 그의 혼합물의 5α-리덕타제의 활성 억제를 도시한 것이다.

이와 같은 본 발명을 다음의 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세히 설명하나, 본 발명이 하기의 실시예나 시험예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 레몬밤 추출물의 제조

건조된 레몬밤잎을 분쇄하고, 분쇄된 레몬밤잎 500 g을 3차 증류수 5 ℓ에 첨가하여, 75 ℃에서 24시간 동안 중탕가열을 하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 감압 건조하여 레몬밤 추출물 41 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 2> 베르가못 추출물의 제조

건조된 베르가못잎을 분쇄하고, 분쇄된 베르가못잎 500 g을 3차 증류수 5ℓ에 첨가하여, 75 ℃에서 24시간 동안 중탕 가열을 하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 감압 건조하여 베르가못 추출물 38 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 3> 박하잎 추출물의 제조

건조된 박하잎을 분쇄하고, 분쇄된 박하잎 500 g을 3차 증류수 5 ℓ에 첨가하여, 75 ℃에서 24시간 동안 중탕 가열을 하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 감압 건조하여 박하잎 추출물 48 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 4> 한련초 추출물의 제조

건조 한련초 500 g에 3차 증류수 증류수 5 ℓ를 가하고 75 ℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 한련초 열수 추출물 42 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10kGy/H, 25kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 5> 지구자 추출물의 제조

건조 지구자 1 ㎏에 증류수 5 ℓ를 가하고 90 내지 95 ℃에서 3시간 동안 3회 추출하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 지구자 열수 추출물 85 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 6 내지 19> 레몬밤 , 베르가못 , 박하잎, 한련초 및 지구자의 혼합 추출물의 제조

레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 각각의 추출물을 하기 표 1에 제시된 것과 같은 중량 비율로 혼합한 혼합 추출물을 얻었다. 구체적으로 실시예 1 내지 5에서 얻은 각각의 추출물을 20 ㎎/㎖의 농도로 3차 증류수에 녹인 후에 각 추출물의 중량비율이 표 1이 되도록 각각의 추출물 수용액을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.

혼합 추출물에 있어서의 각 추출물 성분의 중량 비율(%)

실시예	레몬밤	베르가못	박하잎	한련초	지구자
6	50	0	0	0	50
7	0	50	0	0	50
8	0	0	50	0	50
9	0	0	0	50	50
10	50	50	0	0	0
11	50	0	50	0	0
12	50	0	0	50	0
13	30	30	0	0	40
14	30	0	30	0	40
15	30	0	0	30	40
16	35	35	30	0	0
17	25	25	25	0	25
18	25	25	25	25	0
19	20	20	20	20	20

< 실험예 1> S. epidermidis 에 대한 항균 활성 실험

96-well plate의 각 well에 S. epidermidis 균 현탁액을 분주하고, 실시예 6 내지 19에서 얻은 혼합 추출물과 실시예 1 내지 5에서 얻은 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 한련초 및 지구자 추출물을 동일하게 0.5 ㎎/㎖의 농도로 처리하였다. 또한 통상적으로 항균활성이 있다고 알려진 트리클로산(triclosan : TC) 및 살리실산(salicylic acid : SA)이 여드름 관련 균에 대해서 활성이 있는지를 알아보기 위해 각각을 역시 동일한 농도로 처리하였다. 96-well plate를 추출물 처리로부터 0, 48시간 경과한 시점에서 microplate spectrophotometer (BioTek Instrument, Vermont, USA)를 이용하여 흡광도 600 nm에서 측정하였다. 한편, 아무런 처리도 하지 않은 것(CON으로 표시)을 대조군으로 삼았다. 현탁액을 분주한 이후 아무런 처리도 하지 않은 대조군(CON)의 48시간 경과 시점에 측정한 흡광도 수치를 0시간의 수치로 나눈 값을 성장률 100(%)으로 하였을 때, 혼합 추출물 처리군 및 단독 추출물 처리군에 대한 48시간 경과 시점에 측정한 흡광도 수치를 0시간의 수치로 나눈 값의 대조군에 대한 비율을 각 군의 성장률로 정의하였다. 따라서, 100 이하의 성장률을 보인다는 것은, 성장을 저해하였음을 의미하는 것이다.

S. epidermis 에 대한 성장률

실시예	성장률(%)
1	89
2	93
3	94
4	96
5	87
6	72
7	77
8	76
9	84
10	87
11	89
12	93
13	62
14	65
15	71
16	87
17	58
18	87
19	56
CON	100
TC	52
SA	61

상기 결과에서 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 및 한련초 추출물이 지구자 추출물과 조합될 경우 S. epidermis에 대한 성장률을 감소시킴을 확인하였다.

< 실험예 2> P. acnes 에 대한 항균 활성 실험

실험예 1과 동일한 방법을 이용하여 P. acnes에 대한 항균 활성을 시험하였다.

P. acnes 에 대한 성장률

실시예	성장률(%)
1	91
2	88
3	92
4	97
5	88
6	78
7	74
8	75
9	89
10	89
11	90
12	94
13	68
14	62
15	74
16	88
17	60
18	89
19	58
CON	100
TC	55
SA	59

상기 결과에서 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 및 한련초 추출물이 지구자 추출물과 조합될 경우 P. acnes에 대한 성장률을 감소시킴을 확인하였다.

< 실험예 3> M. furfur 에 대한 항균 활성 실험

실험예 1과 동일한 방법을 이용하여 M. furfur에 대한 항균 활성을 시험하였다.

M. furfur 에 대한 성장률

실시예	성장률(%)
1	90
2	92
3	87
4	94
5	89
6	76
7	78
8	71
9	81
10	89
11	88
12	91
13	64
14	59
15	68
16	88
17	60
18	88
19	55
CON	100
TC	56
SA	57

상기 결과에서 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 박하잎 추출물, 및 한련초 추출물이 지구자 추출물과 조합될 경우 M. furfur에 대한 성장률을 감소시킴을 확인하였다.

< 실험예 4> 레몬밤 , 베르가못 , 박하잎, 한련초 및 지구자의 혼합 추출물의 5α-reductase 효소 활성 억제효과 측정

남성호르몬 생합성에 있어서 가장 중요한 효소이며, 과잉의 피지 생성을 통한 사춘기 여드름 생성에 가장 중요한 5α-리덕타제에 대한 시험물질의 억제효과를 측정하였다. 이를 통하여 피지 생성 억제와 여드름 억제에 대한 간접효과를 확인하였다. 사람 유래의 5α-리덕타제 분비세포인 HEK293(Human Embryonic Kidney) 세포주의 배양액에 상시 실험예 1 내지 3에서 항균효과가 인정되는 실시예 6 내지 9, 13 내지 15, 17 및 19의 추출물을 처리하여, 5α-리덕타제의 분비가 실시예 6 내지 9, 13 내지 15, 17 및 19의 추출물의 처리에 의해 억제되는가를 측정하였다.

5α-리덕타제 분비세포인 HEK293 세포주의 배양은 RPMI 1640에 10%의 우태아혈청을 첨가한 배지로 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다. 24-웰 플레이트에 10⁶세포/웰(cells/well)의 농도로 세포를 배양하고 세포의 부착을 확인한 뒤, 시험물질(실시예 6 내지 9, 13 내지 15, 17 및 19의 추출물)을 농도별로 세포 배양액에 첨가하여 24시간 동안 배양하였다. 배양액을 회수하여 Baerbel P. 등의 방법(Mol Cell Biochem 270: 201-208, 2005)에 따라 기질인 4-androstene-3,17-dione이 5α-리덕타제의 작용에 의해 5α-androstane-3,17-dione으로 변화되는 비율을 측정하였다. 하기 식에 따라 5α-리덕타제 효소 활성 억제율을 계산하고, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

<수학식 1>

리덕타제 억제율

실시예	효소활성 억제율(%)
	1.0%	2.0%	3.0%
6	7.2	13.2	23.4
7	6.5	12.2	20.5
8	5.8	11.8	19.8
9	8.2	15.2	28.4
13	8.8	16.5	24.5
14	8.1	14.8	22.8
15	8.5	17.2	32.4
17	9.2	16.8	28.5
19	11.5	24.4	42.8
CON	0	0	0

< 제제예 1> 유연 화장수

정제수에 부틸렌 글리콜, 글리세린, 폴리옥시에틸렌 경화 피마지유, 베타인, 구연산, 구연산나트륨 및 방부제를 첨가하여 교반한 후 용해시킨 다음, 에탄올에 향료를 넣어 용해시킨 혼합물을 첨가하였다. 여기에 본 발명에 따른 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초의 혼합 추출물을 가하여 충분히 교반한 후, 숙성시켜 본 발명에 따른 상기 혼합추출물을 함유한 유연 화장수를 제조하였다. 하기 표 6에 각 성분의 함량을 나타내었다.

성분	함량(중량%)
레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 추출물	4.0
부틸렌 글리콜	3.5
글리세린	2.5
폴리옥시에틸렌 경화 피마자유	0.1
에탄올	2.5
베타인	1.0
구연산	0.01
구연산 나트륨	0.03
방부제	미량
향료	미량
정제수	잔량

< 제제예 2> 영양 화장수

본 발명에 따른 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 혼합추출물, 부틸렌 글리콜, 글리세린, 카르복시비닐폴리머, 아르기닌, 방부제 및 정제수를 70 ℃ ~ 75 ℃에서 교반하면서 가열하였다. 여기에 75 ℃ ~ 80 ℃에서 교반하여 가열시킨 스쿠알란, 부틸렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트, 소르비탄스테아레이트, 포리소르베이트 60, 글리세릴 스테아레이트 및 스테아릴글리세레티네이트 혼합물을 가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45℃정도로 냉각하면서 향료를 첨가하여 교반한 다음, 30 ℃까지 냉각한 후 숙성시켜 본 발명에 따른 상기 혼합추출물을 함유한 영양화장수를 제조하였다. 하기 표 7에 각 성분의 함량을 나타내었다.

성분	함량(중량%)
레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 추출물	6.0
부틸렌 글리콜	8.0
글리세린	5.0
스쿠알란	4.0
부틸렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트	5.0
소르비탄스테아레이트	1.5
폴리소르베이트 60	1.0
글리세릴스테아레이트	0.5
스테아릴글리시레티네이트	0.2
카르복시비닐폴리머	0.1
아르기닌	0.1
방부제	미량
향료	미량
정제수	잔량

< 제제예 3> 영양 에센스

시토 시테롤, 폴리글리세릴-2-올레이트, 세라마이드, 세테아레스-4 및 콜레스테롤을 교반하여 혼합한 다음, 본 발명에 따른 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 혼합추출물, 디세틸포스페이트, 농글리세린 및 정제수 혼합용액을 첨가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45 ℃로 냉각되면 향료를 첨가하여 교반하고 30 ℃까지 냉각시켜 숙성시켰다. 여기에 카르복시비닐폴리머, 산탄검 및 방부제를 첨가하여 안정화시킨 후 숙성시켜 본 발명에 따른 상기 혼합추출물을 함유한 영양 에센스를 제조하였다. 하기 표 8에 각 성분의 함량을 나타내었다.

성분	함량(중량%)
레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 추출물	7.0
시토 스테롤	1.7
폴리글리세릴-2-올레이트	1.5
세라마이드	0.5
세테아레스-4	1.2
콜레스테롤	1.5
디세틸포스페이트	0.4
농글리세린	5.0
카르복시비닐폴리머	0.2
산탄검	0.2
방부제	미량
향료	미량
정제수	잔량

< 제제예 4> 영양 크림

1,3-부틸렌 글리콜, 글레세린, 하이드로제네이트드 레시진, 옥틸도데카놀, 트리옥타노인, 스테아릭에씨드, 폴리솔베이트 60, 및 소르비탄세스퀴올레이트을 교반하여 혼합한 다음, 본 발명에 따른 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 혼합추출물, 트리에탄올아민, 디메치콘, EDTA, 글리세린 및 정제수 혼합용액을 첨가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45 ℃로 냉각되면 향료를 첨가하여 교반하고 30 ℃까지 냉각시켜 숙성시켰다. 여기에 산탄검 및 방부제를 첨가하여 안정화시킨 후 숙성시켜 본 발명에 따른 상기 혼합추출물을 함유한 영양 크림을 제조하였다. 하기 표 9에 각 성분의 함량을 나타내었다.

성분	함량(중량%)
레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 추출물	10.0
1,3-부틸렌 글리콜	3.0
글리세린	3.0
하이드로제네이티드 레시친	1.0
옥틸도데카놀	3.0
트리옥타노인	2.0
스테아릭에씨드	1.5
세토스테아릴알콜	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
소르비탄세스퀴올레이트	2.0
디메치콘	3.0
항산화제	0.3
산탄검	0.2
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
정제수	잔량

< 제제예 5> 팩

글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜, 소듐하이루로네이트, 글리신, 및 폴리아크릴아마이드을 교반하여 혼합한 다음, 본 발명에 따른 레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 혼합추출물, 스쿠알렌, 디메치콘, 트리에탄올아민, 및 EDTA 합용액을 첨가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45 ℃로 냉각되면 향료를 첨가하여 교반하고 30 ℃까지 냉각시켜 숙성시켰다. 여기에 산탄검 및 방부제를 첨가하여 안정화시킨 후 숙성시킨후 부직포에 본 발명에 따른 상기 혼합추출물을 도포하여 팩을 제조하였다. 하기 표 10에 각 성분의 함량을 나타내었다.

성분	함량(중량%)
레몬밤, 베르가못, 박하잎, 지구자 및 한련초 추출물	8.0
글리세린	7.0
1,3-부틸렌 글리콜	3.0
스쿠알렌	3.0
디메치콘	3.0
소듐하이루로네이트	0.1
글리신	2.0
폴리아크릴아마이드	5.0
항산화제	0.3
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
정제수	잔량

Claims (10)

1. 레몬밤, 베르가못 및 한련초 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 허브 추출물과 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
2. 삭제
3. 제1항에 있어서, 상기 허브 추출물은 물, C₁ 내지 C₃의 알코올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출된 것인 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 허브 추출물은 수용성 성분인 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 허브 추출물 및 상기 지구자 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
6. 제1항, 제3항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 프로피온박테리움 아크네(Propionbacterium acnes), 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococus epidermidis) 또는 말라세지아 펄펄(Malassezia furfur)에 대해 항균활성을 갖는 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
7. 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 한련초 추출물 및 지구자 추출물를 유효성분으로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
8. 제7항에 있어서, 상기 레몬밤 추출물, 베르가못 추출물, 한련초 추출물 및 지구자 추출물을 각각 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장용 조성물.
9. 제1항, 제3항 내지 제5항 및 제7항 내지 제8항의 어느 한 항의 조성물을 함유하는 여드름 예방 또는 개선용 화장품.
10. 제9항에 있어서, 상기 화장품은 유연화장수, 영양화장수, 영양에센스, 영양크림 및 팩으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 여드름 예방 또는 개선용 화장품.

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