KR101187683B1 - 천연 추출물을 함유하는 항진균 조성물, 이를 이용한 백선의 예방 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

천연 추출물을 함유하는 항진균 조성물, 이를 이용한 백선의 예방 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법 Download PDF

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Abstract

천연 추출물을 함유하는 항진균 조성물, 이를 이용한 족부백선의 예방 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 상세하게는 청미래덩굴, 황금, 사매, 백지, 양아욱 추출물을 함유한 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 백선 발생의 원인이 되는 피부 사상균에 항균효과를 나타내는 천연 조성물로서 이를 포함하는 약제, 화장료 또는 세정제로 적용 가능한 족부 백선의 예방 또는 치료용 조성물, 살균소독용 조성물 및 주방세제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 청미래덩굴, 황금, 사매, 백지, 양아욱 성분의 생약추출물은 자연으로부터 추출된 친환경 생약추출물로서 인체의 적용에 있어서 부작용 및 독성이 없어 부담없이 적용가능하다. 한편 항진균의 우수성을 뛰어나며, 특히 족부백선(무좀) 원인균인 트리코파이톤 멘타그로파이트 (trichophyton mentagrophytes) 및 트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum)에 대하여 우수한 항진균 효과를 나타내어 족부백선(무좀)의 예방 및 치료용으로 사용되기에 적합하다. 또한 여러 제품으로 제조될 수 있는 제형 우수성이 뛰어나 환자의 취향과 편리성에 따른 제품화가 가능하다.

Description

천연 추출물을 함유하는 항진균 조성물, 이를 이용한 백선의 예방 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법{Antifungal composition comprising herb extracts, Anti-dermatophytosis by using thereof and, method of manufacturing thereof}
본 발명은 항진균 조성물, 이를 이용한 족부 백선의 예방 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 백선 발생의 원인이 되는 피부 사상균에 항균효과를 나타내는 천연 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것이다. 한편, 상기 천연추출물을 포함하여 제조되는 약제, 화장료 또는 세정제에 관한 것이다.
백선(Dermatophytosis)은 백선균, 소포자균, 표피균 등의 피부사상균에 의한 표재성 감염에 의한 피부질환의 총칭이다. 피부사상균은 표피의 각질층, 모발, 손톱 및 발톱 등 각질에 기생하여 각질을 영양분으로 하여 생존하는 진균으로 이들 각질에 감염을 일으켜 병변이 발생한다. Trichophyton (T.), Microsporum (M.) Epidermophyton (E.) 세속에 속하는 피부사상균은 43균종 가운데 절반 정도가 사람에게 감염을 일으킬 수 있다. 그 절반에는 M. gypseum이 대표적인 토양친화성 피부사상균과 T. mentagrophytes var . mentagrophytesM. canis가 대표적인 동물친화성 피부사상균 그리고 T. rubrum , T. tonsurans , T. mentagrophytes var.interdigitale E. floccosum이 대표적인 인체 친화성 피부사상균이 포함된다.
백선의 발생 부위와 병변의 특징은 전염된 피부사상균의 종류에 따라 결정된다. 또한 증상 발현에는 발생부위의 해부학적 특성이 관여한다. 동물로부터 전염된 경우에는 T. mentagrophytes var . mentagrophytesM. canis가 가장 많은 원인으로 두피(두부 백선), 얼굴(안면 백선), 가슴과 팔다리(체부 백선) 등 노출 부위에 주로 발생하며 상대적으로 가려움증이 심하다. 다른 사람으로부터 전염된 경우에는 T. rubrum이 가장 많은 원인으로 주로 발(족부 백선)에서 병변이 시작하여 손(수부 백선), 사타구니(고부 백선), 손톱과 발톱(조갑 백선) 등 다른 부위로 퍼지는데 증상이 심하지 않아 만성으로 진행하는 경향이 있다. 발생 부위에 따라 두부 백선, 체부 백선, 완선(고부 백선), 수발 백선, 안면 백선, 수부 백선, 족부 백선,조갑 백선 등으로 분류한다. 해당 부위 피부, 모발, 손톱및 발톱 각질의 특성과 피부의 해부학적 위치에 따른 각질층의 두께, 생리학적 특성에 따라 임상적 특징이 다르고 이로 인하여 치료 방법과 기간 등에 차이가 있게 된다.
피부사상균의 감염 중 가장 많은 것은 족부 백선(무좀)으로 전체 백선의 33~40%를 차지하며 20대에서 40대 사이에 가장 많고 소아에서는 드물게 발생한다. 1950년대에는 상대적으로 발생빈도가 낮았으나 생활양식이 바뀌면서 항상 구두와 양말을 신고 생활하는 시간이 많아지면서 이로 인해 발의 습도가 유지되는 시간이 길어지므로 감염률이 높아지고 있다. 주요 감염 경로는 목욕탕, 수영장 등 사람이 많이 모이는 곳에서 피부사상균에 감염된 환자에게서 떨어져 나온 인설을 통해 다른 사람의 발로 전염되는 것이며, 한번 감염된 사람은 다시 자신의 가족에게 옮기는 경로를 거치게된다. 백선의 유병률은 계층과 인구군에 따라 다양하게 보고되고 있으며, 족부백선의 경우 36.5%로 추정되고 있다.[문헌1] Moon SK, Shin YM, Park SH. Prevalence of tinea pedis and onychomycosis in the aged. Kor J Med Mycol 2006; 11: 132-140.
또한, 족부백선의 경우 조갑백선이나 완선과 중복감염되어 나타나는 형태가 많은 것으로 보고된 바 있다.[문헌2]Lee SK, Choi JS, Kim KH. A Clinical and mycological study of tinea pedis. Kor J Dermatol 1995; 33: 1029-1037.
백선의 치료는 국소용 항진균제 사용이 기본이 된다. 하지만 병변 부위에 급성 염증이나 2차 감염이 있으면 습포 등 국소 치료를 하고 항생제와 부신피질 호르몬제를 사용하여 치료 후 항진균제를 사용한다. 국소용 항진균제 치료로 호전되지 않으면 경구용 항진균제를 사용하게 되는 데, 병변이 광범위하거나 두부 백선과 조갑백선의 경우는 처음부터 경구용 항진균제를 사용한다.
항진균제는 크게 polyene계, azole계, allylamine계 약물 등으로 나눌 수 있다. Polyene계 약물에는 nyststin, amphotericinB가 있다. Azole계 약물에는 ketoconazole, miconazole과 같은 imidazole계 약물과 itraconazole, fluconazole과 같은triazole계 약물이 있다. 이러한 방법들은 족부백선(무좀)의 예방과 치료에 있어 접촉성 피부염이나 피부조직 세포조직의 자체손상 등을 가져와 여러가지 부작용이 나타날수 있다.
한편, 청미래덩굴 추출물 함유한 기술 중 천연물을 이용한 항여드름 화장료(대한민국 특허등록: 10-0593511호), 아토피 피부염 개선능을 갖는 한방 조성물 및 그 제조방법 (대한민국 특허등록: 10-0813781)이 있으나 이는 백선균을 포함하지 않았으며 종래에는 이를 이용하여 백선에 적용되는 예는 없었다.
본 발명은 상기와 같은 백선치료용으로서 먹는 약의 경우 간독성이나 소화장애를 가져올 수 있고, 바르는 연고의 경우 피부 부작용으로 인해 접촉성 피부염이 발생하는 종래기술의 문제점을 해결하고, 인체친화적인 자연추출물을 이용하여 항진균활성이 매우 우수하여 족부백선 환자의 병변을 경감시키고 지속적으로 발생하는 요인을 예방함으로서 증상의 예방, 치료에 우수한 조성물을 제공한다.
더불어 백선치료를 위해 그 효과의 우수성을 제품화하는 과정 또는 본 발명의 조성물을 포함하는 여러가지의 제형을 갖는 화장품, 약품, 세정제 등에 적용할 때, 그 제형 가공의 편리성과 적용시의 효과 저하성이 전혀 없어 다양한 형태의 제형제조 및 이에 맞게 적용 사용되도록 제품화하여 족부백선의 환자가 편리하게 여러가지 제형을 사용가능 할 수 있는 조성물을 제공함에 있다.
상기와 같은 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 부작용 및 독성이 적은 천연추출물에서 유도되는 천연추출 항균제 조성물을 제공한다. 더욱 상세하게는, 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱의 생약추출물의 혼합물인 천연추출 항진균 조성물을 제공한다.
상기 생약추출물의 혼합물은 상기 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱 중 어느 하나에 대한 추출물을 혼합한 것 또는 상기 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매 및 양아욱을 일괄하여 추출한 추출물로서의 혼합물일 수 있다.
즉, 상기 생약재로서의 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱 각각에 대한 추출물을 혼합할 수 있고, 상기 생약재인 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱을 일괄하여 추출한 추출한 혼합물일 수 있는데, 각각의 추출물을 혼합한 경우에는 각각의 추출물의 각 성분이 제조되는 과정에서 보다 순수한 추출물일 수 있으며, 한편, 일괄하여 추출하는 경우에는 각 성분의 일괄 추출시에 여러성분이 함께 추출되는 과정에서 미세한 효과의 차이가 있을 수 있다.
한편, 상기 생약추출물의 혼합물은 청미래덩굴추출물: 황금추출물: 백지추출물: 사매추출물: 양아욱추출물 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비를 갖는 것이 바람직하다.
또한, 상기 생약추출물의 혼합물은 청미래덩굴: 황금: 백지: 사매: 양아욱 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비를 갖고 일괄하여 추출하는 것이 바람직하다.
이 때, 생약의 각 성분비는 전체적인 균형적인 비율로서 유사한 범위로 사용되는 것이 바람직하며, 이 수치의 범위 내에서 항진균의 효과 및 추출시의 성분 함량비에서도 우수한 효과를 가질 수 있다.
또한, 상기 천연물로부터 성분을 추출할 때, 정제수, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 중 어느 하나 또는 이들의 2이상의 혼합물이 추출용매로 사용되어 상기 생약추출물의 혼합물이 제조될 수 있다. 이 때, 상기 생약추출 혼합물은 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱 중 어느 하나를 각각 추출한 후에 혼합할 수 있으며, 동시에 추출용매를 사용하여 추출할 수 있음은 앞서 설명한 바와 같다.
그리고, 상기 천연추출 항균제 조성물은 백선의 예방 또는 치료를 위한 세정제용, 백선의 예방 또는 치료의 약제용, 백선의 예방 또는 치료를 위한 화장료용 중 어느 하나로 사용되는 것을 특징으로 하는 천연추출 항균제 조성물일 수 있다.
이 때, 상기 백선은 족부백선인 것으로서, 족부백선의 원인균이 트리코파이톤 멘타그로파이트(trichophyton mentagrophytes) 및 트리트리코파이톤 루브럼(Trichophyton rubrum)인 것일 수 있다.
한편, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 계면활성제 0.1 ~ 0.2 중량%; 알카리금속벤조에이트 0.01 ~ 0.02중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 스프레이형 족부백선의 예방 또는 치료용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
그리고, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 디메치콘코폴리올 5 ~ 15 중량%; 사이클로메치콘 5 ~ 15 중량%; 우레아 10 ~ 30 중량%; 글리세린 10 ~ 30 중량%; 트리에탄올아민 0.01 ~ 0.03 중량%; 방부제 0.01~ 2중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 젤형의 족부백선의 예방 또는 치료용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
이 때, 상기 젤형은 풋크림, 스킨케어, 세정제, 비누일 수 있으며, 젤형의 제형으로서의 화장료 조성물의 일체의 형태로 적용될 수 있다.
또한, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 소듐라우릴설페이트 1 ~ 3 중량%; 우레아 0.5 ~ 1.5 중량%; L-멘톨 0.2 ~ 0.7 중량%; 폴리옥시에칠렌노닐페닐에텔 0.6 ~ 1 중량%; 에탄올 10 ~ 20 중량%; EDTA 0.02 ~ 0.08 중량%; 방부제 0.01-2중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 액상형의 족부백선의 예방 또는 치료용 조성물을 제공할 수 있다.
이 때, 상기 액상형은 , 스킨케어, 세정제, 비누일 수 있으며, 액상형의 제형으로서의 화장료 조성물의 일체의 형태로 적용될 수 있다.
그리고, 본 발명은 백선의 예방 또는 치료를 위한 세정제용, 백선의 예방 또는 치료의 약제용, 백선의 예방 또는 치료를 위한 화장료용 중 어느 하나로 사용됨이 바람직하다.
한편, 본 발명은 S1) 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계; S2) 상기 생약재 각 성분 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용액에 침지하여, 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계; S3) 수득한 추출물을 청미래덩굴추출물: 황금추출물: 백지추출물: 사매추출물: 양아욱추출물 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비로 혼합하는 혼합단계; S4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 감압 여과하고, 농축하는 농축단계;를 포함하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법일 수 있다.
또한, 본 발명은, S1) 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계; S2) 상기 생약재 각 중량비에 대해 청미래덩굴: 황금: 백지: 사매: 양아욱 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비로 혼합하는 혼합단계; S3) 상기 생약재의 혼합물 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용액에 침지하여, 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계; S4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 감압 여과하고, 농축하는 농축단계;를 포함하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법일 수 있다.
이 때, 상기 S2) 단계 또는 S3)단계에서의 환류냉각 시간은 바람직하게는 2 ~ 12 시간이 바람직하며, 4 ~ 8 시간인 것이 더욱 바람직하고, 상기 알코올류는 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 중 어느 하나 또는 이들의 2이상의 혼합물인 것이 바람직하다.
한편, 본 발명은, 상기 S4) 의 농축단계 후, -20℃ 부터 단계적으로 30℃ 까지 48 시간 동안 동결건조하여 건조분말을 수득하는 분말화단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법일 수 있다.
더불어, 본 발명은 천연추출 항균제 조성물로서 항진균을 위한 약제학적 조성물, 항진균 기능을 포함하는 화장료 조성물, 항진균 작용을 하는 피부 세정제, 항진균 작용을 하는 소독제용으로 사용될 수 있으며, 상기 천연추출 항균제 조성물을 포함하는 약제학적 약품, 화장품, 세정제, 소독제를 제공할 수 있다.
본 발명은, 종래의 기술과 대비하여, 종래의 먹는 무좀약의 경우 간독성이나 소화장애를 가져올수 있고 바르는 연고의 경우에는 피부자극으로 인하여 접촉성 피부염이 발생하는 경우가 있으나, 본 발명의 청미래덩굴, 황금, 사매, 백지, 양아욱 성분들의 생약추출물은 자연으로부터 추출된 친환경 생약추출물로서 인체의 적용에 있어서 부작용 특히 피부의 점막에 대한 자극이나 부작용 및 독성이 없어 위험부담 없이 적용가능하다.
더욱이, 본 발명은 항균진균활성이 매우 우수하여 족부백선환자의 병변을 경감시키고 지속적으로 발생하는 요인을 예방함으로서 증상의 예방, 치료에 우수할 뿐더러, 그 효과의 우수성을 제품화하는 과정 또는 본 발명의 조성물을 포함하는 여러가지의 제형을 갖는 화장품, 약품, 세정제 등에 적용할 때, 그 제형 가공의 편리성과 적용시의 효과 저하성이 전혀 없어 다양한 형태의 제형제조 및 이에 맞게 적용 사용되도록 제품화하여 족부백선의 환자가 편리하게 여러가지 제형을 사용가능할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 조성물에 의한 트리코파이톤 멘타그로파이트(Trichophyton mentagrophytes)에 대한 항균활성을 나타내는 배양사진이다.
도 2는 본 발명의 조성물에 의한 트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum)에 대한 항균활성을 나타내는 사진이다.
도 3은 본발명의 조성물에 의한 트리코파이톤 멘타그로파이트(Trichophyton mentagrophytes)에 대한 MTT assay를 이용한 항진균 측정 사진이다.
도 4는 본발명의 조성물에 의한 트리코파이톤 트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum)에 대한 MTT assay를 이용한 항진균 측정 사진이다.
도 5는 본발명의 조성물에 의한 세포독성 측정결과를 나타낸 그래프를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명의 기술분야에 속한 통상의 지식을 가진자(이하 당업자라 한다.)가 용이하게 실시 가능하도록 실시예를 포함하여 상세히 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용을 상술(詳述)한다.
본 발명은 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱으로 구성되는 생약추출물을 함유하는 천연추출 항진균 조성물을 제공하며, 그 하나의 실시예로서 화장료로서의 족부 백선의 예방 및 개선효과가 있는 생약 조성물을 제공한다.
< 천연추출 항진균 조성물의 제조방법 >
본 발명인 천연추출 항진균 조성물을 제조하는 방법은 상기 조성 생약 성분인 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱의 원재료를 혼합하여 정제수 또는 에탄올과 정제수를 혼합한 용액으로 한번에 추출한 수 있으며, 각 약제별로 정제수와 에탄올 또는 정제수로 추출한 후 혼합하여 얻을 수 있다. 이 때, 상기 에탄올은 일 실시예로 볼 수 있으며, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 중 어느 하나 또는 이들의 2이상의 혼합물이 사용될 수 있다.
이 때, 상기의 추출물은 액상을 농축을 하거나 또는 건조하여 건조분말의 형태를 가질 수 있다.
본 발명에 있어서, 본 생약 구성은 기존의 청미래덩굴 추출물을 함유한 기술과 비교하여 새로운 조성물로서, 실제를 갖는 인체에 안전한 화장료를 추구하였다
본 발명의 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱으로 이루어진 군으로부터 선택된 생약을 각각 세척 및 건조한 후 각 생약의 중량 약 8 내지 10배 분량의 정제수를 포함한 에탄올 30% 용매로 약 1시간~24시간, 바람직하게는 4시간~8시간 동안 환류냉각 추출하여 감압 여과 및 농축하여 본 발명의 청미래덩굴,황금, 백지, 사매, 양아욱 추출물을 수득할 수 있다.
이때, 추출에 있어서 생약재를 혼합하여 일시에 추출할 수 있으며, 이 때의 각 생약재의 중량비는 청미래덩굴 1.0 내지 3.0: 황금 1.0 내지 3.0 :백지 1.0 내지 3.0 : 사매 1.0 내지 3.0 : 양아욱 1.0 내지 3.0 중량비(w/w)로 구성하여 추출용액을 사용하여 추출하여 항진균 조성물의 제조가 가능하다.
한편, 추출에 있어서, 각 생약재를 각각 추출하는 경우 각 추출액의 성분비가 청미래덩굴추출물 1.0 내지 3.0 : 황금추출물 1.0 내지 3.0 : 백지추출물 1.0 내지 3.0 : 사매추출물 1.0 내지 3.0 : 양아욱추출물 1.0 내지 3.0 중량비(w/w)로 구성하여 혼합에 의해 항진균 조성물의 제조가 가능하다.
상기 추출물에 대해서는 건조단계를 거쳐 농축하거나, 분말로 제조하여 사용할 수도 있다.
< 천연추출 항진균 조성물을 이용한 족부백선의 예방 또는 치료용 화장료 조성물의 제조방법 >
본 발명은 항진균 효과를 효과적으로 유지하는 범위 내에서 상기 생약들로부터 적절하게 그 구성 생약을 첨가하거나 혹은 삭제하거나, 그 배합비를 적절하게 가감할 수 있으며, 본 발명의 목적에 적합하게 사용 될 수 있는 것들을 포함할 수 있다.
상기 천연추출 항진균 조성물의 제조방법에 의해 얻은 천연추출 항진균 조성물을 포함하여, 족부백선의 예방 또는 치료용으로 사용되기 위한 약제학적 약품 또는 화장품 등의 제조에 있어서 상기 천연추출 항진균 조성물은 약제학적 약품 또는 화장품의 제조에 있어서, 1중량% 내지 20중량% 포함되는 것이 바람직하다. 그 함량이 1중량% 미만일 경우에는 실질적인 항진균 효과를 기대하기 어렵다는 문제점이 있으며, 상기 20중량%를 초과하는 경우 제형에 맞는 제품의 제조에 어려움이 있다는 점에서 수치한정의 의의가 있다.
또한 본 발명의 화장료 조성물은 상기한 한방 식물추출물 외에도 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 피부 외용제에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면 수용성 성분, 분말성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점도조절제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형은 임의로 선택할 수 있으되, 종래의 화장료제형인 크림, 스킨, 에어로졸 같은 여러 가지 형태로 제조할 수 있다.
그리고, 본 발명의 화장료 조성물은 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 및 향료로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.
또한 본 발명은 상기 생약 조성물에 기호성 식품 성분을 첨가하여 통상적으로 알려진 방법에 의하여 각종 건강기능식품을 제조할 수 있고, 또한 일반적인 제형으로 제형화 될 수 있으며, 제형에 따라 당업자가 적의하게 선택하여 배합 할 수 있다.
천연추출 항진균 조성물의 제조
청미래덩굴, 황금, 사매, 백지, 양아욱 각각 100g을 세척한 후 전체 생약재 중량의 10배수의 30% 에탄올 추출용액에서 5시간 환류 냉각한 후, 여과지 (11㎛ paper fillter)로 여과하여 추출한 액을 감압 농축하여 본 발명의 천연추출 항진균 조성물을 얻었다.
< 시험예 1> : 디스크 확산법( Disc - diffusion method )에 의한 항균활성 측정>
상기 실시예1 에서 제조한 천연추출 항진균 조성물의 항균활성을 확인하기 위하여 디스크 확산법을 이용하였다.
전 배양된 트리코파이톤 멘타그로파이트(trichophyton mentagrophytes) 및 트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum)를 디스크 확산법 측정용 평판배지(Sabouraud Dextrose Agar . Difco.USA)에 100 ㎕씩 분주하여 도말하였다. 멸균된 페이퍼 디스크를 도말된 평판배지에 붙인 후, 추출물을 멸균된 페이퍼 디스크에 5mg/disc의 농도로 시료를 점적한 후 배지 위에 올려놓았다. 이에 대한 대조군으로 항진균제인 Itraconazol 을 페이퍼디스크에 50㎍/disk의 농도로 시료를 점적한후 배지위에 올려놓았다. 이 평판배지를 각 균주에 따른 적정온도(28℃)에서 48 시간동안 배양한 후 생육저지환(Clean Zone)의 크기를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
생육저지환 크기 ( mm )
균주 혼합추출물 Itraconazol
트리코파이톤 멘타그로파이트
(trichophyton mentagrophytes)
22 24
트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum) 24 24
< 시험예 2 : MTT 방법에 의한 항진균 활성측정>
MTT assay 는 다음과 같은 방법에 의해 실시하였다. 트리코파이톤 멘타그로파이트(trichophyton mentagrophytes) 및 트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum)의 세포수를 2×105/ml이 되도록 Sabouraud Dextrose 배지로 희석한 후 96-well serial dilution 방법에 의해 농도별 처리를 하여 첨가한다음 28℃에서 24 시간 배양하였다. 배양후 PBS 용액을 10㎕첨가하여 중화시킨 후, MTT(Sigma,U.S.A)용액 10㎕를 첨가한 다음 37℃에서 12시간 발색시킨 다음 microplate reader (BIO-RAD)를 사용하여 흡광도 570nm에서 그 발색정도를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 이를 통하여 본 발명의 혼합 추출물에대한 생육 최소 저해농도 (MIC)값을 구할수 있었다.
균주 MIC(mg/ml)valus
트리코파이톤 멘타그로파이트
(trichophyton mentagrophytes)
0.5
트리코파이톤 루브럼(trichophyton rubrum) 0.1
< 시험예 3 : 혼합추출물에 대한 세포 독성 실험>
섬유아세포(Human Diploid Fibroblast)를 세포를 96wellplate에 5×105 cells/㎕의 농도로 희석하여 100㎕ 씩 접종한 후 24시간 배양하였다.배양 후 배지를 모두 제거하고,무혈청 배지를 넣은 well에 각각 90㎕씩 넣었다.최종 농도가 각각 0,20,50,100㎍/㎕가 되도록 희석한 시료를 10㎕씩 각 well에 처리한다. 24시간 배양 후PhosphateBufferedSaline(PBS)를 이용하여 5㎎/㎖의 농도로 녹여져 있는 MTT시약을 20㎕씩 넣어주고 4시간 배양 하였다. MTT 시약과 시료가 포함된 배지를 모두 제거하고 각 well에 100㎕ acid isopropanol(0.04N HCliniso-propanol)을 첨가하여 30분간 교반하여 주고,ELISA reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
천연추출물 각각의 농도에서 섬유아세포의 cell viability를 측정한 결과 각각 0,20,50,100 ㎍/㎖의 농도에서 cellviability가 각각 101.2%, 99.6%,99.7%,99.0%로 나타나 본발명의 추출물은은 섬유아세포에 대한 세포독성이 없음을 확인할 수 있었다.
SMF-05 (㎍/㎖) 0 20 50 100
CellViability
(% of control)
101.2 99.6 99.7 99
백선 예방 또는 치료용 조성물 및 에어로졸 스프레이 제형제조
본 발명의 천연추출 항진균 조성물을 포함하여 백선의 예방 또는 치료용 에어로졸 스프레이를 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 에어로졸 스프레이를 제조하였다.
<배합성분 함량(중량%)>
천연추출 항진균 조성물 20%
계면활성제 0.15%
알칼리금속벤조에이트 0.015%
정제수 잔량
합 계 100
백선 예방 또는 치료용 조성물 및 젤형의 제형 중 풋크림의 제조
본 발명의 천연추출 항진균 조성물을 포함하여 백선의 치료 및 예방용 풋크림을 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 풋크림을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
천연추출 항진균 조성물 20%
디메치콘코폴리올 10.0%
사이클로메치콘 10.0%
우레아 20.0%
글리세린 20.0%
트리에탄올아민 0.02%
방부제 1.0%
정제수 잔량
예방 또는 치료용 조성물 및 젤형의 제형 중 풋스킨의 제조
본 발명의 천연추출 항진균 조성물을 포함하여 백선의 치료 및 예방용 풋스킨을 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 풋크림을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
천연추출 항진균 조성물 10%
소듐라우릴설페이트 2.0%
우레아 1.0%
L-멘톨 0.5%
폴리옥시에칠렌노닐페닐에텔 0.8%
에탄올 15%
EDTA 0.05%
방부제 1 %
정제수 잔량
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 균등범위 내로서 이용가능한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (18)

  1. 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱의 생약추출물의 혼합물인 천연추출 항진균 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 생약추출물의 혼합물은 상기 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 및 양아욱 중 어느 하나에 대한 추출물을 혼합한 것 또는 상기 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매 및 양아욱을 일괄하여 추출한 추출물로서의 혼합물인 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 생약추출물의 혼합물은 청미래덩굴추출물: 황금추출물: 백지추출물: 사매추출물: 양아욱추출물 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비를 갖는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 생약추출물의 혼합물은 청미래덩굴: 황금: 백지: 사매: 양아욱 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비를 갖고 일괄하여 추출하는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 생약추출물의 혼합물은 정제수, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 중 어느 하나 또는 이들의 2이상의 혼합물이 추출용매로 사용되어지는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  6. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 천연추출 항진균 조성물은 백선의 예방 또는 치료를 위한 세정제용, 백선의 예방 또는 치료의 약제용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  7. 제 6 항에 있어서,
    상기 백선은 족부백선인 것으로서, 족부백선의 원인균이 트리코파이톤 멘타그로파이트(trichophyton mentagrophytes) 및 트리트리코파이톤 루브럼(Trichophyton rubrum)인 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물.
  8. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 상기 천연추출 항진균 조성물 1 내지 20 중량%;
    계면활성제 0.1 ~ 0.2 중량%;
    알카리금속벤조에이트 0.01 ~ 0.02중량%; 및,
    잔량 정제수를 포함하는 화장료 조성물.
  9. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 상기 천연추출 항진균 조성물 1 내지 20 중량%;
    디메치콘코폴리올 5 ~ 15 중량%;
    사이클로메치콘 5 ~ 15 중량%;
    우레아 10 ~ 30 중량%;
    글리세린 10 ~ 30 중량%;
    트리에탄올아민 0.01 ~ 0.03 중량%;
    방부제 0.01~ 2중량%; 및,
    잔량 정제수를 포함하는 젤형의 화장료 조성물.

  10. 제9항에 있어서,
    상기 젤형은 풋크림, 스킨케어, 세정제, 비누인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.

  11. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 상기 천연추출 항진균 조성물 1 내지 20 중량%;
    소듐라우릴설페이트 1 ~ 3 중량%;
    우레아 0.5 ~ 1.5 중량%;
    L-멘톨 0.2 ~ 0.7 중량%;
    폴리옥시에칠렌노닐페닐에텔 0.6 ~ 1 중량%;
    에탄올 10 ~ 20 중량%;
    EDTA 0.02 ~ 0.08 중량%;
    방부제 0.01-2중량%; 및,
    잔량 정제수를 포함하는 액상형의 화장료 조성물.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 액상형은 풋스킨, 스킨케어, 세정제, 비누인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  13. 제 1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서 상기 항진균 조성물을 함유하는 약제학적 약학 조성물.
  14. 제 1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서 상기 항진균 조성물을 함유하는 살균제 조성물.
  15. S1) 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계;
    S2) 상기 생약재 각 성분 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용액에 침지하여, 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계;
    S3) 수득한 추출물을 청미래덩굴추출물: 황금추출물: 백지추출물: 사매추출물: 양아욱추출물 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비로 혼합하는 혼합단계;
    S4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 감압 여과하고, 농축하는 농축단계;를 포함하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법.
  16. S1) 생약재로서 청미래덩굴, 황금, 백지, 사매, 양아욱을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계;
    S2) 상기 생약재 각 중량비에 대해 청미래덩굴: 황금: 백지: 사매: 양아욱 = 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 : 1.0 ~ 3.0 의 중량비로 혼합하는 혼합단계;
    S3) 상기 생약재의 혼합물 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용액에 침지하여, 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계;
    S4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 감압 여과하고, 농축하는 농축단계;를 포함하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서,
    상기 S4) 의 농축단계 후, -20℃ 부터 단계적으로 30℃ 까지 48 시간 동안 동결건조하여 건조분말을 수득하는 분말화단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법.
  18. 제 15항 또는 제16항에 있어서,
    상기 S2)단계에서의 환류냉각 시간은 4 ~ 8 시간이며, 상기 알코올류는 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 중 어느 하나 또는 이들의 2이상의 혼합물 것을 특징으로 하는 천연추출 항진균 조성물의 제조방법.
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