KR101723605B1 - 대상포진 예방 및 치료용 dna 백신 조성물 및 이를 이용한 vzv 항원에 대한 t세포 활성화 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 대상포진 바이러스(VZV) 단백질을 부호화하는 VZV 유래 유전자의 삽입 부위를 포함하는 적어도 일종의 플라스미드, 및 약제학적으로 허용 가능한 기타의 성분을 포함하는 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물을 제공한다. 상기 플라스미드는 서로 다른 이종(異種)의 유전자 삽입부위를 포함하는 복수의 플라스미드를 포함한다. 상기 플라스미드는 IE-62 단백질(서열목록 1)을 코딩하는 제1 유전자의 삽입부위를 포함하는 제1 플라스미드, IE-63 단백질(서열목록 2)을 코딩하는 제2 유전자의 삽입부위를 포함하는 제2 플라스미드 및 gE 단백질(서열목록 3)을 코딩하는 제3 유전자의 삽입부위를 포함하는 제3 플라스미드를 포함한다.

Description

대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물 및 이를 이용한 VZV 항원에 대한 T세포 활성화 방법{DNA VACCINE COMPOSITION FOR PREVENTING AND TREATING HERPES ZOSTER AND METHOD OF ACTIVATING T-CELL TO VZV ANTIZEN BY USING THE SAME}

본 기술은 백신 분야의 기술로서, 더욱 구체적으로는 생산성, 안정성 및 T세포에 대한 면역반응성이 우수하고, 다양한 질환 형태에 적용 가능한 대상포진 예방 및 치료용 백신에 관한 기술이다.

일반적으로, 대상포진(Herpes Zoster)은 수두-대상포진 바이러스(Varicella-Zoster Virus, VZV)가 신경절(neuronal ganglion)에서 잠복해 있다가, 면역이 약해지면 VZV의 재활성화가 유발되어 나타나는 피부 발진 질환이다. 대상포진이 발병하면 수포성 병변이 나타나고 회복되더라도 신경성 통증 (postherpetic neuralgia)의 후유증이 남게 되며 신경성 통증은 일단 발생하면 완치가 어렵고 환자들이 극심한 통증을 겪게 된다. VZV의 재활성화 및 대상포진의 발병은 T세포를 중심으로 한 세포면역 반응의 약화와 관련이 있으며, 특히 고령자나 면역억제 치료를 받는 사람에서 호발하는 질환이다.

대상포진이 발생하면 항바이러스제로 치료를 하지만, 이의 목적은 기본적으로 발진이 시작되고 72시간 이내에 투여하여 발진이 더 이상 다른 부위로 확산되지 않게 하고, 대상포진 후 합병증을 줄이거나 완화하는 것이다. 고령자 및 면역억제 환자가 증가함에 따라, 국내에서 대상포진의 발병율은 급속도로 증가하고 있으나 근원적인 치료법이 없기 때문에, 예방 백신의 중요성이 매우 큰 질환이라고 여겨지고 있다.

현재 시판되고 있는 대상포진 예방백신은 임상시험에서 그 효능을 인정받기는 하였으나 예방백신 투여에 따른 대상포진 발생 감소율은 50%에 그치고 있어 효능이 뛰어난 새로운 대상포진 백신 개발이 필요한 실정이다. 그리고 현재 시판되고 있는 대상포진 예방백신은 약독화된 생백신이기 때문에 대상포진의 발병율이 높은 면역억제 환자에서는 오히려 사용할 수 없는 역설적인 상황에 처해 있다. 이에 따라 면역억제 환자에서도 안전하게 투여할 수 있는 새로운 대상포진 백신 개발이 절실히 요구되고 있다.

본 발명의 목적은 전술한 바와 종래 기술의 문제점을 해결하고, 현실적인 요구를 고려한 발명으로서, 다양한 형태의 질환 환자에게 적용 가능하고 안정성이 획기적으로 개선된 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물을 체내에 효과적으로 투여하여 VZV 항원에 대한 T세포의 활성화 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 실시예에 따른 대상포진 예방 및 치료용 플라스미드 DNA는 대상포진 바이러스(VZV) 단백질을 부호화하는 VZV 유래 유전자의 삽입 부위를 포함하고, 전기천공 방식에 의하여 체내에 직접 투여되어 VZV 항원에 대한 T세포 면역활성을 유도한다.

상기 전기천공을 위한 전기천공기로서는 이노비오(inovio)사의 CELLECTRA^ㄾ 전기천공기를 사용할 수 있다.

상기 유전자는 IE-62 단백질(서열목록 1)을 코딩하는 제1 유전자, IE-63 단백질(서열목록 2)을 코딩하는 제1 유전자 및 gE 단백질(서열목록 3)을 코딩하는 제3 유전자 중 어느 하나일 수 있다.

상기 플라스미드는 구체적으로 서열목록 4의 플라스미드 DNA, 서열목록 5의 플라스미드 DNA 및 서열목록 6의 플라스미드 DNA 중 어느 하나일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 대상포진 예방 침 치료용 DNA백신 조성물은 대상포진 바이러스(VZV) 단백질을 부호화하는 VZV 유래 유전자의 삽입 부위를 포함하는 적어도 일종의 플라스미드, 및 약제학적으로 허용 가능한 기타의 성분을 포함할 수 있다. 상기 기타의 성분으로서는 예를 들면 식염수 등의 물을 들 수 있다.

상기 DNA 백신을 이루는 상기 플라스미드로서는 서로 다른 이종(異種)의 유전자 삽입부위를 포함하는 복수의 플라스미드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 플라스미드로서는 VZV의 단백질을 부호화하는 서로 다른 유전자 부위를 포함하는 복수의 플라스미드가 사용될 수 있다.

상기 DNA 백신 조성물에 포함되는 플라스미드로서는 IE-62 단백질(서열목록 1)을 코딩하는 제1 유전자의 삽입부위를 포함하는 제1 플라스미드, IE-63 단백질(서열목록 2)을 코딩하는 제2 유전자의 삽입부위를 포함하는 제2 플라스미드 및 gE 단백질(서열목록 3)을 코딩하는 제3 유전자의 삽입부위를 포함하는 제3 플라스미드 등 3종의 플라스미드가 사용될 수 있다. 상기 각 플라스미드의 조성물 내 함량은 질환형태, 투여 대상자의 연령 등을 고려하여 다양하게 조절될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 VZV 항원에 대한 T세포 활성화 방법은 대상포진 바이러스(VZV) 단백질을 부호화하는 VZV 유래 유전자의 삽입 부위를 포함하는 플라스미드를 준비하는 단계, 및 상기 플라스미드를 전기천공 방식에 의하여 체내에 투여하는 단계를 포함한다. 한편, 상기 플라스미드는 대량생산 시스템에 의하여 양산될 수 있다.

본 발명에 따른 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신은 플라스미드의 직접 투여에 의한 백신이므로 약독화된 생백신이 갖는 안전성 문제를 일으키지 않는다. 또한, 플라스미드의 대량생산이 용이하고, 백신의 유통 과정의 안정성이 획기적으로 개선될 수 있다.

상기 DNA 백신은 전기천공 방식에 의하여 체내에 투여되기 때문에, 일반적인 주사제와 비교하여, 혁신적인 체내 전달 효율을 나타낼 수 있다.

한편, 상기 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신은 예방 뿐만 아니라 치료 목적의 사용이 가능하고, 다양한 질환을 갖는 환자 및 다양한 연령대의 환자에게 적절하게 사용될 수 있다.

상기 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신은 플라스미드의 유전자 삽입부위가 서로 다른, 복수의 플라스미드의 다양한 조합을 통하여 맞춤형 백신 설계가 가능한 장점을 갖는다.

도 1은 본 발명에 일 실시예에 따른 접종 스케쥴을 보여주기 위한 도면이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 실험군들에 대한 면역원성 결과를 보여주는 그래프들이다.
도 3 및 도 4는 각 실험군의 단백질 중복펩타이드 면역반응을 비교한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5 내지 도 7은 각각의 플라스미드 유전자에 의하여 발현되는 생성물을 확인한 전기영동 사진들이다.

이하, 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신에 관하여 자세하게 설명하도록 한다.

본 발명에 따른 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신은 바이러스 기반의 생백신이 아닌, DNA 자체를 체내에 투여하는 DNA 기반의 백신으로서, VZV 항원에 대한 T세포 면역활성을 유도하기 위하여 체내에 투여되는 플라스미드 형태의 DNA 자체가 백신으로서 기능한다.

상기 DNA 백신은 VZV 유래의 항원 단백질을 부호화하여, 궁극적으로 체내에서 항원 단백질을 형성하는 역할을 한다. VZV 유래의 단백질은 요구되는 DNA 백신의 특성을 고려하여, 선정되는 것이 바람직하며 상기 단백질은 단독 또는 복수종의 조합으로 선정될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 단백질로서는 세포면역반응을 유도할 수 있는 단백질인 IE-62(서열목록 1), IE-63(서열목록 2), 당단백질인 gE(서열목록 3) 유전자를 들 수 있으며, 상기 플라스미드는 이러한 단백질을 부호화하는 유전자가 삽입되도록 설계된다.

상기 플라스미드 DNA는 체내에 액상에 혼합되어 투여되는데, 본 발명의 플라스미드 DNA는 전기천공 방식에 의하여 체내에 고효율로 투입될 수 있도록 설계 되며, 이러한 전기천공 방식에 의하여야만 체내 전달 효율을 극대화할 수 있고 궁극적으로 치료 효능을 극대화할 수 있다. 전기천공 방식에 의한 체내 투여 부위는 근육 부위 등 특별히 제한되지 않으며, 투여 대상자의 연령, 질환 타입, 병행 질환 등 다양한 요소를 고려하여 결정될 수 있다. 전기천공 방식을 구현하는 전기천공 장비로는 예를 들면, 이노비오(inovio)사의 전기천공기(CELLECTRA^ㄾ )를 사용할 수 있다.

각각, 상기 IE-62, IE-63 및 gE 단백질을 부호화하고 발현시킬 수 있는 유전자인 제1 유전자, 제2 유전자 및 제3 유전자는 통상의 방법으로 플라스미드에 탑재되며, 다만, 효과와 투여 효율을 극대화하기 위하여 본 실시예에서는 각각 서열목록 4, 서열목록 5 및 서열목록 6의 플라스미드를 설계함으로써, DNA 백신의 효율을 극대화할 수 있다. 상기 각각의 플라스미드는 단독으로 사용될 수도 있으나, 서로 다른 2종 이상의 플라스미드 조합 형태로 DNA 백신에 포함되는 것이 바람직하다. 예를 들어, 본 발명의 일 실시예에서는, 상기 세 가지 플라스미드를 모두 포함하는 DNA 백신을 고려할 수 있다. 한편, 본 실시예에서 명시하지 않은 또 다른 이종(異種)의 플라스미드를 새로이 도입할 수 있음은 물론이다.

상기 플라스미드는 주사제 등을 통하여 체내에 투여될 수 있으며, 전달 효율 및 면역반응 효율을 위하여 상기 플라스미드는 고농도 및 고순도로 준비되어야 한다. 또한, 상업적인 관점에서 대량생산의 용이성을 확보하여야 한다. 본 발명의 일 실시예에 따른 플라스미드는 현재 이러한 고농도/고순도 대량생산의 기반을 확보한 상태이다.

본 발명의 일 실시예에 따른 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신은 전술한 적어도 1종의 플라스미드 DNA를 포함하는 액상, 즉 주사제의 백신으로서, 플라스미드 DNA 및 액상 성분을 포함한다. 상기 액상 성분은 순수한 물일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 따른 DNA 백신 조성물은 물 이외에, 약제학적으로 허용가능한 기능성 첨가제들을 더 포함할 수 있으며 이러한 첨가제는 관용기술의 수준에서 도입될 수 있다.

상기 DNA 백신 조성물은, 예를들면, 전술한 3종의 플라스미드를 모두 포함할 수 있다.

이하에서는, 구체적인 실험의 내용을 토대로 본 발명의 일 실시예에 따른 플라스미드 DNA의 유효성을 설명하도록 한다.

[실험 1] 면역원성 평가

DNA백신에 이용할 VZV 유전자 후보 선정

VZV 게놈에서 단백질을 부호화하는 67가지 유전자 중에서 세포 면역반응을 유도할 수 있는 단백질 IE-62, IE-63 및 당단백질인 gE 유전자를 후보로 선정하였다. VZV 게놈의 종류는 총 5가지 클레이드(clade)로 나뉘어지며, 클레이드간 IE-62, IE-63, gE 아미노산 서열에는 큰 차이가 없다. 이상의 IE-62, IE-63, gE 유전자 서열로 플라스미드를 제조하였다. 상기 단백질들의 아미노산 서열은 서열목록 1 내지 3에 표시된 바와 같으며, 제조된 플라스미드의 DNA 서열은 서열목록 4 내지 6과 같다. 본 실시예에서의, DNA 백신에는 플라스미드 및 액상성분으로서 물 외에는 기타 성분이 포함되지 않았다.

마우스 실험

IE-62, IE-63 및 gE 유전자를 DNA 백신 후보물질로 제조하여 C57BL/6 마우스에 투여하고 비장세포를 분리하여 VZV 항원에 대한 T세포 면역원성을 평가하였다. 시험을 시행한 군은 총 5군이며 각 군당 5마리로 다음과 같은 조합으로 구성하였다.

1) Neg :　vector 로 접종한 군 (n=5)

2) IE62 :　IE-62 DNA 백신으로 접종한 군 (n=5)

3) IE63 :　IE-63 DNA 백신으로 접종한 군 (n=5)

4) gE :　gE DNA 백신으로 접종한 군 (n=5)

5) IE62+IE63+gE : IE-62, IE-63, gE DNA 백신을 혼합하여 접종한 군

전기천공기인 CELLECTRA^® (이노비오사 제조)를 이용하여 2주 간격으로 3번 접종하였으며, 매 접종시 DNA의 양은 마리당 30μg이었으며 혼합한 군은 DNA당 30μg씩 총 90μg을 매 접종하였다. 접종이 완료 된 12일 후 비장세포를 분리하여 면역평가를 시행하였다. 접종 스케쥴은 도 1에 도시된 바와 같다. 도 1은 본 발명에 일 실시예에 따른 접종 스케쥴을 보여주기 위한 도면이다.

시험용 항원의 제조

후보 유전자가 코딩하는 단백질에 대한 전체 면역반응을 체계적으로 측정하기 위해 중복 펩타이드 (overlapping peptides, OLPs) 시리즈를 고안하여 제조하였다. 각각의 중복 펩타이드는 15 아미노산으로 구성되며, 이웃한 펩타이드와 10 아미노산이 중복되게 고안하였다. IE-62, IE-63, gE 단백질 전체 아미노산 서열을 포함하도록 중복 펩타이드를 고안하였다. 261개의 IE-62 중복 펩타이드, 54개의 IE-63 중복 펩타이드, 124개의 gE 중복 펩타이드를 제조하였다. 연속된 37개 또는 38개의 IE-62 중복 펩타이드를 혼합하여 총 7가지 펩타이드 혼합물을 만들어 사용하였다. 연속된 27개의 IE-63 중복 펩타이드를 혼합하여 총 2가지 펩타이드 혼합물을 만들어 사용하였다. 연속된 40개 또는 41개의 gE 중복 펩타이드를 혼합하여 총 3가지 펩타이드 혼합물을 를 만들어 사용하였다. 음성대조군으로 5% DMSO를 사용하였고, 양성대조군으로 PMA(Phorbol Myristate Acetate) ionomycin을 혼합하여 사용하였다. 중복 펩타이드의 혼합으로 만든 펩타이드 혼합물을 아래 표 1에 나타내었다.

MRC-5 cell에 VZV를 감염시켜 만든 용해물(lysate)를 항원으로 사용하고, 이에 대응하는 음성 항원으로 MRC-5 cell 용해물을 사용하였다.

IFN-γ ELISPOT 어세이 프로토콜

한 웰 당 1ㅧ10⁶ 개의 비장세포를 넣어 ELISPOT 어세이(assay)를 시행하였다. 중복펩타이드 혼합물 자극시 웰당 각 중복펩타이드 농도가 1μg/ml 가 되도록 투여하였고, lysate 항원 자극시 well 당 50μg/ml 농도가 되도록 투여했으며 각 시험당 3번 반복시행을 하였다. 중복펩타이드 항원자극으로 얻은 검체 결과는 Mean of OLP pools specific spot forming cells (SFCs) - Mean of 5% DMSO specific SFCs 값으로 계산하였다. Lysate 항원자극으로 얻은 검체 결과는 Mean of VZV specific SFCs -Mean of MRC-5 specific SFCs 값으로 계산하였다. 각 웰 당 SFC 의 최대치는 500으로 계산하였다.

면역원성 실험결과

각 백신에 따른 항원 평가 결과, 음성 대조군으로 사용한 Neg 군에서는 어떠한 중복 펩타이드 자극에도 면역반응을 보이지 않았다. IE-62, IE-63, gE DNA 백신을 각각 단일 투여한 IE-62, IE-63, gE 군에서는 해당 단백질의 중복 펩타이드에 대해서만 면역반응을 보였다. IE-62, IE-63, gE DNA백신을 모두 투여한 IE62+IE63+gE 군에서는 세단백질의 중복 펩타이드에 대해서 모두 면역반응을 나타내었다. 후보 물질의 DNA백신 투여시, 후보 물질에 특이적인 중복펩타이드에 대해서만 면역반응을 나타내었다. 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 실험군들에 대한 면역원성 결과를 보여주는 그래프들이다.

도 3 및 도 4는 각 실험군의 단백질 중복펩타이드 면역반을을 비교한 결과를 보여주는 그래프이다. 도 3을 참조하면, 단일 DNA백신을 투여한 군과 세가지의 DNA백신을 혼합하여 투여한 군의 해당 단백질 중복펩타이드 면역반응을 비교한 결과, 세가지 DNA백신을 혼합하여 투여하면 단일 DNA백신을 투여했을 때보다 IE-62에 대한 면역반응은 43.3% 감소하였고, IE-63에 대한 면역반응은 차이가 없었으며, gE에 대한 면역반응은 9.6% 감소하였다.

항원 선정의 타당성

도 4를 참조하면, 각 실험군에 lysate 항원으로 자극한 결과, Neg 군에서는 면역반응을 보이지 않은 반면, 후보 물질의 DNA백신을 투여한 군에서는 강한 면역반응을 보였음을 확인하였다. 이러한 결과는 VZV에 감염된 세포에서는 IE-62, IE-63, gE 등의 단백질이 발현되고 있으며, 본 실험에서 후보물질로 선택한 IE-62, IE-63, gE에 대해 면역반응을 유도하면 VZV에 감염된 세포에 대해 면역반응이 작동할 수 있음을 확인할 수 있었다.

실험평가

IE-62, IE-63, gE 단백질을 코딩하는 유전자로 제조한 DNA백신을 실험동물 모델에서, 평가 및 분석한 결과, 단일 또는 혼합투여시 충분한 T세포 면역원성을 보였다. VZV 용해물 항원 자극을 통한 T세포 면역원성 분석 결과, IE-62, IE-63, gE를 백신의 후보 물질로 선정하는 것이 타당하다고 판단되었다.

[실험 2] 인비트로(in-vitro) 단백질 발현평가

발현확인 조건

- 세포도입(transfection) : RD cells (1x106 cells/ T75 flask), 30 ug of pDNA, Lipofectamine^ㄾ 2000, 세포도입 24 시간 후 cell harvest

* RD cell : 인간 횡문근육종 세포 (rhabdomyosarcoma)

- 세포 용해(cell lysis) : 2x10⁶ cells/90 ul RIPA buffer with Protease Inhibitor Cocktail

- SDS PAGE : LDS sample buffer with Reducing agent (DTT), 30 ul loading (lysate 19.5 ul), 4-12% Bis-Tris gel, MES running buffer, 165V, 35분

- Protein transfer : NC membrane, Dry blotting, 20V, 1분 → 23V, 4분 → 25V, 2분

- Protein detection : 1) Blocking 1hr, 2) Antibody reaction(1:100) 1hr 30min (HA-probe HRP (SantaCruz사, Cat. no. sc-805HRP), Goat anti-VZV IE62 (SantaCruz사, Cat. no. sc-17525), Donkey anti-goat IgG HRP (SantaCruz사, Cat. no. sc-2020), 3) HRP chromogenic substrate (Invitrogen사, Cat. no. WP20004)

발현확인 평가

도 5 내지 도 7은 각각의 플라스미드 유전자에 의하여 발현되는 생성물을 확인한 전기영동 사진들이다.

도 5를 참조하면 Lipofectamine^® 2000을 이용하여 IE-62 유전자를 코딩하는 플라스미드를 인간 횡문근육종 세포 (rhabdomyosarcoma)에서 유래된 RD세포에 도입 후 24시간 후에 세포를 용해하여 단백질을 추출하고 발현항원 검출용 항체를 이용하여 Western Blot을 수행하였다. IE-62 유전자를 코딩하는 플라스미드의 발현 단백질은 anti-VZV IE62 (SantaCruz사, cat.no. SC-2020)를 이용하여 검출하였고, HRP Chromogenic Substrates (Invitrogen Cat. no. WP20004) 를 사용하여 가시화 하였다. IE-62 유전자를 코딩하는 플라스미드로부터 발현되는 도입 유전자의 생성물 크기는 예측 분자량과 일치함을 확인하였으며, 이는 RD세포내에 도입된 유전자의 생성물이 VZV의 IE-62 항원 단백질임을 나타내는 것이다.

도 6을 참조하면, Lipofectamine^® 2000을 이용하여 IE-63 유전자를 코딩하는 플라스미드를 인간 횡문근육종 세포 (rhabdomyosarcoma)에서 유래된 RD세포에 도입 후 24시간 후에 세포를 용해하여 단백질을 추출하고 발현항원 검출용 항체를 이용하여 Western Blot을 수행하였다. IE-63 유전자를 코딩하는 플라스미드의 발현 단백질은 HA-probe HRP (SantaCruz사, cat.no. SC-805HRP)를 이용하여 검출하였고, HRP Chromogenic Substrates (Invitrogen Cat. no. WP20004) 를 사용하여 가시화 하였다. IE-63 유전자를 코딩하는 플라스미드로부터 발현되는 도입 유전자의 생성물 크기는 예측 분자량과 일치함을 확인하였으며, 이는 RD세포내에 도입된 유전자의 생성물이 VZV의 IE-63 항원 단백질임을 나타내는 것이다.

도 7을 참조하면, Lipofectamine^® 2000을 이용하여 gE 유전자를 코딩하는 플라스미드를 인간 횡문근육종 세포 (rhabdomyosarcoma)에서 유래된 RD세포에 도입 후 24시간 후에 세포를 용해하여 단백질을 추출하고 발현항원 검출용 항체를 이용하여 Western Blot을 수행하였다. gE 유전자를 코딩하는 플라스미드의 발현 단백질은 HA-probe HRP (SantaCruz사, cat.no. SC-805HRP)를 이용하여 검출하였고, HRP Chromogenic Substrates (Invitrogen Cat. no. WP20004) 를 사용하여 가시화 하였다. gE 유전자를 코딩하는 플라스미드로부터 발현되는 도입 유전자의 생성물 크기는 예측 분자량과 일치함을 확인하였으며, 이는 RD세포내에 도입된 유전자의 생성물이 VZV의 gE 항원 단백질임을 나타내는 것이다.

<110> GENEONE LIFE SCIENCE <120> DNA VACCINE COMPOSITION FOR PREVENTING AND TREATING HERPES ZOSTER AND METHOD OF ACTIVATING T-CELL TO VZV ANTIZEN BY USING THE SAME <130> KP14-001 <160> 6 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1328 <212> PRT <213> Varicella-Zoster Virus <400> 1 Met Asp Trp Thr Trp Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Arg Val 1 5 10 15 His Ser Met Asp Thr Pro Pro Met Gln Arg Ser Thr Pro Gln Arg Ala 20 25 30 Gly Ser Pro Asp Thr Leu Glu Leu Met Asp Leu Leu Asp Ala Ala Ala 35 40 45 Ala Ala Ala Glu His Arg Ala Arg Val Val Thr Ser Ser Gln Pro Asp 50 55 60 Asp Leu Leu Phe Gly Glu Asn Gly Val Met Val Gly Arg Glu His Glu 65 70 75 80 Ile Val Ser Ile Pro Ser Val Ser Gly Leu Gln Pro Glu Pro Arg Thr 85 90 95 Glu Asp Val Gly Glu Glu Leu Thr Gln Asp Asp Tyr Val Cys Glu Asp 100 105 110 Gly Gln Asp Leu Met Gly Ser Pro Val Ile Pro Leu Ala Glu Val Phe 115 120 125 His Thr Arg Phe Ser Glu Ala Gly Ala Arg Glu Pro Thr Gly Ala Asp 130 135 140 Arg Ser Leu Glu Thr Val Ser Leu Gly Thr Lys Leu Ala Arg Ser Pro 145 150 155 160 Lys Pro Pro Met Asn Asp Gly Glu Thr Gly Arg Gly Thr Thr Pro Pro 165 170 175 Phe Pro Gln Ala Phe Ser Pro Val Ser Pro Ala Ser Pro Val Gly Asp 180 185 190 Ala Ala Gly Asn Asp Gln Arg Glu Asp Gln Arg Ser Ile Pro Arg Gln 195 200 205 Thr Thr Arg Gly Asn Ser Pro Gly Leu Pro Ser Val Val His Arg Asp 210 215 220 Arg Gln Thr Gln Ser Ile Ser Gly Lys Lys Pro Gly Asp Glu Gln Ala 225 230 235 240 Gly His Ala His Ala Ser Gly Asp Gly Val Val Leu Gln Lys Thr Gln 245 250 255 Arg Pro Ala Gln Gly Lys Ser Pro Lys Lys Lys Thr Leu Lys Val Lys 260 265 270 Val Pro Leu Pro Ala Arg Lys Pro Gly Gly Pro Val Pro Gly Pro Val 275 280 285 Glu Gln Leu Tyr His Val Leu Ser Asp Ser Val Pro Ala Lys Gly Ala 290 295 300 Lys Ala Asp Leu Pro Phe Glu Thr Asp Asp Thr Arg Pro Arg Lys His 305 310 315 320 Asp Ala Arg Gly Ile Thr Pro Arg Val Pro Gly Arg Ser Ser Gly Gly 325 330 335 Lys Pro Arg Ala Phe Leu Ala Leu Pro Gly Arg Ser His Ala Pro Asp 340 345 350 Pro Ile Glu Asp Asp Ser Pro Val Glu Lys Lys Pro Lys Ser Arg Glu 355 360 365 Phe Val Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Trp Gly Ser Ser Ser Glu 370 375 380 Asp Glu Asp Asp Glu Pro Arg Arg Val Ser Val Gly Ser Glu Thr Thr 385 390 395 400 Gly Ser Arg Ser Gly Arg Glu His Ala Pro Ser Pro Ser Asn Ser Asp 405 410 415 Asp Ser Asp Ser Asn Asp Gly Gly Ser Thr Lys Gln Asn Ile Gln Pro 420 425 430 Gly Tyr Arg Ser Ile Ser Gly Pro Asp Pro Arg Ile Arg Lys Thr Lys 435 440 445 Arg Leu Ala Gly Glu Pro Gly Arg Gln Arg Gln Lys Ser Phe Ser Leu 450 455 460 Pro Arg Ser Arg Thr Pro Ile Ile Pro Pro Val Ser Gly Pro Leu Met 465 470 475 480 Met Pro Asp Gly Ser Pro Trp Pro Gly Ser Ala Pro Leu Pro Ser Asn 485 490 495 Arg Val Arg Phe Gly Pro Ser Gly Glu Thr Arg Glu Gly His Trp Glu 500 505 510 Asp Glu Ala Val Arg Ala Ala Arg Ala Arg Tyr Glu Ala Ser Thr Glu 515 520 525 Pro Val Pro Leu Tyr Val Pro Glu Leu Gly Asp Pro Ala Arg Gln Tyr 530 535 540 Arg Ala Leu Ile Asn Leu Ile Tyr Cys Pro Asp Arg Asp Pro Ile Ala 545 550 555 560 Trp Leu Gln Asn Pro Lys Leu Thr Gly Val Asn Ser Ala Leu Asn Gln 565 570 575 Phe Tyr Gln Lys Leu Leu Pro Pro Gly Arg Ala Gly Thr Ala Val Thr 580 585 590 Gly Ser Val Ala Ser Pro Val Pro His Val Gly Glu Ala Met Ala Thr 595 600 605 Gly Glu Ala Leu Trp Ala Leu Pro His Ala Ala Ala Ala Val Ala Met 610 615 620 Ser Arg Arg Tyr Asp Arg Ala Gln Lys His Phe Ile Leu Gln Ser Leu 625 630 635 640 Arg Arg Ala Phe Ala Ser Met Ala Tyr Pro Glu Ala Thr Gly Ser Ser 645 650 655 Pro Ala Ala Arg Ile Ser Arg Gly His Pro Ser Pro Thr Thr Pro Ala 660 665 670 Thr Gln Thr Pro Asp Pro Gln Pro Ser Ala Ala Ala Arg Ser Leu Ser 675 680 685 Val Cys Pro Pro Asp Asp Arg Leu Arg Thr Pro Arg Lys Arg Lys Ser 690 695 700 Gln Pro Val Glu Ser Arg Ser Leu Leu Asp Lys Ile Arg Glu Thr Pro 705 710 715 720 Val Ala Asp Ala Arg Val Ala Asp Asp His Val Val Ser Lys Ala Lys 725 730 735 Arg Arg Val Ser Glu Pro Val Thr Ile Thr Ser Gly Pro Val Val Asp 740 745 750 Pro Pro Ala Val Ile Thr Met Pro Leu Asp Gly Pro Ala Pro Asn Gly 755 760 765 Gly Phe Arg Arg Ile Pro Arg Gly Ala Leu His Thr Pro Val Pro Ser 770 775 780 Asp Gln Ala Arg Lys Ala Tyr Cys Thr Pro Glu Thr Ile Ala Arg Leu 785 790 795 800 Val Asp Asp Pro Leu Phe Pro Thr Ala Trp Arg Pro Ala Leu Ser Phe 805 810 815 Asp Pro Gly Ala Leu Ala Glu Ile Ala Ala Arg Arg Pro Gly Gly Gly 820 825 830 Asp Arg Arg Phe Gly Pro Pro Ser Gly Val Glu Ala Leu Arg Arg Arg 835 840 845 Cys Ala Trp Met Arg Gln Ile Pro Asp Pro Glu Asp Val Arg Leu Leu 850 855 860 Ile Ile Tyr Asp Pro Leu Pro Gly Glu Asp Ile Asn Gly Pro Leu Glu 865 870 875 880 Ser Thr Leu Ala Thr Asp Pro Gly Pro Ser Trp Ser Pro Ser Arg Gly 885 890 895 Gly Leu Ser Val Val Leu Ala Ala Leu Ser Asn Arg Leu Cys Leu Pro 900 905 910 Ser Thr His Ala Trp Ala Gly Asn Trp Thr Gly Pro Pro Asp Val Ser 915 920 925 Ala Leu Asn Ala Arg Gly Val Leu Leu Leu Ser Thr Arg Asp Leu Ala 930 935 940 Phe Ala Gly Ala Val Glu Tyr Leu Gly Ser Arg Leu Ala Ser Ala Arg 945 950 955 960 Arg Arg Leu Leu Val Leu Asp Ala Val Ala Leu Glu Arg Trp Pro Arg 965 970 975 Asp Gly Pro Ala Leu Ser Gln Tyr His Val Tyr Val Arg Ala Pro Ala 980 985 990 Arg Pro Asp Ala Gln Ala Val Val Arg Trp Pro Asp Ser Ala Val Thr 995 1000 1005 Glu Gly Leu Ala Arg Ala Val Phe Ala Ser Ser Arg Thr Phe Gly Pro 1010 1015 1020 Ala Ser Phe Ala Arg Ile Glu Thr Ala Phe Ala Asn Leu Tyr Pro Gly 1025 1030 1035 1040 Glu Gln Pro Leu Cys Leu Cys Arg Gly Gly Asn Val Ala Tyr Thr Val 1045 1050 1055 Cys Thr Arg Ala Gly Pro Lys Thr Arg Val Pro Leu Ser Pro Arg Glu 1060 1065 1070 Tyr Arg Gln Tyr Val Leu Pro Gly Phe Asp Gly Cys Lys Asp Leu Ala 1075 1080 1085 Arg Gln Ser Arg Gly Leu Gly Leu Gly Ala Ala Asp Phe Val Asp Glu 1090 1095 1100 Ala Ala His Ser His Arg Ala Ala Asn Arg Trp Gly Leu Gly Ala Ala 1105 1110 1115 1120 Leu Arg Pro Val Phe Leu Pro Glu Gly Arg Arg Pro Gly Ala Ala Gly 1125 1130 1135 Pro Glu Ala Gly Asp Val Pro Thr Trp Ala Arg Val Phe Cys Arg His 1140 1145 1150 Ala Leu Leu Glu Pro Asp Pro Ala Ala Glu Pro Leu Val Leu Pro Pro 1155 1160 1165 Val Ala Gly Arg Ser Val Ala Leu Tyr Ala Ser Ala Asp Glu Ala Arg 1170 1175 1180 Asn Ala Leu Pro Pro Ile Pro Arg Val Met Trp Pro Pro Gly Phe Gly 1185 1190 1195 1200 Ala Ala Glu Thr Val Leu Glu Gly Ser Asp Gly Thr Arg Phe Val Phe 1205 1210 1215 Gly His His Gly Gly Ser Glu Arg Pro Ala Glu Thr Gln Ala Gly Arg 1220 1225 1230 Gln Arg Arg Thr Ala Asp Asp Arg Glu His Ala Leu Glu Pro Asp Asp 1235 1240 1245 Trp Glu Val Gly Cys Glu Asp Ala Trp Asp Ser Glu Glu Gly Gly Gly 1250 1255 1260 Asp Asp Gly Asp Ala Pro Gly Ser Ser Phe Gly Val Ser Ile Val Ser 1265 1270 1275 1280 Val Ala Pro Gly Val Leu Arg Asp Arg Arg Val Gly Leu Arg Pro Ala 1285 1290 1295 Val Lys Val Glu Leu Leu Ser Ser Ser Ser Ser Ser Glu Asp Glu Asp 1300 1305 1310 Asp Val Trp Gly Gly Arg Gly Gly Arg Ser Pro Pro Gln Ser Arg Gly 1315 1320 1325 <210> 2 <211> 296 <212> PRT <213> Varicella-Zoster Virus <400> 2 Met Asp Trp Thr Trp Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Arg Val 1 5 10 15 His Ser Met Phe Cys Thr Ser Pro Ala Thr Arg Gly Asp Ser Ser Glu 20 25 30 Ser Lys Pro Gly Ala Ser Val Asp Val Asn Gly Lys Met Glu Tyr Gly 35 40 45 Ser Ala Pro Gly Pro Leu Asn Gly Arg Asp Thr Ser Arg Gly Pro Gly 50 55 60 Ala Phe Cys Thr Pro Gly Trp Glu Ile His Pro Ala Arg Leu Val Glu 65 70 75 80 Asp Ile Asn Arg Val Phe Leu Cys Ile Ala Gln Ser Ser Gly Arg Val 85 90 95 Thr Arg Asp Ser Arg Arg Leu Arg Arg Ile Cys Leu Asp Phe Tyr Leu 100 105 110 Met Gly Arg Thr Arg Gln Arg Pro Thr Leu Ala Cys Trp Glu Glu Leu 115 120 125 Leu Gln Leu Gln Pro Thr Gln Thr Gln Cys Leu Arg Ala Thr Leu Met 130 135 140 Glu Val Ser His Arg Pro Pro Arg Gly Glu Asp Gly Phe Ile Glu Ala 145 150 155 160 Pro Asn Val Pro Leu His Arg Ser Ala Leu Glu Cys Asp Val Ser Asp 165 170 175 Asp Gly Gly Glu Asp Asp Ser Asp Asp Asp Gly Ser Thr Pro Ser Asp 180 185 190 Val Ile Glu Phe Arg Asp Ser Asp Ala Glu Ser Ser Asp Gly Glu Asp 195 200 205 Phe Ile Val Glu Glu Glu Ser Glu Glu Ser Thr Asp Ser Cys Glu Pro 210 215 220 Asp Gly Val Pro Gly Asp Cys Tyr Arg Asp Gly Asp Gly Cys Asn Thr 225 230 235 240 Pro Ser Pro Lys Arg Pro Gln Arg Ala Ile Glu Arg Tyr Ala Gly Ala 245 250 255 Glu Thr Ala Glu Tyr Thr Ala Ala Lys Ala Leu Thr Ala Leu Gly Glu 260 265 270 Gly Gly Val Asp Trp Lys Arg Arg Arg His Glu Ala Pro Arg Arg His 275 280 285 Asp Ile Pro Pro Pro His Gly Val 290 295 <210> 3 <211> 641 <212> PRT <213> Varicella-Zoster Virus <400> 3 Met Asp Trp Thr Trp Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Arg Val 1 5 10 15 His Ser Met Gly Thr Val Asn Lys Pro Val Val Gly Val Leu Met Gly 20 25 30 Phe Gly Ile Ile Thr Gly Thr Leu Arg Ile Thr Asn Pro Val Arg Ala 35 40 45 Ser Val Leu Arg Tyr Asp Asp Phe His Ile Asp Glu Asp Lys Leu Asp 50 55 60 Thr Asn Ser Val Tyr Glu Pro Tyr Tyr His Ser Asp His Ala Glu Ser 65 70 75 80 Ser Trp Val Asn Arg Gly Glu Ser Ser Arg Lys Ala Tyr Asp His Asn 85 90 95 Ser Pro Tyr Ile Trp Pro Arg Asn Asp Tyr Asp Gly Phe Leu Glu Asn 100 105 110 Ala His Glu His His Gly Val Tyr Asn Gln Gly Arg Gly Ile Asp Ser 115 120 125 Gly Glu Arg Leu Met Gln Pro Thr Gln Met Ser Ala Gln Glu Asp Leu 130 135 140 Gly Asp Asp Thr Gly Ile His Val Ile Pro Thr Leu Asn Gly Asp Asp 145 150 155 160 Arg His Lys Ile Val Asn Val Asp Gln Arg Gln Tyr Gly Asp Val Phe 165 170 175 Lys Gly Asp Leu Asn Pro Lys Pro Gln Gly Gln Arg Leu Ile Glu Val 180 185 190 Ser Val Glu Glu Asn His Pro Phe Thr Leu Arg Ala Pro Ile Gln Arg 195 200 205 Ile Tyr Gly Val Arg Tyr Thr Glu Thr Trp Ser Phe Leu Pro Ser Leu 210 215 220 Thr Cys Thr Gly Asp Ala Ala Pro Ala Ile Gln His Ile Cys Leu Lys 225 230 235 240 His Thr Thr Cys Phe Gln Asp Val Val Val Asp Val Asp Cys Ala Glu 245 250 255 Asn Thr Lys Glu Asp Gln Leu Ala Glu Ile Ser Tyr Arg Phe Gln Gly 260 265 270 Lys Lys Glu Ala Asp Gln Pro Trp Ile Val Val Asn Thr Ser Thr Leu 275 280 285 Phe Asp Glu Leu Glu Leu Asp Pro Pro Glu Ile Glu Pro Gly Val Leu 290 295 300 Lys Val Leu Arg Thr Glu Lys Gln Tyr Leu Gly Val Tyr Ile Trp Asn 305 310 315 320 Met Arg Gly Ser Asp Gly Thr Ser Thr Tyr Ala Thr Phe Leu Val Thr 325 330 335 Trp Lys Gly Asp Glu Lys Thr Arg Asn Pro Thr Pro Ala Val Thr Pro 340 345 350 Gln Pro Arg Gly Ala Glu Phe His Met Trp Asn Tyr His Ser His Val 355 360 365 Phe Ser Val Gly Asp Thr Phe Ser Leu Ala Met His Leu Gln Tyr Lys 370 375 380 Ile His Glu Ala Pro Phe Asp Leu Leu Leu Glu Trp Leu Tyr Val Pro 385 390 395 400 Ile Asp Pro Thr Cys Gln Pro Met Arg Leu Tyr Ser Thr Cys Leu Tyr 405 410 415 His Pro Asn Ala Pro Gln Cys Leu Ser His Met Asn Ser Gly Cys Thr 420 425 430 Phe Thr Ser Pro His Leu Ala Gln Arg Val Ala Ser Thr Val Tyr Gln 435 440 445 Asn Cys Glu His Ala Asp Asn Tyr Thr Ala Tyr Cys Leu Gly Ile Ser 450 455 460 His Met Glu Pro Ser Phe Gly Leu Ile Leu His Asp Gly Gly Thr Thr 465 470 475 480 Leu Lys Phe Val Asp Thr Pro Glu Ser Leu Ser Gly Leu Tyr Val Phe 485 490 495 Val Val Tyr Phe Asn Gly His Val Glu Ala Val Ala Tyr Thr Val Val 500 505 510 Ser Thr Val Asp His Phe Val Asn Ala Ile Glu Glu Arg Gly Phe Pro 515 520 525 Pro Thr Ala Gly Gln Pro Pro Ala Thr Thr Lys Pro Lys Glu Ile Thr 530 535 540 Pro Val Asn Pro Gly Thr Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ala Ala Trp Thr 545 550 555 560 Gly Gly Leu Ala Ala Val Val Leu Leu Cys Leu Val Ile Phe Leu Ile 565 570 575 Cys Thr Ala Lys Arg Met Arg Val Lys Ala Tyr Arg Val Asp Lys Ser 580 585 590 Pro Tyr Asn Gln Ser Met Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Val Asp Asp Phe 595 600 605 Glu Asp Ser Glu Ser Thr Asp Thr Glu Glu Glu Phe Gly Asn Ala Ile 610 615 620 Gly Gly Ser His Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Val Tyr Ile Asp Lys Thr 625 630 635 640 Arg <210> 4 <211> 6951 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pGX-5101 <400> 4 gctgcttcgc gatgtacggg ccagatatac gcgttgacat tgattattga ctagttatta 60 atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc gcgttacata 120 acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat 180 aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc aatgggtgga 240 gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc 300 ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt 360 atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat 420 gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag 480 tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc 540 aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga 600 ggtctatata agcagagctc tctggctaac tagagaaccc actgcttact ggcttatcga 660 aattaatacg actcactata gggagaccca agctggctag cgtttaaact taagcttggt 720 accgagctcg gatccgccac catggactgg acctggattc tgttcctggt ggccgctgcc 780 acacgggtgc acagcatgga tacccccccc atgcagagaa gcacccctca gagagccggc 840 agccccgaca ccctggaact gatggatctg ctggatgccg ccgctgctgc cgccgaacat 900 agagccagag tggtcaccag cagccagccc gacgatctgc tgttcggcga gaacggcgtg 960 atggtcggaa gagaacacga gatcgtgtcc atccccagcg tgtccggact gcagcctgag 1020 cccagaacag aggacgtggg cgaggaactg acccaggacg actacgtgtg cgaggacggc 1080 caggatctga tgggcagccc tgtgattccc ctggccgagg tgttccacac cagattcagc 1140 gaggcaggcg ccagagagcc cacaggcgcc gatagaagcc tggaaaccgt gtccctgggc 1200 accaagctgg ccagatcccc caagcccccc atgaacgatg gcgagacagg cagaggcacc 1260 accccaccat tccctcaggc cttctctcct gtgtcccctg ccagcccagt gggcgacgct 1320 gccggaaacg atcagagaga ggaccagcgg agcatcccca gacagaccac cagaggcaat 1380 agccctggcc tgcctagcgt ggtgcaccgg gatagacaga cccagagcat cagcggcaag 1440 aagccaggcg acgaacaggc cggacatgcc catgctagcg gagatggcgt ggtgctgcag 1500 aaaacccaga ggcctgccca gggcaagagc cccaagaaaa agaccctgaa agtgaaggtg 1560 cccctgcccg ccagaaagcc tggtggacct gtgcctggac ccgtggaaca gctgtatcac 1620 gtgctgagcg acagcgtgcc agccaagggc gccaaggccg atctgccctt cgagacagac 1680 gacacccggc ccagaaagca cgacgccaga ggcatcacac ccagagtgcc aggcagaagc 1740 tccggcggca agcctagagc ctttctggcc ctgcccggaa gaagccacgc ccccgatcct 1800 atcgaggacg acagccccgt ggaaaagaag cccaagagcc gcgagttcgt gtcctccagc 1860 agcagctcta gcagctgggg cagctccagc gaggacgagg acgatgagcc tagaagagtg 1920 tccgtgggca gcgagacaac cggcagcaga tctggcagag agcacgcccc cagccccagc 1980 aactccgacg acagcgatag caatgacggc ggctccacca agcagaacat ccagcctggc 2040 taccggtcca tctccggccc tgacccccgg atcagaaaga ccaagagact ggccggcgag 2100 cccggcagac agagacagaa gtccttcagc ctgccccggt ccagaacccc catcatccct 2160 ccagtgtccg gccctctgat gatgcccgat ggctctcctt ggcctggcag cgcccctctg 2220 ccctccaata gagtcagatt cggccccagc ggcgagacaa gagagggaca ttgggaggac 2280 gaagccgtgc gggctgccag agccagatac gaggcctcta cagagcccgt gcctctgtac 2340 gtgccagagc tgggagatcc cgccagacag taccgggccc tgatcaacct gatctactgc 2400 cccgaccggg accccattgc ctggctgcag aatcctaagc tgaccggcgt gaacagcgcc 2460 ctgaaccagt tctaccagaa gctgctgcct cctggcagag ccggaacagc cgtgacagga 2520 tctgtggcct ctccagtgcc tcacgtggga gaagccatgg ccacaggcga agctctgtgg 2580 gccctgcctc atgctgctgc agctgtggct atgagcagaa gatacgaccg cgcccagaag 2640 cacttcatcc tgcagagcct gcggagagcc ttcgccagca tggcctatcc tgaggccacc 2700 ggatctagcc cagccgccag aatcagcaga ggccacccta gccctaccac ccctgccaca 2760 cagacccctg atcctcagcc tagcgctgcc gccagatctc tgagcgtgtg cccccctgac 2820 gacagactgc ggacccctag aaagcggaag tcccagcccg tggaatcccg gtccctgctg 2880 gacaagatca gagaaacccc cgtggccgac gccagggtgg ccgatgatca tgtggtgtcc 2940 aaggccaagc ggcgggtgtc cgagcctgtg acaatcacaa gcggccctgt ggtggacccc 3000 cctgccgtga tcacaatgcc actggacgga cctgccccca acggcggctt cagaagaatt 3060 cctagaggcg ccctgcacac ccccgtgcct agcgatcagg ccagaaaagc ctactgcacc 3120 cccgagacaa tcgccagact ggtggacgac cctctgttcc caacagcctg gcggcctgcc 3180 ctgtcttttg atcctggcgc tctggccgaa atcgccgcta gaaggccagg cggaggcgac 3240 agaagatttg gccctcctag cggcgtggaa gccctgaggc gaagatgcgc ctggatgaga 3300 cagatccccg accccgaaga tgtgcggctg ctgatcatct acgaccccct gcctggcgag 3360 gacatcaacg gcccactgga aagcaccctg gccaccgacc ctggaccatc ctggtcacct 3420 tctagaggcg gactgtctgt ggtgctggcc gccctgagca acagactgtg tctgccttct 3480 acacacgcct gggccggcaa ttggacaggc cctcctgatg tgtccgccct gaatgccaga 3540 ggcgtcctgc tgctgtctac ccgggatctc gctttcgctg gcgccgtgga atacctgggc 3600 tctagactgg ctagcgctcg gcggagactg ctggtcctgg atgctgtggc cctggaacgg 3660 tggcctagag atggcccagc cctgagccag taccatgtgt atgtgcgcgc tcccgccagg 3720 cctgatgcac aggcagtcgt cagatggccc gattctgccg tgaccgaagg actggccaga 3780 gccgtgtttg ccagctccag aacattcggc ccagccagct tcgcccggat cgagacagcc 3840 tttgccaacc tgtaccccgg cgagcagccc ctgtgtctgt gtagaggcgg caacgtggcc 3900 tacaccgtgt gtaccagagc cggccctaag accagggtgc cactgagccc tcgggaatac 3960 cggcagtacg tgctgcccgg cttcgacggc tgtaaagacc tggccagaca gagcaggggc 4020 ctgggactgg gagccgctga ttttgtggat gaggccgccc acagccacag agccgccaat 4080 agatggggac tgggcgctgc tctgaggccc gtgtttctgc cagagggtag acgaccaggc 4140 gccgctggac ctgaagcagg ggatgtgcct acctgggcca gagtgttttg tcggcacgct 4200 ctgctggaac ccgatccagc cgctgaacct ctggtgctgc cacctgtggc tggaagatcc 4260 gtggccctgt acgcctctgc cgacgaagcc agaaatgccc tgccccccat ccctagagtg 4320 atgtggcctc ctggattcgg cgctgccgag acagtgctgg aaggcagcga cggcaccaga 4380 tttgtgtttg gccaccacgg cggaagcgag cggcctgctg aaacacaggc tggccggcag 4440 agaagaaccg ccgacgatag ggaacacgcc ctcgagcccg atgactggga agtgggctgt 4500 gaagatgcct gggacagcga agagggtggc ggagatgatg gcgacgcccc tggcagctcc 4560 ttcggagtgt ctatcgtgtc tgtggcccct ggcgtgctgc gggacagaag agtgggactg 4620 aggccagccg tgaaggtgga actgctgagc agctcctcca gctccgagga tgaggatgac 4680 gtgtggggcg gaaggggcgg cagaagccct ccacagagta gaggatgatg agcggccgct 4740 cgagtctaga gggcccgttt aaacccgctg atcagcctcg actgtgcctt ctagttgcca 4800 gccatctgtt gtttgcccct cccccgtgcc ttccttgacc ctggaaggtg ccactcccac 4860 tgtcctttcc taataaaatg aggaaattgc atcgcattgt ctgagtaggt gtcattctat 4920 tctggggggt ggggtggggc aggacagcaa gggggaggat tgggaagaca atagcaggca 4980 tgctggggat gcggtgggct ctatggcttc tactgggcgg ttttatggac agcaagcgaa 5040 ccggaattgc cagctggggc gccctctggt aaggttggga agccctgcaa agtaaactgg 5100 atggctttct tgccgccaag gatctgatgg cgcaggggat caagctctga tcaagagaca 5160 ggatgaggat cgtttcgcat gattgaacaa gatggattgc acgcaggttc tccggccgct 5220 tgggtggaga ggctattcgg ctatgactgg gcacaacaga caatcggctg ctctgatgcc 5280 gccgtgttcc ggctgtcagc gcaggggcgc ccggttcttt ttgtcaagac cgacctgtcc 5340 ggtgccctga atgaactgca agacgaggca gcgcggctat cgtggctggc cacgacgggc 5400 gttccttgcg cagctgtgct cgacgttgtc actgaagcgg gaagggactg gctgctattg 5460 ggcgaagtgc cggggcagga tctcctgtca tctcaccttg ctcctgccga gaaagtatcc 5520 atcatggctg atgcaatgcg gcggctgcat acgcttgatc cggctacctg cccattcgac 5580 caccaagcga aacatcgcat cgagcgagca cgtactcgga tggaagccgg tcttgtcgat 5640 caggatgatc tggacgaaga gcatcagggg ctcgcgccag ccgaactgtt cgccaggctc 5700 aaggcgagca tgcccgacgg cgaggatctc gtcgtgaccc atggcgatgc ctgcttgccg 5760 aatatcatgg tggaaaatgg ccgcttttct ggattcatcg actgtggccg gctgggtgtg 5820 gcggaccgct atcaggacat agcgttggct acccgtgata ttgctgaaga gcttggcggc 5880 gaatgggctg accgcttcct cgtgctttac ggtatcgccg ctcccgattc gcagcgcatc 5940 gccttctatc gccttcttga cgagttcttc tgaattatta acgcttacaa tttcctgatg 6000 cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcatcaggtg gcacttttcg 6060 gggaaatgtg cgcggaaccc ctatttgttt atttttctaa atacattcaa atatgtatcc 6120 gctcatgaga caataaccct gataaatgct tcaataatag cacgtgctaa aacttcattt 6180 ttaatttaaa aggatctagg tgaagatcct ttttgataat ctcatgacca aaatccctta 6240 acgtgagttt tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg 6300 agatcctttt tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc 6360 ggtggtttgt ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag 6420 cagagcgcag ataccaaata ctgttcttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa 6480 gaactctgta gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc 6540 cagtggcgat aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc 6600 gcagcggtcg ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta 6660 caccgaactg agatacctac agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag 6720 aaaggcggac aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct 6780 tccaggggga aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga 6840 gcgtcgattt ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc 6900 ggccttttta cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct t 6951 <210> 5 <211> 3855 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pGX-5102 <400> 5 gctgcttcgc gatgtacggg ccagatatac gcgttgacat tgattattga ctagttatta 60 atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc gcgttacata 120 acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat 180 aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc aatgggtgga 240 gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc 300 ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt 360 atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat 420 gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag 480 tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc 540 aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga 600 ggtctatata agcagagctc tctggctaac tagagaaccc actgcttact ggcttatcga 660 aattaatacg actcactata gggagaccca agctggctag cgtttaaact taagcttggt 720 accgagctcg gatccgccac catggactgg acctggattc tgttcctggt ggccgctgcc 780 acccgggtgc acagcatgtt ctgcaccagc cccgccacca gaggcgacag cagcgagtct 840 aagcctggcg ccagcgtgga cgtgaacggc aagatggaat acggcagcgc ccctggcccc 900 ctgaacggca gagatacaag cagaggccct ggcgccttct gcacccccgg atgggagatc 960 caccccgcca gactggtgga agatatcaac cgggtgttcc tgtgtatcgc ccagagcagc 1020 ggcagagtga cccgggacag cagacggctg cggcggatct gcctggactt ctacctgatg 1080 ggccggaccc ggcagaggcc taccctggcc tgttgggagg aactgctgca gctgcagccc 1140 acccagaccc agtgcctgcg ggccaccctg atggaagtgt cccacagacc ccccagaggc 1200 gaggacggct tcatcgaggc ccccaacgtg cccctgcacc gcagcgctct ggaatgcgac 1260 gtgtccgacg acggcggcga ggacgacagc gacgatgatg gcagcacccc cagcgacgtg 1320 atcgagttca gagacagcga cgccgagagc agcgacggcg aggacttcat cgtggaagag 1380 gaaagcgagg aatccaccga cagctgcgag cccgatggcg tgcccggcga ctgctataga 1440 gatggcgacg gctgcaacac ccccagcccc aagaggcccc agcgggccat cgaaagatac 1500 gctggcgccg agacagccga gtacaccgcc gccaaagccc tgacagccct gggcgaaggc 1560 ggcgtggact ggaagagaag aaggcacgag gcccctcggc ggcacgacat tcctccacct 1620 catggcgtgt agtgagcggc cgctcgagtc tagagggccc gtttaaaccc gctgatcagc 1680 ctcgactgtg ccttctagtt gccagccatc tgttgtttgc ccctcccccg tgccttcctt 1740 gaccctggaa ggtgccactc ccactgtcct ttcctaataa aatgaggaaa ttgcatcgca 1800 ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg gggcaggaca gcaaggggga 1860 ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg ggctctatgg cttctactgg 1920 gcggttttat ggacagcaag cgaaccggaa ttgccagctg gggcgccctc tggtaaggtt 1980 gggaagccct gcaaagtaaa ctggatggct ttcttgccgc caaggatctg atggcgcagg 2040 ggatcaagct ctgatcaaga gacaggatga ggatcgtttc gcatgattga acaagatgga 2100 ttgcacgcag gttctccggc cgcttgggtg gagaggctat tcggctatga ctgggcacaa 2160 cagacaatcg gctgctctga tgccgccgtg ttccggctgt cagcgcaggg gcgcccggtt 2220 ctttttgtca agaccgacct gtccggtgcc ctgaatgaac tgcaagacga ggcagcgcgg 2280 ctatcgtggc tggccacgac gggcgttcct tgcgcagctg tgctcgacgt tgtcactgaa 2340 gcgggaaggg actggctgct attgggcgaa gtgccggggc aggatctcct gtcatctcac 2400 cttgctcctg ccgagaaagt atccatcatg gctgatgcaa tgcggcggct gcatacgctt 2460 gatccggcta cctgcccatt cgaccaccaa gcgaaacatc gcatcgagcg agcacgtact 2520 cggatggaag ccggtcttgt cgatcaggat gatctggacg aagagcatca ggggctcgcg 2580 ccagccgaac tgttcgccag gctcaaggcg agcatgcccg acggcgagga tctcgtcgtg 2640 acccatggcg atgcctgctt gccgaatatc atggtggaaa atggccgctt ttctggattc 2700 atcgactgtg gccggctggg tgtggcggac cgctatcagg acatagcgtt ggctacccgt 2760 gatattgctg aagagcttgg cggcgaatgg gctgaccgct tcctcgtgct ttacggtatc 2820 gccgctcccg attcgcagcg catcgccttc tatcgccttc ttgacgagtt cttctgaatt 2880 attaacgctt acaatttcct gatgcggtat tttctcctta cgcatctgtg cggtatttca 2940 caccgcatca ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga acccctattt gtttattttt 3000 ctaaatacat tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa ccctgataaa tgcttcaata 3060 atagcacgtg ctaaaacttc atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga 3120 taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt 3180 agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca 3240 aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct 3300 ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgttc ttctagtgta 3360 gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct 3420 aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc 3480 aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca 3540 gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agctatgaga 3600 aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg 3660 aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt 3720 cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag 3780 cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt 3840 tgctcacatg ttctt 3855 <210> 6 <211> 4890 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pGX-5103 <400> 6 gctgcttcgc gatgtacggg ccagatatac gcgttgacat tgattattga ctagttatta 60 atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc gcgttacata 120 acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat 180 aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc aatgggtgga 240 gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc 300 ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt 360 atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat 420 gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag 480 tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc 540 aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga 600 ggtctatata agcagagctc tctggctaac tagagaaccc actgcttact ggcttatcga 660 aattaatacg actcactata gggagaccca agctggctag cgtttaaact taagcttggt 720 accgagctcg gatccgccac catggactgg acctggattc tgttcctggt ggccgctgcc 780 acccgggtgc acagcatggg caccgtgaac aagcccgtcg tgggagtgct gatgggcttc 840 ggcatcatca ccggcaccct gcggatcacc aaccccgtgc gggccagcgt gctgagatac 900 gacgacttcc acatcgacga ggacaagctg gacaccaaca gcgtgtacga gccctactac 960 cacagcgacc acgccgagag cagctgggtg aaccggggcg agagcagccg gaaggcctac 1020 gaccacaaca gcccctacat ctggccccgg aacgactacg acggcttcct ggaaaacgcc 1080 cacgagcacc acggcgtgta caaccagggc agaggcatcg acagcggcga gcggctgatg 1140 cagcctaccc agatgagcgc ccaggaagat ctgggcgacg acaccggcat ccacgtgatc 1200 cccaccctga acggcgacga ccggcacaag atcgtgaacg tggaccagcg gcagtacggc 1260 gacgtgttca agggcgacct gaaccccaag ccccagggcc agagactgat cgaggtgtcc 1320 gtggaagaga accacccctt caccctgaga gcccccatcc agcggatcta cggcgtgcgg 1380 tataccgaga cttggagctt cctgcccagc ctgacctgca ccggggatgc cgcccctgcc 1440 atccagcaca tctgcctgaa gcacaccacc tgtttccagg acgtggtggt ggacgtggac 1500 tgcgccgaga acaccaaaga ggaccagctg gccgagatca gctaccggtt ccagggcaag 1560 aaagaggccg accagccctg gatcgtggtg aacaccagca ccctgttcga cgagctggaa 1620 ctggaccccc ccgagatcga gcccggcgtg ctgaaggtgc tgcggaccga gaagcagtac 1680 ctgggcgtgt acatctggaa catgcggggc agcgacggca ccagcaccta cgccaccttt 1740 ctggtgacat ggaagggcga cgagaaaacc cggaacccca cccctgccgt gacccctcag 1800 cctagaggcg ccgagtttca catgtggaac taccactccc acgtgttcag cgtgggcgac 1860 accttcagcc tggccatgca tctgcagtac aagatccacg aggccccctt cgacctgctg 1920 ctggaatggc tgtacgtgcc catcgaccct acctgccagc ccatgcggct gtacagcacc 1980 tgtctgtacc accccaacgc cccccagtgc ctgagccaca tgaacagcgg ctgcaccttc 2040 accagccccc acctggctca gagggtggcc agcaccgtgt accagaactg cgagcacgcc 2100 gacaactaca ccgcctactg cctgggcatc agccacatgg aacccagctt cggcctgatc 2160 ctgcacgacg gcggcaccac cctgaagttc gtggacaccc cagagagcct gagcggcctg 2220 tacgtgttcg tggtgtactt caacggccac gtggaagccg tggcctacac cgtggtgtcc 2280 accgtggacc acttcgtgaa cgccatcgag gaacggggct tcccacccac agccggacag 2340 cctccagcca ccaccaagcc caaagaaatc acccccgtga accccggcac cagccctctg 2400 ctgagatatg ccgcctggac aggcggactg gccgctgtgg tgctgctgtg cctggtgatc 2460 ttcctgatct gcaccgccaa gcggatgaga gtgaaggcct accgggtgga caagtccccc 2520 tacaaccaga gcatgtacta cgccggcctg cccgtggacg atttcgagga cagcgagagc 2580 accgacaccg aggaagagtt cggcaacgcc atcggcggca gccacggcgg ctctagctac 2640 accgtgtaca tcgacaagac ccgctgatga gcggccgctc gagtctagag ggcccgttta 2700 aacccgctga tcagcctcga ctgtgccttc tagttgccag ccatctgttg tttgcccctc 2760 ccccgtgcct tccttgaccc tggaaggtgc cactcccact gtcctttcct aataaaatga 2820 ggaaattgca tcgcattgtc tgagtaggtg tcattctatt ctggggggtg gggtggggca 2880 ggacagcaag ggggaggatt gggaagacaa tagcaggcat gctggggatg cggtgggctc 2940 tatggcttct actgggcggt tttatggaca gcaagcgaac cggaattgcc agctggggcg 3000 ccctctggta aggttgggaa gccctgcaaa gtaaactgga tggctttctt gccgccaagg 3060 atctgatggc gcaggggatc aagctctgat caagagacag gatgaggatc gtttcgcatg 3120 attgaacaag atggattgca cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gctattcggc 3180 tatgactggg cacaacagac aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg gctgtcagcg 3240 caggggcgcc cggttctttt tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcaa 3300 gacgaggcag cgcggctatc gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc agctgtgctc 3360 gacgttgtca ctgaagcggg aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc ggggcaggat 3420 ctcctgtcat ctcaccttgc tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga tgcaatgcgg 3480 cggctgcata cgcttgatcc ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa acatcgcatc 3540 gagcgagcac gtactcggat ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct ggacgaagag 3600 catcaggggc tcgcgccagc cgaactgttc gccaggctca aggcgagcat gcccgacggc 3660 gaggatctcg tcgtgaccca tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt ggaaaatggc 3720 cgcttttctg gattcatcga ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta tcaggacata 3780 gcgttggcta cccgtgatat tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga ccgcttcctc 3840 gtgctttacg gtatcgccgc tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg ccttcttgac 3900 gagttcttct gaattattaa cgcttacaat ttcctgatgc ggtattttct ccttacgcat 3960 ctgtgcggta tttcacaccg catcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc 4020 tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgagac aataaccctg 4080 ataaatgctt caataatagc acgtgctaaa acttcatttt taatttaaaa ggatctaggt 4140 gaagatcctt tttgataatc tcatgaccaa aatcccttaa cgtgagtttt cgttccactg 4200 agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg atcttcttga gatccttttt ttctgcgcgt 4260 aatctgctgc ttgcaaacaa aaaaaccacc gctaccagcg gtggtttgtt tgccggatca 4320 agagctacca actctttttc cgaaggtaac tggcttcagc agagcgcaga taccaaatac 4380 tgttcttcta gtgtagccgt agttaggcca ccacttcaag aactctgtag caccgcctac 4440 atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt ggctgctgcc agtggcgata agtcgtgtct 4500 taccgggttg gactcaagac gatagttacc ggataaggcg cagcggtcgg gctgaacggg 4560 gggttcgtgc acacagccca gcttggagcg aacgacctac accgaactga gatacctaca 4620 gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc cgaagggaga aaggcggaca ggtatccggt 4680 aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac gagggagctt ccagggggaa acgcctggta 4740 tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct ctgacttgag cgtcgatttt tgtgatgctc 4800 gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc cagcaacgcg gcctttttac ggttcctggc 4860 cttttgctgg ccttttgctc acatgttctt 4890

Claims (7)

1. 삭제
2. 삭제
3. 삭제
4. 대상포진 바이러스(VZV) 단백질을 부호화하는 VZV 유래 유전자로서, IE-62 단백질(서열목록 1)을 코딩하는 제1 유전자의 삽입부위를 포함하는 제1 플라스미드(서열목록 4), IE-63 단백질(서열목록 2)을 코딩하는 제2 유전자의 삽입부위를 포함하는 제2 플라스미드(서열목록 5) 및 gE 단백질(서열목록 3)을 코딩하는 제3 유전자의 삽입부위를 포함하는 제3 플라스미드(서열목록 6); 및
   약제학적으로 허용 가능한 기타의 성분을 포함하고,
   전기천공 방식에 의하여 체내에 직접 투여되는 대상포진 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물.
5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제

Images