KR102147641B1 - 피라칸타 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피라칸타(Pyracantha fortuneana) 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

Description

피라칸타 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Improving Atopic Dermatitis with the Extract of Pyracantha fortuneana}

본 출원은 2017년 9월 15일자 한국 특허 출원 제10-2017-0118549호에 기초한 우선권의 이익을 주장하며, 해당 한국 특허 출원의 문헌에 개시된 모든 내용은 본 명세서의 일부로서 포함된다.

본 발명은 피라칸타(Pyracantha fortuneana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물로서, 아토피 피부염 개선에 효능이 있는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부환경으로부터 생체를 보호하는 보호막의 기능을 하는 기관으로서, 인체 내의 생체성분 즉, 물이나 전해질 등의 손실을 방지하는 동시에 외부로부터 유해물질이 인체 내로 침입하지 못하도록 하는 역할을 한다.

피부는 크게 표피층, 진피층 및 피하지방층으로 구분된다. 표피층은 최외각 층을 이루는 각질세포와 세포 간 지질로서 피부의 장벽기능을 담당한다. 이처럼 피부의 장벽 기능은 각질의 세포분열과 분화를 통해서, 그리고 세포 간 지질을 통해서 체내 물질의 유출을 방지하고 피부 수분증발을 방지하는데 그 중 가장 대표적인 것이 세라마이드이다.

세라마이드는 세포간 지질의 핵심 구성성분으로, 각질세포 간 지질의 약 50 퍼센트를 차지하며 라멜라 액정구조의 형성에 결정적인 역할을 하여 피부장벽과 수분 유지 기능에 아주 중요한 스핑고지질이다. 각질형성세포의 어느 층에서 세라마이드의 합성 과정이 시작되는지는 확실히 알려져 있지 않지만, 일반적으로는 분화가 시작되는 유극층으로 알려져 있으며, 세라마이드의 양이 감소하면 피부건조증, 아토피, 건선과 같은 피부 질환을 야기하는 것이 보고된 바 있다.

구체적으로, 세라마이드는 세린-팔미토일 전이효소(Serine-palmitoyl transferase, SPT)의 활성과 직접적인 관련이 있으며, SPT KO 마우스(Knockout Mouse)의 피부에서 세라마이드 함량이 감소하면 피부 가려움증과 아토피가 나타나는 것으로 알려진 바 있다(Nakajima K., et al. 2013).

한편, 아토피는 음식물 또는 흡입성 물질에 대한 인체의 알레르기 반응으로서, 아토피 피부염은 염증성 피부 질환으로 심한 소양감, 홍반, 부종 등의 증상이 나타나는 것으로, 아토피 피부염의 확실하게 검증된 유발 원인은 밝혀지지 않았으나 외부의 알레르기원이 피부에 침투하면 나타나는 것으로 알려져 있다.

이러한 아토피 피부염을 치료하기 위한 다양한 치료용 약물이 개발되어 왔으나, 이는 주로 외부의 알레르기원이 피부에 침투된 후의 피부의 과민성 알레르기 반응을 억제하는 작용을 함으로써 치료하는 방법으로서, 인체의 면역반응의 민감도를 저하시키는 부작용이 있어, 아토피 피부염 증상은 개선되는 반면, 외부의 항원에 대해서 다소 약한 면역반응을 나타내는 부작용이 있었다.

이와는 달리 아토피 피부염의 개선을 위한 새로운 접근법으로서, 외부의 알레르기원이 피부를 통해 인체 내부로 유입되는 것을 차단하는 방법을 활용하기 위한 다양한 연구가 진행되어 왔다.

구체적으로, 피부의 세라마이드 함량이 감소하면, 피부 장벽 기능이 약해지고 외부의 알레르기원이 피부로 침투하기 쉬워짐에 따라, 알레르기성 피부질환인 아토피 피부염이 유발되는 바, 피부 내의 세라마이드의 함량은 아토피 피부염의 발생과 개선에 큰 영향을 미친다.

더욱이, 사회가 발전됨에 따라 과거에는 없던 다양한 종류의 알레르기원에 노출되게 되어 아토피 피부염의 발병률이 유아와 성인의 구분없이 빈번하게 나타나게 되었다. 다양한 알레르기원을 일일이 제거하거나 방지하고 예방하는 외에, 피부 자체의 장벽 기능을 강화시켜 아토피 피부염을 예방하고 개선하기 위한 일환으로 피부의 세라마이드의 부족을 해결하기 위한 연구가 활발하게 진행되고 있다.

많은 연구자들이 천연 세라마이드를 개발하거나 유사 세라마이드를 개발하고 있으나, 세라마이드는 가격이 높을 뿐만 아니라 매우 난용성 물질로 결정화 경향이 커서 이를 함유하는 처방의 개발이 어려운 단점이 있다. 유기용매를 연속상으로 하는 방법의 경우에는 피부의 대한 자극이 발생하며, 수상을 연속상으로 하고 리포좀에 도입하는 방법의 경우에는 리포좀이 장기간 안정적으로 유지되지 않는 문제점이 있어 실질적인 효능을 기대하기 어렵다.

이에 따라, 다양한 제형으로 구현하여 화장료로서 이용이 가능하면서도, 아토피 피부염의 개선 효과가 뛰어난 화장료 조성물에 대한 개발이 계속되고 있다.

본 발명은 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 상기 화장료가 피라칸타 추출물을 포함함으로써 아토피 피부염 예방 및 개선에 효능이 있을 뿐만 아니라, 다양한 제형으로 구현이 가능한 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

또한, 식물로부터 추출한 추출물을 포함함으로써, 인체에 무해하고 안전성이 우수한 효과를 가지는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 피라칸타(Pyracantha fortuneana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.

여기서 피라칸타는 전초(뿌리, 줄기, 잎 등 그 약재의 전체)부위 및 열매를 사용함을 특징으로 한다.

본 발명은 피라칸타 추출물에서 수득한 유효성분을 포함함으로써, SPT의 발현을 촉진하고, 세라마이드 생합성을 촉진하는 동시에 피부 내 세라마이드 함량을 증가시킬 수 있는 효과가 있다.

또한, 피라칸타 추출물은 염증관련인자인 일산화질소(Nitric oxide, NO)의 생성을 저해하여 피부자극을 완화시킬 수 있는 바, 항염 효능으로 인한 아토피성 피부염 개선 효과, 피부자극 완화 효과가 우수하다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 세라마이드 함량을 증가시키는 동시에 일산화질소의 생성을 저해함에 따라, 피부장벽기능을 강화하여 피부 보습 및 가려움증 개선 효과가 뛰어나고 피부자극 완화효과가 우수하여 아토피성 피부, 건조피부 등의 피부 개선 효과가 뛰어나다.

특히, 본 발명의 화장료 조성물은 아토피 피부염의 예방과 개선에 탁월한 효과를 가진다.

본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피라칸타 추출물의 추출방법은 특정의 방법으로 한정되지 않는다.

다만, 본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서는, 바람직하게는 피라칸타 1 중량부에 대해 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산, 메틸프로판디올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 용매를 1 ~ 10 중량부로 첨가하여 80 ~ 100℃에서 추출하는 것이 바람직하다.

얻어진 추출물은 동결건조하여 동결건조물을 제조하고, 얻어진 동결건조물을 용매에 분산시키거나 용해시킬 수 있다. 얻어진 동결건조물은 용매 내에 5 중량% 미만으로 첨가될 수 있고, 상기 분산용매는 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산, 메틸프로판디올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.

상기 동결건조물은 0.3 초과 5 중량% 미만으로 첨가될 수 있으며, 상기 함량보다 소량으로 첨가되는 경우, 화장료로서의 효능이 미미한 문제가 있고, 5 중량% 이상으로 첨가되는 경우에는 용매에 추출 용매 제조 후, 소정의 시간이 경과 한 후에 동결건조물이 석출되며 변색이 나타나는 문제가 있다.

한편, 본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 피라칸타 추출물은 바람직하게는 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.06 내지 0.14 중량%로 포함될 수 있다. 보다 바람직하게는, 0.08 내지 0.13 중량%로 포함될 수 있고, 가장 바람직하게는 0.10 내지 0.12 중량%로 포함될 수 있다.

피라칸타 추출물의 함량이 상기 함량보다 소량으로 첨가되는 경우, 화장료의 효능이 미미한 문제점이 있고, 상기 함량보다 과량으로 첨가되는 경우에는, 첨가량 대비 효과의 차이가 나지 않아 비경제적인 문제점이 있다.

한편, 본 발명에 따른 화장료 조성물은, 바람직하게는 상기 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하다. 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

한편, 본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 수중유(O/W)형으로 이루어진 기초화장료 제형, 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료 제형, 스킨, 로션, 아이크림, 수딩젤, 연고, 마스크팩용 제형, 바디워시용 제형, 필링젤, 수중유형 메이크업베이스, 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형, 선크림, 비비크림 및 두피용 제형 중에서 선택되는 어느 하나인 것일 수 있다.

또한, 이는 선택적으로 에어로졸 형태로 피부에 적용될 수도 있고, 고체 형태 예컨대, 스틱의 형태일 수도 있다. 이는 피부용 케어 제품 및/또는 메이크업 제품으로서 사용될 수도 있다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테를 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 드라가칸트 등이 이용될 수 있다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이드, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이드, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명은 피부 화장료에 적용이 가능하고, 인체에 무해하여 안전성이 우수할 뿐만 아니라, 피라칸타(Pyracantha fortuneana) 추출물을 함유하여 아토피 예방 및 개선 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

구체적으로, 피부의 세라마이드 함량이 저감되거나 부족하게 되는 경우에, 피부의 자체 세라마이드의 합성을 촉진하고, 세라마이드 성분을 피부에 공급함으로써, 외부의 알레르기원이 피부에 침투되는 것을 방지하여 과민성 알레르기 피부염인 아토피 피부염을 예방하고 개선하는 효과를 갖는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명은 천연 재료를 유효성분으로 함유함으로써 기존의 여러 화학물질을 함유하여 피부에 자극을 주는 화장료에 대한 소비자의 거부감을 감소시킬 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 피라칸타 추출물은 추출물이 정제수만을 포함하는 경우에도 우수한 아토피 피부염의 예방 및 개선 효과를 가지는 바, 제형 안정성을 확보하기 위한 추가 성분을 포함하지 않고도 다양한 화장료의 제형으로 구현이 가능하여, 아토피 피부염 개선용 화장료로서 안전성이 향상된 장점을 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다.

도 1은 세린-팔미토일 전이효소의 발현정도를 나타낸 그래프이다;
도 2는 IL-4와 IL-6의 mRNA 발현정도를 나타낸 그래프이다;
도 3은 경피수분손실량(TEWL)을 나타낸 그래프이다;
도 4는 처방예 1과 비교처방예 1에 대한 염증성 병변의 기저치 대비 비율 그래프이다.

이하, 본 발명의 구성 및 작용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

[실시예 1: 피라칸타 추출물의 제조]

세절하여 음건한 피라칸타의 열매를 95%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조하여 동결건조물을 수득하였다. 그 후, 수득된 동결건조물이 추출물의 총 중량을 기준으로 1 중량%로 함유되게 정제수로 분산/용해하여 피라칸타 추출물을 제조하였다.

[비교예 1: 피라칸타 추출물의 제조]

수득된 동결건조물이 추출물의 총 중량을 기준으로 0.3 중량%가 함유되도록 추출물을 제조한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 피라칸타 추출물을 제조하였다.

[비교예 2: 피라칸타 추출물의 제조]

수득된 동결건조물이 추출물의 총 중량을 기준으로 5 중량%가 함유되도록 추출물을 제조한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 피라칸타 추출물을 제조하였다.

실시예 및 비교예에 따라 제조된 피라칸타 추출물에 대해, 동결건조물을 용매에 분산/용해시킨 후 약 1시간 후에 피라칸타 추출물의 변색여부 및 동결건조물의 석출여부를 확인하여 하기 표 1에 나타냈다.

	실시예1	비교예1	비교예2
변색여부	X	X	O
석출여부	X	X	O

상기 표 1을 참조하면, 실시예 1과 비교예 1의 피라칸타 추출물을 동결건조물을 용매 상에 용해시킨 후에 추출물이 변색되지 않고, 동결건조물이 석출되지 않은 반면, 비교예 2의 경우, 추출물의 색이 약 1시간 경과 후에 즉시 변색되는 문제점이 있었다. 또한, 변색과 함께 동결건조물이 석출됨을 확인할 수 있었다.

한편, 비교예 1의 경우, 추출물이 변색되거나 동결건조물이 석출되지는 않았으나, 피라칸타의 유효 성분의 함량이 적어, 화장료에 첨가하더라도 화장료로서의 효능이 거의 없는 것으로 확인되었다.

[실험예 1: 피라칸타 추출물의 세린-팔미토일 전이효소 발현 촉진효과 측정]

본 실험에서는 피라칸타 추출물이 세라마이드 생합성에 관여하는 핵심효소인 세린-팔미토일 전이효소(Serine-palmitoyl transferase, SPT)의 발현에 영향을 미치는 정도를 측정하였다.

인간 각질 세포주(HaCaT, keratinocyte)를 6 well 배양접시에 분주하고 80% 정도 세포가 찼을 때 배지를 1% FBS로 교체하고 각 실시예 1를 농도별(1, 3, 10, 30, 100 μg/ml)로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 수거하여 용해시키고 세포용해물을 'BCA protein assay kit'로 단백질을 정량하였다. 세포에서 회수되어 정량한 단백질은 10% SDS-PAGE gel에서 전기영동 시킨 후 PVDF 멤브레인에 전이(transfer) 시킨 후, 1차 항체(SPT, ceramidase, Santa cuz., USA)를 4℃에서 오버나이트 처리한 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 1시간 반응시킨 후 TBST로 세척하고 ECL 반응 kit을 이용하여 반응시켜 밴드를 확인 하였다.

각 밴드의 강도(intensity)는 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 '% control'하여 정량하여 SPT 발현량 (%)을 계산하였다.

그 결과는 도 1에 나타내었는데, 이에 의하면 피라칸타 추출물(실시예 1)이 농도의존적으로 세린-팔미토일 전이효소의 발현을 증가시킴을 알 수 있었다(도 1).

[실험예 2: 피라칸타 추출물의 세라미데이즈 (Ceramidase) 억제 효과 확인]

황색포도상구균 (Staphylococcus aureus)은 세라미데이즈 (Ceramidase)를 생산하여 피부에 존재하는 세라마이드를 분해시키므로, 피라칸타 추출물로부터 황색포도상구균의 억제능을 paper disc method를 이용하여 측정함에 따라, 결과적으로 세라미데이즈 활성을 억제하는 가능성을 확인하였다.

실시예 1의 추출물을 농도별로 각각 100㎕씩 paper-disc에 흡수시키고, TSA와 PDA 배지를 굳힌 petri dish 중앙에 각 paper-disc를 올려놓았다. 세균 중 황색포도상구균 (S. aureus)는 균 농도를 1*10⁵ cfu/ml의 농도로 균주를 희석하고 Tap agar (0.05%) 10 ml에 희석한 후, petri dish 위에 1 ml 분주 후 32℃ 에서 24시간 배양을 하여 확인하였다.

그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.

피라칸타 추출물(ug/ml)	(-)	0	30	100
S. aureus	-	15	17	21

(단위: mm)

상기 표 2에 의하면, 저해환의 크기가 농도 의존적으로 커지는 것을 알 수 있었다. 이에 본 발명의 피라칸타 추출물은 황색포도상구균의 활성을 농도 의존적으로 감소시켜, 결과적으로 세라미데이즈의 활성 억제 가능성을 확인하였다.

[실험예 3: 피라칸타 추출물의 IL-4, IL-6 억제 효과 확인]

염증으로 인하여 도움 T세포 2(helper T cell 2)가 분비하는 IL-4와 IL-6는 아토피성 피부염이 있는 피부에서 주로 발견되는 사이토카인으로써, 필라그린(filaggrin)과 세라마이드의 합성을 감소시켜 피부장벽 결함을 야기하고 악화시킨다. 따라서, 본 실험에서는 피라칸타 추출물(실시예 1)이 IL-4와 IL-6의 mRNA 발현을 억제하는 정도를 알아보았다.

RAW 264.7 세포를 PBS로 세척한 후, 트립신을 이용해 배양접시에서 떼어낸 후, 6-웰 플레이트에 3*10⁵ cells로 접종하고 24시간 안정화시켰다. 1 μg/ml의 LPS (lipopolysaccaride)와 실시예 1를 농도별(10, 30, 100 μg/ml)로 동시에 처리하였다. 4시간 후에 트리졸(Trizol)을 이용하여 총 RNA를 추출하였다. RNA는 UV 스펙트로포토미터로 정량한 후, 2 μg의 RNA를 역전사 효소(reverse transcriptase)를 이용해 cDNA로 합성하고, Taq 중합효소를 이용하여 증폭시켰다. 이렇게 증폭된 PCR 산물은 아가로스 겔에 전기영동을 실시한 후 밴드를 확인하였다.

그 결과는 도 2에 나타내었는데, 이에 의하면 피라칸타 추출물(실시예 1)은 농도 의존적으로 IL-4와 IL-6의 mRNA 발현을 억제함을 알 수 있었다(도 2).

[제조예 1: 피라칸타 추출물을 함유하는 화장료의 제조]

실시예 1의 피라칸타 추출물을 0.1 중량%가 포함된 화장료 조성물을 하기 표 3의 조성으로 제조하여 이를 처방예 1이라 하였으며, 대조군으로 비교처방예 1 내지 3을 제조하였다.

성분(중량%)	처방예 1	비교처방예1	비교처방예2	비교처방예3
실시예 1의 피라칸타 추출물	0.1	-	0.05	0.15
1,3-BG	10.0	10.0	10.0	10.0
글리세린	5.1	5.1	5.1	5.1
프로필렌글리콜	4.2	4.2	4.2	4.2
토코페릴아세테이트	3.0	3.0	3.0	3.0
유동파라핀	4.6	4.6	4.6	4.6
트리에탄올아민	1.0	1.0	1.0	1.0
스쿠알란	3.1	3.1	3.1	3.1
마카다미아너트오일	2.5	2.5	2.5	2.5
폴리솔베이트	1.6	1.6	1.6	1.6
솔비탄세스퀴롤레이트	1.6	1.6	1.6	1.6
프로필파라벤	0.6	0.6	0.6	0.6
카르복실비닐폴리머	1.5	1.5	1.5	1.5
향	미량	미량	미량	미량
방부제	미량	미량	미량	미량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량
계	100.0	100.0	100.0	100.0

[실험예 4: 피라칸타 추출물의 피부 장벽기능 강화 효과]

본 실험예 4에서는 상기 제조예 1에서 제조된 '피라칸타 추출물에서 수득한 세라마이드 생합성을 촉진하는 유효성분을 함유하는 화장료' 의 피부 장벽기능 강화 효과를 알아보고자 경피 수분 손실량을 측정하였다.

경피 수분 손실량(TEWL, Transepidermal Water Loss)은 피부 내부의 수분이 증발되는 양을 의미하는 것으로, 피부의 장벽기능이 상실되었을 때, 피부 내부의 수분이 증발하므로, 경피 수분 손실량의 측정을 통해 피부 장벽 기능 강화 효과를 확인할 수 있다.

경피수분손실량은 Tewamter TM300 (Courage and Khazaka)를 사용하여 측정하였으며, 시험 부위를 제공된 세안제를 이용하여 씻은 후 항온 및 항습 조건에서 30분 이상 대기한 후에 측정하였다.

측정은 동일 부위에서 20회 연속 측정하여 마지막 측정 값 5 개의 평균값을 구하여, 하기 도 3에 나타냈다.

[실험예 5: 염증성 병변의 기저치 대비 비율 측정]

처방예 1과 비교처방예 1의 화장료에 대해 염증성 병변의 기저치 대비 비율을 측정하였다. 기저치 대비 비율은 '시험물질 적용 후 측정 시점에서 병변 수/시험물질 적용 전 병변 수'를 의미한다.

시험물질의 적용 전 피험자의 얼굴에서 염증성 병변과 비염증성 병변 수를 측정한 후, 2주 간격으로 방문 시 피험자의 얼굴에서 염증성 병변 수를 측정하여 시험물질의 적용 전 병변 수에 대비한 8주 후의 병변 수의 비율을 평가하여 통계분석하였다.

통계분석은 SPSS, SAS 등 통계처리 프로그램을 이용하여 분석하며, 통계법으로는 반복측정 분산분석(Repeated Measure ANOVA)을 사용하였다.

염증성 병변의 기저치 대비 비율 변화를 도시한 도 4를 참고하면, 확인한 결과 시험제품(처방예1) 사용군은 사용 전과 비교하여 사용 8주 후 유의하게 감소 (p<0.05) 하였고, 대조제품(비교처방예1) 사용군은 사용 전과 비교하여 모든 시점에 유의한 변화는 나타나지 않았다. 또한 대조제품과 비교하여 사용 8주 후에 유의한 차이(p<0.005)가 나타났다.

[실험예 6: 아토피 관능 평가]

본 발명에 따른 혼합추출물의 아토피 피부염 유발 억제효과를 확인하기 위하여 하기와 같은 패널 테스트를 진행하였다.

1. 인체적용시험 대상자 선정

아토피성 피부염 증상이 있는 5~7세의 미취학 아동 20명(연령: 만 4세 2명, 만 5세 12명, 만 6세 6명(평균 만 5.2 세), 성별: 남성 10명, 여성 10명)을 대상으로 시험제품인 처방예1 및 비교처방예 1~3을 전완부 또는 얼굴에 4주 사용하는 동안, 제품 사용 전과 사용 2주 후, 사용 4주 후에 각 시험항목들을 측정하여 가려움증 완화에 대한 효과를 평가하고, 시험 종료 후 설문평가를 완료하였다. 아토피 외 피부질환, 가려움, 따가움, 홍반, 화장품 부작용, 의약품 부작용, 광민감성 경험에 대한 설문에서 해당되는 시험대상자는 없었다.

시험대상자에게 처방예 1, 비교처방예 1~3을 전완부에 수딩젤, 로션, 크림 순서대로 적당량 덜어서 바른 후 충분히 두드려 흡수시키도록 하였다.

2-1. 피부 가려움증 개선도 평가(Visual Analog Scale Assessment)

시험대상자가 느끼는 제품 사용 전후의 가려움증의 정도를 0-10㎝ 선분 위에 시험대상자가 직접 표시하도록 하고, 표시한 선분의 길이를 비교하여 가려움증 개선도를 평가하고, 그 결과를 하기 표 4에 나타냈다.

그 결과, 아래 표와 같이, 처방예 1는 사용 전과 비교하여 사용 2주 후, 사용 4주 후 피부 가려움증의 정도가 모두 유의하게 감소(p <0.025)하였으며, 비교 처방예 1 및 2는 사용 전과 사용 후에 유의미한 차이가 없었다.

비교처방예 3은 처방예 1과 비교하여, 실시예 1의 피라칸타 추출물을 과량으로 포함함에도 불구하고, 처방예 1의 피부 가려움증 개선 효과와 큰 차이가 없는 것으로 확인되었다. 따라서, 특정함량 이상으로 피라칸타 추출물을 첨가하는 것은 무용한 것으로 판단된다.

단위:cm	처방예1	비교처방예 1	비교처방예 2	비교처방예 3
사용 전	6.31(1.63)	6.28(1.33)	6.21(1.22)	6.40(1.39)
사용 2주 후	4.98(1.04)	6.03(1.92)	4.78(1.37)	3.98(1.02)
사용 3주 후	3.08(1.09)	6.31(1.02)	4.08(1.99)	2.09(1.22)
사용 4 주 후	1.90(1.02)	5.07(1.98)	3.05(1.98)	1.29(1.22)

2-2. 유효성 설문조사(Global Assessment of Efficacy)

처방예 1, 비교처방예 1 내지 3을 사용 후 피부 가려움증 개선 및 피부 건조도 개선에 대하여 아주 좋음(5), 좋음(4), 보통(3), 나쁨(2), 아주 나쁨(1)의 5단계로 직접 설문에 답하도록 하였다. 각 답변에 대한 시험대상자 수의 백분율을 구하여 표 5 내지 8에 도시하고, 각 화장료의 효능 유무를 판단하였다.

하기 표 5를 참조하면, 처방예 1의 수딩젤, 로션 및 크림 적용 후 피부 가려움증 개선 및 피부 건조도 개선 항목에 대하여 시험대상자의 100%가 보통 이상으로 평가하였다.

그러나, 비교처방예 1 내지 2에 대해서는 표 6 및 7과 같이 시험대상자의 대부분이 보통 이하로 평가하였다. 한편, 비교처방예 3의 경우 표 8을 참조하면, 처방예 1과 비슷한 정도로 보통 이상의 결과로 평가하였으나, 피라칸타 추출물을 과량으로 첨가한 것에 비해 그 효과의 차이가 크지 않은 것으로 확인되었다.

처방예 1		시험대상자 수
수딩젤, 로션, 크림 전완부 도포		5*	4*	3*	2*	1*
	피부가려움증 개선	19	8	3	0	0
	피부 건조도 개선	18	9	3	0	0

비교처방예 1		시험대상자 수
수딩젤, 로션, 크림 (전완부 도포)		5*	4*	3*	2*	1*
	피부가려움증 개선	0	0	12	12	6
	피부 건조도 개선	0	0	13	11	6

비교처방예 2		시험대상자 수
수딩젤, 로션, 크림 전완부 도포		5*	4*	3*	2*	1*
	피부가려움증 개선	0	0	12	13	5
	피부 건조도 개선	0	0	14	11	4

비교처방예 3		시험대상자 수
수딩젤, 로션, 크림 (전완부 도포)		5*	4*	3*	2*	1*
	피부가려움증 개선	14	11	5	0	0
	피부 건조도 개선	13	10	7	0	0

Claims (6)

1. 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물로서,
   피라칸타(Pyracantha fortuneana) 추출물을 함유하며,
   상기 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물은 총 중량에 대해 상기 피라칸타 추출물을 0.06 내지 0.14 중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물은,
   아토피 피부염 예방 또는 개선 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 삭제
4. 제1항에 있어서,
   상기 화장료 조성물의 제형은,
   용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 수중유(O/W)형으로 이루어진 기초화장료 제형, 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료 제형, 스킨, 로션, 아이크림, 수딩젤, 연고, 마스크팩용 제형, 바디워시용 제형, 필링젤, 수중유형 메이크업베이스, 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형, 선크림, 비비크림 및 두피용 제형 중에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
5. 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물의 제조방법으로서,
   (a) 피라칸타를 세척하고, 세절한 후 음건하는 단계;
   (b) 에탄올 수용액으로 환류추출하고 냉침한 후 환류추출물을 여과하는 단계;
   (c) 여과된 추출물을 20 내지 50 ℃의 온도에서 감압농축한 후 동결건조하는 단계; 및
   (d) 동결건조물을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 헥산, 메틸프로판디올 및 이들의 혼합물에서 선택된 용매에 혼합하여 피라칸타 추출물을 수득하는 단계; 를 포함하되,
   상기 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물은 총 중량에 대해 상기 피라칸타 추출물을 0.06 내지 0.14 중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
6. 제5항에 있어서,
   상기 (d) 단계의 용매는 정제수인 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물의 제조방법.

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