KR101269410B1 - 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법 - Google Patents

버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 복합배양법에 따르면 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 균사체의 복합배양균사체를 대량 생산할 수 있으며, 상기 방법을 이용해 배양된 본 발명의 복합배양균사체는, 베타글루칸 또는 AHCC를 다량으로 함유하여 위암세포주와 위암세포를 주입한 마우스에서 뛰어난 항암 효과가 있음이 확인된다.

Description

버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법 {Methods of culturing Inonotus obliquus, Phellinus linteus, Ganoderma lucidum, Sparassis crispa and Vegetable Worms using mushroom media}
본 발명은 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 베타글루칸(β-glucan, 다당류의 일종으로 면역증강작용을 가지고 있으며 효모의 세포벽, 버섯류, 곡류 등에 존재함) 또는 AHCC(active hexose correlated compound, 담자균류의 균사체 배양 추출물 중에서 얻은 다당류를 총칭함)를 함유하는 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양균사체의 항암효과를 확인하고, 상기 복합배양된 균사체를 이용하여 제조할 수 있는 기능성 식품들의 실례 및 제조방법을 제공한다.
차가버섯(Inonotus obliquus)은 러시아, 캐나다, 일본 홋카이도와 같은 한랭지역에서 자생하는 자작나무, 오리나무 등에 기생하는 균핵이다. 최근 일본에서는 차가버섯이 C형 간염 예방과 간암 치료 효과가 있다고 보고되었고, 미국에서도 차가버섯이 특수 천연 물질로 분류되어 미래 제약 및 건강식품으로 개발 중이다. 우리나라에서도 민간에서 위암 환자와 당뇨병 환자에게 차가버섯을 사용한 결과, 그 효과가 기타 버섯류에 비해 뛰어났던 것으로 보고된 바 있다. 그 외에 차가버섯이 신체 저항력 증가, 종양 발생 억제, 미백 등에도 효과가 있다고 보고되어 있다.
상황버섯(phellinus linteus)은 목질진흙버섯이라고도 하며, 동의보감에서는 상목이(桑木耳)라는 이름으로 탕액편에 기록되어 있다. 뽕나무 줄기에 자생하며 삿갓 표면을 제외하고는 모두 황색이다. 초기에는 진흙 덩어리가 뭉쳐진 것처럼 보이다가 다 자란 후에는 나무 그루터기에 혓바닥을 내민 모습이어서 수설(樹舌)이라고도 한다. 예로부터 상황버섯은 자궁출혈, 월경불순 등에 이용되어 왔으며 최근에는 종양 억제, 면역력 강화 및 미백에 우수한 효과가 있다고 보고된 바 있다.
영지버섯(Ganoderma lucidum)은 여름에 활엽수 뿌리에서 발생한다. 진시황의 불로초라고도 알려져 있고 본초강목에서는 인삼과 함께 이 버섯을 상약의 반열에 올려놓았다. 영지버섯은 강장, 진해, 소종(消腫) 등의 효능이 있어 호흡기 질환, 신경쇠약, 심장병, 고혈압 등에 효과가 있고 콜레스테롤을 낮춰주며 항암 효과가 있다고도 알려져 있다.
꽃송이버섯(Sparassis crispa)은 여름부터 가을까지 살아있는 나무의 뿌리 근처 줄기나 그루터기에 뭉쳐서 발생한다. 하얀 꽃이 무리를 지어 핀 것처럼 보이며 송이와 비슷한 향을 낸다. 가을에 침엽수를 자른 그루터기나 고목의 언저리에서 자생한다. 꽃송이버섯은 면역 증강, 고혈압 억제, 혈당 상승 억제, 혈액 순환 개선, 조혈 작용 등의 효과가 있다.
동충하초(Vegetable Worms)는 대부분 곤충을 숙주로 하여 기생하여 상기 곤충의 시체에 자실체를 내는 것을 특징으로 하며, 겨울에는 벌레이던 것이 여름에는 버섯으로 변한다는 뜻을 지닌다. 숙주의 종류에 따라 나비를 숙주로 하는 붉은동충하초(Cordyceps militaris), 매미를 숙주로 하는 매미동충하초(C. sobolifera), 벌을 숙주로 하는 벌동충하초(C. sphecocephala) 등이 있으며 그 밖에 딱정벌레, 메뚜기, 거미를 숙주로 하는 동충하초도 있다. 면역 기능 강화, 항암, 호흡기 기능의 회복, 노화 억제, 피로 회복, 비만이나 빈혈 억제 등의 효과가 알려져 있다.
표고버섯(Lentinus edodes, 또는 Continellus shiitake)은 사물기생균(死物寄生菌)으로 참나무류에 기생하는 목재부유균(wood rotting fungi)이다. 표고버섯의 약리 작용으로는 항종양, 항균, 면역증강, 암 전이 억제, 발암 억제, 탈콜레스테롤, 산성음식의 중독방지, 항바이러스 효과, 식물 생장 촉진, 자실체형성 유도 촉진 등이 알려져 있다.
상기 버섯류는 뛰어난 항암 효과 및 면역력 강화 효과가 있다고 공통적으로 보고되어 있으며 기능성 식품 및 건강보조식품은 물론 의약품의 제조에도 널리 사용되고 있다.
한편, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 의약품, 기능성 식품의 혼합 원료로서 사용하기 위해서는 자실체인 버섯을 채취하여 사용해야 하지만 버섯 자체가 자연 상태에서 번식이 잘 되지 않는다는 점과, 채취 남용으로 인해 자원 고갈 및 생태계 파괴가 야기된다는 문제점이 있다. 톱밥 등을 이용하여 자실체를 재배하는 방법이 이용되기도 하나 이러한 방법도 재배 기간만 수개월이 소요된다. 산업적으로 사용할 수 있을 정도로 원료를 공급하기 위해서도 대량의 생산 시설 및 경비가 소요된다는 난점 때문에 대량 생산의 수요를 충족시키지 못하고 있다.
이와 같이, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초는 항암제나 면역 증강제로서 효과가 있음에도 그 공급이 제한적이며 대량 생산 및 속성 생산이 용이하지 않아 널리 활용되지 못하고 있다.
따라서, 상기 버섯들에 대하여, 버섯균의 자실체와 동등한 효과를 나타내는 균사체를 생산할 수 있는 대량 배양 방법에 대한 연구가 최근 활발하게 이루어지고 있다. 특히 한국등록특허 제218897호, 제393254호에는 상황버섯 균사체의 배양방법, 한국등록특허 제787170호, 제592129호에는 차가버섯 균사체의 배양방법, 한국공개특허 제2002-0029361호, 제2009-0003779호에는 영지버섯 균사체의 배양방법, 한국등록특허 제474979호에는 꽃송이버섯 균사체의 배양방법, 한국등록특허 제432472호, 제465283호에는 동충하초의 배양방법이 공지되어 있다.
또한 한국등록특허 제889927호, 제889930호에는 이미 상황버섯과 차가버섯의 균사체를 복합배양하는 방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제922311호에는 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 균사체를 복합배양하는 방법이 개시되어 있다. 한편, 이렇게 버섯을 복합배양하는 경우 각 버섯에 미량으로 존재하던 AHCC라는 물질의 양이 증가된다고 알려져 있다. AHCC는 항암효과가 있다고 널리 알려진 물질로서 담자류의 버섯에서 생성되는 물질로 담자균류의 균사체 배양 추출물 중에서 얻은 다당류를 총칭한다. 상기 AHCC는 암세포를 배제하는 면역 세포인 백혈구나 림프구를 활성화하여 우리의 몸에 본래 갖춰져 있는 면역력을 높여 항암작용을 하는 것으로 알려져 있다. 상기 한국등록특허 제922311호에는 서로 성질이 다른 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 균사체들이 서로에게 간섭을 주고받으며 증식하면서, 균사체에서 회백색을 띄는 AHCC를 함유하는 물질이 생성되는 과정이 확인된 바 있다.
한편, 본 발명에서는 상기 한국등록특허 제922311호 등에서 사용된 곡물배지 대신, 버섯배지를 이용하여 복합배양균사체를 배양함으로써, 상기 곡물배지에서 배양된 복합배양균사체보다 베타글루칸이나 AHCC 같은 기능성 물질의 양이 더 증가되는 것과, 상기 복합배양균사체의 항암효과가 더욱 증강된 것을 확인한다.
본 발명의 기술적 과제는 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 균사체의 복합배양방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 방법으로 생성된 복합배양균사체를 함유하는 물질을 이용하여 항암기능이 있는 의약품 및 기능성 식품 등을 제공하는데 있다.
본 발명은 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법, 및, 상기 방법에 따라 배양된 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양균사체에 관한 것이다.
상기 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법은,
(1공정) 버섯을 건조한 후 잘게 분쇄하는 단계;
(2공정) 상기 1공정의 버섯분말의 수분을 20~60%[w/w]로 조절하고 멸균하여 버섯배지를 제조하는 단계; 및,
(3공정) 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 무균처리하여 상기 2공정에서 제조된 버섯배지에 접종하고, 20~40℃에서 15~50일 동안 배양하는 단계;
를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 1공정의 버섯은 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯에서 선택되는 1종 이상의 버섯일 수 있다.
상기 3공정에서, 버섯배지 100 중량부를 기준으로, 상기 버섯배지에, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 각각 0.1~1 중량부씩 접종할 수 있다.
상기 3공정에서,
차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 각각 버섯배지에 접종하는 대신, 상기 5종 버섯이 모두 함께 배양된 복합배양균사체를 접종할 수 있으며, 버섯배지 100 중량부를 기준으로, 상기 버섯배지에, 5종 버섯이 모두 함께 배양된 복합배양균사체 0.5~5 중량부를 접종할 수 있다.
상기 5종 버섯의 복합배양균사체는,
곡물배지 100 중량부를 기준으로, 상기 곡물배지에, 차가버섯 0.1~1 중량부, 상황버섯 0.1~1 중량부, 영지버섯 0.1~1 중량부, 꽃송이버섯 0.1~1 중량부 및 동충하초 0.1~1 중량부를 동시에 접종하여, 20~40℃에서 15~50일 동안 배양한 복합배양균사체인 것을 특징으로 한다.
상기 곡물배지는, 수분이 20~60%[w/w]로 조절된 곡물배지인 것으로서,
찹쌀, 쌀, 현미, 밀 및 콩을 포함하는 그룹에서 선택되는 1가지 이상의 곡물을 준비하는 단계;
상기 곡물 100 중량부를 기준으로, 상기 곡물을 물 100~500 중량부에 침지하고, 탄산칼슘 1~5 중량부를 혼합하여, 상기 곡물이 침지된 물의 수소이온지수를 pH 6.0~7.0으로 맞추는 단계;
상기 곡물을 1~5시간 동안 침지시키는 단계;
상기 침지된 곡물을 1~5시간 동안 탈수하는 단계; 및,
탈수된 곡물을 멸균하는 단계;
를 포함하여 제조될 수 있다.
또한, 3공정에서는,
상기 2공정 후 3공정 전에, 상기 2공정의 버섯배지 100 중량부를 기준으로, 표고버섯 0.1~1 중량부를 접종한 후, 5~10일간 20~40℃에서 표고버섯 균사체를 전배양하여 제조된 표고버섯 균사체 배양물을 제조하고, 상기 3공정에서, 상기 표고버섯 균사체 배양물을 2공정에서 제조된 버섯배지 대신 사용할 수 있다.
본 발명의 복합배양균사체는, 상기 복합배양균사체 중량의 2~20배의 추출용매를 넣고 20~130℃에서 1~10시간 동안 추출하여 수거한 액상을 이용하여 복합배양균사체의 추출물로 제조될 수 있다.
상기 복합배양균사체의 추출물은 여과 및 농축할 수 있으며, 분무건조, 동결건조 또는 열풍건조를 이용하여 분말화할 수 있다.
상기 복합배양균사체의 추출물을 제조하는 추출용매는 그 선택에 있어서 특별히 한정되지는 않으며, 추출용매로는 물, 에탄올, 메탄올, 이소프로필알코올, n-부탄올 등의 저급 알코올, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 등의 다가 알코올, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 벤젠, n-헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매 등을 예로 들 수 있고, 이들 중에서 하나 또는 두 종류 이상의 용매를 혼합하여 추출에 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물을 이용하여 항암기능이 있는 건강식품이나 정제, 캡슐제, 환제, 액제 등을 포함하는 기능성 의약품, 항암 투병 중의 환자를 위한 유동식, 면역력을 증강시키는 동물의 사료, 식물 질병의 발생을 억제하는 유기 비료 등을 제조할 수 있다.
본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물을 함유하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.001㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 100㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물은 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
또한, 본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물은 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 암 치료 개선을 위한 건강기능식품으로 제공될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 복합배양균사체 또는 이의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명은 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 복합배양방법에 따르면, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 균사체의 복합배양균사체를 대량 생산할 수 있었다. 또한, 상기 방법을 이용해 배양된 본 발명의 복합배양균사체는, 베타글루칸 또는 AHCC를 다량으로 함유하여 위암세포주와 위암세포를 주입한 마우스에서 뛰어난 항암 효과가 있음이 확인되었고, 기존 곡물배지를 이용해서 배양한 복합배양균사체보다 전체적인 배양시간이 짧아졌음에도 불구하고 항암효과가 더 탁월하였다.
도 1은 본 발명의 방법대로 표고버섯배지를 이용하여 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양균사체를 배양하는 방법을 나타내는 순서도이다.
도 2는 본 발명의 실시예 2의 방법대로 표고버섯배지를 이용하여 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양균사체를 배양한 배양물을나타내는 사진이다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 실시예는 개시된 내용이 철저하고 완전해질 수 있도록 그리고 당업자에게 본 발명의 사상이 충분히 전달될 수 있도록 하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1: 표고버섯배지에 5종 버섯의 복합배양>
표고버섯을 5mm 너비로 절단하고 건조한 후 분쇄하였다. 상기 표고버섯분말을 수분 50%[w/w], 및 pH 6.5로 맞추어 1ℓ 유리병에 300g을 넣고 병마개를 닫았다. 이 후, 상기 유리병을 멸균기에 넣고, 1.2기압에서 1시간 20분 동안 멸균하였다. 멸균후에는, 상기 유리병을 꺼내어 25℃로 냉각한 다음, 무균실에서, 70% 알코올로 소독된 차가버섯 0.3g, 상황버섯 0.3g, 영지버섯 0.3g, 꽃송이버섯 0.3g 및 동충하초 0.3g을 각각 상기 유리병 안의 표고버섯배지에 접종하였다(표 1 참조). 이어서 상기 유리병의 마개를 닫고 상기 유리병을 배양실로 옮겨 24~25℃에서 배양하였다. 배양 시작 후, 10일 후에 표고버섯배지의 표면에 균사체가 피어나기 시작하였고, 45일 후에는 균사체에서 AHCC 또는 베타글루칸을 함유하는 고분자 물질들이 생성되어 있는 것이 확인되었다.
<실시예 2: 표고버섯배지에 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합균사체 배양>
실시예 1과 동일하게 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 복합배양균사체를 배양하되, 5종의 버섯을 각각 접종하는 대신, 비교예 2에 개시된 곡물배지에서 배양된 5종 버섯균사체 1.5g을 접종하였다(표 1 참조).
<실시예 3: 표고버섯배지에 표고버섯, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합균사체 배양>
실시예 2와 동일하게 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 복합배양균사체를 배양하되, 표고버섯배지를 멸균 후, 0.25g의 표고버섯을 접종하고 10일간 배양하여 표고버섯균사체가 20% 정도 자라게 하여 이를 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 복합배양균사체의 배지로 이용하였으며, 비교예 2에 개시된 곡물배지에서 배양된 5종 버섯균사체는 1.25g을 접종하였다(표 1 참조).
<실시예 4: 아가리쿠스버섯배지에 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합균사체 배양>
실시예 2와 동일하게 복합배양균사체를 배양하되, 표고버섯배지 대신에 아가리쿠스버섯으로 제조한 버섯배지를 이용하였다(표 1 참조).

조건		 버섯의 종류 및 중량(g) 배지
차가
버섯		 상황
버섯		 영지
버섯		 꽃송이
버섯		 동충
하초		 5종
복합
균사체		 표고버섯배지 20%표고버섯균사체배지 아가리쿠스버섯배지
실시예 1 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 - ○ × ×
실시예 2 - - - - - 1.5 ○ × ×
실시예 3 - - - - - 1.25 × ○
(표고버섯 0.25g 접종)		 ×
실시예 4 - - - - - 1.5 × × ○
<비교예 1: 표고버섯배지에 2종의 버섯 균사체 배양>
실시예 1과 동일하게 버섯 균사체를 배양하되, 버섯은 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 중 각각 2종씩만 접종하였고, 접종한 버섯 종류는 표 2에 나타내었다.
<비교예 2: 곡물배지에 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양>
찹쌀 300g을 깨끗한 물로 세척하고, 정제수 600g에 식용 탄산칼슘을 6g을 넣고 희석하였다. 이 후, 상기 찹쌀을 넣고 2시간 동안 침강시켜 최종적으로 상기 찹쌀을 함유한 물의 pH를 6.5로 조절하였다. 2시간 후에는, 상기 찹쌀이 섞인 물을 탈수 그릇에 담아놓고 2시간 동안 탈수하여, 찹쌀의 수분을 50%[w/w]로 맞추었다. 그리고, 상기 탈수된 찹쌀 중 300g(수분이 함유된 상태에서 300g)을 세척된 1ℓ 유리병에 넣고 마개를 닫은 후에, 유리병을 멸균기에 넣고, 1.2기압에서 1시간 20분 동안 멸균하였다. 상기 유리병을 꺼내어 25℃로 냉각한 다음, 무균실에서, 70% 알코올로 소독된 차가버섯 0.3g, 상황버섯 0.3g, 영지버섯 0.3g, 꽃송이버섯 0.3g 및 동충하초 0.3g을 각각 상기 유리병 안의 찹쌀에 접종하였다(표 2 참조).
이어서 상기 유리병의 마개를 닫고 배양실로 옮겨, 상기 버섯 접종물을 24~25℃에서 배양하였다. 배양 시작 후, 10일 후에 찹쌀의 표면에 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 균사체가 피어나기 시작하였고, 45일 후에는 찹쌀의 80% 정도에 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 균사체가 흡수/배양되었다.
상기 방법은 한국등록특허 제922311호에 개시되어 있다.
<비교예 3. 곡물배지에 표고버섯, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양>
상기 비교예 2와 동일하게 버섯 균사체를 배양하되, 표고버섯, 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 각각 0.25g씩 곡물배지에 접종하였다(표 2 참조).

조건		 버섯의 종류 및 중량(g) 배지
차가
버섯		 상황
버섯		 영지
버섯		 꽃송이
버섯		 동충
하초		 표고
버섯		 표고버섯배지 곡물
배지
비교예 1-1 0.75 0.75 - - - - ○ ×
비교예 1-2 0.75 - 0.75 - - - ○ ×
비교예 1-3 0.75 - - 0.75 - - ○ ×
비교예 1-4 0.75 - - - 0.75 - ○ ×
비교예 1-5 - 0.75 0.75 - - - ○ ×
비교예 1-6 - 0.75 - 0.75 - - ○ ×
비교예 1-7 - 0.75 - - 0.75 - ○ ×
비교예 1-8 - - 0.75 0.75 - - ○ ×
비교예 1-9 - - 0.75 - 0.75 - ○ ×
비교예 1-10 - - - 0.75 0.75 - ○ ×
비교예 2 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 - × ○
비교예 3 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 × ○
<실험예 1: 위암 세포주 AGS에 대한 항암효과 비교>
본 발명의 버섯배지를 이용해 배양한 복합배양균사체의 항암효과를 확인하기 위해, 상기 실시예 1 내지 4, 및, 비교예 1 내지 3의 버섯균사체를 용기에서 꺼내어 스텐레스 스틸 용기에 담아 골고루 편 다음 건조로에 넣어 60℃에서 10시간 동안 건조하였고 수분이 5% 이하 되었을 때 꺼내어 분쇄기에서 분쇄하였고, 이후 상기 분말들을 이용하여 항암효과를 확인하였다.
상기 복합배양균사체들이 암세포 사멸효과가 있는지를 확인하기 위해서는 MTT 어세이를 실시하였다.
이를 위해, 위암 세포주 AGS를 96-웰 플레이트에 각 웰당 세포수가 3000개가 되도록 분주하였고, 5% FBS(fetal bovine serum)가 포함된 RPMI 세포 배양액을 이용하여, 24시간 동안 37℃의 5% CO2 습윤 배양기에 세포를 배양하였다.
복합배양균사체 분말은 PBS를 용매로 하여 녹였고, 0.03, 0.003, 0.0003, 0.00003%의 농도가 되도록 세포 배양액에 넣어, 72시간 동안 처리한 후, 세포의 생존 여부를 MTT 어세이를 통해 확인하였다. MTT 5mg당 1㎖의 PBS 완충용액에 녹여 만든 MTT 용액을 각 웰당 20㎕씩 넣고 4시간 동안 37℃의 5% CO2 습윤 배양기에 넣어두었다. 4시간 후 세포 배양액을 제거하고 여기에 DMSO(dimethylsulfoxide)를 200㎕씩 넣었고, DMSO를 잘 섞어주고 5분 정도 기다린 후 550㎚에서 흡광도를 측정하였다. MTT 어세이 결과는, 암세포의 성장을 50% 저해하는 IC50값(maximal inhibitory concentration)으로 나타내었다.
하기 MTT 어세이의 결과를 참고하면, 표 3에 나타난 바와 같이, 비교예 1 내지 3의 복합배양균사체는, 대략 0.019~0.13% 사이의 첨가농도에서 위암 세포주 AGS가 50%의 증식억제활성을 보였으나, 본 발명의 복합배양균사체(실시예 1 내지 4)는 0.005% 첨가농도 이하에서 위암 세포주 AGS가 50%의 증식억제 활성을 나타내어 비교예 1 내지 3의 균사체에 비해 강한 항암효과가 있는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 실시예 2 및 4의 결과를 비교했을 때, 표고버섯배지와 아가리쿠스버섯배지에서 배양된 복합배양균사체는 모두 항암효과가 우세함을 확인할 수 있었다.
한편, 곡물배지에 5종 버섯 이외에도, 표고버섯을 추가하여 접종한 비교예 3의 항암효과가 실시예 2에 비해 높지 않은 것을 통해서, 본 발명의 복합배양균사체의 항암효과가 버섯배지를 이용하였기에 증강된 것이라고 추측할 수 있었다.
균사체 복합배양균사체의 IC50 [(w/v)%]
실시예 1 0.00383
실시예 2 0.00098
실시예 3 0.00027
실시예 4 0.00094
비교예 1-1 0.10823
비교예 1-2 0.10964
비교예 1-3 0.10736
비교예 1-4 0.10533
비교예 1-5 0.10839
비교예 1-6 0.10459
비교예 1-7 0.10452
비교예 1-8 0.10774
비교예 1-9 0.10658
비교예 1-10 0.10547
비교예 2 0.02093
비교예 3 0.01901
<실험예 2: 본 발명의 복합배양균사체의 마우스 항암효과 비교>
실험예 1에서 제조한, 본 발명의 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복합배양균사체 분말(실시예 1)과 비교예 1-1, 2 및 3의 복합배양균사체 분말 1g을 PBS 완충용액에 최종부피가 10㎖이 되도록 녹여 10%(w/v)의 균사체 용액을 만들어 1㎖씩 1.5㎖ 튜브에 분주하여 상기 용액을 냉장 보관 후 실험에 사용하였다. 이 실험에는 5주령의 BalB/C 암컷 누드 마우스 4마리가 각각 그룹별로 사용되었다. RPMI 세포배양액에 5%의 FBS를 첨가하여 배양된 위암 세포주인 AGS를 2×106개씩의 세포를 50㎕의 PBS와 매트리젤 50㎕와 함께 마우스의 피하조직에 두 군데씩 주사하였다. 항암효과를 확인하기 위하여 각 그룹에 하루에 한 번씩 10% 용액을 100㎕씩 경구투여를 하였고, 대조군에는 PBS를 사용하였다. 6일째부터 2~3일마다 종양의 크기를 측정하였고 25일째에 측정을 종료하였다. 표 4는 마우스에 위암 세포를 피하주사한 후 복합배양균사체 분말 용액을 투여하여 각각의 마우스에서 생성된 종양의 크기를 수치화한 값이다.

그룹
종양 크기(㎣) 확인 날짜
6일 8일 11일 13일 15일 18일 20일 22일 25일
실시예 1 55㎣ 58㎣ 62㎣ 69㎣ 87㎣ 111㎣ 153㎣ 195㎣ 242㎣
비교예 1-1 55㎣ 65㎣ 82㎣ 114㎣ 135㎣ 243㎣ 321㎣ 410㎣ 632㎣
비교예 2 59㎣ 70㎣ 86㎣ 120㎣ 159㎣ 230㎣ 301㎣ 412㎣ 615㎣
비교예 3 58㎣ 69㎣ 85㎣ 115㎣ 163㎣ 236㎣ 321㎣ 408㎣ 602㎣
대조군 126㎣ 152㎣ 183㎣ 224㎣ 282㎣ 328㎣ 521㎣ 653㎣ 852㎣
표 4에 나타난 바와 같이, PBS를 사용한 대조군 마우스의 경우, 거대확장된 종양을 확인할 수 있었다. 반면, 실시예 1의 균사체 용액이 경구투여된 군에서나 식수로 공급된 군에서는 종양 생성이 대조군보다 현저하게 억제되어 있는 것을 확인할 수 있었다. 비교예 1-1, 2 및 3도 종양억제 효과가 나타났으나, 실시예 1의 효과보다는 낮은 종양억제효과를 나타내었다. 상기 결과를 통하여 본 발명의 버섯배지를 이용한 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초 균사체의 항암 효과를 다시 입증할 수 있었으며, 곡물배지에서 배양된 복합배양균사체보다, 버섯배지에서 배양된 복합배지균사체가 훨씬 항암효과가 좋음을 확인할 수 있었다.
<실험예 3. 베타글루칸 함량의 확인>
베타글루칸의 측정은 메가자임 베타글루칸 어세이 키트(Megazyme β-glucan assay kit, Megazyme International Ireland Ltd., Ireland)를 이용하여 상기 고분자 분말의 총글루칸(total glucan)을 구한 후, 알파글루칸(α-glucan) 값을 빼서 구하였다.
실험예 1에서 제조한 균사체 분말(0.5㎜ 크기 이하) 100㎎에, 1.5㎖ 하이드로클로릭산(hydrochloric acid, 37% v/v)을 첨가 후, 내용물을 잘 섞어준 다음, 30℃에서 60분 동안 15분 간격으로 총 글루칸이 녹아 나올 수 있도록 잘 섞어주었다. 전분 및 단백질 성분을 효과적으로 변성, 제거시키기 위해 증류수를 10㎖씩 첨가한 후 2시간 동안 끓는 물(100℃)에 방치하였다. 이 후, 실온에서 내용물을 식힌 후, 2N KOH를 첨가하여 pH를 맞추고, 200mM 염화아세트산 나트륨 완충액(sodium acetate buffer, pH 5.0)으로 희석하였다. 희석된 내용물은 원심분리를 통해 상층액을 얻은 후, 각각의 상층액 100㎕에 엑소-1,2-베타글루카네이즈(exo-1,3-β-Glucanase, 100U/㎖)와 베타글루코시데이즈(β-Glucosidase, 20U/㎖)의 혼합용액을 100㎕씩 첨가하여 1시간 동안 40℃에서 방치하고, 포도당 측정 용액(glucose determination reagent) 3㎖를 첨가한 후 40℃에서 20분 동안 방치하였다. 그 다음, 510nm에서 흡광도를 측정하여 총 글루칸 값을 얻었다. 또한, 알파글루칸 값은 각각의 균사체 분말 100㎎에 2M KOH 2㎖을 넣고, 마그네틱 바(magnetic bar)를 이용하여 수조(ice/water bath)에서 20분 동안 섞어준 후, 1.2M 염화아세트산 완충액(pH3.8) 8㎖를 첨가하였다. 이 후, 아밀로글루코시데이즈(amyloglucosidase, 1630U/㎖)과 인버테이즈(invertase, 500U/㎖)의 혼합용액을 200㎕ 첨가한 후, 40℃에서 30분 동안 방치하고, 200mM 염화 아세테이트 완충액(pH 5.0)을 이용하여 희석하였다. 희석 후에는, 포도당 측정 용액 3㎖를 첨가한 후 20분 동안 40℃에서 방치하였고, 510nm에서 흡광도를 측정하여 알파글루칸 값을 얻었다. 베타글루칸의 값은 아래의 식을 통해 얻어내었고, 상기 결과는 표 5에 나타내었다.
베타글루칸 = 총글루칸 - 알파글루칸
균사체 균사체 분말 중의 베타글루칸 (w/w)%
실시예 1 35.6
실시예 2 45.3
실시예 3 32.4
실시예 4 31.4
비교예 1-1 7.5
비교예 1-2 8.4
비교예 1-3 8.8
비교예 1-4 9.5
비교예 1-5 8.6
비교예 1-6 9.4
비교예 1-7 10.3
비교예 1-8 9.4
비교예 1-9 10.5
비교예 1-10 9.7
비교예 2 14.6
비교예 3 13.7
상기 표 5를 확인하면 실시예의 복합배양균사체의 베타글루칸 함량이, 비교예의 버섯균사체의 베타글루칸 함량보다 더 많음을 확인할 수 있었다.
따라서, 상기와 같은 결과를 통해, 본 발명의 복합배양균사체는, 버섯배지 및 5종 버섯의 복합배양으로 인해 베타글루칸을 비롯한 다양한 고분자물질들의 함량이 증가하여 뛰어난 항암효과를 갖는 것으로 확인되었다.
<사용예 1: 약제의 제조예>
1-1. 산제의 제조
실시예 2의 복합배양균사체를 건조한 분말................ 300 mg
유당 ................................................. 100 mg
탈크 ................................................. 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 정제의 제조
실시예 2의 복합배양균사체를 건조한 분말................. 300 mg
옥수수전분 ............................................. 100 mg
유당 .................................................. 100 mg
스테아린산 마그네슘 ..................................... 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-3. 캅셀제의 제조
실시예 2의 복합배양균사체를 건조한 분말 ............ .. 300 mg
옥수수전분 ........................................... 100 mg
유당 ................................................. 100 mg
스테아린산마그네슘 ..................................... 2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
<사용예 2: 건강식품의 제조예>
2-1. 건강식품의 제조
실시예 2의 복합배양균사체를 건조한 분말 .............. 1000 ㎎
비타민 혼합물........................................... 적량
비타민 A 아세테이트 ................................... 70 ㎍
비타민 E ............................................. 1.0 ㎎
비타민 B1 ........................................... 0.13 ㎎
비타민 C .............................................. 10 ㎎
비오틴 ................................................. 10 ㎍
니코틴산아미드 ......................................... 1.7㎎
엽산.................................................... 50 ㎍
판토텐산 칼슘 ......................................... 0.5 ㎎
황산제1철............................................. 1.75 ㎎
산화아연.............................................. 0.82 ㎎
탄산마그네슘 ......................................... 25.3 ㎎
제1인산칼륨............................. .............. 15 ㎎
제2인산칼슘............................................ 55 ㎎
구연산칼륨............................................. 90 ㎎
탄산칼슘 ............................................. 100 ㎎
염화마그네슘 ........................................ 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2-2. 건강 음료의 제조
실시예 2의 복합배양균사체를 건조한 분말 ................ 500 ㎎
구연산 ................................................. 100 ㎎
올리고당 ............................................... 100 g
매실농축액 ............................................... 2 g
타우린 ................................................... 1 g
정제수를 가하여 전체 .................................. 900 ㎖
통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관하여 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (11)

  1. (1공정) 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯을 건조한 후 잘게 분쇄하는 단계;
    (2공정) 상기 1공정의 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯 분말의 수분을 20~60%[w/w]로 조절하고 멸균하여 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지를 제조하는 단계; 및,
    (3공정) 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 각각 무균처리하여 상기 2공정에서 제조된 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지에 접종하고 20~40℃에서 15~50일 동안 배양하는 단계;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 3공정에서, 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지 100 중량부를 기준으로, 상기 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지에,
    차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 각각 0.1~1 중량부씩 접종하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 3공정에서,
    차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초를 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지에 접종하는 대신, 이들 5종 버섯이 모두 함께 배양된 복합배양균사체를 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지에 접종하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  4. 제 3 항에 있어서,
    표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지 100 중량부를 기준으로, 상기 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지에, 상기 5종 버섯이 모두 함께 배양된 복합배양균사체 0.5~5 중량부를 접종하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  5. 제 3 항에 있어서,
    상기 5종 버섯의 복합배양균사체는,
    곡물배지 100 중량부를 기준으로, 상기 곡물배지에, 차가버섯 0.1~1 중량부, 상황버섯 0.1~1 중량부, 영지버섯 0.1~1 중량부, 꽃송이버섯 0.1~1 중량부 및 동충하초 0.1~1 중량부를 동시에 접종하여, 20~40℃에서 15~50일 동안 배양한 버섯의 복합배양균사체인 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 곡물배지는, 수분이 20~60%[w/w]로 조절된 곡물배지인 것으로서,
    찹쌀, 쌀, 현미, 밀 및 콩을 포함하는 그룹에서 선택되는 1가지 이상의 곡물을 준비하는 단계;
    상기 곡물 100 중량부를 기준으로, 상기 곡물을 물 100~500 중량부에 침지하고, 탄산칼슘 1~5 중량부를 혼합하여, 상기 곡물이 침지된 물의 수소이온지수를 pH 6.0~7.0으로 맞추는 단계;
    상기 곡물을 1~5시간 동안 침지시키는 단계;
    상기 침지된 곡물을 1~5시간 동안 탈수하는 단계; 및,
    탈수된 곡물을 멸균하는 단계;
    를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  7. 제 1 항에 있어서,
    상기 2공정 후 3공정 전에, 상기 2공정의 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지 100 중량부를 기준으로, 표고버섯 0.1~1 중량부를 접종한 후, 5~10일간 20~40℃에서 표고버섯 균사체를 전배양하여 제조된 표고버섯 균사체 배양물을 제조하고, 상기 3공정에서, 상기 표고버섯 균사체 배양물을 2공정에서 제조된 표고버섯, 꽃송이버섯 및 아가리쿠스버섯 중에서 선택되는 1종 이상의 버섯이 함유된 배지 대신 사용하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사의 복합배양방법.
  8. 제 1 항 내지 제 3 항, 및, 제 7 항 중 어느 한 항에 따른 방법으로 제조된 복합배양균사체.
  9. 제 8 항에 있어서,
    상기 복합배양균사체는 건조된 복합 배양균사체를 기준으로, 베타글루칸 함량이 전체 중량의 30(w/w)% 이상인 것을 특징으로 하는 복합배양균사체.
  10. 제 8 항의 복합배양균사체를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항암용 약학조성물.
  11. 제 8 항의 복합배양균사체를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 암 예방 및 개선용 건강기능식품.
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105794492A (zh) * 2016-03-09 2016-07-27 湖北悟芝堂生物科技有限公司 灵芝的培育方法
KR20200032785A (ko) 2018-09-18 2020-03-27 백승배 검은콩 추출물 및 꽃송이버섯 추출물로 이루어진 암의 예방 또는 치료용 조성물.
KR20200091788A (ko) * 2019-10-24 2020-07-31 허서진 발효된 곡물 분말 및 버섯 배지를 이용하여 균사체 분말을 제조하는 방법
KR20210052639A (ko) 2019-10-29 2021-05-11 주식회사 기운찬 버섯 복합배양 균사체를 함유하는 혈당 조절용 조성물의 제조방법
KR20210120467A (ko) 2020-03-27 2021-10-07 박종례 버섯 복합배양 균사체, 싱아, 바위솔 및 비름의 혼합 추출물을 함유하는 통풍의 예방 또는 치료용 조성물
KR20210123806A (ko) 2020-04-06 2021-10-14 박종례 버섯 복합배양 균사체, 싱아, 바위솔 및 비름의 혼합 추출물을 함유하는 항알레르기성 조성물
KR102402408B1 (ko) * 2021-05-14 2022-05-30 허서진 아가리쿠스 버섯 및 다종버섯균사체 복합배양방법
KR20220116675A (ko) 2021-02-15 2022-08-23 주식회사 기운찬 복합버섯균사체를 함유하는 인지기능 또는 기억력 개선용 조성물
KR20240034975A (ko) 2022-09-08 2024-03-15 주식회사 기운찬 복합버섯균사체를 함유하는 폐렴의 예방 또는 치료용 조성물

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103444436B (zh) * 2013-09-06 2015-02-04 攀枝花市农林科学研究院 废弃芒果枝栽培灵芝和凤尾菇的方法
KR101652035B1 (ko) * 2014-11-12 2016-08-29 주식회사 기운찬 차가버섯, 상황버섯 및 꽃송이버섯의 복합버섯 균사체의 생산방법
KR101719773B1 (ko) * 2014-11-14 2017-03-28 대한민국 동충하초를 함유하는 꽃무지류 유충의 사료 및 이의 제조방법
CN105265171B (zh) * 2015-09-29 2017-10-17 金寨尚臻生物科技有限公司 一种减少桑黄接种杂菌感染的方法
KR20200076934A (ko) 2018-12-20 2020-06-30 이수용 동충하초의 대량 증식 종균 획득 방법과 이를 이용한 대량 배양방법
KR102477517B1 (ko) * 2020-07-15 2022-12-15 이재갑 천마 배지를 이용한 6종 버섯 균사체의 복합 배양 방법
KR102593176B1 (ko) * 2021-06-07 2023-10-23 동의대학교 산학협력단 차가버섯 추출물을 이용한 목이버섯 자실체의 생산 방법
KR102611413B1 (ko) * 2023-02-15 2023-12-06 천병수 동충하초와 상황버섯 교배 방법, 및 이를 통해 제조된 물질

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20060113343A (ko) * 2005-04-28 2006-11-02 박종욱 상황버섯균사체를 이용한 상황느타리버섯의 재배방법
KR20060131273A (ko) * 2005-06-15 2006-12-20 장원철 상황버섯 가공 부산물을 함유하는 버섯 재배용 배지, 그제조방법, 그를 사용하여 재배된 버섯, 및 그 버섯 또는 그버섯의 가공물을 함유한 제품
KR100889930B1 (ko) 2008-08-27 2009-03-24 이태봉 곡물을 이용한 차가버섯 균사체와 상황버섯 균사체의 복식 대량 배양방법, 이에 의해 배양된 차가버섯 균사체와 상황 버섯 균사체를 포함하는 식품 및 그 제조 방법
KR100922311B1 (ko) 2009-06-10 2009-10-21 이태봉 활성화된 당 관련 화합물을 함유하는 물질을 생성하는 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복식 배양 방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20060113343A (ko) * 2005-04-28 2006-11-02 박종욱 상황버섯균사체를 이용한 상황느타리버섯의 재배방법
KR20060131273A (ko) * 2005-06-15 2006-12-20 장원철 상황버섯 가공 부산물을 함유하는 버섯 재배용 배지, 그제조방법, 그를 사용하여 재배된 버섯, 및 그 버섯 또는 그버섯의 가공물을 함유한 제품
KR100889930B1 (ko) 2008-08-27 2009-03-24 이태봉 곡물을 이용한 차가버섯 균사체와 상황버섯 균사체의 복식 대량 배양방법, 이에 의해 배양된 차가버섯 균사체와 상황 버섯 균사체를 포함하는 식품 및 그 제조 방법
KR100922311B1 (ko) 2009-06-10 2009-10-21 이태봉 활성화된 당 관련 화합물을 함유하는 물질을 생성하는 차가버섯, 상황버섯, 영지버섯, 꽃송이버섯 및 동충하초의 복식 배양 방법

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105794492A (zh) * 2016-03-09 2016-07-27 湖北悟芝堂生物科技有限公司 灵芝的培育方法
KR20200032785A (ko) 2018-09-18 2020-03-27 백승배 검은콩 추출물 및 꽃송이버섯 추출물로 이루어진 암의 예방 또는 치료용 조성물.
KR102227348B1 (ko) 2018-09-18 2021-03-15 백승배 검은콩 추출물 및 꽃송이버섯 추출물로 이루어진 암의 예방 또는 치료용 조성물.
KR20200091788A (ko) * 2019-10-24 2020-07-31 허서진 발효된 곡물 분말 및 버섯 배지를 이용하여 균사체 분말을 제조하는 방법
KR102239305B1 (ko) * 2019-10-24 2021-04-13 허서진 발효된 곡물 분말 및 버섯 배지를 이용하여 균사체 분말을 제조하는 방법
KR20210052639A (ko) 2019-10-29 2021-05-11 주식회사 기운찬 버섯 복합배양 균사체를 함유하는 혈당 조절용 조성물의 제조방법
KR20210120467A (ko) 2020-03-27 2021-10-07 박종례 버섯 복합배양 균사체, 싱아, 바위솔 및 비름의 혼합 추출물을 함유하는 통풍의 예방 또는 치료용 조성물
KR20210123806A (ko) 2020-04-06 2021-10-14 박종례 버섯 복합배양 균사체, 싱아, 바위솔 및 비름의 혼합 추출물을 함유하는 항알레르기성 조성물
KR20220116675A (ko) 2021-02-15 2022-08-23 주식회사 기운찬 복합버섯균사체를 함유하는 인지기능 또는 기억력 개선용 조성물
KR20230074451A (ko) 2021-02-15 2023-05-30 주식회사 기운찬 복합버섯균사체를 함유하는 알츠하이머 질환의 개선용 조성물
KR102402408B1 (ko) * 2021-05-14 2022-05-30 허서진 아가리쿠스 버섯 및 다종버섯균사체 복합배양방법
KR20240034975A (ko) 2022-09-08 2024-03-15 주식회사 기운찬 복합버섯균사체를 함유하는 폐렴의 예방 또는 치료용 조성물

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