KR101398737B1 - 아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 종양의 예방 또는 치료에 유용한 조성물을 제공한다. 본 발명은 아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 것을 특징으로 하는 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
아카시아속 나무 껍질 유래물, 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물, 아카시아속 나무 껍질의 추출물, 아카시아속 나무 껍질 폴리페놀, 축합형 탄닌, 플라반-3-올, 플라바놀류 중합체

Description

아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING AND/OR TREATING TUMOR CONTAINING COMPONENT ORIGINATING IN THE BARK OF TREE BELONGING TO THE GENUS ACACIA}
본 발명은 아카시아속(genus Acacia)에 속하는 수목에서 유래하는, 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물, 및 이 조성물의 식품, 동물용 사료, 및 의약으로서의 용도에 관한 것이다.
일본에서는 제2차 세계 대전 후, 공중 위생의 개선과 항생 물질의 발견 등에 의해 감염증에 의한 사망이 격감했지만, 대신에 생활 습관병 외에, 특히 암의 발생수는 증가의 일로를 걸어, 1981년에는 국민의 사망 원인의 제1위가 될 정도이다. 오늘날, 암으로 사망하는 사람은 약 3명 중에 1명의 비율로 있다. 또한, 암은 일본뿐만아니라 다른 각국에서도 급속히 증가하고 있어, 인류 공통의 적이라고 해야할 질환이다.
따라서, 암을 비롯한 종양의 예방 또는 치료 방법의 개발은 중요하고 또한 급무의 과제라고 할 수 있다.
실제로, 약제로서 다양한 항암제가 개발되어, 사용되고 있지만, 중대한 부작용을 수반하는 등의 문제도 많다.
아카시아는 아카시아 벌꿀이나 그 나무 껍질로부터 추출되는 탄닌을 가죽 타닝제나 목재용 접착제로서 이용할 수 있는 것이 알려져 있고, 또한 최근에는 아카시아속의 추출물에 COX-2의 선택적 저해 효과(특허 문헌 1)가 있는 것이나 아카시아속의 나무 껍질에 활성 산소 소거 효과(특허 문헌 2)나 티로시나아제 활성 저해 효과에 의한 미백 효과(특허 문헌 3)가 있는 것이 개시되어 있다. 그러나, 아카시아속의 나무 껍질이나 나무 껍질 유래의 폴리페놀의 항종양 활성은 확인되어 있지 않았다.
특허 문헌 1: 일본 특허 공표 2004-532811호 공보
특허 문헌 2: 일본 특허 공개 제2004-352639호 공보
특허 문헌 3: 일본 특허 공개 (평)10-025238호 공보
<발명의 개시>
<발명이 해결하고자 하는 과제>
본 발명은 안정성이 높고, 종양의 예방 및/또는 치료에 유용한 조성물을 제공한다.
<과제를 해결하기 위한 수단>
본 발명자들은 상기 과제를 해결하기 위해 예의 연구를 거듭한 결과, 아카시아속 나무 껍질 유래물이 우수한 항종양 활성을 갖고, 종양의 예방 또는 치료에 유용한 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은 아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 것을 특징으로 하는 종양의 예방 및/또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 아카시아속 나무 껍질 유래물을 사용하는, 종양의 예방 또는 치료 방법에 관한 것이기도 하다.
또한, 본 발명은 종양의 예방 또는 치료용의 조성물을 제조하기 위한, 아카시아속 나무 껍질 유래물을 사용하는 방법에 관한 것이기도 하다.
<발명의 효과>
본 발명의 조성물은 항종양 활성, 특히 우수한 항악성종양 활성을 갖는다.
또한, 본 발명의 조성물은 장기간 복용하더라도 부작용 등의 염려가 적고, 안전성이 높다.
도 1은 YAC-1 세포의 생존 세포수의 변화를 도시한 도면이다.
도 2는 마우스에서의 종양 증식 저지 시험의 타임 스케줄을 도시한 도면이다.
도 3은 마우스의 이식 후 28일째의 평균 종양 중량을 도시한 도면이다.
<발명을 실시하기 위한 최선의 형태>
본 발명에서 사용할 수 있는 아카시아속 나무 껍질 유래물이란, 아카시아속에 속하는 수목(이하, 「아카시아」 또는 「아카시아속」이라 함)의 나무 껍질을 원료로 하여 얻어지는 것이면 특별히 제한되지 않고, 예를 들면, 아카시아속의 나무 껍질의 세편(細片), 분말 및 이들의 현탁액, 아카시아속의 나무 껍질의 추출액, 농축 추출액, 및 엑기스 분말 등의 추출물, 및 이 추출물을 정제하여 얻은 정제물을 들 수 있다. 우수한 항종양 활성이 얻어지는 점에서, 아카시아속의 나무 껍질 의 추출물, 특히 아카시아 나무 껍질 폴리페놀이 바람직하다.
본 발명에서는, 이들 아카시아속 나무 껍질 유래물을 1종만 사용할 수도 있고, 2종 이상 병용할 수도 있다.
본 발명에서 사용할 수 있는 아카시아는, 아카시아속에 속하는 수목이면 특별히 제한되지 않지만, 우수한 항종양 활성이 있는 아카시아속 나무 껍질 유래물이 얻어지는 점에서, 학명: 아카시아 미아른시 드 와일드(Acacia mearnsii De Wild., 일반명 블랙 와틀), 학명: 아카시아 만기움 윌드(Acacia mangium Willd., 일반명 아카시아 만기움), 학명: 아카시아 딜바타 링크(Acacia dealbata Link), 학명: 아카시아 데커렌스 윌드(Acacia decurrens Willd.), 및 학명: 아카시아 피크난타 벤쓰(Acacia pycnantha Benth.)로 이루어지는 군에서 선택되는 아카시아속의 나무 껍질이 바람직하고, 특히 아카시아 미아른시 드 와일드 및 아카시아 만기움 윌드가 바람직하다.
본 발명에서는 이들 아카시아속의 나무 껍질을 1종만 사용할 수도 있고, 2종 이상 병용할 수도 있다.
상기 아카시아속의 나무 껍질은, 통상, 수목으로서 벌채한 후, 나무 껍질만을 박리하여 채취하고 건조시킴으로써 얻어지는데, 바람직하게는 추가로 태양 건조시킨 나무 껍질이다.
아카시아속의 나무 껍질은 외피와 약간 섬유질의 내피로 이루어지고, 함수율 20% 정도 이하로 건조되면 햄머밀(hammer mill) 등의 분쇄기로 용이하게 미분화한다. 본 발명에서는, 아카시아속의 나무 껍질로서, 이 아카시아속의 내피와 외피의 양쪽을 함께 이용할 수도 있고, 어느 한쪽만을 이용할 수도 있다.
상기 아카시아속의 나무 껍질의 세편은 관용의 방법에 따라서 아카시아속의 나무 껍질을 적당한 크기로 분쇄하여 얻을 수 있다.
또한, 상기 아카시아속의 나무 껍질의 분말은 아카시아속의 나무 껍질을 관용의 방법으로 분쇄하여 분말화하여 얻을 수 있는데, 특히, 입경이 100 μm 이하, 특히 50 내지 70 μm인 분말이 바람직하다. 분말의 분획은, 함수율 20% 이하로 건조시킨 나무 껍질을 적당한 크기, 예를 들면 입경 1.6 mm 이하 정도로 분쇄하고, 얻어진 분말을 진동 체 등으로 등급 분류하여 요구되는 분말을 얻을 수 있다.
상기 아카시아속의 나무 껍질의 추출물은 아카시아속의 나무 껍질을 관용의 방법에 따라서 추출하여 얻을 수 있다. 우수한 항종양 활성을 갖는 아카시아속의 나무 껍질의 추출물을 얻기 위해서, 아카시아속의 나무 껍질을 알코올이나 극성 용매로 추출하는 것이 바람직하다.
이러한 알코올로서 에탄올 등을, 극성 용매로서 물 등을 사용할 수 있고, 또한 필요에 따라서 이들 용매를 단독 또는 2종 이상을 병용할 수도 있다. 특히, 우수한 항종양 활성을 얻기 위해서, 물과, 에틸 알코올 등의 알코올과의 혼합 용매가 바람직하다.
또한, 동일 또는 서로 다른 용매에 의해서 복수회 추출 조작을 행할 수도 있다.
우수한 항종양 활성을 갖는 추출물을 얻는 데에 있어서, 아카시아속의 나무 껍질로부터의 물 또는 열수에 의한 추출물을 추가로 에탄올로 추출하여 얻은 추출 물을 사용할 수도 있다.
추출은 아카시아속의 나무 껍질의 세편이나 분말 등에 용매를 첨가하고 필요에 따라서 교반하여 추출하는데, 온도나 시간 또는 고액비(solid-liquid ratio)에 대해서는 특별히 한정되지 않는다. 용매에 물을 이용하는 경우에는, 열수로 추출할 수도 있다. 얻어진 추출액은 그대로 동결 건조 또는 분무 건조할 수도 있고, 또는 감압 농축하고 나서 동결 건조 또는 분무 건조할 수도 있다. 얻어지는 추출물은, 추출액, 용액, 분말, 농축액, 페이스트상물 등의 다양한 형태로 할 수 있고, 널리 필요에 따라서 사용할 수 있다.
또한, 이들의 형태로 얻어진 본 발명의 아카시아속의 나무 껍질 추출물은 그대로 종양의 예방 또는 치료에 사용할 수 있는 외에, 추가로 필요에 따라서 정제하고, 그 정제물도 항종양 활성 성분으로서 사용할 수 있다.
본 발명에서는, 아카시아속 나무 껍질 유래물로서, 아카시아속의 나무 껍질에 함유되어 있는 성분도 예시된다. 이러한 성분으로서, 아카시아 나무 껍질 폴리페놀 등이 예시된다. 특히, 아카시아 나무 껍질 폴리페놀은 우수한 항종양 활성을 나타내기 때문에 바람직한 성분이다.
본 발명의 아카시아 나무 껍질 폴리페놀이란, (-)-피세티니돌, (-)-로비네티니돌, (+)-카테킨, 및 (+)-갈로카테킨 등의 플라반-3-올을 기본 골격으로 하는 플라바놀류가 C4-C8, C4-C6 결합한 중합체인 축합형 탄닌의 일종을 의미한다. 여기서, 이러한 축합형 탄닌으로서 분자량 300 내지 3000, 특히 500 내지 3000의 것이 바람직하다. 본 발명에서 이용하는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀은, 상기 아카시 아속의 나무 껍질의 분말 등을 열수 추출함으로써 얻을 수 있다.
또한, 아카시아 나무 껍질 폴리페놀 제품으로서는 미모사 센트럴 코퍼레이티브 엘티디. 제조의 등록상표 미모사 ME 파우더(MIMOSA ME POWDER), 미모사 MS 파우더, 미모사 GS 파우더, 미모사 FS 파우더, 미모사 WS 파우더, 미모사 RG 파우더, 미모사 RN 파우더, 미모사 DK 파우더, 미모사 AL 파우더, 미모사 CR 파우더, 골든 미모사 파우더(GOLDEN MIMOSA POWDER) 등이 예시된다.
본 발명의 조성물은 아카시아속 나무 껍질 유래물, 예를 들면, 아카시아속의 나무 껍질, 그의 추출물, 그의 정제물, 또는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀 그 자체일 수도 있지만, 다른 항종양 활성을 갖는 물질, 예를 들면, 종양의 예방 및/또는 치료에 유용한 물질 등을 포함하고 있을 수 있다. 예를 들면, 상어 연고, 약용 인삼, 동충하초, 키틴, 키토산, 아가리스크, 마이타케(maitake), 메시마코브, 메카부(mekabu), 모즈쿠(mozuku), 및 모자반 등이다.
본 발명의 조성물은 아카시아속 나무 껍질 유래물, 예를 들면, 아카시아속의 나무 껍질, 그의 추출물, 그의 정제물, 또는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀 그 자체일 수도 있는데, 본 발명의 효과를 손상시키지 않는 한, 부형제, 감미료, 산미료, 증점제, 향료, 색소, 유화제, 및 그 외에 의약품이나 식품으로 일반적으로 이용되고 있는 첨가제나 소재를 포함하고 있을 수도 있다.
본 발명의 조성물로 예방 또는 치료될 수 있는 종양으로서는, 예를 들면, 양성종양 또는 악성종양(암) 등을 들 수 있다. 양성종양으로서, 색소성 모반, 형성 이상 모반, 현수섬유종, 지방종, 림프관종, 지루성 각화증, 피부섬유종, 각화극세 포종, 켈로이드 등의 연부종양, 또는 대장폴립 또는 성대폴립 등의 폴립이 예시되고, 악성종양으로서, 급성 또는 만성의 백혈병, 악성 림프종, 골수종, 또는 매크로글로블린혈증 등의 조혈기 유래의 악성종양; 뇌종양, 두경부암(예를 들면, 후두암, 인두암, 설암 등), 유방암, 폐암, 식도암, 위암, 대장암, 간암, 담낭·담관암, 췌장암, 신장암, 부신피질암, 방광암, 전립선암, 고환종양, 난소암, 자궁암, 융모암, 갑상선암, 악성 카르티노이드 종양, 피부암, 악성 흑색종, 골육종, 연골육종, 연부조직육종, 횡문근육종, 평활근육종, 섬유육종, 지방육종, 또는 혈관육종 등의 고형종양; 또는 이들에 유래·관련되는 암이 예시된다.
본원 발명의 조성물은, 특히, 백혈병, 유방암, 위암, 대장암, 간암, 신장암, 및 혈관육종, 특히 백혈병 및 유방암의 예방 또는 치료에 유용하다.
또한, 본 발명에 있어서, 치료에는, 종양을 축소하거나, 치유하거나, 종양의 성장, 전이, 악화를 억제하거나 하는 것 등도 포함된다.
본 발명에 따른 조성물의 섭취량은 특별히 제한되지 않지만, 제형, 및 사용자 또는 환자 등의 섭취자 또는 섭취 동물의 연령, 체중 및 증상에 따라서 적절하게 선택할 수 있다. 예를 들면, 유효 성분량으로서 1일당 섭취자 또는 섭취 동물의 체중 1 kg에 대하여 아카시아 나무 껍질 폴리페놀량으로 0.001 내지 1 g, 바람직하게는 0.001 내지 0.5 g, 보다 바람직하게는 0.005 내지 0.1 g을 경구 섭취하는 것이, 양호한 항종양 활성이 얻어지기 때문에 바람직하다.
섭취 기간은 사용자 또는 환자의 연령, 증상에 따라서 임의로 정할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 식품 또는 동물용 사료로서, 예를 들면, 건강 식 품, 기능성 식품, 건강 보조 식품, 특정 보건용 식품, 미용 식품, 또는 영양 보조 식품(서플러멘트(supplement))으로서 사용할 수 있다. 이들 식품 및 동물용 사료는, 예를 들면, 차 및 쥬스 등의 음료수; 및 아이스크림, 젤리, 사탕, 초코렛, 및 츄잉검 등의 형태일 수도 있다. 또한, 액제, 가루제, 입제, 캡슐제, 또는 정제의 형태일 수도 있다. 여기서, 동물용 사료에는, 애완 동물, 축산 동물 또는 동물원 등에서 사육되고 있는 동물 등을 포함하는, 종양의 예방 또는 치료를 필요로 하는 모든 동물이 포함된다.
또한, 본 발명에 따른 조성물은 의약품 또는 의약부외품으로서 사용할 수 있다. 이들 의약품 또는 의약부외품은, 예를 들면, 산제, 정제, 코팅정, 당의정, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐제, 액제, 유탁제, 또는 현탁제의 형태로 경구적으로 투여할 수 있는데, 예를 들면 좌제의 형태로 직장으로; 예를 들면 연고, 크림제, 겔제, 또는 액제의 형태로 국부적 또는 경피적으로; 예를 들면 주사용 액제로서 비경구적으로 투여할 수도 있다. 바람직하게는 경구 투여이다.
이하, 제조예, 시험예, 배합예를 들어 본 발명을 더욱 자세하고 구체적으로 설명하지만, 본 발명이 이것에 한정되는 것은 아니다. 특히, 여기서는 본 발명의 아카시아속의 나무 껍질을 외피와 내피로 나누지 않고 실시예를 기술하고 있지만, 외피를 내피로부터 분리하여 각각 사용할 수도 있다.
이하의 제조예, 시험예 등에 있어서, 본 발명의 각 아카시아를 각각의 학명의 다음의 괄호 내에 나타낸 번호로 나타낸다. 예를 들면, 학명: 아카시아 미아른 시 드 와일드의 아카시아를 아카시아 No.1이라고 기재한다.
학명: 아카시아 미아른시 드 와일드(No.1), 학명: 아카시아 만기움 윌드(No.2), 학명: 아카시아 딜바타 링크(No.3), 학명: 아카시아 데커렌스 윌드(No.4), 학명: 아카시아 피크난타 벤쓰(No.5).
또한, %는 특별히 언급하지 않는 한 중량%를 의미한다.
아카시아 나무 껍질 분말의 제조예 1
아카시아 No.1의 나무 껍질을 함수율 20% 이하까지 건조시키고, 그 건조 나무 껍질을 햄머밀로 1.6 mm 이하(10 메쉬체(타일러: Tyler) 통과)의 분말로 분쇄한 후, 다시 진동 체로 등급 분류하여 63 μm 이하(250 메쉬체 하)의 미분말을 얻었다.
동일하게 하여, 나머지 4종의 아카시아 No.2 내지 5의 나무 껍질을 분쇄하여 각각 63 μm 이하의 미분말을 얻었다. 종류에 따라서 250 메쉬체 통과의 미분말의 수율에 다소의 차는 있지만, 목적으로 하는 미분말이 얻어졌다.
아카시아 나무 껍질 추출물의 제조예 2
본 발명의 각 아카시아 No.1 내지 5의 나무 껍질을 각각 함수율 20% 이하까지 건조시키고, 그 건조 나무 껍질을 햄머밀로 1.6 mm 이하의 분말로 분쇄한 후, 이 건조 분쇄 나무 껍질 100 g에 대하여 5배량의 열수를 첨가하고, 비등하고 나서 15분간 추출하고, 10 내지 20 μm의 필터를 이용하여 여과하였다. 얻어진 여과액을 스프레이 드라이어로 분무 건조하여 나무 껍질 추출물 각 40 g을 얻었다.
이하, 각 나무 껍질 추출물은 아카시아 No.1 내지 5 열수 추출물이라고 기재 한다.
아카시아 나무 껍질 추출물의 제조예 3
본 발명의 아카시아의 나무 껍질을 함수율 20% 이하까지 건조시키고, 그 건조 나무 껍질을 햄머밀로 1.6 mm 이하의 분말로 분쇄한 후, 이 건조 분쇄 나무 껍질 100 g에 대하여 5배량의 에탄올을 첨가하고, 비등시켜 환류시키면서 15분간 추출하고, 10 내지 20 μm의 필터를 이용하여 여과하였다. 얻어진 여과액으로부터 에탄올을 증발시킨 후, 농축액을 밀폐형 스프레이 드라이어로 분무 건조하여, 나무 껍질 추출물(이하, 아카시아 No.1 에탄올 추출물과 같이 기재함) 40 g을 얻었다.
동일하게 하여, 아카시아 No.1 내지 5의 에탄올 추출물을 얻었다.
아카시아 나무 껍질 추출물의 제조예 4
제조예 2에서 얻어진 아카시아 열수 추출물 10 g에 3배량의 에탄올을 첨가하고, 비등시켜 환류시키면서 15분간 추출하고, 10 내지 20 μm의 필터를 이용하여 여과하였다. 얻어진 여과액으로부터 에탄올을 증발시키고, 그것에 물을 첨가하고 나서 동결 건조시켜서 9 g의 추출물(이하, 아카시아 No.1 열수 추출물 에탄올 분획과 같이 기재함)을 얻었다.
동일하게 하여 아카시아 No.1 내지 5의 열수 추출물 에탄올 분획을 얻었다.
시험예 1 종양 세포의 시험관 내 배양에 있어서의 증식 억제 효과
(1) 시험 시료의 제조
제조예 2에 기재된 아카시아 No.1 열수 추출물 200 mg에 2 ml의 증류수를 첨가하고, 100℃에서 10분간 추출하였다. 그 추출액을 여과(밀리포어 필터, 구멍 직 경 0.45 μm)하고, 여과액을 10% FCS-RPMI1640으로 10배 및 100배로 희석하여, 각각 아카시아 No.1 열수 추출물의 농도가 10 mg/ml 및 1 mg/ml인 시험 시료를 제조하였다(농도는, 원재료 상당분으로 나타냄).
또한, 유효 대조로서 마이토마이신C 2mg을 10% FCS-RPMI1640으로 희석하여, 50 μg/ml 용액으로 한 것을 사용하였다.
(2) 재료와 방법
마우스 백혈병 세포 YAC-1(리까가꾸 겐뀨쇼 사이보우 뱅크로부터 공여)를 계대배양하고, 계대배양 4일째의 것을 10% FCS-RPMI1640으로 1×106 세포/ml로 제조하였다.
상기한 YAC-1 세포(1×106 세포/ml) 950 μl를 24구멍 플레이트의 각 웰에 주입하고, 상기에서 제조한 시험 시료를 50 μl 첨가하고, 교반하고, 37℃ 하에서 3일간 배양하였다. 배양 후, 세포수 및 생존율을 측정하여, 생존 세포수를 구하였다.
(3) 결과
아카시아 No.1 열수 추출물의 시험 시료를 첨가하면, YAC-1 세포의 증식은 억제되고, 특히 0.5 mg/ml의 농도로, 5.0 mg/ml의 농도나 마이토마이신C(농도 2.5 μg/ml)보다도 큰 YAC-1 세포 증식 억제 작용을 나타낸다(도 1).
시험예 2 마우스에서의 종양 증식 저지 시험
(1) 시험 방법
제조예 2에 기재된 아카시아 No.1 열수 추출물을 필요량 칭량하여 60℃의 물에 분산시키고, 아카시아 No.1 열수 추출물을, 각각 7.8 mg/ml, 15.6 mg/ml 및 31.3 mg/ml 함유하는, 시험 음료 1, 시험 음료 2 및 시험 음료 3을 제조하였다.
제조예 2에 기재된 아카시아 No.1 열수 추출물을 필요량 칭량하여 시판 사료와 혼합하여, 아카시아 No.1 열수 추출물을, 각각 15.6 mg/g 및 31.3 mg/g 함유하는, 시험 사료 2 및 시험 사료 3을 제조하였다.
C3H/HeN 마우스의 암컷을 하기의 표와 같이, 대조 1군, 시험 1군, 시험 2군, 시험 3군, 및 양성 대조군으로 군분류하였다.
Figure 112009014300517-pct00001
시험은 도 2에 나타낸 타임 스케줄에 따랐다.
우선, 상기한 바와 같이 군분류한 마우스에게, 문헌[Abe S et al. Gann 73 91-96(1982)] 및 문헌[Ohasi K et al. Yakugaku Zasshi 113 396-399(1993)]에 기재된 방법에 따라서, 동일계 종양 MM46 유방암 세포 2×106개를 서혜부 피하에 이식하였다.
종양을 이식한 날부터, 음료수로서, 대조 1군에는 수돗물을, 시험 1군 내지 시험 3군에는 시험 음료 1 내지 3을 각각 섭취시켰다. 또한, 양성 대조군에는 수돗물을 섭취시키고, 또한 종양 이식 후 7일째, 11일째 및 14일째에 렌티난을 6.25 mg/kg 복강 내 투여하였다.
시험 2군 및 시험 3군에 관해서는, 섭수량이 0.2 ml/일로서, 다른 군의 섭수량 4 내지 6 ml/일과 비교하여 현저하게 적고 체중 감소도 현저하였다. 그 때문에, 종양 이식 7일째에 시험 음료 2 및 3을 수돗물로 바꾸었다. 또한, 시험 2군의 마우스를 5마리씩 대조 2군 및 시험 2a군에, 시험 3군의 마우스를 5마리씩 대조 3군 및 시험 3a군으로 각각 군분류하였다. 대조 2군 및 대조 3군에는 계속해서 대조 사료를 먹이로 주었다. 시험 2a군 및 시험 3a군에는 대조 사료 대신에 각각 시험 사료 2 및 3을 먹이로 주었다.
마우스 서혜부 피하에 이식한 종양의 증식을 3일 내지 4일 간격으로 4주간까지 촉지(觸知)에 의해 관찰하고, 또한 종양 직경도 측정하였다. 기타, 생존일수 및 체중도 측정하였다. 시험 종료 시에 종양을 추출하고, 그 습중량을 측정하였다.
(2) 시험 결과
결과를 표 2, 도 3에 나타내었다. 또한, 통계학적 검정은, 스튜던트(Student)의 t 검정을 이용하였다.
Figure 112009014300517-pct00002
이상으로부터, 아카시아 나무 껍질이 백혈병 세포나 유방암의 증식을 억제하는 것을 알 수 있어, 항종양 활성을 갖는 것을 확인하였다.
시험 1군 및 3a군에서는, 이식 후 14일째부터 종양이 억제되어, 아카시아 나무 껍질의 항종양 작용이 빠른 시기에 나타나는 것이 보였다.
시험 2군 및 시험 3군에서 섭수량의 감소가 보였지만, 이것은 아카시아 나무 껍질을 고농도로 함유하는 시험 음료의 강한 쓴 맛에 의한 것이라고 생각되었다. 시험 음료를 수돗물로 전환하고, 시험 사료를 대신해서 먹이로 준 바 체중의 회복이 보였기 때문에, 이 체중 감소는 아카시아 나무 껍질의 독성에 의한 것이 아니라고 생각되었다.
시험예 3 돌연 변이 유기성 시험
일본 노동부 고시 제77호((소)63년 9월 1일)에 준거하여 돌연 변이 유기성 시험을 실시하였다. 156 내지 5,000 μg/플레이트의 용량의 검체(제조예 2의 아카시아 No.1 내지 5 열수 추출물)로 시험한 결과, 어느 균주에 대해서도 복귀 돌연변이 콜로니수가 증가하지 않았다.
시험예 4 소핵 시험
통상법에 따라서, 생체 내에서의 소핵 유발능의 유무를 조사하였다. 아카시아 No.1 열수 추출물을, 수컷 ICR계 마우스에, 2,000, 1,000, 및 500 mg/kg의 하루 용량으로, 24시간 간격으로 2회 경구 투여하고, 최종 투여 24시간 후에 소핵 표본을 제조하였다.
아카시아 No.1 열수 추출물의 어느쪽의 용량도 양성을 나타내지 않았다. 또한, 동시에 관찰한 총다염성 적혈구의 총적혈구에 대한 비에 있어서 일정한 변동은 없고, 음성 대조군과 비교하더라도 적혈구의 증식 억제는 보이지 않았다.
시험예 5 마우스 급성 독성 시험(경구 투여)
OECD(Guidelines for the Testing of Chemicals 401, 1987)에 준거하여, ICR 계 암수 마우스를 이용한 급성 경구 독성 시험을 실시하였다. 그 결과, 아카시아 No.1 열수 추출물의 LD50치는 수컷에서는 4,468 mg/kg, 암컷에서는 3,594 mg/kg이었다.
상기 시험을 제조예 2의 아카시아 No.2 내지 5 열수 추출물에 대해서 행하여 동일한 결과를 얻었다.
시험예 6 래트 반복 투여 독성 시험(경구 투여)
통상법에 따라서 래트를 이용한 13주간 반복 투여 독성 시험을 실시하였다.
아카시아 No.1 열수 추출물을 0.5, 1.5, 및 5.0% 함유하는 혼합 사료를, Slc:SD 래트의 암수에 먹이로 주었다.
그 결과, 래트의 사망예는 없었다. 일반 상태를 포함하여, 검사에 있어서 이상은 없었다.
시험예 7 인간 단회 투여 시험
32세 내지 43세의 건강한 성인 남성 5명에게 아카시아 No.1 열수 추출물을 1500 mg(하기의 배합예 4의 정제를 12정) 섭취시키고, 섭취 전·섭취 3시간 후·섭취 8시간 후·섭취 24시간 후·섭취 1주간 후에, 일반 검사·혈액학적 검사·혈액 생화학적 검사, 뇨 검사를 실시했지만, 임상상 문제가 되는 검사치의 변동은 없었다. 정제에 관련된 유해 사상(adverse event)도 없었다.
시험예 8 인간 4주간 연속 투여 시험
23세 내지 44세의 건강한 성인 남성 25명에게 하기의 배합예 4의 아카시아 No.1 열수 추출물을 750 mg/일(배합예 4의 정제를 6정) 및 1000 mg/일(배합예 4의 정제를 8정) 4주간 각각 섭취시켰다.
각 군의 섭취 전, 섭취 2주간 후, 섭취 4주간 후, 섭취 종료 2주간 후에, 일반 검사, 혈액 검사, 뇨 검사를 실시하였다. 문제가 있는 검사치의 변동은 없었다. 유해 사상도 없었다.
배합예 1 내복제의 제조
제조예 4의 아카시아 나무 껍질 열수 추출물 에탄올 분획을 이용하여, 하기에 나타내는 조성으로 내복제를 제조하였다.
제조예 4의 추출물 분획 1.0(중량%)
젖당 30.0
옥수수 전분 60.0
결정 셀룰로오스 8.0
폴리비닐피롤리돈 1.0
계 100.0
배합예 2 애완 동물 사료의 제조
제조예 2의 아카시아 나무 껍질 열수 추출물을 이용하여 하기에 나타내는 조성으로 애완 동물 사료를 제조하였다.
제조예 2의 추출물 1.0(중량%)
오트밀 88.0
전분 5.0
식염 2.5
전란(全卵) 3.0
조미료 0.5
계 100.0
배합예 3 정제(과자)의 제조
제조예 4의 아카시아 나무 껍질 열수 추출물 에탄올 분획을 이용하여, 하기에 나타내는 조성으로 정제(과자)를 제조하였다.
제조예 4의 추출물 분획 1.0(중량%)
시트르산 1.0
탈지 분유 15.0
자당 에스테르 1.0
플레이버 0.5
가루당 20.0
젖당 61.5
계 100.0
배합예 4 정제의 제조
제조예 2의 아카시아 나무 껍질 No.1 열수 추출물을 이용하여, 하기에 나타내는 조성으로 정제를 제조하였다.
제조예 2의 아카시아 나무 껍질 No.1 열수 추출물 125(mg)
자당 에스테르 9
젖당 166
계 300
본 발명에 따르면, 종양의 예방 및/또는 치료용의 조성물을 얻을 수 있다.
보다 상세하게는, 본 발명의 조성물은 각종 양성종양 또는 악성종양의 예방 및/또는 치료에 유용하다.
이들 조성물은, 의약품, 의약부외품, 화장품, 또는 건강 식품, 건강 보조 식품, 특정 보건용 식품, 혹은 영양 보조 식품 등의 식품 또는 동물용 사료에 이용할 수 있다.

Claims (17)

  1. 아카시아 미아른시 드 와일드(Acacia mearnsii De Wild.)의 나무 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는, 조혈기 유래의 악성 종양의 예방 또는 치료용 의약 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물이 플라반-3-올을 기본 골격으로 하는 플라바놀류의 중합체인 축합형 탄닌으로서 분자량 500 내지 3000인 아카시아 나무 껍질 폴리페놀을 포함하는 조성물.
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제1항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물에 포함되는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀량으로 1일당 섭취자 또는 섭취 동물의 체중 1 kg에 대하여 0.001 내지 1 g 경구 섭취되는 것인 조성물.
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 아카시아 미아른시 드 와일드(Acacia mearnsii De Wild.)의 나무 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는, 조혈기 유래의 악성 종양의 예방 또는 치료용 동물용 사료 조성물.
  13. 아카시아 미아른시 드 와일드(Acacia mearnsii De Wild.)의 나무 껍질 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는, 조혈기 유래의 악성 종양의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물.
  14. 제12항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물이 플라반-3-올을 기본 골격으로 하는 플라바놀류의 중합체인 축합형 탄닌으로서 분자량 500 내지 3000인 아카시아 나무 껍질 폴리페놀을 포함하는 조성물.
  15. 제12항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물에 포함되는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀량으로 1일당 섭취자 또는 섭취 동물의 체중 1 kg에 대하여 0.001 내지 1 g 경구 섭취되는 것인 조성물.
  16. 제13항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물이 플라반-3-올을 기본 골격으로 하는 플라바놀류의 중합체인 축합형 탄닌으로서 분자량 500 내지 3000인 아카시아 나무 껍질 폴리페놀을 포함하는 조성물.
  17. 제13항에 있어서, 상기 나무 껍질 추출물에 포함되는 아카시아 나무 껍질 폴리페놀량으로 1일당 섭취자 또는 섭취 동물의 체중 1 kg에 대하여 0.001 내지 1 g 경구 섭취되는 것인 조성물.
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