KR101526303B1 - 항노화용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 아주가 렙탄스(Aguga reptans)를 식물줄기세포배양기술(Plant stem cell culture technology)로 배양하여 추출한 페닐프로파노이드(phenylpropanoid)를 함유하여 항노화 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다. 그리고 피부세포재생 및 항노화 효과를 더욱 배가 시키기 위해 벌베리 새싹(Vaccinium Myrtillus Bud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron Gigantea Bud), 복숭아 새싹(Prunus Persica Bud) 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 화합물을 더 함유할 수 있다.

본 발명에 의하여 제공되는 화장료 조성물은 피부에 대한 안전성이 우수하며, 피부의 주름 개선 효과가 탁월하여 항노화용 화장료 조성물로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에서 사용한 아주가 렙탄스로부터 추출한 페닐프로파노이드가 콜라겐의 생합성을 농도의존적으로 증가시키므로 본 발명을 사용할 시, 노화된 피부에 콜라겐을 공급하여 피하근육의 위축으로 탄력과 윤기가 없어진 피부에　생기를 갖게 할 수 있으며, 피부 탄력증진과 더불어 노화를 예방할 수 있는 효능이 있다.

아주가 렙탄스, 페닐프로파노이드, 새싹 추출물, 항노화, 화장료 조성물

Description

항노화용 화장료 조성물{Anti-aging cosmetic composition}

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 아주가 렙탄스(Aguga reptans)에서 추출한 페닐프로파노이드(phenylpropanoid)를 유효성분으로 함유하는 항노화용 조성물에 관한 것이다.

피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 기관들을 온도·습도 변화, 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해 주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이렇게 중요한 피부 역시 인체의 다른 장기와 마찬가지로 나이가 들어감에 따라 점차 노화가 진행되게 되고, 그 결과로서 피부 탄력손실, 각질화, 주름 생성, 피부 위축 등의 현상이 나타나게 된다. 이러한 피부 노화 현상의 원인은 크게 두 가지로 세포의 유전자 변이, 조직 변화 등 내적 요인과 자외선, 습도 등 외적 요인으로 분류될 수 있다(Masamitsu Ichihashi, Fragrance Journal, Vol. 32, No. 5, 24 ~ 30). 특히 자외선에 의한 노화 현상을 광노화라고 하며, 이러한 광노화 현상은 자외선에 의하여 세포 내부에 활성 산소 라디칼이 생성되고, 이 활성 산소는 염증성 반응을 일으키는 신호전달 체계를 통하여 진피층의 탄력 섬유인 콜라겐, 엘라스틴 등의 단백질 분해 효소(MMP-1, MMP-3, MMP-9, etc.) 의 합성을 촉진하여(Fisher G.J. et al., Nature, Vol. 379, 335~339) 진피층의 탄력을 감소시킴으로써 피부 주름이 유발되는 것으로 알려져 있다.

따라서, 이러한 피부 노화 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위하여 주름 개선 효과가 있는 생리활성물질을 개발하고자 하는 노력이 꾸준히 있어 왔다. 대표적으로 1995년 광노화된 피부의 개선을 위한 치료제로 트레티노인(trans-retinoic acid)이 미국 FDA 허가를 받았으며, 이보다 부작용이 적은 레티놀이 1990년대 중·후반부터 화장품 원료에 사용되기 시작하면서 본격적으로 주름 개선 화장품이 출시되기 시작하였다. 그 이후로 여성 호르몬 유사 물질, 각종 식물에서 추출한 항산화제 등이 주름 개선 원료로서 화장품에 도입되었다.

그러나 이러한 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 자극, 트러블 등 피부 부작용을 유발하는 등 여러 가지 문제점을 가지고 있었다. 이에, 피부 부작용을 유발하지 않으면서도 피부 노화 방지 효과를 갖는 원료에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 최근에는 식물의 전형성능(totipotency)을 이용한 식물세포배양기술이 발전되면서 식물로부터 유래되는 기능성 2차 대사산물(secondary metabolite)에 대한 관심이 증폭되고 있다. 이 2차 대사산물은 다양한 생리활성을 갖는 것으로 알려지고 있어 고기능성 화장품의 신원료로 식물 줄기세포 유래 추출물질들이 주목을 받고 있다. 이 기술을 이용하면 천연에 존재하나, 화학적 합성방법으로는 얻기 어려웠던 고기능성 활성물질을 경제적으로 생산할 수 있다는 점에서 지금까지 사용하지 못했던 새로운 성분들을 개발하고 응용할 수 있게 될 것으로 기대되고 있다. 특히 기능성 화장품에 대한 소비자들의 요구가 증대하는 것만큼 신 기능성 소재나 관련 기술의 발전이 충분하지 못했다는 점에서 무수히 많은 신 기능성 성분들을 만들어 낼 수 있는 식물줄기세포기술을 이용한 화장품은 다양한 피부 효능, 특히 항노화 효능 부분에서 큰 인기를 끌게 될 것이다.

이에, 본 발명자들은 피부 부작용을 유발하지 않는 천연 식물 유래 성분이면서 피부 노화방지 및 주름개선 효과가 뛰어난 화장료 개발을 위해 연구를 거듭한 결과, 아주가 렙탄스의 줄기세포 추출 성분을 함유하는 화장료 조성물을 개발하였다. 여기에 벌베리(Vaccinium Myrtillus), 세콰이어(Sequoiadendron Gigantea), 복숭아(Prunus Persica) 등의 새싹 추출물을 추가로 함유하게 되면 그 효과가 더욱 커진다는 것을 확인하였다.

이 때 아주가 렙탄스 추출물은 아주가 렙탄스로부터 캘러스(callus)를 유도하고 세포 배양(cell culture)한 후 추출하여 가공한 페닐프로파노이드를 유효성분으로 함유할 수 있다. 상기 유효성분을 함유하는 화장료 조성물이 세포 재생력을 강화시키고 활성산소를 제거함으로서 탄력 증진, 주름 개선 효과가 있다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다. 또한, 이를 노화된 피부의 피부세포 재생과 증식을 촉진시키는데 효과가 있는 벌베리(Vaccinium Myrtillus), 세콰이어(Sequoiadendron Gigantea) 또는 복숭아(Prunus Persica)의 식물 새싹 호르몬 성분들과 혼합 사용하였을 경우 그 효과가 매우 커진다는 사실도 발견하였다.

따라서 본 발명의 목적은 식물유래 성분들을 이용하여 피부 안전성이 우수하며 피부 노화 방지 및 주름 개선 효과가 뛰어난 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아주가 렙탄스(Aguja Reptans) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 양태는, 상기 항노화용 화장료 조성물에 벌베리 새싹(Vaccinium Myrtillus Bud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron Gigantea Bud) 또는 복숭아 새싹(Prunus Persica Bud)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 새싹 추출물을 더 함유하는 항노화용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

이때, 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가진다.

또한, 종래와 동일한 기술적 구성 및 작용에 대한 반복되는 설명은 생략하기로 한다.

아주가 렙탄스 추출물은 최근 각광받고 있는 식물줄기세포배양 기술을 이용하여 추출하는데, 아주가 렙탄스의 잎사귀로부터 캘러스(callus)를 유도한 후 고체배양(solid cell culture)하여 줄기세포주(stem cell line)를 확립하고 현탁배양(suspension cell culture)을 통해 유효 성분을 대량으로 생산한 후 추출하여 얻는다. 아주가 렙탄스로부터 유효성분을 추출하는 방법은 한국공개특허 제 2007-0113193호에 공지된 추출방법과 같이 상기 식물의 조직 외식체(tissue explant)로부터 유래되는 세포주의 식물성 배양 방법으로 추출할 수 있으며, 미국공개특허 제 2007-0015262호에 공지된 바와 같이 아주가 렙탄스IRBN22(DSM 16451)유래의 안정한 식물세포주에 5-탄소 원자 이하의 알코올의 혼합물을 가하여 용출되는 페닐프로파노이드를 추출할 수 있으나, 상기의 추출방법에 한정되지는 않는다.

본 발명에서 사용한 아주가 렙탄스 추출물은 상업적으로 구입한 것으로서 제품명은 Teupolioside HTN(INCI name: Teupolioside; 제조회사: I.R.B. Istituto di Ricerche Biotechnogiche)을 사용하였다.

한편, 상기 아주가 렙탄스 추출물은 아주가 렙탄스로부터 추출하여 분리/정제한 페닐프로파노이드를 유효성분으로 함유할 수 있는데, 본 발명에서 사용된 페닐프로파노이드는 피부 탄력에 기여하는 생체분자들의 기능을 떨어뜨리는 활성 산소들을 제거하여 생물학적 산화반응으로부터 피부를 보호한다. 또한, 피부에서 콜라겐 합성을 증가시킴으로써 피부 진피층의 탄력 섬유를 증가시켜 주름을 개선·완화하는 효과가 있으며, 피부 염증의 원인이기도 한 5-알파 환원효소(5-alpha reductase)의 활성을 억제시키기도 한다. 이 중에서도 생물학적 산화반응을 억제하는 항산화 효과는 익히 알려진 비타민 C나 토코페롤(tocopherol), 레스베라트롤(resveratrol)과 같은 항산화제보다 그 효과가 수배에 이르는 것으로 보고되고 있다. 따라서 피부 노화의 주요 원인인 항산화 반응을 외부로부터 억제하여 방어하고 내부에서는 콜라겐 합성을 촉진시키고 5-알파 환원효소의 활성을 억제시켜 종합적인 항노화 효과를 나타내게 된다.

상기 페닐프로파노이드 성분은 아주가 렙탄스로부터 추출하여 가공된 평균 분자량이 780 ~ 820 달톤(Dalton)인 저분자량 물질로, 본 발명에 의한 화장료 조성 물은 상기 페닐프로파노이드 성분을 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 10 중량%로 함유하며, 더 바람직하게는 0.01 ~ 5 중량%로 함유한다. 함유량이 0. 001 중량% 미만일 경우에는 주름개선 효과를 기대하기 어려우며, 10 중량%를 초과하는 경우에는 더 이상 효능이 크게 증가하지 않아 그 원료 효율성이 크게 떨어지게 된다.

본 발명에서 사용된 벌베리, 세콰이어 또는 복숭아 새싹 추출물의 각 성분은 조성물 총 중량에 대하여 각각 0.001 ~ 10 중량%로 함유하며, 더 바람직하게는 0.05 ~ 5 중량%로 함유한다. 각 성분의 함유량이 0.001 중량% 미만일 경우에는 피부 세포 재생 및 증식 촉진 효과를 기대하기 어려우며, 10 중량%를 초과하는 경우에는 더 이상 효능이 크게 증가하지 않아 그 원료 효율성이 떨어지게 된다.

또한, 본 발명은 페닐프로파노이드 및 식물 새싹 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다. 상기 페닐프로파노이드는 아주가 렙탄스로부터 추출하며, 상기 식물 새싹 추출물은 벌베리 새싹(Vaccinium MyrtillusBud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron GiganteaBud) 및 복숭아 새싹(Prunus PersicaBud)으로 이루어진 군에서 1종 이상을 선택하여 추출된 추출물을 상기 화장료 조성물에 혼합하여 사용한다. 앞서 설명한 바와 같이, 상기의 식물 새싹 추출물도 공지된 방법에 의해 추출하는 것으로 한다. 이와 같이 제조된 상기 조성물은 탄력 증진용 혹은 주름 개선용인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤 또는 피부 점착 타입 화장료의 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있다.

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 의하여 제공되는 화장료 조성물은 피부에 대한 안전성이 우수하며, 피부의 주름 개선 효과가 탁월하여 항노화용 화장료 조성물로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에서 사용한 아주가 렙탄스로부터 추출한 페닐프로파노이드가 콜라겐의 생합성을 농도의존적으로 증가시키므로 본 발명을 사용할 시, 노화된 피부에 콜라겐을 공급하여 피하근육의 위축으로 탄력과 윤기가 없어진 피부에　생기를 갖게 할 수 있으며, 피부 탄력증진과 더불어 노화를 예방할 수 있는 효능이 있다.

이하, 본 발명을 구체적인 실시 예에 의해 보다 더 상세히 설명하고자 한다. 하지만, 본 발명은 하기 실시 예에 의해 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 사상과 범위 내에서 여러 가지 변형 또는 수정할 수 있음은 이 분야에서 당업자에게 명백한 것이다.

[ 실시예 1] 유효성분 추출

아주가 렙탄스의 잎사귀로부터 캘러스 유도용 배지에서 캘러스를 유도하여 선별한 후, 선별된 캘러스를 고체배지에서 배양하여 안정적으로 생장하는 줄기세포주를 선별하였다. 선별된 줄기세포주를 당 및 성장호르몬이 함유된 현탁배양액에서 배양한 후, 배양된 세포로부터 외부 액상으로 배출된 페닐프로파노이드를 함유하는 추출물을 얻었다. 또한, 벌베리, 세콰이어 및 복숭아 새싹의 추출물도 상기와 동일한 방법으로 얻었다.

[ 실시예 2] 콜라겐 합성 촉진 효과

인체 섬유아세포를 24 웰(well) 평판배양기에 배양한 후, 각각 0, 1, 5, 10 ppm의 아주가 렙탄스로부터 추출하여 가공한 페닐프로파노이드(Teupolioside HTN ; 제조회사:I.R.B.)가 포함된 배지로 교체하였다. 배양 3일째에 10%의 우태아 혈청이 함유된 배지인 DMEM(Dulbeco's Modified Eagle's Medium)를 각 웰 당 0.5㎖씩 첨가한 후, L[2,3,4,5-³H]-프롤린 10μCi를 첨가하였다. 24시간 경과 후, 각 웰에 들어있는 배지와 세포들을 긁어 모아 5% 트리클로로아세트산 (Trichloroacetic acid ; TCA) 용액에 넣어 수세한 후, 대조군의 시험관은 4℃에서 보관하고, 페닐프로파노이드 각 농도별 실험군의 시험관에는 타입 I 콜라게나제(type I collagenase) 1 unit/㎕를 넣고, 37℃에서 90분간 배양하였다. 그 후, 모든 시험관에 50% 트리클로로아세트산을 0.05㎖씩 첨가하고 4℃에서 20분간 방치한 다음, 각각 12,000rpm에서 10분간 원심 분리하여, 각각의 상등액과 침전물을 액체 신틸레이션 계수기 (LSC ; Liquid Scintillation Counter)로 씨피엠(CPM ; Count Per Minute) 값을 얻어, 하기 수학식 1에 의거하여 대조군과 실험군에 대해 콜라겐 생합성 값(RCB ; Relative Collagen Biosynthesis)을 측정하고 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

[수학식 1]

[표 1]

상기 표 1에서 볼 수 있는 바와 같이 아주가 렙탄스로부터 추출한 페닐프로파노이드가 섬유아세포의 콜라겐 생합성을 농도의존적으로 증가시킴을 알 수 있었다.

[ 제형예 1 ~ 4 및 비교제형예 1 ~ 2]

실제 사람의 피부에서 주름 완화 효과를 시험하기 위하여 하기 표 2와 같은 조성의 유액 형태의 크림 제형을 제조하였다. 70 ℃에서 수상파트와 유상파트를 3600rpm으로 호모믹싱한 후 카보머와 중화제를 투입하여 제조하였다. 상기의 수상파트는 정제수에 페닐프로파노이드와 새싹추출물, 글리세린, 부틸렌글라이콜 및 이디티에이-2나트륨을 혼합하여 만들었고, 유상파트는 식물성경화유와 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드에 스테아린산, 글리세릴스테아레이트, 세테아릴 알코올, 아라키딜/베헤닐 알코올 & 아라키딜 글루코사이드, 세틸아릴 알코올 & 세테아릴 글루코 사이드 및 액상파라핀을 고온에서 용해시켜 제조하였다.

[표 2]

[ 실시예 3] 주름 개선 효과

상기 표 2의 제형예 1 ~ 4 및 비교제형예 1 ~ 2의 주름개선효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 30대 여성 140명을 각각 20명씩 7조로 나누어 아침 저녁 매일 2회씩 8주간 지정된 눈가 부위에 제형예 1 ~ 4 및 비교제형예 1 ~ 2의 크림을 각각 도포하게 한 후, 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오미터(visiometer : SV60, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하였다. 그 결과를 하기 표 3 및 도 1에 나타내었으며, 이 결과는 8주 후의 각각의 파라미터(parameter) 값에서 8주 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 이 값은 음수가 나올수록 주름 개선 효과가 높다는 것을 의미한다.

[표 3]

R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이 값

R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균

R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고치

R4 : 주름 등고선의 기선(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값

R5 : 주름 등고선의 기선에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 평균값

[ 실시예 4] 피부 안전성 평가

상기 표 3 및 하기 도 1에 표시된 바와 같이, 페닐프로파노이드 성분을 함유한 제형예 1 ~ 4의 화장료 조성물이 피부에 안전한가를 확인하기 위하여 상기 제형예 1 ~ 4 및 비교제형예 1 ~ 2에 대해 피부 안전성 평가를 실시하였다. 피부 안전성 평가는 의과대학에서 일반적으로 진행하는 피부과 테스트 방법으로 수행하였으며, 평균연령 31.1세의 성인여성 30명의 등에 48시간 첩포시험한 후 24시간 후까지 자극여부를 관찰한 결과 무자극 판정 결과를 얻었다. 따라서 상기 제형예로 제조된 화장료는 피부 테스트 상 안전한 조성물임을 확인할 수 있었다. 특히 제형예 1 ~ 4의 조성물은 비교제형예 2에 비하여 피부 주름 개선 효과가 탁월하였으며, 특히 페닐프로파노이드, 벌베리 새싹 추출물, 세콰이어 새싹 추출물 및 복숭아 새싹 추출물을 모두 함유한 제형예 1의 조성물을 도포하였을 경우 피부 주름 개선 효과가 가장 우수하였다.

도 1은 제형예 1 ~ 4 및 비교제형예 1 ~ 2의 주름 개선 효과를 나타낸 그래프이다.

Claims (10)

1. 아주가 렙탄스(Aguja Reptans) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서,

   상기 항노화용 화장료 조성물에 벌베리 새싹(Vaccinium Myrtillus Bud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron Gigantea Bud) 또는 복숭아 새싹(Prunus Persica Bud)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 새싹 추출물을 더 함유하는 항노화용 화장료 조성물.
3. 제 1항에 있어서,

   상기 아주가 렙탄스 추출물은 아주가 렙탄스로부터 식물세포 배양기술을 이용하여 추출한 페닐프로파노이드를 함유하는 항노화용 화장료 조성물.
4. 제 1항에 있어서,

   상기 아주가 렙탄스 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 10 중량%로 함유하는 항노화용 화장료 조성물.
5. 제 2항에 있어서,

   상기 벌베리 새싹(Vaccinium Myrtillus Bud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron Gigantea Bud), 복숭아 새싹(Prunus Persica Bud) 또는 이들의 혼합물로 이루어진 새싹 추출물 군에서 선택된 화합물에서 각 성분은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 10 중량%로 함유하는 항노화용 화장료 조성물.
6. 제 1항에 있어서,

   상기 조성물은 탄력 증진용 혹은 주름 개선용인 것을 특징으로 하는 항노화용 화장료 조성물.
7. 페닐프로파노이드 및 식물 새싹 추출물을 함유하는 화장료 조성물.
8. 제 7항에 있어서,

   상기 페닐프로파노이드는 아주가 렙탄스로부터 추출한 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
9. 제 7항에 있어서,

   상기 식물 새싹 추출물은 벌베리 새싹(Vaccinium Myrtillus　Bud), 세콰이어 새싹(Sequoiadendron Gigantea　Bud) 및 복숭아 새싹(Prunus Persica　Bud)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
10. 제 7항에 있어서,

    상기 조성물은 탄력 증진용 혹은 주름 개선용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.

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