KR101821349B1 - 그루터기 접종법을 이용한 복령의 대량 생산방법 - Google Patents

그루터기 접종법을 이용한 복령의 대량 생산방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 복령 균주를 액체배지에서 배양하여 복령 균사체를 수득하는 단계, 상기 수득한 복령 균사체를 톱밥, 미강, 감자전분 및 옥수수전분을 포함하는 톱밥 배지에 접종하는 단계, 및 상기 접종된 복령 균사체를 생육시키는 단계를 포함하는 복령의 대량 생산방법을 제공한다.

Description

그루터기 접종법을 이용한 복령의 대량 생산방법{Method for mass production of Poria cocos using a stump inoculation}
본 발명은 그루터기 접종법을 이용한 복령의 대량 생산방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 복령 균주를 배지에 접종하는 단계, 상기 접종된 배지를 배양하여 복령 균사체를 수득하는 단계, 및 상기 수득한 복령 균사체를 소나무과 수종 그루터기의 뿌리 접합부에 접종하여 복령 자실체를 생육시키는 단계를 포함하는 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에 관한 것이다.
복령은(Poria cocos Wolf) 한방에서 주로 사용하였으나, 근래에는 기능성 식품으로도 이용되고 있는 버섯으로서, 분류학상 진균류의 일종으로 담자균아문, 민주름버섯목, 구멍장이버섯과, 구멍버섯속에 속한다.
복령균은 소나무류를 벌채한 후 3~5년이 경과하면 그 뿌리 주변에서 기생 또는 부생하는 갈색부후균으로 부정형의 균핵(sclerotia)을 형성하는데, 항종양(antitumor immunity), 항그람양성균(echinomycin) 등과 같은 항암활성이 우수한 성분을 다량 함유되고 있는 약용자원인 복령을 대량 생산할 수 있는 방법에 대한 연구가 미흡한 실정이다.
이러한 복령에 대하여 인공재배 기술의 필요성이 대두되었으나, 그동안 추진되어 온 복령의 인공재배 기술은 경작지 재배, 하우스 재배 등에 관한 것으로서, 상기 종래기술로는 고품질 복령의 대량 생산을 위한 토양중 원목 비매립 비닐봉지 재배방법이 개시되어 있다 (한국공개특허 제10-2011-0000089호).
또한, 벌목한 나무토막(직경 10∼30㎝, 길이 20∼60㎝ 정도)에 종균을 톱밥 배지나 곡립 배지를 이용하여 부착시킨 후 검은 비닐봉지로 밀봉하여 온, 습도 조절이 용이한 장소(암실)에서 15∼25℃의 생장적온으로 습도 70∼80%로 건조를 방지하면서, 40∼60일간의 활착기간을 거처 배양함으로써, 6개월후부터 복령의 수확이 용이한 복령의 재배방법이 개시되어 있다 (한국공개특허 제10-2005-0051801호).
그러나, 자연산 복령의 생산지와 동일한 산림내에서의 인공 재배에 관한 기술은 아직까지 개발되지 않았고, 현재 우리나라에서는 일부 지역에서 경작지 인공 재배가 이루어지고 있으나, 그 생산량은 아주 미비한 실정이며, 성공적인 사례도 드문 실정이다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은 소나무과 수종의 그루터기 벌채지에서 임지를 효율적으로 이용하고, 단기간 내에 복령을 대량 생산할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, (a) 복령 균주를 배지에 접종하는 단계, (b) 상기 접종된 배지를 배양하여 복령 균사체를 수득하는 단계, 및 (c) 상기 수득한 복령 균사체를 소나무과 수종 그루터기의 뿌리 접합부에 접종하여 복령 자실체를 생육시키는 단계를 포함하는 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기의 방법에 의해 생산된 복령을 제공한다.
본 발명에 의하면, 자연채취에 의존하던 기존의 복령 생산방식으로부터 탈피하여, 자연산 복령의 생산지와 동일한 산림내에서의 인공 재배를 통하여, 계절에 상관없이 연중 복령을 대량 생산할 수 있다.
도 1a 내지 도 1f는 시료에서 채취한 모본 버섯자실체를 나타낸 것이다.
도 2는 복령 고체배지의 pH 특성을 조사한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 복령 액체배지의 pH 특성을 조사한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 실시예 5에서 사용한 복령 균주를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명의 그루터기를 이용한 복령 접종방법의 모식도를 나타낸 것이다.
도 6은 접종된 그루터기에서의 균사체 활착을 나타낸 사진이다.
도 7은 그루터기에서의 복령 균핵(자실체)의 생육에 관한 사진이다.
도 8은 수확한 복령 균핵(자실체)를 나타낸 사진이다.
본 발명은 (a) 복령 균주를 배지에 접종하는 단계, (b) 상기 접종된 배지를 배양하여 복령 균사체를 수득하는 단계, 및 (c) 상기 수득한 복령 균사체를 소나무과 수종 그루터기의 뿌리 접합부에 접종하여 복령 자실체(균핵)를 생육시키는 단계를 포함하는 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에 관한 것이다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 복령 균주는 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03 (KFCC11593P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07 (KFCC11619P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC09 (KFCC11620P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC10 (KFCC11621P) 및 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC17 (KFCC11622P)로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 KFCC11592P 및 KFCC11593P는 2014년 8월 7일, 또한 상기 KFCC11619P 내지 KFCC11622P는 2015년 9월 23일 한국미생물보존센터에 각각 기탁되었다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 복령 균주는 바람직하게는 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03 (KFCC11593P) 및/또는 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07 (KFCC11619P)일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 배지는 단목 배지 또는 톱밥 배지일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 단목 배지는 소나무과 수종의 단목 100 중량부에 대하여, 톱밥 40~60 중량부, 감자 전분 40~60 중량부 및 옥수수 전분 40~60 중량부를 혼합한 후, 멸균시킨 배지일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 톱밥 배지는 소나무과 수종의 톱밥 100 중량부에 대하여, 감자 전분 30~40 중량부, 옥수수 전분 10~20 중량부 및 미강 10~20 중량부를 혼합한 후, 멸균시킨 배지일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 톱밥 배지는 소나무과 수종의 톱밥 100 중량부에 대하여, 감자 전분 30~40 중량부, 옥수수 전분 10~20 중량부 및 미강 10~20 중량부를 혼합한 혼합물을 멸균 봉지에 담아 성형한 후, 멸균시킨 배지일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 성형은 구형 또는 반구형 형태로 성형할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 필요에 따라 변형된 형태로 성형할 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 멸균 방법은 공지된 통상의 방법에 의해 수행하는 것으로 족하므로, 이에 대한 상세한 설명은 생략한다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 (b) 단계의 배양은 20~25℃, 바람직하게는 23~25℃에서 20~30일, 바람직하게는 23~27일 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 소나무과 수종은 소나무, 전나무, 리기다소나무, 잣나무 및 낙엽송으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법에서, 상기 뿌리 접합부는 도 5와 같이, 그루터기의 지하 20~40cm에 위치할 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법은 상기 (c) 단계에서, 복령 균사체를 소나무과 수종 그루터기의 뿌리 접합부에 접종한 후, 15~20cm 깊이로 복토하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 상기 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법은 상기 (c) 단계에서, 상기 복령 균사체의 접종후, 3~6개월 동안 복령 자실체의 생육을 유도할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 생산된 복령에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나, 하기 실시예들은 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> (복령의 균핵 채집 및 균주의 선발)
도 1a 내지 도 1f와 같은 복령 균주를 강원도 정선, 양양 및 삼척에서 채집하였다.
상기 채집한 복령 균주들의 균사 신장력을 조사하기 위하여, PDA 배지(Difco®Potato Dextrose Agar) 19.5g을 500㎖ 증류수에 녹인 1ℓ 삼각 플라스크 2병을 121℃의 고압멸균기에서 15분간 멸균하였다.
복령 균주의 접종은 코르크 보러(cork borer) 3호(지름 7mm)를 사용하여 PDA에서 생장한 상기 복령 6 균주를 같은 크기로 떼어 내어 상기 균주를 각각의 PDA 평판 배지의 중앙에 하나씩 접종하는 방법으로 2 반복하였다.
복령의 복합 배지에서의 생장량 조사는 하기 표 1과 같은 MCM, YM, YMPG 등 총 8가지의 복합 배지를 사용하였는데, 상기 복합 배지의 제조는 증류수 1 L에 하기 표 1과 같이 조성 시약을 g 단위로 녹여서 사용하였다.
하기 표 1에서, 효모 추출물, 맥아 추출물 및 펩톤은 Difco®를 사용하였으며, 그 외의 시약은 Sigma®를 사용하였다.
상기 제조된 각각의 배지를 고압 멸균기에 121℃에서 15분간 멸균하여 생장량 측정을 위한 가로(a), 세로(b) 선이 있는 페트리디쉬의 중앙점을 기준으로 평판배지로 만들었다.
Figure 112016017165832-pat00001
배양 조건은 온도 16℃~22℃, 습도(RH) 60%이며, 5,000 Lux의 광 조건을 부여하여 배양기에서 30일간 배양한 후, 페트리디쉬의 가로(a), 세로(b)의 선을 따라 자란 균사의 생장량을 측정하였다.
상기 균사의 생장량 측정 결과, 상기 표 1의 8 종류의 복합배지 중에서, MMM, MALT, YPSS 배지 상에서 각각 82.6mm, 88.4mm, 84.2mm로서, 균사 활력이 우수한 것으로 나타났다.
한편, 평균 생장량에서는 MMM, YPSS 배지에서 60.5, 62.8mm의 생장량으로 가장 우수하게 나타났다. 또한, 복합배지에서의 복령 균주의 생장량을 보면, YM, GPM 배지에서 눈에 띄게 더딘 생장을 보였으며, 그 외의 버섯에서는 생장량에 많은 차이가 없다는 것을 알 수 있었다.
배양 온도가 균사 생장에 미치는 영향을 조사한 결과, 20℃에서 가장 빠른 균사 신장력을 나타냈으며, 대체로 16℃에서 22℃사이에서 고른 균사 생장이 이루어졌다.
이상에서 본 바와 같이, 균사의 생장력이 우수한 복령 균주를 각각 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01, 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03, 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07, 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC09, 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC10 및 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC17이라고 명하고, 이를 한국미생물보존센터에 기탁하여 각각 KFCC11592P, KFCC11593P, KFCC11619P, KFCC11620P, KFCC11621P 및 KFCC11622P의 기탁번호를 부여받았다.
<실시예 2> 복령의 고체배지에서의 적정 pH 조사
상기 실시예 1에 의한 복령 6균주의 적정 pH를 조사하기 위하여, pH 4.0, 4.5, 5.0, 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.5, 8.0 및 8.5으로 고체 배지를 제조하였다.
PDA(Difco® Potato Dextrose Agar)를 증류수 500ml에 녹여 NaOH와 HCl을 이용하여 0.001의 오차 범위로 pH를 조절한 뒤, 고압 멸균기에서 121℃의 온도로 15분간 멸균한 후, 페트리디쉬에 분주하여 냉각시켰다.
균주의 접종은 코르크 보러(cork borer) 3호(지름 7mm)를 사용하여 PDA에서 생장한 균주를 같은 크기로 떼어 내어 다섯 개의 각 조각을 PDA 평판 배지의 중앙에 하나씩 접종하는 방법으로 5 반복하였다. 온도 22.0℃, 습도 60%의 배양기로 배양하였으며 7일 간격으로 생장량을 확인하였다.
배양 조건은 온도 22.0℃, 습도(RH) 60%이며, 5,000Lux의 광 조건을 부여하여 배양기에서 30일간 배양한 후 접종한 날로부터 7일, 14일, 21일 간격으로 페트리디쉬의 가로(a), 세로(b)의 선을 따라 자란 균사의 생장량을 측정하였다.
0.5mm의 단위로 중앙으로부터 자란 균사의 가장 정단면의 것을 기준으로 하였으며, 측정한 가로(a), 세로(b) 두 값의 평균을 생장량으로 조사하였다.
복령의 고체배지에서의 pH 변화에 따른 기간별 생장량을 조사한 결과, 도 2에서 보는 바와 같이, pH 4.0~7.0까지 거의 유사하게 우수한 생장량을 나타내었고, pH 7.0 ~ pH 8.0까지 비교적 낮은 생장량을 보였으나, 전체적으로 복령 균사의 생장은 pH의 변화에 크게 영향을 받지 않는 것을 확인할 수 있었다.
<실시예 3> 복령의 액체배지에서의 적정 pH 조사
복령의 적합 액체배지 pH 조사를 위하여 PDB(Difco™ Potato Dextrose Broth) 24g, 증류수 1ℓ의 비율로 녹인 뒤 100㎖ 삼각플라스크에 50ml씩 나누어 분주하여 4.5~8.5까지 NaOH와 HCl을 이용하여 0.001의 오차 범위로 pH를 조절 후 입구를 막아 고압 멸균기에서 121℃의 온도로 15분간 멸균 하였다.
접종은 코르크 보러(cork borer) 3호(지름 7mm)를 사용하여 각기 다른 pH 배지가 있는 삼각 플라스크에 3조각씩 접종한 후, 온도 23.℃의 배양기에서 30일간 배양하여 상기 실시예 1에 의한 복령 6균주의 적정 pH를 조사하였다.
복령의 액체배지에서의 적정 pH 조사 결과, 도 3에서 보는 바와 같이, pH 7.5의 3주째 수치를 예외적으로 보았을 때, pH 4.0에서 0.0525g의 무게로 가장 높은 생장을 보였고, 기간별 생장량에서도 다른 pH에 비하여 pH 6.0에서의 생장이 우수함을 알 수 있었다.
전체적으로 보았을 때, pH에 따른 액체배지에서의 생장량은 pH 8.0~8.5의 알칼리배지보다 pH 5.0~6.5의 중성배지를 더 선호하는 것을 확인할 수 있었다.
<실시예 4> 단목 배지를 이용한 복령 균사체의 제조 (1)
멸균된 증류수 150ml에 플레이트 내의 PDA 배지에서 배양된, 복령 균주로 상기 실시예 1에서 선발된 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P)의 고체 균사를 약 1/2 떼어 내어 블렌더에 갈아 피펫에 옮겨질 수 있을 정도로 크기를 만들었다.
상기 마쇄된 복령의 균사를 50ml의 피펫을 이용하여 멸균된 5L의 배양병에 들어 있는 CoCos 배지(덱스트로스 25g/L, 효모 추출물 5g/L, CaCl2 2.2g/L, MgSO4 1.85g/L, FeCl2 0.027g/L, 이노시톨 0.1g/L 및 티아민 0.001g/L)에 40ml을 접종한 후, 상대습도 80~85% 및 24℃의 온도에서 25일 동안 배양하였다.
상기에서 배양된 복령 균사를, 20~30cm의 소나무과 단목 100 중량부에 대하여, 톱밥 50 중량부, 감자 전분 50 중량부 및 옥수수 전분 50 중량부를 혼합한 후, 121℃에서 15분간 멸균시킨 단목 배지에 접종하였다.
상기 접종된 단복배지를 82.5%의 상대 습도 및 24℃의 온도에서, 25일 동안 배양하여 복령 균사체를 제조하였다.
<실시예 5> 단목 배지를 이용한 복령 균사체의 제조 (2)
복령 균주로 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03 (KFCC11593P) 및 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07 (KFCC11619P)을 사용한 것 이외에는 실시예 4와 동일하게 실시하여 복령 균사체 접종원을 제조하였다.
도 4는 상기에서 사용한 복령 균주를 나타낸 것이다.
<실시예 6> 톱밥 배지를 이용한 복령 균사체의 제조 (1)
멸균된 증류수 150ml에 플레이트 내의 PDA 배지에서 배양된, 복령 균주로 상기 실시예 1에서 선발된 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P)의 고체 균사를 약 1/2 떼어 내어 블렌더에 갈아 피펫에 옮겨질 수 있을 정도로 크기를 만들었다.
상기 마쇄된 복령의 균사를 50ml의 피펫을 이용하여 멸균된 5L의 배양병에 들어 있는 CoCos 배지(덱스트로스 25g/L, 효모 추출물 5g/L, CaCl2 2.2g/L, MgSO4 1.85g/L, FeCl2 0.027g/L, 이노시톨 0.1g/L 및 티아민 0.001g/L)에 40ml을 접종한 후, 상대습도 80~85% 및 24℃의 온도에서 25일 동안 배양하였다.
상기에서 배양된 복령 균사를, 소나무 수종의 톱밥 100 중량부에 대하여, 감자 전분 33.3 중량부, 옥수수 전분 16.7 중량부 및 미강 16.7 중량부를 혼합한 혼합물을 멸균 봉지에 담아 구형으로 성형한 후, 121℃에서 15분간 멸균시킨 톱밥 배지에 접종하였다.
상기 접종된 단복배지를 82.5%의 상대 습도 및 24℃의 온도에서, 25일 동안 배양하여 복령 균사체를 제조하였다.
<실시예 7> 톱밥 배지를 이용한 복령 균사체의 제조 (2)
복령 균주로 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03 (KFCC11593P) 및 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07 (KFCC11619P)을 사용한 것 이외에는 실시예 6과 동일하게 실시하여 복령 균사체를 제조하였다.
<실시예 8> 톱밥 배지를 이용한 복령 균사체의 제조 (3)
톱밥 배지로 소나무 톱밥 : 낙엽송 톱밥 : 잣나무 톱밥이 1:1:1의 중량비로 혼합된 톱밥 배지를 사용한 것 이외에는 실시예 6과 동일하게 실시하여 복령 균사체를 제조하였다.
<실시예 9> 그루터기 접종법을 이용한 복령 자실체의 생육 (1)
소나무 벌근목 그루터기의 지하부 깊이 20~40cm의 뿌리 접합부에 상기 실시예 4에서 제조한 복령 균사체를 접종한 다음, 15~20cm 깊이로 복토한 후, 4개월간 복령 자실체를 생육시켰다.
도 5는 본 발명의 그루터기를 이용한 복령 접종방법의 모식도를 나타낸 것이다.
<실시예 10> 그루터기 접종법을 이용한 복령 자실체의 생육 (2)
복령 균사체로 상기 실시예 5에서 제조한 복령 균사체를 접종한 것 이외에는 실시예 9와 동일하게 실시하여 복령 자실체를 생육시켰다.
<실시예 11> 그루터기 접종법을 이용한 복령 자실체의 생육 (3)
복령 균사체로 상기 실시예 6에서 제조한 복령 균사체를 접종한 것 이외에는 실시예 9와 동일하게 실시하여 복령 자실체를 생육시켰다.
<실시예 12> 그루터기 접종법을 이용한 복령 자실체의 생육 (4)
복령 균사체로 상기 실시예 7에서 제조한 복령 균사체를 접종한 것 이외에는 실시예 9와 동일하게 실시하여 복령 자실체를 생육시켰다.
<실시예 13> 그루터기 접종법을 이용한 복령 자실체의 생육 (5)
복령 균사체로 상기 실시예 8에서 제조한 복령 균사체를 접종한 것 이외에는 실시예 9와 동일하게 실시하여 복령 자실체를 생육시켰다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
본 발명에 의하면, 복령 균주의 신속한 증식이 가능하고, 액체배지 및 톱밥배지에의 배양을 통하여 복령을 대량으로 생산할 수 있을 뿐만 아니라, 자연채취에 의존하던 기존의 복령 생산방식으로부터 탈피하여, 인공 재배를 통하여 계절에 상관없이 연중 복령을 대량 생산할 수 있기 때문에, 본 발명이 속하는 기술분야에 유용하게 적용될 수 있다.
한국미생물보존센터(국내) KFCC11592P 20140807 한국미생물보존센터(국내) KFCC11593P 20140807 한국미생물보존센터(국내) KFCC11619P 20150923 한국미생물보존센터(국내) KFCC11620P 20150923 한국미생물보존센터(국내) KFCC11621P 20150923 한국미생물보존센터(국내) KFCC11622P 20150923

Claims (12)

  1. (a). 복령 균주를 배지에 접종하는 단계;
    (b). 상기 접종된 배지를 배양하여 복령 균사체를 수득하는 단계; 및
    (c). 상기 수득한 복령 균사체를 소나무 그루터기의 뿌리 접합부에 접종하여 복령 자실체를 생육시키는 단계를 포함하되,
    상기 배지는 단목 배지 또는 톱밥 배지이고,
    상기 단목 배지는 낙엽송 또는 잣나무의 단목 100 중량부에 대하여, 상기 낙엽송 또는 잣나무의 톱밥 40~60 중량부, 감자 전분 40~60 중량부 및 옥수수 전분 40~60 중량부를 혼합한 후, 멸균시킨 것이며,
    상기 톱밥 배지는 낙엽송 또는 잣나무의 톱밥 100 중량부에 대하여, 감자 전분 30~40 중량부, 옥수수 전분 10~20 중량부 및 미강 10~20 중량부를 혼합한 후, 멸균시킨 것이고,
    상기 뿌리 접합부는 지하 20~40cm에 위치하는 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 복령 균주는 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC01 (KFCC11592P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2016PC03 (KFCC11593P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC07 (KFCC11619P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC09 (KFCC11620P), 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC10 (KFCC11621P) 및 포리아 코코스(Poria cocos) GFRI2015PC17 (KFCC11622P)로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제1항에 있어서, 상기 톱밥 배지는 낙엽송 또는 잣나무의 톱밥 100 중량부에 대하여, 감자 전분 30~40 중량부, 옥수수 전분 10~20 중량부 및 미강 10~20 중량부를 혼합한 혼합물을 멸균 봉지에 담아 성형한 후, 멸균시킨 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 배양은 20~25℃에서 20~30일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 제1항에 있어서, 상기 (c) 단계에서, 복령 균사체를 소나무 그루터기의 뿌리 접합부에 접종한 후, 15~20cm 깊이로 복토하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  11. 제1항에 있어서, 상기 (c) 단계에서, 상기 복령 균사체의 접종후, 3~6개월 동안 복령 자실체의 생육을 유도하는 것을 특징으로 하는, 그루터기를 이용한 복령의 대량 생산방법.
  12. 삭제
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