KR102268945B1 - 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법 - Google Patents

카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102268945B1
KR102268945B1 KR1020167011049A KR20167011049A KR102268945B1 KR 102268945 B1 KR102268945 B1 KR 102268945B1 KR 1020167011049 A KR1020167011049 A KR 1020167011049A KR 20167011049 A KR20167011049 A KR 20167011049A KR 102268945 B1 KR102268945 B1 KR 102268945B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hyaluronic acid
salt
modified hyaluronic
acid
carboxymethyl group
Prior art date
Application number
KR1020167011049A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20160067887A (ko
Inventor
슌이치 후지카와
šœ이치 후지카와
유키나 아베
가즈노리 아사오카
다쿠시 요시다
Original Assignee
큐피가부시키가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 큐피가부시키가이샤 filed Critical 큐피가부시키가이샤
Publication of KR20160067887A publication Critical patent/KR20160067887A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102268945B1 publication Critical patent/KR102268945B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/4866—Organic macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/001—Preparations for care of the lips
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10—Washing or bathing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/02—Preparations for cleaning the hair
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/12—Preparations containing hair conditioners
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Non-Alcoholic Beverages (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법은, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함하고, 상기 함수 용매는, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고, 상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하이다.

Description

카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법{CARBOXYMETHYL-GROUP-CONTAINING MODIFIED HYALURONIC ACID AND/OR SALT THEREOF AND/OR PRODUCTION METHOD FOR CARBOXYMETHYL-GROUP-CONTAINING MODIFIED HYALURONIC ACID AND/OR SALT THEREOF}
본 발명은 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법, 그리고 이것을 함유하는 화장료, 식품 조성물 및 의약 조성물에 관한 것이다.
예를 들어 히알루론산 등의 수용성 다당류는, 수산기나 카르복실기를 함유하는 것이 많고, 이들 기의 사이에서 형성되는 수소 결합에서 기인하여, 점도가 높은 것이 많다 (일본 공개특허공보 소63-57602호). 수용성 다당류의 점도의 높이는, 외용 의약품 및 화장품에 있어서는, 나쁜 감촉을 초래하는 경우가 있고, 또, 내복 의약품 및 식품에 있어서는, 나쁜 식감을 초래하는 경우가 있다. 이 때문에, 보수력을 갖고, 또한, 끈적거림이 적으며, 식감이 우수한 수용성 다당류가 요구되고 있다.
본 발명은 백색도가 높고, 또한 카르복시메틸화율이 높은 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 간편하게 얻을 수 있는, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법을 제공한다.
본 발명은 또 백색도가 높고, 또한 카르복시메틸화율이 높은 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염, 그리고 이것을 함유하는 화장료, 식품 조성물 및 의약 조성물을 제공한다.
본원 발명자는 특정한 조건에서 히알루론산을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시킴으로써, 백색도가 높고, 또한, 소정의 카르복시메틸화율을 갖는 수식 히알루론산이 얻어지는 것을 알아내었다.
또, 본원 발명자는, 이러한 방법을 사용하여 얻어진, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 백색도가 높고, 보수력이 우수하며, 또한 저점도인 것을 알아내었다.
1. 본 발명의 일 양태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법은, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 (含水) 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함하고, 상기 함수 용매는, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고, 상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하이다.
2. 상기 1 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 할로아세트산은 클로로아세트산 및/또는 브로모아세트산일 수 있다.
3. 상기 1 또는 2 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 함수 용매에 있어서의 상기 히알루론산의 농도가 0.05 g/㎖ 이상 0.5 g/㎖ 이하일 수 있다.
4. 상기 1 내지 3 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 분자량이 4,000 이상 400 만 이하일 수 있다.
5. 상기 1 내지 4 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하일 수 있다.
6. 상기 1 내지 5 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 반응시키는 공정에 의해, 분자량이 80 만 이상인, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻을 수 있다.
7. 상기 6 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 반응시키는 공정에 의해, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하인, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻을 수 있다.
8. 본 발명의 일 양태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은 분자량이 80 만 이상이고, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하이다.
9. 상기 8 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 동점도가 30 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하일 수 있다.
10. 상기 8 또는 9 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 히알루론산을 구성하는 수산기 중 적어도 일부의 수산기의 수소 원자가, -CH2-CO2H 및/또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기로 치환되어 있을 수 있다.
11. 상기 8 내지 10 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하일 수 있다.
12. 상기 1 내지 5 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 반응시키는 공정에 의해, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만인, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염을 얻을 수 있다.
13. 상기 12 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 있어서, 상기 반응시키는 공정에 의해, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하인, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻을 수 있다.
14. 본 발명의 일 양태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은 분자량이 4,000 이상 80 만 미만이고, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하인, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻을 수 있다.
15. 상기 14 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 동점도가 1 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하일 수 있다.
16. 상기 14 또는 15 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 히알루론산을 구성하는 수산기 중 적어도 일부의 수산기의 수소 원자가 -CH2-CO2H 및/또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기로 치환되어 있을 수 있다.
17. 상기 14 내지 16 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하일 수 있다.
18. 본 발명의 일 양태에 관련된 화장료는, 상기 8 내지 11, 14 내지 17 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염을 함유한다.
19. 본 발명의 일 양태에 관련된 식품 조성물은, 상기 8 내지 11, 14 내지 17 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염을 함유한다.
20. 본 발명의 일 양태에 관련된 의약품 조성물은, 상기 8 내지 11, 14 내지 17 중 어느 하나에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염을 함유한다.
상기 1 내지 7, 12 및 13 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법에 의하면, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함하고, 상기 함수 용매는, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고, 상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하임으로써, 백색도가 높고, 또한, 소정의 카르복시메틸화율을 갖는 수식 히알루론산을 간편하게 얻을 수 있다.
상기 8 내지 11 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 분자량이 80 만 이상이고, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하이고, 또, 상기 14 내지 17 에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만이고, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 보수력을 갖고, 또한, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 점도가 작다. 이것에 의해 그 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은, 백색도가 높은 데다가, 끈적거림이 적고, 감촉이 양호하며 (매끄러운 촉감을 갖는다), 또한, 식감이 양호하기 때문에, 예를 들어 의약품, 화장품 및 식품의 성분으로서 사용할 수 있다.
도 1 은, 본 발명의 일 실시예에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 보수율의 측정 결과를 나타내는 도면이다.
도 2 는, 본 발명의 일 실시예에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 점도에 관한 관능 검사의 결과를 나타내는 도면이다.
도 3 은, 본 발명의 일 실시예에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 감촉에 관한 관능 검사의 결과를 나타내는 도면이다.
이하, 도면을 참조하면서, 본 발명을 상세하게 설명한다. 또한, 본 발명에 있어서, 각별히 언급하지 않는 한 「부」는 「질량부」를 의미하고, 「％」는 「질량％」를 의미한다.
[카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 제조 방법]
본 발명의 일 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 (본 명세서에 있어서, 간단히 「수식 히알루론산류」라고 기재하는 경우도 있다) 의 제조 방법은, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함한다. 여기서, 상기 함수 용매는, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고, 상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하이다.
상기 반응시키는 공정에 있어서, 반응액 (함수 용매) 중에 히알루론산 및/또는 그 염의 적어도 일부 (바람직하게는, 히알루론산 및/또는 그 염의 전부 또는 대부분) 와 할로아세트산 및/또는 그 염이 용해된 상태로 그 히알루론산 및/또는 그 염과 그 할로아세트산 및/또는 그 염을 반응시킬 수 있다. 이 경우, 히알루론산 및/또는 그 염과 할로아세트산 및/또는 그 염이 용해되고 있는 점에서, 상기 반응액은 눈으로 보았을 때 투명해도 된다.
＜원료 히알루론산 및/또는 그 염＞
본 발명에 있어서, 「히알루론산」이란, 글루쿠론산과 N-아세틸글루코사민의 이당으로 이루어지는 반복 구성 단위를 1 이상 갖는 다당류를 말한다. 또, 「히알루론산의 염」으로는 특별히 한정되지 않지만, 식품 또는 약학상 허용할 수 있는 염인 것이 바람직하고, 예를 들어, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 아연염, 마그네슘염, 암모늄염 등을 들 수 있다.
히알루론산은, 기본적으로는 β-D-글루쿠론산의 1 위치와 β-D-N-아세틸-글루코사민의 3 위치가 결합한 2 당 단위를 적어도 1 개 함유하는 2 당 이상인 것이고, 또한 β-D-글루쿠론산과 β-D-N-아세틸-글루코사민으로 기본적으로 구성되고, 2 당 단위가 복수 개 결합한 것이다. 그 당은 불포화당이어도 되고, 불포화당으로는, 비환원 말단당, 통상, 글루쿠론산의 4, 5 위치 탄소간이 불포화인 것 등을 들 수 있다.
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 사용되는 원료인 원료 히알루론산 및/또는 그 염은, 동물 등의 천연물 (예를 들어 계관 (鷄冠), 탯줄, 피부, 관절액 등의 생체 조직 등) 로부터 추출된 것이어도 되고, 또는, 미생물, 동물 세포 혹은 식물 세포를 배양하여 얻어진 것 (예를 들어 스트렙토코쿠스속의 세균 등을 사용한 발효법), 화학적 또는 효소적으로 합성된 것 등을 사용할 수 있다.
원료 히알루론산 및/또는 그 염으로는, 당해 조 (粗) 추출물 및 정제물 중 어느 것을 사용해도 되지만, 정제물, 구체적으로는, 카르복시메틸화를 원활하게 진행할 수 있는 점에서, 순도가 90 ％ (질량비) 이상인 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 사용하는 것이 바람직하다.
＜원료 히알루론산 및/또는 그 염의 평균 분자량＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 있어서, 상기 반응시키는 공정에서 용해시키는 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 평균 분자량은 통상, 카르복시메틸화를 원활하게 실시할 수 있는 점에서 4,000 이상 400 만 이하인 것이 바람직하고, 300 만 이하인 것이 보다 바람직하다. 또한, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 평균 분자량은 하기 방법으로 측정할 수 있다.
＜분자량의 측정 방법＞
즉, 약 0.05 g 의 (정제) 히알루론산 (본품) 을 정밀하게 계량하여, 0.2 ㏖/ℓ 농도의 염화나트륨 용액에 녹여, 정확하게 100 ㎖ 로 한 용액 및 이 용액 8 ㎖, 12 ㎖ 그리고 16 ㎖ 를 정확하게 계량하여, 각각에 0.2 ㏖/ℓ 농도의 염화나트륨 용액을 첨가하여 정확하게 20 ㎖ 로 한 용액을 시료 용액으로 한다. 이 시료 용액 및 0.2 ㏖/ℓ 농도의 염화나트륨 용액에 대해, 일본 약국방 (제 16 개정) 일반 시험법의 점도 측정법 (제1법 모세관 점도 측정법) 에 의해 30.0 ± 0.1 ℃ 에서 비점도를 측정하고 (식 (A)), 각 농도에 있어서의 환원 점도를 산출한다 (식 (B)). 환원 점도를 세로축에, 본품의 환산한 건조물에 대한 농도 (g/100 ㎖) 를 가로축에 취하여 그래프를 그리고, 각 점을 연결하는 직선과 세로축의 교점으로부터 극한 점도를 구한다. 여기서 구해진 극한 점도를 Laurent 의 식 (식 (C)) 에 대입하여, 평균 분자량을 산출한다 (Torvard C Laurent, Marion Ryan, and Adolph Pietruszkiewicz, "Fractionation of hyaluronic Acid", Biochemical et Biophysical Acta., 42, 476-485 (1960), 요모타 치카코, 「히알루론산나트륨 제제의 SEC-MALLS 에 의한 분자량 평가」, 국립 의약품 식품 위생 연구소 보고, 제 121호, 030-033 (2003)).
(식 A) 비점도 ＝ {시료 용액의 소요 유하 초수}/(0.2 ㏖/ℓ 염화나트륨 용액의 소요 유하 초수)} － 1
(식 B) 환원 점도 (㎗/g) ＝ 비점도/(본품의 환산한 건조물에 대한 농도 (g/100 ㎖))
(식 C) 극한 점도 (㎗/g) ＝ 3.6 × 10-4M0.78
M : 평균 분자량
＜원료 히알루론산 및/또는 그 염의 함유량＞
원료 히알루론산 및/또는 그 염에 있어서, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 함유량은, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 순도의 지표이고, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 함유량이 많을수록, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 순도가 높다고 할 수 있다.
본 발명에 있어서, 원료 히알루론산 및/또는 그 염에 있어서의 히알루론산의 함유량은, 카르바졸 황산법 (예를 들어 일본 약국방) 으로 측정된 글루쿠론산 정량값으로부터 산출된 값이다.
카르바졸 황산법은, 붕산나트륨·황산 용액 중에 히알루론산 수용액을 첨가하여 혼화하고, 히알루론산을 가열 분해한 후 냉각시키고, 카르바졸·에탄올 용액을 첨가하여 혼화하고, 가열 후 방랭시킨 시료액의 흡광도 (530 ㎚) 를 측정하는 방법이다. 동일하게 처리한 D-글루쿠로놀락톤을 사용하여 검량선을 작성하고, D-글루쿠로놀락톤 환산값을 산출한 후, 1.102 를 곱하여 글루쿠론산 정량값을 구한다. 얻어진 글루쿠론산 정량값에 (히알루론산의 분자량/글루쿠론산의 분자량) 을 곱하여 히알루론산의 함유량을 산출한다.
＜카르복시메틸화＞
본 발명에 있어서, 「수식 히알루론산 및/또는 그 염」이란, 적어도 일부에 유기기가 도입되어 있는 히알루론산 및/또는 그 염을 말하고, 히알루론산 및/또는 그 염과는 상이한 구조를 갖는다. 또, 본 발명에 있어서 「유기기」란, 탄소 원자를 갖는 기를 말한다.
또, 본 발명에 있어서, 「카르복시메틸기」란, 「-CH2-CO2H」또는 「-CH2-CO2-」로 나타내는 기를 말한다.
따라서, 본 발명에 있어서, 「카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염」이란, 적어도 일부에 카르복시메틸기가 도입되어 있는 히알루론산 및/또는 그 염을 말한다.
보다 구체적으로는, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에서는, 예를 들어, 히알루론산 (하기 식 (1) 참조) 을 구성하는 수산기 (하기 식 (1) 에 있어서, 히알루론산을 구성하는 N-아세틸글루코사민의 C-4 위치, C-6 위치, 그리고, 히알루론산을 구성하는 글루쿠론산의 C-2 위치, C-3 위치의 적어도 일부의 수산기의 수소 원자가, -CH2-CO2H 및/또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기) 로 치환되어 있을 수 있다. 즉, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에서는, 이들 위치에 있는 수산기 중 1 또는 2 이상의 위치에 있는 수산기의 수소 원자가, -CH2-CO2H 및/또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기로 치환되어 있어도 된다.
본 발명에 있어서, 「히알루론산을 구성하는 2 당 단위」란, 히알루론산을 구성하는, 서로 이웃하여 결합하는 2 당 (글루쿠론산 및 N-아세틸글루코사민) 으로 구성되는 1 단위를 말하고, 「히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율」이란, 그 1 단위에 대한, 그 1 단위에 함유되는 카르복시메틸기의 수이고, 보다 구체적으로는, 그 1 단위를 100 ％ 로 한 경우, 그 1 단위에 대한, 그 1 단위에 함유되는 카르복시메틸기의 수의 비율 (％) 을 말한다.
[화학식 1]
Figure 112016040224889-pct00001
(식 중, n 은 1 이상 7,500 이하의 수를 나타낸다)
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는 예를 들어, 하기 식 (2) 로 나타내는 화합물일 수 있다.
[화학식 2]
Figure 112016040224889-pct00002
(식 중, R1 ∼ R5 는 독립적으로, 수소원자, -CH2-CO2H 로 나타내는 기, 또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기를 나타내고 (단, R1 ∼ R5 가 모두 수소원자를 나타내는 경우를 제외한다), n 은 1 이상 7,500 이하의 수를 나타낸다)
＜pH＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 있어서, 수산기의 구핵성을 높일 수 있는 점에서, 상기 반응에 사용하는 염기성 조건하에서 실시되는 것이 바람직하고, 반응액 (함수 용매) 의 pH 가 9 이상 (9 이상 14 이하, 바람직하게는 10 이상 14 이하, 보다 바람직하게는 11 이상 14 이하) 인 것이 보다 바람직하다.
또한, 반응액을 염기성으로 조정하기 위해서, 염기성 전해질을 반응액 중에서 사용할 수 있다. 염기성 전해질로는, 예를 들어, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등의 알칼리 금속의 수산화물, 수산화칼슘, 수산화마그네슘, 수산화바륨 등의 알칼리 토금속의 수산화물을 들 수 있다. 후술하는 제 1 예 및 제 2 예 중 어느 수식 히알루론산류를 효율적으로 얻을 수 있는 점에서, 반응액 중의 염기성 전해질의 농도는 예를 들어, 0.2 몰/ℓ 이상 10 몰/ℓ 이하이고, 바람직하게는 0.5 몰/ℓ 이상이며, 8 몰/ℓ 이하이다.
또, 후술하는 제 1 예 및 제 2 예 중 어느 수식 히알루론산류를 양호한 효율로 얻을 수 있는 점에서, 상기 함수 용매에 있어서의 상기 히알루론산의 농도가 0.05 g/㎖ 이상 0.5 g/㎖ 이하인 것이 바람직하다.
＜할로아세트산 및/또는 그 염＞
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 제조 방법 (이하, 간단히 「본 실시형태에 관련된 제조 방법」이라고 약칭하는 경우도 있다) 에 있어서, 할로아세트산 및/또는 그 염은, 카르복시메틸기를 원료 히알루론산 및/또는 그 염에 도입하기 위해서 사용된다.
할로아세트산은 예를 들어, 모노할로아세트산 및/또는 그 염일 수 있고, 보다 구체적으로는, 클로로아세트산 및/또는 그 염, 또는, 브로모아세트산 또는 그 염인 것이 바람직하다. 할로아세트산의 염은 예를 들어, 클로로아세트산의 알칼리 금속염 및/또는 브로모아세트산의 알칼리 금속염인 것이 바람직하고, 클로로아세트산나트륨 및/또는 브로모아세트산나트륨인 것이 보다 바람직하다.
＜할로아세트산 및/또는 그 염의 사용량＞
할로아세트산 및/또는 그 염의 사용량은 통상, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 사용량의 10 ％ 이상 500 ％ 이하 (질량비) 이고, 50 ％ 이상 200 ％ 이하 (질량비) 인 것이 바람직하다.
＜함수 용매＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 있어서, 상기 함수 용매가, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액임으로써, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 용해성이 우수하다.
함수 용매가 수용성 유기 용매와 물의 혼합액인 경우, 즉, 함수 용매가 물 및 수용성 유기 용매의 양방을 함유하는 경우, 히알루론산의 용해성을 높일 수 있는 점에서, 그 함수 용매 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율은 통상 60 v/v％ 이하 (0 v/v％ 를 초과하고 60 v/v％ 이하) 이고, 40 v/v％ 이하 (0 v/v％ 를 초과하고 40 v/v％ 이하) 인 것이 바람직하다.
수용성 유기 용매로는, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올등의 알코올계 용매, 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 케톤계 용매, 테트라하이드로푸란, 아세토니트릴 등을 들 수 있고, 이들을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이 중, 이소프로판올, 에탄올 등의 탄소 원자수 1, 2 또는 3 의 저급 알코올이 바람직하다.
＜반응 온도＞
상기 반응에 있어서, 카르복실화를 원활하게 진행할 수 있고, 또한, 분자량의 저하를 억제할 수 있는 점에서, 반응액의 온도는 통상 30 ℃ 이하 (바람직하게는 0 ℃ 를 초과하고 또한 30 ℃ 이하) 인 것이 바람직하고, 10 ℃ 이하 (바람직하게는 0 ℃ 를 초과하고 또한 10 ℃ 이하) 인 것이 보다 바람직하다. 특히, 반응액의 온도를 10 ℃ 이하로 함으로써, 고분자량 (80 만 이상) 의 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다.
예를 들어, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 클로로아세트산 및/또는 그 염을 사용하는 경우, 카르복시메틸화를 원활하게 진행할 수 있고, 또한, 얻어지는 수식 히알루론산류의 갈변을 억제할 수 있는 점에서, 상기 반응에 있어서의 반응액의 온도는 통상 30 ℃ 이하 (바람직하게는 0 ℃ 를 초과하고 또한 30 ℃ 이하) 일 수 있고, 1 ℃ 이상 30 ℃ 이하인 것이 바람직하다.
또, 예를 들어, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 브로모아세트산 및/또는 그 염을 사용하는 경우, 카르복시메틸화를 원활하게 진행할 수 있고, 얻어지는 수식 히알루론산류의 갈변 및 분자량의 저하를 억제할 수 있는 점에서, 상기 반응에 있어서의 반응액의 온도는 통상 10 ℃ 이하 (바람직하게는 0 ℃ 를 초과하고 또한 10 ℃ 이하) 일 수 있고, 1 ℃ 이상 10 ℃ 이하인 것이 바람직하다.
보다 구체적으로는, 후술하는 제 1 예인, 고분자량 (예를 들어 분자량 80 만 이상) 이고, 또한, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율 (이하, 간단히 「카르복시메틸화율」이라고도 한다) 이 높은 (예를 들어 50 ％ 이상, 바람직하게는 50 ％ 이상 200 ％ 이하) 수식 히알루론산류를 제조하기 위해서는, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서, 브로모아세트산 및/또는 그 염을 사용하여, 반응액의 온도를 10 ℃ 이하 (예를 들어, 0 ℃ 를 초과하고 또한 10 ℃ 이하) 에서 반응을 실시하는 것이 바람직하다.
또, 후술하는 제 2 예인, 저분자량 (예를 들어 분자량 80 만 미만) 이고, 카르복시메틸화율이 높은 (예를 들어 60 ％ 이상, 바람직하게는 60 ％ 이상 200 ％ 이하) 수식 히알루론산류를 제조하기 위해서는, 반응액의 온도를 10 ℃ 이상 (예를 들어, 10 ℃ 이상 35 ℃ 이하, 바람직하게는 15 ℃ 이상, 보다 바람직하게는 20 ℃ 이상, 더욱 바람직하게는 실온) 에서 반응을 실시하는 것이 바람직하다.
＜반응 시간＞
상기 반응에 있어서, 카르복실화를 원활하게 진행할 수 있고, 또한, 분자량의 저하를 억제할 수 있는 점에서, 반응 시간은 통상 30 분 이상 100 시간 이하인 것이 바람직하고, 60 분 이상 60 시간 이하인 것이 보다 바람직하다.
＜제 1 제조예＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 분자량이 80 만 이상인, 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다. 즉, 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 고분자량이고, 또한, 백색도가 높은 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다.
이 경우, 얻어지는 수식 히알루론산류의 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하일 수 있다.
＜제 2 제조예＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 있어서, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만인, 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다.
이 경우, 얻어지는 수식 히알루론산류의 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하일 수 있다. 즉, 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만으로 비교적 낮고, 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하로 높으며, 또한, 백색도가 높은 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다.
[카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염]
＜분자량＞
본 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 (수식 히알루론산류) 은, 분자량이 4,000 이상 200 만 이하이다. 본 발명에 있어서, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 분자량은, 이하의 방법으로 측정할 수 있다.
겔 여과 칼럼을 사용하여, 분자량이 이미 알려진 복수의 (정제) 히알루론산 (기준 물질) 을 액체 크로마토그래피 분석함으로써, 그것들의 유지 시간으로부터 검량선을 작성한다. 동일하게, 측정 대상인 수식 히알루론산류를 액체 크로마토그래피 분석하고, 상기 검량선을 사용하여 분자량을 구함으로써, 수식 히알루론산류의 분자량을 구할 수 있다.
상기 액체 크로마토그래피 분석에 사용할 수 있는 액체 크로마토그래피 분석 장치로는, 예를 들어, Waters Alliance 2690 HPLC Separations Module (Waters 사 제조), Waters Alliance 2695 HPLC Separations Module (Waters 사 제조), 1200 Series (Agilent 사 제조) 를 들 수 있다. 또, 액체 크로마토그래피 분석에 사용할 수 있는 칼럼으로는, 예를 들어, shodex 사 제조 배위자 교환 크로마토그래피 용 칼럼 (배위자 교환 모드 ＋ 사이즈 배제 모드), 형명 「SUGAR KS-801」, 「SUGAR KS-802」, 「SUGAR KS-803」, 「SUGAR KS-804」, 「SUGAR KS-805」, 「SUGAR KS-806」, 「SUGAR KS-807」이나, TOSOH 제조 사이즈 배제 크로마토그래피 칼럼, 형명 「TSKgel GMPW」를 들 수 있다.
＜카르복시메틸화율＞
본 발명에 있어서, 수식 히알루론산류의 카르복시메틸화율은, 1H-NMR 스펙트럼에 있어서, 히알루론산 골격 중의 C-2 위치에 결합하는 N-아세틸기의 메틸기 (-CH3) 의 프로톤을 나타내는 피크 (2 ppm 부근에 발현) 의 적산값에 대한, -CH2-CO2H 및/또는 -CH2-CO2- 로 나타내는 기 중의 메틸렌기 (-CH2-) 의 프로톤을 나타내는 피크 (3.8 ppm 이상 4.2 ppm 이하의 범위에 발현) 의 적산값의 비율 (％) 로 나타낸다.
또, 동일한 정도의 분자량을 갖는 히알루론산에 대해 보수력이 높은 데다가, 점도가 억제되어 있는 점에서, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하일 수 있고, 10 ％ 이상 200 ％ 이하인 것이 바람직하고, 50 ％ 이상 200 ％ 이하인 것이 보다 바람직하며, 60 ％ 이상 200 ％ 이하인 것이 더욱 바람직하고, 70 ％ 이상 200 ％ 이하인 것이 특히 바람직하다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에 의하면, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 동일한 정도의 분자량을 갖는 히알루론산과 비교하여 점도가 낮다. 이 때문에, 예를 들어, 의약품, 화장품, 및 식품 성분으로서 사용할 수 있다.
＜동점도＞
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 동점도는, 동점도가 1 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하이다. 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 동점도는, 우베로데 점도계 (시바타 과학 기계 공업 주식회사 제조) 를 사용하여 측정할 수 있다. 이 때, 유하 초수가 200 초 이상 1,000 초가 되는 계수의 우베로데 점도계를 선택한다. 또, 측정은 30 ℃ 의 항온 수조 중에서 실시하여, 온도 변화가 없도록 한다. 우베로데 점도계에 의해 측정된 상기 수용액의 유하 초수와, 우베로데 점도계의 계수의 곱에 의해, 동점도 (단위 : ㎟/s) 를 구할 수 있다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 동일한 정도의 분자량을 갖는 히알루론산 및/또는 그 염과 비교하여 동점도가 작기 때문에, 끈적거림이 적고, 촉감이 양호 (매끄러운 촉감을 갖는) 하며, 또한, 식감이 양호하다.
＜색상＞
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 예를 들어 화장료, 식품 조성물, 및 의약품 등에 사용하는 경우, 제품의 색에 영향을 미치지 않는다는 점에서, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는 색의 명도가 높고, 또한, 노르스름한 색이 약한 것이 바람직하다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 색의 색상을 나타내는 b 값 (이하, 간단히 「b 값」이라고도 한다) 이 5 이하일 수 있고, 4 이하인 것이 바람직하고, 3 이하인 것이 보다 바람직하며, 또, 0 이상인 것이 바람직하다.
b 값은, 물질이 갖는 색의 색상 (hue) 을 규정하는 값으로, b 값이 클수록 노르스름한 색이 강한 것을 나타내고, 한편, b 값이 작을수록 푸르스름한 색이 강한 것을 나타낸다.
또, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 색의 명도를 나타내는 L 값 (이하, 간단히 「L 값」이라고도 한다) 이 90 이상 (90 이상 100 이하) 일 수 있고, L 값이 92 이상인 것이 바람직하고, L 값이 93 이상인 것이 보다 바람직하다.
L 값은, 물질이 갖는 색의 명도 (lightness) 를 규정하는 값으로, 0 ∼ 100 사이의 수치로 나타낸다. L 값이 100 인 경우 가장 밝은 상태 (완전한 백색) 를 나타내고, 한편, L 값이 0 인 경우 가장 어두운 상태 (완전한 흑색) 를 나타낸다.
b 값 및 L 값은, JIS Z 8730 에 의해 규정되는 색차 표시 방법에 의해, Lab 계 색도 좌표로 표시될 수 있다. 또, b 값 및 L 값은, 시판되는 색차계에 의해 측정할 수 있다. 또한, 본 발명에 있어서는, 고체의 수식 히알루론산류에 대해, b 값 및 L 값을 측정하는 것으로 한다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 b 값 및 L 값은, 예를 들어, 색차계 (상품명 「COLOR AND COLOR DIFFERENCE METERMODEL 1001 DP」, 닛폰 덴쇼쿠 공업 주식회사 제조) 에 10 Φ 렌즈를 장착하고, 유리 셀에 측정 시료 1 g 이상을 전면에 깔아 측정할 수 있다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에 의하면, 색차계에 의해 측정된 b 값이 5 이하 (나아가서는, L 값이 90 이상) 임으로써, 새로운 정제 공정을 필요로 하지 않고, 화장료, 식품, 및 의약품의 원료로서 사용할 수 있다.
＜제 1 예 (고분자량체)＞
(분자량 및 동점도)
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 제 1 예 (본 발명에 있어서 「고분자량체」라고도 한다) 는, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하 (바람직하게는 10 ％ 이상, 40 ％ 이상이어도 되고, 혹은 50 ％ 이상이어도 되며, 보다 바람직하게는 60 ％ 이상, 더욱 바람직하게는 70 ％ 이상) 이고, 또한, 분자량이 80 만 이상 (바람직하게는 80 만 이상 200 만 이하) 이다. 이 경우, 제 1 예는, 동점도가 30 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하 (바람직하게는 50 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하) 일 수 있다.
제 1 예인 수식 히알루론산류는 분자량이 80 만 이상이고, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 고분자량이면서, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산보다 점도가 낮기 때문에, 예를 들어 의약품이나 화장품의 성분으로서 사용한 경우, 감촉이 양호하다.
분자량이 80 만 이상인 히알루론산은, 이것보다 저분자의 히알루론산과 비교하여 점도가 높기 때문에, 예를 들어 의약품이나 화장품의 성분으로서 사용한 경우, 히알루론산의 농도가 높아지면 사용시에 끈적거림을 느끼는 경우가 있다. 이에 반하여, 그 제 1 예인 수식 히알루론산류는 분자량이 80 만 이상이고, 또한, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 분자량이 80 만 이상으로 고분자량임에도 불구하고, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산보다 점도가 낮기 때문에, 예를 들어 의약품이나 화장품의 성분으로서 사용한 경우, 끈적거림이 적고, 감촉이 양호한 데다가 (매끄러운 촉감을 갖는다), 우수한 식감을 갖고, 또한, 백색도가 높다.
＜제 2 예 (저분자량체)＞
(분자량 및 동점도)
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 제 2 예 (본 발명에 있어서 「저분자량체」라고도 한다) 는, 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하 (바람직하게는 70 ％ 이상 200 ％ 이하) 이고, 또한, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만이다. 이 경우, 제 2 예는, 동점도가 1 ㎟/s 이상 30 ㎟/s 이하 (바람직하게는 10 ㎟/s 이상 29 ㎟/s 이하) 일 수 있다.
제 2 예인 수식 히알루론산류는 분자량이 4,000 이상 80 만 미만이고, 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산보다 점도가 낮다. 이 때문에, 예를 들어 의약품이나 화장품의 성분으로서 사용한 경우, 감촉이 양호한 데다가 우수한 식감을 갖고, 또한, 백색도가 높다.
＜염의 변환＞
본 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산으로부터 그 염으로 변환하는 방법, 그리고, 본 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 염으로부터 그 수식 히알루론산으로 변환하는 방법은, 특별히 한정되는 것은 아니고, 공지된 방법을 사용하여 실시할 수 있다.
본 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산으로부터 그 염으로 변환하는 방법으로는, 예를 들어, 알칼리 수용액 (예를 들어, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 수산화마그네슘, 수산화암모늄 등의 수용액) 을 사용하여 처리하는 방법을 들 수 있다. 또, 본 실시형태에 관련된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 염으로부터 그 수식 히알루론산으로 변환하는 방법으로는, 예를 들어, 산 수용액 (예를 들어, 염산, 황산, 질산, 인산 등의 수용액) 을 사용하여 처리하는 방법이나, 산성 양이온 교환 수지를 사용하는 방법을 들 수 있다.
＜용도＞
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 그 카르복시메틸기를 구성하는 카르복실기에서 기인하여, 높은 보수 효과를 갖는다. 이 때문에, 예를 들어 피부 등의 생체 조직에 있어서 높은 보수 효과를 갖는다. 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 생체 조직의 표면에 도포 또는 접촉하여 섭취시켜도 되고, 특히, 얼굴, 팔, 손가락, 다리, 관절 등의 피부에 도포 또는 접촉시키는 것이 바람직하다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 그 카르복시메틸기를 구성하는 카르복실기에서 기인하여, 동일한 정도의 분자량을 갖는 히알루론산과 비교하여 점도가 낮다. 이 때문에, 예를 들어 화장료에 사용한 경우, 끈적거림이 적고, 감촉이 양호하기 (매끄러운 촉감을 갖는다) 때문에, 화장품의 성분으로서 사용할 수 있다. 또한, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 물에 대한 용해성이 우수하기 때문에, 예를 들어 물을 함유하는 여러 가지 제품에 사용할 수 있다.
혹은, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는 경구 섭취할 수 있다. 따라서, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 예를 들어 의약품 및 식품의 성분으로서 사용할 수 있다.
[작용 효과]
＜공지 기술 (카르복시메틸화 셀룰로오스의 제조 방법)＞
본 실시형태에 관련된 제조 방법의 작용 효과를 설명함에 있어, 먼저, 공지 기술인, 카르복시메틸화 셀룰로오스의 제조 방법에 대해 설명한다.
카르복시메틸화 셀룰로오스 (이하, 「CMC」라고도 한다) 는 예를 들어, 유화제, 증점제 등으로서 폭넓게 이용되고 있다. 이 CMC 는, 공업적으로는 셀룰로오스를 대량의 알칼리수로 처리하여 알칼리셀룰로오스로 한 후, 함수 유기 용매 중에 분산시켜 모노할로아세트산과 반응시킴으로써 제조된다 (일본 공개특허공보 2000-34301호).
그러나, 상기 방법을 사용하여 히알루론산을 카르복시메틸화하고자 한 경우, 히알루론산의 카르복시메틸화가 충분히 진행되지 않는다. 그 이유로서, 히알루론산이 함수 유기 용매에 충분히 용해되지 않는 것이 추측된다.
＜작용 효과＞
(수식 히알루론산류의 제조 방법)
(1) 갈변의 방지
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함함으로써, 백색도가 높은 (예를 들어 b 값이 5 이하) 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있다.
보다 구체적으로는, 상기 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 반응액 (혼합액) 중에서, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 적어도 일부와 할로아세트산 및/또는 그 염이 용해된 상태로 그 히알루론산 및/또는 그 염과 그 할로아세트산 및/또는 그 염을 반응시킬 수 있다. 이 때문에, 상기 반응액 중에 있어서, 그 원료 히알루론산 및/또는 그 염과 그 할로아세트산 및/또는 그 염의 반응성 이 우수하기 때문에, 카르복시메틸화가 원활하게 진행된다. 이것에 의해 얻어지는 수식 히알루론산류의 갈변을 방지할 수 있기 때문에, 백색도가 높은 수식 히알루론산을 간편하게 얻을 수 있다.
이 때문에, 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 활성탄 처리 등의 통상적인 정제를 거치지 않아도, 백색도가 높은 수식 히알루론산류를 간편하게 얻을 수 있기 때문에, 제조 효율이 우수하다. 또한, 본 실시형태에 관련된 제조 방법은, 상기 반응시키는 공정 후에, 활성탄 처리 등의 통상적인 정제를 실시하는 것을 제외하는 것은 아니다.
(2) 카르복시메틸화율의 조정
본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함함으로써, 소정의 카르복시메틸화율을 갖는 수식 히알루론산을 얻을 수 있다. 여기서, 카르복시메틸화율은 예를 들어, 할로아세트산 및/또는 그 염의 농도 및 종류, pH, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 농도 및 분자량, 반응 온도 및 반응 시간을 적절히 선택함으로써 조정할 수 있다.
(3) 높은 카르복시메틸화율
특히, 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의하면, 상기 서술한 바와 같이, 상기 반응액 중에 있어서, 그 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염과 그 할로아세트산 및/또는 그 염의 반응성이 우수하기 때문에, 카르복시메틸화가 원활하게 진행되기 때문에, 백색도가 높고, 또한 카르복시메틸화율이 높은 (예를 들어, 50 ％ 이상) 수식 히알루론산 및/또는 그 염을 양호한 효율로 얻을 수 있다.
(4) 후처리의 간편성
본 실시형태에 관련된 제조 방법에서는, 상기 반응시키는 공정에 있어서, 생성된 수식 히알루론산류는 반응액 중에서 용해되어 있다. 이 때문에, 그 반응액에 예를 들어 에탄올 등의 유기 용매를 첨가하고, 생성된 수식 히알루론산류를 침전시켜 회수함으로써, 생성된 수식 히알루론산류와, 반응제인 할로아세트산 및/또는 그 염을 용이하게 분리할 수 있다. 이 때문에, 후처리가 간편하다.
(수식 히알루론산류의 작용 효과)
(1) 보수 효과의 향상
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 카르복시메틸기를 가짐으로써, 수식되어 있지 않은 동일한 정도의 분자량의 히알루론산 및/또는 그 염과 비교하여, 카르복실기를 보다 많이 함유할 수 있기 때문에 보수 효과가 보다 우수하다.
보다 구체적으로는, 그 카르복시메틸기 중의 카르복실기가 물과 수소 결합을 구성하기 때문에, 그 카르복실기에서 기인하여 보수력이 보다 높아진다고 추측된다.
(2) 우수한 촉감 및 식감
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에 함유되는 카르복시메틸기를 구성하는 카르복실 이온 (CO2 -) 의 부전하끼리가 반발함으로써, 그 수식 히알루론산 및/또는 그 염의 입체 구조 중의 얽힘이 적어지기 때문에, 점도가 낮아진다고 추측된다.
따라서, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류에 의하면, 분자량이 80 만 이상이고, 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하이거나, 또는, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만이고, 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하임으로써, 높은 보수력을 갖고, 또한, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 점도가 작다. 이것에 의해 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류 끈적거림이 적고, 촉감이 양호 (매끄러운 촉감을 갖는다) 하며, 또한, 식감이 양호하기 때문에, 예를 들어 의약품, 화장품 및 식품의 성분으로서 사용할 수 있다.
(3) 높은 백색도
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 본 실시형태에 관련된 제조 방법에 의해 얻어진 것임으로써, 반응 중의 갈변이 억제되어 있다. 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는 예를 들어, 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하이고, 백색도가 높다.
(4) 우수한 생체 적합성
카르복시메틸기는 생체 적합성이 높고, 항원성이 낮다. 이 때문에, 카르복시메틸기를 갖는 카르복시메틸화 셀룰로오스는, 상기 서술한 바와 같이, 화장품, 의약품, 식품 등의 폭넓은 용도에 사용되고 있다. 또한, 히알루론산은, 화장품, 의약품, 식품 등의 폭넓은 용도에 사용되고 있다. 따라서, 히알루론산의 관능기의 일부가 카르복시메틸화된, 본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류는, 생체 적합성이 높고, 항원성이 낮다.
(5) 착상의 독창성
또한, 히알루론산은 본래 수용성이 우수한 점에서, 본래 난수용성인 셀룰로오스와는 상이하다. 즉, 셀룰로오스는, 수용성의 향상을 목적으로 하여 카르복시메틸화하는 데에 반해, 히알루론산의 카르복시메틸화는, 수용성의 향상을 목적으로 한다기 보다는, 보수 효과의 한층 더 향상되는 것을 목적으로 하는 것인 점에서, 셀룰로오스의 카르복시메틸화와는 착상 및 작용 효과가 전혀 상이한, 신규하고 또한 독창성을 갖는 것이다.
[화장료]
본 발명의 일 실시형태에 관련된 화장료는, 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 함유한다. 본 실시형태에 관련된 화장료에 있어서의, 수식 히알루론산류의 함유량은 예를 들어 0.001 질량％ 이상 5 질량％ 이하이고, 사용 형태에 따라 적절히 결정할 수 있다.
본 실시형태에 관련된 화장료의 양태는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어, 피부용 화장료를 들 수 있다. 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 피부용 화장료에 사용함으로써, 적당한 점도를 갖고, 또한, 보수 효과가 높기 때문에, 피부에 촉촉함을 부여하여, 피부의 거칠한 느낌을 개선할 수 있다.
본 실시형태에 관련된 피부용 화장료의 양태로는, 예를 들어, 세안료, 세정료, 화장수 (예를 들어, 미백 화장수), 크림 (예를 들어, 배니싱 크림, 콜드 크림), 유액, 미용액, 팩 (예를 들어, 젤리상 필오프 타입, 페이스트상 닦아내기 타입, 분말상 씻어내기 타입), 클렌징, 파운데이션, 립스틱, 립크림, 립글로스, 립라이너, 블러셔, 쉐이빙 로션, 에프터 선 로션, 데오도란트 로션, 바디 로션 (핸드케어 로션, 풋케어 로션을 포함한다), 바디 오일, 비누, 입욕제를 들 수 있다.
본 실시형태에 관련된 화장료에는 추가로 이하의 성분이 배합되어 있어도 된다. 상기 성분으로는, 예를 들어, 카티온화 다당류 (예를 들어, 카티온화 히알루론산, 카티온화 하이드록시에틸셀룰로오스, 카티온화 구아검, 카티온화 전분, 카티온화 로커스트빈검, 카티온화 덱스트란, 카티온화 키토산, 카티온화 벌꿀 등), 아니온 계면활성제 (예를 들어, 알킬벤젠술폰산염, 폴리옥시알킬렌알킬에테르황산에스테르염, 알킬황산에스테르염, 올레핀술폰산염, 지방산염, 디알킬술포숙신산염 등), 비이온 계면활성제 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 유도체 등), 양이온 계면활성제 (예를 들어, 알킬트리메틸암모늄염, 디알킬디메틸암모늄염, 알킬피리디늄염, 염화스테아릴트리메틸암모늄 등), 양쪽성 계면 활성제 (예를 들어, 알킬베타인, 알킬아미드프로필베타인, 이미다졸리늄베타인, 난황 (卵黃) 레시틴, 대두 레시틴 등), 유분 (예를 들어, 실리콘, 실리콘 유도체, 유동 파라핀, 스쿠알란, 밀랍, 카르나우바 왁스, 올리브유, 아보카도유, 동백유, 호호바유, 마유 등), 보습제 (예를 들어, 히알루론산나트륨, 가수분해 히알루론산, 아세틸화 히알루론산, 히알루론산디메틸실란올, 세라마이드, 라우로일글루타민산디피토스테릴옥틸도데실, 피토글리코겐, 가수분해 난각막 (卵殼膜), 트레할로오스, 글리세린, 아테로콜라겐, 소르비톨, 멀티톨, 1,3-부틸렌글리콜 등), 고급 지방산 (예를 들어, 라우르산, 베헨산, 팔미트산, 스테아르산, 이소스테아르산, 올레산 등), 고급 알코올 (예를 들어, 세틸알코올, 스테아릴알코올, 베헤닐알코올, 이소스테아릴알코올, 바틸알코올 등), 다가 알코올 (예를 들어, 글리세린, 디글리세린, 1,3-프로판디올, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 펜틸렌글리콜 등), 증점제 (예를 들어, 셀룰로오스에테르, 카르복시비닐 폴리머, 잔탄검, 팔미트산덱스트린 등), 양쪽성 고분자 수지 화합물 (예를 들어, 베타인화 디알킬아미노알킬아크릴레이트 공중합체 등), 카티온성 고분자 수지 화합물 (예를 들어, 비닐피롤리돈/디메틸아미노에틸메타크릴레이트 공중합체 카티온화물, 폴리디메틸디알릴암모늄할라이드형 카티온성 폴리머 등), 방부제 (예를 들어, 메틸파라벤, 에틸파라벤, 부틸파라벤, 프로필파라벤, 페녹시에탄올 등), 산화 방지제 (예를 들어, 토코페놀, BHT 등), 금속 봉쇄제 (예를 들어, 에데트산염, 에티드론산염 등), 자외선 흡수제 (예를 들어, 벤조페논 유도체, 파라아미노벤조산 유도체, 메톡시 계피산 유도체 등), 자외선 반사제 (예를 들어, 산화티탄, 산화아연 등), 단백질 가수분해물 (예를 들어, 케라틴 펩티드, 콜라겐 펩티드, 대두 펩티드, 소맥 펩티드, 밀크 펩티드, 실크 펩티드, 난백 펩티드 등), 아미노산 (예를 들어, 알기닌, 글루타민산, 글리신, 알라닌, 하이드록시프롤린, 시스테인, 셀린, L-테아닌 등), 천연물 엑기스 (고삼 (苦蔘) 엑기스, 해초 엑기스, 유칼립투스 엑기스, 로얄제리 엑기스, 로즈마리 엑기스, 밤나무 엑기스 등), 그 밖의 기능성 성분 (코엔자임 Q10, 알부틴, 폴리쿼터늄 51, 엘라스틴, 백금 나노콜로이드, 팔미트산레티놀, 판테놀, 알란토인, 디라우로일글루타민산리신나트륨, 인산아스코르빌마그네슘, L-아스코르브산2-글루코시드, 엘라그산, 코직산, 리놀레산, 트라넥삼산 등), 인지질 폴리머, 향료, 색소를 들 수 있다.
[식품 조성물]
본 발명의 일 실시형태에 관련된 식품 조성물은, 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 함유한다. 본 실시형태에 관련된 식품 조성물에 있어서의, 수식 히알루론산류의 함유량은 예를 들어 0.001 질량％ 이상 5 질량％ 이하이고, 사용 형태에 따라 적절히 결정할 수 있다. 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 식품 조성물에 사용함으로써, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 점도가 억제되어 있기 때문에, 식감이 우수하다.
본 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 함유하는 식품 조성물의 양태는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어, 주식인 쌀밥 가공 식품, 제빵류 등, 부식인 레토르트 통조림, 냉동 식품, 반찬, 건조 식품 등, 마요네즈 등 조미료, 음료, 과자, 디저트류, 액상, 겔상 또는 소프트 캡슐상 등의 서플리먼트류 등의 일반 식품 전반 (全般) 외에, 생리 기능을 표현하는 것이 허가된 특정 보건용 식품 전반을 들 수 있다.
[의약품 조성물]
본 발명의 일 실시형태에 관련된 의약품 조성물은, 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 함유한다. 본 실시형태에 관련된 의약품 조성물에 있어서의, 수식 히알루론산류의 함유량은 예를 들어 0.001 질량％ 이상 5 질량％ 이하이고, 사용 형태에 따라 적절히 결정할 수 있다. 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류를 의약품 조성물에 사용함으로써, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 점도가 억제되어 있기 때문에, 식감이 우수하다.
본 실시형태에 관련된 의약품 조성물의 사용 형태에는 특별히 제한은 없고, 분말상, 과립상, 고농도 액상, 저농도 액상 등의 사용 형태로 할 수 있다. 상기 실시형태에 관련된 수식 히알루론산류의 분자량의 안정성을 감안하여, 액상보다 건조 형태가 바람직하다.
또한, 본 실시형태에 관련된 의약품 조성물에는, 필요에 따라, 증량제, 결합제, 활택제, 보존제, 산화 방지제, 향료, 감미료, 산미료, 부형제 등을 배합할 수 있다. 또, 비타민 C, 비타민 B2, 비타민 B12, 비타민 E 등의 비타민류, 핵산, 콘드로이틴황산, 콜라겐 등의 영양 성분, 철, 아연 등의 미네랄 성분 등의 각종 영양 성분을 배합할 수도 있다.
[실시예]
이하, 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 본 발명은 실시예에 한정되지 않는다.
＜실험예 1 : 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 조제＞
30 ㎖ 의 샘플병에 수산화나트륨 1.04 g 을 계량하여 취한 후, 물 8 ㎖ 를 첨가하여 용해시켰다. 다음으로, 히알루론산 2.0 g 을 첨가하여 용해시킨 후, 모노클로로아세트산나트륨 1.52 g 을 첨가하여 용해시키고, 실온에서 48 시간 정치 (靜置) 하였다. 여기서, 상기 반응액의 pH 는 13 이었다. 그 후, 200 ㎖ 비커에 에탄올 80 ㎖ 를 넣고, 그 반응액을 교반하면서 첨가하여, 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 침전시켰다. 그 후, 400 메시의 여과포로 침전을 200 ㎖ 비커에 회수한 후, 10 ％ 염화나트륨 수용액 40 ㎖ 를 첨가하여 침전을 용해시켰다. 추가로, 8 ％ 염산 수용액으로 pH 를 조제한 후, 용해액에 교반하면서 에탄올 80 ㎖ 를 넣고, 다시 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 침전시켰다. 80 ％ 함수 에탄올 100 ㎖ 로 3 회 세정한 후 감압 여과하고, 55 ℃ 에서 3 시간 감압 건조시킴으로써, 실험 번호 1 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻었다.
＜실험예 2 : 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 조제＞
수산화나트륨의 농도, 함수 용매의 사용량, 용매의 종류, 할로아세트산 및/또는 그 염의 종류 및 사용량, 반응 온도, 및 반응 시간을 표 1 및 표 2 와 같이 변경한 것 이외에는, 실시예 1 과 동일한 방법에 의해, 실험 번호 2 내지 36 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 얻었다. 또한, 본 실시예에 있어서, 「실온」이란, 25 ℃ 이상 30 ℃ 이하의 온도를 의미한다.
또한, 표 1 은, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노클로로아세트산나트륨을 사용한 결과를 나타내고 있고, 표 2 는, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노브로모아세트산을 사용한 결과를 나타내고 있다.
또, 실험 번호 2 내지 36 의 반응액의 pH 는 모두 10 이상 14 이하의 범위였다.
실험 번호 1 내지 17, 19 내지 29, 31 내지 36 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 육안으로 확인한 결과, 백색이었다 (b 값이 5 이하였다). 한편, 상기 실험 번호 18 및 30 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 육안으로 확인한 결과, 갈변이 확인되었다 (b 값이 5 를 크게 초과하고 있었다).
Figure 112016040224889-pct00003
Figure 112016040224889-pct00004
실험 번호 1 내지 36 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 분자량은, 상기 서술한 실시형태에 기재된 방법에 의해 측정되었다. 또, 실험 번호 2, 20, 21, 23, 27, 36 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 동점도를, 상기 서술한 실시형태에 기재된 방법에 의해 측정한 결과, 각각, 3.49 ㎟/s, 91.8 ㎟/s, 54.7 ㎟/s, 92 ㎟/s, 9.69 ㎟/s, 121.10 ㎟/s 였다. 또한, 실험 번호 1 내지 36 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 카르복시메틸화율은, 이하의 방법으로 1H-NMR 스펙트럼의 적산값으로부터 구하였다.
(시료 조제)
시료 7 ㎎ 과 내부 표준 물질 4,4-디메틸-4-실라펜탄술폰산나트륨 (DSS) 1 ㎎ 을 중수 0.7 ㎖ 에 녹여, NMR 시료관에 옮겨 넣고 캡을 씌웠다.
(측정 조건)
장치 : Varian NMR system 400 NB 형 (바리안 테크놀로지즈 재팬 리미티드)
관측 주파수 : 400 ㎒
온도 : 30 ℃
기준 : DSS (0 ppm)
적산 횟수 : 64 회
(해석 방법)
1H-NMR 스펙트럼의 2.0 ppm 부근에 나타나는 히알루론산의 N-아세틸기 (CH3) 의 피크와, 3.8 ppm 이상 4.2 ppm 이하의 범위에 나타나는 카르복시메틸기의 메틸렌기 (-CH2-) 의 피크를 적분하였다. 적분값에서 하기 식으로부터, 수식 히알루론산을 구성하는 히알루론산의 2 당 반복 단위별로 결합되어 있는 카르복시메틸기의 수를, 카르복시메틸화율 (CM 화율) 을 구하였다.
CM 화율 ＝ (3.8 ppm 이상 4.2 ppm 이하의 범위에 나타나는 피크 적분값/2)/(2.0 ppm 의 피크 적분값/3)
표 1 및 표 2 에 나타내는 바와 같이, 상기 실험 번호 1 내지 15, 19 내지 29, 31 내지 36 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산에 의하면, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산 및/또는 그 염을 할로아세트산 및/또는 그 염과 반응시키는 공정을 포함하고, 상기 함수 용매는, 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고, 상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하임으로써, 백색도가 높고, 또한, 카르복시메틸화율이 높은 수식 히알루론산을 간편한 방법에 의해 얻어지는 것을 이해할 수 있다.
그 중에서도, 상기 실험 번호 20 내지 26, 31 내지 36 과 같이, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노브로모아세트산을 사용하고, 또한, 온도가 10 ℃ 이하인 함수 용매 중에서 당해 반응을 실시하는 경우, 백색도가 높고, 또한, 높은 분자량 (80 만 이상) 또한 높은 카르복시메틸화율 (40 ％ 이상, 바람직하게는 50 ％ 이상) 을 갖는 수식 히알루론산이 얻어지는 것을 이해할 수 있다. 그 수식 히알루론산은 보수력을 갖고, 또한, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 점도가 작은 것을 이해할 수 있다. 이것에 의해 본 발명의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염은 촉감이 양호하며 끈적거림이 적어, 감촉이 양호하고 (매끄러운 촉감을 갖는다), 또한, 식감이 양호하기 때문에, 예를 들어 의약품, 화장품 및 식품의 성분으로서 사용할 수 있다.
또, 상기 실험 번호 27 내지 29 와 같이, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노브로모아세트산을 사용하고, 또한, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서 당해 반응을 실시하는 경우, 백색도가 높고, 4,000 이상 80 만 미만의 분자량을 가지며, 또한, 높은 카르복시메틸화율 (60 ％ 이상) 을 갖는 수식 히알루론산이 얻어지는 것을 이해할 수 있다.
또, 상기 실험 번호 3, 9 내지 13, 15, 19 와 같이, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노클로로아세트산나트륨을 사용하여, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서 당해 반응을 실시하는 경우, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 분자량, 반응 온도, 반응 시간, 및 사용하는 모노클로로아세트산나트륨이나 수산화나트륨의 양을 조정함으로써, 백색도가 높고, 높은 분자량 (80 만 이상) 을 가지며, 또한, 5 ％ 이상 200 ％ 이하의 카르복시메틸화율을 갖는 수식 히알루론산이 얻어지는 것을 이해할 수 있다.
또한, 상기 실험 번호 1, 2, 4 내지 8, 14 와 같이, 할로아세트산 및/또는 그 염으로서 모노클로로아세트산나트륨을 사용하여, 온도가 30 ℃ 이하인 함수 용매 중에서 당해 반응을 실시하는 경우, 원료 히알루론산 및/또는 그 염의 분자량, 반응 온도, 반응 시간, 및 사용하는 모노클로로아세트산나트륨이나 수산화나트륨의 양을 조정함으로써, 백색도가 높고, 4,000 이상 80 만 미만의 분자량을 가지며, 또한, 높은 카르복시메틸화율 (60 ％ 이상 200 ％ 이하) 을 갖는 수식 히알루론산이 얻어지는 것을 이해할 수 있다.
이에 반하여, 상기 실험 번호 16 및 17 에서는, 비교적 저분자 (80 만 미만) 이고, 또한, 높은 카르복시메틸화율 (60 ％ 이상 200 ％ 이하) 의 카르복시메틸화율을 갖는 수식 히알루론산을 얻을 수는 없었다.
상기 실험 번호 16 및 17 에서는, 반응에 사용하는 함수 용매 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 를 초과하고 있었기 때문에, 반응에 사용한 히알루론산의 대부분이 그 함수 용매에 용해되지 않아, 반응액이 2 상으로 분리되었다. 이 때문에, 상기 실험 번호 16 및 17 에서는, 반응 종료 후, 반응에 사용한 모노클로로아세트산나트륨을 완전하게 제거하기 위해서, 반응 생성물을 일단, 물에 용해시킨 후, 침전시켜 정제해야 하여, 후처리가 번잡하였다.
이에 반하여, 상기 실험 번호 1 내지 15, 18, 20 내지 29, 31 내지 36 에서는, 생성된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산이 반응액 중에서 용해되고 있었다. 이 때문에, 그 반응액에 에탄올을 첨가하여, 생성된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 침전시켜 회수함으로써, 생성된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산과, 반응제인 할로아세트산 및/또는 그 염을 용이하게 분리할 수 있어, 후처리가 간편하였다.
＜시험예 1 : 보수력 시험＞
칭량병을 산화인 (V) 10 g 과 함께 진공 건조기에 넣고, 감압하, 60 ℃ 에서 30 분간 건조시켰다. 건조시킨 칭량병을 데시케이터 중에서 식힌 후, 빈 칭량병의 중량을 측정하여, 상기 실험 번호 6, 12 및 23 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 1.0 ％ 액을 1.0 g 칭량하였다. 또, 상기 실험 번호 6, 12 및 23 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산과 동일하거나 또는 근사한 분자량 (20 만, 90 만, 120 만) 을 갖는 3 종류의 히알루론산 (모두 큐피 주식회사 제조) 도 동일한 처리로, 칭량병에 칭량하였다. 다음으로, 이들 칭량병을 실리카 겔을 동봉한 데시케이터에 넣고, 35 ℃ 의 항온기에 넣어 22.5 시간 유지한 후에 질량을 측정하였다. 이하의 식에 기초하여, 보수율 (％) 을 산출하였다.
보수율 (％) ＝ {(항온기에 넣기 전의 샘플의 질량) － (22.5 시간 후의 샘플의 질량)}/(항온기에 넣기 전의 샘플의 질량) × 100 (％)
상기 수식 히알루론산 및 상기 히알루론산의 보수율의 측정 결과를 도 1 에 나타낸다. 도 1 의 그래프에 있어서, 좌측은 히알루론산 (미수식) 의 보수율, 우측은 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 보수율이고, 분자량마다 페어로 하여 나타낸다.
도 1 에 의하면, 본 발명의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산은, 동일한 정도의 분자량의 히알루론산과 비교하여 보수율이 높은 것을 이해할 수 있다.
＜시험예 2 : 관능 시험＞
상기 실험 번호 21 의 수식 히알루론산의 점도 (육안) 및 감촉에 대해, 관능 평가를 실시하였다. 관능 평가에 있어서는, 컨트롤 (대조) 로서, 각각 분자량 80 만 및 분자량 117 만의 히알루론산 (모두 큐피 주식회사 제조) 을 사용하였다.
평가는, 패널리스트로서 성인 남녀 6 명 (남성 5 명, 여성 1 명) 이 실시하여, 분자량 80 만의 점도 (육안) 및 감촉을 3 점으로 하여 이하의 평가 기준에 의해 실시하였다. 6 명의 평가 결과의 평균을 도 2 및 도 3 에 각각 나타낸다.
또한, 평가 시료는, 각 시료의 농도가 1 ％ 인 수용액을 사용하였다. 또, 감촉에 대해서는, 그 수용액을 상완에 도포했을 때의 감촉을 평가하였다.
(평가 기준)
점도 (육안) … 5 점 (점도가 높다), 4 점 (점도가 약간 높다), 3 점 (점도가 보통), 2 점 (점도가 약간 낮다), 1 점 (점도가 낮다)
감촉 … 5 점 (매끈하다), 4 점 (끈적거림이 적고, 어느 쪽인지 말하면 매끈하다), 3 점 (끈적거림이 있다), 2 점 (끈적거림이 약간 크다), 1 점 (끈적거림이 크다)
도 2 및 도 3 에 의하면, 본 발명의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산은, 동일한 정도의 분자량을 갖는 히알루론산과 비교하여, 끈적거림이 적고 매끈하며, 또한, 점도가 낮은 외관을 갖는 것을 이해할 수 있다.
＜시험예 3 : 백색도＞
상기 실험 번호의 18, 21 및 30 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산의 b 값 및 L 값을, 색차계 (상품명 「COLOR AND COLOR DIFFERENCE METERMODEL 1001 DP」, 닛폰 덴쇼쿠 공업 주식회사 제조) 에 10 Φ 렌즈를 장착하고, 유리 셀에 측정 시료 1 g 이상을 전면에 깔아 측정하였다. 그 결과를 표 3 에 나타낸다.
Figure 112016040224889-pct00005
상기 실험 번호 21 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산은, 30 ℃ 이하의 온도에서 반응을 실시하여 얻어진 것이기 때문에, 육안으로 백색인 것이 확인되고, 또한, 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하임으로써, 백색도가 높은 것을 이해할 수 있다.
이에 반하여, 상기 실험 번호 18, 30 의 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산은, 30 ℃ 를 초과하는 온도에서 반응을 실시하여 얻어지기 때문에, 육안으로 갈변이 확인되고, 또한, 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 를 대폭 초과하고 있던 것으로부터, 백색도가 낮은 것을 이해할 수 있다.
＜배합예 1 : 화장수＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 화장수를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.2 ％
히알루론산나트륨 0.1 ％
가수분해 히알루론산 0.1 ％
가수분해 히알루론산알킬 (C12-13) 글리세릴 0.1 ％
콜라겐 펩티드 0.1 ％
1,3-부틸렌글리콜 5.0 ％
글리세린 3.0 ％
이소스테아릴알코올 0.1 ％
아세트산토코페롤 0.1 ％
POE(20)소르비탄모노라우르산에스테르 0.5 ％
POE(15)라우릴알코올에테르 0.5 ％
피롤리돈카르복실산아연 0.1 ％
에틸파라벤 0.1 ％
메틸파라벤 0.15 ％
에탄올 5.0 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 2 : 유액＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 유액을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.3 ％
펜틸렌글리콜 5.0 ％
글리세린 3.0 ％
스쿠알란 5.0 ％
스테아르산 0.5 ％
스테아릴알코올 2.0 ％
바셀린 4.0 ％
스테아르산소르비탄 1.0 ％
POE(10)모노스테아르산에스테르 1.0 ％
카르복시비닐 폴리머 0.5 ％
폴리쿼터늄-51 0.1 ％
메틸파라벤 0.15 ％
프로필파라벤 0.1 ％
수산화칼륨 0.1 ％
BHT 0.02 ％
EDTA-2 나트륨 0.02 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 3 : 크림＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 2 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 크림 (에몰리언트 크림) 을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 2) 0.5 ％
폴리에틸렌글리콜 4.0 ％
1,3-프로판디올 6.0 ％
스쿠알란 11.0 ％
디메치콘 1.0 ％
세탄올 6.0 ％
스테아르산 2.0 ％
수소 첨가 코코글리세릴 4.0 ％
트리카프릴린 8.0 ％
모노스테아르산글리세린 3.0 ％
POE(20)세틸알코올에테르 2.0 ％
코엔자임 Q10 0.03 ％
세라마이드 0.1 ％
디라우로일글루타민산리신나트륨 0.1 ％
EDTA-2 나트륨 0.02 ％
프로필파라벤 0.1 ％
메틸파라벤 0.15 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 4 : 미용액＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 2 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 미용액 (미백 보습 에센스) 을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 2) 0.8 ％
히알루론산나트륨 0.2 ％
가수분해 히알루론산 0.1 ％
1,3-부틸렌글리콜 5.0 ％
글리세린 1.5 ％
POE 소르비탄모노스테아르산에스테르 1.0 ％
소르비탄모노스테아르산에스테르 0.5 ％
잔탄검 0.2 ％
알긴산나트륨 0.2 ％
카르복시비닐 폴리머 0.2 ％
수산화칼륨 0.1 ％
올리브유 0.2 ％
토코페롤 0.1 ％
EDTA-2 나트륨 0.02 ％
알기닌 0.15 ％
글리시리진산디칼륨 0.05 ％
알부틴 0.2 ％
팔미트산레티놀 0.2 ％
고삼 엑기스 0.2 ％
해조 엑기스 0.2 ％
트라넥삼산 0.1 ％
엘라스틴 0.1 ％
콜라겐 0.1 ％
인산아스코르브산마그네슘 0.1 ％
시트르산나트륨 1.0 ％
시트르산 0.1 ％
프로필파라벤 0.1 ％
메틸파라벤 0.15 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 5 : 미용액 팩＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 미용액 팩 (페이스트상 필오프 타입) 을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.5 ％
폴리아세트산비닐 에멀전 17.0 ％
폴리비닐알코올 11.0 ％
소르비톨 5.0 ％
폴리에틸렌글리콜 400 5.0 ％
스쿠알란 2.5 ％
POE 소르비탄모노스테아르산에스테르 1.0 ％
산화티탄 4.0 ％
탤크 8.0 ％
에탄올 8.0 ％
메틸파라벤 0.15 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 6 : 세안료＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 세안료 (클렌징 폼) 를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.2 ％
카티온화 히알루론산 0.1 ％
(큐피 주식회사 제조, 히알로베일)
글리세린 10.0 ％
폴리에틸렌글리콜 400 15.0 ％
디프로필렌글리콜 10.0 ％
라우로일글루타민산나트륨 20.0 ％
POE(2)모노스테아르산에스테르 5.0 ％
팜 지방산 글루타민산나트륨 8.0 ％
알킬베타인 2.0 ％
EDTA-2 나트륨 0.02 ％
프로필파라벤 0.1 ％
메틸파라벤 0.15 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 7 : 선스크린＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 선스크린 (유액) 을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.2 ％
1,3-부틸렌글리콜 3.0 ％
디프로필렌글리콜 3.0 ％
시클로메치콘 5.0 ％
디메치콘 5.0 ％
세탄올 1.0 ％
바셀린 1.0 ％
메톡시 계피산 옥틸 5.0 ％
산화티탄 2.0 ％
산화아연 2.0 ％
스테아르산소르비탄 1.0 ％
POE(20)소르비탄모노스테아르산에스테르 1.0 ％
페녹시에탄올 0.8 ％
메틸파라벤 0.1 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 8 : 립크림＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 립크림을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.1 ％
마이크로크리스탈린 왁스 1.5 ％
세레신 12.0 ％
스쿠알란 10.0 ％
데카메틸테트라실록산 10.0 ％
말산디이소스테아릴 5.0 ％
칸데릴라 왁스 2.0 ％
바셀린 8.0 ％
하이드록시스테아르산글리세릴 2.0 ％
멘톨 0.05 ％
유동 파라핀 1.0 ％
아세트산토코페롤 0.1 ％
토코페롤 0.05 ％
프로필파라벤 0.1 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 9 : 샴푸＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 샴푸를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.2 ％
카티온화 히알루론산 0.1 ％
(큐피 주식회사 제조, 히알로베일)
POE(20)라우릴에테르황산나트륨 11.0 ％
라우로일아스파라긴산나트륨 10.0 ％
야자유 지방산 아미드프로필베타인 4.0 ％
야자유 지방산 모노에탄올아미드 2.0 ％
EDTA-2 나트륨 0.1 ％
벤조산나트륨 0.2 ％
페녹시에탄올 0.8 ％
메틸파라벤 0.1 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 10 : 헤어 컨디셔너＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 헤어 컨디셔너를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.3 ％
카티온화 히알루론산 0.2 ％
(큐피 주식회사 제조, 히알로베일)
스테아릴알코올 4.0 ％
세탄올 1.5 ％
하이드록시에틸우레아 1.0 ％
아미노프로필디메치콘 1.5 ％
디메치콘 0.5 ％
가수분해 실크 1.0 ％
1,3-부틸렌글리콜 1.0 ％
글리세린 3.0 ％
2-에틸헥산산세틸 2.0 ％
미리스트산이소세틸 0.4 ％
L-알기닌 0.1 ％
트레할로오스 0.1 ％
소르비톨 0.1 ％
케라틴 펩티드 0.1 ％
POE(4)스테아릴에테르 1.0 ％
스테아르산디메틸아미노프로필아미드 3.0 ％
염화디스테아릴디메틸암모늄 0.2 ％
벤조산나트륨 0.3 ％
페녹시에탄올 0.8 ％
메틸파라벤 0.1 ％
향료 적당량
정제수 잔량
＜배합예 11 : 소프트 캡슐＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 소프트 캡슐을 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 20 ％
올리브유 35 ％
밀납 5 ％
중사슬 지방산 트리글리세리드 5 ％
젤라틴 25 ％
글리세린 10 ％
＜배합예 12 : 산제＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 산제 (과립제) 를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 10 ％
젖당 60 ％
옥수수 전분 25 ％
하프로멜로스 5 ％
＜배합예 13 : 소프트 캡슐＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 정제를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 25 ％
젖당 24 ％
결정 셀룰로오스 20 ％
옥수수 전분 15 ％
덱스트린 15 ％
이산화규소 1 ％
＜배합예 14 : 젤리 음료＞
본 배합예에서는, 이하에 기재하는 처방으로, 실험예 1 에서 얻어진 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산을 배합한 스파우트 파우치에 들어간 백도 젤리 음료를 조제하였다.
카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 (실험예 1) 0.20 ％
잔탄검 1.00 ％
카라기난 0.5 ％
덱스트린알코올 3.0 ％
스쿠랄로오스 1 ％
4 배 농축 백도 과즙 5.00 ％
시트르산 0.60 ％
시트르산나트륨 0.20 ％
L-아스코르브산 0.10 ％
피치 향료 0.20 ％
정제수 잔량

Claims (20)

  1. 온도가 30 ℃ 이하인 함수 (含水) 용매 중에서, 용해된 원료 히알루론산, 그 염, 또는 히알루론산 및 그 염을 할로아세트산, 그 염, 또는 할로아세트산 및 그 염과 반응시키는 공정을 포함하고,
    상기 함수 용매는 물 또는 수용성 유기 용매와 물의 혼합액이고,
    상기 혼합액 중에 있어서의 수용성 유기 용매의 비율이 60 v/v％ 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 할로아세트산은 클로로아세트산, 브로모아세트산, 또는 클로로아세트산 및 브로모아세트산인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 함수 용매에 있어서의 상기 히알루론산의 농도가 0.05 g/㎖ 이상 0.5 g/㎖ 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 용해된 원료 히알루론산, 그 염, 또는 히알루론산 및 그 염의 분자량이 4,000 이상 400 만 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  5. 제 1 항에 있어서,
    얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 반응시키는 공정에 의해, 분자량이 80 만 이상인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산이 얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  7. 제 6 항에 있어서,
    상기 반응시키는 공정에 의해, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 5 ％ 이상 200 ％ 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산이 얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  8. 분자량이 80 만 이상이고, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 50 ％ 이상 200 ％ 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 또는 그 염.
  9. 제 8 항에 있어서,
    동점도가 30 ㎟/s 이상 200 ㎟/s 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 또는 그 염.
  10. 제 8 항에 있어서,
    히알루론산을 구성하는 수산기 중 적어도 일부의 수산기의 수소 원자가, -CH2-CO2H 및 -CH2-CO2 - 로 나타내는 기 중 하나 이상으로 치환되어 있는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 또는 그 염.
  11. 제 8 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    색의 색상을 나타내는 b 값이 5 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 또는 그 염.
  12. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 반응시키는 공정에 의해, 분자량이 4,000 이상 80 만 미만인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산이 얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  13. 제 12 항에 있어서,
    상기 반응시키는 공정에 의해, 히알루론산을 구성하는 2 당 단위에 대한 카르복시메틸화율이 60 ％ 이상 200 ％ 이하인 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산이 얻어지는 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염의 제조 방법.
  14. 제 8 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염을 함유하는 화장료.
  15. 제 8 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염을 함유하는 식품 조성물.
  16. 제 8 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산, 그 염, 또는 수식 히알루론산 및 그 염을 함유하는 의약품 조성물.
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
KR1020167011049A 2013-10-08 2014-10-07 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법 KR102268945B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013211480 2013-10-08
JPJP-P-2013-211480 2013-10-08
PCT/JP2014/076846 WO2015053280A1 (ja) 2013-10-08 2014-10-07 カルボキシメチル基含有修飾ヒアルロン酸および／またはその塩および／またはその製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20160067887A KR20160067887A (ko) 2016-06-14
KR102268945B1 true KR102268945B1 (ko) 2021-06-23

Family

ID=52813096

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020167011049A KR102268945B1 (ko) 2013-10-08 2014-10-07 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법

Country Status (7)

Country Link
US (1) US10155824B2 (ko)
EP (1) EP3056519B1 (ko)
JP (2) JP5756246B1 (ko)
KR (1) KR102268945B1 (ko)
CN (1) CN105658674B (ko)
TW (1) TWI648292B (ko)
WO (1) WO2015053280A1 (ko)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6423701B2 (ja) * 2014-12-05 2018-11-14 花王株式会社 化粧料
US20180086852A1 (en) * 2015-03-31 2018-03-29 Kewpie Corporation Hyaluronic Acid Derivative and Manufacturing Method Therefor and Cosmetics, Food Composition, and Pharmaceutical Composition Containing Hyaluronic Acid Derivative
JP2016199515A (ja) * 2015-04-13 2016-12-01 キユーピー株式会社 乳化化粧料
JP2016199518A (ja) * 2015-04-13 2016-12-01 キユーピー株式会社 皮膚改善剤
JP2016199516A (ja) * 2015-04-13 2016-12-01 キユーピー株式会社 ゲル状化粧料
JP2016041729A (ja) * 2015-10-29 2016-03-31 キユーピー株式会社 毛髪用化粧料
CN108339112B (zh) * 2016-12-30 2023-04-21 亚宝药业集团股份有限公司 一种用于促进创伤愈合、褥疮修复、术后应激性溃疡愈合的营养组合物
KR102371689B1 (ko) * 2017-04-26 2022-03-07 주식회사 엘지생활건강 활성화 공정을 포함하는 아세틸화 히알루론산의 제조방법
JP6940852B2 (ja) * 2017-11-30 2021-09-29 キユーピー株式会社 ポリイオンコンプレックス、及びポリイオンコンプレックスの成形体
CN110038031A (zh) * 2019-04-03 2019-07-23 上海美宝生命科技有限公司 一种油性抑菌膏及其制备方法
US11789352B2 (en) * 2021-11-01 2023-10-17 GM Global Technology Operations LLC Camera system laminated into glass using microsensor and lens

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005056608A1 (en) 2003-12-04 2005-06-23 University Of Utah Research Foundation Modified macromolecules and methods of making and using thereof
CN102898545A (zh) * 2012-11-15 2013-01-30 山东众山生物科技有限公司 一种降低透明质酸粘度的方法
KR101551681B1 (ko) 2009-07-30 2015-09-09 카르빌란 테라퓨틱스, 인코포레이티드 변형된 히알루론산 폴리머 조성물 및 관련방법

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6357602A (ja) 1986-08-29 1988-03-12 Q P Corp 低分子ヒアルロン酸の製法
JP3850559B2 (ja) 1998-07-21 2006-11-29 ダイセル化学工業株式会社 カルボキシメチルセルロース又はその塩類
DE102005004643B4 (de) * 2005-01-28 2010-04-08 Innovent E.V. Technologieentwicklung Antivirale Kombinationen sowie ihre Verwendung
JP4576583B2 (ja) 2005-03-22 2010-11-10 キユーピー株式会社 ヒアルロン酸またはその塩、およびその製造方法、ならびにこれを含有する化粧料および食品組成物
CN101225125B (zh) * 2008-01-18 2012-12-05 中国科学院烟台海岸带研究所 一种吸湿保湿剂及其制备方法
DE102009024616A1 (de) * 2009-06-08 2010-12-23 Telos Gmbh Sterilisierbare Implantatbeschichtung und Verfahren zu deren Herstellung

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005056608A1 (en) 2003-12-04 2005-06-23 University Of Utah Research Foundation Modified macromolecules and methods of making and using thereof
KR101551681B1 (ko) 2009-07-30 2015-09-09 카르빌란 테라퓨틱스, 인코포레이티드 변형된 히알루론산 폴리머 조성물 및 관련방법
CN102898545A (zh) * 2012-11-15 2013-01-30 山东众山生物科技有限公司 一种降低透明质酸粘度的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Stephanie Möller, ‘Synthesis and antiherpetic activity of carboxymethylated and sulfated hyaluronan derivatives’, Carbohydrate Polymers 90 (2012) 608-615*

Also Published As

Publication number Publication date
JP2015147945A (ja) 2015-08-20
JP5756246B1 (ja) 2015-07-29
EP3056519A1 (en) 2016-08-17
KR20160067887A (ko) 2016-06-14
TWI648292B (zh) 2019-01-21
CN105658674B (zh) 2019-04-09
TW201522381A (zh) 2015-06-16
CN105658674A (zh) 2016-06-08
WO2015053280A1 (ja) 2015-04-16
US10155824B2 (en) 2018-12-18
EP3056519A4 (en) 2017-11-08
EP3056519B1 (en) 2019-04-10
JPWO2015053280A1 (ja) 2017-03-09
JP6377020B2 (ja) 2018-08-22
US20160244534A1 (en) 2016-08-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102268945B1 (ko) 카르복시메틸기 함유 수식 히알루론산 및/또는 그 염 및/또는 그 제조 방법
US9107842B2 (en) Modified hyaluronic acid and/or a salt thereof, method for producing the same, and cosmetic preparation comprising the same
JP5852560B2 (ja) ヒアルロン酸金属塩の製造方法、ヒアルロン酸金属塩を含む化粧品の製造方法、ならびにヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法
KR102301455B1 (ko) 히알루론산 및/또는 그 염 및 그 제조 방법, 그리고, 그 히알루론산 및/또는 그 염을 포함하는 식품, 화장료, 및 의약품
JP2013181001A (ja) ヒアルロン酸組成物、およびこれを含む皮膚外用剤
JP6613300B2 (ja) ヒアルロン酸誘導体およびその製造方法、ならびにヒアルロン酸誘導体を含む化粧料、食品組成物および医薬組成物
WO2015053282A1 (ja) カルボキシメチル基含有修飾ヒアルロン酸および／またはその塩の架橋物およびその製造方法
JP5734536B1 (ja) カルボキシメチル基含有修飾ヒアルロン酸および／またはその塩の架橋物およびその製造方法
JP2010189368A (ja) 液状皮膚外用剤
JP6599673B2 (ja) ヒアルロン酸および／またはその塩、ならびに、該ヒアルロン酸および／またはその塩を含む食品、化粧料、および医薬品
JP2016199516A (ja) ゲル状化粧料
JP2004107238A (ja) 乾燥肌改善用キット

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant