KR102514212B1 - 화장료 크림 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명의 화장료 크림 조성물은 엄나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 느릅나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 및 비타민나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부;를 포함한다.

Description

화장료 크림 조성물 및 이의 제조방법{COSMETIC COMPOSITION AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}

본 발명은 화장료 크림 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

일반적으로 화장품 분야는 피부 노화를 방지하고 보다 나은 피부를 갖고자 남녀노소를 대상으로 다양한 종류와 조성물을 혼합하여 제품을 제조하는데 목적이 있다.

대표적인 피부질환은 사춘기의 남녀에게 발생하며 면포(comedone), 구진(papule), 농포(pustule), 낭종 또는 결절 형성을 특징으로 하는 모낭 피지선의 만성 염증성 질환인 여드름은 주로 일컫는다. 여드름은 피부 중 가장 잘 보이는 부위, 특히 얼굴, 가슴, 등 목 및 상박 등에 나타난다.

이러한 여드름은 피부내에 발생하는 염증과 피지가 모공을 막아 발생하는 질환으로 치료를 위해서는 약물투여나 항균제를 복용하는 등의 의학적인 방법으로 사용하는데, 이는 인체에 다양한 부작용을 초래할 수 있어 문제가 되고 있는 실정이다.

이로 인해 세균 또는 진균의 감염을 예방하고 치료하기 위한 산제, 용액제, 현탁제, 크림제, 겔제, 페이스트제, 연고제 또는 팅크제의 제형을 갖는 조성물 및 화장료 조성물을 개시하고 있으나, 상기한 제형의 조성 물을 환부에 적용할 경우, 적용부위가 넓을 경우 다량의 약물 도포가 요구되며, 도포량을 일정하게 조절하기 어렵고 부작용이 발생하는 등의 문제점이 있었다.

상기 문제점 해결을 위해 식물 추출물을 적용하는 예가 있으나, 식물 추출물이라고 해도 부작용이 있거나, 피부자극이 심한 경우도 많다.

따라서, 천연에서 자생하는 식물들을 대상으로 유효성분을 추출하여 피부 노화방지와 더불어 염증성 피부질환의 개선효과 등을 기대할 수 있을 뿐만 아니라, 부작용을 최소화하는 화장료 조성물의 제조가 필요하다.

1. 등록특허공보 제10-0361551호 '느릅나무의 추출물을 함유하는 피부노화방지 용화장료조성물' (등록일자 2002.11.06) 2. 등록특허공보 제10-0670530호 '철현채 추출물, 유엽 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물'(등록일자 2007.01.10)

본 발명의 목적은 피부질환의 일종인 종기, 여드름 등에 효과가 있고, 피부미백 및 피부 진정효과를 기대할 수 있는 화장료 크림 조성물 및 이의 제조방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 다른 목적은 부작용이 최소화된 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 상기 및 기타의 목적들은 하기 설명되는 본 발명에 의하여 모두 달성될 수 있다.

본 발명의 하나의 관점은 화장료 조성물에 관한 것이다.

일 구체예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 엄나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 느릅나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 및 비타민나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부;를 포함한다.

상기 엄나무 추출물 및 비타민나무 추출물의 함량과 느릅나무 추출물의 함량비는 1:1 내지 3:1일 수 있다.

상기 화장료 조성물은 스테아린산 10 내지 20 중량부; 세탄올 0.1 내지 3 중량부; 프로필렌글리콜 1 내지 5 중량부; 및 글리세린 3 내지 8 중량부;를 더 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 에탄올 5 내지 15 중량부; 폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄 0.1 내지 3 중량부; 글리세린 3 내지 8 중량부; 및 1,3-부틸렌글리콜 4 내지 7 중량부;를 더 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 와셀린 1 내지 3 중량부; 세스퀴올레인산소르비탄 0.1 내지 1.5 중량부; 및 카르복시비닐폴리머 15 내지 20 중량부;를 더 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 프로필렌글리콜 5 내지 15 중량부; 글리세린 5 내지 15 중량부; 히아루론산나트륨 수용액(1%) 3 내지 8 중량부; 및 에탄올 3 내지 8 중량부;를 더 포함할 수 있다.

상기 엄나무 추출물, 느릅나무 추출물 및 비타민나무 추출물은 120℃ 내지 131℃ 및 1.2기압 내지 2.8기압에서 고온 고압 증류로 추출한 것일 수 있다.

본 발명의 다른 관점은 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.

일 구체예에 따르면, 상기 화장료 조성물의 제조방법은 엄나무, 느릅나무 및 비타민나무 각각 100 중량부에 물 2000 내지 8000 중량부를 혼합하여 120℃ 내지 131℃ 및 1.2기압 내지 2.8기압에서 고온 고압 증류하여 추출물 수득하는 단계; 상기 추출물을 여과기로 여과하는 단계; 상기 여과한 액상의 추출물을 -70℃ 내지 -40℃, 5 mmTorr 내지 30 mmTorr에서 10시간 내지 30시간 동결건조하는 단계; 및 스테아린산, 세탄올, 프로필렌글리콜, 글리세린, 에탄올, 폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄, 1,3-부틸렌글리콜, 세스퀴올레인산소르비탄, 카르복시비닐폴리머 및 히아루론산나트륨 수용액(1%) 중 하나 이상을 더 혼합하는 단계;를 포함할 수 있다.

본 발명은 피부질환의 일종인 종기, 여드름 등에 효과가 있고, 피부미백 및 피부 진정효과를 기대할 수 있을 뿐만 아니라 부작용이 최소화된 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 효과를 갖는다.

도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 화장료 조성물의 비타민나무 잎 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과에 대한 실험 결과를 그래프로 간단히 나타낸 것이다.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시 예를 가질 수 있는 바, 특정 실시 예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에서 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해 되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.

본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.

제1, 제2 등의 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되어서는 안 된다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.

또한, 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. 또한, 첨부된 도면은 본 발명의 사상을 쉽게 이해할 수 있도록 하기 위한 것일 뿐, 첨부된 도면에 의해 본 발명의 사상이 제한되는 것으로 해석되어서는 아니됨을 유의해야 한다.

또한, 본 명세서 내의 중량부는 각 함량 사이의 비율을 나타낼 수 있고, 또는 중량%의 의미로 사용될 수도 있다.

화장료 조성물

본 발명의 화장료 조성물은 엄나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 느릅나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부; 및 비타민나무 추출물 0.05 내지 0.5 중량부;를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 엄나무, 느릅나무, 비타민나무의 추출물 함유함으로써 피부 외용연고나 로션 등의 화장료를 제조하여 사람의 피부에 도포하였을 때 피부 정돈/피지 조절/모공 관리 기능(예를 들어 과잉 피지와 오래된 각질을 관리하여 주며 모공을 축소시킴), 피부 진정 기능(예를 들어 피부 수렴 및 진정 작용이 우수하여, 수분 유지를 증진시켜 피부에 부드러움 느낌을 부여함), 피부 재생 기능(예를 들어 피부 유연화 및 손상된 피부 조직의 치유에 효과적임), 여드름균 억제 기능이 우수하다.

상기 엄나무(Kalopanax pictus)는 두릅나무과에 속하는 활엽수로서 개두릅나무, 엄나무, 엉개나무 등의 이름으로 불려지며, 어린 순에는 각종 비타민과 무기질, 사포닌 등이 함유되어 있어 뿌리와 함께 식용하고, 껍질은 약용으로 사용한다. 예부터 허리와 다리를 쓰지 못하고 마비되는 것을 예방한다고 하여 관절염이나 신경통 등에 사용되어 왔으며, 최근에는 엄나무 햇순의 데침에 영양학적 특성변화, 잎 추출물의 항산화효과와 줄기로부터 항산화 활성물질의 분리동정 등 많은 연구가 보고되고 있다.

그리고, 본 발명의 발명자들이 천연에서 자생하는 동식물들을 대상으로 우수한 라디칼 소거제를 개발하고자 광범위한 전통한방 고서(古書) 및 민간요법 등을 조사하여 연구를 거듭한 결과, 느릅나무에 매우 강력한 라디칼 소거 효과가 있음을 밝혀 내었고, 느릅나무는 유해한 활성 라디칼의 소거 능력과 주름 방지 효과가 우수한 효과가 있는 것을 확인하였다.

상기 엄나무 추출물은 0.05 내지 0.5 중량부, 구체적으로 0.1 내지 0.3 중량부 포함될 수 있다. 상기 함량 범위에서 항산화 효과가 우수하면서도 피부자극을 최소화할 수 있는 장점이 있다.

상기 비타민나무는 구체적으로 비타민나무의 열매의 추출물을 사용할 수 있다. 비타민나무(Hippophae rhamnoides 산자나무)는 보리수과에 속하는 관목으로서 100 여종 이상의 성분을 포함하고 있으며, 특히 비타민(A, B, C, E, F, K)등 유효한 성분을 많이 함유하고 있다. 겨울철 추위 및 여름철 고온에서도 잘 자라며, 척박한 지대에서도 잘 자라는 강한 적응성을 지녔다.

비타민나무는 항산화 활성측정 및 지방산 함량 및 암 예방, 면역 체계 분야 등 다양한 연구 분야가 이루어지고 있으며 비타민나무 열매에 베타카로틴 성분이 함유하고 있다고 보고된 바 있다. 또한 비타민나무 잎의 기기분석을 통해 유효성분을 측정하고 있으며, 비타민나무로 다양한 식품을 만들어 사용하고 있으나, 국내에서는 아직 그 연구가 활발하게 이루어지지 않고 있다.

상기 비타민나무는 0.05 내지 0.5 중량부, 구체적으로 0.1 내지 0.3 중량부 포함될 수 있다. 상기 함량 범위에서 항균 효과 및 미백 효과가 우수하면서도 피부자극을 최소화할 수 있는 장점이 있다.

상기 느릅나무는 참느릅나무(Ulmus parvifolia JACQ), 왕느릅나무(Ulmus macrocarpa HANCE), 큰잎느릅나무(Ulmus macrocarpa var, macrophylla NAK), 당느릅나무(Ulmus davidiana PLANCH), 느릅나무(Ulmus davidiana var japonica NAK) 중 어느 것을 사용하여도 무방하며, 특히 느릅나무와 큰잎느릅나무를 사용하는 것이 좋다. 전통적으로 느릅나무는 이수(利水), 소종(消腫)작용이 있어 한방에서 임질, 수종, 유선염 등에 사용하여 왔다. (원색천연약물대사전, 남산당, 1989)

특히, 본 발명의 발명자는 상기 느릅나무의 부스럼 및 종기의 발생을 방지하고, 피부 진정 효과가 있는 것을 밝혀 내었다.

상기 엄나무 추출물은 맵고 찬 성질을 가지고 있어, 화장료 조성물에 오랜 기간 또는 과하게 사용될 경우 피부 자극을 일으킬 우려가 있고, 상기 비타민나무 역시 산도로 인해 민감한 피부에 부작용을 일으키는 문제가 있다.

상기 느릅나무 추출물은 엄나무 및/또는 비타민나무의 부작용을 최소화하는 효과가 있다.

상기 느릅나무 추출물은 0.05 내지 0.5 중량부, 구체적으로 0.1 내지 0.3 중량부 포함될 수 있으며, 상기 함량범위에서 노화방지, 피부자극 최소화의 효과가 우수하다.

또한, 상기 엄나무 추출물 및 비타민나무 추출물의 함량과 느릅나무 추출물의 함량비는 1:1 내지 3:1일 수 있다. 상기 함량비 범위에서 항산화 효과, 노화방지, 항균효과 및 피부자극 최소화의 밸런스가 우수하다.

일 구체예에서, 상기 화장료 조성물은 스테아린산 10 내지 20 중량부; 세탄올 0.1 내지 3 중량부; 프로필렌글리콜 1 내지 5 중량부; 및 글리세린 3 내지 8 중량부;를 더 포함하여 화장료 중 크림을 제조할 수 있다. 더욱 구체적으로 상기 크림은 수산화칼륨, 방부제, 향수 및 정제수를 더 포함할 수 있다.

다른 구체예에서, 상기 화장료 조성물은 에탄올 5 내지 15 중량부; 폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄 0.1 내지 3 중량부; 글리세린 3 내지 8 중량부; 및 1,3-부틸렌글리콜 4 내지 7 중량부;를 더 포함하여 화장료 중 유연화장수를 제조할 수 있다. 더욱 구체적으로 상기 유연 화장수는 파라옥시안식향산메칠, 향, 색소 및 정제수를 더 포함할 수 있다.

또 다른 구체예에서, 와셀린(바셀린) 1 내지 3 중량부; 세스퀴올레인산소르비탄 0.1 내지 1.5 중량부; 및 카르복시비닐폴리머 15 내지 20 중량부;를 더 포함하여화장료 중 영양 화장수를 제조할 수 있다. 더욱 구체적으로 상기 영양 화장수는 폴리옥시에틸렌올레일에칠, 파라옥시안식향산메칠, 프로필렌글리콜, 에탄올, 수산화칼륨, 향, 색소 및 정제수를 더 포함할 수 있다.

또 다른 구체예에서, 프로필렌글리콜 5 내지 15 중량부; 글리세린 5 내지 15 중량부; 히아루론산나트륨 수용액(1%) 3 내지 8 중량부; 및 에탄올 3 내지 8 중량부;를 더 포함하여 화장료 중 엣센스를 제조할 수 있다. 더욱 구체적으로 상기 엣센스는 폴리옥시에틸렌경화피마자유, 파라옥시안식향산메칠, 향 및 정제수를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 엄나무 추출물, 느릅나무 추출물 및 비타민나무 추출물은 120℃ 내지 131℃ 및 1.2기압 내지 2.8기압에서 고온 고압 증류로 추출한 것일 수 있으며, 하기 화장료 조성물의 제조방법을 참고할 수 있다.

화장료 조성물 제조방법

일 구체예에 따르면, 상기 화장료 조성물의 제조방법은 엄나무, 느릅나무 및 비타민나무 각각 100 중량부에 물 2000 내지 8000 중량부를 혼합하여 120℃ 내지 131℃ 및 1.2기압 내지 2.8기압에서 고온 고압 증류하여 추출물 수득하는 단계; 상기 추출물을 여과기로 여과하는 단계; 상기 여과한 액상의 추출물을 -70℃ 내지 -40℃, 5 mmTorr 내지 30 mmTorr에서 10시간 내지 30시간 동결건조하는 단계; 및 스테아린산, 세탄올, 프로필렌글리콜, 글리세린, 에탄올, 폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄, 1,3-부틸렌글리콜, 세스퀴올레인산소르비탄, 카르복시비닐폴리머, 히아루론산나트륨 수용액(1%), 향, 색소, 방부제 및 정제수 중 하나 이상을 더 혼합하는 단계;를 포함할 수 있다.

본 발명의 엄나무, 느릅나무 및 비타민나무의 추출물은 고온 고압 증류로 추출되어 엄나무, 느릅나무 및 비타민나무 유효성분을 손실 없이 그대로 포함할 수 있는 장점이 있다.

또한, 동결건조 단계를 거쳐 엄나무, 느릅나무 및 비타민나무의 유효성분 파괴를 최소화할 수 있다.

상기 스테아린산, 세탄올, 프로필렌글리콜, 글리세린, 에탄올, 폴리라우린산폴리옥시에틸렌소르비탄, 1,3-부틸렌글리콜, 세스퀴올레인산소르비탄, 카르복시비닐폴리머, 히아루론산나트륨 수용액(1%), 향, 색소, 방부제 및 정제수 중 하나 이상을 더 혼합은 상기 구체예들에 따라 적절히 혼합할 수 있고, 이로써 크림, 유연화장수, 영양화장수 및 엣센스의 제조가 가능하다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 바람직한 예시로 제시된 것이며 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석될 수는 없다.

여기에 기재되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다.

실시예

추출예: 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물 제조

엄나무, 느릅나무, 비타민나무 또는 각각의 열매를 125℃ 및 1.8기압의 고온 고압 조건에서 증류하여 각각의 추출물을 수득하였고, 상기 추출물은 여과기(미도시)를 통해 여과하였다.

각각의 상기 액상의 추출물을 -60℃, 23mmTorr에서 20시간 동안 동결 건조하여 분말 형태로 제조하였다.

제조예 1: 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물을 함유하는 화장료 중 크림의 제조예

하기 표 1에서 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물은 상기 추출예의 것을 말한다.

비교예 1

비교예 1은 상기 제조예 1에서 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물을 포함하지 않고 정제수로 대체한 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

비교예 2

비교예 2는 상기 제조예 1에서 느릅나무 추출물을 포함하지 않고 정제수로 대체한 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

제조예 2: 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물을 함유하는 화장료 중 유연화장수의 제조예

하기 표 2에서 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물은 상기 추출예의 것을 말한다.

제조예 3: 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물을 함유하는 화장료 중 영양화장수의 제조예

하기 표 3에서 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물은 상기 추출예의 것을 말한다.

제조예 4: 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물을 함유하는 화장료 중 엣센스의 제조예

하기 표 4에서 엄나무, 느릅나무, 비타민나무 추출물은 상기 추출예의 것을 말한다.

실험예 1: 엄나무 추출물의 항산화효과 시험(DPPH 테스트)

엄나무 추출물의 항산화 효과를 알아보기 위하여, 유리 라디칼인 DPPH(1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질; 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)의 환원에 의해(항산화제는 산화됨) 발생되는 흡광도의 변화를 통해 DPPH 산화 억제 효능을 비교 측정함으로써 항산화능을 평가하는 방법으로 수행하였다.

100μM(in 에탄올) DPPH 용액 190㎕와 제조된 엄나무 추출물 및 양성 대조군을 각각 10㎕씩 넣어 반응액을 만들고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 양성 대조군으로는 널리 사용하고 있는 합성 항산화제인 트롤록스(Trolox)를 사용하였다. 각 물질의 DPPH 분석 결과는 하기 표 5에 나타내었으며, IC50은 첨가한 시료에 의해 흡광도가 50％ 감소했을 때의 시료 농도를 의미한다.

실험예 2: 느릅나무 추출물의 노화방지에 대한 효과 시험

7주된 털없는 쥐를 물과 먹이에는 제한을 두지 않고, 자외선을 방출하지 않는 불빛에 두었다. 쥐는 8마리를 1군으로 하여 4군으로 하였다. 제 1군은 자외선을 조사하지 않고, 제 2, 3, 4군은 자외선을 조사하였다. 자외선은 웨스팅하우스 FS-40 썬램프(Westinghouse FS-40 sunlamp)(280-400nm)를 사용하여 쥐의 등에서 16cm정도 떨어진 곳에서 조사했으며, 일주일에 3차례 10주간 지속하였다. 10주간 총 자외선 조사량은 35J/cm 2 정도로 하였다. 10주 후, 제 2군은 그대로 두고 제 3군에는 비교예 1에 의해 제조한 크림을, 제 4군에는 제조예 1에 의해 제조한 크림을 1ml씩 주 5회, 10주간 도포하였다. 각 군에 대하여 리플리카(replica)를 만들어 주름의 정도에 따라 0-4까지의 점수를 내었다. 0은 주름이 없는 것이고, 4는 주름이 깊고, 많이 늘어진 상태이다. 수치 판정은 시험자 20명을 선정하여 각리플리카가 어느 군의 것인지 알지 못하게 한 상태에서 수치를 정하게 하는 맹검법으로하여, 얻은 각 수치의 평균값으로 하여 표 6에 나타내었다.

제 1군: UV 조사하지 않은 군

제 2군: UV 조사 후 시료를 처리하지 않은 군

제 3군: UV 조사 후 비교예 1을 처리한 군

제 4군: UV 조사 후 제조예 1을 처리한 군

실험예 3: 비타민나무 추출물의 항균 효능 시험

상기 추출예에 따라 제조된 비타민나무 추출물을 대상으로 항균성을 시험하였다. 시험균주는 Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichiacoli ATCC 8739, Pseudomonas aerugnosa ATCC 9027, Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC16404 등 5가지 균주를 사용하였다. 시험방법은 보존 중인 세균 E coli, S. aureus, P aeruginosa를 대두카제인소화액체배지(Trypticase Soy Broth)에 접종하여 30~35℃ 에서 24시간동안 배양하였다. 진균 중 C. albicans에 대해서는 사브로ㅇ포도당액체배지(Sabouraud Dextrose Broth)에 접종하여 20~25℃에서 48시간동안 배양하였다. 배양된 시험 균액을 원심분리하여 배지를 제거하고 멸균 생리식염수를 이용하여 세정한 후,

개/㎖의 농도가 되도록 조정하여 접종균액으로 사용하였다. A niger에 대해서는 사브로·포도당한천배지(Sabouraud Dextrose Agar)에 접종하여 20~25℃에서 7일 동안 배양하였다. 배양된 A. niger를 0.05% polysorbate 80 첨가 멸균 생리식염수를 이용하여

개/㎖의 포자 부유액으로 조제하여 접종균액으로 사용하였다. 시험물질 200㎖에 초기 접종균수가

개/㎖가 되도록 각각의 준비된 시험균액을 0.2㎖씩 접종한 후 상온의 암소에서 보관하였다. 보관 중인 각각의 검체를 접종 후 0일, 12일, 26일이 되는 날 생균수를 측정하고 색조나 냄새 등의 변화를 관찰하여 결과를 기록하였다. 단, 이때 모든 실험의 최초 희석 단계에서는 D/E Neutralizing Broth (DIFCO)를 이용하여 중화시키는 과정을 거쳐 시험을 실시하였으며 희석액으로는 멸균 생리식염수를 사용하였다.

실험 후 배양은 세균의 경우 30~35℃ 에서 24시간동안 배양하였고, C albicans는 20~25℃ 에서 48시간, Aniger의 경우에는 20~25℃ 에서 7일간 배양하였다.

배양 후 배지에서 세균이 증식한 경우, 배지상의 균수에 희석배수를 곱하여 산출하였으며, 배지에서 세균이 증식하지 않을 경우는 중화단계에서 이루어진 희석배수를 곱하여 「10 미만 (<10)」으로 표시하였다.

생균수 계산식은 「N(생균수) = C(집락수) x D(희석배수) x V(추출 단계에서 사용된 D/E Neutralizing Broth의 희석비율(10 배)」이며, 보존력의 판정은 아래 표 7을 기준으로 하였다.

그 결과는 하기 표 8과 같다.

(단위: CFU/㎖)

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 비타민나무 열매의 추출물의 경우, 대장균(E. coli), 황색포도상구균(S. aureus) 및 녹농균(P. aerinosa) 3종에 대한 항균효과가 뛰어난 반면, 진균인 효모균(C. albicans)과 사상균(A. niger) 에 대해서는 방부 효능이 낮은 것으로 확인되었다.

실험예 4: 비타민나무 추출물의 미백 효능 시험

추출예에 따라 제조된 비타민나무추출물의 처리 농도는 5, 10, 20, 50, 100 ㎍/㎖의 양으로 사용하였고, 양성대조군으로서 알부틴(Arbutin)을 상기 추출물과 동일한 양으로 사용하여 비교하였다. B16F10 세포주는 멜라닌을 합성하는 세포주이다. 멜라닌 세포주를 3 x 10^5으로 세포수를 측정한 후 seeding하였다. 80%이상의 멜라닌세포가 부착된 것을 확인한 후(16시간) 상기 추출물을 농도별로 48시간 처리하였다. 배양이 끝난 후 배지를 제거하고 PBS(Phosphated buffer saline)으로 세척하며 트립신을 처리하여 세포를 회수하였다. 그리고, 상기 회수한 세포를 hematocytometer를 이용하여 세포수를 측정한 후 5,000 ~ 10,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상등액을 제거하여 펠렛을 얻었다. 여기에 1N NaOH(10% DMSO 포함) 200ul를 첨가 후 80℃에서 1시간 방치하여 멜라닌을 완전히 녹인 후 405nm 흡광도 값을 구한 후 멜라닌 생성량을 비교하였다.

그 결과, 도 1 을 참조하면 양성대조군인 알부틴과 비교해 볼 때 비타민나무 잎 추출물의 멜라닌 형성 억제효능은 낮은 것으로 나타났고, 양성대조군인 알부틴과 비교해 볼 때 비타민나무 열매 추출물은 비슷하게 멜라닌을 억제하는 것으로 확인되어 미백 활성 효능을 가지는 것으로 조사되었다.

실험예 5

제조예 1-4로 제조된 각각의 화장료를 남40명, 여40명씩 총 80명을 선정하여 잠들기전 세안 후 2주간 매일 얼굴에 도포하여 피부진정(재생)/피부미백/여드름감소의 효과 중 어느 하나의 효과가 나타나는 것을 기반으로 뚜렷한 효과, 효과 있음, 차이 없음의 3단계로 평가하였으며, 그 실험결과는 표 9와 같다.

위의 표 9의 결과에서 볼 수 있듯이, 제조예 1-4에 따라 제조된 엄나무, 느릅나무, 비타민나무로부터 추출되는 추출물에서 선택되는 1종 이상의 유효 성분이 함유된 화장료는 피시험자 80명 중 71~78%가 피부진정(재생)/피부미백/여드름감소의 효과 중 어느 하나의 효과를 보였으며, 피부 내에서 어떤 부작용도 나타나지 않아, 안전하고 효과가 매우 뛰어난 화장료 조성물임을 알 수 있다.

실험예 6: 피부자극 관능 평가

상기 제조예 1 및 비교예 2의 크림 20g을 하루 4번 4시간 마다 골고루 도포하여 바르는 것을 피시험자 80명(제조예 1 40명 및 비교예 1 40명)에게 수행한 뒤 피부의 붉은 정도를 기준으로 5점 채점법으로 크림의 피부 자극을 관능 평가 하고 평균을 내어 하기 표 10에 나타내었다. 점수가 높을수록 피부 자극이 낮은 것을 의미한다.

상기 표 10에 나타난 바와 같이, 느릅나무 추출물은 엄나무 및/또는 비타민나무에 의해 유발될 수 있는 피부자극을 진정시키는 효과가 있음을 알 수 있다.

이상 본 발명의 실시예들을 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.

Claims (8)

1. 엄나무 열매 추출물 0.1 내지 0.3 중량%;
   느릅나무 열매 추출물 0.1 내지 0.3 중량%;
   비타민나무 열매 추출물 0.1 내지 0.3 중량%;
   스테아린산 10 내지 20 중량%;
   세탄올 0.1 내지 3 중량%;
   프로필렌글리콜 1 내지 5 중량%; 및
   글리세린 3 내지 8 중량%;를 포함하며,
   상기 엄나무 열매 추출물 및 상기 비타민나무 열매 추출물의 함량과 느릅나무 열매 추출물의 함량비는 1:1 내지 3:1이며,
   상기 엄나무 열매 추출물, 상기 느릅나무 열매 추출물 및 상기 비타민나무 열매 추출물은 120~131℃ 및 1.2~2.8 기압에서 물로 증류 추출된 것을 특징으로 하는 화장료 크림 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   수산화칼륨, 방부제, 향수 및 정제수를 더 포함하는 화장료 크림 조성물.
   
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 제1항 또는 제2항의 화장료 크림 조성물의 제조 방법으로서,
   엄나무 열매, 느릅나무 열매 및 비타민나무 열매에 물을 혼합하고 120℃ 내지 131℃ 및 1.2 기압 내지 2.8 기압에서 증류하여 추출물 수득하는 단계;
   상기 추출물을 여과기로 여과하는 단계;
   상기 여과한 액상의 추출물을 동결건조하는 단계; 및
   스테아린산, 세탄올, 프로필렌글리콜 및 글리세린을 더 혼합하는 단계;를 포함하는 화장료 크림 조성물의 제조 방법.
   
7. 제6항에 있어서,
   상기 추출물은 엄나무 열매, 느릅나무 열매 및 비타민나무 열매 각각 100 중량부에 물 2,000 내지 8,000 중량부를 혼합 및 증류하여 수득되는 화장료 크림 조성물의 제조 방법.
   
8. 제6항에 있어서,
   상기 동결건조는 -70℃ 내지 -40℃ 및 5 mmTorr 내지 30 mmTorr에서 10 시간 내지 30 시간 동안 수행되는 화장료 크림 조성물의 제조 방법.

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