KR100964603B1 - 주목과 뽕나무 추출물을 이용한 당뇨 치료용 약학 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents

주목과 뽕나무 추출물을 이용한 당뇨 치료용 약학 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 당뇨병 또는 고혈압 치료제로 사용할 수 있는 주목과 뽕나무가 혼합된 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎이 혼합된 추출물에 대한 것이다. 솔잎을 비롯하여 뽕나무의 뿌리인 상백피 혹은 뽕나무 잎과 줄기 등은 당뇨병이나 고혈압에 효과가 있다고 알려져 있지만 주목이 당뇨병과 고혈압의 치료제로 사용된 사례는 본 발명이 처음이다. 본 발명의 주목에 뽕나무가 혼합된 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎이 혼합된 추출물은 뽕나무나 솔잎 단일 추출물보다 동물 및 사람에게서 당뇨 및 고혈압에 대한 현저한 효과를 나타내었다.

Description

주목과 뽕나무 추출물을 이용한 당뇨 치료용 약학 조성물 및 이의 제조 방법{Phamaceutical composition of diabetes mellitus using extract of Taxus cuspidata and mulberry tree, and mamufacturing method thereof}
본 발명은 주목과 뽕나무가 혼합된 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎이 혼합된 추출물을 이용한 당뇨병 또는 고혈압의 치료제 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.
현대인에게 있어서 식습관이 서구화됨에 따라 비만과 고지혈증, 고혈압 및 당뇨와 같은 생활 습관병의 발생율이 현저히 증가하고 있어 심각한 사회문제가 되고 있다. 특히, 한국인의 당뇨병 발생율은 최근 10년 사이에 급증하여 한국인의 사망요인 중 4위에 이르고 있는 실정이다. 당뇨병(Diabetes mellitus)은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 등의 대사질환의 일종으로, 혈중 포도당의 농도가 높아지는 고혈당을 특징으로 하며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으키고 소변에서 포도당을 배출하게 된다. 당뇨병의 진단은 혈액검사로 진단한다. 증상이 없는 경우 8시간 이상 금식 후에 측정한 혈당이 126mg/dL 이상이거나, 경구 당부하 검사 2시간 후 혈당이 200mg/dL 이상인 경우를 당뇨병이라 한다. 물을 많이 마시거나 소변이 많아지고 체중이 감소하는 동시에 식사와 무관하게 측정한 혈당이 200mg/dL 이상일 때도 당뇨병으로 진단한다.
당뇨병은 전 세계적으로 중요한 성인병 중의 하나로서, 최근 우리나라에서도 급속한 경제 성장과 더불어 당뇨병 유병률이 7~8％에 달하며, 특히 합병증이 유발되기까지 전반적으로 수명이 길어짐에 따라 당뇨병 환자들은 합병증의 고통을 피할 수 없게 되었다. 일반적으로 당뇨병에 걸린 후 10~20년이 지나면 체내 거의 모든 기관이 손상을 받아 당뇨성 망막병증(diabetic retinopathy), 당뇨성 백내장(diabetic cataract), 당뇨성 신증(diabetic nephropathy), 당뇨성 신경병증(diabetic neuropathy) 등으로 나타난다. 만성 당뇨성 신증은 혈액 투석 치료 및 말기 신부전의 가장 중요한 원인이 되고 있으며, 당뇨성 백내장은 실명을 초래하고 결국엔 죽음에 이른다. 당뇨병의 치료는 일반적으로 식이요법이나 운동요법 및 약물요법 등을 병행하고 있는데, 이들 모두 지속적으로 정상 혈당을 유지시켜 당뇨합병증을 예방 또는 지연시키는 데 목표를 두고 있다.
고혈압(Hypertension)은 정상 범위를 넘어서서 지속적으로 높은 혈압을 의미하는 것으로, 18세 이상의 성인에서 수축기 혈압이 140mmHg 이상이거나 확장기 혈압이 90mmHg 이상인 경우를 말한다. 수축기 혈압은 심장이 수축하면서 혈액을 내보낼 때 혈관에 가해지는 압력이고, 확장기 혈압은 심장이 확장(이완)하면서 혈액을 받아들일 때 혈관이 받는 압력이다.
고혈압에는 최고 혈압만이 높은 경우와 최고 혈압과 최저 혈압 양쪽이 모두 높은 경우가 있는데, 보통 고혈압이라고 하는 것은 후자의 경우가 많고 최고 혈압만이 높은 경우는 심장에서 보내는 혈액량이 많아질 때와 대동맥의 탄력성이 감소되어 있을 때, 즉 어떤 종류의 심장판막증이거나 갑상선기능항진증, 대동맥경화, 대동맥류(大動脈瘤) 등인 경우이다. 최고 및 최저 혈압이 모두 높은 경우는 고혈압을 일으킨 병을 알 수 있는 것(2차성 또는 속발성)과 원인을 알 수 없는 것으로 유전적인 요소를 가진 것(1차성 또는 본태성)이 있다. 본태성 고혈압이 생기는 근본적인 이유는 명확하지 않지만, 심박출량(cardiac output; 심장에서 1분 동안 박출하는 혈액의 양)의 증가나 말초 혈관 저항의 증가로 인한 것으로 생각된다. 전체 고혈압 환자의 약 95%는 본태성 고혈압으로 비율적으로 압도적으로 많다.
고혈압의 뇌신경증세로 가장 많은 것이 두통, 현기증, 이명(耳鳴), 흥분 등이며, 여기에 등이나 목의 결림 등이 따르는데, 이것들은 고혈압 초기에 보이는 증세로서 이러한 증세의 발작시에는 혈압이 일시적으로 높아진다. 그러나 점점 더 이러한 발작 증세가 짧은 간격으로 자주 일어나게 되고 나중에는 차차 발작이 없을 때도 계속 혈압이 높은 상태에서 원상태로 돌아가지 않게 된다. 이 시기가 되면 두통(특히 조기에), 현기증, 심박항진, 호흡곤란, 수면장애, 감정의 불안 등이 계속되고, 뇌의 동맥경화가 진행되면서 기억력 감퇴, 반신마비 증세가 나타나며, 안저 출혈로 인한 시력감퇴도 발생한다. 고혈압 증세를 보이는데도 치료를 받지 않은 채 몇 년이 지나게 되면 중요 장기(臟器)에 이상이 나타난다. 초기에 자각증세가 없던 사람도 이때쯤 되면 심박항진, 호흡곤란, 흉부압박감, 심장동통 등이 발작적으로 일어나고, 심장은 비대해지고 폐와 간에 울혈이 나타나며 하지(下肢)에 부기가 생기거나 심한 호흡 곤란이 생긴다. 고혈압이 오래 계속되면 동맥경화도 조금씩 진행되고, 혈압은 더욱 높아지며 그에 따라서 동맥경화가 더 심해지는 악순환이 되풀이된다. 동맥경화는 전신, 특히 뇌, 심장, 신장에 일어나기 쉬우며, 신장에 일어나는 경우는 야간에는 빈뇨증이 아침에는 얼굴이 부석부석하고 발이 붓는 등의 증세가 발생한다. 고혈압과 관련된 위험 인자에는 고혈압의 가족력, 음주, 흡연, 고령, 운동 부족, 비만, 짜게 먹는 식습관, 스트레스 등의 환경적, 심리적 요인이 있다.
한편 본 발명에서 주목(朱木, Taxus cuspidata)은 겉씨식물 구과식물아강 주목목 주목과의 상록 교목으로 한국일본중국 동북부시베리아 등에 분포하며 고산 지대에서 주로 서식한다. 일본산으로 원줄기가 곧게 서지 않고 밑에서 여러 개로 갈라지는 것은 눈주목(var.nana)이라고 하며, 잎이 보다 넓고 회색이 도는 것은 회솔나무(var.latifolia)라고 하며 울릉도와 북쪽에서 자란다. 원줄기가 비스듬히 자라면서 땅에 닿은 가지에서 뿌리가 내리는 것은 설악눈주목(T.caespitosa)이라고 하며 설악산 대청봉 근처에서 눈잣나무와 같이 자란다. 성장을 마친 주목은 높이 22m, 지름 2m에 달한다. 가지가 사방으로 퍼지고 큰 가지와 원대는 홍갈색이며 껍질이 얕게 띠 모양으로 벗겨진다. 잎은 줄 모양으로 나선상으로 달리지만 옆으로 벋은 가지에서는 깃처럼 2줄로 배열하며, 길이 1.5~2.5mm, 너비는 2~3mm로 표면은 짙은 녹색이고 뒷면에 황록색 줄이 있다. 잎맥은 양면으로 도드라지고 뒷면에는 가장자리와 중륵 사이에 연한 황색의 기공조선(氣孔條線:잎이 숨쉬는 부분으로 보통 잎 뒤에 흰 선으로 나타남)이 있다. 잎은 2~3년 만에 떨어진다.
뽕나무(Mulberry tree 또는 Morus alba)는 쌍떡잎식물 쐐기풀목 뽕나무과 뽕나무속에 속한 낙엽 교목 또는 관목을 총칭한다. 원산지는 온대아열대 지방이다. 작은 가지는 회색빛을 띤 갈색 또는 회색빛을 띤 흰색이고 잔털이 있으나 점차 없어진다. 잎은 달걀 모양 원형 또는 긴 타원 모양 원형이며 3~5개로 갈라지고 길이 10cm로서, 가장자리에 둔한 톱니가 있으며 끝이 뾰족하다. 잎자루와 더불어 뒷면 맥 위에 잔털이 있다.
솔잎은 예로부터 오랫동안 이용된 식품 중의 하나로 주위에서 쉽게 구할 수 있는 재료이며 체질에 별로 구애받지 않고 누구나 섭취할 수 있는 식품으로 각종 질병의 치료 및 예방 효과가 우수하다. 솔잎에는 당질이 많이 들어 있으며, 필수 아미노산, 효소, 칼슘, 인, 철분, 엽록소 등 다양한 영양 성분이 들어있다. 솔잎은 각종 질병 치유와 예방에 놀라운 효과가 있는 것으로 알려지고 있다. 솔잎은 피를 맑게 하고 혈액순환을 잘되게 하여 말초신경을 확장시킨다. 이로 인해 호르몬의 분비를 높이며 중풍, 고혈압, 심근경색의 예방과 치유에 특효를 보이며 타박상, 신경통, 류머티즘 증세에도 잘 듣는다. 솔잎은 또한 요통이나 감기예방, 만성기관지염, 고혈압, 중풍, 신경통, 천식 등에 효과가 있고 수분대사를 잘 시켜주고 피부에 활력을 주며 소염, 소종 효과와 해독작용을 잘하여 여성들에게 불청객으로 찾아오는 월경불순, 냉대하, 자궁염, 자궁수탈증 등의 포괄적인 여성질환에 좋다. 또한 탄닌이 '멜라닌 색소'와 결합해 소변으로 배설되어 '멜라닌색소'가 침착되는 것을 막아 살결이 희어지고 매끄러워지는 효과를 가지며 피부에 탄력을 준다. 또한 신경을 안정시켜주는 효과가 있으며 혈당을 낮춰주는 성분인 글리코키닌도 포함하고 있어 당뇨병에도 도움을 주며 철분이 풍부해 빈혈에도 좋다고 알려져 있다.
현재까지 당뇨병이나 고혈압 또는 이로 인한 합병증 등에 대한 수많은 연구가 진행되어 왔으나 아직도 완전한 치료법은 확립되어 있지 않은 실정에 있어 당뇨병이나 고혈압의 치료 또는 예방과 관련된 기능성 식품이나 의약품에 대한 지속적인 연구가 절실히 요구되고 있다. 이에 대해 본 발명자는 주목과 뽕나무 추출물을 이용하여 당뇨병과 고혈압을 치료할 수 있는 방법을 개발하였다.
한국등록특허 제826672호에는 뽕나무와 버드나무를 주재료로 하며 일부 솔잎을 포함한 고혈압을 낮추기 위한 건강 음료에 대한 기술이 공지되어 있으며 한국공개특허 제2001-49156호에는 고혈압을 치료할 수 있는 솔잎 추출물에 대한 기술이 공지되어 있다. 한국등록특허 제529793호에는 당뇨병을 치료하기 위한 뽕나무 추출물에 대한 기술이 공지되어 있고 한국공개특허 제 2005-80501호에는 고혈압 및 당뇨병 환자를 위한 뽕잎 분말과 솔잎 분말이 포함된 건강보조식품에 대한 기술이 공지되어 있다. 그러나 상기 종래기술은 주목을 포함하지 않는 상태의 추출물 또는 혼합물 상태로서 본 발명의 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물과 다르다.
주목은 항암제인 택솔을 대량 증식시킬 수 있는 재료로 널리 알려져 있고 노화를 억제한다고 알려져 일부 화장료의 재료로 사용되고 있지만 현재까지 당뇨병이나 고혈압의 치료제로 사용된 사례는 없다.
본 발명의 목적은 당뇨병과 고혈압을 치료하기 위한 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물을 제공하는 데에 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물을 포함한 약학 제제와 건강기능식품을 제공하는 데에 있다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위해 주목과 뽕나무의 혼합 추출물을 제조하는 단계는,
(1공정) 주목과 뽕나무의 잎과 줄기를 세척 및 건조하는 단계;
(2공정) 상기 세척된 주목과 뽕나무를 사방 0.2~3cm로 세절하는 단계;
(3공정) 상기 세절된 주목 20~60 중량부와 뽕나무 20~60 중량부를 혼합하는 단계;
(4공정) 상기 주목과 뽕나무 혼합물에 중량대비 10~50배의 추출용매를 넣고 가열하는 단계; 및
(5공정) 상기 가열된 주목과 뽕나무 추출물을 여과한 여액을 수득하는 단계;
를 포함할 수 있다.
상기 3공정에서 주목과 뽕나무를 혼합하는 단계에서 솔잎을 세척하여 건조한 후 0.2~3cm로 세절된 솔잎을 전체 중량의 10~30 중량%로 추가할 수 있다. 솔잎을 추가한 추출물은 특히 고혈압에 효과가 있다.
상기 4공정에서 가열된 추출물은 상온으로 식힌 후 고형분을 제거하지 않는 상태에서 다시 동일 조건으로 재가열하는 과정을 수행할 수 있다.
상기 4공정의 추출용매는 정제수, 알코올(메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올), 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있으나 바람직하게는 정제수가 좋으며, 가열 단계는 70~125℃에서 1~10시간 동안 가열할 수 있다. 상기 가열은 직접적인 가열보다 추출물을 제조하는 통상의 중탕기를 이용하여 중탕 가열하는 것이 바람직하다.
상기 5공정의 여과 과정은 가열 과정을 마친 추출물의 고형분을 가라앉혀 추출물을 여과할 때 통상적으로 사용하는 솜, 거름종이, 부직포, 여과지, 가는 체 등을 이용하여 고형분을 제거할 수 있다.
상기 5공정의 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)의 여과 여액은 별도의 가공없이 멸균 및 밀봉 포장하여 그대로 사용되거나 당뇨병과 고혈압의 치료를 위한 약학 제제나 건강기능식품에 포함되어 사용될 수 있다. 상기 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)의 여과 여액은 성인 60kg 기준으로 100~150㎖씩 하루에 1~3회 복용되는 것이 바람직하다.
또는 상기 5공정의 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)의 여과 여액은 동결건조, 열풍건조 또는 분무건조를 이용하여 분말화하여 약학 제제나 건강기능식품으로 제조하여 사용될 수 있다.
당뇨병과 고혈압의 치료를 위해 약학적 조성물로서, 상기 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 동결건조, 열풍건조 또는 분무건조 등을 이용하여 분말화 된 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)을 함유하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오즈, 덱스트로오즈, 수크로오즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화를 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 활성성분의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.001㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 300㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 추출물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 본 발명의 추출물은 독성 및 부작용은 거의 없어 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
또한, 본 발명의 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)은 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 당뇨병과 고혈압 치료 개선을 위한 건강기능식품을 제공한다. 본 발명의 건강기능식품은 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)의 여과 여액의 동결, 열풍 또는 분무 건조 분말, 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 화합물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다. 상세하게는, 본 발명은 주목과 뽕나무 추출물(솔잎 추출물 포함 가능)을 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 당뇨병과 고혈압 예방 및 치료용 건강기능식품을 제공한다.
주목은 항암제인 택솔을 대량 생산할 수 있는 주재료로 널리 알려져 있지만 아직까지는 당뇨병이나 고혈압에 사용된 적은 없으며 뽕나무 역시 뿌리를 주로 생약제제로 이용하지만 잎이나 가지가 갖는 약리학적 효과에 대해서는 알려진 것이 많지 않다. 이에 대해 본 발명자는 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물이 당뇨병과 고혈압에 뛰어난 치료 효과를 갖는 것을 확인함으로 당뇨병 및 고혈압을 치료할 수 있는 조성물과 이의 제조 방법을 구현하였다.
도 1은 본 발명의 실시예 1에 따른 주목과 뽕나무 추출물을 제조하는 방법을 나타내는 순서도이다.
도 2은 본 발명의 실시예 2에 따른 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물을 제조하는 방법을 나타내는 순서도이다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 실시예는 개시된 내용이 철저하고 완전해질 수 있도록 그리고 당업자에게 본 발명의 사상이 충분히 전달될 수 있도록 하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1 : 주목과 뽕나무를 혼합한 추출물 제조>
먼저 주목과 뽕나무의 잎과 줄기를 각각 4kg을 정제수에 세척한 후 건조한다. 세척된 주목과 뽕나무의 잎과 줄기는 사방 1cm로 세절한다. 세절된 주목과 뽕나무는 정제수 300kg에 넣고 120℃에서 4시간 동안 중탕 가열한다. 가열이 완료된 주목과 뽕나무 추출물은 다시 같은 조건에서 한 번 더 중탕 가열한 후 이후 고형분을 가라앉혀 여과한 여액을 수거한다.
<실시예 2 : 주목, 뽕나무 및 솔잎을 혼합한 추출물 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 주목과 뽕나무를 혼합할 때 정제수에 세척하고 건조하여 1cm로 세절한 솔잎 2kg을 넣어준다.
<비교예 1 : 주목 추출물의 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 주목 8kg만을 이용하여 추출물을 제조하였다.
<비교예 2 : 뽕나무 추출물의 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 뽕나무 8kg만을 이용하여 추출물을 제조하였다.
<비교예 3 : 솔잎 추출물의 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 주목과 뽕나무 대신 솔잎 8kg만을 이용하여 추출물을 제조하였다.
<비교예 4 : 주목과 솔잎 추출물의 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 뽕나무 대신 솔잎 4kg을 이용하여 추출물을 제조하였다.
<비교예 5 : 솔잎과 뽕나무 추출물의 제조>
상기 실시예 1의 제조방법과 동일하게 추출물을 제조하되 주목 대신 솔잎 4kg을 이용하여 추출물을 제조하였다.
<실험예 1 : 본 발명의 추출물의 급성 독성 실험>
실험하기 전 저녁부터 절식시킨 ICR 웅성생쥐(체중 24±1g)을 7마리씩을 한 군으로 하여 실시예 1 및 실시예 2의 추출물을 동결건조한 분말을 경구투여를 하였고, 행동의 이상 유무를 관찰하였다. 결과는 리치필드 제이 티 및 윌콕슨 에프의 방법에 따라 LD50 값을 산출하였고 다음 표 1에 나타내었다.

조건
LD50 (mg/kg)
투여 경로

실시예 1
> 2000mg/kg
경구

실시예 2
> 2000mg/kg
경구

Rosiglitazone*
> 1000mg/kg
경구

* : 아반디아 정 / Avandia Tab
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 1 및 실시예 2의 추출물이 경구 투여시 Rosiglitazone(항당뇨병성 약제)만큼 안정성이 우수한 것으로 나타났다.
<실험예 2 : 동물 혈당 강하 효과 확인>
상기 실시예 1에 의해 제조된 추출물의 혈당 강하 활성을 측정하기 위하여, 자발성 당뇨병 실험동물인 db/db 당뇨병 생쥐를 대상으로 혈당 강하 효과를 실험하였다. 먼저 동물에 경구 투여할 수 있도록 실시예 1 내지 2 및 비교예 1 내지 5의 추출물 각각을 동결건조하였다.
이후 실험군으로 당뇨병이 발현된 10주령의 웅성 db/db 생쥐를 사육 환경에 2주간 적응시킨 후 혈중 포도당 농도가 600mg/dL 내외의 당뇨병 생쥐를 실험대상 동물로 선정하였다. 실험군은 추출물을 투여하지 않는 대조군과 실시예 1 내지 2 및 비교예 1 내지 5의 시료 투여군으로 구분하고 각 군당 실험동물 수는 5마리씩으로 하였다. 시료의 조제 및 투여를 위해 상기 동결건조된 추출물들을 0.5% CMC(Carboxymethyl-cellulose)액을 사용하여 현탁액으로 조제하여 사용하였고, 각 추출물을 500mg/kg(체중)을 경구 투여하였다.
혈당의 측정은 비 공복상태에서 매일 오전 중에 꼬리에서 채혈하여 글루코스 옥시다아제법(Glucose oxidase method)으로 혈당을 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 2에 나타내었다.


구분
혈청 중의 글루코스 함량(㎎/㎗)
대조군 실시예 1
투여군		 실시예 2
투여군		 비교예 1
투여군		 비교예 2
투여군		 비교예 3
투여군		 비교예 4
투여군		 비교예 5
투여군

1일
596.3
±6.2
578.2 ±0.3
574.2 ±2.5
592.3 ±7.6
597.7 ±9.5
595.3
±5.9
599.2
±6.4
596.7 ±8.5

3일
587.5
±5.4
478.8 ±1.1
480.3 ±7.2
585.3 ±5.5
581.3 ±5.4
579.4
±1.7
587.5
±6.1
577.5 ±2.1

5일
582.4
±5.4
420.6 ±5.4
415.6 ±9.5
570.3 ±8.7
575.3 ±8.1
572.4
±5.5
579.4
±4.2
582.4 ±5.5
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 2의 추출물을 처리한 군은 비교예 1 내지 5의 추출물과 대조군에 비해 우수한 혈당 강하 작용이 있음을 확인할 수 있었다. 실시예 1과 실시예 2의 추출물의 효과의 차이는 보이지 않았다.
<실험예 3 : 동물 혈압 강하 확인>
본 연구를 위하여, 6마리의 선천성 고혈압 쥐(SHR)를 사용하였다. 1주간의 적응기를 둔 후에, 실시예 1 내지 실시예 2 및 비교예 1 내지 비교예 5에서 제조된 추출물을 동결건조 한 후 각각 500㎎/㎏을 4주 동안 매일 쥐에게 먹였다. 대조군에는 추출물을 먹지 않는 군을 선택하였다.
먼저 SHR을 무마취 상태로 실험에 사용하기 위하여 치우(Chiu) 등이 사용한 방법(Chuang C. Chiueh and Irwin J. Kopin;J. Physiol. 234(6), H690-H695, 1978)을 이용하여 다음과 같은 수술을 시행하였다. SHR에 체중 kg당 50mg 용량의 펜토바르비탈 나트륨(sodium pentobarbital)을 복강 내로 주사한 후 마취시킨 다음, 헤파린(heparin) 용액(500IU/ml in saline)을 채운 폴리에틸렌 도관(polyethylenecatheter; PE-50; Clay Adams)을 왼쪽 경동맥에 2cm 정도 삽입하고 피하를 통하게 하여 목 뒤쪽으로 뺐다. 이때 도관 및 수술기구는 70%의 알코올로 소독하여 수술에 사용하였으며 수술부위는 설파다이아진(sulfadiazine) 가루로 도포하였고, 도관 내의 혈액응고를 방지할 목적으로 헤파린(heparin) 용액을 1일 2회 0.5㎖씩 주입하였다. 혈압 및 심박동수의 관찰은 도관을 삽입하고, 24시간 경과 후 행하였다. 수축기 및 이완기 혈압은 경동맥에 삽입한 도관을 스타탐 압력변환기(Statham pressure transducer ; P23 ID)에 직접 연결하여 측정하였으며, 평균 동맥압은 다른 채널(channel)로 동시에 기록하였다. 압력 변환기(Pressure transducer)의 위치는 쥐 심장의 위치와 평행을 유지하였다. 심박동수는 동맥파의 카디오-타코그래프(cardio-tachograph; 7P44C)를 통하여 다른 채널에서 측정하였다. 혈압 및 심박동수를 측정하기 위하여 운반된 쥐는 안정 및 진정을 위하여 2시간 동안 방치한 후, 혈압 및 심박동수를 측정하였다. 실험 결과로 얻은 혈압 및 심박동수는 30초마다 5분간 읽은 10개의 값을 평균하여 구하였다. 혈압을 측정한 결과, 동일 심박수를 갖는 상태에서 수축기 혈압에 있어서 대조군 대비로 실시예 2의 추출물에서 뛰어난 수축기 혈압 강하 효과를 확인할 수 있었으며, 이완기 혈압 및 평균 혈압에서도 동일하게 관찰되었다(표 3 참조). 또한 실시예 1의 추출물은 약간의 효과가 있었으나 실시예 2의 추출물보다 효과가 높지는 않았고 비교예 1 내지 비교예 5에서는 별다른 효과를 나타내지 않았다.


조 건
대조군 대비 혈압 강하율 비교수치 (%)
대조군 실시예 1
투여군		 실시예 2
투여군		 비교예 1
투여군		 비교예 2
투여군		 비교예 3
투여군		 비교예 4
투여군		 비교예 5
투여군
투여
4주후
비교
0%
10%
19%
1%
2%
1%
1%
2%
<실험예 4 : 임상 혈당 강하 확인>
실시예 1 내지 실시예 2 및 비교예 1 내지 비교예 5의 추출물의 여과 여액을 각각 당뇨병 환자 15명에게 아침 저녁으로 하루에 두 번 120㎖씩 30일간 섭취하게 한 후 5일 간격으로 혈당을 측정하였다. 혈당의 측정은 8시간 이상 금식한 후에 자가 혈당 측정기를 사용하여 측정하였다. 대조군으로는 추출물을 섭취하지 않는 당뇨병 환자들을 비교하였다. 혈당 수치가 126mg/dL 이하의 혈당으로 내려간 것을 정상 혈당으로 회복하였다는 기준으로 하였다. 표 4는 각 혈당을 측정한 날짜에 각 추출물을 섭취한 당뇨병 환자들의 혈당이 15명 중에서 정상 혈당으로 회복된 인원 수를 나타내는 표이다.
표 4의 결과를 확인하면 실시예 1과 실시예 2의 추출물은 모두 당뇨병 환자의 혈당을 정상으로 회복시키는 효과가 있는 것으로 나타났다. 실시예 2에 추가된 솔잎 추출물은 혈당을 내리는 데에 별다른 영향은 미치지 않는 것처럼 보였으며 각각의 단일 추출물, 주목과 솔잎 추출물 및 뽕나무와 주목 추출물은 거의 효과가 없는 것으로 나타났다.


조건
투여일수에 따른 정상혈당 인원(명)

5일
10일
15일
20일
25일
30일

실시예 1
1명
1명
2명
7명
9명
11명

실시예 2
1명
2명
3명
8명
9명
12명

비교예 1
0명
0명
0명
0명
0명
1명

비교예 2
0명
0명
0명
0명
1명
2명

비교예 3
0명
0명
0명
0명
0명
1명

비교예 4
0명
0명
0명
0명
0명
1명

비교예 5
0명
0명
0명
0명
1명
2명

대조군
0명
0명
0명
0명
0명
0명
<실험예 5 : 임상 혈압 강하 확인>
실시예 1 내지 실시예 2와 비교예 1 내지 비교예 5의 추출물의 여과 여액을 각각 고혈압 환자 15명에게 아침 저녁으로 하루에 두 번 120㎖씩 30일간 섭취하게 한 후 5일 간격으로 수동식 의료용 혈압계를 사용하여 혈압을 측정하였다. 혈압은 수축기 혈압이 140mmHg 이하 및 확장기 혈압이 90mmHg 이하의 혈압으로 내려간 경우를 정상으로 회복하였다는 기준으로 하였다. 표 5는 각 고혈압 환자의 혈압이 각 측정 날짜에서 15명 중에서 정상으로 회복된 인원 수를 나타내는 표이다.
표 5의 결과를 확인하면 실시예 2에서 주목과 뽕나무 추출물에 솔잎을 추가한 추출물이 고혈압을 정상 혈압으로 회복하는데 가장 효과가 좋았으며 주목과 뽕나무만을 이용한 추출물은 솔잎이 추가된 추출물보다는 효과가 덜하였다. 또한 각각의 단일 추출물과 주목과 솔잎 추출물 및 뽕나무와 솔잎 추출물은 거의 효과가 없었다.

조건
투여일수에 따른 정상혈압 인원(명)

5일
10일
15일
20일
25일
30일

실시예 1
0명
0명
1명
4명
6명
8명

실시예 2
1명
1명
2명
10명
12명
13명

비교예 1
0명
0명
0명
0명
0명
0명

비교예 2
0명
0명
0명
0명
0명
1명

비교예 3
0명
0명
0명
0명
0명
1명

비교예 4
0명
0명
0명
0명
1명
1명

비교예 5
0명
0명
0명
0명
1명
1명

대조군
0명
0명
0명
0명
0명
0명
본 발명을 이용하여 생성된 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물은 의약품이나 식품에 첨가되어 당뇨병 또는 고혈압 치료제 등으로 제조되어 사용될 수 있다.
구체적인 예로서 본 발명은 주목과 뽕나무 추출물 또는 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물을 이용한 당뇨병과 고혈압을 치료하기 위한 약제와 기능성 식품의 제조방법을 제공한다.
<사용예 1: 약제의 제조예>
1-1. 당뇨병 치료를 위한 산제의 제조
실시예 1의 주목과 뽕나무 추출물의 동결건조 분말............. 300 mg
유당 ...................................................... 100 mg
탈크 ...................................................... 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 고혈압 치료를 위한 산제의 제조
실시예 2의 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물의 동결건조 분말....... 300 mg
유당 ....................................................... 100 mg
탈크 ....................................................... 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-3. 당뇨병 치료를 위한 정제의 제조
실시예 1의 주목과 뽕나무 추출물의 동결건조 분말.............. 300 mg
옥수수전분 .................................................. 100 mg
유당 ....................................................... 100 mg
스테아린산 마그네슘 ........................................ 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-4. 고혈압 치료를 위한 정제의 제조
실시예 2의 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물의 동결건조 분말........ 300 mg
옥수수전분 ................................................... 100 mg
유당 ........................................................ 100 mg
스테아린산 마그네슘 ......................................... 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-5. 당뇨병 치료를 위한 캅셀제의 제조
실시예 1의 주목과 뽕나무 추출물의 동결건조 분말................ 300 mg
옥수수전분 ................................................... 100 mg
유당 ......................................................... 100 mg
스테아린산마그네슘 ........................................... 2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
1-6. 고혈압 치료를 위한 캅셀제의 제조
실시예 2의 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물의 동결건조 분말.......... 300 mg
옥수수전분 .................................................... 100 mg
유당 .......................................................... 100 mg
스테아린산마그네슘 ............................................ 2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
<사용예 2: 건강식품의 제조예>
2-1. 당뇨병 치료를 위한 건강식품의 제조
실시예 1의 주목과 뽕나무 추출물의 동결건조 분말................ 200 ㎎
비타민 혼합물.................................................. 적량
비타민 A 아세테이트 .......................................... 70 ㎍
비타민 E ..................................................... 1.0 ㎎
비타민 B1 .................................................... 0.13 ㎎
비타민 C ..................................................... 10 ㎎
비오틴 ........................................................ 10 ㎍
니코틴산아미드 ................................................ 1.7㎎
엽산........................................................... 50 ㎍
판토텐산 칼슘 ................................................. 0.5 ㎎
황산제1철...................................................... 1.75 ㎎
산화아연....................................................... 0.82 ㎎
탄산마그네슘 .................................................. 25.3 ㎎
제1인산칼륨.................................................... 15 ㎎
제2인산칼슘.................................................... 55 ㎎
구연산칼륨..................................................... 90 ㎎
탄산칼슘 ...................................................... 100 ㎎
염화마그네슘 .................................................. 24.8 ㎎
2-2. 고혈압 치료를 위한 건강식품의 제조
실시예 2의 주목, 뽕나무 및 솔잎 추출물의 동결건조 분말......... 200 ㎎
비타민 혼합물.................................................. 적량
비타민 A 아세테이트 .......................................... 70 ㎍
비타민 E ..................................................... 1.0 ㎎
비타민 B1 .................................................... 0.13 ㎎
비타민 C ..................................................... 10 ㎎
비오틴 ........................................................ 10 ㎍
니코틴산아미드 ............................................... 1.7㎎
엽산........................................................... 50 ㎍
판토텐산 칼슘 ................................................. 0.5 ㎎
황산제1철...................................................... 1.75 ㎎
산화아연....................................................... 0.82 ㎎
탄산마그네슘 .................................................. 25.3 ㎎
제1인산칼륨.................................................... 15 ㎎
제2인산칼슘.................................................... 55 ㎎
구연산칼륨..................................................... 90 ㎎
탄산칼슘 ...................................................... 100 ㎎
염화마그네슘 .................................................. 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다. 또한 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (8)

  1. 주목(Taxus cuspidata)의 잎과 줄기 20~60 중량부와 뽕나무(Morus alba)의 잎과 줄기 20~60 중량부로 혼합된 혼합물의 열수 추출물을 유효성분으로 함유하고 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료용 약학 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. (1공정) 주목과 뽕나무의 잎과 줄기를 세척 및 건조하는 단계;
    (2공정) 상기 세척된 주목과 뽕나무를 0.2~3cm로 세절하는 단계;
    (3공정) 상기 세절된 주목 20~60 중량부와 뽕나무 20~60 중량부를 혼합하는 단계;
    (4공정) 상기 주목과 뽕나무 혼합물에 중량대비 10~50배의 정제수를 넣고 가열하는 단계; 및
    (5공정) 상기 가열된 주목과 뽕나무 추출물을 여과한 후 고형분을 제거하고 여액을 수득하는 단계;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료를 위한 주목과 뽕나무 열수 추출물의 제조 방법.
  5. 주목(Taxus cuspidata)의 잎과 줄기 20~60 중량부와 뽕나무(Morus alba)의 잎과 줄기 20~60 중량부로 혼합된 혼합물의 열수 추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함하는 당뇨병 개선용 건강기능식품.
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
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