KR20220149245A - 조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 - Google Patents
조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220149245A KR20220149245A KR1020210056626A KR20210056626A KR20220149245A KR 20220149245 A KR20220149245 A KR 20220149245A KR 1020210056626 A KR1020210056626 A KR 1020210056626A KR 20210056626 A KR20210056626 A KR 20210056626A KR 20220149245 A KR20220149245 A KR 20220149245A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- osteoblasts
- gene
- group
- fis1
- Prior art date
Links
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 title claims abstract description 101
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 title claims abstract description 38
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 230000011164 ossification Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 51
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- 101150075109 FIS1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 24
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 19
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 16
- RGOJCHYYBKMRLL-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethoxy)benzenesulfonamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=CC=C(OC(F)(F)F)C=C1 RGOJCHYYBKMRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- SHCXABJSXUACKU-XTXDISFPSA-N isobongkrekic acid Natural products COC(CC=C/C=C/CCC=CCC(C)C=CC(=C/C(=O)O)CC(=O)O)C(=C/C=C(C)/C(=O)O)C SHCXABJSXUACKU-XTXDISFPSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 27
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 22
- 101150045559 Opa1 gene Proteins 0.000 claims description 20
- 108700000707 bcl-2-Associated X Proteins 0.000 claims description 20
- 102000055102 bcl-2-Associated X Human genes 0.000 claims description 20
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims description 19
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 101150014183 Alpl gene Proteins 0.000 claims description 12
- 101150079986 Ibsp gene Proteins 0.000 claims description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 11
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 claims description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 9
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 9
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 claims description 8
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 claims description 8
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 claims description 8
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 7
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 5
- 101150024147 bax gene Proteins 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 4
- 241000282341 Mustela putorius furo Species 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 claims 2
- 208000013558 Developmental Bone disease Diseases 0.000 claims 1
- 206010072610 Skeletal dysplasia Diseases 0.000 claims 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 2
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 abstract 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 12
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 10
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 9
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 9
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 7
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 7
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 235000012489 doughnuts Nutrition 0.000 description 7
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 4
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 4
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- -1 etc.) Proteins 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 3
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 3
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 208000000595 Bisphosphonate-Associated Osteonecrosis of the Jaw Diseases 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241001135516 Burkholderia gladioli Species 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 2
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 2
- 241000270722 Crocodylidae Species 0.000 description 2
- 101710173353 Cytotoxicity-associated immunodominant antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 239000012098 Lipofectamine RNAiMAX Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 241000270666 Testudines Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 2
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 7-aminoactinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=C(N)C=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 0.000 description 1
- 108700012813 7-aminoactinomycin D Proteins 0.000 description 1
- 102000023805 ATP:ADP antiporter activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040000931 ATP:ADP antiporter activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 235000006491 Acacia senegal Nutrition 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102100025683 Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme Human genes 0.000 description 1
- 101710161969 Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940078581 Bone resorption inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101150008656 COL1A1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000016921 Integrin-Binding Sialoprotein Human genes 0.000 description 1
- 108010028750 Integrin-Binding Sialoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102100023845 Mitochondrial fission 1 protein Human genes 0.000 description 1
- 101710081788 Mitochondrial fission 1 protein Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100012928 Mus musculus Fis1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 238000010806 PrimeScriptTM RT Reagent kit Methods 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOMLBTHPCVDRHM-UHFFFAOYSA-N [3-[(2,4-dimethylphenyl)carbamoyl]naphthalen-2-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound CC1=CC(C)=CC=C1NC(=O)C1=CC2=CC=CC=C2C=C1OP(O)(O)=O IOMLBTHPCVDRHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 239000002617 bone density conservation agent Substances 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003563 calcium carbonate Drugs 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N hexaethylene glycol Chemical class OCCOCCOCCOCCOCCOCCO IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000004072 osteoblast differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000006201 parenteral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000001944 prunus armeniaca kernel oil Substances 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
- CMFRFQODFZBKTI-UHFFFAOYSA-L zinc;4-benzamido-2,5-diethoxybenzenediazonium;tetrachloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].Cl[Zn]Cl.CCOC1=CC([N+]#N)=C(OCC)C=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1.CCOC1=CC([N+]#N)=C(OCC)C=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 CMFRFQODFZBKTI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/13—Nucleic acids or derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
- A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/306—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention
Abstract
본 명세서는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하는 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방, 치료 및/또는 개선용 약학적 및/또는 식품 조성물을 포함하는 골형성 촉진제 및/또는 골질환 치료제에 관한 것이다. 구체적으로, 저농도의 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 처리 및/또는 Opa1 (발현억제), Fis1 (발현증가), Bax (발현증가) 유전자의 활성조절로 미토콘드리아의 형태변화 및 분열을 유도하여, 골재생 및/또는 골형성을 촉진시킨다는 것을 처음으로 밝힌 것으로, 상기 유효성분들은 골재생 및/또는 골형성 촉진용 약학적 조성물 및 골질환의 예방 및/또는 치료용 약학적 조성물로 활용될 수 있다.
Description
본 명세서는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하는 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및/또는 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
급격한 고령화로 인해 노인인구가 급증하고 있으며, 100세 시대를 맞이하는 노인의 대부분에서 골감소증으로 인한 골격계 질환으로 삶의 질이 저하되고 있다. 국내환자 수만 대략 100만 명에 달하는 대표적인 골감소증인 골다공증을 치료하기 위해 수많은 약제들이 개발되었으며, 치료제 시장 규모는 국내시장이 약 2000억원, 세계시장이 약 10조원이 넘는 것으로 추정된다.
대표적인 골다공증 치료제인 비스포스포네이트 성분의 골흡수억제제는 골밀도 증가 자체에는 효과가 있으나 Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw (BRONJ)와 같은 심각한 부작용이 발생할 수 있기 때문에, 골흡수 억제제가 아닌 골형성을 촉진시키는 약제를 통한 골질환 치료에 대한 연구를 진행하였다.
미토콘드리아는 에너지 공급원으로서 아데노신 트라이포스페이트 (adenosine triphosphate, ATP) 합성 및 조절에 관여하는 모든 진핵세포의 생존에 필수적인 세포소기관이다. 세포 내 다양한 기능들이 미토콘드리아에 의해 조절되는데, 예를 들면, 세포신호처리, 세포주기, 세포분화, 및 세포성장 뿐만 아니라 세포사멸의 제어와도 관련되어 있다. 미토콘드리아는 주변 세포 소기관들과도 끊임없이 소통하며, 활발하게 형태를 변화시키기도 하는데, 이 과정에서 스스로 분열 (fission)하여 작은 미토콘드리아 형태로 변화하거나, 미토콘드리아 유래 소포체 (Mitochondrial-derived vesicle, MDV)를 생성하기도 한다.
척추동물의 골격을 이루는 뼈의 형태와 기능을 적절히 유지하는 것은 생명유지에 필수적이며, 뼈를 형성하는 세포인 조골세포는 이러한 뼈의 상태를 최적으로 유지하기 위해 여러 가지 물질을 분비한다. 본 발명자들은 활성화된 조골세포가 미토콘드리아 혹은 미토콘드리아에서 유래된 작은 소포체 (MDV)를 뼈가 형성될 주변으로 분비한다는 것을 발견하였고, 조골세포 유래의 미토콘드리아를 유효성분으로 포함하는 골형성 촉진용 약학적 조성물 및 골질환 치료용 약학적 조성물을 2020년에 관련 특허를 출원 (출원번호: PCT/KR2020/007015)한 바 있다. 본 발명자는 미토콘드리아를 추출하기 위해 조골세포의 활성화를 유도하던 중 조골세포가 활성화되면 미토콘드리아의 형태가 동그란 도넛 모양으로 변화되고, 도넛 모양의 미토콘드리아가 많을수록 미토콘드리아 유래 소포체 분비 및 골형성이 증가한다는 것을 발견하였다.
봉크렉산 (Bongkrekic acid)은 발효된 코코넛이나 옥수수에서 발견되는 Burkholderia gladioli라는 세균이 생산하는 독소로 미토콘드리아에서 생산된 ATP가 미토콘드리아 밖으로 나오는 것을 억제해서 세포가 ATP를 사용하지 못하게 함으로써 세포의 기능을 억제하고 고농도에서는 사멸까지 유도할 수 있어, 인도네시아나 중국에서는 이 독소로 인한 사망사고도 보고된 바 있다. 하지만, 본 발명자는 낮은 농도의 봉크렉산을 조골세포에 처리할 경우, 조골세포가 활성화되고 골형성이 증가한다는 것을 처음으로 확인하여, 독으로 알려진 봉크렉산이 의료용으로도 사용될 수 있다는 가능성을 확인하였다.
본 발명자들은 미토콘드리아의 형태를 도넛 모양으로 변화시키거나 미토콘드리아의 분비를 증가시키는 약물을 스크리닝하였고, 봉크렉산 (Bongkrekic acid), 미토콘드리아의 형태조절에 중요한 유전자인 Opa1과 Fis1, 미토콘드리아 외막에 작용하는 유전자인 Bax 등의 활성을 조절하면 골형성을 유도할 수 있다는 것을 처음으로 확인하였다.
본 명세서는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인,
골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방, 치료 및/또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 명세서는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하는 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방, 치료 및/또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 명세서에서의 “골질환”은 골절, 골파괴증, 골다공증, 골연화증, 골관절염, 류머티즘 관절염 및/또는 골형성 장애를 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 Opa1, Fis1 (Mitochondrial fission 1) 및 Bax (bcl-2-associated X)는 각 유전자에 의해 암호화되는 단백질을 의미할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니고, 특히 Opa1 유전자에 의해 암호화되는 단백질은 dynamin-like 120 kDa protein일 수 있다.
본 명세세에서 Alpl은 Alpl 유전자 및 상기 유전자에 의해 암호화되는 효소 (Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme)를 모두 의미할 수 있고, 상기 효소는 저인산효소증, 고칼슘형증 등 골질환과 직접적으로 연관되어 있다.
본 명세서에서 Ibsp는 Ibsp 유전자 및 상기 유전자에 의해 암호화되는 Bone sialoprotein를 모두 의미할 수 있고, 상기 유전자의 조절은 뼈 기질의 무기질화 및 뼈 종양의 성장에 중요하다.
본 명세서에서 “봉크렉산 (Bongkrekic acid)”는 발효 코코넛 또는 박테리아 Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans에 의해 오염된 옥수수에서 생성되는 호흡기 독소를 의미하고, 미토콘드리아 ADP/ATP 운반체라고도 불리는 ADP/ATP translocase를 억제하여 ATP가 미토콘드리아를 떠나 세포의 나머지 부분에 대사 에너지를 제공하는 것을 방지하기 때문에 독성이 높다.
본 명세서에서 단백질은 항체, 항체 단편, 또는 이의 유사체 등의 형태를 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 유전자는 DNA, RNA (예컨대, siRNA, microRNA, shRNA 등), PNA (peptide nucleic acid), 앱타머 등의 형태를 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 mRNA는 인위적으로 합성된 형태, 천연적으로 획득할 수 있는 형태일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
의약 용도
일 예는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물의 Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제는 Opa1 유전자를 타겟으로 하는 Small-interfering RNAs (siRNAs), microRNAs (miRNAs), antisense oligonucleotides (ASOs), 및 aptamers로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물의 Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Fis1 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물의 Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Bax 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 도넛 모양으로 변화된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 “도넛 모양”은 조골세포 유래 미토콘드리아 중에서 원형도 ((4 x 미토콘드리아의 넓이)/(π x (FeretMax)2)) 값이 0.5 내지 1 및/또는 하나 이상의 구멍이 형성된 형태인 것을 의미할 수 있다 (FeretMax는 최대 페럿 직경 (Feret diameter)을 의미).
상기 약학적 조성물은 원형도 값이 0.5 내지 1 및/또는 하나 이상의 구멍이 형성된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 상기 봉크렉산을 0.1 내지 1000μM, 0.1 내지 500μM, 0.1 내지 200μM, 0.1 내지 100μM, 0.1 내지 70μM, 0.1 내지 50μM, 0.1 내지 45μM, 1 내지 1000μM, 1 내지 500μM, 1 내지 200μM, 1 내지 100μM, 1 내지 70μM, 1 내지 50μM, 1 내지 45μM, 10 내지 1000μM, 10 내지 500μM, 10 내지 200μM, 10 내지 100μM, 10 내지 70μM, 10 내지 50μM, 10 내지 45μM, 30 내지 1000μM, 30 내지 500μM, 30 내지 200μM, 30 내지 100μM, 30 내지 70μM, 30 내지 50μM, 30 내지 45μM, 35 내지 1000μM, 35 내지 500μM, 35 내지 200μM, 35 내지 100μM, 35 내지 70μM, 35 내지 50μM 또는 35 내지 45μM의 농도, 예를 들어 40μM의 농도로 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 Alpl 및 Ibsp로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 발현 증가 효과가 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방 및/또는 치료용 약학적 조성물일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서, “치료”는 질병 상태 또는 증상의 개선, 경감 또는 안정화, 부분적 또는 완전한 회복, 생존의 연장, 질환 범위의 감소, 질병 진행의 지연 또는 완화, 기타 다른 이로운 치료 결과 등을 모두 포함하는 의미로 사용된다. “예방”은 특정 질병을 갖지 않는 대상에게 작용하여 상기 특정 질병이 발병하지 않도록 하거나, 그 발병 시기를 늦추거나, 발병 빈도를 낮추는 모든 기작 및/또는 효과를 포함하는 의미로 사용된다.
본 명세서에서 제공되는 약학적 조성물 내의 유효성분으로 사용된 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제의 함량은 사용 형태 및 목적, 사용 대상의 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 (추출물에서 용매를 제거한 고형성분) 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 0.001 내지 90 중량%, 0.001 내지 75 중량%, 0.001 내지 50 중량%, 0.01 내지 99.9 중량%, 0.01 내지 90 중량%, 0.01 내지 75 중량%, 0.01 내지 50 중량%, 0.1 내지 99.9 중량%, 0.1 내지 90 중량%, 0.1 내지 75 중량%, 0.1 내지 50 중량%, 1 내지 99.9 중량%, 1 내지 90 중량%, 1 내지 75 중량%, 1 내지 50 중량%, 5 내지 99.9 중량%, 5 내지 90 중량%, 5 내지 75 중량%, 5 내지 50 중량%, 10 내지 99.9 중량%, 10 내지 90 중량%, 10 내지 75 중량%, 또는 10 내지 50 중량% 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제의 함량은 상기 약학적 조성물을 투여하는 대상의 체중 기준으로 0.001 내지 400 mg/kg (body weight; BW), 1 내지 400 mg/kg, 50 내지 400 mg/kg, 100 내지 400 mg/kg, 0.001 내지 300 mg/kg, 1 내지 300 mg/kg, 50 내지 300 mg/kg, 100 내지 300 mg/kg, 0.001 내지 200 mg/kg, 1 내지 200 mg/kg, 50 내지 200 mg/kg, 100 내지 200 mg/kg, 0.001 내지 100 mg/kg, 1 내지 100 mg/kg 또는 50 내지 100 mg/kg일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물 또는 유효성분인 조골세포 활성화를 촉진하는 제제는 인간, 원숭이 등의 영장류, 마우스, 래트, 토끼 등의 설치류, 이외의 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말, 염소 등을 포함하는 포유류, 닭, 오리, 거위 등을 포함하는 조류, 뱀, 도마뱀, 거북, 악어 등을 포함하는 파충류, 양서류, 및 어류 등의 척추동물에서 선택된 투여 대상에 다양한 경로로 투여될 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물의 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 정맥, 근육, 또는 피하 주사, 또는 국소 주입 등의 비경구 투여의 경로로 투여될 수 있다. 일 예에서, 상기 약학적 조성물은 골형성이 필요한 부위 또는 골질환 부위에 투여 (예컨대, 주사제 형태로 주입 등)를 위한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 또는 주사제 (예컨대, 멸균 주사용액 등)의 형태의 비경구 제형 등으로 제형화하여 사용될 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 약학적 조성물은 앞서 설명한 유효성분 이외에도, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행 (Standard pharmaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제, 및 희석제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 보조제와 혼합되어 투여될 수 있다. 예컨대, 상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있고 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 글리세롤, 에탄올 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 약제학 분야에서 통상적으로 사용되는 모든 담체일 수 있다.
상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 희석제 및/또는 부형제는 약학적 조성물의 적절한 제제화에 통상적으로 사용되는 모든 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 윤할제, 계면활성제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
예컨대, 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제 등의 경구투여를 위한 고형 제제의 경우, 상기 부형제는 이러한 고형 제제의 제제화를 위한 적어도 1종 이상의 물질, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose), 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 이외에도, 마그네슘 스티레이트 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 또한, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등의 경구투여를 위한 액상제제의 제제화의 경우, 통상적으로 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이 사용될 수 있고, 이외에, 통상적으로 사용되는 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 및/또는 보존제 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
예컨대, 상기 약학적 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 적절한 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강내 또는 혀밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제 (예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔 (Witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유 (Apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물을 이용한 비경구용 제제는 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 명세서의 약학적 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 (ampoule) 또는 바이알 (vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.
본 명세서의 약학적 조성물을 연고, 크림, 도포용 파우더, 오일, 피부 외용제 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 약학 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 순서와 관계없이 연속적으로 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수도 있다. 본 명세서의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양으로 투여할 수 있으며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 명세서의 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한, 특별한 제한 없이 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물의 비경구 투여 방법으로는, 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서의 약학적 조성물은 단독으로 사용할 수 있으나, 치료 효율을 증가시키기 위하여 추가적으로 방사선 요법, 화학 요법 등의 다양한 피부 노화 예방 또는 치료 방법 및/또는 상처 치료 방법들과 병용하여 사용할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
식품 조성물
일 예는 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 식품 조성물을 제공한다.
상기 식품 조성물의 Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제는 Opa1 유전자를 타겟으로 하는 Small-interfering RNAs (siRNAs), microRNAs (miRNAs), antisense oligonucleotides (ASOs), 및 aptamers로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물의 Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Fis1 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물의 Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Bax 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물은 도넛 모양으로 변화된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 “도넛 모양”은 조골세포 유래 미토콘드리아 중에서 원형도 ((4 x 미토콘드리아의 넓이)/(π x (FeretMax)2)) 값이 0.5 내지 1 및/또는 하나 이상의 구멍이 형성된 형태인 것을 의미할 수 있다 (FeretMax는 최대 페럿 직경 (feret diameter)를 의미).
상기 식품 조성물은 원형도 값이 0.5 내지 1 및/또는 하나 이상의 구멍이 형성된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물은 상기 봉크렉산을 0.1 내지 1000μM, 0.1 내지 500μM, 0.1 내지 200μM, 0.1 내지 100μM, 0.1 내지 70μM, 0.1 내지 50μM, 0.1 내지 45μM, 1 내지 1000μM, 1 내지 500μM, 1 내지 200μM, 1 내지 100μM, 1 내지 70μM, 1 내지 50μM, 1 내지 45μM, 10 내지 1000μM, 10 내지 500μM, 10 내지 200μM, 10 내지 100μM, 10 내지 70μM, 10 내지 50μM, 10 내지 45μM, 30 내지 1000μM, 30 내지 500μM, 30 내지 200μM, 30 내지 100μM, 30 내지 70μM, 30 내지 50μM, 30 내지 45μM, 35 내지 1000μM, 35 내지 500μM, 35 내지 200μM, 35 내지 100μM, 35 내지 70μM, 35 내지 50μM 또는 35 내지 45μM의 농도, 예를 들어 40μM의 농도로 포함할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물은 Alpl 및 Ibsp로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 발현 증가 효과가 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물은 골형성 촉진용 및/또는 골질환 예방 및/또는 개선용 식품 조성물일 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 제공되는 식품 조성물에서, 용어 "식품"은 영양소를 한 가지 이상 함유하고 있는 식용의 천연물 또는 가공품을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 일반 식품, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제, 음료 첨가제 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 의미하기 위하여 사용될 수 있다. 용어 "식품 조성물"은 상기 식품을 제조하기 위한 재료의 조합을 의미할 수 있다. 일 예에서, 상기 식품은 건강기능식품을 의미할 수 있다.
상기 식품 조성물 내의 유효성분으로 사용된 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제의 함량은 식품사용 형태, 목적 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 예컨대, 고형분 중량 기준으로 0.00001 내지 99.9 중량%, 0.0001 내지 99.9 중량%, 0.001 내지 99.9 중량%, 또는 0.001 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제의 함량은 상기 식품 조성물을 투여하는 대상의 체중 기준으로 0.001 내지 400 mg/kg (body weight; BW), 1 내지 400 mg/kg, 50 내지 400 mg/kg, 100 내지 400 mg/kg, 0.001 내지 300 mg/kg, 1 내지 300 mg/kg, 50 내지 300 mg/kg, 100 내지 300 mg/kg, 0.001 내지 200 mg/kg, 1 내지 200 mg/kg, 50 내지 200 mg/kg, 100 내지 200 mg/kg, 0.001 내지 100 mg/kg, 1 내지 100 mg/kg 또는 50 내지 100 mg/kg일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 식품 조성물의 투여 '대상'은 인간, 원숭이 등의 영장류, 마우스, 래트, 토끼 등의 설치류, 이외의 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말, 염소 등을 포함하는 포유류, 닭, 오리, 거위 등을 포함하는 조류, 뱀, 도마뱀, 거북, 악어 등을 포함하는 파충류, 양서류, 및 어류 등의 척추동물 중에서 선택된 개체, 상기 개체로부터 분리된 세포, 조직, 또는 세포 배양물 등일 수 있다.
본 명세서의 조성물은 조골세포의 활성화를 촉진하는 효과가 있으며, 구체적으로 골형성 촉진 및/또는 골질환의 예방, 치료 및/또는 개선 효과가 있다.
도 1a 내지 1c는 조골세포에 siOpa1, pCMV-fis1 및 siFis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 조골세포 유래 미토콘드리아를 관찰한 결과를 보여주는 사진이다. siCtrl은 siOpa1 및 siFis1에 대한 대조군, Ctrl (Tris)는 봉크렉산에 대한 대조군, pCMV-Ctrl은 pCMV-fis1에 대한 대조군을 의미한다.
도 1d 및 1e는 조골세포에 siOpa1, pCMV-fis1 및 siFis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 조골세포 유래 미토콘드리아의 형태 변화를 정량적으로 분석한 결과를 보여주는 그래프이다. siCtrl은 siOpa1 및 siFis1에 대한 대조군, Ctrl은 봉크렉산에 대한 대조군, pCMV-Ctrl은 pCMV-fis1에 대한 대조군을 의미한다.
도 2a, 3a, 3c 및 4a는 조골세포에 siOpa1, siFis1 및 pCMV-Fis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 alkaline phosphatase (ALP)를 염색한 조골세포를 관찰한 결과를 보여주는 사진이다.
도 2b, 3b, 3d 및 4b는 조골세포에 siOpa1, siFis1 및 pCMV-Fis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 qRT-PCR을 수행하여 골형성 마커의 발현을 확인한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5a, 5b는 조골세포에 siBax 및 pCMV-Bax를 각각 형질주입한 후 alkaline phosphatase (ALP)를 염색한 조골세포를 관찰한 결과를 보여주는 사진이다.
도 6은 Opa1, Fis1, Bax 및 bongkrekic acid가 미토콘드리아에 미치는 효과 및 이에 따른 골형성을 표현하는 모식도이다.
도 1d 및 1e는 조골세포에 siOpa1, pCMV-fis1 및 siFis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 조골세포 유래 미토콘드리아의 형태 변화를 정량적으로 분석한 결과를 보여주는 그래프이다. siCtrl은 siOpa1 및 siFis1에 대한 대조군, Ctrl은 봉크렉산에 대한 대조군, pCMV-Ctrl은 pCMV-fis1에 대한 대조군을 의미한다.
도 2a, 3a, 3c 및 4a는 조골세포에 siOpa1, siFis1 및 pCMV-Fis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 alkaline phosphatase (ALP)를 염색한 조골세포를 관찰한 결과를 보여주는 사진이다.
도 2b, 3b, 3d 및 4b는 조골세포에 siOpa1, siFis1 및 pCMV-Fis1을 각각 형질주입하거나 봉크렉산을 첨가한 후 qRT-PCR을 수행하여 골형성 마커의 발현을 확인한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5a, 5b는 조골세포에 siBax 및 pCMV-Bax를 각각 형질주입한 후 alkaline phosphatase (ALP)를 염색한 조골세포를 관찰한 결과를 보여주는 사진이다.
도 6은 Opa1, Fis1, Bax 및 bongkrekic acid가 미토콘드리아에 미치는 효과 및 이에 따른 골형성을 표현하는 모식도이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
하기 실시예에서 진행한 통계분석의 모든 값은 평균 ± 평균의 표준 오차 (SEM)로 표시하였고 Tukey의 사후 테스트를 통한 일원 분산 분석을 2개 이상의 그룹에 대한 통계 분석을 위해 수행하였고 Student’s t 테스트를 2개 그룹의 통계 분석에 대해 수행하였다. P < 0.05인 경우 유의한 것으로 판단하였다.
실시예 1. 두개골 유래 조골세포의 추출
조골세포 미토콘드리아의 형태 변화를 확인하기 위해 미토콘드리아 기질에서만 특이적으로 녹색형광단백질 (GFP)이 발현되도록 형질전환 마우스를 준비하였다. 구체적으로, lgs1CKI-mitoGFP이 knock-in된 C57BL/6 암컷 형질전환 마우스 (lgs1CKI-mitoGFP/CKI-mitoGFP)를 Jeremy Nathans (Johns Hopkins University School of Medicine, MD)으로부터 제공받고, Col1a1-Cre 수컷 마우스를 한국생명공학연구원에서 제공받았고, 2.3kb 뮤린 Col1a1 프로모터를 사용하여 상기 마우스에서 Col1a1-Cre가 발현하도록 준비하였다. 준비된 상기 C57BL/6 암컷 형질전환 마우스와 Col1a1-Cre 수컷 마우스를 교배시켜, 조골세포의 미토콘드리아에서만 조건부로 GFP를 발현하는 갓 태어난 형질전환 마우스 (Col1a1-Cre; Igs1CKI-mito-GFP/+)를 준비하였다. 모든 동물 연구는 서울대학교 Institutional Animal Care and Use Committees의 승인을 받았다.
상기 준비한 미토콘드리아에서만 조건부로 GFP를 발현하는 형질전환 마우스의 두개골 세포를 0.25% 트립신 (Gibco)에 10분동안 처리한 후 용액을 제거하고, 2mg/mL의 제2형 콜라겐분해효소 (type 2 collagenase, Worthington)에 30분동안 배양한 후 용액을 제거하여 골조직에서 불순물을 제거한 후, 다시 제2형 콜라겐분해효소로 60분 동안 골조직을 배양하였다. 골조직에서 분리되어 나온 세포를 1300 rpm 속도로 3분간 원심분리하여 수집한 후 세포를 혈청 위에 놓고 원심분리하여 잔해물을 제거하였고, 골조직에서 분리된 모든 세포를 살아있으면서 미토콘드리아에 GFP를 발현하는 조골세포만을 분리하기 위하여, 7AAD (Bio-Legend)로 10분동안 염색 (죽은 세포만 염색됨) 후, 초고속 유세포 자동 분리기 (Fluorescence-activated cell sorting, FACS)를 사용하였다. 이때, 비슷한 모양과 크기를 가지는 세포를 분리하고, 이 중에서 살아있는 세포들 (7-AAD negative cells)만을 선택하여, GFP를 발현하는 조골세포와 GFP를 발현하지 않는 비조골세포로 분리한 후, GFP를 발현하는 조골세포만을 수집하였다.
실시예 2. 조골세포의 분화과정 동안 미토콘드리아의 형태 변화 확인
실시예 2-1. 조골세포 분화 및 형질주입
상기 실시예 1에서 추출한 조골세포를 10% fetal bovine serum (Gibco) 및 100U/mL의 페니실린-스트렙토마이신 (penicillin-streptomycin, Gibco)이 첨가된 alpha MEM (Minimum Essential Media, Hyclone)으로 구성된 배지에서 5일동안 분화를 유도하였다. 구체적으로 상기 분화용 배지는 50μg/mL의 ascorbic acid (Amreasco), 5mM의 beta-glycerophosphate (Sigma), 10% fetal bovine serum (Gibco) 및 100 U/mL의 페니실린-스트렙토마이신 (penicillin-streptomycin, Gibco)이 첨가된 alpha MEM으로 구성되어 있으며 5일동안 분화를 유도하여 준비하였다.
상기 분화를 유도할 때 미토콘드리아의 융합 (fusion)을 유도하는 Opa1 (dynamin-like 120 kDa protein) 유전자와 미토콘드리아 분열 (fission)을 유도하는 Fis1 (Mitochondrial fission 1 protein) 유전자의 발현을 억제하는 짧은 간섭 RNA (siRNA) (각각 siOpa1, siFis1)를 1mL당 300,000개의 조골세포에 Lipofectamine RNAiMAX Reagent (Invitrogen)를 이용하여 분화와 동시에 각각 30nM로 형질주입 (transfection) 하였으며, 미토콘드리아의 분열을 증가시키기 위한 pCMV-Fis1 플라스미드 (한국인간유전자은행)를 1mL당 300,000개의 조골세포에 TransIT®-LT1 Transfection Reagent (Mirus)를 이용하여 분화와 동시에 1μg/mL로 형질주입하여 Fis1 유전자를 과발현시켰다. 또한, 별도로 상기 준비한 조골세포에 Tris 용액 기반의 Bongkrekic acid (Sigma, B6179, USA)를 40μM의 농도로 분화와 동시에 처리하였다. 상기 siRNA의 대조군으로 control siRNA를 상기 siRNA와 실질적으로 동일한 방법으로 형질주입한 조골세포, 상기 플라스미드의 대조군으로 유전자가 삽입되지 않은 pCMV-SPORT6 empty vector 플라스미드를 상기 pCMV-Fis1 플라스미드와 실질적으로 동일한 방법으로 형질주입한 조골세포, 상기 Bongkrekic acid의 대조군으로 0.01M Tris 용액을 처리한 조골세포를 준비하였다. 상기 siRNA들은 대한민국 Bioneer에서 구입하여 제조사의 지침에 따라 Lipofectamine RNAimax (Invitrogen, USA)를 사용하여 형질주입 시킨 것이고, 해당 siRNA의 구체적인 정보는 하기 표 1에 나타내었다.
| siRNA 이름 | ID number (Bioneer siRNA IDs) |
RNA accession | 염기서열 (5’ → 3’) | 서열번호 |
| siOpa1 Forward | 74143-1 | NM_001199177.1 NM_133752.3 |
guguucacaacgaaaccaatt | 1 |
| siOpa1 Reverse | uugguuucguugugaacactt | 2 | ||
| siFis1 Forward | 66437-1 | NM_001163243.1 NM_001347504.1 NM_025562.3 |
cugauugauaaggccaugatt | 3 |
| siFis1 Reverse | ucauggccuuaucaaucagtt | 4 | ||
| control siRNA Forward | SN-1002 (카탈로그 번호) |
- | - | - |
| control siRNA Reverse | - | - |
상기 pCMV-Fis1 플라스미드는 한국 인간 유전자 은행에서 구입한 전장 마우스 Fis1 cDNA (ID: mMU002771)를 사용한 것이고, 제조업체의 지침에 따라 TransIT-LT1 형질 감염 시약 (Mirus Bio, USA)을 사용하여 조골세포로 형질주입 시켰다. 상기 pCMV-SPORT6 empty vector 플라스미드를 상기 pCMV-Fis1 (ID: mMU002771)에서 EcoRI과 MfeI 제한효소로 Fis1 유전자를 제거하고 다시 붙이는 방식으로 제작하였다.
실시예 2-2. 조골세포 형광 이미징
상기 실시예 2-1에서 형질주입 또는 약물처리 등을 통해 준비한 조골세포와 각각의 대조군을 4% 파라포름알데하이드 용액에 고정하고 DAPI Fluoremount-G® (Southern Biotech, 0100-20, USA)를 장착하여 핵을 염색하였다. Plan-Apochromat 63x/1.4 numerical aperture 오일 대물렌즈가 장착된 Zeiss LSM 800 공 초점 현미경 (Zeiss, Germany)을 사용하여 Airyscan 모드에서 이미지를 촬영하였다. 상기 촬영된 조골세포 샘플은 유리 바닥 접시 (MatTek; P35G-1.5-14-C, USA, or SPL; 101350, Korea)에서 배양되었다. 모든 촬영에서, 488nm 레이저는 미토콘드리아 매트릭스 GFP를 감지하기 위해 사용하였고, 405nm 레이저는 DAPI를 감지하기 위해 사용하였다. 상기 촬영한 이미지는 Zeiss Zen 3.1 (blue edition) 소프트웨어 (Zeiss, Germany)를 사용하여 조골세포에서 미토콘드리아 길이 (섬유 길이 기능 사용)와 도넛 모양의 미토콘드리아의 수를 분석하였다. 다음 두 조건을 충족하면 도넛 모양의 미토콘드리아로 판단하였다: 원형도 값이 0.5 내지 1이고, 구멍의 수가 1이상. 모든 분석은 수동으로 상기 소프트웨어에 의해 분석되었다.
실시예 2-3. 결과
상기 실시예 2-2에서 Zeiss LSM 800 공 초점 현미경 (Zeiss, Germany)을 사용하여 이미지를 촬영한 결과를 도 1a 내지 1c에 나타내었다. siOpa1 및 pCMV-Fis1 플라스미드가 각각 형질주입된 조골세포와 봉크렉산이 첨가된 조골세포에서 대조군에 비해 미토콘드리아의 분열과 도넛 모양의 미토콘드리아 (donut-shaped mitochondria)의 형성이 증가하였으며, siFis1이 형질주입된 조골세포에서는 대조군에 비해 미토콘드리아의 분열과 도넛 모양의 미토콘드리아의 형성이 유의미하게 감소하였다
상기 실시예 2-2에서 Zeiss Zen 3.1 소프트웨어 (Zeiss)를 이용하여 미토콘드리아의 형태 변화를 정량적으로 분석한 결과를 도 1d 및 1e에 나타내었다. siOpa1 및 pCMV-Fis1 플라스미드가 각각 형질주입된 조골세포와 봉크렉산이 첨가된 조골세포에서 각각의 대조군에 비해 미토콘드리아의 분열 (fission)이 유의미하게 증가하였으며 siFis1이 형질주입된 조골세포에서는 대조군에 비해 미토콘드리아의 분열이 유의미하게 감소하였다. 또한, siOpa1 및 pCMV-Fis1 플라스미드가 각각 형질주입된 조골세포와 봉크렉산이 첨가된 조골세포에서 각각의 대조군에 비해 도넛 모양의 미토콘드리아 (donut-shaped mitochondria)가 각각 유의미하게 증가하였으며, siFis1이 형질주입된 조골세포에서는 대조군에 비해 도넛 모양의 미토콘드리아가 유의미하게 감소하였다.
실시예 3. 조골 세포의 골형성 활성도 평가
실시예 3-1. 조골세포 형질주입 및 분화
상기 실시예 1에서 추출한 조골세포에 상기 실시예 2-1과 실질적으로 동일한 방법으로 30nM의 siOpa1, siFis1, 1μg/mL의 pCMV-Fis1 플라스미드를 각각 형질주입하고, 별도의 조골세포에 40μM의 봉크렉산을 처리하고, 추가적으로 상기 실시예 1에서 추출한 조골세포에 30nM의 Bax (Bcl-2-associated X)의 siRNA인 siBax, 1μg/mL의 pCMV-Bax 플라스미드 (한국 인간 유전자 은행, ID: mMU001857)를 각각 형질주입하고, 상기 실시예 2-1의 10% fetal bovine serum (Gibco) 및 100U/mL의 페니실린-스트렙토마이신 (penicillin-streptomycin, Gibco)이 첨가된 alpha MEM (Minimum Essential Media, Hyclone)으로 구성된 배지에서 상기 조골세포들의 분화를 5일동안 유도하였다. 상기 siRNA의 대조군으로 상기 실시예 2-1의 control siRNA를 상기 siRNA와 실질적으로 동일한 방법으로 형질주입한 조골세포, 상기 플라스미드의 대조군으로 유전자가 삽입되지 않은 pCMV-SPORT6 empty vector 플라스미드를 상기 pCMV-Fis1 플라스미드와 실질적으로 동일한 방법으로 형질주입한 조골세포, 상기 Bongkrekic acid의 대조군으로 0.01M Tris 용액을 처리한 조골세포를 준비하였다. 상기 Bax (Bcl-2-associated X)의 siRNA인 siBax의 구체적인 정보는 하기 표 2에 나타내었다.
| siRNA 이름 | ID number (Bioneer siRNA IDs) |
RNA accession | 염기서열 (5’ → 3’) | 서열번호 |
| siBax Forward | 12028-1 | NM_007527.3 | gcugcagaggaugauugcutt | 5 |
| siBax Reverse | agcaaucauccucugcagctt | 6 |
실시예 3-2. alkaline phosphatase (ALP) 염색
상기 실시예 3-1에서 분화를 유도한 조골세포의 골형성 활성을 확인하기 위해 골형성 마커인 alkaline phosphatase (ALP)의 염색을 수행하고 관찰하였다. 구체적으로, ALP 염색은 1mg의 Naphthol AS-MX phosphate (Sigma)를 100μL의 N,N-dimethylformamide (Sigma)에 용해시킨 후, 2 mL의 0.1% Fast blue BB salt (Sigma) 용액을 첨가한 후 37℃에서 30분 동안 진행하였다. 염색의 진한 정도로 골형성 활성을 확인하였고, 염색이 진하게 될수록 ALP의 발현이 높은 것으로 평가하였다.
실시예 3-3. 실시간 중합효소 연쇄반응 (Quantitative RT-PCR, qRT-PCR)
상기 실시예 3-2에서 ALP 염색을 수행한 조골세포의 유전자 발현 수준을 평가하기 위해 qRT-PCR을 수행하였다. QIAzol Lysis Reagent (Qiagen, Germany) 및 RNeasy Mini Kit (Qiagen, Germany)를 사용하여 상기 세포에서 전체 RNA를 추출하고, 제조업체 지침에 따라 PrimeScript RT Reagent Kit (Takara, Japan)를 사용하여 cDNA를 준비하였다. TB Green Premix Ex Taq II (Takara, Japan) 및 StepOnePlus Real-Time PCR system (Applied Biosystems, USA)을 사용하여 Quantitative RT-PCR을 수행하였다. 상대적 유전자 발현은 18S rRNA로 정규화하여 표준 2(-ΔΔCt) 계산을 사용하여 결정되었고, 사용된 프라이머 정보를 하기 표 3에 구체적으로 나타내었다.
| 유전자이름 | 염기서열 (5’ → 3’) | 서열번호 |
| Alpl F_primer | ccaactcttttgtgccagaga | 7 |
| Alpl R_primer | ggctacattggtgttgagctttt | 8 |
| Ibsp F_primer | cagggaggcagtgactcttc | 9 |
| Ibsp R_primer | agtgtggaaagtgtggcgtt | 10 |
실시예 3-4. 조골세포 염색정도 및 분화와 관련된 유전자 발현 수준 평가
상기 실시예 3-2에서 ALP 염색한 조골세포를 관찰한 결과를 도 2a, 3a, 3c, 4a, 5a 및 5b에 나타내었다. siOpa1을 형질주입한 조골세포, pCMV-Fis1 플라스미드를 형질주입한 조골세포, pCMV-Bax 플라스미드를 형질주입한 조골세포 및 봉크렉산을 처리한 조골세포의 경우 각각 대조군에 비해 염색정도가 더 강하게 나타났고, siFis1을 형질주입한 조골세포 및 siBax를 형질주입한 조골세포의 경우 각각 대조군에 비해 염색정도가 더 약하게 나타났다.
상기 실시예 3-3에서 qRT-PCR을 수행하여 유전자 발현수준을 평가한 결과를 도 2b, 3b, 3d 및 4b에 나타내었다. siOpa1을 형질주입한 조골세포, pCMV-Fis1 플라스미드를 형질주입한 조골세포 및 봉크렉산을 처리한 조골세포의 경우 각각 대조군에 비해 골형성 마커로 알려진 Alpl, Ibsp의 발현이 유의미하게 증가하였고, siFis1을 형질주입한 조골세포의 경우 대조군에 비해 Alpl, Ibsp의 발현이 유의미하게 감소하였다. 이러한 결과를 통해 Opa1 유전자 발현의 억제, Fis1 유전자 발현의 촉진, Bax 유전자 발현의 촉진 및 봉크렉산 처리를 통해 미토콘드리아의 분열 및 도넛 모양이 형성되고 이를 통해 조골세포 골형성 활성도를 증가시킨다는 것을 확인하였다. 상기 실험을 통해 확인한 유전자 및 봉크렉산(Bongkrekic acid)이 미토콘드리아에 미치는 효과 및 이에 따른 골형성을 표현한 모식도를 도 6에 나타내었다.
<110> Seoul National University R&DB Foundation
<120> Composition for promoting bone formation or treating bone disease
by acting on osteoblast mitochondria
<130> DPP20210572KR
<160> 10
<170> koPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siOpa1 Forward
<400> 1
guguucacaa cgaaaccaat t 21
<210> 2
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siOpa1 Reverse
<400> 2
uugguuucgu ugugaacact t 21
<210> 3
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siFis1 Forward
<400> 3
cugauugaua aggccaugat t 21
<210> 4
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siFis1 Reverse
<400> 4
ucauggccuu aucaaucagt t 21
<210> 5
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siBax Forward
<400> 5
gcugcagagg augauugcut t 21
<210> 6
<211> 21
<212> RNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> siBax Reverse
<400> 6
agcaaucauc cucugcagct t 21
<210> 7
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Alpl F_primer
<400> 7
ccaactcttt tgtgccagag a 21
<210> 8
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Alpl R_primer
<400> 8
ggctacattg gtgttgagct ttt 23
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ibsp F_primer
<400> 9
cagggaggca gtgactcttc 20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ibsp R_primer
<400> 10
agtgtggaaa gtgtggcgtt 20
Claims (16)
- 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인,
골형성 촉진용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제는 Opa1 유전자를 타겟으로 하는 Small-interfering RNAs (siRNAs), microRNAs (miRNAs), antisense oligonucleotides (ASOs), 및 aptamers로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 골형성 촉진용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Fis1 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이고,
상기 Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Bax 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 골형성 촉진용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서, 원형도 ((4 x 미토콘드리아의 넓이)/(π x (최대 페럿 직경)2)) 값이 0.5 내지 1 또는 하나 이상의 구멍이 형성된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 골형성 촉진용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 봉크렉산을 0.1 내지 100μM의 농도로 포함하는, 골형성 촉진용 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서 Alpl 및 Ibsp로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 발현 증가 효과가 있는, 골형성 촉진용 약학적 조성물.
- 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인,
골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제7항에 있어서, 상기 Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제는 Opa1 유전자를 타겟으로 하는 Small-interfering RNAs (siRNAs), microRNAs (miRNAs), antisense oligonucleotides (ASOs), 및 aptamers로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Fis1 유전자를 암호화하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이고,
상기 Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제는 Bax 유전자를 암호화하는 하는 mRNA 및 이를 운반하는 재조합 벡터로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제7항에 있어서, 원형도 ((4 x 미토콘드리아의 넓이)/(π x (최대 페럿 직경)2)) 값이 0.5 내지 1 또는 하나 이상의 구멍이 형성된 조골세포 유래 미토콘드리아의 비율을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 봉크렉산을 0.1 내지 100μM의 농도로 포함하는, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, Alpl 및 Ibsp로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 발현 증가 효과가 있는, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제7항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 골질환은 골절, 골파괴증, 골다공증, 골연화증, 골관절염, 류머티즘 관절염, 또는 골형성 장애인, 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인,
골형성 촉진용 식품 조성물. - 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 조골세포의 활성화를 촉진하는 제제는
1) 봉크렉산 (Bongkrekic acid) 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염,
2) Opa1 또는 이를 암호화하는 유전자의 억제제,
3) Fis1 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제 및
4) Bax 또는 이를 암호화하는 유전자의 활성화제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인,
골질환 예방 또는 개선용 식품 조성물. - 제15항에 있어서, 상기 골질환은 골절, 골파괴증, 골다공증, 골연화증, 골관절염, 류머티즘 관절염, 또는 골형성 장애인, 골질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210056626A KR102587803B1 (ko) | 2021-04-30 | 2021-04-30 | 조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| PCT/KR2022/006201 WO2022231388A1 (ko) | 2021-04-30 | 2022-04-29 | 조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132546A KR20230145293A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Bax 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132547A KR20230145294A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | 봉크렉산에 의한 조골세포 활성화를 통한 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132544A KR102622408B1 (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Opa1 억제에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132545A KR20230145292A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Fis1 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210056626A KR102587803B1 (ko) | 2021-04-30 | 2021-04-30 | 조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
Related Child Applications (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020230132544A Division KR102622408B1 (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Opa1 억제에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132546A Division KR20230145293A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Bax 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132545A Division KR20230145292A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Fis1 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132547A Division KR20230145294A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | 봉크렉산에 의한 조골세포 활성화를 통한 골질환 치료용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220149245A true KR20220149245A (ko) | 2022-11-08 |
| KR102587803B1 KR102587803B1 (ko) | 2023-10-10 |
Family
ID=83848422
Family Applications (5)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210056626A KR102587803B1 (ko) | 2021-04-30 | 2021-04-30 | 조골세포 미토콘드리아에 작용하여 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132547A KR20230145294A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | 봉크렉산에 의한 조골세포 활성화를 통한 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132546A KR20230145293A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Bax 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132544A KR102622408B1 (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Opa1 억제에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132545A KR20230145292A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Fis1 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
Family Applications After (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020230132547A KR20230145294A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | 봉크렉산에 의한 조골세포 활성화를 통한 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132546A KR20230145293A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Bax 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132544A KR102622408B1 (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Opa1 억제에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
| KR1020230132545A KR20230145292A (ko) | 2021-04-30 | 2023-10-05 | Fis1 활성화에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (5) | KR102587803B1 (ko) |
| WO (1) | WO2022231388A1 (ko) |
-
2021
- 2021-04-30 KR KR1020210056626A patent/KR102587803B1/ko active IP Right Grant
-
2022
- 2022-04-29 WO PCT/KR2022/006201 patent/WO2022231388A1/ko unknown
-
2023
- 2023-10-05 KR KR1020230132547A patent/KR20230145294A/ko not_active Application Discontinuation
- 2023-10-05 KR KR1020230132546A patent/KR20230145293A/ko not_active Application Discontinuation
- 2023-10-05 KR KR1020230132544A patent/KR102622408B1/ko active IP Right Grant
- 2023-10-05 KR KR1020230132545A patent/KR20230145292A/ko not_active Application Discontinuation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Cell Death & Disease, 9, 674/1-14, 2018. * |
| Journal of Cellular Biochemistry, 100(3), 703-715, 2007.* * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20230145014A (ko) | 2023-10-17 |
| KR20230145292A (ko) | 2023-10-17 |
| KR20230145294A (ko) | 2023-10-17 |
| KR102587803B1 (ko) | 2023-10-10 |
| KR102622408B1 (ko) | 2024-01-05 |
| WO2022231388A1 (ko) | 2022-11-03 |
| KR20230145293A (ko) | 2023-10-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2525913C1 (ru) | Новый пептид и его применение | |
| CN104114572A (zh) | 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物 | |
| KR20140013887A (ko) | 눈 손상 및 질환 치료용 성체 줄기 세포／전구 세포 및 줄기 세포 단백질 | |
| WO2016049867A1 (zh) | 以外源性线粒体为有效成份的组合物、其用途及修复细胞的方法 | |
| JP2009256374A (ja) | 疾患および損傷の処置のための一酸化窒素ドナー | |
| CN106754723B (zh) | 一种具有抗肿瘤功能的免疫细胞及其应用 | |
| US20190048054A1 (en) | Mesenchymal Stem Cells Expressing Biomarkers that Predict the Effectiveness of Mesenchymal Stem Cells for Treating Diseases and Disorders | |
| Guo et al. | HIF-1α/SDF-1/CXCR4 axis reduces neuronal apoptosis via enhancing the bone marrow-derived mesenchymal stromal cell migration in rats with traumatic brain injury | |
| Chen et al. | A selected small molecule prevents inflammatory osteolysis through restraining osteoclastogenesis by modulating PTEN activity | |
| JP6537092B2 (ja) | ｍＴＯＲインヒビターを含む、眼の症状、障害または疾患を治療または予防するための医薬およびその応用 | |
| KR102622408B1 (ko) | Opa1 억제에 의한 조골세포 활성화를 통한 골형성 촉진 유도용 또는 골질환 치료용 조성물 | |
| EP3331538B1 (en) | Modulating inflammasome activation of myeloid-derived suppressor cells for treating gvhd or tumor | |
| US9295709B2 (en) | Pharmaceutical composition comprising MicroRNA-30B, MicroRNA-133A, or MicroRNA-202-5P inhibitor for inhibiting cancer | |
| KR101467631B1 (ko) | 자살 유전자 치료법에서의 발프로산의 기능 | |
| US9546354B2 (en) | Z cells activated by zinc finger-like protein and uses thereof in cancer treatment | |
| CN112569338B (zh) | Tdfa在制备预防和/或治疗眼表炎症疾病的药物中的应用 | |
| CN107929286A (zh) | 氧化苦参碱在制备抗关节软骨退变的药物中的应用 | |
| KR20170091882A (ko) | 편도 유래 중간엽 줄기세포 또는 이의 조정 배지를 포함하는 골다공증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| RU2777371C2 (ru) | Клетка-естественный киллер, содержащая экзогенную митохондрию, и фармацевтическая композиция, включающая такую клетку | |
| KR101721811B1 (ko) | ｍｉｃｒｏＲＮＡ－30ｂ, ｍｉｃｒｏＲＮＡ－133ａ 또는 ｍｉｃｒｏＲＮＡ－202－5ｐ의 억제제를 포함하는 항암용 약학적 조성물 | |
| KR101705378B1 (ko) | 간엽줄기세포 및 ⅰｌ-21 차단제를 포함하는 이식편대숙주질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| US11389483B2 (en) | Methods for treating pain | |
| Gao et al. | Nr4a1 enhances Wnt4 transcription to promote osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells and alleviates inflammation-inhibited bone regeneration | |
| KR20220002086A (ko) | Sirt7 억제제를 포함하는 알레르기 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR20130023797A (ko) | 자연살해세포 억제제 및 간엽줄기세포를 유효성분으로 포함하는 이식편대숙주질환의 예방 또는 치료를 위한 세포치료제 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| AMND | Amendment | ||
| X701 | Decision to grant (after re-examination) | ||
| A107 | Divisional application of patent | ||
| GRNT | Written decision to grant |