KR101853076B1 - 커큐민을 포함하는 살바이러스 또는 살균용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 조성물, 및 상기 조성물을 사용하여 소독하는 방법에 관한 것이다. 또한, 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물, 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물, 살바이러스 또는 살균용 사료 첨가제, 및 이를 포함하는 사료에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 구제역 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스 등에 대하여 우수한 살바이러스 효과를 가지며, 살모넬라균 또는 브루셀라 균 등에 대해 우수한 살균 효과를 가진다.

Description

커큐민을 포함하는 살바이러스 또는 살균용 조성물{Antiviral or antimicrobial composition comprising curcumin}
본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 조성물, 및 상기 조성물을 사용하여 소독하는 방법에 관한 것이다. 또한, 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물, 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물, 살바이러스 또는 살균용 사료 첨가제, 및 이를 포함하는 사료에 관한 것이다.
구제역(FMD)은 경제적으로 가장 중요한 가축 질환으로서, 전염성 높은 우제류 가축의 급성전염병이다. 이는 소, 돼지, 양, 및 염소와 같은 아틸오닥틸라(Artiodactyla) 목의 분지제 동물(cloven-footed animal)이 감염되기 쉽다. 원인이 되는 구제역 바이러스(FMDV)는 4개의 캡시드 단백질 (VP1-VP4) 및 비구조적인 폴리펩티드를 코딩하는 포지티브 센스 RNA 게놈을 갖는 피코나비리데(Picornaviridae)과의 아프토바이러스이다.
구제역 바이러스는 전염성이 매우 강하여 무리에서 한마리가 감염되면 나머지 가축 모두에게 급속하게 감염된다. 일단 감염되면 고열(40∼41℃)이 있고, 거품 섞인 침을 많이 흘린다. 사료를 먹지 않고 잘 일어서지 못하며 통증을 수반하는 급성구내염과 제관(蹄冠)·지간(趾間)에 수포(물집)가 생긴다. 증세가 심해지면 수포가 터져 궤양으로 진전되며 앓다가 죽는다.
구제역 바이러스에 감염되면 노출된 동물을 격리하여 제거하고, 화학적으로 불활성화된 바이러스 조성물로 백신접종하여 방제된다. 그러나 FMDV의 현저한 항원 다양성 때문에 이들 백신의 제조가 매우 어렵다. A, O, C, 아시아, 사우쓰 아프리카 유형의 SAT-1, 2, 및 3의 7개의 구별되는 혈청형이 설명되었으며, 이들 각각은 여러 하위유형으로 재분류될 수 있다. 혈청형 A 바이러스가 가장 변이적이며, 30개 이상의 하위유형을 갖는다. 혈청형 사이에는 교차보호가 없으므로, 한 혈청형의 바이러스의 감염으로부터 회복되거나, 백신 접종된 동물은 여전히 나머지 6개의 혈청형의 바이러스로 감염되기 쉽다. 더욱이, 혈청형 내에서의 항원 변이 정도는 한 하위유형에 대한 백신 효과가 동일한 혈청형 내의 또 다른 하위유형에 대하여 보호적일 수 없을 정도이다.
따라서, 구제역 바이러스 감염 예방을 위하여 최우선책으로 시설의 개선, 효율적인 사양관리에 이어 축사 내외 환경의 청정화를 통한 세균 증식을 억제하고 축사 내외에 존재하는 바이러스, 세균 등 각종 미생물을 효과적으로 처리하는 것이 필요하다. 이때 효과적인 처리라고 하는 것은 유효한 약재로 철저히 소독하는 것이 포함됨을 의미한다.
즉, 현재 개발되어 있는 각종 소독제의 병원성 미생물/바이러스에 대한 소독효과를 확인하고 적절히 적용하는 것이 필수적이다. 특히 국내 발생이 전혀 없었던 구제역의 경우는 그 동안 국내에서 소독제에 대한 시험 연구 사례가 없어 더욱 그 중요성이 크다고 하겠으며, 직접 구제역 바이러스에 대한 소독효과를 시험하여 방역의 마지막 보루라고 할 수 있는 소독제의 신뢰도를 높이는 것이 반드시 필요하다.
소독제를 개발하고 있는 선진국에서는 구제역 발생이 없을 뿐만 아니라 비 발생국에서의 구제역 바이러스를 이용한 실험은 엄격히 규제되고 있기 때문에 세계적으로 구제역 바이러스에 대한 정확한 소독효과를 실험하여 명시한 경우가 흔치 않다. 따라서 구제역 바이러스을 제거할 수 있는 소독제의 개발이 필요하며, 이뿐만 아니라 축사 내외에 존재하는 바이러스 및 세균 등의 증식을 효과적으로 억제할 수 있는 소독제의 개발이 시급하다.
이에 본 발명자들은 저독성이고 저공해물질로서 커큐민을 사용하여 살균 살충 소독에 적용하는 경우, 주변 환경에 악영향을 미치지 않으면서 우수한 구제역 바이러스에 대한 살균, 살바이러스 및 이의 소독효과를 제공할 뿐만 아니라, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지콜레라 바이러스, 뉴캐슬 바이러스, 살모넬라균(Salmonella typhimurium) 및 브루셀라균(Brucella ovis)에 효과적으로 살균/소독하는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 동물의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 소독하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 바이러스 또는 상기 균에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물 및 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염을 예방 또는 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 바이러스 또는 상기 균에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 바이러스에 대한 살바이러용 또는 상기 균에 대한 살균용 사료 첨가제 및 상기 사료 첨가제를 함유하는 사료를 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위해, 하나의 양태로서 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 조성물을 제공한다.
Figure 112011088195322-pat00001
상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n≤5, 1≤m≤5이다.
상기 화학식에서 2개 이상의 R1 이 수소 이외의 작용기일 때, 각각 독립적으로 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기일 수 있다. 또한, 2개 이상의 R2가 수소 이외의 작용기일 때, 각각 독립적으로 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기일 수 있다.
본 발명의 조성물에서 유효성분으로 포함되는 상기 화합물은 하기 화학식 2의 커큐민이 바람직하다.
Figure 112011088195322-pat00002
본 발명에서는 커큐민을 포함하는 조성물을 제조하고, 이를 구제역 바이러스에 처리한 결과, 구제역 바이러스에 대한 살바이러스 및 소독 효과가 나타남을 확인하였다. 뿐만 아니라, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스 및 뉴캐슬 바이러스에 대한 살바이러스 효과와 살모넬라균 및 브루셀라균에 대한 살균 효과도 확인하였다.
상기 조성물은 소독제, 살균제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제의 형태로 제조될 수 있으며, 특히 상기 바이러스 및/또는 세균의 증식을 억제하고 예방할 수 있는 소독제 또는 살균제의 형태로 제조되는 것이 바람직하다.
또한, 상기 조성물에는 4급 암모늄, 인산, 및 구연산이 추가로 포함될 수 있으며, 상기 4급 암모늄은 염화벤젤코니윰일 수 있다. 또한, 총 조성물 100 중량부에 대하여 커큐민을 0,01 내지 0.1 중량부, 4급 암모늄을 18 내지 22 중량부, 구연산을 9 내지 11 중량부, 인산을 5 내지 6 중량부로 포함할 수 있다.
다른 양태로서, 본 발명은 상기 살바이러스용 또는 살균용 조성물을 동물의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 소독하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물 및 상기 조성물을 개체에 투여하여 상기 바이러스 또는 균에 의한 감염을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.
상기 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 사료 첨가제 및 상기 사료 첨가제를 함유하는 사료를 제공한다.
이하, 본 발명을 자세히 설명한다.
본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 상기 살바이러스용 또는 살균용 조성물을 동물의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 소독하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 화합물은 커큐민(curcumin), 데메톡시커큐민(demethoxycurcumin), 또는 비스데메톡시커큐민(bisdemethoxycurcumin)일 수 있으며, 이의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로도 사용할 수 있다. 바람직하게는, 상기 화합물은 커큐민이다.
상기 약학적으로 허용가능한 염으로는 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 상기 화학식 1을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염의 형태로 만들어 사용할 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속 염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
상기 조성물의 유효성분으로서 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 식물 추출물은 그 종류가 제한되지 않으며, 바람직하게는 커큐마속(Curcuma sp.)에 속하는 식물 추출물이고, 보다 바람직하게는 울금 추출물이다.
일반적으로 울금이란 가을울금 (Curcuma longa Linne)의 덩이뿌리를 그대로 또는 주피를 제거하고 쪄서 말린 뿌리를 의미 (대한약전 제9개정)하고, "덩이뿌리"란 덩이 모양으로 생긴 뿌리로서, 괴근(塊根)이라고도 한다.
한편, 가을울금(Curcuma longa Linne)의 뿌리줄기 부분을 일반적으로 강황 (Curcuma longa Rhizoma)이라 하며 (대한약전 제9개정), "뿌리줄기"란 식물의 줄기가 뿌리처럼 땅속으로 뻗어서 자라나는 땅속줄기로서, 근경(根莖)이라고도 한다.
본 발명에서 울금(Turmeric)이란 커큐마속(Curcuma sp.)에 속하는 식물의 덩이뿌리 부분을 의미하는 것으로 , 상기 커큐마속(Curcuma sp .)에 속하는 식물에는 온울금(Curcuma wenyujin, Y. H. Chen et C. Ling), 가을울금(황울금)(Curcuma longa Linne), 봄울금(Curcuma longa Salisb.), 보라색울금(Curcuma zedoaria), 광서아출(계울금)(Curcuma kwansiensis, S. G. Lee et C. F. Liang), 아출(녹사울금) (Curcuma aeruginosa), 봉아출 [Curcuma phaeocaulis Val. (생강과 Zingiberaceae)] 또는 커큐마 도메스티카 (Curcuma domestica) 등이 있으며, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에서 울금은 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있다.
상기 울금 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 여과법 및 환류추출법 등 당업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있다. 바람직하게는 세척 및 건조로 이물질이 제거된 울금의 뿌리를 분쇄하여 얻은 울금 건조물을 물, C1~C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 보다 바람직하게는 C1~C4의 알코올로 추출한 추출물일 수 있고, 가장 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올로 추출한 추출물일 수 있다. 이때, 추출용매는 울금의 건조중량의 2 ~ 20 배로 하는 것이 바람직하다. 일례로 울금 건조물을 세절한 후 추출용기에 넣고 C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올을 넣고 일정기간 상온에서 방치한 다음, 여과하여 알코올 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 추출은 상온에서 1주 동안 방치하는 것이 바람직하며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 거칠 수 있다.
한편, 본 발명에서 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 식물 추출물의 분획물은 상기 설명한 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 식물 추출물로부터 분획하여 얻을 수 있다. 바람직하게는, 커큐마속(Curcuma sp.)에 속하는 식물 추출물의 분획물이고, 보다 바람직하게는 울금 추출물의 분획물이다. 보다 구체적으로, 상기 울금 분획물은 울금 추출물을 물에 현탁시킨 후 헥산 및 에틸아세테이트로 각각 분획함으로써 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 물 분획물로서 각각 얻을 수 있다.
본 발명에서 용어, "구제역 바이러스"는 4개의 캡시드 단백질 (VP1-VP4) 및 비구조적인 폴리펩티드를 코딩하는 포지티브 센스 RNA 게놈을 갖는 피코나비리데(Picornaviridae)과의 아프토바이러스일 수 있다. 구제역 바이러스에 감염되면, 고열(40∼41℃) 증상, 거품 섞인 침을 많이 흘리는 증상, 통증을 수반하는 급성구내염과 수포가 생기는 증상이 발생할 수 있다.
본 발명에서 용어, "조류 인플루엔자 바이러스"는 분류학적으로 인플루엔자 바이러스 A형 특히, H5N1 바이러스일 수 있으며, 상기 바이러스에 감염되면, 고열, 기침, 인후통, 호흡곤란 등의 증상이 나타날 수 있다.
본 발명에서 용어, "뉴캐슬병(Newcastle disease) 바이러스"는 파라믹소군에 속하는 조류 병원 바이러스로서, 지름 150∼200nm으로 피막이 있으며 입자에 RNA중합효소를 갖는 바이러스일 수 있다. 상기 뉴캐슬병은 주로 닭에게 발생하는 전염병으로서, 감염되면, 원기쇠약, 호흡기 증세, 신경증세, 산란율 저하 등의 증상이 나타날 수 있다.
본 발명에서 용어, "돼지 콜레라 바이러스(hog cholera virus)"는 돼지의 급성패혈증성 전염병의 병원 바이러스를 포함한다.
본 발명에서 용어, "살모넬라(Salmonella)균"은 막대 모양의 세균의 한 속으로, 약 0.7 ~ 1.5μm, 길이 약 2 ~ 5μm 정도의 크기로 주로 사람이나 동물의 소화관에 서식하는 균을 포함한다.
본 발명에서 용어, "브루셀라(Brucella)균"은 그램-음성 박테리아에 속하는 것으로서 소간균(0.6~1.5 X 0.5~0.7㎛)으로 아포, 편모가 없는 균을 포함한다.
본 발명의 상기 살바이러스용 또는 살균용 조성물은 그 제형의 종류에 제한이 없으나, 바람직하게는 소독제, 살균제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제의 형태로 제조된 것이다. 보다 바람직하게는, 상기 살바이러스용 또는 살균용 조성물은 소독제 또는 살균제의 형태로 제조되는 것이다.
또한, 상기 조성물에는 4급 암모늄, 인산, 및 구연산을 추가로 포함할 수 있다. 상기 4급 암모늄에는 염화알킬트리메틸암모늄(alkyl trimethyl ammonium chloride), 염화알킬디메틸벤질암모늄(Alkyldimethylbenzyl ammonium chloride), 염화알킬디메틸메타아릴암모늄(Alkyldimethylmetharyl ammonium chloride), 염화벤잘코니움((benzalconium chloride)등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 바람직하게는 상기 4급 암모늄은 염화벤잘코니움이다.
상기 염화벤잘코니움은 포유류에게는 낮은 독성을 갖으며, 온도 및 pH에 영향을 받지 않아 가축용 소독제로 광범위하게 사용되고 있는 성분이다.
상기 구연산은 유기산으로서, 식품이나 음료 등의 식품 첨가제로 사용되고 있으며, 독성과 부식성이 매우 적어 안전성이 높은 물질이다.
상기 인산은 식품 첨가물로 사용되며, 식품 제조, 기구 등의 소독제로 사용될 수 있다.
본 발명의 살바이러스 또는 살균용 조성물에 포함되는 화학식 1로 표시되는 화합물, 4급 암모늄, 인산, 및 구연산은 살바이러스 또는 살균 효과가 나타나는 범위라면, 각 성분의 조성비율은 제한되지 않는다. 본 발명의 일 실시예로서, 상기 조성물은 총 조성물 100 중량부에 대해서 커큐민을 0.01 내지 0.1 중량부, 4급 암모늄을 18 내지 22 중량부, 구연산을 9 내지 11 중량부, 인산을 5 내지 6 중량부로 포함할 수 있다.
또한, 상기 조성물에는 살바이러스 또는 살균 효과를 갖는 다른 성분을 추가로 포함할 수 있으며, 살바이러스 또는 살균 효과를 방해하지 않는 상에서 통상 첨가되는 성분이 추가로 포함될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 커큐민, 염화벤잘코니움, 구연산, 및 인산을 포함하는 소독용 조성물을 제조하고, 상기 조성물을 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬 바이러스 각각과 반응시킨 결과, 상기 바이러스에 대한 살바이러스 효과 즉, 소독 효과를 확인할 수 있었다. 또한, 상기 조성물을 살모넬라균, 브루셀라균 각각과 반응시킨 결과, 상기 세균에 대한 살균 효과, 즉, 소독효과를 확인할 수 있었다. 특히, 상기 살바이러스 효과 및 살균 효과는 커큐민을 포함하지 않고 염화벤잘코니움, 구연산, 및 인산만을 포함하는 소독용 조성물에서는 나타나지 않은 효과로서, 상기 실험 결과로부터 커큐민의 상기 바이러스에 대한 살바이러스 및 상기 세균에 대한 살균 효과를 확인할 수 있었다. 상기 조성물은 약 1/1000 희석액에 대해서도 각각의 바이러스 및 세균에 대한 소독 효과가 나타났는 바, 본 발명의 조성물은 적은양을 사용하여도 우수한 소독효과가 나타나는 특징이 있다.
본 발명에서는 상기 살바이러스용 또는 살균용 조성물을 동물의 서식지에 처리하여, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 소독할 수 있다.
상기 동물의 종류에는 제한이 없으며, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및/또는 브루셀라균의 증식을 억제하거나, 상기 바이러스 또는 균의 발생을 예방하고자 하는 장소에 처리함으로써, 상기 바이러스 및/또는 세균을 소독할 수 있다.
다른 양태로서, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 용어, "예방"은 조성물의 투여에 의해 상기 바이러스 또는 상기 세균의 감염을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 용어, "치료"란 조성물의 투여에 의해 상기 바이러스 또는 상기 세균의 감염에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
상기 바이러스 또는 세균에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
상기 본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 감염된 바이러스 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 용어, "개체"란 상기 바이러스 또는 상기 세균에 이미 감염되었거나 감염될 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하고, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 개체에게 투여함으로써, 상기 바이러스 또는 상기 균에 의한 감염을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 발명의 혼합물은 목적하는 바에 따라 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한 상기 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태로서, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 조류 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 과육의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 ~ 10 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 이들 성분들은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 살모넬라균, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 균에 대한 살균용 사료 첨가제에 관한 것이다.
상기 사료첨가제는 살바이러스 및 항바이러스, 또는 살균 효능을 가지므로 가금류, 가축 등에게 꾸준히 섭취하게 함으로써 바이러스성 또는 세균성 질환을 예방할 수 있고, 이미 발생한 바이러스성 또는 세균성 질환을 개선시킬 수 있다. 사료는 영양가, 주성분, 유통, 수분 함량 배합상태 및 가공형태 등에 따라 여러 가지로 분류할 수 있으며, 상기 사료는 조사료, 농후사료, 보충사료, 단백질사료, 녹말사료, 지방질사료 또는 섬유질사료가 사용가능하나, 이에 한정하지 않는다.
또한 상기 사료첨가제는 추가적으로 가금류 및 가축 등에 허용되는 담체를 함유할 수 있다. 본 발명에 있어서는 상기 사료첨가제를 그대로 또는 공지의 담체, 안정제 등을 가할 수 있으며, 필요에 따라 비타민, 아미노산류, 미네랄 등의 각종 양분, 항산화제, 항생물질, 항균제 및 기타의 첨가제 등을 가할 수도 있으며, 그 형상으로서는 분체, 과립, 펠릿, 현탁액 등의 적당한 상태일 수 있다. 본 발명의 사료첨가제를 공급하는 경우는 가금류 및 가축 등에 대하여 단독으로 또는 사료에 혼합하여 공급할 수 있다.
또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 사료 첨가제를 함유하는 사료에 관한 것이다.
상기 설명한 사료첨가제를 다양한 동물의 사료나 음수의 원료 및 첨가제로 사용할 수 있으며, 상기 사료첨가제를 포함하는 사료 조성물로 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 구제역 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스 등에 대하여 우수한 살바이러스 효과를 가지며, 살모넬라균 또는 브루셀라 균 등에 대해 우수한 살균 효과를 가지므로, 상기 바이러스 또는 세균에 의한 감염의 예방 또는 치료에 유용히 사용할 수 있으며, 상기 바이러스 또는 세균의 발생 예방 및 증식 억제를 위한 소독용 조성물로 유용히 사용할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 제한되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 소독제 조성물 제조
본 실시예에서는 대한약전 제제총칙 및 별규의 조성물로 소독제를 제조하였다. 본 발명의 소독제 조성물의 조성비는 하기와 같이 나타낼 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
원료약품 분량: 본제 1 L 중,
염화벤잘코니움 --------------- 200 g
구연산 ---------------------- 100 g
인 산 ---------------------- 60 g
커큐민 ---------------------- 0.5 g
정제수 ---------------------- 적 량
본 발명의 소독제 조성물 중 커큐민은 별규로서, 커큐민을 포함하는 울금 추출물, 분획물 또는 유도체로도 나타낼 수 있으며, 구체적인 울금 추출물, 분획물 및 이로부터 커큐민을 분리하는 방법은 하기 실시예와 같다.
< 실시예 2> 울금 추출물의 제조 및 이로부터 울금 분획물 및 커큐미노이드계 화합물의 분리 및 정제
울금 추출물의 제조
본 실시예에서 사용한 울금은 일반적으로 한약재상이나 시장에서 구입할 수 있는 것으로 가을식물(Curcuma longa Linne)의 덩이뿌리(Radix) 부위를 그대로 쪄서 말린 것을 구입한 후 본 발명의 추출물을 효율적으로 얻기 위하여 파우더 형태로 분쇄하여 사용하였다. 울금 1.6 kg에 100% 에탄올(EtOH) 7.5 ℓ를 가하여 실온에서 5일 방치하고 여과지로 여과하고 농축하여 울금 에탄올 추출물(170 g)을 얻었다.
울금 추출물로부터 울금 분획물 및 커큐미노이드계 화합물의 분리 및 정제
상기 방법으로 수득한 울금의 에탄올 추출물 170 g에 물 1ℓ를 넣어 현탁시켰다. 이를 분별 깔대기에 넣고, n-헥산 및 에틸아세테이트를 순서대로 이용하여 분별 추출하여 n-헥산 가용추출물 (23 g), 에틸아세테이트 가용추출물 (85 g) 및 물 가용추출물 (34 g)을 수득하였다.
상기에서 수득한 에틸아세테이트 가용추출물 85 g을 클로로포름, 메탄올 및 이들의 혼합용매 (80:1 ~ 1:1)를 이동상으로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피[실리카겔 500 g, 70~230 메쉬(mesh)]를 수행하여 15개의 분획물(Fr.-1~15)로 분리하였다. 이중 여섯 번째 분획물(Fr.-6, 16 g)은 n-헥산 : 에틸아세테이트(20:1 ~ 1:1 (v/v))의 혼합용매를 이동상으로 하여 다시 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (30 g, 230 ~ 400 메쉬)를 수행하여 5개의 분획물(Fr.-6-1~5)을 얻었다.
그 중 Fr.-6-2~3 분획물(11 g)에 대해 클로로포름, 메탄올 및 이들의 혼합용매 (80:1 ~ 4:1)를 이동상으로 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 획득한 분획물을 대상으로 제조용 TLC(preparative TLC)법으로 전개[(n-헥산:에틸아세테이트=4:1 (v/v)]하여 순수한 화합물인 커큐민(curcumin) (8 g)을 수득하였다. 또한, 여덟 번째 분획물 (Fr.-8, 14 g)은 n-헥산 : 에틸아세테이트(20:1 ~ 1:1 (v/v)) 및 클로로포름 : 메탄올 (80:1 ~ 20:1 (v/v))의 혼합용매를 이동상으로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (30 g, 230 ~ 400 메쉬)를 반복적으로 수행하여 데메톡시커큐민(demethoxycurcumin)(0.4g)와 비스데메톡시커큐민(bisdemethoxycurcumin)(0.2 g)을 수득하였다.
< 실험예 1> 구역제 바이러스에 대한 살바이러스 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 구제역 바이러스에 대한 살바이러스 소독 효과를 검증하기 위하여, 이를 영국 Pirbright, Institute for Animal Health 기관에 의뢰하였고, 본 발명의 소독제는 Lot/Batch:P11H01를 부여받았다. 구제역 바이러스(FMDV)는 1967년 발생한 야외균주 type 01 BFS 1860/67(British field strain)를 BHK21 세포를 이용하여 시험하였다. 이때, 본 발명의 소독제는 하기 표 1에 나타난 바와 같이, 희석 배수 1/100, 1/200, 1/300, 1/500 및 1/1000배로 희석하여 사용하였다.
희석배수 pH
1:100 2.67
1:200 3.07
1:300 3.39
1:500 3.95
1:1000 5.46
상기와 같이 희석한 본 발명의 조성물을 사용하여 구제역 바이러스 소독 효과를 측정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
로트 넘버(Lot Number) 희석배수(액) FMDV 소독 효과
Batch: P11H01 1:100 Pass
Batch: P11H01 1:200 Pass
Batch: P11H01 1:300 Pass
Batch: P11H01 1:500 Pass
Batch: P11H01 1:1000 Pass
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 구제역 바이러스에 대하여 소독 효과가 1/1000 희석액에서도 소독효과가 있음을 확인하였다.
한편, 커큐민을 포함하고 있지 않은, 벤잘코니움, 구연산, 및 인산만을 유효성분으로 하는 산성 소독제인 바로크린(한국썸벧)은 현재 구제역 바이러스에 대한 소독 효과를 나타내지 않았다.
즉, 커큐민, 벤잘코니움, 구연산, 및 인산을 유효성분으로 하는 본 발명의 소독제는 커큐민을 포함하지 않은 상기 바로크린 소독제와는 달리 구제역 바이러스에 대하여 살바이러스 소독 효과를 나타내었다.
< 실험예 2> 조류 인플루엔자 바이러스에 대한 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 조류 인플루엔자 바이러스에 대한 소독효력을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 소독제 효력 시험을 완성하였으며, 국립수의과학 검역원에서 분양받은 조류인플루엔자 바이러스 H9N2 (MS96 strain)을 시험에 공시하였다.
상기 공시 바이러스를 10일령의 SPF 발육란의 요막강내에 접종하여, 계대 배양하였다. 증식된 바이러스의 활력이 최대인 시점 (바이러스 역가 107.0EID50/mL 이상)에 채독하여 시험에 공시하였다.
본 발명의 시험방법은 수의과학검역원 고시 제2008-14호의 소독제 효력시험 지침의 별표 2의 바이러스의 소독제효력시험 규정에 준하여 실시하였다.
소독제의 희석
본 발명의 소독제의 희석은 처리구에 맞게 증류수, 경수, 유기물 희석액(1% 소태아 혈청 함유)으로 희석하였으며, 이때 희석배수는, 처리구 1; 1/600, 1/800, 1/1000, 1/1500, 1/2000 및 1/2500, 처리구 2; 1/550, 1/700, 1/850, 1/1000, 1/1500 및 1/2000, 처리구 3; 1/250, 1/300, 1/400, 1/500, 1/600 및 1/800배로 각각 희석하였다.
소독제 반응
바이러스가 존재하는 요막강액 1.0 mL를 19 mL의 처리구에 맞게 증류수, 경수, 유기물 희석액에 혼합한 후, 1분 간격으로 2.5 mLTlr을 취하여 동량의 소독제 희석액이 들어 있는 시험관에 혼합하였다. 그런 다음 4℃에서 정확히 30분간 반응시키며, 도중에 10분마다 혼합함으로써, 바이러스와 소독제를 반응시켰다.
바이러스 증식여부 판정
중화액으로 PBS를 사용하여 원액, 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5 및 10-6 희석하여, 0.2 mL을 희석 배수당 5개의 10일란 발육란의 요막강내에 접종하고, 37℃의 부화기내에서 5일간 배양하였다. 매일 검란을 실시하였으며, 접종 후 24시간 이내에 죽은 발육란은 사고사로 간주하고 시험성적에서 제외하였다. 바이러스 존재 유무 및 바이러스 역가는 혈구응집반응을 실시하여 최종 판정하였다.
본 발명의 바이러스 소독 효력 시험은 3차 시험결과를 종합하여 판정하였으며, 바이러스 함유량 계산은 하기의 Karber method를 이용하였다.
Figure 112011088195322-pat00003
(L1, 시험된 낮은 희석물의 로그(log of lowest dilution tested); L, 희석물간의 로그 간격(log interval between dilutions); S. 각각의 희석물에 대한 % 사망률의 총합)
본 발명의 소독제의 희석배수에 따른 조류 인플루엔자 바이러스 소독 효력 시험의 결과는 하기 표 3과 같았다.
처리구 1차 2차 3차 중위수
처리구1 (유기물 무) 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
처리구2 (유기물 저) 1/850 1/850 1/1000 1/850
처리구3 (유기물 고) 1/400 1/400 1/400 1/400
처리구4 (병원체대조) + + +
처리구5 (증류수대조) + + +
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유기물이 없는 조건에서 1/1000, 낮은 유기물 조건에서 1/850, 높은 유기물 조건에서 1/400 희석액에서 조류 인플루엔자 바이러스에 대한 소독효력을 나타냈다.
< 실험예 3> 뉴캐슬병 바이러스에 대한 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 뉴캐슬병 바이러스(Newcastle disease virus)에 대한 소독효력을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 소독제 효력 시험을 완성하였으며, 서울대학교에서 분양받은 뉴캐슬병 바이러스 SNU 4152 strain (Velogenic strain)을 시험에 공시하였다.
본 발명의 시험방법은 수의과학검역원 고시 제2008-14호의 소독제 효력시험 지침의 별표 2의 바이러스의 소독제 효력시험 규정에 준하여 실시하였다. 실험예 2와 동일한 희석배수로 소독제를 희석하였고, 상기 실험예와 동일한 방법으로 바이러스를 배양하여 소독제와 반응시켰다. 뉴캐슬병 바이러스에 대한 소독 효력 및 바이러스 증식여부는 중화액을 CEF 세포 배양용 배지에 사용하여, 현미경으로 CPE(세포병변 효과) 형성여부를 관찰함으로써 바이러스의 존재 유무를 최종 판정하였다.
본 발명의 바이러스 소독 효력 시험은 3차 시험결과를 종합하여 판정하였으며, 바이러스 함유량 계산은 Karber method를 이용하였다.
본 발명의 소독제의 희석배수에 따른 뉴캐슬병 바이러스 소독 효력 시험의 결과는 하기 표 4와 같았다.
처리구 1차 2차 3차 중위수
처리구1 (유기물 무) 1/1000 1/1200 1/1200 1/1200
처리구2 (유기물 저) 1/800 1/800 1/800 1/800
처리구3 (유기물 고) 1/300 1/300 1/400 1/300
처리구4 (병원체대조) + + + +
처리구5 (증류수대조) + + + +
상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유기물이 없는 조건에서 1/1200, 낮은 유기물 조건에서 1/800, 높은 유기물 조건에서 1/300 희석액에서 뉴캐슬병 바이러스에 대한 소독효력을 나타냈다.
<실험예 4> 돼지콜레라 바이러스에 대한 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 돼지콜레라 바이러스에 대한 소독효력을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 소독제 효력 시험을 완성하였고, 국립수의과학 검역원에서 분양받은 돼지콜레라 바이러스 (LOM strain)를 시험에 공시하였다.
본 발명의 시험방법은 수의과학검역원 고시 제2008-14호의 소독제 효력시험 지침의 별표 2의 바이러스의 소독제 효력시험 규정에 준하여 실시하였다.
본 발명의 시험방법은 실험예 2 및 3과 동일한 희석배수로 소독제를 희석하였고, 상기 실험예와 동일한 방법으로 바이러스를 배양하여 소독제와 반응시켰다. 돼지콜레라 바이러스에 대한 소독 효력 및 바이러스 증식여부는 중화액을 PK-15 세포 배양용 배지에 사용하여 일정배수로 희석하고, PK-15 단층세포가 형성된 96 well에 접종하여 5일 동안 37℃에서 배양하였으며, 바이러스의 존재유무는 특이 PLA(peroxidase-linked assay)를 이용하여 최종 판정하였다.
본 발명의 바이러스 소독 효력 시험은 3차 시험결과를 종합하여 판정하였으며, 바이러스 함유량 계산은 Karber method를 이용하였다.
본 발명의 소독제의 희석배수에 따른 돼지콜레라 바이러스 소독 효력 시험의 결과는 하기 표 5와 같았다.
처리구 1차 2차 3차 중위수
처리구1 (유기물 무) 1/1000 1/1200 1/1200 1/1200
처리구2 (유기물 저) 1/700 1/600 1/700 1/700
처리구3 (유기물 고) 1/500 1/450 1/450 1/450
처리구4 (병원체대조) + + +
처리구5 (증류수대조) + + +
상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유기물이 없는 조건에서 1/1200, 낮은 유기물 조건에서 1/700, 높은 유기물 조건에서 1/450 희석액에서 돼지콜레라 바이러스에 대한 소독효력을 나타냈다.
<실험예 5> 살모넬라 티피뮤리움( Salmonella typhimurium )에 대한 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 살모넬라균에 대한 소독효력을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 소독제 효력 시험을 완성하였고, 살모넬라 티피뮤리움(Salmonella typhimurium) G-B-14-21-62을 수의과학 검역원으로부터 분양받아 시험에 공시하였다.
본 발명의 시험방법은 수의과학검역원 고시 제2008-14호의 소독제 효력시험 지침의 별표2의 바이러스의 소독제 효력시험 규정에 준하여 실시하였다.
본 발명의 소독제의 희석배수에 따른 살모넬라균 소독 효력 시험의 결과는 하기 표 6과 같았다.
처리구 1차 2차 3차 중위수
처리구1 (유기물 무) 1/400 1/400 1/440 1/400
처리구2 (유기물 저) 1/850 1/935 1/850 1/850
처리구3 (유기물 고) 1/450 1/450 1/495 1/450
처리구4 (병원체대조) + + + +
처리구5 (증류수대조) + + + +
상기 표 6에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유기물이 없는 조건에서 1/400, 낮은 유기물 조건에서 1/850, 높은 유기물 조건에서 1/450 희석액에서 살모넬라균에 대한 소독효력을 나타냈다.
< 실험예 6> 브루셀라 오비스( Brucella ovis )에 대한 소독 효력 측정
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 Brucella ovis에 대한 소독효력을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 소독제 효력 시험을 완성하였고, 브루셀라 오비스(Brucella ovis) 63/290을 수의과학 검역원으로부터 분양받아 시험에 공시하였다.
본 발명의 시험방법은 수의과학검역원 고시 제2008-14호의 소독제 효력시험 지침의 별표2의 바이러스의 소독제 효력시험 규정에 준하여 실시하였다.
본 발명의 소독제의 희석배수에 따른 브루셀라균 소독 효력 시험의 결과는 하기 표 7과 같았다.
처리구 1차 2차 3차 중위수
처리구1 (유기물 무) 1/900 1/990 1/900 1/900
처리구2 (유기물 저) 1/800 1/800 1/880 1/800
처리구3 (유기물 고) 1/300 1/330 1/300 1/300
처리구4 (병원체대조) + + + +
처리구5 (증류수대조) + + + +
상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유기물이 없는 조건에서 1/900, 낮은 유기물 조건에서 1/800, 높은 유기물 조건에서 1/300 희석액에서 브루셀라균에 대한 소독효력을 나타냈다.
<실험예 7> 본 발명의 소독제에 대한 급성경구독성시험
본 발명의 커큐민 함유 소독제 조성물의 급성 경구 독성시험을 국립수의과학검역원고시 제2009-18호 ‘동물용 의약품등의 독성시험 지침’ 중 ‘동물용 의약품등의 독성시험방법(별표)’의 급성 경구 독성시험법에 준하여 실시하였다.
본 발명의 소독제의 급성 경구 독성시험을 평가하기 위해 국립 경상대학교 수의과대학 동물의학연구소에 의뢰하여 완성하였다. 본 발명의 소독제에 대한 시료번호는 GNU-VM-2011-03으로 부여받아 본 발명의 급성경구독성시험을 완성하였다.
시험계
동물종(계통) : 설치류 - 랫드(Sprague-Dawley계통)
비설치류 - 백색토끼(뉴질랜드 화이트계)
공급원 : (주) 샘타고 Bio Korea
시험계의 선택사유
국립수의과학검역원고시 제2009-18호 ‘동물용 의약품등의 독성 시험지침기준’법에 2종의 동물을 사용하도록 규정되어 있는 바, 설치류는 랫트를, 비설치류는 백색토끼를 사용하였다. 이는 랫드와 백색토끼가 동물용 의약품등의 독성시험에 널리 사용되고 있어 기초자료가 충분히 축적되어 있으므로 시험결과 해석 및 평가에 이용하는 것이 가능하기 때문이다.
투여약량 및 약제 조제
기초시험에서 최대 투여약량은 2000 mg/kg으로 설정하였다. 투여약량의 공시동물수는 랫드의 경우, 암·수 각각 10마리씩 60마리를, 백색토끼의 경우, 암·수 각각 6마리씩 12마리를 공시하였으며, 개체별 식별은 피모에 색소로 일련번호를 표시하였다.
본 발명의 소독제 시험물질의 투여
투여개시 6시간 전부터, 시험물질 투여 후, 4 시간 동안 절식시켰다. 랫드의 경우 경구투여 주사침을 이용하고, 토끼의 경우 stomach tube을 이용하여, 체중 측정치를 기준으로 소정의 시험물질 조제 액량을 산출, 위내에 1회 강제 경구 투여하였다.
LD50 산출은 시험종료 후, Probit법을 이용하여 LD50치를 산출하였다.
본 발명의 조성물을 함유하는 소독제는 공시 랫드 및 백색토끼 암·수 모두 기초시험 최대 투여약량 2000 mg/kg에서 모두 생존하였다. 따라서 LD50 값은 마우스 및 토끼 모두 2000 mg/kg 이상으로 추정되었다. 따라서 본 발명의 소독제의 공시 랫드 및 백색토끼 암·수에 대한 LD50는 모두 2000 mg/kg 이상으로 안전한 물질로 추정되었다.
본 발명의 조성물을 함유하는 소독제는 공시 랫드 및 백색토끼 암·수 모두에서 일반 중독증상이 나타나지 않았다.
또한, 본 발명의 조성물을 함유하는 소독제의 투여량에 따라 공시동물은 체중변화 없이 증가추세를 나타내었다. 아울러, 본 발명의 급성 독성시험 공시동물에 대하여 투약 14일 후에 부검하여 내장 장기의 육안적 관찰을 수행한 결과, 이상부검소견은 관찰되지 않았다.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 브루셀라균에 대한 살균용 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112017086276427-pat00004

    상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n ≤5, 1≤m ≤5이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화학식 2의 커큐민(curcumin)인 것인 조성물.
    [화학식 2]
    Figure 112017086276427-pat00005
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 소독제, 살균제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제의 형태로 제조된 것이 특징인 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 4급 암모늄, 인산, 및 구연산을 추가로 포함하는 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 4급 암모늄은 염화벤젤코니윰인 조성물.
  6. 제4항에 있어서, 총 조성물 100 중량부에 대해서 커큐민을 0.01 내지 0.1 중량부, 4급 암모늄을 18 내지 22 중량부, 구연산을 9 내지 11 중량부, 인산을 5 내지 6 중량부로 포함하는 것인 조성물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 조성물을 동물의 서식지에 처리하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 소독하는 방법.
  8. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 치료용 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112017086276427-pat00006

    상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n ≤5, 1≤m ≤5이다.
  9. 제8항에 있어서, 상기 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염의 예방 또는 개선용 식품 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112017086276427-pat00007

    상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n ≤5, 1≤m ≤5이다.
  11. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 및 뉴캐슬병 바이러스로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이러스에 대한 살바이러스용, 또는 브루셀라균에 대한 살균용 사료 첨가제
    [화학식 1]
    Figure 112017086276427-pat00008

    상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n ≤5, 1≤m ≤5이다.
  12. 제11항에 기재된 사료첨가제를 함유하는 사료.
  13. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이를 포함하는 식물 추출물, 또는 상기 추출물의 분획물을 인간을 제외한 포유류에 투여하는 단계를 포함하는, 구제역 바이러스, 돼지 콜레라 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 및 브루셀라균으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상에 의한 감염을 예방 또는 치료하는 방법:
    [화학식 1]
    Figure 112017086276427-pat00009

    상기 식에서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시기, 또는 C1~C10의 알콕시기이고, 1≤n ≤5, 1≤m ≤5이다.


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