KR101222673B1

KR101222673B1 - 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101222673B1
Application number: KR1020110073040A
Authority: KR
Inventors: 이상록; 안장균; 차은정; 김혜종
Original assignee: 이상록
Priority date: 2011-07-22
Filing date: 2011-07-22
Publication date: 2013-01-16

Abstract

본 발명은 피부 자극 완화 및 두피 진정 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물 및 카카오 추출물 및 이의 혼합 추출물을 포함함으로써 염증, 피부 자극 및 자극감을 완화시키는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 혼합 추출물은 염색 및 퍼머 등과 같은 화학적 시술시 나타날 수 있는 두피 자극을 완화하고 진정시켜 컨디셔닝 효과도 제공하므로, 특히 모발 화장용 조성물에 유용하게 이용될 수 있다.

Description

한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물{The cosmetic composition for scalp-calming and alleviating skin irritation containing the extract of Eclipta prostrate, Symphytum officinale, Platycodon grandiflorum, and Theobroma cacao}

본 발명은 피부 자극 완화 및 두피 진정 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 한련초 추출물, 및 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물을 포함함으로써 피부 자극 및 염모제 등에 의한 자극에 대한 두피 진정효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.

두피는 표피(epidermis), 진피(dermis), 피하조직(subcutaneous tissue)으로 구성되어 있으며, 가장 바깥조직이 표피이다. 표피는 신체의 민감한 조직을 손상 받지 않도록 보호해주는 기능을 한다. 그러나 외부의 온도, 습도의 변화, 공해물질 등의 여러 가지 물리적, 화학적 외부의 자극과 스트레스, 영향 결핍 등으로 인해 두피의 보습 기능 등을 상실하여 자극을 유발할 수 있으며, 나아가서는 탈모에도 영향을 미칠 수 있다.

모발 컨디셔닝 개선을 위한 제품의 경우, 염색 혹은 퍼머 등과 같이 화학적 시술로 인해 손상된 모발에 손상의 심화를 중단시키면서 우수한 컨디셔닝 효과를 줄 수 있는 제품이 요구되고 있으며, 최근 들어서는 두피에도 안전한 제품에 대한 요구가 점점 증가하고 있다.

일반적으로 모발 컨디셔닝 개선 제품은 양이온성 계면활성제와 고급 지방 알코올, 유분에 의해 이루어진 구조에 의해 적정한 점도와 크림 같은 제형을 유지하며, 샴푸 후 제거된 모발의 유분을 보충하고, 음이온을 띄는 모발 표면에 양이온성 계면활성제가 흡착하여 모발의 손상 및 정전기 발생을 억제하여 젖은 모발 및 마른 모발 모두를 보다 쉽게 관리할 수 있도록 만들어 준다. 상기의 기능을 제공하기 위하여 주로 장쇄의 4급 암모늄화합물과 고급 지방알코올, 탄화수소 오일, 실리콘오일을 함유한다. 상기에서 장쇄의 4급 암모늄 양이온 계면활성제와 고급 지방 알코올, 탄화수소 오일은 모발의 광택, 촉촉함, 부드러움을 제공하여 주며, 실리콘오일은 삼푸 후 피지의 제거로 인한 모발의 뻣뻣한 느낌을 감소시키기 위해 인공적으로 피지와 유사한 느낌을 부여하여 모발에 부드러움과 윤기를 부여하기 위해 사용된다.

통상적으로 양이온 계면활성제가 함유된 제형은 모발의 컨디셔닝 효과를 부여하는 성분으로 자극 유발 가능성이 있기 때문에 두피에 사용을 권장하지 않는다. 또한 이러한 제형은 염색 및 퍼머 등과 같은 화학적 시술 후에 사용하는 모발용 트리트먼트의 주요 성분으로서 화학적으로 손상된 모발에 컨디셔닝감을 부여하여 모발을 부드럽고 매끄럽게 해주는 기능을 가진다. 하지만 화학적 시술 후 민감해진 두피에 양이온 계면활성제와 같은 성분이 함유된 제형이 닿을 경우 자극을 유발할 수 있고, 두피가 따갑거나 부어 오르고 가려울 수 있는 등 자극 현상이 있을 수 있다. 이러한 화학적 시술 후 민감해진 두피를 진정시키고 완화시키는 제형이 아직까지 부재하다.

한편, 길경은 초롱꽃과Campan㎕aceae)의 식물인 도라지(Platycodon grandiflorum A. DC.)의 뿌리로, 길경은 주로 거담, 진해작용, 기침 및 기관지염의 치료제로 사용되어왔으며, NF-kB와 NO assay를 통한 항염증 효과, 항암효과, 통증완화효과, 소화효소분비 억제효과, 콜레스테롤 대사 개선효과가 있는 것으로 알려져 있다.

또한, 한련초(Eclipta prostrate)는 높이 10~70 cm되는 국화과의 한해살이 초본이다. 우리 나라 제주도, 남부지방, 중부지방의 콩밭에 많이 발생하는 식물이다. 예로부터 혈류량 촉진, 진통, 면역, 피부염, 모발 성장 촉진 및 피부가 갈라지는 피부염에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 특히 피부 자극완화에 효과적가 있는 것으로 알려져 있다(KR 10-2009-0091547A).

또한, 컴프리(Symphytum officinale)는 지치과로서 유럽이 원산지이고, 약용 또는 사료용으로 재배한다. 컴프리는 푸른 야채 중에 단백질을 비롯한 비타민, 미네랄이 동물의 간에 비교할 만큼 골고루 풍부하게 들어있는 식물이다. 일반 성분은 다른 채소와 비슷하나 특수성분으로는 유기 게르마늄 및 알란토인 성분이 있어 간질환 환자에게 유익하며, 항암효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 한방에서는 잎과 뿌리를 감부리(甘富利)라는 약재로 쓰는데, 소화 기능을 향상시키며, 위산과다, 위궤양, 빈혈, 종기, 악창, 피부염에 사용한다고 보고되고 있다.

또한, 카카오콩(Theobroma cacao)은 쌍떡잎 식물 아욱목 벽오동 나무과의 교목으로 아메리카 열대 지방이 원산지이다. 카카오에는 다량의 폴리페놀이 함유되어 있다. 특히, 카카오(Cacao bean: CB) 유래 폴리페놀은 주로 배유(cotyledon)의 색소 세포(pigment cell) 안에 저장되어 있다고 알려져 있으며, 카카오 중량의 약 10%의 폴리페놀이 함유되어 있다. 최근 카카오 프로시아니딘의 LDL(low density lipid) 산화 및 리폭시다아제 활성 감소 효과, 혈장의 산화 손상에 대한 초콜릿 소비의 용량 의존성 효과, 유리 라디칼 유도 적혈구 용혈에 미치는 코코아 플라바놀(flavanol) 및 프로시아니딘의 저해효과 등 카카오 유래 폴리페놀류의 항산화 관련 연구가 활발히 수행되고 있다.

이에 본 발명자들은 피부 자극을 완화하고, 특히 두피 진정 효과가 우수한 천연 추출물 및 이의 혼합 조성물을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

KR 10-2010-88881A 초록 KR 10-2009-0091547A 초록

본 발명의 목적은 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 추출물 및 한련초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극 완화 및/또는 두피 진정용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물 및 한련초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극 완화 및/또는 두피 진정용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 구체예는 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물 및 한련초 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 자극 완화 및/또는 두피 진정용 화장료 조성물을 제공한다.

본 명세서에서 사용되는, "피부 자극 완화"란, 피부 자극 물질에 의해 발생하여 피부에 나타나는 가려움, 따끔거림, 화끈거림 등의 자극감과 홍반 및 부종 등의 염증성 자극 반응을 예방, 완화 및 치료하는 것을 의미한다.

본 명세서에서 사용되는, "두피 진정"이란, 염모제와 같은 두피 자극 물질에 의해 발생하는, 가려움, 따끔거리는 자극감 등을 완화시키거나, 자극감을 제거하는 것을 의미한다.

상기 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법, 즉, 통상적인 온도와 압력 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다. 본 발명의 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물 및 한련초 추출물 제조에 사용될 수 있는 추출용매로는 예를 들면, 물, 탄소수 C₁ 내지 C₃의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜 등의 추출용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용 가능하다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물 및 한련초 추출물 건조 중량의 1 내지 15배 정도이며, 5 내지 12배일 수 있으며, 10배일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 추출방법으로는 열 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등을 사용할 수 있으며, 1회 또는 다수 회 반복하여 추출시켜 사용할 수 있다. 또한, 추출온도는 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물 및 한련초 추출물의 유용성분의 유효활성이 제거되지 않을 정도의 온도이면, 특별히 제한되지 않는다.

상기 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물 및 한련초 추출물은 각각 단독으로도 피부 자극 억제 효과 및 염모제 등에 대한 두피 진정 효과를 갖으므로 단독으로 피부 자극 완화 및 두피 진정용 화장료 조성물 이용될 수 있다. 그러나, 상기 추출물을 혼합할 경우 더욱 우수한 피부 자극 완화 효과 및/또는 두피 진정 효과를 갖으므로, 상기 추출물을 혼합하여 이용되는 것이 바람직하다(표 2 내지 5, 및 도 1 내지 5).

상기 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 추출물 및 한련초 추출물은 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유될 수 있으며, 4 ~ 6 : 4 ~ 6의 중량비율로 함유될 수 있다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.

또한, 본 발명의 일 구체예는 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 유효성분으로 포함하는 자극 완화 및/또는 두피 진정용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 함유될 수 있으며, 2 ~ 8 : 2 ~ 8 : 2 ~ 8의 중량비율로 함유되는 것이 바람직하다. 그러나, 함량비율은 제품의 특성에 따라 다양한 중량비로 혼합될 수 있다.

상기 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물의 혼합 추출물의 경우에는 각각의 추출물에 비하여, 각질 세포주에서 레티노익산 및 소듐라우릴술페이트와 같은 자극물질에 대한 자극 완화 효과가 우수하며(표 2, 도 1 및 2), 마우스 실험을 통하여 피부 자극에 대한 완화 효과도 우수함을 확인하였다(표 3 및 도 3). 특히, 염모제에 대한 자극 진정 효과가 우수함을 확인하였다(표 5, 도 4 및 도 5). 특히, 각각의 추출물은 자극 완화제로 알려진 알파 비사볼올에 비하여 효과가 우수함을 확인하였다(표 2, 3 및 5, 도 1 내지 5).

또한, 본 발명의 일 구체예는 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물의 혼합 추출물을 함유하는 자극 완화 및 두피 진정용 화장품을 제공한다. 상기 본 발명의 일 구체예에따른 화장료 조성물은 혼합 추출물을 전체 중량비에서 1 내지 30 중량 %로 함유될 수 있으며, 5 내지 20 중량 %로 함유될 수 있다.

본 발명의 추출물을 포함하는 화장용 조성물은 상기 추출물 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 화장품 제제에 있어서 수용가능한 "담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 정도 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 발명의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 ％ 내지 약 99.99 중량 ％, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량％ 내지 약 99.99 중량 ％로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발명의 화장료 조성물이 제조되는 전술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴, 목 등)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라질 수 있으므로, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.

예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이크림, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 포함하는 두피 및/또는 모발 상태 개선용 조성물은 모발용 조성물로부터 유발될 수 있는 두피의 따가움, 가려움, 염증 등의 자극을 완화하고 진정시켜 주는 효과를 제공한다. 또한, 본 발명의 조성물은 염색 및 퍼머 등과 같은 화학적 시술 시 나타날 수 있는 두피 자극을 완화하고 진정시켜 컨디셔닝 효과도 제공할 수 있다.

도 1은 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물 각각 및 이의 혼합 추출물의 레티노익산에 의한 자극완화효과를 그래프화 한 것이다.
도 2는 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물 각각 및 이의 혼합 추출물의 소듐라우릴술페이트에 의한 자극완화효과를 그래프화 한 것이다.
도 3은 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물 각각 및 이의 혼합 추출물의 컴파운드 48/80에 대한 자극완화효과를 그래프화 한 것이다.
도 4 및 5는 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물 각각 및 이의 혼합 추출물의 염모제에 의한 두피 자극 완화 효과를 그래프화 한 것이다.

이하 본 발명을 다음의 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세히 설명하나, 본 발명이 하기의 실시예나 시험예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 한련초 추출물의 제조

건조 한련초 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 한련초 열수 추출물 64 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 2> 컴프리 추출물의 제조

건조 컴프리 500 g에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 75 ℃에서 24시간 동안 중탕 가열하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 컴프리 열수 추출물 58 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 3> 길경 추출물의 제조

건조된 길경을 분쇄하고, 분쇄된 길경 1 kg에 3차 증류수 5ℓ를 가하고 80 내지 85 ℃에서 3시간 동안 3회 가열하여 추출한 후 400 메쉬 여과포로 여과하고 0.45 ㎛의 필터로 여과하고, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 길경 추출물 126 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다.

< 실시예 4> 카카오 추출물의 제조

탈지 카카오 분말 1 kg에 3차 증류수 5 ℓ를 가하고 90 ℃ 내지 95 ℃에서 3시간 동안 3회 추출하였다. 이를 종이 필터인 Watman #2로 여과하여 고형분을 제거한 후, 이 여과액을 감압증류기(EYELA, JP/N-1000)를 이용하여 농축 후 동결 건조하여 카카오 열수 추출물 118 g을 얻었다. 제조된 추출물을 60Co 감마선(10 kGy/H, 25 kGy)으로 조사 멸균하여 사용하였다. 상기 추출물을 20 ㎎/㎖의 농도로 3차 증류수에 녹인 후 실험에 사용하였다.

< 실시예 5 내지 8> 혼합추출물의 제조

한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물 및 카카오 추출물을 하기 표 1에 제시된 것과 같은 중량 비율로 혼합한 혼합 추출물을 얻었다. 구체적으로 실시예 1 내지 5에서 얻은 각각의 추출물을 20 ㎎/㎖의 농도로 3차 증류수에 녹인 후 각 추출물의 중량비율이 표 1이 되도록 각각의 추출물 수용액을 혼합하여 혼합 추출물을 제조하였다.

혼합 추출물에 있어서의 각 추출물 성분의 중량 비율(%)

실시예	한련초 추출물	컴프리 추출물	길경 추출물	카카오 추출물
5	50	50	0	0
6	50	0	50	0
7	50	0	0	50
8	25	25	25	25

< 시험예 1> 각질 세포주 HaCaT 에서 레티노익산 및 소듐라우릴술페이트 ( Sodium Lauryl S㎕ phate , SLS ) 자극에 의한 프로스타글란딘 E2 억제 효능 및 α- MSH ( Melanocyte stim㎕ating hormone )의 활성 평가

시험 세포인 각질형성세포(세포주명: HaCaT 입수처: GSL-Cell line service, Eppelheim, Germany)를 10 %의 우태아 혈청 (FBS, Gibco, USA)과 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (Gibco, USA)을 함유한 DMEM(D㎕becco's Modified EagleMedium, Lonza, USA) 배지를 이용하여 96 웰 플레이트에 약 2 x 10⁴ 세포수/웰의 밀도로 분주한 후, 36.5 ℃, 5 % CO₂ 조건하에서 24시간 동안 배양하였다.

배양액을 제거한 후, 인산염완충용액(PBS) 200 ㎕로 1회 세척하고, 우태아 혈청이 함유되지 않는 DMEM배지 200 ㎕를 넣어 24시간 배양하였다. 이후 1 % 우태아 혈청이 함유된 DMEM으로 하기 실시예 1 내지 8의 추출물 및 이의 혼합물을 0.1 %농도로 10분간 처리한 다음 100 μM 농도의 레티노익산(Sigma-Aldrich, USA) 또는 1O ppm 농도의 소듐라우릴술페이트(Sigma-Aldrich, USA)로 추가 처리하여 24시간 동안 배양시켰다.

배양액 50 ㎕를 취하여 프로스타글란딘 E₂(PGE2) ELISA 키트(R & D system, USA)를 이용하여 레티노익산 또는 소듐라우릴술페이트에 의한 프로스타글란딘 E2 유리 억제 효과를 측정하였으며, 그 결과는 표 2와 같다.

억제능은 표준물질인 rhPGE₂의 흡광도를 토대로 표준 곡선을 그려 흡광도와 표준물질간의 반응식을 구한 후, 처리 물질의 흡광도를 대입하여 rhPGE₂의 분비량을 얻었다. 이후 아래의 수학식 1에 의해 자극완화율을 평가하였다. 이때 대조군으로는 알파 비사볼올을 5 ppm을 이용하였다.

또한, 상기와 동일한 방법으로 각질형성세포를 배양하고 동일한 방법으로 실시예 1 내지 8의 추출물과 레티노익산 또는 소듐라우릴술페이트를 처리하여 배양한 다음, 배양액 50㎕를 취하여 α-MSH(Melanocyte stim㎕ating hormone)EIA-ELISA 키트 (Phoenix pharmaceutical Inc. USA))를 이용하여 레티노익산 또는 소듐라우릴술페이트에 의한 α-MSH 활성 효과를 측정하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.

억제능은 표준물질인 재조합 α-MSH 의 흡광도를 토대로 표준 곡선을 그려 흡광도와 표준 물질간의 반응식을 구한 후, 처리 물질의 흡광도를 대입하여 α-MSH 의 분비량을 얻었다. 이후 하기 수학식 2에 의해 자극완화율을 평가하였다.

하기 표 2의 결과를 보면, 프로스타글란딘 E₂의 분비에 있어서 상기 혼합추출물을 처리한 경우는 각각의 추출물을 처리한 경우와 비교하여 현저하게 높은 수준으로 프로스타글란딘 E₂의 분비를억제함을 알 수 있다.

또한, α-MSH의 분비활성능에 있어서도 혼합추출물을 처리한 경우는 식물 추출물 각각을 처리한 경우와 비교하여 현저하게 높은 수준으로 α-MSH의 분비를 활성화시킴을 알 수 있다. 이때 대조군으로는 알파 비사볼올을 5 ppm을 이용하였다.

	자극완화율(%)
	레티노익산 (100μM)		소듐라우릴술페이트(1O ppm )
	프로스타글란딘 E ₂	α- MSH	프로스타글란딘 E ₂	α- MSH
실시예 1	52.4	49.7	48.7	49.3
실시예 2	41.2	34.2	34.5	31.3
실시예 3	37.2	36.2	32.4	32.6
실시예 4	35.2	41.2	33.2	34.8
실시예 5	69.4	65.1	67.9	65.4
실시예 6	68.2	54.3	66.3	64.2
실시예 7	58.3	60.2	63.2	64.8
실시예 8	92.4	91.3	87.2	84.5
대조군 ( 비사볼올 )	85.2	78.2	78.3	77.5

< 시험예 2> 피부자극 완화 시험

누드 마우스(BALB/C sic-nu/nu mouse(12-17g,♀))에 0.5 %의 컴파운드 48/80(아토피 유도물질)을 오른쪽 어깨에 주사한 후 1 시간 동안 긁는 횟수를 측정한다. 그 다음 24시간 후에 12마리의 쥐에 정제수를 이용하여 10분의 1로 희석시킨 실시예 1 내지 8의 추출물 및 이의 혼합물을 각각 100 ㎕를 왼쪽 어깨에 주사하고 10분 뒤에 동일한 자리에 0.5 % 컴파운드 48/80을 50 ㎕ 주사하여 한 시간 동안 긁는 횟수를 측정한다. 0.5 %의 컴파운드 48/80만을 주사하였을 때의 긁는 횟수를 100 %로 환산하여 기준공통 횟수로 하고 이에 대하여 시료 및 컴파운드 48/80을 주사한 후 긁은 횟수를 공통기준횟수에 비교하여 나타내었다.

상기 시험을 3번 반복하여 그 평균치를 도식화하여 도 3에 나타내었다. 대조군은 식염수를 처리한 경우이며, 양성 대조군으로는 알파-비사볼올 10 ppm을 이용하였다. 각각 1 % 및 5 %에 따른 결과를 표 3 및 도 3에 나타내었다. 상기의 실험으로부터 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물의 혼합 조성물이 피부자극완화 효과에 효과적임을 알 수 있었다.

	긁음 횟수
	1 %	5 %
실시예 1	83	68
실시예 2	86	76
실시예 3	85	71
실시예 4	66	52
실시예 5	68	51
실시예 6	64	53
실시예 7	65	49
실시예 8	42	32
식염수	112
대조군(10 ppm )	52

< 시험예 3> 염모제 사용 후의 두피 자극 완화 효과

본 발명의 혼합 추출물이 염모제에 의한 자극을 완화시키는지 확인하기 위해서 BALB/c 쥐를 이용한 MEST법을 이용하여 실험하였다. 각 처리군 당 10마리로 하였다. 쥐의 복부 부위의 털을 제거하고, 2.5 % 파라페닐렌디아민(Paraphenylenediamine: PPD)을 5일간 처리한 후, 1주일간 휴지기를 갖는다. 염모제는 하기 표 4의 조성에 따라 제1성분 및 제2성분을 제조하였고, 사용하기 직전에 혼합하였다.

	성분	함량(중량 %)
제1성분	정제수	잔량
	소듐설파이트	0.5
	아스보킥애씨드	0.5
	폴리옥시에틸렌우릴에텔	4.0
	폴리옥시에틸렌올레일에텔	4.0
	세토스테아릴알코올	8.0
	p-페닐렌디아민	0.5
	레조시놀	0.5
	모노에탄올아민	0.1
	암모니아	0.1
제2성분	정제수	잔량
	과산화수소(30%)	17.0
	인산	0.2

혼합된 염모제를 쥐의 귀에 도포하고 30분 후에 닦아내었다. 다시 1주일의 휴지기를 가진 다음, 정제수를 이용하여 10분의 1로 희석시킨 상기 실시예 1 내지 8의 조성물을 1시간 간격으로 2회 적용하였다. 대조군으로는 식염수를 도포하였으며, 양성 대조군으로는 알파-비사볼올(10 ppm)을 이용하였다. 염모제를 다시 도포하고 24시간 후에 상기 실시예 1 내지 8 및 식염수 및 알파-비사볼올 각각을 각 처리군에 1시간 간격으로 2회 적용하였다. 24시간 후 귀의 무게를 측정하고, H&E 염색법에 의해 병리 조직한 귀의 무게를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.

처리 조성물	귀 무게( mg )	귀 두께(㎛)
식염수	15.34±0.524	351.34±23.78
대조군(10 ppm )	12.51±0.457	290.24±24.65
실시예 1	14.12±0.624	320.35±21.26
실시예 2	14.35±0.458	324.43±23.64
실시예 3	14.68±0.675	328.12±27.18
실시예 4	14.54±0.487	305.74±23.78
실시예 5	12.97±0.579	309.28±26.54
실시예 6	13.31±0.758	312.12±27.32
실시예 7	13.28±0.675	311.07±26.22
실시예 8	11.24±0.423	273.17±24.71

상기 표 5에서 알 수 있듯이, 본 발명에 의한 실시예 1 내지 8의 처리군은 식염수 및 알파-비사볼올로 처리한 경우와 비교해서 귀무게 및 귀 두께가 유의하게 감소하였다. 이 결과로부터, 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물 및 카카오 추출물이 염모제에 의한 두피 자극을 완화시켜 염증을 줄이는 효과가 우수함을 알 수 있었다.

< 실험예 4> 피부 안전성에 대한 평가

본 발명 조성물의 피부 안전성을 확인하기 위해 성인 여성 20명 및 남성 20명을 대상으로 실시예 5 내지 8의 추출물을 도포한 첩포 시험을 진행하여 본 발명의 조성물에 대한 피부 안전성을 평가하였다.

측정 방법은 첩포를 부착한 뒤 24시간 경과 후 첩포를 제거, 30분 후에 첫 판독을 시행하였고 96시간이 경과한 후에 2차 판독을 시행하였다. 시료의 피부 자극의 강도를 알아보기 위해 피부의 양성반응의 정도에 따라 가중치를 부여하여 피부 평균 반응도를 구하여 시료의 피부 자극을 육안 판정하였다. 그 결과는 하기 [표 6]에 나타내었다.

시험물질	평균 반응도	판정 등급
실시예 5	0.00	무자극
실시예 6	0.00	무자극
실시예 7	0.00	무자극
실시예 8	0.00	무자극

상기 표 6에서 보는 바와 같이 실시예 5 내지 8 추출물이 피부에 자극을 주지 않는 것을 알 수 있다. 따라서, 본 발명의 화장용 조성물은 피부에 대한 안전성이 우수한 것으로 판정할 수 있다.

< 제제예 1> 유연 화장수

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 영양 화장수의 제제예는 다음 표 7의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	4.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	0.4
글리신	3.5
디포타슘글리시리제이트	0.1
1,3-부틸렌 글리콜	3.0
소듐히아루로네이트	0.1
에탄올	5.0
항산화제	0.1
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 2> 영양 화장수

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 영양 화장수의 제제예는 다음 표 8의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	4.0
글리세린	7.0
소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트	2.0
미네랄 오일	4.0
트리옥타노인	1.0
스테아릭에씨드	1.0
글리세릴 스테아레이트	0.5
소르비탄모노스테아레이트	1.0
디메치콘	0.5
항산화제	0.2
트리에탄올아민	0.1
카보머	0.2
EDTA	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 3> 영양 에센스

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 영양 에센스의 제제예는 다음 표 9의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	7.0
글리세린	5.0
1,3-부틸렌 글리콜	2.0
폴리에틸렌 글리콜	2.0
카보머	1.0
소듐하이루로네이트	0.1
글리신	3.0
폴리아크릴아마이드	2.0
히드록시에칠셀룰로우즈	0.2
에탄올	3.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	1.0
항산화제	0.3
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 4> 영양 크림

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 영양 크림의 제제예는 다음 표 10의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	10.0
1,3-부틸렌 글리콜	3.0
글리세린	3.0
하이드로제네이티드 레시친	1.0
옥틸도데카놀	3.0
트리옥타노인	2.0
스테아릭에씨드	1.5
세토스테아릴알콜	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
소르비탄세스퀴올레이트	2.0
디메치콘	3.0
항산화제	0.3
산탄검	0.2
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 5> 팩

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 팩의 제제예는 다음 표 11의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	8.0
글리세린	7.0
1,3-부틸렌 글리콜	3.0
스쿠알렌	3.0
디메치콘	3.0
소듐하이루로네이트	0.1
글리신	2.0
폴리아크릴아마이드	5.0
항산화제	0.3
트리에탄올아민	0.1
EDTA	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 6> 헤어 로션

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 헤어 료션의 제제예는 다음 표 12의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	8.0
세토스테아릴알코올	2.0
EDTA 2Na	0.2
세틸트리메칠암모늄클로라이드	1.5
히드록시에틸셀룰로오즈	0.5
미네랄오일	5.0
방부제	0.1
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 7> 모발 영양화장수

상기 실시예 8에 따른 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 모발 영양화장수의 제제예는 다음 표 13의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	8.0
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	0.7
미네랄 오일	5.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.2
스테아릴트리메틸암모늄클로라이드	1.0
방부제	0.2
향료	0.05
정제수	잔량

< 제제예 8> 헤어린스 및 트리트먼트

본 발명에 따른, 한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물을 함유하는 헤어린스 및 트리트먼트의 제제예는 다음 표 14의 조성과 같이 제조하였다.

성분	함량(중량%)
한련초, 컴프리, 길경 및 카카오 혼합추출물	8.0
프로필렌글라이콜	0.5
스테아릴트리메틸암모늄클로라이드	2.0
세틸트리메칠암모늄클로라이드	2.0
세틸알코올	2.5
스테아릴알코올	2.5
미네랄오일	0.5
사이트릭애씨드	0.2
폴리디메칠실록산	1.0
방부제	0.02
색소	0.02
향료	0.05
정제수	잔량

Claims

컴프리 추출물, 길경 추출물 및 카카오 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물 및 한련초 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 컴프리 추출물, 길경 추출물, 카카오 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물 및 한련초 추출물을 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 포함하는 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 모두 포함하는 포함하는 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물.
제3항에 있어서, 상기 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물, 및 카카오 추출물을 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10 : 1 ~ 10의 중량비율로 포함하는 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 한련초 추출물, 컴프리 추출물, 길경 추출물 또는 카카오 추출물은 각각 독립적으로 물, C₁ 내지 C₃의 알코올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출된 것인 자극 완화 또는 두피 진정용 화장료 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 크림, 유연화장수, 수렴화장수, 밀크 로션, 파운데이션, 비누 및 세안폼으로 구성된 군으로부터 선택된 제형으로 제제화된 것인 자극 완화 및 두피 진정용 화장료 조성물.