KR101130212B1

KR101130212B1 - 사포게닌 및 그 유도체의 치료 방법 및 사용법

Info

Publication number: KR101130212B1
Application number: KR1020047014567A
Authority: KR
Inventors: 다일 리스; 필 구닝; 안토니아 오르시; 종친 시아; 야얼 휴
Original assignee: 파이토팜 피엘씨
Priority date: 2002-03-27
Filing date: 2003-03-27
Publication date: 2012-04-13
Also published as: KR20040093153A; US20110190249A1; CN102727501A

Abstract

본 발명은 특정의 비-인지성 신경변성, 비-인지성 신경근 변성, 운동신경-감각기관의 신경변성 또는 수용체 기능장애 또는 인지적, 신경의 및 신경근육의 손상 부재의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실에서의 특정의 스테로이드성 사포게닌, 이와 관련된 화합물 및 이들의 유도체의 치료 방법 및 사용법에 관한 것이다.

Description

사포게닌 및 그 유도체의 치료 방법 및 사용법{Theraputic methods and uses of SAPOGENIN and their derivatives}

본 발명은 사포게닌, 이와 관련된 화합물 및 그 유도체의 치료방법 및 사용법에 관한 것이다.

사포게닌, 이와 관련된 화합물 및 이들의 유도체는 비-인지적 신경변성(non-cognitive neurodegeneration), 비-인지성 신경근 변성(non-cognitive neuromuscular degeneration), 운동신경-감각기관의 신경변성(motor-sensory neurodegeneration), 또는 수용체 기능장애 또는 상실(loss)에 있어서의 치료법에 사용된다. 추가의 양상에서, 본 발명은 이러한 치료법에 사용되는 조성물에도 관련된다.

인지적 기능장애(cognitive dysfunction)는 알츠하이머 질병(Alzheimer's disease, AD), 알츠하이머 형태의 노인성 치매(SDAT), 루이 신체 치매(Lewy body dementia) 및 도관 치매(vascular dementia)와 같은 치매 질환 및 증후군의 특징이다. 가벼운 인지적 손상(mild cognitive impairment, MCI), 나이-관련된 기억력 손 상(age-associated memory impairment, AAMI), 자폐증(autism) 및 신경손상(neuroimpairment)과 같은 더 경미한 인지적 기능장애도 특정의 비-치매성 질환 및 증후군의 특성이다.

비-인지적 신경결함(즉, 인지적 기능장애 부재시 신경결함), 비-인지적 신경근 결함(즉, 인지적 기능장애 부재시 신경근 결함), 및 운동신경-감각기관의 신경결함은 파킨스씨 병; 근육 기능장애(muscular dystrophy); 안면견갑상완근 이영양증(facioscapsulohumeral muscular dystrophy, FSH), 뒤센형 근위축증(Duchenne muscular dystrophy), 백커형 근위측증(Becker muscular dystrophy) 및 부르스씨 근육 이영양증(Bruce's muscular dystrophy)을 포함한 근육 이영양증(muscular dystrophy); 후치쓰씨 이영양증(Fuchs' dystrophy); 근긴장성 이양증(myotonic dystrophy); 각막위측증(corneal dystrophy); 반사 교감신경 위축 증후군(reflex sympathetic dystrophy syndrome, RSDSA); 신경맥관 이영양증(neurovascular dystrophy); 중증근무력증(myasthenia gravis); 램버트 이튼 병(Lambert Eaton disease); 헌팅턴씨 병(Huntington's disease); 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS); 및 다발성 경화증(multiple sclerosis)과 같은 질환 및 증후군의 특징을 가진다.

수용체 손실 -특히 니코틴 및/또는 무스카린 수용체(muscarinic receptors) 및/또는 도파민 수용체(dopamine receptors) 및/또는 아드레날린성수용체(adrenoceptor)의 손실- 은 상기 기술한 질환 및 증후군의 일부 또는 모두의 특징을 가진다. 인지, 신경 및 신경근 손상의 부재시 상기 수용체의 손실, 또한 체위성 저혈압(postural hypotension), 만성 피로 증후군(chronic fatigue syndrom), 천식(asthma), 심부전에 대한 이환성(susceptibility to heart failure) 및 근육 변성(muscular degeneration)과 같은 질환 및 증후군의 특징을 가진다.

상기와 같은 질환과 증후군은 모든 사회에서 발생되고 있는 매우 심각한 것으로, 이는 생활의 기대치, 후천적 질병의 치료가 높아지고, 인구학상 측면에서 보면 노령 인구 쪽으로 점점 증가되고 있기 때문이다.

본 발명의 참고자료로 병합된 DE-A-4303214 에서는, 바이러스성 질환의 치료에 있어서 사포닌 및 사포게닌의 사용법을 제시하고 있지만, 이 분야의 통상의 지식을 가진 자들이 어떤 특정의 바이러스성 질환용 화합물의 특정한 그룹을 선택할 수 있는지에 대한 데이터를 기재하고 있지 않다.

WO-A-99/16786에서는, 치매의 치료에 있어서 특정의 사포닌과 사포게닌의 사용법을 제시하고 있는 바, 이는 본 발명의 참고자료로 병합되었다.

WO-A-99/48482, WO-A-99/48507, WO-A-01/23406, WO-A-01/23407, WO-A-01/23408에서는, 인지적 기능장애 및 관련 질환의 치료에 있어서 특정의 사포닌, 사포게닌 및 그 유도체의 사용법을 기재하고 있는 바, 이는 본 발명의 참고자료로 병합되었다.

중국 특허 출원번호 CN-A-1096031호 에서는 β-adrenergic 및 M-cholinergic 수용체의 두 종류의 조절에서의 스파이로스탄 사포게닌(spirostane sapogenin), 살사사포게닌(sarsasapogenin)의 대생물작용(bioactivity)을 기술하고 있으나, 특정의 약학적 활성은 제시되어 있지 않다. 이는 본 발명의 참고자료로 반영되었다. 그 러나, "동위원소로 분류되는 화합물의 합성과 적용(Synthesis and Application of Isotopically Labelled Compounds)", 1998, p.315-320, Yi et al. 에서는 노인성 치매의 치료에 있어서 살사사포게닌의 사용법을 기술하고 있다.

이러한 많은 질환들은 소위 "스펙트럼" 질환이라고 불리우는 것으로, 증상의 조합이 광범위하고, 상대적인 가혹함(severity)이 광범위하게 존재한다. 각각의 증상의 가혹함과 특정의 증상의 결합은 개인 및 개인에 따라, 및 질병이 진행되는 단계에 따라 달라질 수 있다. 파킨스씨 병, 중증 근무력증, 램버트 이튼 병, 체위성 저혈압 및 만성 피로 증후군과 같은 인지적 기능장애는 비록 2차 증상의 가능성이 있는 여러 증상들 중의 하나로 나타난다 하더라도 일차적 증상은 아니다. 또한, 이러한 질환들은 바이러스성 질병 또는 치매는 아니다. 따라서, 많은 경우에 있어서 인지적 기능장애(예를 들면, 치매)의 치료는 필요치 않다.

본 발명은 특정의 사포게닌 및 사포닌을 포함한 그 유도체가 비인지지적 신경변성, 비인지적 신경근변성, 및 운동신경 감각기관의 신경변성 뿐만 아니라 인지적, 신경 및 신경근 손상의 부재시 수용체 손실에 대해 놀라운 활성도(activity)를 가진다는 발견을 기초로 하여, 상기 질환들을 적극적으로 예방하고, 역전시킬 수 있게 되었다. 이러한 발견은 특정의 비-바이러스성, 스펙트럼 및 비-스펙트럼, 일차 증상이 아닌 인지적 신경변성에 있어서의 질병의 개선된 치료를 가능케했다.

본 발명의 일 양상에 따르면, ⅰ)비-인지적 신경변성, ⅱ)비-인지적 신경근 변성, ⅲ)운동신경-감각기관의 신경변성, ⅳ)인지적, 신경의 및 신경근 결함의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실을 겪고 있는 또는 거기에 걸리기 쉬운 인간 및 비-인간 동물의 치료 또는 예방을 위하여, 조성물(예를 들면, 약학 조성물, 식품, 식품 보조제 및 음료)의 제조방법, 또는 치료 또는 예방에 있어서 활성 약물(여기에 정의된 것과 같은)의 사용법을 제공하는 데 있다.

"활성 약물"이라는 표현은 다음 화학식 1, 2, 및 3으로 표시되는 화합물을 나타내는 것으로서, X 라디칼 치환체, 아래에 정의된 것과 같은 이러한 화합물의 당(sugar)-치환된 유도체, 이들의 모든 입체이성질체 및 라세미 혼합물, 이들의 약학적으로 허용가능한 프로-드러그 및 염, 및 모든 혼합물 및 이들의 조합으로 정의된 것과 같은 1종 이상으로부터 파생된 유도체를 언급하는 것으로, 아래에 정의된 바와 같이 사포게닌 유도체이다.

- 상기 식에서, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R₁₀, R_13,R_18,R_19,R_20,R_21,R_22, R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R_31,및 R₃₂은 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬이거나; 또는 치환되지 않거나; 또는 OR 이며, 여기서 R은 알킬기 또는 아실기이고,

- R₉, R_11,R_12,R_14,R_15,R_16,R _17,R_25,및R₃₃ 은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기이거나; 또는 치환되지 않거나; 또는 OR 이며, 여기서 R은 알킬기 또는 아실기이고,

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기고;

- 상기 식에서, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_18,R_19,R_20,R_21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R _31,R₃₂및 R₃₄ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_11,R_12,R_14,R_15,R_16,R _17,R_25,R₃₃ 및 R₃₅은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기고;

- 여기서, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_14,R_18,R_19,R_20,R_21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R _31,R_32,R_33,R_34,R_35,R₃₆및 R ₃₇ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO ₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_11,R_12,R_15,R_16,R_17,및 R₂₅은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기이고; 및

R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

사포게닌 유도체, 특별히 배제되지 않지만 1종 이상의 X 라디칼 치환체로부터 파생된 스테로이드성 스파이로스탄 사포게닌 유도체로서,

여기서 X는

- 할로겐 원자,

- (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-),

- N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 및

- 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택된 것이며; 및

상기 화합물의 어떤 형태의 유도체, 여기서 3-위치의 탄소원자는(즉, 탄소에 R₃가 치환되어 있거나, 또는 상기 화학식에서는 정의되지 않은 사포게닌 유도체에서는 해당 위치), 또는 화학식 2 및 3의 경우에는, 3-위치의 탄소원자, 26-위치(즉, 탄소에 R₃₄가 치환되어 있음)에 또는 각각 3- 및 26-위치에서의 탄소원자는 O-sugar 단위를 가지고 있는 바, 여기서 당 그룹(sugar group)은 단당류, 이당류 또는 삼당류이다.

사포게닌 활성 약물의 당-담지 유도체 형태(sugar-carrying derivative forms)는 일반적으로 사포게닌과 같은 종래기술에 언급되어 있다. "카르보하이드레이트(carbohydrate)"라는 표현은 본 발명에서 특별히 이러한 당 그룹(sugar group)을 포함한다.

본 발명에서 사용된 활성 약물은 상기 정의 내에 있는 비-에스트로겐성 스테로이드성 사포게닌, 사포닌 및 이들의 유도체로서, 이들의 모든 생리학적으로 허용가능한 프로-드러그 및 염을 포함하는 것이 바람직하다.

이러한 활성 약물은 자연적으로 발생된 것이거나 또는 비-자연적으로 발생된 것일 수도 있다. 비-자연적으로 발생된 활성 약물은 이 분야에서 잘 알려지고, 아래에 기술된 것과 같이, 자연적으로 발생된 화합물의 사이드 그룹(side group) 및/또는 사이드 원자를 변형시킴으로써 제조된다.

본 발명은 또한, 인간 및 비-인간 동물의 처치를 위한 방법, 및 상기 처치 방법에서 사용을 위한 활성 약물을 포함하는 조성물을 제공하는 것에도 관련된다.

본 발명의 활성 약물은, 필요에 따라, 1종 또는 그 이상의 콜린에스테라제 (cholinesterase) 억제제, 도파민 작용제(예를 들면, L-dopa), COMT 억제제, MAO-B 억제제, 항-콜린효능제(anti-cholinergics), 아세틸콜린 작용제, 세로토닌 작용제(serotonin agonists), AMPA 수용체 작용제, GABA 수용체 작용제, NMDA 수용체 작용제, β-아드레날린성수용체 작용제, 디고신(digoxin), 도부타민(dobutamine), 소염제(anti-inflammatories), 향신경성 인자(neurotrophic factors), 스타틴(statins), 아데노신 A2a 수용체 길항제(adenosine A2a receptor antagonists), 알도스 환원효소 억제제(aldose reductase inhibitors), 면역조절물질(immunomodulators), 칸나비노이드 작용제(cannabinoid agonist), 인터페론 β 또는 트리사이클릭 항-진정제(tricyclic anti-depressant)와 같은 추가의 활성 약물과 동시 투여할 수도 있다.

상기 활성 약물은 비-인지적 신경변성, 비-인지적 신경근 변성, 운동신경-감각기관의 신경변성, 또는 수용체 기능장애 또는 상실과 같은 특징을 가지는 질환 및 질병을 겪고 있거나 이러한 질병에 걸리기 쉬운 인간 및 비-인간적 동물에 치료학적으로 또는 치료예방적으로(prophylactically) 적용시킬 수 있다.

따라서, 본 발명은 또한 상기와 같은 1종 이상의 질환 및 질병을 겪고 있거나 또는 걸리기 쉬운 인간 및 비-인간 동물의 처치 또는 예방을 위한 조성물(예를 들면, 약학 조성물, 식품, 식품 보조제 및 음료)의 제조; 또는 예방 또는 치료에 있어서의 활성 약물(여기서 정의된 것과 같이)의 사용법을 제공하는 데 있다.

활성 약물의 예

다음에서 활성 약물의 분류를 특별히 나타내었다:

1. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물로서,

- R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_18,R_19,R_20,R _21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R_31,및 R₃₂은 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬이거나; 또는 치환되지 않거나; 또는 OR 이며, 여기서 R은 알킬 또는 아실기이고,

- R₉, R_11,R_12,R_14,R_15,R_16,R _17,R_25,및R₃₃ 은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬이거나; 또는 치환되지 않거나; 또는 OR 이며, 여기서 R은 알킬 또는 아실기이고,

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기고; 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

2. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물로서,

- R₉, R_12,R_15,R_16,R₁₇= H 이고,

- R₁₁, R_14,R_25,R₃₃은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬이거나; 또는 치환되지 않거나; 또는 OR 이며, 여기서 R은 알킬 또는 아실기이고,

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기이고; 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

3. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물로서,

- R₁=R₂=R₄=R₅=R₆=R₇=R₈=R ₁₀=R₁₁=R₉=R₁₂=R₁₃=R₁₅=R₁₆=R ₁₇=R₁₈=R₁₉=R₂₀=R₂₁=R₂₂=R₂₃=R ₂₄= R₂₅=R₂₆=R₂₇=R₂₈=R₂₉=R₃₀=R₃₁=R₃₂=R₃₃=H 이고,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기이고;

- ... 는 단일결합을 나타낸 것이며,

- C25 에서의 메틸기는 R 또는 S 배향이며,

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

- R₃ 또는 R₂₃ 의 적어도 1종 이상은 X 라디칼이고, H, OH, =O, 및 OR(여기서 R=알킬 또는 아실 그룹이거나, 또는 치환되지 않은 것)인 치환체로 남겨질 수 있으며, 및 X는 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO ₂NH-, 및 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택된 것이며,

4. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물로서,

- R₁=R₂=R₄=R₅=R₆=R₇=R₈=R ₁₀=R₁₁=R₉=R₁₂=R₁₃=R₁₅=R₁₆=R ₁₇=R₁₈=R₁₉=R₂₀=R₂₁=R₂₂=R₂₃=R ₂₄= R₂₅=R₂₆=R₂₇=R₂₈=R₂₉=R₃₀=R₃₁=R₃₂= H 이고,

- R₃₃=R₁₄= CH₃ 이고;

- ... 는 단일결합을 나타낸 것이며,

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

5. 상기 화학식 2로 표시되는 화합물로서,

- R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_18,R_19,R_20,R _21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R_31,R₃₂및 R₃₄ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_11,R_12,R_14,R_15,R_16,R _17,R_25,R₃₃ 및 R₃₅은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기이고;

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

6. 상기 화학식 2로 표시되는 화합물 및 그의 카르보하이드레이트 유도체로서,

- R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_18,R_19,R_20,R _21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27, R_28,R_29,R_30,R_31, 및R₃₂ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_12,R_15,R_16,R₁₇= H 이고,

_-R₃₄는 H, OH, =O, 및 OR이며, 여기서 R은 알킬기, 아실기 또는 카르보하이드레이트기이며; 및

- R_11,R_14,R_25,R_33,및 R₃₅는 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기고;

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

7. 상기 화학식 2로 표시되는 화합물 및 그의 카르보하이드레이트 유도체로서,

- R₁=R₂=R₄=R₅=R₆=R₇=R₈=R ₁₀=R₁₁=R₉=R₁₂=R₁₃=R₁₅=R₁₆=R ₁₇=R₁₈=R₁₉=R₂₀=R₂₁=R₂₂=R₂₃=R ₂₄= R₂₅=R₂₆=R₂₇=R₂₈=R₂₉=R₃₀=R₃₁=R₃₂=R₃₃= H 이고,

- R₁₄= CH₃ 이고;

- R₃₄= -OH 또는 -OR이며, 여기서 R=알킬, 아실 또는 카르보하이드레이트이며, 및

- R₃₅=H 이거나 또는 치환되지 않은 것이며,

- ... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며, 및

- C25에서의 메틸기는 R 또는 S 배열이며, 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

- R₃ 또는 R₂₃ 의 적어도 1종 이상은 X 라디칼이고, H, OH, =O, 및 OR(여기서 R=알킬 또는 아실기이거나, 또는 치환되지 않은 것)인 치환체로 남겨질 수 있으며, 및 X는 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO ₂NH-, 및 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택된 것이며,

8. 상기 화학식 2로 표시되는 화합물 및 그의 카르보하이드레이트 유도체로서,

- R₁₄=R₃₃= CH₃ 이고;

- R₃₅=H 이거나 또는 치환되지 않은 것이며,

- ... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며, 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

9. 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물로서,

- R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_14,R_18,R_19,R _20,R_21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R_31,R_32,R _33,R_34,R_35,R₃₆및 R₃₇ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_11,R_12,R_15,R_16,R_17,및 R₂₅은 H, OH, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 는 알킬기이고; 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

10. 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물로서,

- R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R_10,R_13,R_14,R_18,R_19,R _20,R_21,R_22,R_23,R_24,R_26,R_27,R_28,R_29,R_30,R_31,R_32,R _33,R_35,R₃₆및 R₃₇ 는 서로 독립적인 것으로, H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬 또는 아실기)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R₉, R_12,R_15,R_16,R₁₇= H 이고,

- R₃₄= H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH ₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기, 아실기, 또는 카르보하이드레이트기이고)이거나, 또는 치환되지 않은 것이며;

- R_11,및 R₂₅는 H, OH, =O, 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃- , NH₂-, MeSO₂NH-, 알킬기, OR(여기서 R은 알킬기 또는 아실기), 또는 치환되지 않은 것이며;

... 는 임의의 이중결합을 나타낸 것이며,

여기서 상기에 추가로,

- R₃₃ 또는 R₁₄ 중의 하나는 알킬기이고; 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며;

11. 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물 및 그의 카르보하이드레이트 유도체로서,

- R₁₄= CH₃ 이고;

- R₃₄= -OH 또는 -OR이며, 여기서 R=알킬기, 아실기 또는 카르보하이드레이트기이며, 및

- R₃₅=H 이거나 또는 치환되지 않은 것이며,

- R₃₇=H, -OH 또는 =O이며,

- R₃₆=H 또는 -OH 이며,

- ... 는 단일결합을 나타낸 것이며, 및

- C25 에서의 메틸기는 R 또는 S 배열이며, 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

12. 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물 및 그의 카르보하이드레이트 유도체로서,

- R₁₄=R₃₃= CH₃ 이고;

- R₃₅=H 이거나 또는 치환되지 않은 것이며,

- R₃₇=H, -OH 또는 =O이며,

- R₃₆=H 또는 -OH 이며,

- ... 는 단일결합을 나타낸 것이며, 및

- C25에서의 메틸기는 R 또는 S 배열이며, 및

- R₂₅의 입체화학은 β 배향이며; 및

여기서 상기에 추가로,

13. 치환된 사포게닌, 특별히 스테로이드성 스파이로스탄 사포게닌을 배제하지 않는 것이며, 여기서 사포게닌의 적어도 1종 이상의 OH-그룹은 X로 치환된 것이며, 여기서 X는 할로겐 원자, (Me-S-), (Me-SO-), (Me-SO₂-), N₃-, NH₂-, MeSO ₂NH-, 및 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택된 것이며;

14. 상기에서 정의된 사포게닌, 특별히 스테로이드성 스파이로스탄 사포게닌을 배제하지 않는 것이며, 여기서 X로 정의되는 할로겐 원자는 플루오르 원자이며;

15. (3β-플루오로-5β,20α,22α,25R-스파이로스탄), (3,3-다이플루오로-5β,20α,22α,25R-스파이로스탄), (3α-메틸설포닐아미노-5β,20α,22α,25R-스파이로스 탄), (3α-아지도-5β,20α,22α,25R-스파이로스탄), (3α-아미노-5β,20α,22α,25R-스파이로스탄) 및 이들의 입체이성질체 및 라세미 혼합물, 이들의 약학적으로 허용가능한 프로-드러그 및 염으로부터 선택된 치환된 사포게닌;

16. 치환된 사포게닌으로서, 여기서 모체 사포게닌(parent sapogenin)은 살사사포게닌, 에피살사사포게닌, 스밀라게닌, 에피스밀라게닌, 및 안주로게닌-D(anzurogenin-D)로부터 선택된 것으로서, 이는 상기 정의된 것과 같은 1종 이상의 X 라디칼로 치환된 것이며;

17. 다음 화학식 4로 표시되는 화합물:

여기서, R 그룹은 수소 원자; 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 또는 아릴카바모일; 또는 설포(HO₃S); 포스포노((HO)₂P(O)-); 또는 단당류, 이당류 또는 삼당류; 여기서 어떤 알킬기는 선택적으로 아릴, 아미노, 모노- 또는 다이-알킬-아미노, 카르복실산 잔기(-COOH), 또는 이들의 어떤 조합으로 치환된 것 중에서 선택된 것이며;

18. 상기 1 내지 17의 항목에서 정의된 것과 같은 화합물의 유도체 형태로서, 3-위치의 탄소 원자 또는, 화학식 2 및 3의 경우에는, 3-위치의 탄소 원자, 26-위치의 탄소 원자 또는 각각 3- 및 26-위치에서의 탄소 원자는, 당 그룹(sugar group)이 단당류, 이당류 또는 삼당류인 O-sugar 단위를 가지고 있는 바, 예를 들면, 탄소수 5 또는 6인 모노 알도스(aldose), 또는 케토스, 바람직하기로는 고리화된 푸라노스(furanose) 또는 피라노스 형태, 또는 α 또는 β 아노머(anomer) 이거나 및 D 또는 L 광학 이성질체를 함유하거나, 또는 이들의 다이- 및 트리-올리고사카라이드 의 어떤 조합; 당 잔기의 아실화된 형태가 또한 "당(sugar)" 이라는 용어에 포함되며; 적합한 당의 예를 들면, 글루코스, 만노스, 과당(fructose), 갈락토스, 말토스, 셀로비오스(cellobiose), 수크로스(sucrose), 람노스(rhamnose), 자일로스(xylose), 아라비노스(arabinose), 푸코스(fucose), 퀴노보스(quinovose), 아피오스(apiose), 락토스, 갈락토스-글루코스, 글루코스-아라비노스, 푸코스-글루코스, 람노스-글루코스, 글루코스-글루코스-글루코스, 글루코스-람노스, 만노스-글루코스, 글루코스-(람노스)-글루코스, 글루코스-(람노스)-람노스, 글루코스-(글루코스)-글루코스, 갈락토스-(람노스)-갈락토스 및 이의 아실화(예를 들면, 아세틸화) 유도체의 형태를 포함한다.

상기의 화합물의 정의에서:

선택적으로 알킬기의 아미노, 모노-알킬-아미노 및 다이-알킬-아미노 치환체는, 알킬기의 α 위치에서 모노-치환체로 존재하는 것이 바람직하다.

선택적으로 알킬기의 -COOH 치환체는 알킬기의 말단 또는 어떤 다른 위치에 존재할 수 있다.

"알킬"은 사슬 내에 탄소수 1 내지 20인 선형 또는 브랜치형인 지방족 탄화수소 그룹을 의미한다. 바람직한 알킬기는, 사슬 내에 탄소수 1 내지 12인 것이다. 브랜치형은 메틸, 에틸 또는 프로필기 등과 같은 1종 이상의 저급 알킬기가 선형의 알킬 사슬에 부착된 것을 의미한다. "저급 알킬기(lower alkyl)"는 사슬 내에 탄소수 1 내지 4인 것을 의미하는 것으로, 선형이거나 브랜치 형태이거나 모두 가능하다. 알킬기의 예에는, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, t-부틸, s-부틸, n-펜틸, 3-펜틸 등을 포함한다.

"아릴" 은 방향족 고리(ring) 또는 접합 고리(fused ring) 방식을 포함하는

모든 형태의 그룹으로서, 바람직하기로는 탄소수 12 까지를 포함한다. 아릴 그룹의 한 예로는 페닐 그룹이 있다. 또한, 아릴 그룹의 예를 들면, 할로(예를 들면, 클로로 또는 브로모), 알킬, 시클로알킬, 하이드록시, 알콕시, 아미노, 니트로, 아실아미노, 카르복시 및 알콕시카르보닐기로부터 독립적으로 선택된 치환체에 의해 선택적으로 모노- 또는 폴리-치환된 것이다.

"카르복실산 잔기(carboxylic acid residue)"는 -COOH 그룹을 의미한다.

"아실(acyl)기" 는 H-CO- 또는 알킬-CO- 그룹을 의미하는 것으로, 여기서 알킬기는 상기에서 정의한 바와 같다. 바람직하기로는, 아실기는 저급 알킬기를 포함 한다. 이러한 아실그룹의 예로는, 포밀(formyl), 아세틸(acetyl), 프로판오일(propanoyl), 2-메틸프로판오일(2-methylpropanoyl), 부탄오일(butanoyl) 및 팔미토일(palmitoyl)을 포함한다.

"선택적으로 치환된(optionally substituted)" 이라는 것은 상기 그룹이 1종 또는 그 이상의 같거나 다른 치환체로 치환될 수 있다는 것을 의미하는 것으로, 바람직하기로는 치환된 페런트 그룹과 관련하여 각각 작은(예를 들면, 가장 큰 입자 치수의 20% 이하인) 크기를 가지는 1종 이상의 치환체; 적절한 치환체는 할로(클로로, 또는 브로모), 알킬, 시클로알킬, 히드록시, 알콕시, 아미노, 아실아미노, 아릴, 아로일아미노(aroylamino), 카르복시, 알콕시카보닐, 아르알콕시카보닐, 헤테로아르알콕시카보닐(heteroaralkoxycabonyl) 및 선택적으로 치환된 카바모일을 포함하며, 바람직하기로는 상기에서 한정한 크기의 이내에 있는 것이다;

"약학적으로 용인된" 은 음성 의약 및 수의학 심판 양상에서, 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 인간 및 저급 동물의 세포와 접촉하는 데 사용되기에 적합한 것으로, 이상적인 이익/위험 비율에 비례한다. "약학적으로 허용가능한 프로-드러그"는 상기 화합물의 프로드러그를 의미하는 것으로, 음성 의약 및 수의학 심판 양상에서, 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 인간 및 저급 동물의 세포와 접촉하는 데 사용되기에 적합한 것으로, 이상적인 이익/위험 비율에 비례하며, 이들이 의도한 사용법에 효과적일 뿐만 아니라, 상기 화합물의 쌍극성이온 형태(zwitterionic form)이다. "프로-드러그(pro-drug)" 라는 용어는 상기 화학식의 모체 화합물(parent compound)을 제조하기 위하여 생체 내에서(in vivo) 빠르게 전 달되는 화합물을 의미하는 것으로, 예를 들면 혈액 내에서 가수분해에 의한 것이다. 신진대사의 분열에 의해 빠르게 전달될 수 있는 관능성 그룹은 카르복실 그룹과 반응하는 그룹의 종(class)을 생체 내에서 제조한다. 이 경우 화합물에서 신진대사적으로 분열된 그룹들은 생체내에서 분열되기 때문에, 이러한 그룹을 가진 화합물들이 프로드러그로 작용하게 된다. 프로드러그의 검토는 다음에서 제공받을 수 있다: 프로드러그의 설계, H. Bundgaard, ed., Elsevier, 1985; 효소학에서의 방법, K. Widder et al, Ed., Academic Press, 42, p.309-396, 1985; 약물 설계 및 개발에 관한 교과서, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, ed., Chapter 5; 프로드러그의 설계 및 응용 p.113-191; 진보된 약물 전달에 대한 재고, H. Bundgard, 8, p.1-38, 1992; Journal of Pharmaceutical Science, 77, p. 285, 1988; Chem. Pharm. Bull., N. Nakeya et al, 32, p.692, 1984; 신규한 전달 시스템에서의 프로드러그, T. Higuchi and V. Stella, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press; 1987, 이러한 자료들은 본 발명의 참고자료로 반영된 것이다.

"약학적으로 용인된 염" 이라는 것은 본 발명의 화합물의 비교적 비독성이고, 무기 및 유기 산 첨가 염(acid addition salt), 및 염기 첨가 염을 의미한다. 이러한 염들은 화합물의 최종 분리 및 정제 단계에서 in situ 로 제조될 수 있다. 특히, 산 첨가 염은 자유 염기 형태의 정제된 화합물과 적합한 유기 또는 무기산을 반응시키고, 제조된 염을 분리함으로써 각각 제조될 수 있다. 예를 들면, S. M. Berge, et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci., 66: p.1-19(1977)를 보라, 이 문헌은 본 발명의 참고자료로 반영된 것이다. 또한, 염기 첨가 염은 산 형태의 정제된 화합물과 적합한 유기 또는 무기 염기를 반응시키고, 제조된 염을 분리함으로써 각각 제조될 수 있다. 염기 첨가 염은 약제학적으로 용인된 금속 및 아민 염을 포함한다. 적합한 산 첨가 염기의 예로는, 염산, 황산, 인산 및 질산으로부터 선택된 염으로 형성된 것들이다. 적합한 염기 첨가 염의 예로는 수산화 나트륨, 수산화 칼륨 및 수산화 암모늄으로부터 선택된 염기로부터 형성된 것들이다.

특별히 바람직한 활성 약물의 종은 상기 화학식 4로 표시된 화합물이다.

화학식 4의 화합물에서, C25의 메틸 그룹은 S 배열이며, 본 발명의 이러한 화합물은 살사사포게닌 및 에피살사포게닌 또는 이들의 유도체이다. 화학식 4로 표시되는 다른 화합물에서는, C25의 메틸 그룹은 R 배열이며, 본 발명의 이러한 화합물은 스밀라게닌 및 에피스밀라게닌 또는 이들의 유도체이다.

상기 화학식 4에서, -OR 은 다음으로부터 선택된 것이다(어떤 조건으로 배제된다는 조건이 없는 한): 하이드록시, 카틸레이트(cathylate)(ethoxycarbonyloxy), 아세테이트, 석시네이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 발러레이트, 이소발러레이트, 카프로에이트, 이소카프로에이트, 다이에틸아세테이트, 옥타노에이트, 데카노에이트, 라우레이트(laurate), 미리스테이트(myristate), 팔미테이트(palmitate), 스테아레이트, 벤조에이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 시나메이트(cinnamate), p-니트로벤조일옥시(p-nitrobenzoyloxy), 3,5-다이니트로벤조일옥시(3,5-dinitrobenzoyloxy), p-클로로벤조일옥시(p-chlorobenzoyloxy), 2,4-다이클로 로벤조일옥시(2,4-dichlorobenzoyloxy), p-브로모벤조일옥시(p-bromobenzoyloxy), m-브로모벤조일옥시(m-bromobenzoyloxy), p-메톡시벤조일옥시(p-methoxybenzoyloxy), 프탈일(phthalyl), 글리시네이트, 알라니네이트(alaninate), 발리네이트(valinate), 페닐알라니네이트(phenylalaninate), 이소로우시네이트(isoleucinate), 메티오니네이트(methioninate), 아르기니네이트(argininate), 아스파테이트(aspartate), 시스테이네이트(cysteinate), 글루타미네이트(glutaminate), 히스티디네이트(histidinate), 리시네이트(lysinate), 프로리네이트(prolinate), 세리네이트(serinate), 트레오니네이트(threoninate), 트립토파네이트(tryptophanate), 티로시네이트(tyrosinate), 푸머레이트(fumerate) 및 말러에이트(maleate).

상기 화학식 4의 화합물과 약학적으로 용인된 이의 염은, 특별히 다음의 화합물이 바람직하다(전제조건에 의해 배제되지 않는 한):

-살사사포게닌,

-살사사포게닌 카틸레이트,

-살사사포게닌 아세테이트,

-살사사포게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌,

-에피살사사포게닌 카틸레이트,

-에피살사사포게닌 아세테이트,

-에피살사사포게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌,

-스밀라게닌 카틸레이트,

-스밀라게닌 아세테이트,

-스밀라게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌,

-에피스밀라게닌 카틸레이트,

-에피스밀라게닌 아세테이트,

-에피스밀라게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염.

화학식 4로 표시되는 화합물의 사포닌(R=sugar)은 특별히 다음의 화합물이 바람직하다: 살사사포게닌, 에피살사사포게닌, 스밀라게닌 및 에피스밀라게닌인 바, 각각의 경우에 있어서 3-위치의 탄소원자는 O-sugar 단위를 가지고 있으며, 여기 서 당 그룹(sugar group)은 글루코스, 만노스, 과당(fructose), 갈락토스, 말토스, 셀로비오스(cellobiose), 수크로스(sucrose), 람노스(rhamnose), 자일로스(xylose), 아라비노스(arabinose), 푸코스(fucose), 퀴노보스(quinovose), 아피오스(apiose), 락토스, 갈락토스-글루코스, 글루코스-아라비노스, 푸코스-글루코스, 람노스-글루코스, 글루코스-글루코스-글루코스, 글루코스-람노스, 만노스-글루코스, 글루코스-(람노스)-글루코스, 글루코스-(람노스)-람노스, 글루코스-(글루코스)-글루코스, 갈락토스-(람노스)-갈락토스 및 이의 아실화(예를 들면, 아세틸화) 유도체 중에서 선택된 것이다.

적합한 활성 약물의 추가의 예를 들면, 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올, 스밀라게논, 코프로스테롤 및 약학적으로 용인된 프로-드러그 및 이들의 염을 포함한다.

조성 및 용도

따라서, 본 발명은 인간 또는 비인간적인 동물에 있어서 그들의 필요에 따라 비인지적 신경변성, 비인지적 신경근 변성, 운동신경-감각기관의 신경변성 또는 인지적, 신경의 및 신경근 손상의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실을 처치 또는 예방하기 위한 방법을 제공하고, 제공할 수 있게 된 것으로, 이는 상기 인간 또는 비인간적 동물에게 유효량의 상기 활성 약물(여기에서 정의한 것과 같은) 또는 약학적으로 용인된 이들의 염을 투여하는 것을 포함한다.

이러한 활성 약물은 활성 약물 및 추가의 적합한 어떤 성분을 포함하는 조성 물의 형태로 투여도리 수도 있다. 이러한 조성물의 예를 들면, 약학 조성물(약제), 식품, 식품 보조제, 또는 음료이다. 이러한 조성은, 특정의 화합물의 혼합물, 및/또는 약학적으로 허용가능한 이들의 염을 포함할 수도 있다.

본 발명의 추가의 양상에 따르면, 비인지적 신경변성, 비인지적 신경근 변성, 운동신경-감각기관의 신경변성 또는 인지적, 신경의 및 신경근 손상의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실에 있는 인간 또는 비-인간 동물의 처치에 있어서의 활성 약물을 포함한 조성물의 사용법을 제공하는 바, 이는 유효량의 활성 약물의 화합물을 포함한다.

본 발명에서 "약학 조성물"은 활성 약물 및 약학적으로 허용가능한 담체; 희석제; 보조제(adjuvant); 부형제; 또는 보존제(preserving agent), 첨가제, 붕해제, 습윤제, 에멀젼화제, 현탁제, 감미료, 향미제(flavoring agent), 방향제(perfuming agent), 항박테리아제, 항균제, 윤활제 및 배용제(dispensing agent)와 같은 부형약을 포함하며, 투약 및 제형의 방식의 본질에 따라 달라진다.

여기에서 사용된 "식품(foodstuff)", "식품 보조제(food supplement)" 및 "음료(beverage)" 와 같은 용어는 그들의 일반적인 의미를 가지는 것으로, 약제학 제조에 한정되는 것은 아니다.

활성 약물의 복용량(dosage)은 처치되거나 또는 예방되는 증상의 격렬함에 따라 광범위하게 달라질 수 있다. 적절한 복용량의 선택은 이 분야의 능숙한 기술자들이 과도한 어려움 없이 수행할 수 있다. 활성 약물의 복용량은 예를 들면, 몸무게(kg)당 약 0.1mg 이상, 또 다른 예를 들면, 몸무게(kg)당 약 0.3mg 이상으로, 1일 1회 투여되는 것이 바람직하다. 더 일반적으로는, 몸무게 kg당 1 내지 25 mg의 사이, 예를 들면 약 1 내지 10mg으로 1일 1회 투여되는 것이 바람직하다. 이 조성물은 이는 환자에게 약 1 내지 10mg/kg 사이의 단위 제형으로 투여되기에 적합하도록 단위 제형으로 적절하게 제제화될 수 있다. 인간에게 사용할 경우, 제형은 1일 약 70 내지 700mg의 사이에서 편리하게 적용할 수 있다.

"약학적으로 용인된 제형"은 본 발명의 화합물 또는 조성물의 제형을 의미하는 것으로, 정제; 당의정(dragees); 파우더; 엘릭시르(elixirs); 시럽; 현탁액, 스프레이, 흡입용 정제, 마름모꼴 정제(lozenge), 에멀젼, 물약, 그래뉼, 캡슐 및 좌약(suppository)을 포 액상 조제(liquid preparations)를 포함할 뿐만 아니라, 리포좀 조제를 포함하는 주사용 액상 조제도 포함한다. 제제화 기술은 Remington, Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co., Easton, PA, latest edition 에서 찾아볼 수 있다.

일반적으로, 특정 그룹의 화합물의 하나가 존재하는 참고자료는 이러한 화합물의 2종 이상의 혼합물의 범위까지 포함한다.

본 발명은 ⅰ)비인지적 신경변성, ⅱ)비인지적 신경근변성, ⅲ)운동신경-감각기관의 신경변성, 또는 ⅳ)인지적, 신경의 및 신경근 손상의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실의 처치를 위하여, 다음과 같은 어떤 질환을 겪고 있거나 또는 걸리기 쉬운 인간 또는 비-인간 동물 환자에 있어서의 처치법을 제공하는 데 있는 바, 상기 질환은 파킨스씨 병; 뇌염후 파킨스씨병(postencephalitic parkinsonism); 우 울증(depression); 정신분열증(schizophrenia); 안면견갑상완근 이영양증(facioscapsulohumeral muscular dystrophy, FSH), 뒤센형 근위축증(Duchenne muscular dystrophy), 백커형 근위측증(Becker muscular dystrophy) 및 부르스씨 근육 이영양증(Bruce's muscular dystrophy)을 포함한 근육 이영양증(muscular dystrophy); 후치쓰씨 이영양증(Fuchs' dystrophy); 근긴장성 이양증(myotonic dystrophy); 각막위측증(corneal dystrophy); 반사 교감신경 위축 증후군(reflex sympathetic dystrophy syndrome, RSDSA); 신경맥관 이영양증(neurovascular dystrophy); 중증근무력증(myasthenia gravis); 램버트 이튼 병(Lambert Eaton disease); 헌팅턴씨 병(Huntington's disease); 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)을 포함한 운동신경 감각기관의 질병; 다발성 경화증(multiple sclerosis); 체위성 저혈압; 정신적 쇼크에 의한 신경변성(traumatic neurodegeneration)(예를 들면, 발작에 따른, 또는 사고에 따른(예를 들면, 정신적 쇼크에 의한 머리의 손상 또는 척수 손상)); 배튼씨병(Batten's disease); 카케인 증후군(Cockayne syndrom); 다운 증후군(Down syndrom); 피질기저 신경절 변성(corticobasal ganglionic degeneration); 다중 시스템 위축증(multiple system atrophy); 오리보폰토 소뇌 위축증(olivopontocerebellar atrophy); 덴타토루부랄 위축증(dentatorubral atrophy); 팔리돌루이시안 위축증(pallidoluysian atrophy); 척수구근 위축증(spinobulbar atrophy); 시신경염(optic neuritis); 경화성 팬-뇌염(sclerosing pan-encephalitis, SSPE); 주의력 부족 장애(attention deficit disorder); 후-바이러스성 뇌염(post-viral encephalitis); 후-소아마비 증후군 (post-poliomyelitis syndrom); 파르씨 증후군(Fahr's syndrom); 유베르 증후군(Joubert syndrom); 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre syndrom); 무뇌회증(lissencephaly); 모야모야병(Moyamoya disease); 신경이주병(neuronal migration disorders); 자폐증(autistic syndrom); 폴리글루타민병(polyglutamine disease); 니만-피크병(Niemann-Pick disease); 진행성 다병소성 백질성뇌질환(progressive multifocal leucoencephalopathy); 가성 뇌종양(pseudotumor cerebri); 레프섬씨병(Refsum disease); 젤위거증(Zellweger syndrom); 진핵성상마비(supranuclear palsy); 프레드리히 실조증(Friedreich's ataxia); 제 2형 척수소뇌성 실조증(spinocerebellar ataxia type 2); 레트 증후군(Rhett syndrome); 샤이-드래거 증후군(Shy-Drager syndrom); 뇌결정성 경화증(tuberous sclerosis); 피크병(Pick's disease), 만성 피로증후군(chronic fatigue syndrome); 유전성 신경장애(hereditary neuropathy), 당뇨병의 신경장애(diabetic neuropathy), 및 유사분열의 신경장애(mitotic neuropathy)을 포함하는 신경장애(neuropathies); 크로이츠펠트-야코브병(Creutzfeldt-Jakob disease, CJD), 변형 크로이츠펠트-야코브병(variant CJD), 광우병(bovine spongiform encephalopathy, BSE), GSS(Gerstmann-Straeussler-Scheinker Syndrom), FFI(Fatal Familial Insomnia), 구루병(kuru), 및 알퍼 증후군(Alper's syndrom)을 포함하는 프리온계 신경변성(prion-based neurodegeneration); 요셉병(Joseph's disease); 급성 전이성 뇌척수염(acute disseminated encephalomyelitis); 지주막염(arachnoiditis); 중추 신경계의 도관 장애(vascular lesions of the central nervous system); 말초 신경 기능의 손상 (loss of extremity neuronal function); 샤르코-마리-투쓰병(Charcot-Marie-Tooth disease); 심장 기능부전, 천식 및 황반 변성(macular degeneration)에 걸리기 쉬운 것 등이다.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 질병을 겪고 있거나 또는 걸리기 쉬운 인간 또는 비-인간 동물에 있어서 상기 질환 및 질병을 처치하거나 예방하기 위한 방법을 포함하는 바, 이는 여기에 정의된 것과 같은 유효량의 활성 약물을 상기 인간 또는 비-인간 동물에게 투여하는 단계를 포함할 뿐만 아니라, 상기 처치 또는 예방을 위한 조성물의 제조에 있어서 활성 약물의 사용법도 포함한다.

파킨스씨병, 뇌염후 파킨스씨병, 체위성 저혈압, 자폐증, 만성 피루증후군, 중증 무기력증(myasthenia gravis) 및 램버트 이튼병 뿐만 아니라, 본 발명에서 언급한 질병 상태의 범위 내의 다른 어떤 질병들의 경우, 여기에 기술된 것과 같은 본 발명과 관련된 것이거나 또는 상기와 같이 이 분야의 종래 기술에서 인정된 것으로 기술된 것이거나 또는 유효한 치료로 자명한 것이며, 본 발명은 인지적 기능장애의 증상이 없거나; 또는 치료되고자 하는 환자에게 존재하는 인지적 기능장애의 어떤 증상으로 인한 2차적으로 또는 부수적으로 비-인지지적 신경변성; 비인지지적 신경근 변성; 운동신경-감각기관의 신경변성; 또는 인지적, 신경의 및 신경근 손상의 부재시 수용체 기능장애 또는 상실의 증상을 조건으로 적용될 수 있을 것이다.

본 발명에서 사용되는 화합물의 제조

스밀라게닌, 에피스밀라게닌, 및 살사사포게닌은 상업적으로 구입가능한 재료들이다. 이러한 재료의 공급자들로는, 시그마 알드리치, 리서치 플러스 사(Research Plus Inc.) 및 스테랄로이드 사(Steraloid Inc.) 등이 있다. 이러한 재료들의 제조 방법은 JACS p.5225(1959)에 나타낸 바와 같은 에피살사사포게닌의 제조라는 논문에서 찾아 볼 수 있다. 에피살사사포게닌은 메탈 하이드라이드 환원제를 사용하여 살사포게논을 환원시켜 제조할 수 있다. 살사사포게논은 Lajis et al, Steroids, 1993, 58, 387-389의 방법을 사용하여 제조할 수 있다.

또한, 출발 물질로 사용되는 비치환된 사포게닌은 청미래덩쿨(Smilax), 아스파라거스(Asparagus), 지모(Anemarrhena), 유카(Yucca) 또는 용설란(Agave)과 같은 유명한 식물 속(genus), 식물 종(species)의 범위의 것으로, 자연적으로 생성된 것이다. 여기서, 스밀라게닌 또는 살사사포게닌은 본 발명과 부합되도록 사용되는 바, 식물 추출 또는 건조 분말된 형태의 식물 재료의 형태로 사용되며, 청미래덩쿨(Smilax), 아스파라거스(Asparagus), 지모(Anemarrhena), 유카(Yucca) 또는 용설란(Agave)과 같은 식물 속(genus)으로부터 유래된 것이다.

활성 약물의 제조 방법은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자들에게 잘 알려져 있다. 이러한 약물의 예를 들면, WO-A-02/79221(실시예 5 내지 16에서와 같이, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 석시네이트, 에피스밀라게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드, 살사사포게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드, 에피스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드, 에피스밀라게닌 L-알라니네이트 하이드로클로라이드, 에피스 밀라게닌 L-발리네이트 하이드로클로라이드, 에피스밀라게닌 L-이소루이시네이트 하이드로클로라이드, 에피스밀라게닌 L-페닐알라니네이트 하이드로클로라이드 및 에피스밀라게닌 L-메티오니네이트 하이드로클로라이드의 제조방법을 기술하고 있음)과 같다. 화학식 4로 표시되는 화합물은, R=H인 것보다 다른 경우에, R=H인 화합물로부터 종래 기술을 이용하여 제조될 수 있다.

바람직한 반응은 친핵성 치환 반응인 바, 이는 3-위치에서 OH를 함유한 화합물과 다음 화학식 5로 표시되는 화합물과 반응한다:

L-R

여기서 R은 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 또는 아릴카바모일 중에서 선택된 것인 바, 또는 여기서 어떤 알킬기는 아릴, 아미노, 모노 알킬-아미노, 다이-알킬-아미노, 카르복실산 잔기(-COOH), 또는 이들의 어떤 조합으로 선택적으로 치환된 것이며; 및 L은 친핵성 치환에 적합한 조건 하에서의 리빙 그룹이다.

L-R 화합물의 예를 들면, 카르복실산 또는, 만일 적절하다면, 무수물, 또는 아실 할라이드(예를 들면, 아실 클로라이드)가 있다. 예를 들면, 여기서 R은 카틸레이트(에폭시카보닐) 단위일때, 상기 L-R 화합물은 에틸 클로로포메이트가 적절할 것이다.

상기 반응은 피리딘과 같은 염기 하에서 수행될 것이며, 선택적으로 염산과 같은 산(acid)의 존재하에서도 가능하다.

친핵성 치환 반응의 상세한 반응은 이미 잘 알려진 바와 같으며, 예를 들면, RC Larock, in Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989를 보라.

다이하이드로살사사포게닌은 Marker and Rohmann(1939), STerols LⅢ; The structure of the side chain of sarsasapogenin, J. Am. Chem. Soc. 61, pp846-851에 기술된 방법을 사용하여 제조될 것이다. 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올은 Scheer et al, (1955), The C-25 isomerism of smilagenin and sarsasapogenin: J. Am. Chem. Soc. 77, pp641-646에 기술된 방법을 이용하여 제조될 것이다.

여기에 기술된 방법에서는, 반응성 관능기로 보호시킬 필요가 있는 바, 이러한 관능기의 예를 들면, 하이드록시, 카르복시 또는 아미노 그룹이며, 반응 내에서 원치 않는 침전을 피하기 위하여 이러한 것들은 최종 생성물에서 요구되는 것들이다. 종래의 보호성 그룹은 스탠다드 입자에 부합되도록 사용될 것이다. 예를 들면, TW Green 및 PGM Wuts 는 "Protective groups in organic chemistry", John Wiley & Sons, 1991에서; JFW McOmie는 "Protective groups in organic chemistry", Plenum Press, 1973에서 기술한 것을 보라. 상기 화학식 5로 표시되는 화합물 L-R에서(여기서 R은 아미노-치환된 것임) 보호성 아미노 치환체는, 알콕시카보닐 보호성 그루을 사용하는 것이 바람직한 바, 그럼으로써 아미노 관능기는 합성 단계 동안, 건조 용매 내에서 산성 조건에서 디프로텍션(deprotection) 될 때까지 알콕시카보닐아미노 그룹(바람직하기로는, t-부톡시카보닐아미노)으로 존재한다.

따라서, 제조된 화합물은 종래의 방법으로 반응 혼합물로부터 회수될 것인 바, 예를 들면, 반응 혼합물로부터 용매를 증류시킴으로써 회수되거나, 또는 필요하다면 반응 혼합물로부터 용매를 증류시킨 다음 잔류물을 물 속으로 쏟아넣은 (pouring) 다음, 물-잘 섞이는 용매로 추출하고, 추출물로부터 용매를 증류시킴으로써 제조된다. 추가로, 필요하다면, 생성물은 재결정, 재침전, 또는 다양한 크로마토그래피 기술, 감지할 수 있는 컬럼 크로마토그래피 또는 예비 틴 레이어 크로마토그래피(TLC)와 같은 종래에 잘 알려진 기술에 의해 정제시킬 수 있다.

활성도(activity)에 기초한 검토

본 발명의 기초가 되는 치료학적인 사용법은 아래의 실시예에서 상세하게 기술된 바와 같이 신규한 많은 진찰로부터 발생된 것이다. 본 발명의 이론적인 원리를 이해하기 위해서는, 어떻게 상기에서 정의된 활성 약물의 범위를 넘어 본 발명에 청구된 치료학적인 활성을 예견하게 되었는지, 그러한 발견들을 요약하는 것이 유용할 것이다.

스밀라게닌, 에피스밀라게닌, 살사사포게닌 및 에피살사사포게닌은 시험관 내 실험(in vitro)에서 이러한 수용체 발현을 하는 세포 내에서 무스카린 아세틸콜린 수용체 및 아드레날린성수용체의 손실을 복원시킨다. 이러한 결과는, 상기 화합물들이 정상적인 세포의 수용체 손실(실시예 1) 쪽으로 복원시키는 것을 나타낸다.

살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌은 쥐의 피질 신경(cortical neurones) 시험관 내 실험(in vitro)에서 화학적으로 유도된 신경변성을 방지한다. 이러한 결과는, 이러한 화합 물들이 신경보호성이며 및 시험관 내 실험(in vitro)에서 신경변성 및 신경손상을 방지하는 것을 나타낸다.(실시예 2)

살사사포게닌, 스밀라게닌, 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올, 스밀라게논, 스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드 및 코프로스테롤은 쥐의 피질 신경(cortical neurones) 시험관 내 실험(in vitro)에서 화학적으로 유도된 신경변성을 역전(reverse)시킨다. 이러한 결과는, 이러한 화합물들이 시험관 내 실험(in vitro)에서 감각 기관(sensory) 신경변성 및 신경손상을 역전시키는 것을 나타낸다. (실시예 3)

스밀라게닌은 뉴런에서 화학적으로 유도된 고사(apoptosis)를 전환시키는 바, 이 화합물은 시험관 내 실험(in vitro)에서 항-고사(anti-apoptotic) 및 신경보호성을 나타낸다.(실시예 4)

스밀라게닌 및 살사사포게닌은 시험관 내 실험(in vitro)에서 그들의 향신경성(neurotrophic) 효과를 나타냄으로써, 쥐의 피질 신경 시험관 내 실험(in vitro)에서 신경돌기(neurite)의 성장(신경돌기 수 및 신경돌기 분기)을 증가시킨다. (실시예 5)

스밀라게닌 및 살사사포게닌은 중간뇌 도파민성 뉴런(mesenchephalic dopaminergic neurons)의 시험관 내 실험(in vitro)에서 신경독(neurotoxin)-유도된 신경변성(신경독 1-메틸-4-페닐피리디늄(MPP⁺)을 방지하고 역전시킨다. 이러한 결과는, 이러한 화합물들이 시험관 내 실험(in vitro)에서 신경변성 및 신경손상을 방지하거나 역전시키는 것을 나타낸다.(실시예 6 및 7)

살사사포게닌 및 스밀라게닌은 쥐의 척추 운동신경 뉴런의 시험관 내 실험(in vitro)에서 화학적으로 유도된 신경변성을 역전시킨다. 이러한 결과는, 상기 화합물들이 시험관 내 실험(in vitro)에서 운동신경 뉴런의 신경변성 및 신경손상을 역전시키는 것을 의미한다.(실시예 8)

살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 및 스밀라게닌은 늙은 쥐의 인지능력에 대한 시험관 내 실험에서의 잘못된 응답의 횟수를 감소시키는 바, 이는 테스트된 화합물로 치료한 늙은 쥐의 골수(brain)에서 무스카린성 아세틸콜린 수용체 밀도를 증가시키는 것과 서로 관련된다. 이러한 결과는, 상기 화합물들이 생체 내 실험(in vivo)에서 신경손상을 역전시키는 것을 의미한다.(실시예 9)

스밀라게닌 및 살사사포게닌은 늙은 동물에서 향신경성 인자(neutrotrophic factor)(BDNF)로부터 유도된 뇌에서의 감소(decline) 및 무스카린성 아세틸콜린 및 도파민 수용체의 감소를 역전시킨다. 이러한 결과는, 이들 화합물들이 생체 내 실험(in vivo)에서 운동신경-감각기관의 신경변성, 신경손상 및 향신경성(neurotrophic)을 역전시키는 것을 의미한다.(실시예 9)

에피살사사포게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 및 에피스밀라게닌은 신경독 약물(아이보테닉산 및 아밀로이드 β)에 노출시킨 어린 쥐의 인지적 능력의 생체 내 시험(in vivo)에서 잘못된 응답의 횟수를 감소시키며, 척수에서 무스카린성 아세틸콜린 수용체 밀도를 증가시킨다. 이러한 결과는, 상기 화합물들이 생체 내 실험(in vivo)에서 신경손상을 역전시키는 것을 의미한 다.(실시예 10)

스밀라게닌 및 살사사포게닌은 근위축성 측삭 경화층(ALS)와 샤르코-마리-투쓰(Charcot-Marie-Tooth) 질병의 쥐 모델에서 생존 및 운동신경-감각기관의 신경변성 및 신경손상을 증진시킨다. (실시예 11)

요약하면, 상기 화합물들은 특정의 신경관련된 변성의 양상을 늦추거나 역전시키는 것으로 알려져 왔다. 이는 세포 체(cell body)에서 역 변환(adverse changes)의 역전; 신경 확장의 위축; 뉴로트로핀(예를 들면, BDNF, NGF, NT-3, NT4/5), TGF-β super-family 향신경성 인자(예를 들면, GDNF) 및 뉴로킨스(neurokines, 예를 들면, CNTF, LIF)와 같은 향신경성 인자 방출의 감소; 및 신경의 독성 또는 고사(apoptosis)의 역전을 포함한다. 상기 화합물들은 강력한 신경보호성, 신경돌기의 성장의 축적, 및 신경독성의 예방성을 가진다. 이러한 화합물들은 무스카린성 아세틸콜린 및 도파민 수용체 밀도의 감소와 같은 콜린효능성 및 도파민성 기능에 있어서의 감소를 늦추거나 또는 역전시키는 것으로 알려져 왔다. 또한, 우리는 수용체 손실 효과의 신경보호성과 역전은 실제적으로 조절가능한 효과인 것을 발견했는 바, 이는 연속적으로 악화되는 상태를 보호함으로써 정상적인 또는 어린 상태로 과거의 악화(deterioration)된 상태가 역전되는 것이다. 추가로, 우리는 이러한 화합물의 고사 효과의 역전은 세포 주기의 비-종양의(non-neoplastic) 도메인에서 조절될 수 있으며, 종양(neoplasia)을 유발시키지는 않는 것임을 발견했다.

상기의 데이터는, 본 발명에서 이미 기술된 질병 상태에 강력하게 대응할 수 있는 것을 의미한다. 또한, 상기의 데이터는 암과 같은 위중하거나 또는 생명을 위협하는(life-threatening) 부작용은 없는 것으로 관찰되었다.

상기에서 기술한 종래 기술은 상기의 관찰들의 확장으로 본 발명에서 "활성 약물"이라는 용어로 포함된 관련된 화학 구조 및 유도체들에 대해 치료학적 활성의 음성-기초한 예견 및 음성 예견을 나타낸다.

당(sugar), 에스터 및 스테로이드 분자에 적절한 위치, 특별히 3- 및/또는 26-위치에서의 다른 그룹들은 생체 내에서 가수분해에 의해 쉽게 분열되며, 이러한 동일한 효과는 분자의 다른 탄소 원자에서도 기대할 수 있는 것으로 약물학 및 이 분야에서 잘 알려져 있다. 추가로, 본 발명에서 사용된 것과 같은 "활성 약물" 이라는 표현의 용어 내에 포함되는 염(salt), 자유 산(free acid) 및 자유 염기(free base)는 생체 내 시험에서 활성 약물이 존재하는 체액의 pH에 따라 서로간에 쉽게 전환될 수 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 다양한 형태의 범위에서의 사이드 그룹 치환체는 구조의 약학적 활성에 실제적으로 불리하게 작용하지 않고, 특히, 전체 분자의 크기에 비해 사이드 그룹의 크기가 작을 경우에는 탄소 골격 복합체 내에 존재할 수 있는 것으로 알려져 있다.

상기와 같은 이러한 이유들 때문에, 본 발명에서 제조된 약물학적 활성의 잇점을 나타낸 청구항들은 합리적인 것이며, 여기에서 정리하고, 존재하는 실험 데이터로부터 확실하고, 신뢰할 수 있는 것에 기초한 것이다.

한 가지 전제조건으로, 상기 화합물은 성장 인자 및/또는 신경 성장 인자로부터 유래된 뇌와 같은 향신경성(향신경성) 인자의 퇴화 속도를 감소시키고, 성장 인자 및/또는 신경 성장 인자로부터 유래된 뇌와 같은 향신경성(향신경성) 인자의 생성 또는 방출을 증가시킨다는 것이다. 성장 인자에서 이러한 효과는 세포기질 또는 핵 수용체, 또는 성장 인자인 mRNA의 생성 속도에 직접적으로 영향을 줌으로 인한 결과로 자극제 영역에서 화합물을 결합하는 또는, 다른 물질 인자의 생성이 증가된 결과로 인한 화합물의 효과 때문이다.

추가로, 상기 화합물은 수용체를 조절하는 것으로 보여진다. 예를 들면, 이러한 화합물의 일부는 뇌에서 무스카린 아세틸콜린 또는 도파민 수용체의 손실을 방지하거나 역전시키는 것으로 발견되고 있는 바, 이러한 화합물은 수용체 갯수 또는 기능 또는 전환(trunover)에서의 결핍을 수정하는 기능에 의한 것으로 생각된다.

본 발명을 실시예를 한정하지 않고 기술하기 위하여, 첨부된 도면과 실시예를 다음과 같이 나타내었다. 그러나, 본 발명은 다른 어떤 방법에서든 청구항을 한정하기 위한 것은 아니다.

도 1은 CHO-β2/m3 동시-감염된 세포 줄기에서 5일된 m3 및 β2 아드레날린성 수용체 밀도에 대한 에피스밀라게닌 아세테이트의 효과를 나타낸 것이다.

도 2는 쥐의 초생의 피질 뉴런에서 글루타메이트로 유도된 신경변성에 대한 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 및 스밀라게닌의 효과를 나타낸 것이다.

도 3은 늙은 쥐의 학습 능력 및 기억력에 있어서 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 및 스밀라게닌의 효과를 나타낸 것이다.

도 4는 무스카린 수용체 개수에 대한 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 및 스밀라게닌의 효과를 나타낸 것이다.

도 5는 스밀라게닌을 경구 투여한 후 SOD-1 쥐의 생존 프로파일을 나타낸 것이다.

도 6은 살사사포게닌을 경구 투여한 후 pmn 쥐의 생존 프로파일을 나타낸 것이다.

실시예 1 : 시험관 내 실험( in vitro )에서 수용체 손실의 복구

m 수용체용 담체로 감염되거나 또는 β2 및 me 수용체용 담체로 동시 감염된 CHO 세포의 CHO 세포 또는 β2 및 m3 수용체에서의 무스카린 아세틸콜린 수용체(m)의 발현에 대한 에피스밀라게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 석시네이트, 및 살사사포게닌의 효과를 조사하였다.

그 결과를 다음 표 1과 도면 1에 나타내었다. 배양주기 동안 CHO 세포를 m 수용체용 담체로 감염시켰으며, 에피스밀라게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 석시네이트, 및 살사사포게닌으로 처리하여 각각 수용체 갯수의 감소를 방지하였다. 배양 주기 동안 CHO 세포 를 β2와 m3 수용체용 담체로 동시 감염시켰으며, m3 수용체의 밀도는 변화가 없는 반면에, β2 아드레날린성수용체의 밀도는 감소하였다. 에피스밀라게닌 아세테이트로 배양(incubation)시킨 것은 m3 수용체의 밀도에 큰 변화를 주지 않지만, β2 아드레날린성수용체의 감소는 크게 방지하는 것으로 나타났다.

(표 1)

에피스밀라게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 석시네이트, 및 살사사포게닌의 m 아세틸콜린 수용체 밀도에 있어서의 복구 효과

화합물	농도[microM]	활성도
에피스밀라게닌 카틸레이트	10	++
살사사포게닌 카틸레이트	10	++
에피살사사포게닌 카틸레이트	10	++
에피살사사포게닌 석시네이트	10	++
살사사포게닌	10	++

따라서, 이번 실험으로 에피스밀라게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 석시네이트, 및 살사사포게닌 각각은 시간에 따른 수용체 개수의 감소를 방지할 수 있으며, 수용체 레벨이 감소되는 세포에 주어지면 수용체 개수를 정상 수준까지 복원시키는 경향이 있다는 것을 나타내었다.

실시예 2 : 살사사포게닌 , 에피살사사포게닌 카틸레이트 , 에피살사사포게닌 , 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌의 뉴런에서의 신경보호( neuroprotective ) 효과

이번 실험의 목적은 신경변성을 일으키는 것으로 알려진 글루타메이트에 노출시킨 쥐의 초생 피질 뉴런의 생존에 대한 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌의 효과를 실험하였다.

쥐의 피질 뉴런을 10일 동안 배양시켰으며, 10일 째 되는 날, 배지를 혈청이 없는 배지로 전환하였다. 12일째, 글루타메이트에 노출시키기 전 24 시간에, 배양을 세척하였으며, 배지를 양성의 대조군(β-oestradial), 테스트 화합물(살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌), 또는 부형제 대조군(DMSO, 0.25%), 또는 음성의 대조군인 디오스게닌(diosgenin)을 포함한 신선한 배지로 교체시켰다.

13일 째, 배양을 글루타메이트에 노출시켰다. 배양 기간 후, 배양을 세척하고, 글루타메이트 노출 후 24시간에 이들의 보호 효과를 증진시킬 수 있는 관련된 화합물 또는 부형제로 보충된 신선한 배지위에 두었다.

뉴런의 세포 생존은 테스트 화합물 처리 또는 글루타메이트 + 테스트 화합물 노출 후 24시간된 배지에서 방출된 락테이이트 디하이드로게나제(latate dehydrogenase, LDH) 활성도를 CytoTox 96 non-radioactive kit를 이용하여 측정함으로써 실험하였으며, 450nm에서 흡수 파장을 측정하여 정량화시켰다.

글루타메이트로 쥐의 초생 피질 배양을 노출시킴에 따라, 피질 뉴런에 중요한 변성을 가져왔으며, 24시간 후-처리는 락테이트 디하이드로게나제가 배양 배지 내로 방출의 증가로 인해 나타난 것이다.

24시간 동안 화합물로 전처리된 초생의 피질 배양에서는 글루타메이트로-유 도된 신경변성에 있어서 중요한 감소를 나타내었다. (도면 2, 표 2)

(표 2)

글루타메이트로-유도된 신경변성의 예방에 있어서 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌의 효과

조건	평균± s.e.m(%)
대조군	100
+글루타메이트	66± 3
+글루타메이트+살사사포게닌(30nM)	79± 3
대조군	100
+글루타메이트	65± 3
+글루타메이트+에피살사사포게닌 카틸레이트(30nM)	74± 3
대조군	100
+글루타메이트	68± 3
+글루타메이트+에피살사사포게닌(30nM)	88± 3
대조군	100
+글루타메이트	71± 2
+글루타메이트+에피스밀라게닌(30nM)	79± 2
대조군	100
+글루타메이트	68± 4
+글루타메이트+스밀라게닌(30nM)	91± 4
대조군	100
+글루타메이트	68± 4
+글루타메이트+디오스게닌(30nM) 음성 대조군	72± 4

살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 스밀라게닌 모두는 쥐의 초생 피질 뉴런의 생체 내 실험(in vitro)에서 글루타메이트-유도된 신경변성에 대해 탁월한 신경보호 효과를 나타냈다.

실시예 3 : 뉴런에 있어서 살사사포게닌, 스밀라게닌, 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올, 스밀라게논, 스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드 및 코프로스테롤에 의한 신경변성의 역전

상기에서 언급한 바와 같이, 쥐의 초생 피질 배양을 글루타메이트(100μM; 10min)에 노출시킴으로써 24시간 후 측정된 락테이트 디하이드로게나제 활성도의 증가로, 상당한 신경변성을 나타낸다는 것을 알 수 있다. 글루타메이트에 노출시킨 후, 17β-oestradial로 처리는 글루타메이트에 노출시킨 뉴런에 비해 LDH 활성도에서 상당한 감소를 나타냈는 바, 이는 중요한 신경보호 효과를 의미하는 것이다. 비슷하게, 살사사포게닌, 스밀라게닌, 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올, 스밀라게논, 스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드 및 코프로스테롤로 처리하면, 글루타메이트에 노출시킨 뉴런과 비교했을 때, LDH 활성도에서 상당한 감소를 나타내는 바, 이 또한 상당히 신경보호 효과를 나타내는 것을 암시한다. (표 3)

(표 3)

사전에 글루타메이트에 노출시킨 표피 뉴런에서의 여러 화합물의 효과

조건	평균± s.e.m(%)
대조군	100± 4
글루타메이트[100 μM]	66± 2
글루타메이트+17β-oestradiol[3 nM]	69± 2
글루타메이트+17β-oestradiol[30 nM]	75± 5
대조군	100± 1
글루타메이트[100 μM]	67± 3
글루타메이트+살사사포게닌[3 nM]	101± 3
글루타메이트+살사사포게닌[30 nM]	112± 1
글루타메이트+스밀라게닌[3 nM]	109± 6
글루타메이트+스밀라게닌[30 nM]	104± 1
대조군	100± 8
글루타메이트[100 μM]	40± 1
글루타메이트+디오스게닌[30 nM, 음성 대조군]	49± 6
대조군	100± 5
글루타메이트[100 μM]	64± 4
글루타메이트+16,22-에폭시코프로스탄-3β-올[3 nM]	114± 7
글루타메이트+16,22-에폭시코프로스탄-3β-올[30 nM]	134± 5
글루타메이트+스밀라게논[3 nM]	119± 7
글루타메이트+스밀라게논[30 nM]	119± 4
대조군	100± 4
글루타메이트[100 μM]	58± 3
글루타메이트+스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드[3 nM]	117± 4
글루타메이트+스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드[30 nM]	141± 6
글루타메이트+코프로스테롤[3 nM]	126± 5
글루타메이트+코프로스테롤[30 nM]	116± 4

결론적으로, 쥐의 초생 표피 뉴런에서 살사사포게닌, 스밀라게닌, 16,22-에폭시코프로스탄-3β-올, 스밀라게논, 스밀라게닌 글리시네이트 하이드로클로라이드 및 코프로스테롤은 글루타메이트에 의해 유도된 신경변성을 역전시키는 바, 이는 신경변성의 장애에서 치료 가능성을 제시하는 것이다.

실시예 4 뉴런에서 스밀라게닌의 반-고사(anti- apoptotic ) 효과

본 실험의 목적은 글루타메이트에 노출시킨 쥐의 초생 표피 배양액에서, 고사(apoptosis)의 표시인 caspase-3 활성도에서 스밀라게닌의 반-고사 효과를 측정하였다.

표피 뉴런의 1차 배양

쥐의 피질 뉴런을 6일 동안 배양시켰으며, 6일 째 되는 날, 글루타메이트(100μM, 10min)를 가하였다. 그 다음, 배양을 세척하였으며, 배지를 스밀라게닌 또는 부형제 대조군(DMSO, 0.25%)을 포함한 신선한 배지로 6시간 동안 교체시켰다. 6시간 처리 후, 카스파제 3 활성도(caspase 3 activity)를 측정함으로써 고사(apoptosis)를 측정하였다. 카스파제 3 활성도는 색상계의 카스파제-3 기질, 아세틸-ASp-Glu-Val-Asp p-니트로아닐라이드로부터 p-니트로아닐린의 분열에 의해 측정되었다. 상대적인 카스파제-3 활성도는 광학 밀도에 의해 측정되었으며, 추가로 카스파제-3의 상대적인 활성도는 샘플의 수소 농도를 정량화시킨 것으로, 이 역시 광학 밀도로서 측정되었다.(Du et al, J Neurochem., 69, 1382-1388, 1997; Sawada et al, Faseb J., 14, 1202-1214, 2000)

스밀라게닌은 쥐의 초생 피질 뉴런에서 글루타메이트에 유도된 카스파제-3 활성도의 증가를 역전시키는 바, 이는 스밀라게닌이 반-고사 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. (표 4)

(표 4)

피질 뉴런에서 글루타메이트 유도된 카스파제-3 활성도에서 스밀라게닌의 효과

조건	카스파제 활성도(% of control)
대조군	100
+글루타메이트	131
+글루타메이트+스밀라게닌(300 nM)	105

실시예 5

신견변성 장애는 뉴런의 점진적인 상실 및 뉴런 돌기(신경돌기) 변성의 특징을 가진다. 신경돌기의 자연적인 발생(outgrowth)을 유도하는 약물은 뉴런과 신경변성 질병의 증상을 개선시키는 것 사이의 새로운 관계의 형성으로 촉진된다. (Katzman et al, Faseb J., 5,278-286, 1991)

17β-oestradial(0.3,3,30 pM)에의 노출은, 쥐의 초생 피질 뉴런에서 신경돌기의 현존하는 길이를 현저히 증가시켰다.(표 5) 17β-oestradial(3,30 pM)에의 노출은, 쥐의 초생 피질 뉴런에서 신경돌기를 드러내는 뉴런의 퍼센티지를 현저히 증가시켰다.(표 6) 스밀라게닌, 및 살사사포게닌(0.3,3,30 pM)에의 노출은, 쥐의 초생 피질 뉴런에서 신경돌기의 현존하는 길이와 신경돌기를 드러내는 뉴런의 퍼센티지를 현저히 증가시켰다.(표 5, 6)

결론적으로, 스밀라게닌과 살사사포게닌은 생체 내 실험(in vitro)을 통해 향신경성 효과를 가지는 것을 확인할 수 있었다.

(표 5)

광학 측미법을 이용하여 측정된 신경돌기 길이에 있어서 17β-oestradial, 스밀라게닌 및 살사사포게닌의 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구	100± 4
17β-oestradial(0.3 pM)	154± 5
17β-oestradial(3 pM)	163± 4
17β-oestradial(30 pM)	183± 5
스밀라게닌(0.3 pM)	159± 5
스밀라게닌(3 pM)	190± 8
스밀라게닌(30 pM)	204± 6
살사사포게닌(0.3 pM)	177± 5
살사사포게닌(3 pM)	197± 5
살사사포게닌(30 pM)	211± 6

(표 6)

신경돌기를 나타내는 뉴런의 개수에 있어서 17β-oestradial, 스밀라게닌 및 살사사포게닌의 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구	47± 2
17β-oestradial(0.3 pM)	48± 2
17β-oestradial(3 pM)	60± 2
17β-oestradial(30 pM)	59± 2
스밀라게닌(0.3 pM)	63± 2
스밀라게닌(3 pM)	63± 2
스밀라게닌(30 pM)	66± 2
살사사포게닌(0.3 pM)	55± 2
살사사포게닌(3 pM)	61± 1
살사사포게닌(30 pM)	62± 2

실시예 6

스밀라게닌 및 살사사포게닌은 파킨스씨 질병의 생체 내 실험(in vitro) 모델인 쥐의 중간뇌 도파민성 뉴런에서 뉴트로톡신, 1-메틸-4-페닐피리니늄(MPP+)에 노출시킴으로써 발생된 신경변성을 방지시켰다.

뉴로톡신, MPP+, 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘(MPTP)의 대사산물(metabolite)에 의해 발생된 손상은 파킨스씨 질병과 같은 신경변성의 장애에 서 관찰되는 니그로스트리아탈 도파민성(nigrostriatal dopaminergic) 뉴런의 신경변성을 모방한다. (Mytinlineou et al, Science, 225, 529-531, 1984) 이러한 독소에 의해 유도된 가장 지배적인 생화학적 변화는 흑색질 부위 컴팩타(substantia nigra pars compacta) 및 꼬리핵(caudate nucleus)(Burns et al, Proc natl Acad Sci U.S.A., 80,4546-4550, 1983)에서의 도파민의 감소된 레벨 및 그의 대사산물, 및 니그로스트리아탈 시냅토솜의 제조(nigrostriatal synaptosomal preparation)(heikkila et al, J Neurochem., 44,310-313,1985)에서 도파민 흡수의 감소를 포함한다.

스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 도파민성 뉴런의 전처리는 MPP⁺ 단독으로 한 것과 비교했을 때, 특정의 도파민성 뉴로톡신 MPP+(2μM)의 노출로 인한 뉴런의 소멸을 현저하게 감소시켰다. Glial 세포 줄기-유도된 향신경성 인자(GDNF)와 뇌-유도된 향신경성 인자(BDNF), 뉴런의 성장과 관계된 분자들은 양성의 대조군으로 사용되었다. 스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 전처리는 MPP⁺ 단독으로 노출시킨 뉴런에 비해 뉴런의 생존에 있어서 현저한 증가를 나타내는 바, 이는 중요한 신경보호 효과를 암시한다.(표 7)

(표 7)

MPP+(2μM) 노출된 후 도파민성 뉴런에 있어서 BDNF 및 GDNF, 스밀라게닌 및 살사사포게닌의 전처리 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구	100± 3
+MPP+(2 μM)	55± 3
+MPP+(2 μM) + BDNF(1.85nM) & GDNF(0.17nM)	122± 7
+MPP+(2 μM) + 스밀라게닌(30 nM)	98± 4
+MPP+(2 μM) + 살사사포게닌(30 nM)	89± 3

스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 전처리된 파킨스씨 질병의 시험관 내 실험(in vitro) 모델에서는, 특정의 도파민성 뉴로톡신, MPP+에 노출됨에 따라 신경의 변성을 현저하게 방지시키는 바, 이는 신경보호 효과를 나타내는 것을 의미한다.

실시예 7

또한, 스밀라게닌 및 살사사포게닌은 파킨스씨 질병의 시험관 내 실험(in vitro) 모델인 쥐의 중간뇌 도파민성 뉴런에서 뉴로톡신 1,-메틸-4-페닐피리디늄(MPP⁺)에 노출되어 발생된 신경변성을 역전시켰다.

스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 처리된 도파민성 뉴런은 MPP⁺ 단독으로 처리된 것과 비교했을 때에 비해 특정의 도파민성 뉴로톡신 MPP⁺(2μM)에 노출시킴으로써 뉴런의 고사를 현저하게 감소시켰다. Glial 세포 줄기-유도된 향신경성 인자(GDNF)와 뇌-유도된 향신경성 인자(BDNF), 뉴런의 성장과 관계된 분자들, 및 17β-oestradial을 양성의 대조군으로 사용되었다. 스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 처리는 MPP⁺ 단독으로 노출시킨 뉴런에 비해 뉴런의 생존에 있어서 현저한 증가를 나타냈다. (표 8)

(표 8)

MPP⁺(2μM) 노출 후 도파민성 뉴런에 있어서, BDNF 및 GDNF, 스밀라게닌, 살사사포게닌 및 17β-oestradial 처리 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구	100± 6
+MPP⁺(2 μM)	76± 4
+MPP⁺(2 μM) + BDNF(1.85nM) & GDNF(0.17nM)	98± 5
+MPP⁺(2 μM) + 스밀라게닌(30 nM)	111± 6
+MPP⁺(2 μM) + 살사사포게닌(30 nM)	112± 6
+MPP⁺(2 μM) + 17β-oestradial(30 nM)	106± 5

MPP⁺에의 노출은 도파민성 개수의 현저한 감소뿐만 아니라, 신경돌기의 퍼센티지에서도 현저한 감소를 나타냈다. 이러한 연구는 스밀라게닌 및 살사사포게닌은 뉴런의 시험관 내 실험에서 신경돌기 개수를 표 9에서와 같이 현저하게 증가시키는 것을 나타냈다. 이러한 결과는 상기 화합물이 운동신경 신경변성을 역전시키는 것을 나타낸다.

(표 9)

MPP⁺(2μM) 노출 후 도파민성 뉴런에 있어서 스밀라게닌 및 살사사포게닌의 신경돌기 퍼센티지의 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구	41± 4
+MPP⁺(2 μM)	27± 5
+MPP⁺(2 μM) + 스밀라게닌(0.03 nM)	41± 4
+MPP⁺(2 μM) + 살사사포게닌(0.03 nM)	43± 4

실시예 8 척추의 운동신경 뉴런에 있어서 살사사포게닌 및 스밀라게닌의 신경보호 효과

본 실험의 목적은 운동신경 신경변성의 모델에서 신경변성을 유발하는 것으로 알려진 글루타메이트에 노출시킨 쥐의 초생 척추 운동신경 뉴런의 생존에 있어서 살사사포게닌과 스밀라게닌의 효과를 측정하였다.

척추의 운동신경 뉴런의 일차 배양

쥐의 운동신경 뉴런을 Maritinou et al, Neuron, 8, 737-744에 기술된 것과 같은 방법에 따라 제조하였다. 10일째, 배지를 제거하였으며, 배양액을 37℃에서 10분 동안 규정된 배지에서 그루타메이트(4μM)에 노출시켰다. 글루타메이트에 노출시킨 다음, 배지를 37℃에서 Eagle 배지로 변형된 Dulbecco로 세척한 다음, 테스트 화합물을 포함한 신선한 배양 배지에 놓았다. 48시간 후, 척추의 운동신경 뉴런 변성의 한계를 상기와 같이 배양 배지 속으로 방출된 락테이트 디하이드로게나제(LDH)의 함량을 측정함으로써 측정하였다.

결과

글루타메이트에 노출시키고, 쥐의 초생 척추의 운동신경 뉴런의 현저한 변성은, 48시간 후처리시켜, 배양 배지 속으로 락테이트 디하이드로게나제 방출이 증가되는 것을 나타냈다.

살사사포게닌 또는 스밀라게닌으로 48시간 동안 처리시킨 초생 쥐의 척추 운 동신경 뉴런은 글루타메이트로 유도된 신경변성을 현저하게 감소시켰다. (표 10)

(표 10)

척추의 운동신경 뉴런에 있어서 그루타메이트로 유도된 신경변성에 있어서 스밀라게닌 및 살사사포게닌의 효과

조건	Mean± s.e.m(%)
대조구+DMSO(0.25%)	100± 1
글루타메이트[4μM] + DMSO[0.25%]	94± 1
글루타메이트 + BDNF[3 nM]	148± 8
글루타메이트 + 17β-oestradiol[0.03 nM]	102± 2
글루타메이트 + 17β-oestradiol[3 nM]	110± 1
글루타메이트 + 17β-oestradiol[300 nM]	116± 6
글루타메이트 + 살사사포게닌[0.03 nM]	123± 2
글루타메이트 + 살사사포게닌[3 nM]	137± 1
글루타메이트 + 살사사포게닌[300 nM]	136± 6
글루타메이트 + 스밀라게닌[0.03 nM]	128± 4
글루타메이트 + 스밀라게닌[3 nM]	154± 1
글루타메이트 + 스밀라게닌[300 nM]	144± 4

살사사포게닌과 스밀라게닌은 운동신경 변성의 모델인 쥐의 척추 운동신경 뉴런의 생체 내 실험에서 글루타메이트에 의해 유도된 신경변성을 역전시키는 것을 확인하였다.

실시예 9

인생의 두 번째 절반에서는(인간에 있어서, 40세 전방으로부터) 뇌에 있어서 뉴런의 밀도는 감소한다.(Selkoe, D J. Sci. Am. 267, 134-142, 1992) 피질의 기능이 변화되는 것은 뉴런의 갯수, 이들의 상호관계의 감소, 향신경성 인자로부터 유도된 뇌와 같은 뉴로트로핀에 있어서의 감소(BDNF; Bothwell, M, Functional interactions of neurotrophins and neurotrophin receptors, Annu. Rev. Neurosci., 18-223-253, 1995), 아세틸콜린 수용체 밀도에 있어서의 감소(무스카린성 및 니코틴성) 및/또는 피질 영역(Rinne et al, Brain Res., 336, 19-25, 1985; Selkoe, D J, Sci. Am. 267, 134-142, 1992) 에서 이들의 커플링 기능의 감소 때문이다. 더욱이, 나이가 들어가는 동안, 무스카린성 아세틸콜린 수용체 결합은 해마(hippocampus, Narang, N, Mech. Ageing Dev., 78, 221-239, 1995) 및 늙은 쥐의 선조체(striatum)(Beigon et al, Neurobiol, Aging., 10, 305-310, 1989), 및 인간(Rinne et al, Brain Res., 336, 19-25, 1985)에서 현저하게 감소된다. 또한, 알츠하이머병의 경우, 콜린효능성 활성의 감소는 아밀로이드 β 플라그의 침착(deposition)과 관계된다.(von der Kammer et al, Biochem. Soc. Symp. 131-140, 2001). 파킨스씨 질병과 같은 다른 신경변성 장애는 도파민성 활성도에서의 감소를 나타내는 특징이 있다.(Drukarch et al, Expert. Opin. Investig. Drugs, 10, 1855-1868, 2001)

늙은 쥐(Sprague-Dawley rats 20 month old)에 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 또는 스밀라게닌을 2개월 또는 3개월 동안 경구 투여함으로써 학습 및 기억력에 있어서의 손상, 무스카린성 아세틸콜린 및 도파민 수용체에 있어서의 감소, 및 뉴트로핀 BDNF에 있어서의 감소, 노령의 과정의 특징으로 나타나는 변형을 역전시킨다.

늙은 Sprague-Dawley rats를 다른 그룹으로 분리하고, 하나의 대조군과 다른 그룹들은 2-3개월 동안 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 또는 스밀라게닌(18mg/kg.day, n=10)으로 처리하였다. 처리되지 않은 어린 쥐의 대조군(n=14)을 본 실험에 포함시켰다. 약물의 일일 도스를 최소량의 음식에 섞었으며, 각각의 쥐에 매일 아침마다 나누어서 투여하였다.

학습 및 기억력 실험을 Y-maze 기구를 이용하여 수행하였다. Y-maze의 각각의 상지(arm)의 밑면에 구리 막대를 정렬시켜, 필요할 때마다 적절한 전압의 전기적 전류를 가하였다. 각각의 상지의 길이는 45cm이고, 끝에는 15W 램프를 설치하여 필요할 때마다 켰다. 3개월 간의 약물 투여 후, 각각의 쥐를 7일 동안 다음과 같이 계속해서 훈련시켰다. 각각의 훈련 기간동안, 쥐를 Y-maze의 한쪽 상지에 놓아, 2분 동안 놓아 둔 다음, 전기적 전류를 구리 막대에 가하고, 오른쪽으로 또는 상지의 램프를 밝게 비춰서 비-자극(non-stimulation) 부위를 나타내게 하였다. 만일 쥐가 그 상지 쪽으로 들어가게 되면, 하나의 옳은 응답으로 기록하였으며, 그렇지 않을 경우, 하나의 틀린 응답으로 기록하였다. 이러한 자극-응답(stimulation-response) 테스트는 매일 20회에 걸쳐 반복하였으며, 각각 두 번의 연속된 시험 사이에 5초 동안의 휴식기를 가졌다.

7일째 20번의 테스트 후에 옳은 응답의 횟수를 학습 능력의 발현으로 사용하였다(횟수가 높을수록 학습 능력은 더 높은 것임). 그 다음, 쥐를 30일 동안 쉬게 한 다음, 이러한 과정을 한번 더 반복하였다. 30일 동안의 휴식 기간 후에, 20회의 테스트에서 옳은 응답의 횟수를 기억력을 나타내는 수치로 사용하였다.

뇌에서 무스카린 아세틸콜린 수용체 밀도를 측정하였다. 조직은 다음과 같이 제조하였다. 쥐의 목을 베고, 재빨리 뇌를 빼낸 다음, 냉동 건조시켜 냉동장치로 이송하였다. 이 뇌를 균질화시키고, 최종적으로 펠렛을 완충액에 띄워놓았다.

이중-점 경쟁적 리간드 결합 시험(dual-site competitive ligand binding assay)을 무스카린 아세틸콜린 수용체 밀도를 측정함으로써 사용하였다.

그 결과를 다음 도면 3 및 4에 나타내었다. Y-maze 실험을 통한 결과, 늙은 쥐에서 학습 능력과 기억력 모두 손상을 입은 것으로 밝혀졌다. 그러나, 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 및 스밀라게닌을 늙은 쥐에게 투여한 후에는, 학습 및 기억력이 복원되었다. 무스카린 아세틸콜린 수용체 밀도는 늙은 쥐에서 눈에띄게 감소되었다. 살사사포게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트 및 스밀라게닌은 무스카린 아세틸콜린 수용체 수를 상당부분 복원시켰다.

어린 쥐의 경우 늙은 쥐(129.2± 36.8; 153.8± 40.5 fmol/mg protein, D1 과 D2, 각각)에 비해 현저하게 높은 도파민(D) 1 및 2 수용체 밀도(157.7± 33.2; 200.6± 50.9 fmol/mg protein, 각각)를 나타내었다. 반대로, 3개월 동안 스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 처리된 늙은 쥐는 D1 및 D2의 수용체 밀도(스밀라게닌 177ㅁ 10.9; 217ㅁ 45.7fmol/mg protein, 살사사포게닌 172.0ㅁ 44.0; 206.4ㅁ 60.5,각각)를 복원시켰다.

또한, 어린 쥐의 경우 늙은 쥐(1.205± 0.219 ng/g tissue)에 비해 현저하게 높은 BDNF 레벨(1.647± 0.277 ng/g tissue)을 나타냈다. 반대로, 3개월 동안 스밀라게닌 및 살사사포게닌으로 처리된 늙은 쥐는 BDNF 레벨(1.342± 0.07; 1.410± 0.232 ng/g tissue, 각각)을 부분적으로 복원시켰다.

따라서, 상기 화합물들은, 신경손상, BDNF 레벨의 감소 및 늙은 쥐에서 발생된 무스카린 아세틸콜린 및 도파민 수용체 밀도의 감소를 역전시켰다.

실시예 10

신경변성 모델로서의 알츠하이머 질병 모델

알츠하이머 병의 in vivo 모델을 신경변성 모델로 사용하였다. 이 모델에서 뉴로톡신 약물(아밀로이드 베타 및 이보테닉 산)을 쥐의 뇌로 주입시켰는 바, 이는 뇌에서 수용체 손실 및 인지적 손상을 주도하기 때문이다. 이전의 연구들에서는 쥐 뇌의 핵 도관(nucleus vasalis)에서 아밀로이드 β의 국부적인 주입은 수술 후 2개월까지 콜린의 저기능(cholinergic hypofunction) 및 행동의 손상을 유발시킨다고 밝히고 있다(Giovannelli et al., 1995:Neuroscience, 66, 781-792.). 또한, 쥐의 해마상 융기(hippocampus) 내로 아밀로이드 β와 소량의 이보테닉 산을 동시-주입시킴으로써, 주입된 부위에 근접된 것 뿐만 아니라 멀리 떨어져 있는 글리아 세포의 침윤(infiltration)으로 인한 뉴런의 손실을 공동으로 생성시킨다(Morimoto et al., 1995 : Neuroscience, 84, 479-487).

본 발명의 연구에서는 Morimoto 방법(Morimoto et al., 1998:Neuroscience, 84, 479-487)에 약간의 변형(양측의 주입 대신에 단독으로)을 가하여 사용하였다. 3개월된 Sprague Dawley 쥐를 각각의 다른 그룹으로 무작위로 분할하였다. 아밀로이드 β_1-40과이보테닉 산(모두 Sigma로부터 구입한 것임)의 주입은 정위법 기구(stereotaxic instrument, Stoelting 사 제품)를 이용하였으며, 좌표(coordinate)는 AP=-0.5mm(중간 라인의 오른쪽), L=-2.8mm(브레그마로부터 뒤쪽으로), H=-7.0mm(경내막의 하부) 으로 하였다. 각각의 쥐에 대한 도스는 염수(saline) 1㎕ 중 아밀로이드_1-40(4㎍) 및 이보테닉 산(1㎍) 으로 하였다. 주입은 20분 내에 끝마쳤으며, 주사바늘은 10 분 후에 제거하였다. 그 다음 피부를 봉합시켰다.

8 그룹은 다음과 같다:

- 정상의 염수를 주입시켜 조작된 대조구(대조구)

- 모델(아밀로이드 β + 이보테닉 산을 주입시킨 대조구)

- 모델 + 에피살사사포게닌 카틸레이트(18mg/kg/day)^*

- 모델 + 살사사포게닌 카틸레이트(18mg/kg/day)^*

- 모델 + 에피살사사포게닌 에틸석시네이트(18mg/kg/day)^*(비교구)

- 모델 + 에피살사사포게닌(18mg/kg/day)^*

- 모델 + 에피스밀라게닌(18mg/kg/day)^*

- 모델 + 디오스게닌(즉, 음성 대조구, 18mg/kg/day)^*

여기서 *는 본 발명과 부합되는 화합물이다.

에피살사사포게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사포게닌 에틸석시네이트(비교 화합물), 에피살사사포게닌, 에피스밀라게닌 및 디오스게닌(이들 모두의 복용량은 18mg/kg/day임)을 위관(gastric tube)을 통해서 1일 1회 CMC-Na(0.5%)의 안정한 현탁액으로 동물에게 투여시켰다. 대조구 및 모델 그룹은 1일 1 회 CMC-Na(0.5%)의 동일한 부피로 투여시켰다. 약물 및 부형제를 시행 전 20일부터 시작하여 2달 동안 투여하였다.

무스카린 아세틸콜린성 수용체 밀도를 측정하였다. 뇌 샘플을 균질화시키고, 원심분리시켜, 27000xg에서의 원심분리 샘플을 재-균질화시켜 측정용으로 사용하였다. ³H-QNB의 농도는 포화 범위에서 선택하였다. 배양 및 분리 후, 결합 부분을 액체 신틸레이션 계산기로 측정하였다.

단계적 시험 : 시험 화합물의 기억력 효과는 단계적 시험을 통하여 평가하였다. 60x15x15 cm의 박스를 동일한 크기를 가진 공간으로 분할시켜, 하나는 어두운 공간에 구리 막대 염기를 이용하여, 사용시 전기적으로 가하였으며(40 V ac), 반면 다른 하나는 밝은 공간으로 전기를 가하지 않았다. 두 공간 사이에 통로(구멍)를 두어 쥐가 지나 다닐 수 있도록 하였다. 이번 실험은 각각의 쥐를 이용하여 이틀 동안 연속으로 수행하였다. 첫날은 연습을 시켰으며; 이때 쥐는 처음 3분 동안에 박스에 적응하도록 하고, 그 다음, 밝은 공간에 놓아두고, 쥐의 후면을 통로쪽으로 향하게 하였으며, 어두운 공간에서는 구리 막대에 5분 동안 전기를 가하였다. 둘째 날에는, 시험을 위한 기간으로, 5분 동안 가로지르는 횟수를 기록하였다. 기억력의 개선 여부는 가로지르는 횟수의 감소에 의해 알 수 있었다.

신경변성 모델의 뇌에서의 무스카린 수용체의 밀도는 대조구에 비해 현저하게 낮은 것으로 관찰되었다. 에피살사사포게닌 카틸레이트, 살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 및 에피스밀라게닌은 뇌에서의 무스카린 아세틸콜린성 수용 체 밀도를 상당히 상승시키는 것으로 발견됐는 바, 반면, 디오스게닌 및 에피살사사포게닌 에틸석시네이트는 무스카린 아세틸콜린성 수용체 밀도에 중요한 변화를 나타내지 않았다. 따라서, 이러한 실험을 통해, 본 발명의 화합물은 수용체 수를 정상으로 하는 역할을 하는 바, 즉, 수용체 수준이 저하된 동물에 가하였을 때, 본 발명의 화합물은 수용체 수를 정상의 수준으로 유지하는 경향이 있는 것으로 보여진다.

5분 내에 다수의 잘못된 응답(error number)은 대조구에 비해 신경변성 모델 그룹에서 더 높게 나타났는 바, 이는 기억력의 손상을 의미한다(다음 표 11을 보라). 각각의 에피스밀라게닌, 에피살사사포게닌 카틸레이트, 에피살사사포게닌 및 살사사포게닌 카틸레이트는 상기와 같은 잘못된 응답의 횟수가 현저하게 감소된 것을 볼 수 있는 반면, 디오스게닌 및 에피살사사포게닌 에틸석시네이트는 잘못된 응답의 횟수를 감소시키는 데 모두 효과적이지 못하다.

(표 11)

그룹	무스카린 수용체 밀도 (fmol/mg/protein)	단계를 통한 학습 및 기억력의 시험 (Error No)
대조구(n=10)	859 ± 101	0.60 ± 0.70
모델(n=10)	713 ± 48	4.00 ± 2.40
모델+에피살사사포게닌 카틸레이트(n=10)	877 ± 89^*	1.36 ± 0.92^*
모델+살사사포게닌 카틸레이트(n=11)	916 ± 158	1.36 ± 1.03^*
모델+에피살사사포게닌 에틸석시네이트(n=11)	774 ± 79	3.73 ± 1.35
모델+에피살사사포게닌(n=10)	869 ± 104^*	1.50 ± 1.18^*
모델+에피스밀라게닌(n=11)	877 ± 90^*	1.73 ± 0.91^*
모델 + 디오스게닌(n=8)	770 ± 68	3.75 ± 1.49
쌍을 이루지 않은 학생의 t 시험을 이용하여 통계적으로 분석한 것임. *는 p<0.05를 의미한다.

실시예 11

근위축성 측삭경화증(ALS)는 운동신경 뉴런의 변성, 골격의 위축, 중풍 및 죽음을 유발하는 치명적인 진행성 신경변성 장애이다. 이 질병의 발생은 이종적(heterogeneous)인 바: Cu/Zn 슈퍼옥사이드 디스무타제(SOD-1) 유전자 변성(mutation)은 인간에게 ALS 의 몇몇 형태의 원인이 된다. 이 병에 대한 동물 모델은 SOD-1 유전자 전반에 걸쳐 발현하는 SOD-1 이식 유전자 쥐와 진행성 운동신경의 신경장애(pmn, Charcot-Marie-Tooth 모델) 쥐를 포함한다. 스밀라게닌과 살사사포게닌은 생명체의 수명(lifespan)을 증가시키고, ALS와 Charcot-Marie-Tooth 질병의 두 모델인 SOD 쥐(도면 5)와 pmn 쥐(도면 6)의 행동 장애를 증진시켰다.

상기에서 광범위하게 본 발명을 기술하였다. 그러나, 이 분야의 능숙한 기술자들은 본 발명 및 부수적인 특허의 범위 내에서 의도하는 바를 쉽게 변형 및 변화시킬 수 있다는 것을 인식할 수 있을 것이다.

본 발명의 사포게닌, 이와 관련된 화합물 및 이들의 유도체는 비-인지적 신경변성(non-cognitive neurodegeneration), 비-인지성 신경근육 변성(non-cognitive neuromuscular degeneration), 운동신경-감각기관의 신경변성(motor-sensory neurodegeneration), 또는 수용체 기능장애 또는 상실(loss)에 있어서의 치료법에 사용된다.

Claims

다음 화학식 4로 표시되는 화합물, 상기 화합물의 입체이성질체, 상기 화합물의 라세미 혼합물, 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 염(salts) 및 이들의 혼합물(mixture)로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 인간 또는 비인간 동물에게 있어서 운동신경 감각기관 질환(motor neurone diseases)의 치료 또는 예방용 조성물.

화학식 4

상기 식에서, R은 수소 원자; 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 아릴카바모일; 설포(HO₃S); 포스포노((HO)₂P(O)-); 단당류; 이당류 또는 삼당류이고,

상기 알킬은 탄소수 1 내지 20인 것이며, 상기 아릴은 탄소수 3 내지 12인 것이고, 상기 아실은 H-CO- 또는 알킬-CO- 그룹으로, 상기 알킬-CO-의 알킬은 탄소수 1 내지 20인 것이며,

상기 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 아릴카바모일; 설포(HO₃S); 포스포노((HO)₂P(O)-); 단당류; 이당류 또는 삼당류의 알킬기는 선택적으로 아릴, 아미노, 모노-알킬-아미노, 다이-알킬-아미노, 카르복실산 잔기(-COOH) 및 이들의 조합(combination)으로 이루어진 군중에서 선택된 어느 하나로 치환된 것이다
다음 화학식 4로 표시되는 화합물, 상기 화합물의 입체이성질체, 상기 화합물의 라세미 혼합물, 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 염(salts) 및 이들의 혼합물(mixture)로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 인간 또는 비인간 동물에게 있어서 운동신경 감각기관 질환(motor neurone diseases)의 치료 또는 예방용 조성물.

화학식 4

상기 식에서, OR은 하이드록시, 카틸레이트(cathylate), 아세테이트, 석시네이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 발러레이트, 이소발러레이트, 카프로에이트, 이소카프로에이트, 다이에틸아세테이트, 옥타노에이트, 데카노에이트, 라우레이트(laurate), 미리스테이트(myristate), 팔미테이트(palmitate), 스테아레이트, 벤조에이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 시나메이트(cinnamate), p-니트로벤조일옥시(p-nitrobenzoyloxy), 3,5-다이니트로벤조일옥시(3,5-dinitrobenzoyloxy), p-클로로벤조일옥시(p-chlorobenzoyloxy), 2,4-다이클로로벤조일옥시(2,4-dichlorobenzoyloxy), p-브로모벤조일옥시(p-bromobenzoyloxy), m-브로모벤조일옥시(m-bromobenzoyloxy), p-메톡시벤조일옥시(p-methoxybenzoyloxy), 프탈일(phthalyl), 글리시네이트, 알라니네이트(alaninate), 발리네이트(valinate), 페닐알라니네이트(phenylalaninate), 이소로우시네이트(isoleucinate), 메티오니네이트(methioninate), 아르기니네이트(argininate), 아스파테이트(aspartate), 시스테이네이트(cysteinate), 글루타미네이트(glutaminate), 히스티디네이트(histidinate), 리시네이트(lysinate), 프로리네이트(prolinate), 세리네이트(serinate), 트레오니네이트(threoninate), 트립토파네이트(tryptophanate), 티로시네이트(tyrosinate), 푸머레이트(fumerate), 말러에이트(maleate) 또는 이들의 조합(combination)으로 치환된 것 중에서 선택된 것이다
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 활성물질은 다음 화합물로부터 선택된 1종 이상의 것인 치료 또는 예방용 조성물.

-살사사포게닌,

-살사사포게닌 카틸레이트,

-살사사포게닌 아세테이트,

-살사사포게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-살사사포게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌,

-에피살사사포게닌 카틸레이트,

-에피살사사포게닌 아세테이트,

-에피살사사포게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피살사사포게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌,

-스밀라게닌 카틸레이트,

-스밀라게닌 아세테이트,

-스밀라게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-스밀라게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌,

-에피스밀라게닌 카틸레이트,

-에피스밀라게닌 아세테이트,

-에피스밀라게닌 석시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 글리시네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 알라니네이트(alaninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 발리네이트(valinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 페닐알라니네이트 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 아이소루이시네이트(isoleucinate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염,

-에피스밀라게닌 메티오니네이트(methioninate) 및 약학적으로 용인된 이들의 염;

- 살사사포게닌, 에피살사사포게닌, 스밀라게닌 및 에피스밀라게닌의 사포닌 유도체로서, 각각의 경우에서 3-위치의 탄소원자는 O-당 단위를 가지고 있으며, 상기 O-당 단위의 당 그룹(sugar group)은 글루코스, 만노스, 과당(fructose), 갈락토스, 말토스, 셀로비오스(cellobiose), 수크로스(sucrose), 람노스(rhamnose), 자일로스(xylose), 아라비노스(arabinose), 푸코스(fucose), 퀴노보스(quinovose), 아피오스(apiose), 락토스, 갈락토스-글루코스, 글루코스-아라비노스, 푸코스-글루코스, 람노스-글루코스, 글루코스-글루코스-글루코스, 글루코스-람노스, 만노스-글루코스, 글루코스-(람노스)-글루코스, 글루코스-(람노스)-람노스, 글루코스-(글루코스)-글루코스, 갈락토스-(람노스)-갈락토스 및 이의 아실화 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 것.
제3항에 있어서, 상기 활성물질은 살사사포게닌 및 스밀라게닌으로부터 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상의 것임을 특징으로 하는 치료 또는 예방용 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 운동신경 감각기관 질환(motor neurone diseases)은 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)인 것을 특징으로 하는 치료 또는 예방용 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료 또는 예방용 조성물은 1종 이상의 활성물질에 1종 이상의 추가약물을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 치료 또는 예방용 조성물.
제6항에 있어서, 상기 추가약물은 콜린에스테라제(cholinesterase) 억제제, 도파민 작용제, 카테콜-O-메틸 트랜스퍼라제(catechol-O-methy transferase, COMT) 억제제, 모노아민 산화효소 B(monoamine oxidase B, MAO-B) 억제제, 항-콜린효능제(anti-cholinergics), 아세틸콜린 작용제, 세로토닌 작용제(serotonin agonists), 알파-아미노-3-하이드록시-5메틸-4-이속사졸프로피온산(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxasole proprionic acid, AMPA) 수용체 작용제, GABA 수용체 작용제, N-메틸-D-아스파트산염(N-methyl-D-aspartate, NMDA) 수용체 작용제, β-아드레날린성수용체 작용제, 디고신(digoxin), 도부타민(dobutamine), 소염제(anti-inflammatories), 향신경성 인자(neurotrophic factors), 스타틴(statins), 아데노신 A2a 수용체 길항제(adenosine A2a receptor antagonists), 알도스 환원효소 억제제(aldose reductase inhibitors), 면역조절물질(immunomodulators), 칸나비노이드 작용제(cannabinoid agonist), 인터페론 β 및 트리사이클릭 항-진정제(tricyclic anti-depressant)로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 치료 또는 예방용 조성물.
제7항에 있어서, 상기 치료 또는 예방용 조성물은 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)의 치료 또는 예방용인 것을 특징으로 하는 치료 또는 예방용 조성물.
다음 화학식 4로 표시되는 화합물, 상기 화합물의 입체이성질체, 상기 화합물의 라세미 혼합물, 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 염(salts) 및 이들의 혼합물(mixture)로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 인간 또는 비인간 동물에게 있어서 운동신경 감각기관 질환(motor neurone diseases)의 개선 또는 예방용 식품 조성물.

화학식 4

상기 식에서, R은 수소 원자; 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 아릴카바모일; 설포(HO₃S); 포스포노((HO)₂P(O)-); 단당류; 이당류 또는 삼당류이고,

상기 알킬은 탄소수 1 내지 20인 것이며, 상기 아릴은 탄소수 3 내지 12인 것이고, 상기 아실은 H-CO- 또는 알킬-CO- 그룹으로, 상기 알킬-CO-의 알킬은 탄소수 1 내지 20인 것이며,

상기 알킬카보닐; 알콕시카보닐; 알킬카바모일; 아릴카바모일; 설포(HO₃S); 포스포노((HO)₂P(O)-); 단당류; 이당류 또는 삼당류의 알킬기는 선택적으로 아릴, 아미노, 모노-알킬-아미노, 다이-알킬-아미노, 카르복실산 잔기(-COOH) 및 이들의 조합(combination)으로 이루어진 군중에서 선택된 어느 하나로 치환된 것이다