KR101721811B1 - ｍｉｃｒｏＲＮＡ－30ｂ, ｍｉｃｒｏＲＮＡ－133ａ 또는 ｍｉｃｒｏＲＮＡ－202－5ｐ의 억제제를 포함하는 항암용 약학적 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항암용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p의 억제제(inhibitor)를 유효성분으로 포함하는 항암용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 약학적 조성물에 의하면, microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p를 저해시킴으로써 암세포의 증식을 억제시킬 수 있고, 궁극적으로 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

ｍｉｃｒｏＲＮＡ－30ｂ, ｍｉｃｒｏＲＮＡ－133ａ 또는 ｍｉｃｒｏＲＮＡ－202－5ｐ의 억제제를 포함하는 항암용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition comprising microRNA-30b, microRNA-133a, or microRNA-202-5p inhibitor for inhibiting cancer}
본 발명은 항암용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p의 억제제(inhibitor)를 유효성분으로 포함하는 항암용 약학적 조성물에 관한 것이다.
전 세계적으로 심장질환 및 뇌혈관질환에 의한 사망을 넘어서 가장 중요한 사망원인이 되고 있는 질병은 암이다. 경제가 발달하고 생활양식 및 식생활 패턴이 변함에 따라 발병하는 질병의 형태가 변화되면서 암 발병률이 높아져, 2008년에는 약 760만 명이 암으로 사망하였고 1,266만 명의 신규 암환자가 발생하는 등 암 발생과 암에 의한 사망률이 지속적으로 증가하고 있는 추세이다. 사회가 발달해 감에 따라 인구의 고령화가 진행되어 암에 의한 발병 부담은 더욱 증가할 것으로 예상되며 유전적, 스트레스 등의 원인으로 젊은 연령대의 암 발병률도 점차 증가하는 추세이기 때문에 암 예방 및 치료의 중요성은 더욱 부각되고 있는 실정이나 여전히 효과가 뛰어나면서 부작용이 없는 항암제의 개발과 같은 획기적인 암 치료법이 개발되지 않아 이에 대한 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
그 중, 산소와 영양 공급의 제한을 통해 종양 및 암세포 증식을 억제시킬 수 있는 방법이 있으며 이에 대한 기술개발의 노력은 활발히 추진되고 있다. 이를 위해 저산소 상태에서 발현되는 종양 및 암세포의 유전자들 중에 포도당 대사, 신생혈관 생성에 관여하는 인자들의 발현과 주위 미세 환경에의 적응기전은 종양 및 암세포의 성장과 증식을 이해하는데 중요하다.
microRNA(또는 miRNA)는 전사 후 조절단계에서 유전자 발현을 억제하는 small non-coding RNAs이다. microRNA는 평균 18 ∼ 25개의 뉴클레오타이드로 구성되어 있으며 헤어핀 구조를 형성하고 있다. 타겟 유전자 서열의 3' UTR 부위에 상보적으로 결합함으로써 mRNA의 분해나 단백질로의 번역을 억제하고 있으며 약 5000개 이상의 인간 유전자가 microRNA의 타겟으로 밝혀져 있다. 결과적으로 어떠한 타겟 유전자를 조절하느냐에 따라 생체 내에서 microRNA의 기능이 세포 분화 및 증식, 발생 단계 및 대사 조절, 혈관신생, 세포 사멸 등으로 다양해지며 microRNA 역할의 중요성은 더욱 강조되고 있어 이에 대한 연구도 활발해지는 추세이다.
변형된 microRNA의 발현 양상은 각종 암에서 보고되고 있으며 암 촉진 유전자 혹은 암 억제 유전자의 조절에 관여한다는 사실이 밝혀지고 있다. 또한 microRNA가 신생혈관을 형성하는 단계도 조절한다는 것이 증명되었으며 이러한 기작을 이용하여 혈관 질환 및 암 억제를 위한 새로운 치료법의 가능성이 제시되고 있다. microRNA의 암 관여 유전자의 발현조절 기작을 통해 암세포 형성의 초기 단계에서 이를 예방하고 암에서 유도되는 혈관신생을 저해하는 암 치료 약물의 개발이 절실하다.
한편, PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10)은 세포막 인지질(phospholipid)인 PIP3(Phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate)에 대한 탈인산화효소로 작용하는 대표적인 암억제 유전자(tumor suppressor)로 알려져 있다. PTEN이 소실되거나 변형되었을 때 PIP3 경로를 과도하게 활성화시켜서 뇌암, 유방암, 신경아교종, 전립선암, 자궁내막암 등의 다양한 암 발생을 촉진시키는 것으로 알려져 있다. PTEN의 소실은 종양발생 이외에도 Fas에 대한 민감성을 감소시켜 자가면역질환(autoimmune disease)을 유발하며, Cowden 병이나 Lhermitte-Duclos 병과 같은 유전질환을 일으킨다. 이는 PTEN이 암의 억제뿐만 아니라 뇌의 발달에도 중요한 기능을 담당할 수 있음을 나타낸다.
그러나 현재까지 PTEN의 분자수준의 작용기작 및 그 타겟은 명확하지 않다. 따라서, PTEN의 작용기작을 밝히고 이를 특이적으로 조절하는 신약을 개발하는 것은 암 치료제 개발에 있어 매우 중요하다.
이에, 본 발명자들은 부작용이 없으면서 저산소 환경에서의 암 억제에 관여하는 특정 microRNA를 발굴하고 이를 이용한 효과적인 암 치료용 조성물에 대해 예의 연구 노력한 결과, microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p를 저해시켰을 때 간암세포에서 저산소 환경에 의해 감소되는 PTEN의 발현억제 회복효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p의 억제제(inhibitor)를 유효성분으로 포함하는 항암용 약학적 조성물을 제공하는데 있다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명은, microRNA-30b, microRNA-133a 및 microRNA-202-5p로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 microRNA에 대한 억제제(inhibitor)를 유효성분으로 함유하는, 항암용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은, 약학적으로 유효량의 상기 억제제를 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 암의 예방 또는 치료방법을 제공한다.
또한, 본 발명은, 상기 억제제를 암의 예방 또는 치료에 이용하는 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예로, 상기 microRNA-30b는 서열번호 1의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 구체예로, 상기 microRNA-133a는 서열번호 2의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 구체예로, 상기 microRNA-202-5p는 서열번호 3의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 구체예로, 상기 억제제는 상기 microRNA에 상보적으로 결합하는 PNA(Peptide Nucleic Acid), siRNA(small interfering RNA), 압타머 또는 안티센스 RNA인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 구체예로, 상기 조성물은 저산소 상태에서 억제된 PTEN(phosphatase and tensin) 발현 회복에 기인하여 항암작용을 나타내는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 구체예로, 상기 암은 간암인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 약학적 조성물은 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p를 저해시킴으로써 암세포의 증식을 억제시킬 수 있고, 궁극적으로 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p 저해제에 의한 PTEN 단백질 발현량 변화를 확인한 결과로서, con은 대조군(control)을 의미한다.
도 2는 microRNA-30b와 PTEN의 3'-UTR의 결합 부위를 나타낸 그림이다.
도 3은 microRNA-202-5p와 PTEN의 3'-UTR의 결합 부위를 나타낸 그림이다.
도 4는 microRNA-133a와 PTEN의 3'-UTR의 결합 부위를 나타낸 그림이다.
도 5는 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p의 mimic에 의한 저산소 상태에서 억제된 PTEN 단백질의 발현 변화를 확인한 결과로서, S는 스크램블(scramble)을 의미한다.
도 6은 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p의 mimic에 의한 저산소 상태에서 억제된 PTEN mRNA의 발현 변화를 확인한 결과로서, S는 스크램블(scramble)을 의미한다.
도 7은 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p 저해제에 의한 저산소 상태에서 억제된 PTEN 단백질의 발현 회복을 확인한 결과이다.
본 발명은 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p의 억제제(inhibitor)를 유효성분으로 포함하는 항암용 약학적 조성물을 제공한다.
암억제 유전자(tumor suppressor)인 PTEN은 저산소 상태에서 발현이 저하된다고 알려져 있기 때문에, 본 발명자들은 저산소 상태에서 PTEN의 발현을 조절하는 miRNA를 조사하고자, miRNA 억제제를 간암 세포주(HepG2)에 처리한 후 단백질을 확보하여 PTEN 발현이 조절되는지 확인하였다. 그 결과, 3가지 miRNA (miR-30b, miR-133a, miR-202-5p)에 대한 억제제를 처리하였을 때 모두 PTEN의 발현이 증가되는 것을 확인하였다(도 1 참조).
또한, 본 발명자들은 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p가 PTEN의 3'-UTR 부위에 결합함으로써 PTEN의 mRNA가 분해되거나 저해되어서 PTEN 단백질 발현이 억제될 것으로 예상하고, 이를 확인하기 위해, miRNA target search 프로그램 (DIANA, microrna)과 sequence alignment (NCBI)를 이용하여 이들 miRNA가 PTEN의 3'-UTR 부위에 결합할 수 있는지 조사하였다. 그 결과, miR-30b와 miR-202-5p는 miRNA target search 프로그램 (DIANA, microrna)에 의해 결합이 확인되었으며, miR-133a는 sequence alignment (NCBI)에 의해 결합이 확인되었다(도 2 내지 도 4 참조).
이러한 결과에 기초하여, 본 발명자들은 microRNA-30b, microRNA-133a, 또는 microRNA-202-5p의 억제제 및 유사체가, 저산소 상태의 암세포에서 저하된 PTEN의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 확인하기 위하여, 상기 억제제 및 유사체를 저산소 상태의 간암 세포주(HepG2)에 처리한 후 단백질을 추출하여 western blot을 수행하였다(도 5 및 7 참조).
그 결과, 상기 억제제는 tumor suppressor인 PTEN의 발현을 증가시켜 암을 예방 또는 치료하는 데 유효한 치료제로 이용할 수 있음을 알 수 있었다.
상기로부터 본 발명자들은 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p가 암조직의 증식을 촉진하는 역할을 함을 확인할 수 있었다. 궁극적으로 상기 결과는 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p를 억제시킴으로써 암세포 전이와 증식을 억제할 수 있고, 나아가 암 치료에 효과적으로 이용할 수 있음을 시사한다.
본 발명의 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p의 mature sequence는 하기 표 1에 나타낸 바와 같다.
Gene 서열번호 Sequence(5'->3')
microRNA-30b 서열번호 1 UGUAAACAUCCUACACUCAGCU
microRNA-133a 서열번호 2 UUUGGUCCCCUUCAACCAGCUG
microRNA-202-5p 서열번호 3 UUCCUAUGCAUAUACUUCUUUG
본 발명에 있어서, 용어 "억제제"는 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p에 상보적으로 결합하는 물질로서, PNA(Peptide Nucleic Acid), siRNA(small interfering RNA), 압타머 및 안티센스 RNA로 구성된 군에서 선택되는 것이 바람직하나, miRNA의 발현을 억제하는 물질이라면 어느 것이든지 사용할 수 있기 때문에 이에 한정되지 않는다.
본 발명에 있어서, 용어 "유사체"는 내생의 microRNA(endogenous microRNA)와 같은 활성을 나타내는 2중가닥 RNA 올리고뉴클레오티드인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명에서 용어 "항암"은 암세포의 증식을 억제하거나 사멸하는 작용 및 암세포의 전이를 억제하거나 차단하는 작용을 의미하는 것으로, 암의 예방 및 치료 모두를 의미한다.
본 발명에서 용어 "저산소(hypoxia) 상태"란 세포 및 조직 내의 산소가 생리적 수준 이하, 예를 들어, 최적 수준 미만으로 낮아진 상태를 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 약제학적으로 허용 가능한 담체는 생리식염수, 폴리에틸렌글리콜, 에탄올, 식물성 오일, 및 이소프로필미리스테이트 등을 포함할 수 있으며, 이에 한정되지는 않는다.
또한, 본 발명은 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p 억제제를 포함하는 항암용 조성물의 약제학적 유효량을 개체에 투여하여 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명에서 "개체"란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간, 또는 비-인간인 영장류, 생쥐(mouse), 쥐(rat), 개, 고양이, 말, 및 소 등의 포유류를 의미한다. 또한, 본 발명에서 "약제학적 유효량"은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하게 조절될 수 있음은 당업자에게 명백하다.
본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로, 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직하게는, 1일 0.001 내지 100 mg/체중kg으로, 보다 바람직하게는 0.01 내지 30 mg/체중kg으로 투여한다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 여러 번 나누어 투여할 수 있다. 본 발명의 microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p 억제제는 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 1 중량%의 양으로 존재할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여방법에는 제한이 없으며, 예를 들면, 경구, 직장, 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막, 또는 뇌혈관(intra cerbroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1. 실험방법
1-1. 세포 배양 및 저산소 처리
간암 세포주(HepG2)는 10% 우태아 혈청(FBS) 및 1% penicillin streptomycin이 포함된 DMEM 배지에 함께 넣고, 5% 이산화탄소가 있는 37℃ 항온기에서 배양하였다. 세포가 충분히 자라면 RNA(microRNA 포함) 추출과 단백질 분리를 위해 10㎠ 의 배양접시에서 배양하였다. 두 개의 배양용기로 분리할 경우, 부착세포의 경우에는 트립신-EDTA를 이용하여 배양용기에서 떼어낸 후 1000 rpm에서 5분 동안 원심분리를 한 뒤 부착세포와 같은 방법으로 새 배양용기로 옮겨주었다. 저산소 상태를 유지할 때에는 1% O2 농도를 유지하는 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
1-2. miRNA mimic transfection
Hiperfect reagent(Qiagene)와 miRNA mimic(Bioneer) 및 control miRNA (Bioneer)를 각각 5nM 농도로 함께 섞어준 후 15분 동안 상온에서 반응시킨 혼합물을, 상기 실시예 1-1에 의해 배양된 간암 세포주(HepG2)에 트랜스펙션(transfection)시켰다. 24시간 후 저산소 배양기에 넣어 하루 더 배양하였다.
1-3. miRNA inhibitor transfection
Hiperfect reagent(Qiagene)와 1μM의 miRNA inhibitor (Panagene)를 함께 섞어준 후 15분 동안 상온에서 반응시킨 혼합물을, 상기 실시예 1-1에 의해 배양된 간암 세포주(HepG2)에 트랜스펙션(transfection)시켰다. 24시간 후 저산소 배양기에 넣어 하루 더 배양하였다.
1-4. 단백질 분리
세포의 단백질 분리를 위한 lysis buffer (25 mM Tris, 1% (wt/vol) Nonidet P-40, 0.25% sodium deoxycholate, 150 mM NaCl, 1 mM EGTA, 1 mM PMSF, 1 μg aprotinin, leupeptin, pepstatin, 1 mM Na3VO4, 1 mM NaF)를 PBS로 씻은 간암 세포주(HepG2)에 첨가한 후 ice에서 30분간 두었다. 15,000 rpm, 4℃에서 20분간 원심분리한 후 상층액만을 취하여 정량한 다음 사용할 때까지 -70℃에 보관하였다.
1-5. 웨스턴 블롯팅(Western Blot)
각 조건에 따라 세포 추출물을 얻어 SDS가 함유된 polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)를 실시하였다. 전기영동 후 니트로셀룰로스 필터(nitrocellulose filter)에 90V에서 1시간 동안 transfer하고, 5% non-fat milk를 함유한 TBS로 블락킹하였다. 그 후 1차 항체와 2차 항체를 각각 반응시키고 0.1% tween-20이 함유된 TBS로 세척한 후 ECL 검출 키트를 이용하여 검출하였다. 이때 사용한 1차 항체는 1:1,000, 2차 항체는 1:5,000으로 희석해서 사용하였다.
1-6. RT-PCR
RNase에 의한 RNA의 분해가 일어나기 쉬우므로 이를 사전에 방지하기 위해 실험재료와 장비, 작업대 표면을 에탄올으로 잘 닦았다. Trizol (BD bioscience)를 이용하여 total RNA를 분리하였다. 간암 세포주(HepG2)로부터 분리된 RNA의 농도를 확인한 후, 1μg의 RNA를 150ng random primer, 4mM dNTP, 1μl RNasin, 1μl M-MLV RTase를 넣고 37℃에서 1시간 동안 역전사 반응시켰다. 역전사 반응으로 얻어진 cDNA로 PCR 반응을 수행하였다. 20μl 반응액을 PCR 기계를 이용하여 30∼35 cycles 로 PCR을 수행하고 그 산물을 얻어 전기영동 후 확인하였다.
1-7. microRNA 표적유전자 결합부위 예측 프로그램
microRNA-30b, microRNA-133a, 및 microRNA-202-5p가 표적유전자 PTEN과 결합하는 부위를 예측하기 위하여, DIANA, microrna 및 NCBI의 sequence alignment 프로그램을 이용하였다.
실시예 2. PTEN 유전자를 타겟으로 하는 miRNA 스크리닝
저산소(hypoxia) 상태에서 PTEN의 발현을 조절하는 miRNA를 스크리닝하기 위해, 상기 실시예 1-1 내지 1-5에 나타낸 바에 따라, PNAsTM miRNA inhibitor((주)PANAGENE)를 HepG2 세포에 24시간 동안 처리한 후 단백질을 확보하여 웨스턴 블롯팅으로 PTEN 발현이 조절되는지 확인하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 3가지 miRNA (miR-30b, miR-133a, miR-202-5p)에 대한 inhibitor를 처리하였을 때 모두 PTEN의 발현이 증가되는 것을 확인하였다.
실시예 3. miRNA(miR-30b, miR-133a, miR-202-5p)와 PTEN의 결합 확인
상기 실시예 2를 통해, 본 발명자들은 저산소(hypoxia) 조건의 암세포에서 발현이 감소하는 PTEN이 miRNA(miR-30b, miR-133a, miR-202-5p)의 표적 유전자로서, 이들 miRNA가 PTEN의 3'-UTR 부위에 결합함으로써 PTEN의 mRNA가 분해되거나 억제되어서 PTEN 단백질 발현이 억제됨을 예측하였다.
따라서, 이를 확인하기 위해, miRNA target 조사 프로그램 (DIANA, microrna)과 sequence alignment (NCBI)를 이용하여 이들 miRNA가 PTEN의 3'-UTR 부위에 결합할 수 있는지 조사하였다.
그 결과, 도 2 내지 4에 나타낸 바와 같이, PTEN mRNA의 3'-UTR에서 miRNA(miR-30b, miR-133a, miR-202-5p)와의 결합 부위가 보존되어 있음을 확인하였다.
실시예 4. miRNA에 의한 PTEN의 발현조절
저산소(hypoxia)에 의해 발현이 억제되는 PTEN에 미치는 miR-30b, miR-133a 및 miR-202-5p의 영향을 확인하기 위해, 각각의 miRNA에 대한 mimic을 HepG2 세포에 24시간 동안 처리하여 저산소 상태에서 24시간 배양한 후, 웨스턴 블롯팅에 의해 PTEN 단백질의 발현양을 확인하였다. 이때, miRNA mimic은 AccuTarget TM Human miRNA mimic((주)BIONEER)을 이용하였다.
그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, 저산소 처리에 의해 감소되는 PTEN 단백질의 발현이 miRNA-30b, miR-133a, miR-202-5p mimic 처리시 더욱 감소 또는 유사함을 확인하였다.
또한, 도 6에 나타낸 바와 같이, HepG2 세포에 miRNA mimic을 처리한 후total RNA를 추출하여 역전사에 의해 cDNA를 합성한 후 PCR을 수행한 결과, PTEN의 mRNA 변화에는 차이가 나타나지 않았다.
실시예 5. miRNA 저해제에 의한 PTEN의 발현 억제 회복
저산소(hypoxia)에 의해 발현이 억제되는 PTEN에 미치는 miR-30b, miR-133a 및 miR-202-5p의 영향을 확인하기 위해, 각각의 miRNA에 대한 inhibitor을 HepG2 세포에 24시간 동안 처리하여 저산소 상태에서 24시간 배양한 후, 웨스턴 블롯팅에 의해 PTEN 단백질의 발현양을 확인하였다. 이때, miRNA inhibitor는 PNAsTM miRNA inhibitor((주)PANAGENE)을 이용하였다.
그 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이, 저산소 처리에 의해 감소되는 PTEN 단백질의 발현이 miRNA-30b, miR-133a, miR-202-5p inhibitor 처리시 회복되는 것을 확인하였다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 아닌 것으로 이해해야만 한다.
<110> Kyungpook National University Industry-Academic Cooperation Foundation <120> Pharmaceutical composition comprising microRNA-30b, microRNA-133a, or microRNA-202-5p inhibitor for inhibiting cancer <130> MP16-546 <160> 3 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 22 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> microRNA-30b <400> 1 uguaaacauc cuacacucag cu 22 <210> 2 <211> 22 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> microRNA-133a <400> 2 uuuggucccc uucaaccagc ug 22 <210> 3 <211> 22 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> microRNA-202-5p <400> 3 uuccuaugca uauacuucuu ug 22

Claims (5)

  1. microRNA-202-5p에 대한 억제제를 유효성분으로 함유하는, 저산소 상태에서 PTEN(phosphatase and tensin) 발현 저하에 의해 유도되는 암 치료용 약학적 조성물로서,
    상기 억제제는 상기 microRNA에 상보적으로 결합하는 PNA(Peptide Nucleic Acid), siRNA(small interfering RNA), 압타머 또는 안티센스 RNA인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은 microRNA-133a 또는 microRNA-30b에 대한 억제제를 더 함유하되, 상기 억제제는 상기 microRNA에 상보적으로 결합하는 PNA(Peptide Nucleic Acid), siRNA(small interfering RNA), 압타머 또는 안티센스 RNA인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 microRNA-202-5p는 서열번호 3의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
  4. 제 2 항에 있어서,
    상기 microRNA-133a는 서열번호 2의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
  5. 제 2 항에 있어서,
    상기 microRNA-30b는 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
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British Journal of Cancer. 2011. Vol.105, pp.296-303.
Molecular Cancer Research. 2012. Vol.10, pp.979-991.

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