KR102376345B1 - 상처 치료용 괴사조직제거 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 수성 겔 형태의 괴사조직제거 조성물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 건조 형태로 존재하는 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물, 및 수성 겔 담체를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며, 여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물을 수성 겔 담체와 혼합하여 만성 상처의 괴사조직제거 및 치료에 유용한 괴사조직제거 조성물을 형성시키는 것인 괴사조직제거 조성물에 관한 것이다.

Description

상처 치료용 괴사조직제거 조성물

본 발명은 괴사조직제거(debriding) 조성물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 건조 형태인 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소(proteolytic enzyme) 혼합물, 및 수성 겔 담체를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며, 여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물을 수성 겔 담체와 혼합하여 만성 상처의 괴사조직제거(debridement) 및 치료에 유용한 괴사조직제거 조성물을 형성시키는 것인 괴사조직제거 조성물에 관한 것이다.

만성이거나 치유하기 어려운 상처는 흔한 병으로, 매년 수백만 명의 사람들이 고생하고 있다. 대다수의 만성 상처는 피부 및 피하 조직으로의 혈류를 감소시키는 국소적 또는 일반화된 혈관 부전에 의해 유발된다. 만성이거나 치유하기 어려운 상처의 가장 흔한 유형은 압박 궤양 (욕창 또는 "침대 앓이(bed sores"), 당뇨병성 궤양, 동맥 궤양, 정맥 궤양, 및 수술 후/외상 후 궤양을 포함한다.

만성 상처는 피부에 심한 손상을 결과한다. 이 손상은 피부의 전체 두께를 수반할 수 있으며 종종 더 깊은 조직을 포함할 수 있다. 손상된 피부는 건강한 피부의 해부학적 조직화(anatomic organization)를 상실하고, 각질층은 적어도 부분적으로 파괴되고 결과적으로 피부의 내층은 더 이상 외부 환경으로부터 보호되지 않는다. 게다가, 손상된 피부는 전형적으로, 치유를 가능하게 하기 위해 제거되어야 하는 가피(eschar), 병든 및/또는 비정상 세포를 함유한다. 가피를 그대로 남겨두면 이웃한, 손상되지 않은 조직으로 손상을 확장시키고 심화시킨다. 이 가피는 또한, 생명을 위협할 수 있는 패혈증, 오염 및 감염의 원천 및 박테리아 성장을 위한 매체의 역할을 한다

외과적 처치, 기계적 수단 (드레싱 변경, 입욕), 자가 융해(autolytic) 절차 (침연(maceration)을 촉진시키는 드레싱) 또는 효소적 수단에 의해, "괴사조직제거"로도 공지된, 가피, 병든 및/또는 비정상 세포의 제거가 수행된다. 수술은 작은 괴사 부위를 전체 손상된 피부에서 절제하는 괴사조직제거의 가장 흔한 처치 중 하나이다. 이 방법은 접하지 않는(non-tangential) 작은 표면으로 제한된다. 이는 또한, 보존된 경우, 자연적이고 자발적인 치유 과정의 원천의 역할을 할 수 있는 건강한 조직의 큰 분획의 제거를 수반한다. 외과적 처치는 또한 비용이 더 많이 들고 의료 자원을 필요로 한다.

효소적 괴사조직제거(enzymatic debridement)는 주로 덜 고통스럽고, 더 선택적이며 잘 훈련된 의료인의 도움을 필요로 하지 않기 때문에 기계적 및 외과적 괴사조직제거에 비해 유리하다. 괴사조직제거를 위한 단백질 분해 효소의 적용은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 이들 효소는 박테리아로부터 단리된 것들 및 식물 공급원, 예컨대 파파야 (파파인), 무화과 (피신) 및 파인애플 (브로멜라인)에서 일반적으로 발견되는 것들을 포함한다. 포유동물 숙주에서 생존 가능한(viable) 조직으로부터 생존 가능하지 않은(non-viable), 특히 가피 조직의 소화, 해부 및 분리에 유용한 파인애플 식물로부터 유래된 가수분해 효소는, 그 중에서도, 미국 특허 번호 4,197,291; 4,226,854; 4,307,081; 4,329,430 및 5,830,739에 기재되어 있다.

단백질 분해 효소의 국소 적용으로부터 수득된 치료 활성의 정도는, 특히, 효소의 고유한 촉매 특성에 의해 좌우된다. 단백질 분해 효소를 포함하는 조성물의 국소 사용과 연관된 주요 문제점은 효소의 촉매 활성이 병변 부위에서의 전형적인 낮은 pH, 드레싱의 표면 및/또는 상처 기부(wound bed)의 표면으로의 효소 분자의 흡착, 및 상처 삼출물 내의 모이어티에 의한 효소 활성의 억제로 인해 급속히 약화된다는 것이다. 따라서, 안정적인 효소 제제를 수득하는 것은 복잡하다.

몇몇 연고는 가피의 괴사조직제거용으로 현재 시판되고 있다. 이들 연고는 전형적으로, 원하는 상처의 괴사조직제거를 달성하기 위해 수개월 동안 매일 적용된다.

볼튼(Bolton) 등의 미국 특허 번호 4,668,228은, 가피 및 괴사 조직의 괴사조직제거에 유용한 단백질 분해 효소, 예를 들어, 서브틸리신, 브로멜라인을 폐색성(occlusive) 또는 반-폐색성(semi-occlusive) 외과용 접착 테이프의 접착성 매스 표면(adhesive mass surface) 상에 건조 분말화된 형태로 함유하는 괴사조직제거 테이프를 개시한다. 미국 특허 번호 4,668,228에 따르면, 괴사조직제거 테이프가 화상을 입은 표면에 적용될 때, 폐쇄성 테이프 배킹(backing)을 관통할 수 없는 상처로부터의 물은 괴사조직제거 효소를 활성화시킨다.

볼튼 등의 미국 특허 번호 4,784,653은, 궤양 및 화상 유형의 상처를 치료하는데 사용하기 위한 흡수성 접착 드레싱(absorbent adhesive dressing)으로서, 상기 드레싱이 외부 층으로서의 폐쇄성 필름, 중간 층으로서의 섬유의 흡수성 층, 및 친수성 및 소수성 특성을 둘 다 갖는 아크릴계 중합체로 제조된 내부의 상처를 향하는 접착 층으로서의 습윤 접착성 접착제(wet-stick adhesive)를 갖는 3층 샌드위치 유형의 구조체를 포함하는 것인 흡수성 접착 드레싱을 개시한다. 미국 특허 번호 4,784,653에 따르면, 괴사조직제거 효소는, 필요한 경우, 접착성 매스에 첨가될 수 있다.

스턴(Stern) 등의 미국 특허 번호 5,514,370은, 비-수성 부형제 중 고농도의 콜라게나제를 함유하는 국소 적용용 제약 조성물을 개시한다. 미국 특허 번호 5,514,370은 상처에 비-수성 부형제 및 콜라게나제로 본질적으로 이루어진 조성물을 적용하는 단계를 포함하는 상처 치료 방법을 추가로 개시한다.

롤프(Rolf) 등의 미국 특허 번호 5,804,213은, 상처를 드레싱하기 위해 부을 수 있는, 수계 천연 또는 합성 히드로콜로이드성 중합체성 겔을 형성시키기 위한 건조 미립자 고형물을 포함하는 미리 포장된(prepackaged) 드레싱을 개시한다. 미국 특허 번호 5,804,213에 따르면, 하나의 건조 성분은 수분과는 별도로 밀봉된 용기의 구획에 함유되어 있는 히드로콜로이드이다. 물과 혼합한 후, 혼합물은 상처에 부어지거나 퍼질 수 있게 하기에 충분히 유동적이다. 상처에 적용한 후, 수화된 히드로콜로이드성 분산액은 응고되기 시작하여 물, 히드로콜로이드 및 생물학적 활성 구성성분으로 이루어진 고형의 자립형(self-supporting) 가요성(flexible) 드레싱을 형성시킨다.

홉슨(Hobson) 등의 미국 특허 번호 6,548,556는, 단백질 분해 효소 및 무수 친수성 폴록사머 담체를 조합하여 사용하는 효소 무수 친수성 괴사조직제거제(debrider)를 개시한다.

칼드웰(Caldwell) 등의 미국 특허 번호 8,062,661은 피부 상처를 히드로겔 패치 괴사조직제거 조성물로 접촉시키고 상기 피부 상처로부터 히드로겔 패치 괴사조직제거 조성물을 제거하여 피부 상처로부터 이물질을 제거하는 것을 포함하는, 피부 상처의 괴사조직제거 방법을 개시한다.

본 발명의 출원인에게 양도된 국제 출원 공개 번호 WO 2006/054309는 가피 조직의 괴사조직제거에서 및 상처 치유에서 유용한 브로멜라인으로부터 수득된 괴사조직제거 조성물을 개시한다.

본 발명의 출원인에게 양도된 국제 출원 공개 번호 WO 2013/011514는 듀피트렌병(Dupuytren's disease) 및 페이로니병(Peyronie's disease)을 포함한, 과량의 콜라겐 침착과 연관되어 있는 결합 조직 질환의 치료를 위해 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 추출물을 개시한다.

상처, 특히 만성 상처의 개선된 괴사조직제거를 제공하는 효소적 괴사조직제거 조성물에 대한 오랬 동안 느껴지고 충족되지 않은 필요성이 있다.

발명의 개요

본 발명은 건조 형태인 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소의 혼합물, pH 조정제, 및 수성 겔 담체를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며, 여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소의 혼합물을 pH 조정제 및 수성 겔 담체와 혼합하여 특정 점도 및 특정 pH를 갖는 겔 형태의 괴사조직제거 조성물을 형성시키는 것인 괴사조직제거 조성물을 제공한다. 본 발명은 본 발명의 괴사조직제거 조성물을 상처 부위에 적용함으로써, 상처의 괴사조직제거를 달성하는 단계를 포함하는, 상처, 특히 만성 상처의 괴사조직제거 방법을 추가로 제공한다.

상처 괴사조직제거는 상처 기부 준비((wound bed preparation) (WBP)의 핵심 과정이며 상처 치유를 촉진시키고 상처 봉합(wound closure)을 완료시킬 수 있는 만성 상처 관리에서의 필수적인 개입으로서 간주된다.

샌틸(Santyl)^® 연고와 같은 만성 상처의 치료를 위해 현재 이용 가능한 효소적 괴사조직제거제는 가피 제거를 달성하기 위해, 장기간 동안, 예를 들어 3개월, 6개월 또는 심지어 12개월 동안 매일 적용되는 것으로 공지되어 있다.

10% (w/w)의 양으로 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물, 2.2% (w/w)의 양의 카르보폴(Carbopol)^® 980NF, 이염기성 인산나트륨 및 물을 포함하는 겔 제제가 단일회 4시간 적용 후 화상 상처 괴사조직제거에 효과적인 것으로 본 발명의 출원인에 의해 이전에 밝혀졌다. 카르보폴^® 980NF의 함량으로 인해, 그 겔 제제는 55,000 센티푸아즈 (cP)에서 120,000C p까지 범위의 높은 점도를 가졌다.

(i) 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 5% (w/w)의 양으로, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물 (본원에서 API로 명명됨); (ii) pH 조정제; 및 (iii) 아크릴산의 가교결합된 중합체, 극성 공-용매, 및 물을 포함하는 담체를 포함하는 약 10,000 센티푸아즈 (cP) 내지 약 45,000 cP 범위의 점도를 갖는 수성 겔 제제; 이러한 겔 제제가 만성 상처의 가피 조직으로의 API의 관통을 가능하게 하여 생존 가능하지 않은 조직을 효과적으로 괴사조직제거하도록 하였다는 것이 본 발명에 이르러 처음으로 개시된다. 본 발명의 겔 제제는 며칠 이내에 만성 상처의 가피 괴사조직제거를 가능하게 하였으며, 그와 같이 신속하고 효과적인 효소적 괴사조직제거제로서, 특히 만성이거나 치유하기 어려운 상처에 매우 유용하다.

인간 대상체에서 만성 상처를 괴사조직제거하기 위한 본 발명의 수성 겔 제제의 효능이 정맥성 다리 궤양, 당뇨병성 하지 궤양 및 외상/수술 후 상처와 같은 다양한 병인의 만성 상처에서 입증되었음이 추가로 개시된다. 그러나, 정맥성 다리 궤양 및 당뇨병성 하지 궤양의 괴사조직제거에서 예기치 않게 더 높은 효능이 입증되었다.

본 발명의 수성 겔 제제를 인간 대상체의 만성 상처에 4시간/일 동안 최대 연속 10일 동안 적용하면 API가 없는 수성 겔 제제, 즉 겔 비히클로 관찰된 것들과 본질적으로 유사한 경미하거나 중등도의 유해 효과를 가진 완전한 가피/딱지(slough) 제거를 결과하였다는 것이 본 발명에 이르러 개시된다. 유해 효과는 일시적이었고 환자들은 며칠 이내에 회복되었다. 따라서, 본 발명의 수성 겔 제제는 안전하고 내약성이 우수하다.

본 발명의 수성 겔 제제에서 보다 적은 양의 API가 각각의 적용당 더 긴 지속시간 동안 만성 상처에 적용되는 경우 효과적인 가피 괴사조직제거를 달성할 수 있다는 것이 본 발명에 이르러 추가로 개시된다. 따라서, 본 발명은 수성 겔 제제 중 API의 5% (w/w) 또는 훨씬 더 적은 양의 API, 예를 들어 2% (w/w) 또는 심지어 1% (w/w)를 1-4 주의 치료 기간 동안에 각각의 적용당 24시간, 48시간, 또는 심지어 더 장기간 동안 만성 상처에 적용하여 완전한 상처 괴사조직제거를 달성할 수 있도록 한다는 것을 개시한다.

본 발명의 수성 겔 제제에 첨가된 극성 공-용매 글리세롤은 피부 자극을 감소시켰음이 추가로 개시된다. 따라서, 본 발명의 수성 겔 제제는 극성 공-용매, 바람직하게는 글리세롤을 포함한다.

본 발명의 수성 겔 제제는 일부 실시양태에서 약 6.5 내지 약 8.0 범위의 pH, 예를 들어 약 7.0의 pH를 갖는다. 이 pH 범위에서, 단백질 분해 효소의 활성은 본질적으로 최대이다. 이들 pH를 달성하기 위해, 본 발명의 수성 겔 제제는 pH 조정제를 포함하여, 매우 효과적인 효소적 괴사조직제거제를 수득할 수 있게 한다.

따라서, 본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 "괴사조직제거 조성물"로 또한 표시되는, 본 발명의 수성 겔 제제는, 상처, 특히 만성이거나 치유하기 어려운 상처의 괴사조직제거 및 치료를 위한 신속하고, 효과적이며, 안전하며, 내약성이 우수한 효소 작용제로서 매우 유리하다.

제1 측면에 따르면, 본 발명은,

(a) 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인(ananain) (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물 (상기 단백질 분해 효소 혼합물은 건조 또는 동결건조된 형태이다);

(b) pH 조정제; 및

(c) (i) 아크릴산의 가교결합된 중합체;

(ii) 극성 공-용매; 및

(iii) 물

을 포함하는 담체

를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며,

여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물을 pH 조정제 및 담체와 혼합하여 약 10,000 센티푸아즈 (cP) 내지 약 45,000 cP 범위의 점도, 및 약 6.0 내지 약 8.0 범위의 pH를 갖는 것을 특징으로 하는 겔 형태의 괴사조직제거 조성물을 형성시키며, 여기서 상기 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인, 괴사조직제거 조성물을 제공한다.

일부 실시양태에 따르면, 단백질 분해 효소 혼합물은 담체의 총 중량의 약 2% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로, 예컨대 담체의 총 중량의 약 2%, 2.5%, 3%, 3.5%, 4%, 5%, 6% 또는 약 7% (w/w)의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재한다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 추가 실시양태에 따르면, 단백질 분해 효소 혼합물은 약 1% (w/w) 내지 약 5% (w/w) 범위의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재한다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 단백질 분해 혼합물은 담체의 총 중량의 약 2.5% (w/w)의 양으로 존재한다. 또 다른 예시적인 실시양태에 따르면, 단백질 분해 혼합물은 담체의 총 중량의 5% (w/w)의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재한다.

추가의 실시양태에 따르면, pH 조정제는 인산나트륨, 탄산나트륨, 인산칼륨 및 탄산칼륨으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 한 실시양태에 따르면, pH 조정제는 단백질 분해 효소 혼합물과 함께 건조 형태로 존재한다. 또 다른 실시양태에 따르면, pH 조정제는 담체와 함께 존재한다. 예시적인 실시양태에 따르면, pH 조정제는 인산나트륨이다. 한 실시양태에 따르면, 인산나트륨은 무수 인산수소이나트륨이다. 추가의 실시양태에 따르면, 무수 인산수소이나트륨은 담체의 총 중량의 약 0.1% (w/w) 내지 약 2% (w/w) 범위의 양으로 존재한다. 특정 실시양태에 따르면, 무수 인산수소이나트륨은 담체의 총 중량의 약 0.25% (w/w)의 양으로 존재한다.

추가 실시양태에 따르면, 아크릴산의 가교결합된 중합체는 카르보머(carbomer)이다. 또 다른 실시양태에 따르면, 카르보머는 알릴 수크로스 또는 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 아크릴산의 중합체, 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 C₁₀-C₃₀ 알킬 아크릴레이트 및 아크릴산의 중합체, 폴리에틸렌 글리콜과 장쇄 알킬 산 에스테르의 블록 공중합체를 함유하는, 카르보머 단독중합체 또는 공중합체, 및 그의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

또 다른 실시양태에 따르면, 카르보머는 카르보폴^® 단독중합체, 카르보폴^® 공중합체, 카르보폴^® 혼성중합체 등으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

추가 실시양태에 따르면, 카르보머는, 카르보폴^® 980 NF, 카르보폴^® 71 G NF, 카르보폴^® 971P NF, 카르보폴^® 974P NF, 카르보폴^® 981 NF, 퍼뮬렌(PEMULEN)^TM TR-1 NF, 퍼뮬렌^TM TR-2 NF, 카르보폴^® ETD 2020 NF, 카르보폴^® 울트레즈(Ultrez) 10 NF, 카르보머 934 (카르보폴^® 934 NF), 카르보머 934P (카르보폴^® 934P NF), 카르보머 940 (카르보폴^® 940 NF), 카르보머 941 (카르보폴^® 941 NF) 및 카르보머 1342 (카르보폴^® 1342P NF)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 일부 실시양태에 따르면, 카르보머는 담체의 총 중량의 약 0.5% (w/w) 내지 약 1.5% (w/w) 범위의 양으로 존재하는 카르보폴^® 980 NF이다. 특정 실시양태에 따르면, 카르보폴^® 980 NF는 담체의 총 중량의 약 1% (w/w)의 양으로 존재한다.

또 다른 실시양태에 따르면, 극성 공-용매는 글리세롤, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리글리세롤, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 이소프로필 알콜, 및 그의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가 실시양태에 따르면 극성 c-용매는 담체의 총 중량의 약 2% (w/w) 내지 약 15% (w/w) 범위의 양으로 존재하는 글리세롤이다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 글리세롤은 담체의 총 중량의 10% (w/w)의 양으로 존재한다.

또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물의 점도는 약 10,000 cP 내지 약 30,000 cP, 대안적으로 약 15,000 cP 내지 약 25,000 cP 범위이다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 특정 실시양태에 따르면, 점도는 약 16,000 cP 내지 약 22,000 cP 범위이다.

또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물의 pH는 약 6.0 내지 약 7.0 범위이고, 대안적으로 pH는 약 7.0이다.

일부 실시양태에 따르면,

(a) 담체의 총 중량의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;

(b) pH 조정제;

(c) (i) 알릴 수크로스 또는 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 아크릴산의 중합체;

(ii) 글리세롤; 및

(iii) 물

을 포함하는 담체

를 포함하는 괴사조직제거 조성물.

추가 실시양태에 따르면,

(a) 담체의 총 중량의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;

(b) pH 조정제;

(c) (i) 담체의 총 중량의 약 0.5% 내지 약 1.5% (w/w) 범위의 양의 카르보폴^® 980 NF;

(ii) 글리세롤; 및

(iii) 물

을 포함하는 담체

를 포함하는 괴사조직제거 조성물.

추가 실시양태에 따르면,

(a) 담체의 총 중량의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로, 바람직하게는 약 1% (w/w) 내지 약 5% (w/w) 범위의 양으로 제1 용기에 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;

(b) (i) 담체의 총 중량의 약 0.9% (w/w)의 양의 카르보폴^® 980 NF;

(ii) 담체의 총 중량의 약 10% (w/w)의 양의 글리세롤;

(iii) 담체의 총 중량의 약 0.25% (w/w)의 양으로 존재하는 무수 인산수소이나트륨; 및

(iv) 물

을 포함하는 제2 용기에 존재하는 담체

를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며,

여기서 괴사조직제거 조성물의 점도가 약 15,000 cP 내지 약 25,000 cP 범위이고 pH가 약 6.0 내지 약 7.0 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 상처의 괴사조직제거를 필요로 하는 대상체의 상처 부위에 본 발명의 원리에 따른 괴사조직제거 조성물의 치료 유효량을 적용하는 단계를 포함하는, 상처의 괴사조직제거 방법을 제공한다.

일부 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물을 상처 부위에 적용하는 단계를 포함하는 방법으로, 상기 괴사조직제거 조성물이,

(a) 건조 또는 동결건조된 형태로 존재하는, 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;

(b) pH 조정제;

(c) (i) 아크릴산의 가교결합된 중합체;

(ii) 극성 공-용매; 및

(iii) 물

을 포함하는 담체

를 포함하며,

여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물을 pH 조정제 및 담체와 혼합하여 약 10,000 센티푸아즈 (cP) 내지 약 45,000 cP 범위의 점도, 및 약 6.0 내지 약 8.0 범위의 pH를 갖는 것을 특징으로 하는 겔 형태의 괴사조직제거 조성물을 형성시키며, 여기서 상기 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인 방법.

일부 실시양태에 따르면,

(a) 담체의 약 1% (w/w) 내지 약 7% (w/w) 범위의 양으로, 바람직하게는 약 1% (w/w) 내지 약 5% (w/w) 범위의 양으로 제1 용기에 건조 또는 동결건조된 형태로 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;

(b) (i) 담체의 총 중량의 약 0.9% (w/w)의 양의 카르보폴^® 980 NF;

(ii) 담체의 총 중량의 약 10% (w/w)의 양의 글리세롤;

(iii) 약 0.25% (w/w)의 양으로 무수 인산수소이나트륨; 및

(iv) 물

을 포함하는 제2 용기에 존재하는 담체

를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며,

여기서 조성물의 점도가 약 15,000 cP 내지 약 25,000 cP 범위이고 pH가 약 6.0 내지 약 7.0 범위인 것인 괴사조직제거 조성물을 적용하는 단계를 포함하는 방법.

추가 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물에 의해 괴사조직제거될 상처는 치유하기 어렵거나 만성인 상처이다. 추가 실시양태에 따르면, 치유하기 어렵거나 만성인 상처는 당뇨병성 궤양, 정맥 울혈 궤양, 동맥 부전 궤양, 압박 궤양, 수술 후 및 외상 후 상처로 이루어진 군으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 추가 실시양태에 따르면, 치유하기 어렵거나 만성인 상처는 당뇨병성 하지 궤양, 정맥성 다리 궤양, 수술 후 상처, 및 외상 후 상처로 이루어진 군으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 특정 실시양태에 따르면, 치유하기 어렵거나 만성인 상처는 당뇨병성 하지 궤양 또는 정맥성 다리 궤양이다.

추가 실시양태에 따르면, 치유하기 어렵거나 만성인 상처를 치료하기 위한 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회 적용의 요법으로 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 4-24 시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로, 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지, 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 4-24 시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 10회 적용의 요법에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 4시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다.

또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회 적용의 요법으로 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 24시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로, 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지, 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 24시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다, 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 10회 적용의 요법으로 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 24시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다.

추가 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회 적용의 요법으로 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 48시간 동안 또는 약 72시간 동안 또는 그 사이에 임의의 정수 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 추가 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로, 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지, 상처 부위에 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 48시간 동안 또는 약 48시간 동안 또는 그 사이에 임의의 정수 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 10회 적용의 요법으로 적용되며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 48시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다.

또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 1주 동안 1주 3회의 요법으로 만성 상처에 적용되며, 여기서 상기 괴사조직제거 조성물은 적용당 48시간 및 적용당 72시간으로 이루어진 군으로부터 선택된 지속시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 또 다른 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 적어도 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용 동안 1주 3회의 요법으로, 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지, 만성 상처에 적용되며, 상기 괴사조직제거 조성물은 적용당 48시간 및 적용당 72시간으로 이루어진 군으로부터 선택된 지속시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 한 예시적인 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 10회 적용의 요법으로 1주 3회 적용된다.

또 다른 실시양태에 따르면, 요법은 1회, 2회, 3회, 또는 그 초과회 또는 가피가 완전히 괴사조직제거되고/거나 상처 봉합이 수득될 때까지 반복된다. 치료 요법이 반복되는 경우, 치료는 연속적일 수 있거나 1일 이상, 1주 이상, 또는 1개월 이상의 간격을 둘 수 있다는 점에 주목하여야 한다. 부가적으로 또는 대안적으로, 가피가 다시 발생하고 상처 봉합이 아직 수득되지 않을 경우, 요법은 가피가 완전히 괴사조직제거되고/거나 상처 봉합이 수득될 때까지 1회, 2회, 또는 그 초과회 반복된다.

또 다른 실시양태에 따르면, 상기 방법은 대상체에게 마취제, 항박테리아제, 항진균제 및 항염증제로 이루어진 군으로부터 선택된 활성제를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 예를 들어, 마취제와 같은 활성제는 괴사조직제거 제제의 적용 전에, 괴사조직제거 제제의 적용과 병용하여, 또는 괴사조직제거 제제의 적용 후에 상처 부위에 국소 적용될 수 있거나, 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 상처 치료를 필요로 하는 대상체의 상처 부위에 본 발명의 원리에 따른 괴사조직제거 조성물의 치료 유효량을 적용하는, 상기에서 본원에 정의된 바와 같은 단계를 포함하는, 상처 치료 방법을 제공한다. 특정 실시양태에 따르면, 상처는 치유하기 어렵거나 만성인 상처이다.

추가 측면에 따르면, 본 발명은 상처 치유 또는 상처 봉합을 필요로 하는 대상체의 상처 부위에 본 발명의 원리에 따른 괴사조직제거 조성물의 치료 유효량을 적용하는, 상기에서 본원에 정의된 바와 같은 단계를 포함하는, 상처 치유 또는 상처 봉합 방법을 제공한다. 특정 실시양태에 따르면, 상처는 치유하기 어렵거나 만성인 상처이다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 상기에서 본원에 정의된 바와 같은, 상처의 괴사조직제거 방법에서 및/또는 상처 치료에서 및/또는 상처 치유에서 및/또는 상처 봉합에서 사용하기 위한 본 발명의 원리에 따른 괴사조직제거 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에 따르면, 상처는 치유하기 어렵거나 만성인 상처이다.

본 발명의 이들 및 다른 실시양태는 다음의 도면, 설명, 실시예 및 청구범위와 관련하여 더 잘 이해될 것이다.

도 1A 내지 도 1D는 돼지에서 유도된 만성 상처의 현미경 사진이다. 도 1A는 치료 전 만성 상처를 도시하고, 도 1B는 에스카르엑스 겔(EscharEX Gel) 3%로 11회 치료 후 만성 상처를 도시한다. 대조군으로서, 돼지에서 유도된 만성 상처 (도 1C)를 11회 치료 동안 겔 비히클(Gel Vehicle)로 치료하였다 (도 1D).
도 2A 내지 도 2C는 1시간 (도 2A), 4시간 (도 2B) 및 24시간 (도 2C) 동안 상처에 적용된 활성 제약 성분 (API)의 양의 함수로서 에스카르엑스 겔로 10회째 치료 후의 가피 백분율을 도시한다.
도 3A 내지 도 3C는 1시간 (도 3A), 4시간 (도 3B) 및 24시간 (도 3C) 동안 상처에 적용된 API의 양의 함수로서 에스카르엑스 겔로 10회째 치료 후의 가피의 곡선하 면적 (AUC)을 도시한다.
도 4A 내지 도 4B는 10회째 치료 후, 가피의 곡선하 면적 (AUC) (상부 패널), 가피의 백분율 (중간 패널) 및 소망도 함수(desirability function) (10회 치료 후 최저 AUC 및 최저 가피의 최적화; 하부 패널)의 이차 모델(quadratic model)을 API의 양의 함수로서 (도 4A) 및 치료 지속시간의 함수로서 (도 4B) 도시한다. 넓은 파선은 모델의 신뢰 구간 (95%)을 나타낸다.
도 5는 치료 의향(Intention-to-Treat) (ITT) 모집단(Population)에서 완전한 괴사조직제거까지의 시간을 나타낸다.
도 6은 ITT 모집단 내의 정맥성 다리 궤양을 앓고 있는 대상체에서 치료 군에 의한 완전한 괴사조직제거까지의 시간을 도시한다.
도 7은 ITT 모집단 내의 당뇨병성 하지 궤양을 앓고 있는 대상체에서 치료 군에 의한 완전한 괴사조직제거까지의 시간을 도시한다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 (i) 건조 또는 동결건조된 형태로 존재하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물; (ii) pH 조정제; 및 (iii) 아크릴산의 가교결합된 중합체, 극성 공-용매, 및 물을 포함하는 담체를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며, 여기서, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물을 pH 조정제 및 담체와 혼합하여 약 10,000 cP 내지 약 45,000 cP 범위의 점도, 및 약 6.0 내지 약 8.0 범위의 pH를 갖는 겔 형태의 괴사조직제거 조성물을 형성시키는 것인 괴사조직제거 조성물을 제공한다.

본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 사용된 바와 같은 용어 "브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물"은 브로멜라인으로부터 부분적으로 정제된 효소 제제를 지칭한다.

용어 "브로멜라인"은 상업적으로 구매할 수 있는 파인애플 식물의 줄기로부터 유래된 단백질 추출물을 지칭한다.

브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물 (데브라제(Debrase)® 또는 넥소브리드(NexoBrid)®라고도 함) 및 그의 제법은 WO 2006/054309 및 WO 2013/011514에 개시되어 있으며, 그 내용은 본원에서 완전히 설명된 것처럼 참조로 포함된다. 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물은 브로멜라인: 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)에 존재하는 시스테인 프로테아제 중 적어도 2종을 포함한다. 단백질 분해 혼합물은, 예를 들어, 아나나인 (EC 3.4.22.31) 전구체, 과실 브로멜라인 (EC 3.4.22.33) 전구체 및 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.31) 전구체와 같은 브로멜라인의 시스테인 프로테아제 전구체의 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다. 단백질 분해 혼합물은 시스테인 프로테아제 단편, 자칼린-유사 렉틴, 및/또는 브로멜라인 억제제 (예를 들어, WO 2006/054309 참조)를 추가로 포함할 수 있다. 특정 실시양태에 따르면, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 혼합물은 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32), 아나나인 (EC 3.4.22.31), 브로멜라인의 시스테인 프로테아제 전구체, 및 임의로 자칼린-유사 렉틴을 포함한다.

단백질 분해 혼합물은 WO 2013/011514에 개시된 절차에 의해 수득될 수 있다. 제조의 마지막 단계로서, 단백질 분해 혼합물을 동결건조시키고 사용시까지 동결건조된 분말로서 보관한다. 단백질 분해 효소 혼합물은 동결건조된 또는 건조된 분말로서 매우 안정적이며 2-8 ℃에서 3년 동안 보관할 수 있다. 이 기간 후, 단백질 분해 효소 혼합물은 생산 공정의 말미에 결정된 바와 같이 원래의 효소 활성의 적어도 90%를 유지한다.

본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 상호 교환적으로 사용되는 바와 같은 용어 "건조", "동결건조된" 또는 "무수"는 물을 단백질 분해 효소 혼합물 또는 pH 조정제의 총 중량의 최대 3% (w/w)의 양으로 함유하거나, 대안적으로, 물이 상기 혼합물 또는 pH 조정제의 총 중량의 최대 2%, 1%, 0.5%, 또는 추가로 대안적으로 최대 0.1% (w/w)의 양으로 존재하는, 상기 혼합물 또는 pH 조정제를 지칭한다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 특정 실시양태에 따르면, 단백질 분해 혼합물 및 pH 조정제에는 물이 없다.

본 발명을 실시하는데 유용한 아크릴산의 가교결합된 중합체는 카르보머 이다. 적합한 카르보머는, 예를 들어, 카르보폴^® 단독중합체 (알릴 수크로스 또는 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 아크릴산의 중합체) 예컨대 카르보폴^® 71 G NF, 카르보폴^® 971P NF, 카르보폴^® 974P NF, 카르보폴^® 980 NF, 및 카르보폴^® 981 NF; 카르보폴^® 공중합체 (알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 C₁₀-C₃₀ 알킬 아크릴레이트와 아크릴산의 중합체) 예컨대 퍼뮬렌^TM TR-1 NF 및 퍼뮬렌^TM TR-2 NF; 카르보폴^® 혼성중합체 (장쇄 알킬 에스테르와 폴리에틸렌 글리콜의 블록 공중합체를 포함하는, 카르보머 단독중합체 또는 공중합체) 예컨대 카르보폴^® ETD 2020 NF 및 카르보폴^® 울트레즈 10 NF; "전통적인" 카르보머 예컨대 카르보머 934 (카르보폴^® 934 NF), 카르보머 934P (카르보폴^® 934P NF), 카르보머 940 (카르보폴^® 940 NF), 카르보머 941 (카르보폴^® 941 NF) 및 카르보머 1342 (카르보폴^® 1342P NF)를 포함하는, 루브리졸 어드밴스트 머테리얼즈(Lubrizol Advanced Materials) (오하이오주 클리블랜드)에 의해 카르보폴^®이라는 상표명으로 시판되는 다양한 중합체를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.　 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

극성 공-용매는 글리세롤, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리글리세롤, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 소르비톨, 이소프로필 알콜, 및 그의 조합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 특정 실시양태에 따르면, 극성 공-용매는 글리세롤이다.　

용어 "제약상 허용되는"은 연방 또는 주정부의 규제 기관이 승인하거나 미국 약전 또는 기타 일반적으로 인정된 약전에 열거되어 인간에서 사용하기 위한 것을 의미한다. 본 발명의 괴사조직제거 조성물의 구성 성분은 모두 제약상 허용되는 작용제이다.

용어 "약"은 명시된 값의 10% 초과 또는 미만의 값을 지칭한다.

괴사조직제거 조성물은 예를 들어, 벤질 알콜, 파라벤, 메틸- 또는 프로필히드록시벤조에이트 및 그의 조합물과 같은 보존제 및/또는 예를 들어, 아스코르브산, 디히드로퀴논, 부틸화 히드록시톨루엔, 디티오트레이톨, 및 그의 조합물과 같은 항산화제 및/또는 예를 들어, 올리고사카라이드, 예를 들어, 락토스 등과 같은 항응집제를 추가로 포함할 수 있다.

괴사조직제거 조성물은 활성제 예컨대 마취제, 항박테리아제, 항진균제, 항염증제, 진통제, 성장 인자, 치유 촉진제 또는 그의 조합물을 추가로 포함할 수 있다. 마취제는 아메토카인 (테트라카인), 리그노카인 (리도카인), 크실로카인, 부피바카인, 프릴로카인, 로피바카인, 벤조카인, 메피보카인, 코카인, 및 그의 조합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

항박테리아제는 아만파딘 히드로클로라이드, 아만파딘 술페이트, 아미카신, 아미카신 술페이트, 아모글리코시드, 아목시실린, 암피실린, 암사마이신, 바시트라신, 베타-락탐, 칸디시딘, 카프레오마이신, 카르베니실린, 세팔렉신, 세팔로리딘, 세팔로틴, 세파졸린, 세파피린, 세프라딘, 세팔로글리신, 클로람페니콜, 클로르헥시딘, 클로르헥시딘 글루코네이트, 클로르헥시딘 히드로클로라이드, 클로록신, 클로르퀴랄돌, 클로르테트라사이클린, 클로르테트라사이클린 히드로클로라이드, 시프로플록사신, 시르쿨린, 클린다마이신, 클린다마이신 히드로클로라이드, 클로트리마졸, 클록사실린, 데메클로사이클린, 디클록사실린, 디아이오도히드록시퀸, 독시사이클린, 에탐부톨, 에탐부톨 히드로클로라이드, 에리트로마이신, 에리트로마이신 에스톨레이트, 에리트로마이신 스테아레이트, 파르네솔, 플록사실린, 겐타마이신, 겐타마이신 술페이트, 그라마이신, 기세오풀빈, 할로프로긴, 할로퀴놀, 헥사클로로펜, 이미노시클린, 아이오도클로르히드록시퀸, 카나마이신, 카나마이신 술페이트, 리노마이신, 리네오마이신, 리네오마이신 히드로클로라이드, 마크롤리드, 메클로사이클린, 메타사이클린, 메타사이클린 히드로클로라이드, 메테닌, 메텐아민 히푸레이트, 메텐아민 만델레이트, 메티실린, 메토니다졸, 미코나졸, 미코나졸 히드로클로라이드, 미노사이클린, 미노사이클린 히드로클로라이드, 뮤피로신, 나프실린, 네오마이신, 네오마이신 술페이트, 네티마이신, 네틸마이신 술페이트, 니트로푸라존, 노르풀록사신, 니스타틴, 옥토피록스, 올레안도마이신, 오르세팔로스포린, 옥사실린, 옥시테아클린, 옥시테트라사이클린 히드로클로라이드, 파라클로르메타 크실레놀, 파로모마이신, 파로모마이신 술페이트, 페니실린, 페니실린 G, 페니실린 V, 펜타미딘, 펜타미딘 히드로클로라이드, 페네티실린, 폴리믹신, 퀴놀론 예컨대 플루오로퀴놀론, 스트렙토마이신 술페이트, 테트라사이클린, 토브라마이신, 톨나프테이트, 트리클로산, 트리팜핀, 리파마이신, 롤리테트라사이클린, 은 염, 스펙티노마이신, 스피라마이신, 스트럽토마이스, 술폰아미드, 테트라사이클린류, 테트라사이클린, 토브라마이신, 토브라마이신 술페이트, 트리클로카르본, 트리클로산, 트리메토프림-술파메톡사졸, 틸로신, 반코마이신, 이로트리신, 및 그의 조합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

항진균제는 니스타틴, 클로트리마졸, 미코나졸, 케토코나졸, 플루코나졸, 티아벤다졸(thiabendazole), 에코나졸, 클로미다졸, 이소코나졸, 티아벤다졸(tiabendazole), 티오코나졸, 술코나졸, 비포나졸, 옥시코나졸, 펜티코나졸, 오모코나졸, 세르타코나졸, 플루트리마졸, 및 그의 조합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

항염증제는 비스테로이드성, 스테로이드성 또는 그의 조합물일 수 있다. 비스테로이드성 항염증제의 비제한적 예는 옥시캄, 예컨대 피록시캄, 이속시캄, 테녹시캄, 수독시캄; 살리실레이트, 예컨대 아스피린, 디살시드(disalcid), 베노릴레이트, 트리릴세이트, 사파프린, 솔프린, 디플루니살, 및 펜도살; 아세트산 유도체, 예컨대 디클로페낙, 펜클로페낙, 인도메타신, 술린닥, 톨메틴, 이속세팍, 푸로페낙, 티오피낙, 지도메타신, 아세마타신, 펜티아작, 조메피락, 클린다낙, 옥세피낙, 펠비낙, 및 케토롤락; 페나메이트, 예컨대 메페남산, 메클로페남산, 플루페남산, 니플루미산, 및 톨페남산; 프로피온산 유도체, 예컨대 이부프로펜, 나프록센, 베녹사프로펜, 플루르비프로펜, 케토프로펜, 페노프로펜, 펜부펜, 인도프로펜, 피르프로펜, 카르프로펜, 옥사프로진, 프라노프로펜, 미로프로펜, 티옥사프로펜, 수프로펜, 알루미노프로펜, 및 티아프로페닉; 피라졸, 예컨대 페닐부타존, 옥시펜부타존, 페프라존, 아자프로파존, 및 트리메타존을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

스테로이드성 항염증 약물의 비제한적 예는 코르티코스테로이드 예컨대 히드로코르티손, 히드록실-트리암시놀론, 알파-메틸 덱사메타손, 덱사메사손 포스페이트, 베클로메타손 디프로피오네이트, 크로베타솔 발레레이트, 데소니드, 데속시메타손, 데속시코르티코스테론 아세테이트, 덱사메타손, 디클로로리손, 디프로라손 디아세테이트, 디플루코르톨론 발레레이트, 플루아드레놀론, 플루클로롤론 아세토 니드, 플루드로코르티손, 플루메타손 피발레이트, 플루오시놀론 아세토니드, 플루오시노니드, 플루코르틴 부틸에스테르, 플루오코르톨론, 플루프레드니덴 (플루프레드닐리덴) 아세테이트, 플루란드레놀론, 할시노니드, 히드로코르티손 아세테이트, 히드로코르티손 부티레이트, 메틸프레드니솔론, 트리암시놀론 아세토니드, 코르티손, 코르토독손, 플루세토니드, 플루드로코리손, 디플루오로손 디아세테이트, 플루라드레놀론, 플루드로코르티손, 디플루로손 디아세테이트, 플루라드레놀론 아세토니드, 메드리손, 암시나펠, 암시나피드, 베타메타손 및 그의 에스테르의 잔량, 클로로프레드니손, 클로로프레드니손 아세테이트, 클로코르텔론, 클레시놀론, 디클로리손, 디플루르프레드네이트, 플루클로로니드, 플루니솔리드, 플루오로메탈론, 플루페롤론, 플루프레드니솔론, 히드로코르티손 발레레이트, 히드로코르티손 시클로펜틸프로피오네이트, 히드로코르타메이트, 메프레드니손, 파라메타손, 프레드니솔론, 프레드니손, 베클로메타손 디프로피오네이트, 및 트리암시놀론을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다.

진통제는 코데인, 히드로코돈, 옥시코돈, 펜타닐, 및 프로폭시펜을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 각각의 가능성은 개별 실시양태를 나타낸다.

성장 인자는 표피 성장 인자, 섬유모세포 성장 인자, 인슐린-유사 성장 인자 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

치유 촉진제는 히알루론산 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

바람직한 실시양태에 따르면, 괴사조직제거 조성물은 멸균 상태이다.

본 발명의 겔 제제의 점도는 임의의 공지된 수단에 의해 측정될 수 있다. 점도는 콘 플레이트 기하학적 형상(cone plate geometry)을 사용한 절대 점도 측정에 의해 결정될 수 있다. 대안적으로, 브룩필드(Brookfield) (스핀들(spindle) 및 컵) 점도계를 사용하여 본원에 기재된 겔 제제의 점도를 계산할 수 있다. 본원에서 언급된 점도 범위는 모두 실온에서 측정된다.　

단백질 분해 효소 혼합물 및 담체는 단일 용기의 제1 구획 및 제2 구획에 각각 보관될 수 있거나 2개의 개별 용기, 즉 제1 용기 및 제2 용기에 보관될 수 있다. pH 조정제는 무수 또는 건조된 것일 수 있으며, 단백질 분해 효소 혼합물과 함께 제1 구획 또는 용기에 보관될 수 있다. 대안적으로, pH 조정제는 담체와 함께 제2 구획 또는 용기에 보관될 수 있다. 대안적으로, pH 조정제는 제3의 구별되는 구획 또는 용기에 보관될 수 있다. 특정 실시양태에 따르면, pH 조정제는 제2 구획 또는 용기에 담체와 함께 보관되며, 사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물 및 담체가 혼합되어 본 발명의 괴사조직제거 조성물을 형성시킨다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 3개의 용기를 포함하는 시스템을 제공하며, 여기서 제1 용기는 단백질 분해 효소 혼합물을 포함하고, 제2 용기는 담체를 포함하고, 제3 용기는 pH 조정제를 포함한다. 대안적으로, 상기 시스템은 2개의 용기를 포함하며, 여기서 제1 용기는 단백질 분해 효소 혼합물을 포함하고 제2 용기는 담체 및 pH 조정제를 포함한다.

일부 실시양태에 따르면, 조성물에는 접착제가 없으며, 그 자체로 조성물은 비점착성이다.

괴사조직제거 조성물의 용도

본 발명은 본 발명의 괴사조직제거 조성물의 치료 유효량을 피부 상처의 괴사조직제거를 필요로 하는 대상체의 피부 상처 부위에 국소 적용하여, 상처의 가피를 괴사조직제거함으로써 상처 치유 및 상처 봉합을 촉진시키는 단계를 포함하는, 피부 상처의 괴사조직제거 방법을 제공한다. 특정 실시양태에 따르면, 상처는 만성이거나 치유하기 어려운 상처이다.

본 발명은 본 발명의 괴사조직제거 조성물의 치료 유효량을 피부 상처의 치료를 필요로 하는 대상체의 피부 상처 부위에 국소 적용하여 상처를 치료하는 단계를 포함하는, 피부 상처의 치료 방법을 추가로 제공한다. 특정 실시양태에 따르면, 상처는 만성이거나 치유하기 어려운 상처이다.

본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 상호 교환적으로 사용되는 바와 같은 용어 "만성 상처", "만성 피부 상처" 또는 "치유하기 어려운 상처"는 상처와 마찬가지로 항구성의 구조적, 기능적, 및/또는 미용상 봉합을 생성시키는 질서 정연하고 시기 적절한 일련의 사건을 통해 진행되지 못한 상처를 지칭한다. 1개월 이내에 치유되지 않는 상처는 만성이거나 치유하기 어려운 상처로 간주된다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "상처의 괴사조직제거"는 생존가능하지 않은 조직: 상처로부터의 괴사성 가피, 딱지 또는 피브린, 및 박테리아/생물막(biofilm)의 제거를 지칭한다. 괴사성 가피는 얇거나 두껍고, 가죽 같고 활력을 잃은 흑색, 갈색 또는 황갈색 조직이며, 한편 딱지 및 생물막은 상처 기부 상의, 삼출성, 백색 또는 황록색의 얼룩 덜룩한, 얇은(tenuous) 조직이다. 괴사성 조직, 이물질 및 박테리아는 국소적 상처 치유 과정을 방해하는 금속 단백질 분해 효소의 생산을 자극하거나 생산함으로써 신체가 치유하려는 시도를 저해한다. 이 적대적인 환경은 박테리아가 증식할 수 있게 하고, 상처 기부를 덮는 삼출물, 잔해 및 화농 분비물 ("딱지") 내에서 상처를 추가로 집락화할 수 있게 한다. 게다가, 박테리아는 딱지와 함께 생물막을 형성하여, 잠재적인 파괴로부터 그의 집락을 보호하는 구조적 생성물을 분비한다. 박테리아는 그 자체의 상처 억제 효소를 생산하며, 더욱 중요하게는, 상처 치유에 필요한 희소하고 이용 가능한 국소적 자원을 많이 소비한다.

만성 상처에서, 여러 가지 상이한 인자가 중요한 역할을 할 수 있다. 노출된 표면 예컨대 뼈, 힘줄, 근막 또는 심지어 지방은 세포 증식을 지원하지 않으며 건조하고 이물 예컨대 합성 삽입물이 된다. 국소적 혈액 공급 (동맥, 정맥, 림프관, 압력 등)에 대한 임의의 방해로 인해 상처는 치유하기 어렵게 되고 만성이 될 수 있다. 육아 조직은 다루기 힘들어질 수 있고, 위축되며, 그의 풍부한 혈관 매트릭스를 상실하고, 색상이 더 진하고 불투명해지며 상처 치유 및 봉합 과정에 어떠한 역할도 하지 않을 것이다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "상처 기부 준비 (WBP)"는 내인성 치유를 가속화하거나 다른 치료적 조치의 유효성을 조장하기 위해 적절한 괴사조직제거로부터 생기는 상처 기부를 의미한다. 이는 치유를 저해하는 상처 및 환자 둘 다 내에 다양한 "부담"을 제거하는, 괴사조직제거의 과정이다. 상처 내에 부담은 삼출물, 박테리아, 생물막 및 괴사성/세포 잔해를 포함한다. 환자의 전반적인 건강 상태는 치유 과정에서 중요한다. 만성 상처에서, 문제가 되는 가피, 딱지 또는 생물막을 제거하면 깨끗한 상처 기부가 생길 수 있지만, 환자의 전신 상태 또는 사지의 상태가 이를 뒷받침할 수 없는 경우 장래 치유에 이러한 상처 부위가 여전히 부적당할 수 있다.

치유를 위해 준비된 상처 기부는 상처가 생존 가능한 깨끗한 기부 상에 흉터 형성 및 구축-상피화(contracture-epithelialization) (임의로 생물학적 드레싱, 상처 치유 증진 드레싱, 합성 상처 드레싱, 진공 또는 오존 상처 치유 시스템과 같은 양식을 사용하여)에 의해 자발적으로 봉합될 수 있게 하거나 자가 조직의 STSG (부분층 피부 이식(Split Thickness Skin Graft)) 또는 피부 동종이식을 지원할 것인 건강한 조직 및/또는 건강한 육아 조직 (그래뉼로미터(granulometer) 등급(scale)에서의 수준 >7)의 생존 가능한 기부를 또한 갖는 가피, 딱지, 피브린 또는 생물막이 없는 상처 기부이다.

일부 실시양태에 따르면, 상처의 괴사조직제거는 치료 전에 존재하는 생존 가능하지 않은 조직의 적어도 50%, 대안적으로 적어도 75%의 제거를 지칭한다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태이다. 특정 양태에 따르면, 상처의 괴사조직 제거는 치료 전에 존재하는 생존 가능하지 않은 조직의 적어도 90%, 또는 적어도 95%, 바람직하게는 100%의 제거를 지칭하고; 즉, 치료 전에 존재하는 생존 가능하지 않은 조직의 90% 이상의 이러한 괴사조직제거는 본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 "상처의 완전한 괴사조직제거"로 언급된다.

용어 "상처 봉합"은 조직의 외피(covering) 세포 층을 재생시키는 과정을 지칭한다. 따라서, 상처 봉합 촉진은 외피 세포 층의 재생에 긍정적인 효과를 창출하는 것을 의미한다. 긍정적인 효과는 재생 과정의 가속화 또는 상처의 손상된 부위의 감소일 수 있다. 　

용어 "치료 유효량"은 조성물이 투여되는 대상체에게 유익한 효과를 제공하기에 충분한 단백질 분해 효소 혼합물의 양이다.

일부 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 약 4-24 시간 동안, 또는 그 사이에 임의의 정수 동안, 적어도 1일의 치료 기간 동안 만성 상처 부위에 매일 적용될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 약 4-24 시간 동안, 또는 그 사이에 임의의 정수 동안, 적어도 연속 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10일 동안의 치료 기간 동안 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지 만성 상처 부위에 매일 적용될 수 있다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태이다.

추가 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회 적용의 요법으로 만성 상처 부위에 적용될 수 있으며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 4-24 시간 동안, 예컨대 약 24시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 대안적으로, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지, 만성 상처 부위에 적용될 수 있으며, 여기서 괴사조직제거 조성물은 적용당 약 4-24 시간 동안, 예컨대 약 24시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지된다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태를 나타낸다. 한 실시양태에 따르면, 요법의 지속시간은 적어도 1일이다. 대안적으로, 요법의 지속시간은 적용당 최대 4주, 바람직하게는 약 24시간의 최대 10회 적용이다.

추가 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회 적용의 요법으로 적용당 약 48시간 동안 만성 상처 부위와 접촉하여 유지될 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지 적용당 약 48시간 동안 만성 상처 부위와 접촉하여 유지될 수 있다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태이다. 한 실시양태에 따르면, 요법의 지속시간은 적어도 2일이다. 대안적으로, 요법의 지속시간은 적용당 최대 4주, 바람직하게는 약 48시간의 최대 10회 적용이다.

또 다른 실시양태에 따르면, 본 발명의 괴사조직제거 조성물은 적어도 1회의 적용, 예컨대 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 적어도 10회 적용의 요법으로 또는 가피가 괴사조직제거될 때까지 적용당 약 72시간 동안 만성 상처 부위와 접촉하여 유지될 수 있다. 각각의 가능성은 본 발명의 개별 실시양태이다. 한 실시양태에 따르면, 요법의 지속시간은 적어도 3일이다. 대안적으로, 요법의 지속시간은 적용당 최대 4주, 바람직하게는 약 72시간의 최대 10회 적용이다.

또 다른 실시양태에 따르면, 치료 요법은 1회, 2회, 3회, 또는 그 초과회 또는 가피가 완전히 괴사조직제거되고/거나 상처 봉합이 달성될 때까지 반복될 수 있다. 반복되는 경우, 요법은 서로 연속적/순차적일 수 있거나 수일, 수주, 또는 수개월의 간격을 둘 수 있다.

일부 실시양태에 따르면, 본 발명의 방법은 상처 부위에서 조성물을 유지 또는 보유하기 위해 괴사조직제거 조성물을 폐쇄성 층 또는 드레싱으로 덮는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

일부 실시양태에 따르면, 본 발명의 방법은, 예를 들어, 적용/접촉 시간의 4시간 후 또는 24시간 후 또는 48시간 후 또는 72시간 후와 같이 적용/접촉 시간의 말미에, 상처 부위를 세척하는 추가 단계를 추가로 포함할 수 있다.

본 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 명시된 수치 범위는 그 사이에 임의의 정수를 포함하는 것으로 이해하여야 한다.

일부 실시양태에 따르면, 상처 부위를 세척하고 수시간 또는 수일 후에 괴사조직제거 조성물을 적용하는 경우, 상처 부위에 습윤 또는 촉촉한 드레싱 층, 바람직하게는 촉촉한 식염수 거즈(saline gauze)를 적용할 수 있다.

추가 실시양태에 따르면, 본 발명의 방법은 괴사조직제거 동안에 상처 가장자리 및 상처 주변 피부(peri-wound skin)를 보호하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명은 본 발명의 방법이 공지된 괴사조직제거 방법, 예컨대 외과적 또는 예리한 괴사조직제거와 조합될 수 있는 조합 요법을 포함한다. 일부 실시양태에 따르면, 본 발명의 방법은 외과적 또는 예리한 괴사조직제거 전에 수행할 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 방법은 외과적 또는 예리한 괴사조직제거 후 수행할 수 있다.

일부 실시양태에 따르면, 상처 부위에 적용되는 API의 치료 유효량은 상처 표면 100 cm² 당 약 0.1 gr 내지 약 2 gr 범위이다. 추가 실시양태에 따르면, 상처 부위에 적용되는 괴사조직제거 조성물의 양은 상처 표면 100 cm² 당 약 20 gr이다.

실시예 1

겔 제제의 독성 연구

이 연구는 두 가지 겔 제제의 피부 독성을 평가하는 것을 목표로 하였다. 두 겔 제제 모두 0.9% 카르보폴 980NF를 함유한 수성 제제이었다. 그러나, 제제 중 단지 하나가 10% 글리세롤을 함유하였다. 겔 제제는 또한 겔 제제의 총 중량의 2.5% 또는 5% w/w의 양으로 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소의 혼합물을 함유하였다.

데브라제® 또는 넥소브리드®로도 공지된, 활성 제약 성분을 표시하기 위헤, 이하에 API로 명명된, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 혼합물을 이전에 기재된 바와 같이 (예를 들어, WO 2013/011514 참조) 제조하였다. 치료 전에, 1 gr 분말 또는 0.5 gr 분말의 양의 API를 하기 구성 성분을 함유한 겔 비히클 20 gr과 혼합하였다: 10% w/w 글리세롤을 함유하거나 함유하지 않은 0.9% w/w 카르보폴^® 980NF, 0.25% w/w 인산수소이나트륨 무수물, 및 물. 피부 부위 상에 적용하기 전에, 겔 비히클 및 데브라제® 분말을 최대 15분 혼합하여 겔 제제를 형성시켰다.

잡종 사육 돼지(crossbred domestic pig)를 근육내 (i.m.) 투여된 케타민 HCl 및 크실라진, 정맥내 (i.v.) 투여된 디아제팜, 및 이소플루란 5% 및 산소의 흡입으로 마취시켰다. 돼지 등의 털을 깍고 항생제 비누 및 멸균 상태 아이오딘으로 세척하였다. 피부는 멸균 상태 거즈로 건조시켰다. 각각의 피부 부위 (3 cm x 3 cm)에 2 gr의 각각의 겔 제제를 적용하였다.

각각의 겔 제제를 돼지 등에 4시간 동안 1일 1회 국소 적용하고 제제를 치료의 말미에서 제거하였다. 피부 부위를 겔 제제의 적용 전후에 사진 촬영하고, 드레이즈 (Draize) 등급을 사용하여 홍반 및 부종을 평가하였다:

홍반:

0 - 홍반 없음

1 - 매우 경미한 홍반 (간신히 인지할 수 있음)

2 - 윤곽이 명확한 홍반

3 - 중등도 홍반

4 - 중증 홍반 (비트 적색(beet redness)) 내지 경미한 가피 형성 (심층 부상(injuries in depth))

부종:

0 - 부종 없음

1 - 매우 경미한 부종

2 - 경미한 부종 (분명한 부품(definite raising)에 의해 윤곽이 명확해진 부분의 가장자리)

3 - 중등도 부종 (대략 1 밀리미터 부품)

4 - 중증 부종 (1 밀리미터 초과로 부풀고 노출 부위를 넘어 확장).

피부 부위는 또한 조직병리학적으로 평가하였다. 그 다음에 피부 부위를 다음 치료 때까지 탄성 붕대로 드레싱하였다. 이 절차는 연속 14일 동안 반복되었다. 글리세롤을 함유하거나 함유하지 않은 겔 비히클을 대조군으로 사용하였다.

결과

결과는 홍반이 4회째 치료 후에 제제, 즉 글리세롤을 함유하거나 함유하지 않은 두 겔 제제 모두의 경우 먼저 관찰되었으며 평균 점수 값은 API의 2.5% w/w 및 5% w/w API의 경우 0.5 및 1.0인 것으로 나타났다. 홍반의 평균 등급은 치료 횟수가 증가함에 따라 증가하였고 14일째까지 나타났다. 홍반은 겔 비히클 단독으로 치료한 피부 부위에서는 관찰되지 않았다. 결과는 또한 홍반이 겔 제제에서 API 양의 함수로서 증가한다는 것을 나타냈다. 겔 제제의 총 중량의 5% w/w의 양으로 API를 함유한 글리세롤을 함유한 겔화 제제에 의해 유발된 홍반의 최대 평균 점수는 2.33이었고 겔 제제의 총 중량의 2.5% w/w의 양으로 API를 함유한 글리세롤을 함유한 겔화 제제에 의해 유발된 홍반의 최대 평균 점수는 1.33이었다. 겔 제제의 총 중량의 5% w/w의 양으로 API를 함유한 글리세롤을 함유하지 않은 겔 제제에 의해 유발된 홍반의 최대 평균 점수는 2.66이었고 겔 제제의 총 중량의 2.5% w/w의 양으로 API를 함유한 글리세롤을 함유하지 않은 겔 제제에 의해 유발된 홍반의 최대 평균 점수는 2.0이었다.

두 겔 제제 모두 단지 경미한 부종이 관찰되었다 (최대 점수 평균 0.66).

따라서, 이들 결과는 겔 제제 중 API의 양이 높을수록 더 높은 수준의 피부 자극을 야기하며 글리세롤은 피부 자극을 감소시켰다는 것을 입증한다. 결과적으로, 후속 실험은 10% 글리세롤, 0.9% w/w 카르보폴^® 980NF, 0.25% w/w 인산수소이나트륨 무수물, 및 물을 함유하는 겔 비히클과 혼합된 API를 사용하여 수행하였으며; API 및 겔 비히클을 함유한 이 겔 제제를 EX01 또는 에스카르엑스 겔로 명명하였다.

실시예 2

만성 상처 치료에 미치는 적용 지속시간 및 API 양의 영향

이 연구는 만성 상처에서 가피 제거의 최대 효능을 달성하기 위해 필요한 겔 제제의 적용 지속시간 및 API의 양을 결정하는 것을 목표로 하였다.

만성 상처 모델을 잡종 사육 돼지에서 확립하였다. 네 가지 양의 API (0, 0.75%, 1.25% 및 5% w/w)를 상기 본원에서의 실시예 1에 기재된 바와 같이 글리세롤을 함유하는 겔 비히클과 혼합하고 세 가지 적용 지속시간 (1시간, 4시간 및 24시간) 동안 연속 10일 동안 만성 상처에 적용하였다. "치료 기간"이라고도 표시되는, 10일 기간의 말미에, 만성 상처의 치유율에 미치는 괴사조직제거의 영향을 평가하기 위해, "회복기"라고도 표시되는, 추가 14일 동안 돼지의 만성 상처를 관찰하였다.

만성 상처는 치료 기간의 시작 및 동안에 뿐만 아니라 회복기 동안에 사진 촬영되었다. 가피 부위 및 상처 부위를 이미지제이(ImageJ) 소프트웨어 (NIH, 미국 메릴랜드주)에 의해 측정하여 육안으로 평가하고 JMP® 통계 소프트웨어 (SAS 인코포레이티드(Inc.), 미국 노스캐롤라이나주)에 의해 분석하였다. 각각의 사진에서, 상처 크기 및 가피 크기를 측정하였다. 홍반 및 부종을 상기 본원에서의 실시예 1에 기재된 바와 같이 평가하였다. 첫 번째 치료 전, 마지막 치료 후, 및 회복기의 말미에 각각의 상처의 중앙으로부터 및 가장자리로부터 생검을 수득하였다. 조직을 파라핀에 포매하고, 절단하고 헤마톡실린 및 에오신 (H&E)으로 염색하였다.

사진으로부터의 측정을 사용하여 하기 파라미터를 계산하였다 ("/"는 "중에(out of)"를 의미한다).

1) 기간의 말미에, 가피 부위/상처 부위 백분율.

2) 곡선하 면적 (AUC)에서 x 축은 치료 횟수이고 y 축은 가피 백분율이다. 이 파라미터는 치료의 효능을 나타낸다: 치료가 더 효과적일수록 곡선하 면적이 더 작아진다.

3) 기간의 말미에, 상처 크기/초기 크기 백분율.

4) 곡선하 면적 (AUC)에서 x 축은 치료 숫자이고 y 축은 초기 크기의 상처 크기 백분율이다. 이 파라미터는 상처 봉합을 나타낸다: 상처 봉합이 더 빠를수록 면적이 더 작아진다.

결과

치료 기간의 초반에, 만성 상처는 이미 가피를 발생시켰다. 도 1A 및 1C는 치료 전 만성 상처를 나타내는 대표적인 사진이다. 가피는 두 개의 구별되는 영역으로 구성되어 있었다: 피부가 완전히 절제된 상처의 중심부, 및 상처 가장자리. 중심부에서는 얇은 가피 층이 생겼으며, 한편 가장자리에서는 가피는 괴사성 피부로 구성되어 있었다.

API를 함유하는 겔 제제 (에스카르엑스 겔 또는 EX01로 표시)로 치료한 만성 상처에서, 주변에서 용해로 인해 가피가 생존 가능한 조직으로부터 완전히 분리될 때까지 가피는 연화되고 치료할 때마다 점진적으로 용해되었다 (도 1B). 대조적으로, 겔 비히클로 치료한 만성 상처는 치료 기간 동안에 외관 및 컨시스턴시를 간신히 변화시켰다 (도 1D). 몇몇 경우에, 10회째 치료 후, 가피의 덩어리가 상처 기부로부터 분리되었다. 겔 비히클 및 겔 제제 EX01 둘 다에서, 마지막 치료 후 가피가 남아 있는 경우, 이는 건조하게 되어 회복기 동안에 상처에서 떨어졌다.

젤 제제 EX01로 치료한 상처 주위의 영역은 바세린(Vaseline)에 의한 보호에도 불구하고 치료 기간 동안에 부종 및 홍반을 발생시켰다. 피부 자극의 이 현상은 5% (w/w) API를 사용한 24시간 치료 군에서 더욱 확연하였다. 1.25% (w/w) API를 사용한 24시간 치료는 겔 제제 EX01에서 5% (w/w) API를 사용한 4시간 치료에 의해 수득한 바와 유사한 피부 자극을 유발하였다. 회복기 동안에 홍반 및 부종 둘 다 1-2 일 후에 완전히 사라졌다.

10회째 치료 후의 가피의 백분율은 겔 제제 중의 API의 양 및 치료 지속시간에 상당히 의존하는 것으로 밝혀졌다. 1시간 치료에서는, 10회째 치료에서의 가피의 양과 API의 농도 사이에 어떠한 상관 관계도 없었으며 (도 2A), 한편 4시간 치료에서는, API의 농도가 높을수록, 10회째 치료 후 가피의 양이 더 적게 관찰되었다 (도 2B). 24시간 치료는 젤 제제 중의 API의 낮은 농도가 농도 의존적으로 가피 백분율을 감소시켰으나; 더 높은 농도의 API는 가피의 백분율을 추가로 감소시키지 않은 것으로 나타났다 (도 2C).

괴사조직제거 효능 (AUC)은 API 농도 및 치료 지속시간에 상당히 의존하는 것으로 밝혀졌다. 1시간 치료는 측정된 모든 API 농도에서 4시간 및 24시간 치료보다 덜 효과적이었다 (각각 도 3A, 3B, 및 3C). 4시간 치료에서는, AUC는 API 농도와 상관 관계가 있었으며 (도 3B), 한편 24시간 치료에서는, AUC는 API의 더 낮은 농도에서만 상관 관계가 있었다 (도 3C).

10회째 치료 후 가피의 곡선하 면적 (AUC; 도 4A 및 4B, 상부 패널) 및 가피의 백분율 (도 4A 및 4B, 중간 패널) 둘 다에 대한 이차 모델 (API에 대한 2차(second order))에 대한 적합성은 유의한 것으로 밝혀졌다 (p 값 0.0154). 이 모델에 따르면, ~3.5%의 API 농도에서 24시간 치료에서 최대 소망도 함수 값 (즉, 마지막 치료 후 가피의 최저 백분율 및 최저 AUC 둘 다)에 도달하였다 (도 4A 및 4B, 하부 패널).

치료 기간 동안에 상처의 크기는 거의 변하지 않았으며 크기에서의 임의의 변화는 매우 점진적이었다. 이는 모든 치료 군에 적용되었다.

회복기 동안에: 겔 비히클 군 및 EX01 군 둘 다의 경우, 10회째 치료 후 가피가 남아 있는 경우, 이는 건조하게 되어 회복기 동안에 상처에서 떨어졌다. 따라서, 회복기 후의 가피 비율은 모든 군에서 0 또는 0에 근접하였다. 회복기 말미에 가피의 백분율 또는 회복기 동안에 AUC와 API 농도 또는 치료 지속시간 사이에는 어떠한 유의한 상관 관계도 없었다.

일단 가피가 떨어지면, 모든 상처가 봉합되기 시작하였다. 따라서, 초기 상처 크기로부터의 상처 크기와 API 농도 또는 치료 지속시간 사이에 어떠한 유의한 상관 관계도 밝혀지지 않았다. 회복기 동안에 AUC에 대해서도 마찬가지였다.

결론

이 연구의 결과는 모든 API 농도 및 모든 치료 지속시간에서 가피제 제거가 겔 비히클에 의한 것보다 API를 함유하는 겔 제제에 의해 상당히 더 효율적이었음을 나타냈다. 최적 효율은 24시간 치료에서 약 3.5% w/w API에서인 것으로 밝혀졌으며, 이는 24시간 치료에서 겔 제제의 총 중량의 3.5% w/w 초과의 더 높은 API 농도가 증가된 효능을 야기하지 않았음을 나타낸다. 이 연구의 결과는 효능 및 안전면에서, 더 장시간의 치료가 더 낮은 API의 농도에 의해 보상될 수 있음을 나타냈다.

실시예 3

젤 제제 중의 API의 효능 및 안전성 - 임상 시험

이 연구의 목적은 치유하기 어려운 정맥성 다리 궤양, 당뇨병성 하지 궤양 및 외상/수술 후 상처를 가진 대상체에서 상처의 기부를 준비하는데 있어서 에스카르엑스 겔의 효능 및 안전성을 평가하는 것이었다.

다기관(multicenter), 무작위화, 비히클 제어, 평가자 맹검 연구를 치유하기 어려운 상처를 가진 대상체에서 수행하여 정맥성 다리 궤양, 당뇨병성 하지 궤양 및 외상/수술 후 상처를 가진 환자에서 상처의 기부를 준비하기 위해 상기 본원에서의 실시예 1 및 2에 개시된 겔 제제 중의 API의 효능 및 안전성을 평가하였다.

본 연구는 각각 매일 최대 10회 치료, 4시간 ± 15분 적용 시간으로 에스카르엑스 겔 또는 겔 비히클로 치료된 73명의 대상체를 포함하였다. 이 기간을 "치료 기간"으로서 정의하였다. 각각의 적용 후, 상처를 세척하고, 사진 촬영하고, 상처 크기, 생존 가능하지 않은 조직의 제거 및 육아 조직의 변화, 상처 상태, 및 안전성 파라미터에 대해 임상적으로 평가하였다. 에스카르엑스 겔 또는 겔 비히클로 각각의 괴사조직제거 후 맹검 평가자는 치료 지속에 대해 결정하였고, 상처를촉촉함을 보유한(moist-to-moist) 식염수 거즈로 드레싱하였다.

"치료 기간"의 완료 후, 대상체를 그의 센터에서 표준 절차에 따라 치료하였고, 완전한 상처 봉합 때까지 또는 마지막 치료 적용으로부터 최대 12주 동안 1주 1회 평가하였다 (총 12회의 주간 후속 방문).

상처 봉합을 달성한 대상체의 경우, 상처 봉합 재발을 평가하기 위해 추가의 3회 월간 후속 방문 (총 3회 방문)을 실시하였다. 연구의 전체 기간은 최대 27주였다.

이 연구에 등록한 환자는 하기 병인의 치유하기 어려운 상처 (4주 연령 이상의 상처): 정맥성 다리 궤양, 당뇨병성 하지 궤양, 및 외상/수술 후 상처 상에 >50% 괴상성/딱지/피브린 생존 가능하지 않은 조직을 가진 성인 대상체이다.

에스카르엑스 겔의 제조를 위해, 2 그램의 에스카르엑스^® 멸균 상태 분말을 사용하기 전 ≤15분에 실시예 1에서 상기 본원에서 기재된 바와 같이 40 그램의 멸균 상태 겔 비히클과 혼합하여 5% 에스카르엑스 겔을 수득하였다. 분말을 겔 비히클과 혼합한 후, 각각의 그램의 제조된 에스카르엑스 겔은 0.05 g의 에스카르엑스 분말을 함유하였다. 무작위화 할당에 의해, 40 그램의 겔 비히클 (에스카르엑스 겔)에 혼합된 2 g 분말 또는 단지 40 g의 겔 비히클을 상처 표면 200 cm² 당 상처 표면에 적용하였다.

안전성 결과는 일반 및 국소적 유해 사례, 활력 징후, 통증 평가 (VAS 사용), 감염의 임상 징후, 안전성 시험실 파라미터 (혈액 화학, 혈액학, 응고), 신체 검사, 및 혈액 상실의 중증도 및 발생률을 결정함으로써 평가하였다.

에스카르엑스 겔 치료를 받고 있는 대상체의 경우, 하기 절차를 수행하였다: 리도카인 겔 또는 리도카인 4%, 에피네프린 0.05%, 테트라카인 0.5% (LET 겔)의 조합물을 사용한 예방적 진통제를 피부 가장자리 및 상처 그 자체에 에스카르엑스 적용 30분 전에 적용하였다. 상처 주위의 피부는 바셀린 연고(petrolatum ointment) (상처 가장자리 상에)에 의해 보호되었다. 멸균 상태 등장성 (0.9%) 염화나트륨 용액을 상처에 뿌렸다. 상처는 적용 절차 동안에 촉촉하게 유지되었다. 겔 적용 후, 상처는 적용된 멸균 상태 접착 장벽 물질에 부착된 폐쇄성 필름 드레싱으로 덮었다. 에스카르엑스 겔은 전체 폐쇄성 드레싱을 채우고, 이 폐쇄성 드레싱에서 공기를 남기지 않도록 특별한 주의를 기울였다. 드레싱된 상처를 그대로 폐쇄성 드레싱을 유지하고 안정시키는 느슨하고 푹신한 붕대 드레싱으로 덮었다. 드레싱은 4시간 동안 그대로 유지되었으며 드레싱을 보호하고 손상시키지 않도록 특별한 주의를 기울였다. 치료 4시간 후, 무균 기술을 사용하여 폐쇄성 드레싱을 제거하였다. 접착 장벽은 멸균 상태의 가장자리가 무딘 기기 (예를 들어 설압자)를 사용하여 제거하였다. 건조 거즈, 설압자 등으로 닦아낸 후 젖은 거즈로 닦은 다음에 상처를 물로 세척함으로써 용해된 생존가능하지 않은 조직을 상처로부터 제거하였다.

결과

완전한 괴사조직제거의 발생률

표 1에 나타낸 바와 같이, 괴사조직제거 기간 (최대 10회 치료일)의 말미에 완전한 괴사조직제거 (≥90% 생존 가능하지 않은 조직 제거)의 발생률이 치료 의향 (ITT) 모집단에서, 겔 비히클 군에 비해 에스카르엑스 겔 군에서, 즉 각각 55.1% 대 29.2%로 유의하게 더 높았다.

치료 군에 의한 완전한 괴사조직제거의 빈도 (ITT 모집단)

	완전한 괴사조직제거				p 값*
	달성됨		달성되지 않음
	n	%	n	%
에스카르엑스 (N=49)	27	55.1	22	44.9	0.047
겔 비히클 (N=24)	7	29.2	17	70.8

* 군 간의 비교를 위한 양면 피셔(Fisher) 정확한 시험

상처 병인에 따른 완전한 괴사조직제거의 발생률의 분석을 또한 수행하였다. 표 2에서 나타낸 바와 같이, 에스카르엑스 겔과 겔 비히클 군 사이의 차이는 '당뇨병성 하지 궤양 병인 (각각 50.0% 대 14.3%) 및 '정맥성 다리 궤양' 병인 (각각 62.5% 대 25.0%)에서 더 확연하였다.

병인 및 치료 군 (ITT 모집단)에 의한 완전한 괴사조직제거의 빈도

병인		완전한 괴사조직제거				p 값*
		달성됨		달성되지 않음
		n	%	n	%
당뇨병성 하지 궤양	에스카르엑스 (N=16)	8	50.0	8	50.0	0.176
	겔 비히클 (N=7)	1	14.3	6	85.7
정맥성 다리 궤양	에스카르엑스 (N=16)	10	62.5	6	37.5	0.193
	겔 비히클 (N=8)	2	25.0	6	75.0
외상/수술 후 상처	에스카르엑스 (N=17)	9	52.9	8	47.1	1.000
	겔 비히클 (N=9)	4	44.4	5	55.6

* 군 간의 비교를 위한 양면 피셔 정확한 시험

'당뇨병성 하지 궤양' 및 '정맥성 다리 궤양'의 합해진 환자 모집단 ('외상/수술 후 상처'를 가진 환자 제외)의 완전한 괴사조직제거의 빈도의 분석은, 겔 비히클에 비해 에스카르엑스 겔의 더 유의한 효과를 결과하였다 (완전한 괴사조직제거의 빈도 각각 56.3% 대 20.0%, p = 0.028; 표 3).

치료 군 (ITT 모집단)에 의한, 당뇨병성 하지 궤양 및 정맥성 다리 궤양의 합해진 환자 인구에서의 완전한 괴사조직제거의 빈도

	완전한 괴사조직제거				p 값*
	달성됨		달성되지 않음
	n	%	n	%
에스카르엑스 (N=32)	18	56.3	14	43.8	0.028
겔 비히클 (N=15)	3	20.0	12	80.0

* 군 간의 비교를 위한 양면 피셔 정확한 시험

완전한 괴사조직제거까지의 시간

10회 치료일 내에 ITT 모집단에서 완전한 괴사조직제거까지의 평균 시간은 겔 비히클 군 (평균 8.4일)에 비해 에스카르엑스 겔 군 (평균 7.6일)에서 더 짧았다. 도 5는 치료 군에 의한 완전한 괴사조직제거까지의 시간의 카플란-마이어(Kaplan-Meier) 플롯을 나타낸다. 각각의 시점에서 완전한 괴사조직제거를 달성한 환자의 백분율은 겔 비히클 군에 비해 에스카르엑스 겔 군에서 더 높았다 (로그 순위 검정(Log Rank test) p = 0.075).

병인에 의한 소집단 분석에 의하면, '정맥류 궤양' (각각 평균 6.7일 대 10.5일) 및 '당뇨병성 하지 궤양' (각각 평균 7.9일 대 8.9일각)을 가진 환자에서 겔 비히클 군에 비해 에스카르엑스 겔 군에서 완전한 괴사조직제거까지의 평균 시간이 더 짧은 것으로 나타났다. 완전한 괴사조직제거까지의 시간의 카플란-마이어 플롯이 '정맥성 다리 궤양'에 대해서는 도 6에 그리고 '당뇨병성 하지 궤양'에 대해서는 도 7에 제시되어 있다. 합해진 두 모집단, 즉 '당뇨병성 하부 궤양' 및 '정맥성 다리 궤양'의 분석에 의하면, 겔 비히클 군 (평균 9.7일)에 비해 에스카르엑스 겔 군 (평균 7.3일)에서 완전한 괴사조직제거까지 더 짧은 시간을 결과하였다.

완전한 괴사조직제거까지의 적용 횟수

표 4는 ITT 모집단에서 방문에 의한 완전한 괴사조직제거를 가진 환자의 백분율을 나타낸다.

방문에 의한 완전한 괴사조직제거를 가진 대상체의 백분율

	에스카르엑스 (N=49)			겔 비히클 (N=24)
방문	n	%	누적 백분율	n	%	누적 백분율
1	1	2.0%	2.0%	0	0.0%	0.0%
2	4	8.2%	10.2%	0	0.0%	0.0%
3	3	6.1%	16.3%	2	8.3%	8.3%
4	8	16.3%	32.7%	0	0.0%	8.3%
5	2	4.1%	36.7%	1	4.2%	12.5%
6	3	6.1%	42.9%	3	12.5%	25.0%
7	4	8.2%	51.0%	1	4.2%	29.2%
8	1	2.0%	53.1%	0	0.0%	29.2%
9	1	2.0%	55.1%	0	0.0%	29.2%
10	0	0.0%	55.1%	0	0.0%	29.2%
달성되지 않음*	22	44.9%	100.0%	17	70.8%	100.0%
총	49	100.0%	100.0%	24	100.0%	100.0%

표 4에 나타낸 바와 같이, 에스카르엑스 겔 군의 대상체 중 총 32.7%는 겔 비히클 군의 8.3%에 비해 4회 치료일 이내에 완전한 괴사조직제거를 달성하였다. 절반 이상 (51.0 %)이 겔 비히클 군에서 대상체의 삼분의 일 미만 (29.2%)에 비해 에스카르엑스 겔 군에서 7회 치료일 이내에 완전 괴사조직제거를 달성하였다. 에스카르엑스 겔 군에서 완전한 괴사조직제거를 달성한 27명 환자 중 25명 (93%)에서 완전한 괴사조직제거가 7회 적용 내에 달성되었다.

ITT 모집단에서 병인에 의한 완전한 괴사조직제거를 가진 대상체의 백분율의 소집단 분석에 의하면 '당뇨병성 하지 궤양' 및 '정맥성 다리 궤양'을 가진 대상체의 절반이 에스카르엑스 겔 군에서 각각 7일 및 5일 이내에 완전한 괴사조직제거를 달성한 것으로 나타났으며; 겔 비히클 군에서는, 7회 치료일 후 각각 단지 14.3% 및 25.0%가 완전한 괴사조직제거를 달성하였다. '외상성 수술 후 상처'를 가진 대상체에서, 52.9%는 겔 비히클 군에서 44.4%에 비해 에스카르엑스 겔로 단지 9회 치료일 후에 완전한 괴사조직제거를 달성하였다.

생존 가능하지 않은 조직의 면적

'치료 기간' 전에 생존 가능하지 않은 조직의 평균 면적은 에스카르엑스 겔 군에서 25.3 cm²이고 겔 비히클 군에서 22.7 cm²이었다. 생존 가능하지 않은 조직에서의 감소 백분율은 ITT 모집단서 모든 연구 방문에서 겔 비히클 군에 비해 에스카르엑스 겔 군에서 더 컸다. 치료 기간의 말미에, 생존 가능하지 않은 조직의 면적에서 평균 상대적 감소는 에스카르엑스 겔 군에서 67.4%에 비해 겔 비히클 군에서 46.0%이었다.

병인에 의한 생존 가능하지 않은 조직의 평균 면적의 분석에 의하면 모든 병인에서, 모든 시점에서 겔 비히클 군에 비해 에스카르엑스 겔 군에서 생존 가능하지 않은 조직의 평균 면적이 더 크게 감소한 것으로 나타났다.

안전성

이 연구에서 대다수의 환자는 보고된 AE의 85.0% (130/153)를 차지하는 경미하고 중등도인 AE를 경험하였다. 44건의 중증 유해 사례 (SAE)가 보고되었다; SAE를 보고한 환자의 비율은 두 그룹 모두에 걸쳐 유사하였으며 에스카르엑스 겔 군에서의 39% (19/49) 대 겔 비히클 군에서의 33% (8/24)이었다. AE (93.5%)를 보고한 대부분의 환자는 관련되지 않은 AE (87.6%)를 경험하였으며; 아주 약간 관련된 AE는 AE (7/153)의 5% 미만을 차지하였고 가능하게는 관련된, 아마 관련된 그리고 관련된 AE는 AE의 10% 미만을 차지하였다. 조기 치료 중단을 야기하는 어떠한 AE도 없었다.

두 연구 군 중 환자의 ≥5%에 대해 보고된 가장 흔한 국소적 AE는 SOC '부상, 중독 및 절차상 합병증 (상처 합병증 및 상처 열개) 및 '감염 및 침습 '(봉와직염 및 상처 감염) 하에 있었다. 전체 연구 모집단에서, 일반적인 AE는 SOC '일반적인 장애 및 투여 부위 병태' (발열), '혈액 및 림프계 장애' (빈혈), '위장 장애' (변비 및 메스꺼움), '피부 및 피하 조직 장애' (가려움증) 및 '대사 및 영양 장애' (저칼륨 혈증)로 두 연구 군 중 대상체의 ≥5%에 대해 보고되었다.

실험실 파라미터 (혈액 화학, 혈액학 및 응고 인자), 활력 징후 (혈압, 맥박수 및 체온), 신체 검사 및 병용 의약 사용의 평가는 에스카르엑스 겔 군과 겔 비히클 군 사이의 어떠한 명백한 차이를 나타내지 않았다. 어떠한 일관되거나 누적된 변화가 없었다. 대부분의 실험실 이상이 연구 이전에 있었다.

통증 점수는 치료 방문에 걸쳐 연구 치료 군 간에 거의 동일하였고, 적용 전후의 최소한의 변화가 있었다. 치료 기간 동안에 심한 감염 (봉와직염/골수염의 임상 징후를 통해 평가)의 최소한의 증거가 있었다.

따라서, 에스카르엑스 겔 요법은 내약성이 우수하였고 평가된 신체계의 현저한 병리학적 변화와 또는 실험실 파라미터, 활력 징후, 통증 평가 및 병용 의약 사용에서의 일관된 변화와 연관이 없었다.

결론

본 연구는 5% 에스카르엑스 겔이 치유하기 어려운 상처 치료에 효과적인 효소 제거제라는 것을 확인해 주었다. 이는 만성 상처, 특히 당뇨병성 하지 궤양 및 정맥성 다리 궤양에 대한 효과적이고 신속한 비수술적인 괴사조직제거 치료의 임상적 이점을 제공한다.

실시예 4

젤 제제 중의 API의 효능 및 안전성 - 임상 연구

다기관, 전향적, 무작위화, 제어된 평가자 맹검 연구가 치료하기 어려운 상처를 가진 대상체에서 수행되어 치료하기 어려운 궤양을 가진 한자에서 상처의 기부를 준비하기 위한 상기 본원에서의 실시예 1 및 2에 개시된 겔 제제에서 API의 효능 및 안전성을 평가하였다.

연구는 에스카르엑스 겔 또는 겔 비히클에 의해 치료되는 32명의 대상체 (단지 2개의 병인을 가짐; 정맥성 다리 궤양 및 당뇨병성 하지 궤양)를 포함한다. 전반적으로, 20명의 환자는 24 ± 2시간의 적용시간 (제1 코호트)으로 치료하고 12명의 대상체는 48 ± 2시간의 적용 시간 (제2 코호트)으로 최대 8회의 적용으로 치료하였다. "치료 기간"의 완료 후에, 환자는 표준 절차에 따라 치료되고 마지막 적용으로부터 최대 12주 (최대 12회 방문) 동안 완전한 상처 봉합 때까지 1주 1회 평가 (상처 평가)되었다. 상처 봉합은, 발생할 경우, 마지막 주간 방문 후 2주에 확인되었다. 이 연구의 전체 지속시간은 최대 19주이다.

연구 모집단은 하기 병인의 치유하기 어려운 상처 상에 >50% 괴사성/딱지/피브린 생존 가능하지 않은 조직을 가진 성인을 포함한다:

1. 정맥성 다리 궤양

2. 당뇨병성 하지 궤양

에스카르엑스 겔 또는 겔 비히클의 각각의 적용 후, 상처는 세척하고, 사진 촬영을 하고 상처 크기, 생존 가능하지 않은 조직의 제거 및 육아 조직의 변화 (디지털 평판측량(digital planimetry) 소프트웨어에 의한), 상처 상태 및 안전성 파라미터에 대해 평가하였다. 각각의 괴사조직제거 치료 후에 상처는 촉촉함을 보유한 식염수 거즈로 드레싱하였다.

2 그램의 데브라제^® 멸균 상태 분말을 40 그램의 멸균 상태 겔 비히클 (1:20의 비) 중에서 사용 전 ≤15분에 혼합하여 에스카르엑스 겔을 수득하였다.

분말을 겔 비히클과 혼합한 후, 각각의 그램의 제조된 에스카르엑스 겔은 0.05　g 에스카르엑스^® 분말을 함유하였다.

할당에 의해, 40 그램의 겔 비히클 (에스카르엑스 겔)에 혼합된 2 gr 분말 또는 단지 40 g의 겔 비히클을, 무작위화 아암(arm)에 의해, 각각의 적용당 상처 표면 200 cm² 당 상처 표면에, 24 ± 1시간 및 48 ± 2시간 (2회 치료 아암) 동안, 그리고 최대 10회 적용 또는 완전한 괴사조직제거가 달성될 때까지 (어느 것이든 먼저 발생하는 것) 적용하였다.

포함 기준은 다음과 같았다.

1. 18세에서 90세 연령 사이의 환자, 남성 또는 여성;

2. 정맥성 다리 궤양 또는 당뇨병성 (하지) 궤양 또는 외상/수술 후 상처 (병력 및 신체 검사에 의해 결정)를 가진 환자;

3. 상처는 적어도 4주 동안 치유되고 있지 않다;

4. 괴사성/딱지/피브린 생존 가능하지 않은 조직 면적은 상처 부위의 적어도 50%이다 (임상 평가에 의해 평가).

5. 상처 표면적 (길이 X 폭)은 5 - 200 cm² 범위이다.

주요 종말점은 괴사조직제거 기간의 말미에 (최대 10회 치료) 완전한 괴사조직제거 (생존 가능하지 않은 조직 제거)의 발생률이다.

2차 종말점은 다음을 포함한다:

1. 완전한 괴사조직제거 달성까지의 시간 (최대 10회 치료) (생존 분석);

2. 완전한 괴사조직제거를 달성하는 적용의 횟수;

3. >75% 괴사조직제거 달성까지의 시간 (최대 10회 치료);

4. >75% 괴사조직제거의 발생률 (최대 10회 치료);

5. 치료 기간 동안의 상처 괴사조직제거 상태의 변화 평가: 생존 가능하지 않은 조직에서의 감소 백분율 (매일, 10회 치료 동안에);

6. 치유 및 봉합을 위해 준비된 상처 기부 달성까지의 시간: 성공적으로 자가 이식될 수 있는 기부;

7. 완전한 육아 달성까지의 시간 및 > 75% 육아 달성까지의 시간 (최대 12주);

8. 완전한 육아의 발생률 및 > 75%의 육아의 발생률 (12주에);

9. 시간 경과에 따른 육아 조직의 변화 백분율 (매주, 기준선-12주 동안에);

10. 완전한 상처 봉합의 발생률 (최대 12주);

11. 완전한 상처 봉합까지의 시간 (최대 12주);

12. 상처 부위 감소: 시간 경과에 따른 상처 크기의 백분율 감소 (매주, 기준선에서 최대 12주);

13. 다리 궤양 측정 툴(Leg Ulcer Measurement Tool) (LUMT)에 의해 평가된 바와 같은 상처의 상태 변화 (괴사조직제거의 종료 및 상처 봉합 추적 관찰의 종료)

14. SF-36에 의해 평가된 바와 같은 삶의 질의 변화 (상처 봉합 추적 관찰의 종료 및 상처 봉합 후 3개월 추적 관찰 기간의 종료);

15. 상처 재발률 (상처 봉합 3개월 후);

16. 상처의 재발까지의 시간 (봉합 후 3개월 동안에).

안전성 결과 측정이 평가된다. 이러한 조치는 전신 및 국소적 유해 사례의 중증도 및 발생률, 활력 징후, 통증 평가 (VAS 사용), 감염 증거, 임상 실험실 파라미터 (혈액 화학, 혈액학, 응고), 신체 검사 및 혈액 상실을 포함한다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명이 상기에서 본원에 특히 도시되고 기재된 것에 의해 제한되지 않음을 이식할 것이다. 오히려 본 발명의 범위는 다음의 청구범위에 의해 정의된다.

Claims (38)

1. (a) 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물 (상기 단백질 분해 효소 혼합물은 건조 또는 동결건조된 형태이다);
   (b) 제약상 허용되는 pH 조정제; 및
   (c) (i) 카르보머인 아크릴산의 가교결합된 중합체;
   (ii) 글리세롤, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리글리세롤, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 이소프로필 알콜, 및 그의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 극성 공-용매; 및
   (iii) 물
   을 포함하는 담체
   를 포함하는 괴사조직제거 조성물로서,
   여기서, 상기 카르보머는 담체의 총 중량의 0.5% (w/w) 내지 1.5% (w/w)의 양으로 존재하고,
   사용 전에, 단백질 분해 효소 혼합물 (a)을 pH 조정제 (b) 및 담체 (c)와 혼합하여 10,000 센티푸아즈 (cP) 내지 45,000 cP 범위의 점도 및 5.4 내지 8.8 범위의 pH를 갖는 것을 특징으로 하는 겔 형태의 괴사조직제거 조성물(debriding composition)을 형성시키며, 상기 단백질 분해 효소 혼합물은 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 7.5% (w/w) 범위의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
2. 제1항에 있어서, 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 5% (w/w) 범위의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
3. 제1항에 있어서, 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 2.5% (w/w)의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
4. 제1항에 있어서, 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 5% (w/w)의 양으로 괴사조직제거 조성물에 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
5. 제1항에 있어서, pH 조정제가 인산나트륨, 탄산나트륨 및 탄산칼륨으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 괴사조직제거 조성물.
6. 제5항에 있어서, pH 조정제가 인산나트륨인 괴사조직제거 조성물.
7. 제6항에 있어서, 인산나트륨이 무수 인산수소이나트륨인 괴사조직제거 조성물.
8. 제1항에 있어서, 카르보머가 알릴 수크로스 또는 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 아크릴산의 중합체인 괴사조직제거 조성물.
9. 제1항에 있어서, 카르보머가 카르보폴^® 980 NF인 괴사조직제거 조성물.
10. 제1항에 있어서, 극성 공-용매가 글리세롤인 괴사조직제거 조성물.　
11. 제10항에 있어서, 글리세롤이 담체의 총 중량의 2% (w/w) 내지 16% (w/w) 범위의 양으로 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
12. 제11항에 있어서, 글리세롤이 담체의 총 중량의 10% (w/w)의 양으로 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
13. 제1항에 있어서, 괴사조직제거 조성물의 점도가 10,000 cP 내지 30,000 cP 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.
14. 제1항에 있어서, 괴사조직제거 조성물의 점도가 15,000 cP 내지 25,000 cP 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.
15. 제1항에 있어서, 괴사조직제거 조성물의 pH가 6.0 내지 7.0 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.
16. 제1항에 있어서,
    (a) 담체의 총 중량의 1% w/w 내지 7% w/w 범위의 양으로 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;
    (b) 제약상 허용되는 pH 조정제; 및
    (c) (i) 담체의 총 중량의 0.5% (w/w) 내지 1.5% (w/w) 범위의 양으로 존재하는, 알릴 수크로스 또는 알릴 펜타에리트리톨로 가교결합된 아크릴산의 중합체;
    (ii) 글리세롤; 및
    (iii) 물
    을 포함하는 담체
    를 포함하는 괴사조직제거 조성물.
17. 제1항에 있어서,
    (a) 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 7% (w/w) 범위의 양으로 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;
    (b) 제약상 허용되는 pH 조정제; 및
    (c) (i) 담체의 총 중량의 0.5% 내지 1.5% (w/w) 범위의 양의 카르보폴^® 980 NF;
    (ii) 글리세롤; 및
    (iii) 물
    을 포함하는 담체
    를 포함하는 괴사조직제거 조성물.
18. 제1항에 있어서,
    (a) 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 7% (w/w) 범위의 양으로 제1 용기에 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;
    (b) (i) 담체의 총 중량의 0.9% (w/w)의 양의 카르보폴^® 980 NF;
    (ii) 담체의 총 중량의 10% (w/w)의 양의 글리세롤;
    (iii) 담체의 총 중량의 0.25% (w/w)의 양으로 존재하는 무수 인산수소이나트륨; 및
    (iv) 물
    을 포함하는 제2 용기에 존재하는 담체
    를 포함하는 괴사조직제거 조성물이며,
    여기서 조성물의 점도가 15,000 cP 내지 25,000 cP 범위이고 pH가 6.0 내지 7.0 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.
19. 제18항에 있어서, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 5% (w/w) 범위의 양으로 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
20. 상처의 괴사조직제거에서의 용도를 위한, 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 괴사조직제거 조성물.
21. 제20항에 있어서, 상기 괴사조직제거 조성물이,
    (a) 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 7% (w/w) 범위의 양으로 용기의 제1 구획에 존재하는, 줄기 브로멜라인 (EC 3.4.22.32) 및 아나나인 (EC 3.4.22.31)을 포함하는, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물;
    (b) (i) 담체의 총 중량의 0.9% (w/w)의 양의 카르보폴^® 980 NF;
    (ii) 담체의 총 중량의 10% (w/w)의 양의 글리세롤;
    (iii) 담체의 총 중량의 0.25% (w/w)의 양으로 존재하는 무수 인산수소이나트륨; 및
    (iv) 물
    을 포함하는 제2 용기에 존재하는 담체
    를 포함하며,
    여기서 조성물의 점도가 15,000 cP 내지 25,000 cP 범위이고 pH가 6.0 내지 7.0 범위인 것인 괴사조직제거 조성물.
22. 제21항에 있어서, 브로멜라인으로부터 수득된 단백질 분해 효소 혼합물이 담체의 총 중량의 1% (w/w) 내지 5% (w/w) 범위의 양으로 존재하는 것인 괴사조직제거 조성물.
23. 제20항에 있어서, 상처가 만성이거나 치유하기가 어려운 상처인 것인 괴사조직제거 조성물.
24. 제23항에 있어서, 만성 상처가 당뇨병성 궤양, 정맥 울혈 궤양, 동맥 부전 궤양, 압박 궤양, 수술 후 상처, 및 외상 후 상처로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 괴사조직제거 조성물.
25. 제23항에 있어서, 만성 상처가 당뇨병성 하지 궤양, 정맥성 다리 궤양, 수술 후 상처, 및 외상 후 상처로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 괴사조직제거 조성물.
26. 제20항에 있어서, 상기 괴사조직제거 조성물이 적용당 4시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지되도록 적응된 것인 괴사조직제거 조성물.
27. 제20항에 있어서, 상기 괴사조직제거 조성물이 적용당 22 내지 26시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지되도록 적응된 것인 괴사조직제거 조성물.
28. 제20항에 있어서, 상기 괴사조직제거 조성물이 적용당 44 내지 52시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지되도록 적응된 것인 괴사조직제거 조성물.
29. 제20항에 있어서, 상기 괴사조직제거 조성물이 적용당 44 내지 52시간 및 적용당 65 내지 79시간으로 이루어진 군으로부터 선택된 지속시간 동안 상처 부위와 접촉하여 유지되도록 적응된 것인 괴사조직제거 조성물.
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