KR101315656B1 - 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법 - Google Patents

엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 엽록소가 풍부한 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상을 건조 후 분쇄하고 증류수를 함수율 9~15%정도로 미강과 혼합하여 미강과 엽록소 자체에 존재하는 발효미생물로 1차 발효를 거친 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수 부산물을 혼합하여 2차 발효하고 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분과 발효미생물을 투입하여 3차 발효과정을 거쳐 제조되는 발효추출물에 의해 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 기타 첨가제 등으로 사용할 수 있는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
즉, 본 발명은 본 발명은 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 동결 건조한 뒤 70~200 메쉬로 분쇄하고 미강과 증류수를 혼합하여 함수율 9~15%정도로 되도록 혼합하는 미강혼합물을 만드는 단계; 상기 미강혼합물을 미강과 엽록소 자체에 존재하는 효소 및 발효미생물의 활동으로 1차 발효시키는 단계; 상기 1차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수를 분쇄, 혼합하여 사탕수수에 있는 미생물과 탄소원의 혼합물질로 발효를 할 수 있도록 한 환경에서 2차 발효시키는 단계; 상기 2차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 혼합 배지를 만드는 단계; 상기 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효하는 단계; 상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 알콜 수용액에 혼합, 교반하여 추출하는 추출단계;로 이루어진 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법을 특징으로 한다.

Description

엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법 {Rice bran fermentation extracts with chlorophyll and the manufacturing method thereof}
본 발명은 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 엽록소가 풍부한 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상을 건조 후 분쇄하고 증류수를 함수율 9~15%정도로 미강과 혼합하여 미강과 엽록소 자체에 존재하는 발효미생물로 1차 발효를 거친 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수 부산물을 혼합하여 2차 발효하고 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분과 발효미생물을 투입하여 3차 발효과정을 거쳐 제조되는 발효추출물에 의해 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 기타 첨가제 등으로 사용할 수 있는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
어린 보리싹, 어린 밀싹, 어린 귀리싹은 엽록소 식품으로 클로로필이라고도 한다. 녹색식물은 그 잎의 세포 속에 타원형의 구조물인 엽록체가 많이 들어 있는 화합물이다. 엽록소는 그 빛깔이 녹색이기 때문에 엽록체가 녹색으로 보이고, 따라서 식물의 잎도 녹색으로 보인다. 엽록체의 그라나(grana) 속에 함유되어 있으며, 그라나를 구성하고 있는 단백질과 결합하고 있다. 엽록소에는 a, b, c, d, e와 박테리오 클로로필 a와 b 등 여러 가지가 알려져 있다. 이들은 모두 그 분자의 구조식의 차이에 의하여 분류·명명된 것이다. 이 엽록소들은 그 분자 속에 한 원자의 마그네슘(Mg)을 가지고 있는 것이 특징이다. 엽록소는 모두 물에 녹지 않고 유기용매(有機溶媒: 에테르·벤젠·크로로폼 등 액체상태의 유기화합물)에 녹는 것이 또한 특징이다. 또 자외선을 받으면 암적색의 형광을 방출한다.
엽록소 중에서 가장 보편적으로 볼 수 있는 것이 a와 b이다. 대개의 식물에서는 a와 b가 약 3:1의 비로 존재하고 있다. 다른 엽록소들은 극소량씩 함유되어 있거나 특정 식물에만 존재하고 있다. 박테리오 클로로필은 광합성 을 하는 박테리아의 세포 속에서 발견되는 엽록소이다. 녹색식물은 태양의 빛을 이용하여 이산화탄소CO2)와 물(H2O)을 화합시켜 포도당이나 녹말과 같은 탄수화물을 만든다. 이 과정이 광합성인데, 이 광합성에서 엽록소는 태양의 빛에너지를 포착하여 이를 화학에너지의 형태로 바꾸어 탄수화물을 만들게 하는 중요한 역할을 하고 있다. 즉, 엽록소에 빛을 쬐면 그 빛에너지를 엽록소 분자가 흡수하여 들뜬 상태가 된다.
들뜬 상태는 분자 속의 전자가 여분의 에너지를 흡수하여 보다 에너지가 높은 위치에 자리를 옮기게 되는 현상이다. 분자가 이와 같이 들뜬상태가 되면 다음 순간 원래의 상태로 되돌아가면서 흡수하였던 에너지를 다시 방출한다. 들뜬 상태가 된 여러 분자의 엽록소가 원상태로 되돌아가면서 방출된 에너지들은 한데 모여서 특정 엽록소 분자로부터 전자 한 쌍을 튕겨내게 된다. 이 전자 한 쌍은 몇 가지 전자수용체를 거쳐 이동하여 궁극에는 엽록소에 되돌아가거나, NADP(인산화합물로서 조효소의 하나)라는 물질에 가서 붙게 된다.
이 전자의 이동경로는 전자에 대한 친화력이 작은 물질에서 큰 물질로 옮겨 가는 과정이어서, 이 과정에서 전자의 에너지가 ATP(아데노신삼인산)라는 물질 속에 화학에너지의 형태로 저장된다. 또 NADP에 포착된 전자는 NADP를 환원시킴으로써 뒤에 일어날 이산화탄소의 동화를 가능하게 한다. 또한 엽록소에서 이탈된 전자가 NADP로 넘어가면 엽록소 분자는 전자가 결핍되게 되는데, 이 결핍된 전자는 물분자의 광분해에서 생긴 전자로써 보충된다. 엽록소는 이와 같이 녹색식물의 엽록체 속에서 빛에너지를 흡수하여 이산화탄소를 유기화합물인 탄수화물로 동화시키는 데 쓰이도록 하기 때문에 광합성에서 가장 중요한 구실을 하고 있는 물질이다(출처-엽록소, 네이버 백과사전)
신체에 미치는 효능은 세포 부활 작용, 장기 기능 증진, 조직 저항력 증진, 피로에 의해 움직일 수 없는 신경과 근육에 엽록소를 공급한 후 수축 운동이 재가동되고 심장수축이 강화되었으며 이완기의 연장 및 심장 펌프 전체 작용 활발(말초혈관)의 확장 작용 현저 등이 확인되었다고 한다. 중독과 피로에 의하여 활동이 정지된 심장도 미량의 엽록소 액을 투여한 결과 재활동을 시작하였으며 또한 소화기관의 기능 정상화에 특히 효과가 있었다고 보고된 바 있다.
1935년 조직 배양에 의해 세포 부활 작용이 실험적으로 증명되어 치료약으로 사용되기 시작하였다.
치유 촉진 작용은 육아 형성을 촉진하고 환부의 표면 건조 및 환부에 빠른 치유 효과가 있다. 1200여명의 환자에 대한 대규모 임상 실험 결과 환부의 혐오성 균에 오염되어 악취 발생 → 탈취, 제균력이 있어 병균의 신규 발육을 저지, 건조 작용 - 환부 건조 및 분비물 축소 등이 있으며, 조직 기능 정상화 작용, 신진대사 촉진 작용 , 생리대사 촉진, 질소 대사 촉진 ,조혈 작용은 동물의 적혈구 Hemoglobin과 같은 Porpyrine핵의 모핵이 같은 화학 구조를 띠어 혈액을 조성하는 원료로 흡수 할 수 있다. 실제 빈혈자의 임상실험 결과 회복이 현저히 촉진되었으며 실험 동물의 피하 주사시 적혈구수 또는 Hemoglobin량이 각각 10% 증가를 보였고 백혈구는 40% 정도 증가하였다는 연구 결과가 있다. 또한 살균, 제균작용은 세포 부활을 기초로 한 제균작용 엽록소가 직접적으로 살균하지 않고 생체조직을 부활시키고 저항력을 강화시키며 간접적으로 세균의 증식을 방지한다. 일반적으로 사용하는 화학 제균제는 병원균을 직접 공격하는 동시에 정상적인 세포에도 장애를 주지만 엽록소는 자연 치유력을 강화시켜 정상적 세포기능을 강화하고 체질을 개선해 가면서 질병을 근본적으로 치료해 준다. 즉, 복합적인 효과를 발휘하는 것이 특징이다. 췌장 기능 촉진 작용과 항암작용은 암의 치료 및 예방, 발암물질 제거 및 중화 효과 Chlorophyll 투여에 의한 발암 물질 제거에 관한 연구 결과 식이 섭취로부터 발생되는 3가지 발암 원 즉, 주로 조리한 육류로부터 기인하는 heterocyclic amines, 훈제나 바베큐 음식에서 생성되는 polycyclic hydrocarbons, 그리고 식품 중 발생된 mold로부터 생성된 aflatoxin과 결합하여 제거시켜주는 결과를 나타내었다고 보고된 바 있다.(J. of National Cancer Institute, Jan. 4, 1995)
항궤양 작용은 위. 십이지장궤양, 위산과다, 만성위염, 췌장염 등이 있으며, 항 콜레스테롤 작용 , 항 알레르기 작용이 있는 것으로 나타났다. (약업신문.2001.12.2)
아플라톡신-DNA 손상도 감소로 '데 리필'(Derifil)이라는 이름의 OTC 약물로 판매되고 있는 엽록소 유도체 클로로필린이 진균독소의 일종인 아플라톡신에 의해 유발되는 간암의 발병률을 크게 낮출 수 있으리라는 연구결과가 나왔다. 미 존스 홉킨스대 패트리샤 A. 에그너 박사팀은 12월 4일 발간되는 '국립과학아카데미회보'지에 게재가 예정되어 있는 논문에서 이 같이 밝혔다. 건강한 성인들에게 클로로필린을 복용토록 한 결과 아플라톡신-DNA 손상도가 눈에 띄게 감소했다는 것. 아플라톡신-DNA 손상도가 높으면 간암이 발병할 위험률이 증가하는 것으로 알려져 있다. 아플라톡신(aflatoxins)은 콩, 땅콩, 옥수수, 곡류 등에서 발견되는 균류에 의해 생성되는 발암물질이다. 현재 '데 리필'(클로로필린)은 노인환자들의 체취와 배설물 냄새를 억제하는 약물로 판매되고 있다. 지금까지 연구된 바에 따르면 클로로필린은 쥐 등 설치류 동물들의 간 내부에서 발암물질들의 작용을 억제한다는 사실이 입증된 바 있다. 에그너 박사팀은 클로로필린이 사람에게서도 동일한 효과를 나타내는지 규명하기 위해 180명의 건강한 중국성인들을 대상으로 시험을 진행했다. 중국을 연구장소로 택한 것은 간암이 개발 도상국가들에서 가장 빈번히 발생하는 암의 하나로 자리매김 되고 있는 현실을 감안했기 때문이었다. 실제로 중국인들은 아플라톡신에 오염된 음식물들을 다량 소비하는 것으로 알려져 있다. 시험참여자들에게는 4개월 동안 클로로필린 100㎎ 또는 플라시보를 1일 3회 복용토록 했다. 그 후 3개월이 경과한 시점에서 아플라톡신-DNA 손상도를 살피기 위해 뇨 샘플을 테스트했다. 그 결과 클로로필린을 복용한 그룹의 경우 아플라톡신-DNA 손상도가 플라시보 복용군에 비해 55%나 낮은 수준을 보인 것으로 드러났다. 이 같은 내용은 클로로필린이 간암 발병률을 끌어내리는 데 도움을 줄 수 있을 것임을 시사하는 것이다. 에그너 박사는 "클로로필린을 복용하거나 엽록소가 풍부히 함유된 음식물을 섭취하는 것은 간암과 환경적 요인으로 유발되는 다른 암들의 발병을 억제하는 효과적인 방법이 될 수 있을 것으로 사료된다"고 말했다. 이와 관련, 녹색식물에 풍부한 천연 엽록소는 동물들에게서 암 발병률을 감소시켜 준다는 사실이 앞서 수행되었던 일련의 연구를 통해 입증된 바 있다.
밀싹, 보리싹, 곡류 새싹의 효능을 실험으로 가장 먼저 증명한 사람이 1928년 미국의 화학자인 슈나벨 이다. 미국에서 본격적으로 인기를 끌기 시작한 것은 수많은 환자들이 히포크라테스 보건협회를 방문하여 당뇨병, 고혈압, 비만, 위염, 위궤양, 췌장, 간의 질환, 천식, 녹내장, 습진, 피부질환, 변비, 치질, 게실염, 대장염, 관절염, 빈혈, 구취, 여성질환 등을 고친것으로 알려지면서 부터였다. 일본의 영양학자인 하기와라요시히데 박사는 150여종에 달하는 식물을 연구한 끝에 보리새싹이 질병 예방면에서 가장 탁월한 효과를 가지고 있음을 발견했다. 보리싹에는 칼륨 우유의 55배이상, 시금치의18배, 칼슘이 우유의 11배가 함유하고 있으며, 빈혈을 방지하는 성분 시금치보다 5배, 비타민 씨가 시금치의 3배, 사과의 60배, 성인병을 일으키는 근원물질인 활성산소를 분해하는 효소인 수퍼옥사이드 디스뮤테이즈(SOD)다량 함유하고 있다
코코아는 항산화물질(폴리페놀)이 풍부하게 함유되어있어 세포를 손상시키고 암을 유발할 수 있는 체내 물질을 제거하는 효능이 있어 노화방지와 암 예방에 좋습니다. 카카오폴리페놀에는 면역조절 기능이 있어 감기를 예방해주고 알레르기를 억제해주는 효능이 있다. 카페인은 중추신경을 가볍게 자극해주어 침체되어 있는 기분을 밝게 해주는 효능이 있으며, 초콜릿의 당분은 신경을 부드럽게 해주는 효능이 있어 피로와 불안, 신경과민에 좋다.또한 카카오의 향은 정신을 안정시켜주고 집중력을 높여주는 효능과 충치를 예방하는 물질인 카카오폴리페놀이 함유되어 있어 충치예방에 좋다.
미강의 효과는 쌀겨에는 놀랄 만한 영양소가 들어 있다. 요즘 들어 쌀겨는 주로 닭이나 돼지 등의 가축용 사료로 사용한다. 쌀겨를 먹고 자란 닭이 낳은 달걀은 윤기가 나며, 맛도 매우 뛰어나다. 그만큼 쌀겨에는 각종 영양소가 풍부하게 들어 있다는 이야기다. 쌀겨란 바로 현미에서 정백미로 도정하는 과정에서 생기는 과피, 종피, 호분층 등의 분쇄 혼합물이다.
따라서 쌀겨는 정백미의 부산물이지만 영양에 관해서는 상당히 우수한 재료인 셈이다.
쌀겨에는 비타민 A를 비롯해 B1,B6, 철분, 인, 미네랄 등 다양한 영양소들이 함유되어 있다.
쌀겨의 표준적인 화학 조성을 보면 수분 13.5%, 지방 18.3%, 당질 38.3%, 섬유 7.8% , 회분 8.9% 이다.
비타민 B1은 100g중 2.5㎎이나 들어 있으며, 비타민 E도 많다.쌀겨를 먹으면 식물 섬유로 인해 장의 작용이 활발하게 되므로 배변이 촉진되어 아무리 지독한 변비도 해결할 수 있다. 또, 식물 섬유는 장내의 비피더스균을 증가시켜 장 안에 기생하고 있는 세균의 균형을 유지시키는 기능까지 하고 있기 때문에 대장암도 예방된다.
비피더스균이 증가하면 장이 건강하게 되어 노화 방지에도 큰 몫을 담당한다. 지방간을 예방하는 데도 효과가 높다. 쌀겨의 성분은 또 소장 내 칼슘의 흡수를 억제하는 작용을 하기 때문에 결석이 생기기 쉬운 사람에게 좋은 식품이다. 쌀겨를 면이나 명주 천으로 만든 주머니 속에 넣어 얼굴, 피부 등을 닦으면 얼굴은 윤이 나고 몸은 놀라울 정도로 청결해진다. 비누의 세정효과는 비교도 안 될 것이다. 또 쌀겨로 몸을 닦으면 윤기가 흐르는 아름다운 피부를 유지할 수 있으며, 피부병 치료에도 효과가 있다. 특히 가려움증이 있는 만성 피부질환을 고치기 위해 예로부터 민간요법으로 사용된 것이 쌀겨이다. 가려움증이 있는 만성 피부 질환 가운데 대표적인 것으로 아토피성 피부염을 들 수 있다. 이 피부병을 앓고 있는 사람이 실제로 비누 대신 쌀겨 주머니를 사용해 말끔히 나은 경우도 있다. 쌀겨가 왜 피부를 아름답게 하고 피부병 개선에 효과가 있는 것일까? 그 이유는 바로 쌀겨에 함유된 비타민 B1, B6, E 등에 의한 작용이라고 볼 수 있다. 따라서 건강과 미용면에서 볼 때도 뛰어난 효과가 있다고 발표되고 있다.
미강에는 우리 인체에서 뇌에 많은 영향을 주는 GABA가 함유되어 있을 뿐아니라, 많은 토양미생물과 자체의 효소로 이루어져 있으며, 토양미생물의 보물 창고로 우리가 메주를 만들거나 청국장을 만드는 데 필요한 미생물뿐 아니라 우리 인간에게 유익한 미생물이 많이 함유되어 있으며, 특히 페니실린을 만드는 미생물인 페니시리움등도 함유되어 있어 코코아껍질에 함유되어 있는 강력한 항균성 물질을 무력화할 수 있다. 또한 2차로 고초균과 희소방선균의 여러 미생물을 혼합하여 발효함으로 2차대사산물의 기능성 물질도 얻을 수 있다고 본다.
한편, 상기 발효에 이용되는 미생물들은 유용성이 인정된 그 부가가치가 매우 높아 생물소재 산업에 있어 중요한 위치를 차지하고 있다. 세계 각국에서는 항생물질, 항암제와 같은 의약품과 살균제, 살충제, 제초제와 같은 농약과 건강보조식품, 효소와 같은 식품소재 등 여러 가지로 사용될 수 있는 신물질을 탐색하기 위하여 미생물을 많이 이용하고 있다. 지금까지 10,000 여종의 신물질이 미생물로 부터 발견되었으며 이 중 100여종의 신물질은 이미 실용화 되고 있다.
미생물 중에서 본 발명에 사용하고자 하는 고초균(Bacillus subtilis)은 호기성 부생막대균으로 직경이 1μm 미만의 아주적은 미생물이다. 당류를 탄소원으로 하며, 암모늄염을 질소원으로 항생물질을 만들때는 미량원소를 잘 맞추어 주어야 한다. 이균은 병을 고치는 데는 사용하지 않고 냄새나 통조림의 억균제로 많이 사용한다. 또한 방선균은 특히 2차 대사산물에 있어서 화학구조의 다양성과 종의 풍부함으로 인하여 산업적으로 가장 중요한 미생물로 인식되어 있으며, 지금까지 미생물로부터 발견된 10,000 여종의 생리활성물질 중 약 2/3가 방선균으로부터 유래하였다. 앞으로도 방선균은 새로운 균주의 분리, 유전자 기능 등을 통하여 생물소재 산업의 중요한 위치를 차지할 것으로 전망된다.
한편 방선균은 곰팡이와 유사한 형태의 균사를 형성하므로 과거 곰팡이로 분류된 적도 있었으나 1970년대에 와서 생리생화학적 분석방법이 발전됨에 따라 세포 내의 GC함량이 높고 분화하는 성질을 지닌 원생미생물로 인식되고 있다. 1960년대 이전에는 스트렙토마이세스(Streptomyces)속 균주가 주 연구 대상이었다.
이후 마이크로모노스포라(Micromonospora)속 방선균으로부터 젠타마이신(gentamycin)이 발견되면서부터는 스트렙토마이세스 속 이외의 희소 방선균이 많은 주목을 받기 시작했다. 1989년 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology(1)에서는 40종의 희소방선균이 기재되고 있다.
본 발명은 엽록소가 풍부한 어린 보리싹, 어린 밀싹, 어린 귀리싹을 미강과 혼합하여 미강과 엽록소 자체에 존재하는 발효미생물로 1차 발효를 거친 다음 2차 발효는 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수 부산물을 혼합하여 발효하고 3차 발효는 여러 한약재, 천연영양제, 천연비타민류, 무기질, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 발효미생물을 이용하여 발효한 뒤 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 향장원료, 2차대사산물을 이용한 생리활성물질 및 기타 첨가제등으로 사용할 수 있는 발효산물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
1), 한국 공개특허공보 1979-0001452 : 고온발효 미생물을 이용한 찜질방법2), 한국 등록특허공보 1979-0001452 : 발효사료 3), 한국 공개특허공보 2001-0057177 : 비타민 비원 강화 청국장제조방법 4), 한국 등록특허공보 10-0356761 : 복합미생물 배양체 제조방법 및 복합 미생물 배양체를 이용한 비료제조방법 5), 한국 공개특허공보 10-2004-0026278 :쌀겨로부터 저분자화된 펩타이드 를 포함하는 조성물 및 이의 제조방법 6), 한국 등록특허공보 10-0481696 : 미생물 고체배양용 신규 배지와 배양 장치 및 그들을 이용한 미생물 고체배양방법 7), 한국 공개특허공보 2003-0007364 : 운모를 주제로한 가축사료 첨가제 제조방법 8), 한국 등록특허공보 10-0490953 : 쌀겨(미강) 또는 탈지강을 이용한 생 물공학적 젖산의 제조방법 9), 한국 등록특허공보 10-0646644 : 쌀겨의 가공방법 10), 한국 공개특허공보 10-2006--0016942 : 쌀겨로부터 추출된 유용미생물 배양액의 대량 제조방법 및 상기유용미생물 배양액을 이용한 유용미생물 활성액의 대량제조방법 11), 한국 공개특허공보 10-2006-0042583 : 쌀도정 부산물을 이용한 GABA의 제조방법 12), 한국 등록특허공보 10-0676837 :미생물을 이용한 기초화장품 액상성분 의 제조방법 13), 한국 공개특허공보 10-2007-0067549 :미강 유산균 발효물을 함유하는 피부보호 및 개선용 조성물 14), 한국 공개특허공보 10-2007-0097722 : 미강발효조성물 15), 한국 공개특허공보 10-2007-0105751 :미강으로부터 생리활성물질을 추 출하는 방법 16), 한국 공개특허공보 10-2008-0000197 : 쌀겨(미강) 및 금가루을 함유하 는 맛사지용 팩 조성물의 제조방법 17), 한국 공개특허공보 10-2008-0069107 : 미강을 주성분으로 하는 조성 물, 이를 이용하여 미강발효 조성물을 제조하는 방법, 및 이에 의하여 제조된 미강발효조성물 18), 한국 등록특허공보 10-0945629 : 유익미생물로 발효시킨 분상의 축산 분뇨 분해제 및 그 제조방법 19), 한국 공개특허공보 10-2009-0114572 : 마사지용 미용 팩 및 이의 제조 방법 20), 한국 공개특허공보 10-2009-0117363 : 쌀겨-황국균-청국장균 배양혼합 물의 제조방법 및 그 배양물의 가공방법 21), 한국 공개특허공보 10-2010-0024016 : 쑥 및 미강을 함유하는 탈취용 발효조성물 및 그 제조방법 22), 한국 공개특허공보 10-2010-0035345 : 혈당상승 억제효과와 간 기능 개선 효과를 갖는 미생물 및 상기 미생물을 포함하는 식품 23), 한국 공개특허공보 10-2009-0046767 : 미강을 이용한 사료용 막걸리 제조방법 및 그에 의한 사료용 막걸리 24), 한국 등록특허공보 10-2001-0062453 : 엽록소 추출방법 25), 한국 등록특허공보 10-2001-0062454 : 엽록소음료의 제조방법 26), 한국 등록특허공보 10-2002-0046354 : 엽록소음료의 제조방법 27), 한국 등록특허공보 10-2005-0095459 :엽록소자동분석장치 및 분석방법 28), 한국 공개특허공보 10-2007-0123582 : 엽록소 추출방법 29), 한국 등록특허공보 10-1999-0023112 : 천연엽록소를 물에 용해시키기 위한 장치
본 발명은 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 미강과 혼합하여 미강과 엽록소 자체에 존재하는 발효미생물로 1차 발효를 거친 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수 부산물을 혼합하여 2차 발효하고 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 발효미생물을 이용하여 3차 발효한 뒤 제조되는 발효추출물에 의해 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 향장원료, 2차대사산물을 이용한 생리활성물질 및 기타 첨가제 등으로 사용할 수 있는 발효추출물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 급속동결 건조한 뒤 70~200 메쉬로 분쇄하고 미강과 증류수를 혼합하여 함수율 9~15%정도로 되도록 혼합하는 미강혼합물을 만드는 단계; 상기 미강혼합물을 미강과 엽록소 자체에 존재하는 효소 및 발효미생물의 활동으로 1차 발효시키는 단계; 상기 1차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수를 분쇄, 혼합하여 사탕수수에 있는 미생물과 탄소원의 혼합물질로 발효를 할 수 있도록 한 환경에서 2차 발효시키는 단계; 상기 2차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 혼합 배지를 만드는 단계; 상기 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효하는 단계; 상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 알콜 수용액에 혼합, 교반하여 추출하는 추출단계;로 이루어진 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 및 그 제조방법을 특징으로 한다.
본 발명은 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 미강과 혼합하여 1차 발효를 하고, 2차 발효 시는 코코아 껍질, 원당을 추출한 사탕수수 부산물을 혼합하여 발효하여 항균성이 강한 코코아 껍질을 발효처리한 뒤 2차 발효산물에 천연영양제 및 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하고, 3가지의 강력한 미생물 배지를 만든 뒤 발효미생물을 첨가하여 3차 발효과정을 거쳐 발효추출물로 제조함으로 3차에 걸쳐 발효된 발효산물에 영양분이나 기능성 물질의 분자크기를 킬로달톤(Kd) 단위에서 달톤(d)단위로 아주적은 단위로 쪼개짐으로 흡수와 효과가 향상되고 그에 따른 2차대사산물의 형성으로 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 향장원료, 2차대사산물을 이용한 생리활성물질 및 기타 첨가제 등 고부가성 원료로 제공할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 의한 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조단계를 간단하게 도시한 것이다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하면 다음과 같다. 그리고 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지기능 등에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
본 발명은 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 급속동결 건조한 뒤 70~200 메쉬로 분쇄하고 미강과 증류수를 혼합하여 함수율 9~15%정도로 되도록 혼합하는 미강혼합물을 만드는 단계; 상기 미강혼합물을 미강과 엽록소 자체에 존재하는 효소 및 발효미생물의 활동으로 1차 발효시키는 단계; 상기 1차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수를 분쇄, 혼합하여 사탕수수에 있는 미생물과 탄소원의 혼합물질로 발효를 할 수 있도록 한 환경에서 2차 발효시키는 단계; 상기 2차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 혼합 배지를 만드는 단계; 상기 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효하는 단계; 상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 알콜 수용액에 혼합, 교반하여 추출하는 추출단계로 이루어져서 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물을 제조한다.
이를 더욱 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 건조 및 분쇄하고 이를 미강과 증류수를 혼합하여 함수율 9~15%정도로 혼합한 미강혼합물을 만든다.
보리싹, 밀싹, 귀리싹의 크기는 5~50㎝로 녹색이 제일 짙을 때 수확 된 것을 급속동결 건조한 뒤 70~200 메쉬로 분쇄 한 다음 사용한다. 5~50㎝ 되는 어린 싹에는 칼륨 우유의 55배, 시금치의 18배가 들어있으며, 칼슘이 우유의 11배, 빈혈을 방지하는 성분 시금치보다 5배, 비타민 씨가 시금치의 3배, 사과의 60배, 활성산소를 분해효소인 수퍼옥사이드 디스뮤테이즈(SOD)가 다량 함유되어 있다.
상기 분말상태의 미강혼합물을 코지로 만들어 온, 습도가 자동으로 제어되는 인큐베이트에서 엽록소와 미강 자체에 존재하는 효소 및 발효미생물의 활동으로 흰곰팡이가 코지전체를 덮을 정도로 1처 발효를 한다.
즉, 미강혼합물을 엽록소와 미강에 함유되어 있는 다량의 유익한 미생물이 발효를 할 수 있는 환경인 발효온도 18~50℃, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 환경을 제공함으로서 발효가 이루어지도록 한다.
상기 1차 발효가 끝난 발효산물을 멸균, 건조한다.
즉, 상기 1차 발효된 발효산물에는 발효시 이용되었던 미생물의 발효과정에 과다생장으로 인한 위생적인 부분과 2차 발효작업시 다른 균들의 상충작용을 막기 위하여 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함수율이 7~15%가 되도록 건조과정을 거친다.
상기 건조된 1차 발효산물에 파쇄한 코코아껍질과 사탕수수를 분쇄, 혼합하여 사탕수수에 풍부하게 함유하고 있는 미생물과 남아있는 당분과 탄수화물(탄소원,질소원)로 발효하는 2차 발효를 한다.
즉, 항균성이 강한 코코아 껍질분말을 발효하는 데는 자체 미생물을 활성화할 수 있는 사탕수수(원당을 빼낸)분말을 혼합하여 2차 발효 코지를 만들어 온, 습도가 자동으로 조절되는 인큐베이트에서 발효온도 18~50℃, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 환경을 제공하여 발효를 한다.
상기 2차 발효된 발효산물을 급속멸균, 건조하게 되는 것으로, 이는 1차 발효를 마친 발효산물에는 발효시 이용되었던 미생물의 발효과정에 과다생장으로 인한 위생적인 부분과 2차 발효작업시 다른 균들의 상충작용을 막기 위하여 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함 수분율이 7~15%가 되도록 건조과정을 거친다.
상기 건조된 2차 발효산물 중량부 5 내지 85에 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 15 내지 95중량부로 혼합하여 배지를 만든다.
상기 천연영양제는; 스피루리나엑스, 클로렐라엑스, 노니엑스, 야 자엑스, 코코아엑스, 하이테스트당밀, 정제당밀, 어분, 맥주효모, 동물육엑스, 효모엑스, 감자엑스, 울금엑스, 망고엑스, 아스파라긴엑스, 카제인, 탈지유 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 영양물질로는 비타민류, 식이섬유류, 아미노산류를 사용하되
상기 영양물질 중 비타민류는 비타민A,B₂,B,B12,C,D₂,D₃,E,K 및 엽산 중에서 하나 이상을 선택하게 되며,
상기 영양물질 중 식이섬유류로는 차전자피, 셀룰로오스, 헤미셀룰로오스, 결정셀룰로오스, 리그닌, 펙틴, 알긴산, 구아검, 아라비아검, 곤약만난, 이눌린, 폴리덱스트로스, 말토덱스트린 중에서 하나 이상을 선택하게 되며,
상기 영양물질 중 아미노산류는 히스티딘, 이소로이신, 로이신, 라이신, 메치오닌, 발린, 시스틴, 트립토판, 트레오닌, 페닐, 알라닌, 티로신 중에서 하나 이상을 선택하게 된다.
상기 한약재류로는, 갈근, 갈화, 감초, 강활, 건강, 건율, 검실, 길경, 결명자, 계지, 계피, 고삼, 곡아, 곤포, 곽향, 과루인, 괴화, 구기자, 구절초, 구판, 구인, 국화, 금은화, 나복자, 노근, 노니, 녹각, 녹용, 단삼, 당귀, 당삼, 대맥, 대복피, 대황, 대회향, 대산, 대조, 도인, 독활, 동과자, 동규자, 동충하초, 두충, 마자인, 마황, 망과, 만형자, 맥아, 맥문동, 면실자, 모과, 모려, 목단피, 목통, 목향, 몰약, 박하, 반하, 방기, 방풍, 백강잠, 백자인, 백지, 백출, 보골지, 복령, 복분자, 비파엽, 비타민나무, 사삼, 사상자, 사인, 산사자, 산수유, 산약, 산조인, 산초, 상기생, 상백피, 상엽, 상황버섯, 생강, 석결명, 석곡, 석창포, 세신, 소목, 소자, 송화분, 승마, 시호, 신곡, 신이, 아카리쿠스, 어성초, 애엽, 여정실, 연자육, 연교, 영실, 영지, 오가피, 오매, 오미자, 와송, 우방자, 우슬, 운지, 울금, 원지, 위령선, 위유, 유백피, 유향, 육두구, 육종용, 음양곽 , 익지인, 인동, 인삼, 인진호, 자소, 자하거, 작약, 저령, 전갈, 죽여, 죽력, 죽엽, 정향, 지골피, 지구자, 지실, 지유, 지황, 진피, 질려자, 녹차, 차전자, 창이자, 창출, 천궁, 천마, 천문동, 측백엽, 침향, 치자, 커피, 택사, 토사자, 파극, 패모, 포공영, 포부자, 표고, 하고초, 하수오, 해동피, 행인, 향부자, 향유, 현삼, 현호색, 형개, 황금, 황백, 황련, 황정, 황칠, 호프, 홍삼, 홍화, 후박, 후추, 희첨, 회향, 흑두, 흑축 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 무기질류로는 게르마늄, 셀레늄, 구리, 마그네슘, 망간, 아연, 요오드, 칼슘, 칼륨, 페그마타이트, 맥반석, 운모, 목문석, 일라이트, 흑연, 금, 은 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 조류에서는 갈파래, 곰피, 김, 꼬시래기, 다시마, 돌가사리, 뜸부기, 메생이, 미역, 스피루리나. 클로렐라, 우뭇가사리, 톳, 파래, 함초 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 곡류에서는 쌀, 찹쌀, 현미, 싸라기, 미강, 보리, 밀, 호밀, 귀리, 조, 수수, 옥수수, 메밀, 율무, 기장 중에서 하나 이상을 선택하고, 상기 두류에서는 콩, 팥, 녹두 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 첨가제로는 산미제, 감미제, 착향제를 사용하되
상기 첨가제 중 산미제로 구연산, 사과산, 주석산, 호박산 중에서 하나 이상을 선택한다. .
상기 첨가제 중 감미제로는 자일리톨, 소르비톨, 말토즈, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 아스파탐, 스테비오 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 첨가제 중 착향제로는 혼합과일향, 사과향, 요구르트향, 바나나향, 살구향, 레몬향, 장미향, 인진쑥향, 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 식물성유지 탈지분은 유종자 중에서 탈지가 끝난 부산물로 아마씨 탈지 부산물, 마자인 탈지부산물, 올리브씨 탈지 부산물, 참깨씨 탈지 부산물, 목화씨 탈지 부산물, 대두씨 탈지 부산물, 낙화생씨 탈지 부산물, 쌀겨 탈지 부산물 중에서 하나 이상을 선택한다.
상기 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효를 한다.
본 발명에서의 발효미생물이라 함은 항균성이 높은 원료들을 원활하게 발효할 수 있도록 상기 3차 발효단계에서의 발효미생물로 사용되는 균종은 고초균(Bacillus subtilis)속, 아스퍼길러스(Aspergillus)속, 방선균을 한배지에서 성장시켜 배양된 혼합균으로 이루어지되 상기 고초균(Bacillus subtilis)속은 바실러스 니거 (Bacillus niger), 아스퍼길러스(Aspergillus)속은 아스길러스 오리자 (Aspergillus oryzae), 아스퍼질러스 소자이(Aspergillus sojae)와, 방선균으로는 희소 방선균(Rare actinomycetes)중 마이크로비스포라(Microbispora), 스트렙토스포랑기움(Streptosporangium), 마이크로모노스포라(Micromonospora), 노카르디오포름스(Nocardioforms), 닥틸로스포랑기움(Dactylosporangium) 중에서 고초균(Bacillus subtilis)속 1개의 선택한 미생물과 아스퍼길러스속(Aspergillus)속의 2종 중 1개의 미생물 및 희소 방선균(Rare actinomycetes) 5개 중 1개의 미생물을 선택하고 이를 혼합하여 배양된 균주를 발효산물에 첨가하여 발효온도 18~50, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 환경을 제공함으로 활발한 발효조건을 제공해준다.
상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물은 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함수율이 7~15%가 되도록 건조과정을 거친다. 상기 건조된 3차 발효산물에 알콜 수용액을 혼합, 교반하여 온도 40 내지 90℃에서 압력 1 내지 10 Kgf/㎠로 감압 추출하여 발효추출물을 조성하되 상기 알콜 수용액은 증류수 중량부 70, 무수에탄올 중량부 30으로 형성된다.
상기 발효추출물을 온도 5 내지 10℃에서 10~100일 동안 숙성하는 추가적으로 숙성단계를 더 포함할 수 있다.
상기와 같은 과정으로 만들어지는 분말 및 추출액으로 된 발효추출물을 동물사료첨가제, 발효 한약재 원료, 식품의 원료, 향장원료 및 기타 첨가제 등으로 제조하게 된다.
[실시예]
싹의 크기가 30㎝로 자 란보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 건조하고 급속동결 건조한 뒤 100 메쉬로 분쇄한 다음 미강과 수분율 10% 정도로 혼합하여 미강혼합물을 만드는 단계(S10),
상기 미강혼합물을 분말상태의 코지로 만들어 온, 습도가 자동으로 제어되는 인큐베이트에서 다량의 유익한 미생물이 발효를 할 수 있는 환경인 발효온도 130℃, 습도 70%, pH 6, 수분 함량 10%에서 반호기성 상태에서 20일 동안 1차 발효시키는 단계(S20),
상기 1차 발효가 끝난 혼합 발효산물을 발효시 이용되었던 미생물의 발효과정에 과다생장으로 인한 위생적인 부분과 2차 발효작업시 다른 균들의 상충작용을 막기 위하여 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 100℃에서 10시간 멸균을 하고 건조기에서 함 수분율이 10%가 되도록 건조과정을 거친 다음 1차 발효산물을 코코아 껍질분말과 사탕수수 부산물(원당을 빼낸)분말을 혼합하여 2차 발효 코지를 만들고, 온, 습도가 자동으로 조절되는 인큐베이트에서 발효온도 30℃, 습도 70%, pH 6, 수분 함량 10%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 20일 동안 환경을 제공 고체분말 2차 발효 단계(S30),
상기 2차 발효산물을 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 100℃에서 10시간 멸균을 하고 건조기에서 함 수분율이 10%가 되도록 건조과정을 거친 건조된 2차 발효산물 중량부 50에 스피루리나엑스로 된 천연영양제를 혼합하여 배지를 만드는 단계(S40),
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상기 단계를 거친 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효를 하는 것으로, 발효미생물로 사용되는 균종은 고초균(Bacillus subtilis)속, 아스퍼길러스(Aspergillus)속, 방선균을 한배지에서 성장시켜 배양된 혼합균으로 이루어지되상기 고초균(Bacillus subtilis)속은 바실러스 니거 (Bacillus niger), 아스퍼길러스(Aspergillus)속은 아스길러스 오리자 (Aspergillus oryzae), 방선균으로는 희소 방선균(Rare actinomycetes)인 마이크로비스포라(Microbispora)을 혼합하여 배양된 균주를 발효산물에 첨가하여 온습도가 자동 조절되는 인큐베이트에서 발효온도 30℃, 습도 70%, pH 6, 수분 함량 10%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 20일 동안 3차 발효과정을 거치는 단계(S50),
상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물은 급속멸균기(오토크래이버)를 이용하여 100℃에서 10시간 멸균을 하고 건조기에서 함 수분율이 10%가 되도록 건조과정을 거친 다음 상기 건조된 3차 발효산물에 알콜 수용액을 혼합, 교반하여 온도 70℃에서 압력 5 Kgf/㎠로 감압 추출하여 발효조성물을 추출한다. 상기 알콜 수용액은 증류수 중량부 70, 무수에탄올 중량부 30으로 형성되어 추출하는 추출단계(S60),
상기 추출된 발효조성물을 온도 10℃에서 100일 동안 숙성하는 추가적으로 숙성단계를 포함한다.(S70)

상기와 같은 단계를 거쳐 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물을 제조하게 된다.
이상에서 본 발명은 상기 실시예를 참고하여 설명하였지만 본 발명의 기술사상범위내에서 다양한 변형실시가 가능함은 물론이다.
S10 : 미강혼합물을 만드는 단계
S20 : 1차 발효단계
S30 : 2차 발효단계
S40 : 혼합배지를 만드는 단계
S50 : 3차 발효단계
S60 : 발효추출물 추출단계
S70 : 숙성단계

Claims (12)

  1. 보리싹, 밀싹, 귀리싹 중에서 선택되는 하나 이상의 엽록소를 동결 건조한 뒤 70~200 메쉬로 분쇄하고 미강과 증류수를 혼합하여 함수율 9~15%정도로 되도록 혼합하는 미강혼합물을 만드는 단계;
    상기 미강혼합물을 미강과 엽록소 자체에 존재하는 효소 및 발효미생물의 활동으로 1차 발효시키는 단계;
    상기 1차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 파쇄한 코코아 껍질과 원당을 추출한 사탕수수를 분쇄, 혼합하여 사탕수수에 있는 미생물과 탄소원의 혼합물질로 발효를 할 수 있도록 한 환경에서 2차 발효시키는 단계;
    상기 2차 발효가 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 혼합하여 혼합 배지를 만드는 단계;
    상기 혼합 배지에 발효미생물을 첨가하여 3차 발효하는 단계;
    상기 3차 발효작업이 끝난 발효산물을 멸균 및 건조한 다음 알콜 수용액에 혼합, 교반하여 추출하는 추출단계;로 이루어진 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 1차 발효단계에서는,
    상기 미강혼합물을 인큐베이트에서 발효온도 18~50℃, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 2차 발효단계에서는,
    1차 발효산물을 멸균기를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함수율이 7~15%가 되도록 건조한 다음 인큐베이트에서 발효온도 18~50℃, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 혼합 배지를 만드는 단계에서는,
    2차 발효산물을 멸균기를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함수율이 7~15%가 되도록 건조한 다음 2차 발효산물 중량부 5 내지 85에 천연영양제, 영양물질, 한약재류, 무기질류, 조류, 곡류 및 두류, 첨가제, 식물성유지 탈지분 중에서 1종 이상을 15 내지 95중량부로 혼합하여서 됨을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 천연영양제는; 스피루리나엑스, 클로렐라엑스, 노니엑스, 야 자엑스, 코코아엑스, 하이테스트당밀, 정제당밀, 어분, 맥주효모, 동물육엑스, 효모엑스, 감자엑스, 울금엑스, 망고엑스, 아스파라긴엑스, 카제인, 탈지유 중에서 하나 이상을 선택하며
    상기 영양물질로는 비타민류, 식이섬유류, 아미노산류를 사용하며,
    상기 한약재류로는, 갈근, 갈화, 감초, 강활, 건강, 건율, 검실, 길경, 결명자, 계지, 계피, 고삼, 곡아, 곤포, 곽향, 과루인, 괴화, 구기자, 구절초, 구판, 구인, 국화, 금은화, 나복자, 노근, 노니, 녹각, 녹용, 단삼, 당귀, 당삼, 대맥, 대복피, 대황, 대회향, 대산, 대조, 도인, 독활, 동과자, 동규자, 동충하초, 두충, 마자인, 마황, 망과, 만형자, 맥아, 맥문동, 면실자, 모과, 모려, 목단피, 목통, 목향, 몰약, 박하, 반하, 방기, 방풍, 백강잠, 백자인, 백지, 백출, 보골지, 복령, 복분자, 비파엽, 비타민나무, 사삼, 사상자, 사인, 산사자, 산수유, 산약, 산조인, 산초, 상기생, 상백피, 상엽, 상황버섯, 생강, 석결명, 석곡, 석창포, 세신, 소목, 소자, 송화분, 승마, 시호, 신곡, 신이, 아카리쿠스, 어성초, 애엽, 여정실, 연자육, 연교, 영실, 영지, 오가피, 오매, 오미자, 와송, 우방자, 우슬, 운지, 울금, 원지, 위령선, 위유, 유백피, 유향, 육두구, 육종용, 음양곽 , 익지인, 인동, 인삼, 인진호, 자소, 자하거, 작약, 저령, 전갈, 죽여, 죽력, 죽엽, 정향, 지골피, 지구자, 지실, 지유, 지황, 진피, 질려자, 녹차, 차전자, 창이자, 창출, 천궁, 천마, 천문동, 측백엽, 침향, 치자, 커피, 택사, 토사자, 파극, 패모, 포공영, 포부자, 표고, 하고초, 하수오, 해동피, 행인, 향부자, 향유, 현삼, 현호색, 형개, 황금, 황백, 황련, 황정, 황칠, 호프, 홍삼, 홍화, 후박, 후추, 희첨, 회향, 흑두, 흑축 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 무기질류로는 게르마늄, 셀레늄, 구리, 마그네슘, 망간, 아연, 요오드, 칼슘, 칼륨, 페그마타이트, 맥반석, 운모, 목문석, 일라이트, 흑연, 금, 은 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 조류에서는 갈파래, 곰피, 김, 꼬시래기, 다시마, 돌가사리, 뜸부기, 메생이, 미역, 스피루리나. 클로렐라, 우뭇가사리, 톳, 파래, 함초 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 곡류에서는 쌀, 찹쌀, 현미, 싸라기, 미강, 보리, 밀, 호밀, 귀리, 조, 수수, 옥수수, 메밀, 율무, 기장을 하나 이상 선택하고, 상기 두류에서는 콩, 팥, 녹두 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 첨가제로는 산미제, 감미제, 착향제를 사용하며,
    상기 식물성유지 탈지분은 유종자 중에서 탈지가 끝난 부산물로 아마씨 탈지 부산물, 마자인 탈지부산물, 올리브씨 탈지 부산물, 참깨씨 탈지 부산물, 목화씨 탈지 부산물, 대두씨 탈지 부산물, 낙화생씨 탈지 부산물, 쌀겨 탈지 부산물 중에서 하나 이상을 선택하는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  6. 제 5항에 있어서,
    상기 영양물질 중 비타민류는 비타민A,B₂,B, B12, C, D₂,D₃,E, K 및 엽산 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 영양물질 중 식이섬유류로는 차전자피, 셀룰로오스, 헤미셀룰로오스, 결정셀룰로오스, 리그닌, 펙틴, 알긴산, 구아검, 아라비아검, 곤약만난, 이눌린, 폴리덱스트로스, 말토덱스트린 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 영양물질 중 아미노산류는 히스티딘, 이소로이신, 로이신, 라이신, 메치오닌, 발린, 시스틴, 트립토판, 트레오닌, 페닐, 알라닌, 티로신 중에서 하나 이상을 선택하는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  7. 제 5항에 있어서,
    상기 첨가제 중 산미제로 구연산, 사과산, 주석산, 호박산 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 첨가제 중 감미제로는 자일리톨, 소르비톨, 말토즈, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 아스파탐, 스테비오 중에서 하나 이상을 선택하며,
    상기 첨가제 중 착향제로는 혼합과일향, 사과향, 요구르트향, 바나나향, 살구향, 레몬향, 장미향, 인진쑥향, 중에서 하나 이상을 선택하는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 3차 발효단계에서는,
    발효미생물로 사용되는 균종은 고초균(Bacillus subtilis)속, 아스퍼길러스(Aspergillus)속, 방선균을 한배지에서 성장시켜 배양된 혼합균으로 이루어지되
    상기 고초균(Bacillus subtilis)속은 바실러스 니거 (Bacillus niger), 아스퍼길러스(Aspergillus)속은 아스길러스 오리자 (Aspergillus oryzae), 아스퍼질러스 소자이(Aspergillus sojae)와, 방선균으로는 희소 방선균(Rare actinomycetes)중 마이크로비스포라(Microbispora), 스트렙토스포랑기움(Streptosporangium), 마이크로모노스포라(Micromonospora), 노카르디오포름스(Nocardioforms), 닥틸로스포랑기움(Dactylosporangium) 중에서 고초균(Bacillus subtilis)속 1개의 선택한 미생물과 아스퍼길러스속(Aspergillus)속의 2종 중 1개의 미생물 및 희소 방선균(Rare actinomycetes) 5개 중 1개의 미생물을 선택하고 이를 혼합하여 배양된 균주를 발효산물에 첨가하여 발효온도 18~50, 습도 50~85%, pH 5~6.7, 수분 함량 9~15%에서 호기성과 혐기성의 중간상태에서 2~30일 동안 발효하는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  9. 제 1항에 있어서,
    상기 추출단계에서는,
    3차 발효작업이 끝난 발효산물은 멸균기를 이용하여 80~132℃에서 10분~10시간 멸균을 하고 건조기에서 함 수분율이 7~15%가 되도록 건조과정과 건조된 3차 발효산물에 알콜 수용액을 혼합, 교반하여 온도 40 내지 90℃에서 압력 1 내지 10 Kgf/㎠로 감압 추출하는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 알콜 수용액은 증류수 중량부 70, 무수에탄올 중량부 30으로 형성되는 것을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 발효추출물을 온도 5 내지 10℃에서 10~100일 동안 숙성하는 숙성단계를 더 포함하여서 됨을 특징으로 하는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물 제조방법.
  12. 상기 제 1항 내지 제 11항 중에서 어느 하나의 방법에 의하여 제조되는 엽록소가 함유된 미강의 발효추출물
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