KR101826148B1 - 젖산 발효를 통한 녹각 및 목이버섯 발효액 제조방법 및 상기 발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물 - Google Patents
젖산 발효를 통한 녹각 및 목이버섯 발효액 제조방법 및 상기 발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 젖산 발효를 통한 녹각 및 목이버섯 발효액 제조방법 및 상기 발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 녹각의 단계적인 열수 추출에 의해서 유용성분을 선택적으로 추출한 후 녹각 추출물과 목이버섯 분말 혼합물을 김치 젖산균을 이용하여 식이섬유, 고농도 GABA와 프로바이오틱스(probiotics)가 강화된 염증완화 조성물 제조방법에 대한 것이다. 본 발명에서는 상기와 같은 방법을 통하여 GABA 및 식이섬유가 강화된 녹각 및 목이버섯 발효물을 생산하였으며, 이들의 항산화 및 염증완화 효과를 가지는 기능성 식품 소재를 개발하였다.
Description
본 발명은 젖산 발효를 통한 녹각 및 목이버섯 발효액 제조방법 및 상기 발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 녹각의 단계적인 열수 추출에 의해서 유용성분을 선택적으로 추출한 후 녹각 추출물과 목이버섯 분말 혼합물을 김치 젖산균을 이용하여 식이섬유, 고농도 GABA와 프로바이오틱스(probiotics)가 강화된 염증완화 조성물 제조방법에 대한 것이다.
목이버섯 등의 식용버섯은 대표적인 기호식품으로 풍부한 식이섬유, 다양한 영양성분과 고유한 풍미를 지니고 있어 대표적인 건강식품소재이다. 목이버섯은 식이섬유 함량이 매우 높으며, 비타민 D가 풍부하여 여성 건강에 좋은 식용버섯이다. 특히, 목이버섯은 식약처의 건강기능식품 기능성 원료로서 “배변활동 원활”의 기능성이 인정되었다. 최근 인공재배로 생산되는 식용버섯의 효능평가 등을 통한 고부가가치 소재화에 대한 연구개발이 요구된다. 또한, 버섯을 건강 식품소재 및 고부가가치 소재로 활용하기 위한 방안으로, 발효에 의해 유용 물질의 생성으로 기능성물질이 강화된 소재를 개발하여 식품 및 건강식품의 소재로 활용이 필요하다.
젖산균은 GRAS(Generally Recognized As Safe: 미국 FDA 에서 지정한 일반적으로 안전한 물질) 균주로 대표적인 프로바이오틱스(probiotics: 장내 건강에 도움을 주는 살아있는 생균) 미생물로 알려져 있다. 젖산균은 전통발효식품에서 당으로부터 젖산을 생산하며, 동서양의 김치, 발효유 등 발효식품의 스타터로 이용되고 있다. 최근 젖산균이 정장작용, 아토피, 관절염 같은 면역질환을 치료하는데 효과가 있다는 연구보고가 되면서 젖산균을 이용한 발효제품에 대한 제품화가 활발하다. 특히, 젖산균이 생산하는 생리활성물질은 항균물질, 펩타이드 및 GABA(gamma-butyric acid) 등을 포함한다.
L-글루탐산(L-glutamic acid)은 신경세포 활성을 유도하는 물질로 알려져 있으며, 글루타메이드 디카르복실레이즈(glutamate decarboxylase; GAD, EC 4.1.1.15)에 의해 r-아미노뷰티르산(r-aminobutyric acid; GABA)으로 전환된다. GABA는 억제성 신경전달물질로서 뇌 혈류개선, 스트레스 해소, 기억력 증진, 혈압강하작용, 우울증 완화, 비만 등에 효과가 있는 것으로 알려져 다양한 제품개발이 이루어지고 있다. 자연에서 얻을 수 있는 식물체 GABA 함유량은 약리작용을 발휘하기에 미량으로 미생물을 이용한 GABA 함량을 증대시키고 이를 다양한 제품에 이용하고 있다.
본 발명의 목적은 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P)을 이용한 젖산 발효를 통해, 항산화 활성 및 감마-아미노뷰티르산(gammaaminobutyric acid; GABA) 등의 기능성 물질이 강화된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액을 생산하는 방법을 제공하는데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (1) 녹각을 열수 추출하여 녹각 추출액을 제조하는 단계; (2) 상기 제조된 녹각 추출액에 목이버섯, 모노소듐 글루타메이트(monosodium glutamate; MSG), 포도당(glucose) 및 효모 추출물(yeast extract)를 첨가하여 혼합하는 단계; (3) 상기 혼합물을 열처리하는 단계; 및 (4) 상기 열처리된 혼합물에 젖산균(Lactobacillus) 스타터를 접종하고 배양하여 젖산 발효시키는 단계를 포함하는 항산화 활성 및 감마-아미노뷰티르산(gammaaminobutyric acid; GABA) 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주로 발효시킨 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물을 제공한다.
본 발명은 젖산 발효를 통한 녹각 및 목이버섯 발효액 제조방법 및 상기 발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 녹각의 단계적인 열수 추출에 의해서 유용성분을 선택적으로 추출한 후 녹각 추출물과 목이버섯 분말 혼합물을 김치 젖산균을 이용하여 식이섬유, 고농도 GABA와 프로바이오틱스(probiotics)가 강화된 염증완화 조성물 제조방법에 대한 것이다. 본 발명에서는 상기와 같은 방법을 통하여 GABA 및 식이섬유가 강화된 녹각 및 목이버섯 발효물을 생산하였으며, 이들의 항산화 및 염증완화 효과를 가지는 기능성 식품 소재를 개발하였다.
도 1은 녹각 추출 및 젖산 발효 공정도를 나타낸다.
도 2는 녹각 추출물의 MSG 첨가 함량에 따른 산도와 pH 변화를 나타낸다.
도 3은 MSG 농도에 따른 젖산균의 발효기간 동안 생균수 변화를 나타낸다.
도 4는 녹각 추출물의 목이버섯 첨가 유무에 따른 젖산 발효물의 GABA 생성을 나타낸다.
도 5는 목이버섯 및 녹각 추출물의 MSG 농도에 따른 젖산 발효물의 GABA 생성을 나타낸다.
도 6은 목이버섯 첨가 전 녹각추출액의 세포 생존율을 나타낸다.
도 7은 목이버섯 첨가 후 녹각추출액의 세포 생존율을 나타낸다.
도 8은 목이버섯 첨가 전 녹각추출액의 NO 생성 비교 결과를 나타낸다.
도 9는 목이버섯 첨가 후 녹각추출액의 NO 생성 비교 결과를 나타낸다.
도 2는 녹각 추출물의 MSG 첨가 함량에 따른 산도와 pH 변화를 나타낸다.
도 3은 MSG 농도에 따른 젖산균의 발효기간 동안 생균수 변화를 나타낸다.
도 4는 녹각 추출물의 목이버섯 첨가 유무에 따른 젖산 발효물의 GABA 생성을 나타낸다.
도 5는 목이버섯 및 녹각 추출물의 MSG 농도에 따른 젖산 발효물의 GABA 생성을 나타낸다.
도 6은 목이버섯 첨가 전 녹각추출액의 세포 생존율을 나타낸다.
도 7은 목이버섯 첨가 후 녹각추출액의 세포 생존율을 나타낸다.
도 8은 목이버섯 첨가 전 녹각추출액의 NO 생성 비교 결과를 나타낸다.
도 9는 목이버섯 첨가 후 녹각추출액의 NO 생성 비교 결과를 나타낸다.
이에, 본 발명자들은 녹각 추출물에 목이버섯을 고형분 함량 기준으로 2.5%~10% 범위에서 첨가한 후, 멸균시켜서 김치 유래 젖산균을 접종하여 기능성 물질인 GABA 생산을 최적화하였다. GABA 생산 및 기능성 물질의 강화를 위해서 비타민 D와 식이섬유가 풍부한 목이버섯과 소듐 글루타메이트(sodium glutamate)를 5% 수준으로 첨가하여 젖산 발효 배지를 조성하였다. GABA 생산능이 우수한 김치 젖산균을 1% 수준으로 접종하여 30℃에서 정치배양으로 7일 동안 발효를 수행하였으며, 이를 통해서 프로바이오틱스, GABA 및 식이섬유가 강화된 녹각발효물을 생산하였으며, 이들의 항산화 및 염증완화 효능평가를 통해서 기능성 녹각 복합 발효조성물을 제조하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 (1) 녹각을 열수 추출하여 녹각 추출액을 제조하는 단계; (2) 상기 제조된 녹각 추출액에 목이버섯, 모노소듐 글루타메이트(monosodium glutamate; MSG), 포도당(glucose) 및 효모 추출물(yeast extract)를 첨가하여 혼합하는 단계; (3) 상기 혼합물을 열처리하는 단계; 및 (4) 상기 열처리된 혼합물에 젖산균(Lactobacillus) 스타터를 접종하고 배양하여 젖산 발효시키는 단계를 포함하는 항산화 활성 및 감마-아미노뷰티르산(gammaaminobutyric acid; GABA) 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액 제조방법을 제공한다.
바람직하게는, 상기 (2) 단계는 전체 녹각 추출액 100 중량부에 대해, 목이버섯 0.1 내지 10 중량부, MSG 1 내지 5 중량부, 포도당(glucose) 1 내지 5 중량부 및 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 3 중량부를 첨가하여 혼합될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
바람직하게는, 상기 (4) 단계의 발효는 25 내지 30℃에서, 1 내지 10일 동안 발효할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 실시예에서 사용된 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) EJ2014 균주는 한국미생물보존센터에 KCCM11545P로 수탁하였다.
본 발명에 있어서, "스타터(starter)"란 발효물을 제조하는 경우에 사용하는 미생물 배양액을 말한다. 따라서 스타터 미생물의 종류는 그 제품의 특성을 결정하게 되며 제품의 품질에 중요한 영향을 미친다. 미생물 중에서 스타터로 사용되고 있는 것은 박테리아, 곰팡이, 효모 등을 들 수 있으며, 이것을 단독 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기의 방법에 의해 제조된 항산화 활성 및 GABA 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액을 제공한다.
또한, 본 발명은 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주로 발효시킨 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물을 제공한다.
상세하게는, 상기 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액은 항산화 활성 및 GABA가 증진될 수 있다.
본 발명에 있어서, "감마-아미노뷰티르산(gammaaminobutyric acid; GABA)"은 억제성 신경전달물질로서 뇌 혈류개선, 스트레스 해소, 기억력 증진, 혈압강하작용, 우울증 완화, 비만 등에 효과가 있는 것으로 알려져 다양한 제품개발이 이루어지고 있다. 자연에서 얻을 수 있는 식물체 GABA 함유량은 약리작용을 발휘하기에 미량으로 미생물을 이용한 GABA 함량을 증대시키고 이를 다양한 제품에 이용하고 있다.
본 발명의 식품 조성물인 경우, 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 발효액을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있다.
이하, 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 다만, 이러한 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
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실시예
1> 녹각 추출물 제조 및 젖산 발효
1. 녹각 추출물 제조
증류수 10L에 녹각 500g 넣은 후 고온에서 40시간 동안 추출한 후 여액을 얻는다. 열수 추출된 녹각추출물(100mL)은 목이버섯 2.5g, MSG 2.5%~4.5%, 포도당(glucose) 1.5% 및 YE 0.5%와 혼합된 후 121℃에서 15분간 열처리 하였다. 그리고 각각의 시료에 락토바실러스 플란타륨(L. plantarum) EJ2014 스타터(starter)를 1% 접종하고 30℃ 인큐베이터에서 7일간 배양한 후 발효물을 제조하였다(도 1).
2. 결과 및 고찰
(1) 고형분 함량, pH, 산도 및 생균수 변화
녹각 추출액 젖산 발효물의 pH는 MSG 첨가 농도 증가에 따라서 발효기간 중에 증가하는 경향을 보였다. MSG 2.5% 첨가의 경우에 발효 1일에 pH 4.3으로 떨어졌고 발효 3일에 약간 증가하면서 pH 4.8로 높아졌으며, 발효 7일 동안 유사한 pH값을 나타내었다. 산도는 발효 3일에 가장 높은 1.3%를 나타낸 후 발효 5일에 급격하게 감소하는 경향을 보였다.
MSG 농도가 3.5%, 4.5% 인 경우에 초기 pH 6.2에서 발효 1일에 4.5 정도도 감소한 후 발효 3일부터 증가하면서 발효 5일에는 각각 6.8, 7.1로 높아졌다. 산도는 발효 1일에 0.8%에서 발효기간이 증가하면서 급격하게 감소하면서 발효 3일에 0.15% 정도도 매우 낮은 값을 나타내었다(도 2).
따라서 녹각 추출물의 젖산발효 과정에서 산생성에도 불구하고 산도가 낮아지는 현상은 GABA생성 과정에서 수소이온을 소진되면서 나타나는 현상으로 사료되었다.
생균수 측정 결과, 목이버섯이 첨가되지 않은 경우에 발효 1일에 8×108에서 발효 3일에 1.5×109으로 가장 높은 값을 보인 후 완만하게 감소하였다. 반면에 목이버섯이 첨가된 경우에 발효 1일 생균수는 4.5×109으로 높은 값을 보였으며, 발효 3일에 1.9×109으로 가장 높은 값을 보인 후 완만하게 감소하였다. 따라서 목이버섯 첨가가 젖산 발효중에 생균수를 증진시키는 효과가 있는 것으로 나타났다(표 1).
또한, 목이버섯 첨가조건에서 MSG의 농도가 2.5%~4.5%로 첨가되는 경우에 발효 1일에 최고 높은 생균수 값을 보였으며, 발효기간이 증가되면서 완만하게 생균수가 감소하는 경향을 보였다. 특히, MSG 농도가 높은 경우에 발효 7일에 생균수가 가장 높은 것으로 나타났다(도 3).
(2) GABA 생산(MSG 2.5~4.5%)
GABA 함량 변화를 비교하기 위해 TLC를 이용하여 정성분석 한 결과는 도 4 및 도 5와 같다. 발효 1일부터 발효 7일까지 GABA가 점차적으로 생성되기 시작하였고, 발효 7일에 MSG가 대부분 전환되었다. 목이버섯이 존재하는 경우에 발효 5일에 대부분 MSG가 전환되면서 젖산균에 의한 GABA 생산이 보다 효과적이었다(도 4).
첨가되는 기질로서 MSG 함량이 2.5%에서 4.5%로 증가할 때 녹각 추출물에 목이버섯이 첨가된 경우에 젖산발효 3일에 대부분의 MSG가 이용되면서 GABA로 전환되었다. 따라서 녹각 추출물에 목이버섯 첨가에 따라 고농도 GABA생산이 가능하였다(도 5).
<
실시예
2> 목이버섯 및 녹각추출물 복합 젖산발효액의 항산화 효능평가
1. 목이버섯 및 녹각추출물 복합 젖산발효액 제조
상기 실시예 1에서 제조된 녹각 추출물 200mL에 목이버섯 분말을 5 내지 20g 넣은 후, 효모 추출물(yeast extract) 1g, 포도당(glucose) 2g, MSG 5 내지 10g을 첨가하여 121℃에서 15분간 열처리하였다. 그리고 각각의 시료에 락토바실러스 플란타륨(L. plantarum) EJ2014 스타터(starter)를 1% 접종하고 30℃ 인큐베이터에서 3일간 배양한 후 발효물을 제조하였다.
2. 총 폴리페놀 함량 측정
팽이버섯 분말 발효 전과 발효 후 시료를 5배로 희석한 다음 60 μL을 취하여 Folin 시약(원액을 2배 희석한 액) 60 μL를 가하여 3분간 방치한 후 10% Na2CO3 용액 60 μL를 가하여 반응시켜 반응액의 흡광도를 700 nm에서 측정하였다. 표준곡선을 증류수로 0.1% (w/v)를 제조한 후 최종농도가 0, 20, 40, 60, 80, 100 μg/mL 용액이 되도록 조제하고 이를 일정량 취하여 위와 같은 방법으로 700 nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다.
3. 총 플라보노이드 함량 측정
팽이버섯 분말 발효 전과 발효 후 시료 0.5 mL에 10% 알루미늄 니트레이트(aluminium nitrate)와 1 M 포타슘 아세테이트(potassium acetate)를 각각 0.1 mL, 80% 에탄올(ethanol) 4.3 mL을 가하여 실온에 40분 방치한 뒤 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선을 증류수로 quercetin 0.1% (w/v)를 제조한 후 최종 농도가 0, 50, 100, 150, 200 μg/mL 용액이 되도록 조제하고 이를 일정량 취하여 위와 같은 방법으로 415 nm에서 흡광도를 측정하여 계산하였다.
4.
DPPH
radical 소거 활성 측정
목이버섯 첨가 전후 녹각 추출물 젖산발효물 시료 160 μL와 에탄올에 녹인 0.15 mM DPPH 용액 40 μL를 가하여 실온에서 30분 방치한 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료 추출물의 유리 라디칼 소거활성은 시료를 첨가하지 않은 대조구의 흡광도를 1/2로 환원시키는데 필요한 시료의 농도인 IC50 값으로 나타내었다. 이 때 상대 활성의 비교를 위하여 대조군으로 butylated hydroxy anisole (BHA)를 사용하였다.
5.
ABTS
radical 소거 활성 측정
7 mM 2,2-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid)와 2.45 mM 포타슘 퍼설페이트(potassium persulfate)를 최종 농도로 혼합하여 실온인 암소에서 24시간 동안 방치하여 ABTS+를 형성시킨 후 732nm에서 흡광도 값이 0.70 (±0.02)이 되게 포스페이트 완충액 식염수(phosphate buffer saline; PBS, pH 7.4)로 희석하였다. 희석된 용액 180μL에 샘플(sample) 20 μL를 가하여 정확히 1분 동안 방치한 후 흡광도를 측정하였다.
6. 결과 및 고찰
(1) 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량 측정
녹각 추출물에 목이버섯을 첨가 및 발효 전후에 총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량을 측정해 본 결과, 목이버섯이 첨가되지 않은 경우 발효 전 폴리페놀 함량은 22.67 mg/mL, 플라보노이드 함량은 10.90 mg/mL으로 나타났으며 발효 후 폴리페놀 함량은 20.53 mg/mL, 플라보노이드 함량은 17.36 mg/mL로 나타나면서 비교적 녹각추출물의 페놀화합물의 함량이 높은 것으로 사료되었다. 또한 목이 버섯이 첨가된 경우에 발효전 발효 전 폴리페놀 함량은 19.11 mg/mL, 플라보노이드 함량은 18.25 mg/mL으로 나타났으며 발효 후 폴리페놀 함량은 21.42 mg/mL, 플라보노이드 함량은 13.69 mg/mL로 나타났다(표 2).
(2) DPPH radical 소거능
DPPH radical 소거 활성법을 이용한 녹각 추출물의 목이버섯 첨가 유무에 따른 젖산 발효물의 항산화력을 측정한 결과는 표 3과 같다. 목이버섯 첨가 없이 발효전 녹각 추출물의 희석배수 10, 50, 70에서 각각 76.01%, 50.00%, 41.11%의 저해능을 보이는 것으로 나타났으며, 50% 항산화능을 나타내는 농도 값을 나타내는 IC50 값은 0.17 mg/mL이었다. 목이버섯 첨가전 젖산 발효물의 radical 소거능은 희석배수 10, 50, 70에서 각각 87.22%, 53.88%, 50.55%로 나타났으며 IC50 값은 0.11 mg/mL로 발효전보다 낮은 값을 나타내었다. DPPH radical 소거능은 녹각 추출물을 젖산발효시킨 발효물이 더 적은 농도에서 50%의 활성을 보이는 것으로 보아 발효 후가 더 항산화 활성이 더 우수한 것으로 판단되었다. 또한 목이버섯이 첨가된 녹각 추출물의 희석배수 10, 50, 70에서 각각 라디칼 소거능이 57.86%, 58.18%, 52.22%로 나타났으며, 목이버섯 첨가된 후 젖산발효물은 각각 73.33%, 49.44%, 42.77%로 나타났다. 목이버섯 첨가의 경우에 발효 전후에 50% 활성을 보이는 IC50 값이 각각 0.12 mg/mL, 0.11 mg/mL로서 유사한 값을 나타내었다. DPPH 라디칼 소거능으로 평가된 항산화 활성은 녹각 추출물에 목이버섯 첨가 및 젖산발효에 의해서 IC50 값이 적은 것으로 나타나면서 항산화활성이 높은 것으로 확인되었다(표 3).
(3) ABTS radical 소거능 측정
ABTS 포타슘 퍼설페이트(potassium persulfate)를 암소에 방치하여 ABTS+가 생성되면 시료의 항산화력에 의해 ABTS+가 소거되어 radical 특유의 청록색이 탈색 되는데 이를 흡광도 값으로 나타내어 ABTS+의 소거 활성능을 측정하였다. 목이버섯 첨가전 녹각 추출물의 희석배수 10, 50, 100에서 각각 74.56%, 27.93%, 17.76%의 저해능을 나타내었으며 IC50 값은 2.83 mg/mL이었다. 목이버섯 첨가전 녹각 추출물 젖산발효액의 ABTS radical 소거능은 유사한 radical 소거능을 보이면서 IC50 값은 2.83 mg/mL을 나타내었다.
목이버섯이 첨가된 녹각추출물의 ABTS radical 소거능은 희석배수 10, 50, 100에서 각각 71.63%, 29.88%, 18.84%로 나타났으며 IC50 값은 2.62 mg/mL을 나타내었다. 목이버섯 첨가된 녹각 추출물 젖산발효물의 ABTS radical 소거능은 희석배수 10, 50, 100에서 각각 80.49%, 27.88%, 15.99%로 IC50 값은 2.71 mg/mL로 발효 전후에 유사한 항산화 활성을 나타내었다. 목이버섯의 첨가에 따라서 발효 유무에 관계없이 ABTS radical 소거능이 우수한 것으로 나타났다(표 4).
<
실시예
3> 목이버섯 및 녹각추출물 복합 젖산발효액의 염증완화 효능 평가
1. 세포 생존율
RAW cell의 생존율은 목이버섯이 첨가되지 않은 녹각추출액의 경우에 발효전의 시료는 15배 희석까지 세포 독성은 없었으며, 5배 희석인 경우에서 약간의 세포 독성을 보였다 반면에 발효시킨 시료의 경우에 5배 희석된 시료에서도 세포 독성이 완화되면서 control수준으로 세포 생존율이 올라가는 것으로 나타났다(도 6).
목이버섯이 첨가된 녹각 추출물의 경우에 젖산발효전 시료는 15배 희석된 시료에서 세포 독성은 보이지 않았지만, 5배 희석된 시료에서 세포 독성을 보였다. 반면에 발효시킨 시료의 경우에 5배 희석된 시료에서 세포 독성이 완화되면서 세포 생존율이 높아지는 것으로 나타났다. 따라서 목이버섯의 첨가된 녹각추출물은 발효에 의해서 RAW cell의 세포독성이 완화되는 것으로 판단되었다(도 7).
2. NO 생성
RAW cell의 LPS 물질 유도에 따라서 생성된 NO의 생성 정도를 비교하였다. 목이버섯이 첨가되지 않은 녹각 추출액의 경우에 발효 전의 시료는 15배 희석에서 NO 생성 억제 효과를 보였으며, 이보다 높은 농도인 5배 희석인 경우에 세포독성에 기인한 NO 생성의 억제로 사료되었다. 반면에 발효시킨 시료의 경우에 15배 희석된 시료에서도 NO 생성의 억제가 미비하였다(도 8).
목이버섯이 첨가된 녹각 추출물의 경우에 젖산 발효 전 시료는 15배 희석된 시료에서 NO 생성 억제가 미비하였으며, 5배 희석된 시료의 경우에 NO 생성이 크게 억제되었다. 이는 세포 독성에 기인한 현상으로 사료되었다. 반면에 발효시킨 시료의 경우에 5배 희석된 시료에서 NO 생성이 억제되었다. 발효된 시료는 세포 독성이 완화된 경우를 고려할 때 목이버섯 첨가 및 젖산발효에 의해서 NO 생성이 억제되는 것으로 판단되었다(도 9).
Claims (7)
- (1) 녹각을 열수 추출하여 녹각 추출액을 제조하는 단계;
(2) 상기 제조된 전체 녹각 추출액 100 중량부에 대해, 목이버섯 분말 0.1 내지 10 중량부, MSG 2.5 내지 4.5 중량부, 포도당(glucose) 1 내지 5 중량부 및 효모 추출물(yeast extract) 0.1 내지 3 중량부를 첨가하여 혼합하는 단계;
(3) 상기 혼합물을 열처리하는 단계; 및
(4) 상기 열처리된 혼합물에 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum) EJ2014 (KCCM11545P) 균주 스타터를 접종하고 배양하여 젖산 발효시키는 단계를 포함하는 항산화 활성 및 감마-아미노뷰티르산(gammaaminobutyric acid; GABA) 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액 제조방법. - 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 (4) 단계의 발효는 25 내지 30℃에서, 1 내지 10일 동안 발효하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성 및 GABA 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액 제조방법.
- 제1항의 방법에 의해 제조된 항산화 활성 및 GABA 증진된 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액.
- 제5항에 따른 녹각추출물 및 목이버섯 복합 젖산발효액을 유효성분으로 포함하는 염증 개선용 식품조성물.
- 삭제
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