KR100894148B1 - 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 - Google Patents
레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100894148B1 KR100894148B1 KR1020090004130A KR20090004130A KR100894148B1 KR 100894148 B1 KR100894148 B1 KR 100894148B1 KR 1020090004130 A KR1020090004130 A KR 1020090004130A KR 20090004130 A KR20090004130 A KR 20090004130A KR 100894148 B1 KR100894148 B1 KR 100894148B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- resveratrol
- rice
- gene
- ahrs
- present
- Prior art date
Links
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 title claims abstract description 92
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 title claims abstract description 92
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 title claims abstract description 92
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 89
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 title claims abstract description 65
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 title claims abstract description 65
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 title claims 3
- HSTZMXCBWJGKHG-UHFFFAOYSA-N (E)-piceid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(O)=CC(C=CC=2C=CC(O)=CC=2)=C1 HSTZMXCBWJGKHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 2
- HSTZMXCBWJGKHG-CENDIDJXSA-N Piceid Natural products OC[C@@H]1O[C@@H](Oc2cc(O)cc(C=Cc3ccc(O)cc3)c2)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HSTZMXCBWJGKHG-CENDIDJXSA-N 0.000 title description 2
- HSTZMXCBWJGKHG-OUUBHVDSSA-N piceide Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(C=CC=2C=CC(O)=CC=2)=C1 HSTZMXCBWJGKHG-OUUBHVDSSA-N 0.000 title description 2
- HSTZMXCBWJGKHG-CUYWLFDKSA-N trans-piceid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(\C=C\C=2C=CC(O)=CC=2)=C1 HSTZMXCBWJGKHG-CUYWLFDKSA-N 0.000 title description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 claims description 28
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 23
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 8
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 claims description 5
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 claims description 5
- 108010081296 resveratrol synthase Proteins 0.000 claims description 5
- 235000003911 Arachis Nutrition 0.000 claims 1
- 241000209094 Oryza Species 0.000 abstract description 78
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 66
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 abstract description 22
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 21
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 abstract description 17
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 9
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 abstract description 8
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 abstract description 8
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 abstract description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 29
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 17
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 15
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 8
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 7
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 6
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- IAJOBQBIJHVGMQ-UHFFFAOYSA-N Phosphinothricin Natural products CP(O)(=O)CCC(N)C(O)=O IAJOBQBIJHVGMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- IAJOBQBIJHVGMQ-BYPYZUCNSA-N glufosinate-P Chemical compound CP(O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O IAJOBQBIJHVGMQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 229960004261 cefotaxime Drugs 0.000 description 4
- AZZMGZXNTDTSME-JUZDKLSSSA-M cefotaxime sodium Chemical compound [Na+].N([C@@H]1C(N2C(=C(COC(C)=O)CS[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)\C(=N/OC)C1=CSC(N)=N1 AZZMGZXNTDTSME-JUZDKLSSSA-M 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RUOKEYJFAJITAG-UHFFFAOYSA-N Resveratroloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC(C=C1)=CC=C1C=CC1=CC(O)=CC(O)=C1 RUOKEYJFAJITAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 3
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 3
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 3
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 101150018117 cobB gene Proteins 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 3
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 3
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 101150089009 sir2 gene Proteins 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- DVJSJDDYCYSMFR-ZKWXMUAHSA-N Ala-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O DVJSJDDYCYSMFR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 241000724328 Alfalfa mosaic virus Species 0.000 description 2
- PYIXHKGTJKCVBJ-UHFFFAOYSA-N Astraciceran Natural products C1OC2=CC(O)=CC=C2CC1C1=CC(OCO2)=C2C=C1OC PYIXHKGTJKCVBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDVRQFZUJRMKKP-UHFFFAOYSA-N Betavulgarin Natural products O=C1C=2C(OC)=C3OCOC3=CC=2OC=C1C1=CC=CC=C1O NDVRQFZUJRMKKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 108010054576 Deoxyribonuclease EcoRI Proteins 0.000 description 2
- LTYOQGRJFJAKNA-KKIMTKSISA-N Malonyl CoA Natural products S(C(=O)CC(=O)O)CCNC(=O)CCNC(=O)[C@@H](O)C(CO[P@](=O)(O[P@](=O)(OC[C@H]1[C@@H](OP(=O)(O)O)[C@@H](O)[C@@H](n2c3ncnc(N)c3nc2)O1)O)O)(C)C LTYOQGRJFJAKNA-KKIMTKSISA-N 0.000 description 2
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 2
- IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N Phytoalexin Natural products COC1=CC=CC=C1C1OC(C=C2C(OCO2)=C2OC)=C2C(=O)C1 IHPVFYLOGNNZLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- LTYOQGRJFJAKNA-DVVLENMVSA-N malonyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)CC(O)=O)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 LTYOQGRJFJAKNA-DVVLENMVSA-N 0.000 description 2
- 108010058731 nopaline synthase Proteins 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 239000000280 phytoalexin Substances 0.000 description 2
- 150000001857 phytoalexin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000020095 red wine Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- LUKBXSAWLPMMSZ-UHFFFAOYSA-N resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C=CC1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- DMZOKBALNZWDKI-MATMFAIHSA-N trans-4-coumaroyl-CoA Chemical compound O=C([C@H](O)C(C)(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O1)N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1)OP(O)(O)=O)C)NCCC(=O)NCCSC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 DMZOKBALNZWDKI-MATMFAIHSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000298697 Actinidia deliciosa Species 0.000 description 1
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 1
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N Ala-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MIPWEZAIMPYQST-FXQIFTODSA-N Ala-Cys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIPWEZAIMPYQST-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N Ala-Glu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CFPQUJZTLUQUTJ-HTFCKZLJSA-N Ala-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)N CFPQUJZTLUQUTJ-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 1
- TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N Ala-Leu-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N Ala-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SOBIAADAMRHGKH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IETUUAHKCHOQHP-KZVJFYERSA-N Ala-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)[C@@H](C)O)C(O)=O IETUUAHKCHOQHP-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- GOWZVQXTHUCNSQ-NHCYSSNCSA-N Arg-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GOWZVQXTHUCNSQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- ZATRYQNPUHGXCU-DTWKUNHWSA-N Arg-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O ZATRYQNPUHGXCU-DTWKUNHWSA-N 0.000 description 1
- GFMWTFHOZGLTLC-AVGNSLFASA-N Arg-His-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O GFMWTFHOZGLTLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HCIUUZGFTDTEGM-NAKRPEOUSA-N Arg-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N HCIUUZGFTDTEGM-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- OQPAZKMGCWPERI-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OQPAZKMGCWPERI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N Arg-Tyr Natural products NC(CCNC(=N)N)C(=O)NC(Cc1ccc(O)cc1)C(=O)O UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N Arg-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- APHUDFFMXFYRKP-CIUDSAMLSA-N Asn-Asn-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N APHUDFFMXFYRKP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GZXOUBTUAUAVHD-ACZMJKKPSA-N Asn-Ser-Glu Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GZXOUBTUAUAVHD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N Asn-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- YSYTWUMRHSFODC-QWRGUYRKSA-N Asn-Tyr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O YSYTWUMRHSFODC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ZSJFGGSPCCHMNE-LAEOZQHASA-N Asp-Gln-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N ZSJFGGSPCCHMNE-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- NHSDEZURHWEZPN-SXTJYALSSA-N Asp-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N NHSDEZURHWEZPN-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- WWOYXVBGHAHQBG-FXQIFTODSA-N Asp-Met-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WWOYXVBGHAHQBG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DWOSGXZMLQNDBN-FXQIFTODSA-N Asp-Pro-Cys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O DWOSGXZMLQNDBN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N Chalcone Natural products C=1C=CC=CC=1C(=O)C=CC1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 241000984642 Cura Species 0.000 description 1
- KKZHXOOZHFABQQ-UWJYBYFXSA-N Cys-Ala-Tyr Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KKZHXOOZHFABQQ-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- DVIHGGUODLILFN-GHCJXIJMSA-N Cys-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N DVIHGGUODLILFN-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N Cys-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UIKLEGZPIOXFHJ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N Gln-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N Gln-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FKXCBKCOSVIGCT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- YJSCHRBERYWPQL-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCC(=O)N)N YJSCHRBERYWPQL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BYKZWDGMJLNFJY-XKBZYTNZSA-N Gln-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O BYKZWDGMJLNFJY-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- IRDASPPCLZIERZ-XHNCKOQMSA-N Glu-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N IRDASPPCLZIERZ-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- SRZLHYPAOXBBSB-HJGDQZAQSA-N Glu-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SRZLHYPAOXBBSB-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N Glu-Gln-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O LVCHEMOPBORRLB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N Glu-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O AUTNXSQEVVHSJK-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ZTNHPMZHAILHRB-JSGCOSHPSA-N Glu-Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 ZTNHPMZHAILHRB-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LZEUDRYSAZAJIO-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- HQTDNEZTGZUWSY-XVKPBYJWSA-N Glu-Val-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O HQTDNEZTGZUWSY-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- PYTZFYUXZZHOAD-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN PYTZFYUXZZHOAD-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N Gly-Glu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O XTQFHTHIAKKCTM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DNVDEMWIYLVIQU-RCOVLWMOSA-N Gly-Val-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DNVDEMWIYLVIQU-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- HVCRQRQPIIRNLY-IUCAKERBSA-N His-Gln-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N HVCRQRQPIIRNLY-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- YPWHUFAAMNHMGS-QSFUFRPTSA-N Ile-Ala-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N YPWHUFAAMNHMGS-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- YOTNPRLPIPHQSB-XUXIUFHCSA-N Ile-Arg-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YOTNPRLPIPHQSB-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- HZMLFETXHFHGBB-UGYAYLCHSA-N Ile-Asn-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N HZMLFETXHFHGBB-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 1
- PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N Ile-Glu-Thr Chemical compound N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)O PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- OVDKXUDMKXAZIV-ZPFDUUQYSA-N Ile-Lys-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N OVDKXUDMKXAZIV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- IIWQTXMUALXGOV-PCBIJLKTSA-N Ile-Phe-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N IIWQTXMUALXGOV-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- KLJKJVXDHVUMMZ-KKPKCPPISA-N Ile-Phe-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N KLJKJVXDHVUMMZ-KKPKCPPISA-N 0.000 description 1
- WXLYNEHOGRYNFU-URLPEUOOSA-N Ile-Thr-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N WXLYNEHOGRYNFU-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- UYODHPPSCXBNCS-XUXIUFHCSA-N Ile-Val-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C UYODHPPSCXBNCS-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GBDMISNMNXVTNV-XIRDDKMYSA-N Leu-Asp-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O GBDMISNMNXVTNV-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N Leu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- ODRREERHVHMIPT-OEAJRASXSA-N Leu-Thr-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ODRREERHVHMIPT-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N Leu-Val-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- YIBOAHAOAWACDK-QEJZJMRPSA-N Lys-Ala-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YIBOAHAOAWACDK-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- PIXVFCBYEGPZPA-JYJNAYRXSA-N Lys-Phe-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N PIXVFCBYEGPZPA-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- QBHGXFQJFPWJIH-XUXIUFHCSA-N Lys-Pro-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN QBHGXFQJFPWJIH-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- MEQLGHAMAUPOSJ-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MEQLGHAMAUPOSJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N Lys-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- OLWAOWXIADGIJG-AVGNSLFASA-N Met-Arg-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O OLWAOWXIADGIJG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- OSOLWRWQADPDIQ-DCAQKATOSA-N Met-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OSOLWRWQADPDIQ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UNPGTBHYKJOCCZ-DCAQKATOSA-N Met-Lys-Ala Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UNPGTBHYKJOCCZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LLKWSEXLNFBKIF-CYDGBPFRSA-N Met-Met-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H](N)CCSC LLKWSEXLNFBKIF-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- MIXPUVSPPOWTCR-FXQIFTODSA-N Met-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MIXPUVSPPOWTCR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KYXDADPHSNFWQX-VEVYYDQMSA-N Met-Thr-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O KYXDADPHSNFWQX-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N Met-Val-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBSWWNKMVPAXOI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 101000654471 Mus musculus NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-1 Proteins 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000007117 Oral Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010067152 Oral herpes Diseases 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- LSXGADJXBDFXQU-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 LSXGADJXBDFXQU-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- PSBJZLMFFTULDX-IXOXFDKPSA-N Phe-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O PSBJZLMFFTULDX-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- MGECUMGTSHYHEJ-QEWYBTABSA-N Phe-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MGECUMGTSHYHEJ-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- NPLGQVKZFGJWAI-QWHCGFSZSA-N Phe-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)C(=O)O NPLGQVKZFGJWAI-QWHCGFSZSA-N 0.000 description 1
- FENSZYFJQOFSQR-FIRPJDEBSA-N Phe-Phe-Ile Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FENSZYFJQOFSQR-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010068086 Polyubiquitin Proteins 0.000 description 1
- ORPZXBQTEHINPB-SRVKXCTJSA-N Pro-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O ORPZXBQTEHINPB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KQCCDMFIALWGTL-GUBZILKMSA-N Pro-Asn-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 KQCCDMFIALWGTL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VOZIBWWZSBIXQN-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O VOZIBWWZSBIXQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N Pro-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- GFHOSBYCLACKEK-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GFHOSBYCLACKEK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZMLRZBWCXPQADC-TUAOUCFPSA-N Pro-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 ZMLRZBWCXPQADC-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108010079005 RDV peptide Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 101100084449 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) PRP4 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- CDVFZMOFNJPUDD-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CDVFZMOFNJPUDD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N Ser-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N Ser-His-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CN=CN1 QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NLOAIFSWUUFQFR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LRWBCWGEUCKDTN-BJDJZHNGSA-N Ser-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LRWBCWGEUCKDTN-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N Ser-Thr-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WUXCHQZLUHBSDJ-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- 239000012163 TRI reagent Substances 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N Thr-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- GLQFKOVWXPPFTP-VEVYYDQMSA-N Thr-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GLQFKOVWXPPFTP-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- AYCQVUUPIJHJTA-IXOXFDKPSA-N Thr-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AYCQVUUPIJHJTA-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- SCCKSNREWHMKOJ-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Ser Chemical compound N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SCCKSNREWHMKOJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NZFCWALTLNFHHC-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NZFCWALTLNFHHC-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DMWNPLOERDAHSY-MEYUZBJRSA-N Tyr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DMWNPLOERDAHSY-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- HNERGSKJJZQGEA-JYJNAYRXSA-N Tyr-Met-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N HNERGSKJJZQGEA-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- TYGHOWWWMTWVKM-HJOGWXRNSA-N Tyr-Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 TYGHOWWWMTWVKM-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N Val-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LNYOXPDEIZJDEI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HIZMLPKDJAXDRG-FXQIFTODSA-N Val-Cys-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N HIZMLPKDJAXDRG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XTAUQCGQFJQGEJ-NHCYSSNCSA-N Val-Gln-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N XTAUQCGQFJQGEJ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N Val-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N OTJMMKPMLUNTQT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N Val-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N DAVNYIUELQBTAP-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- BTWMICVCQLKKNR-DCAQKATOSA-N Val-Leu-Ser Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O BTWMICVCQLKKNR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N Val-Lys-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- SJRUJQFQVLMZFW-WPRPVWTQSA-N Val-Pro-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SJRUJQFQVLMZFW-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N Val-Ser-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O UGFMVXRXULGLNO-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- -1 antihyperlipidemia Substances 0.000 description 1
- 208000002399 aphthous stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 108010091092 arginyl-glycyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000005513 chalcones Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000006355 external stress Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 108010060641 flavanone synthetase Proteins 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000010359 gene isolation Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 244000037671 genetically modified crops Species 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 1
- 108010008237 glutamyl-valyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010090037 glycyl-alanyl-isoleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010062266 glycyl-glycyl-argininal Proteins 0.000 description 1
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010076718 lysyl-glutamyl-tryptophan Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 108010082527 phosphinothricin N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108700042769 prolyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N trans-chalcone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010077037 tyrosyl-tyrosyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
- A23L7/10—Cereal-derived products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/326—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on cardiovascular health
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/3262—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on blood cholesterol
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
본 발명은 항암, 항고지혈증, 항혈전작용 등의 다양한 약리 효과를 가지는 레스베라트롤을 함유하는 쌀에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 세포내에 도입된 형질전환 벼 종자 및 벼 식물체로부터 생산할 수 있는 레스베라트롤을 함유하는 쌀에 관한 것이다.
본 발명에 의하면 레스베라트롤 합성 유전자를 이용하여 레스베라트롤 고함유 작물을 개발할 수 있으며, 특히 레스베라트롤 생합성 벼는 식용 및 화장품, 음료, 사료 등 다양한 가공품의 생산에 널리 활용될 수 있을 것이다.
레스베라트롤 생합성 유전자(RS), 항암, 항혈전, 벼과식물, 형질전환
Description
본 발명은 항암, 항고지혈증, 항혈전작용 등의 다양한 약리 효과를 가지는 레스베라트롤을 함유하는 쌀에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 세포내에 도입된 형질전환 벼 종자 및 벼 식물체로부터 생산할 수 있는 레스베라트롤을 함유하는 쌀에 관한 것이다.
레스베라트롤 생합성 유전자(resveratrol synthase, RS)의 산물인 레스베라트롤은 식물이 강한 자외선(UV)이나, 곰팡이균에 감염되었을 때 방어물질로 생합성 되는 피토알렉신(phytoalexin) 물질로 1976년 Langcake와 Pryce에 의해 보고되었다.
레스베라트롤은 강한 항산화성으로 결장암, 구강포진, 궤양치료에 이용되고 있으며, 또한 항암, 항혈전, 항고지혈증, 항염증, 발작질환, 심혈관 질병의 예방 등 인간의 건강 증진을 위한 약리 효과가(Aggarwal 등, 2004; Fremont, 2000; Jang 등, 1997; Wu 등, 2001) 있음이 밝혀졌다.
또한, 레스베라트롤은 상기의 약리활성 효과 외에도 수명연장 관련 단백질인 sir2를 활성화 시키는 물질로 알려졌다. Sir2 단백질은 저칼로리 조건에서 NAD+에 의하여 활성화되어 세포의 수명을 연장시키는 수명연장 관련 단백질 중 하나인데, Konrad 등 (2003)의 보고에 의하면 sir2 단백질은 칼로리를 제한하였을 때에만 NAD+에 의하여 유일하게 활성화되는데, 레스베라트롤을 첨가한 조건에서도 저칼로리 조건과 유사하게 sir2 단백질이 활성화되어, 효모를 이용한 실험에서 레스베라트롤을 첨가하였을 때 효모의 수명이 평균 70%가 증가하였다는 실험 결과를 발표하였다.
이러한 생리활성을 갖는 레스베라트롤은 72종 이상의 식물체에서 합성되며, 소나무 등 목본류에서는 항상 생산되지만, 초본류에서는 피토알렉신 활성에 의해 상처, 오존에 의한 손상, UV, 병해충 감염 등 외부 스트레스에 의한 자기방어 물질로 생합성 되며, 레스베라트롤의 생합성이 가장 우수한 식물은 포도와 땅콩이다 (Schroder 등, 1990).
적포도주에는 레스베라트롤이 함유되어 있어 '프렌치 패러독스' (French Paradox)라 하여 적포도주의 섭취와 심혈관질환의 발병률은 부의 상관관계가 있다 (Wu 등, 2001)는 보고는 적포도주가 전 세계적으로 관심을 끌게 된 계기가 되었다.
하지만, 레스베라트롤의 함량을 인위적으로 증진시키기 위하여 재배시 포도에 인위적으로 균주를 접종하거나, 수확 후 포도와 땅콩 종자에 초음파 세척 처리나, UV 조사 등을 통하여 레스베라트롤의 함량을 증진시키는 연구들이 시도되고 있다.
또한, 포도와 땅콩으로부터 분리한 레스베라트롤 합성 유전자를 생명공학기법을 이용하여 레스베라트롤 생합성 작물을 개발하려는 연구가 시도되고 있다. 포도의 레스베라트롤 합성 유전자를 이용한 형질전환 키위 식물체 잎에서 182㎍/g의 레스베라트롤이 생산되었으며 (Kobayashi 등, 2000), 땅콩의 레스베라트롤 합성 유전자를 이용한 형질전환 담배의 현탁배양 세포에서 50ng/g의 레스베라트롤이 생산되었음을 보고하였다 (Hain 등, 1990).
레스베라트롤 합성 유전자는 1분자의 coumaroyl-CoA와 3분자의 malonyl-CoA를 전구물질로 이용하여 레스베라트롤을 생합성 한다. 또한, 찰콘 합성 (chalcone synthase) 유전자도 레스베라트롤 합성 유전자와 마찬가지로 1분자의 coumaroyl-CoA와 3분자의 malonyl-CoA를 전구물질로 이용하여 플라보노이드(flavonoid)를 생합성 한다. 벼에는 레스베라트롤 합성 유전자는 존재하지 않으나, 찰콘 합성 유전자가 11번 염색체에 존재하며, 또한 정상적인 단백질을 생산한다고 보고하였다 (Reddy 등, 1996).
P. Stark-Lorenzen 등은 포도에서 유래한 스틸빈(레스베라트롤) 합성 유전자를 벼에 도입하여 도열병에 저항성이 있음을 보고하였다(Plant Cell Reports(1997) 16;668-673).
그러나 본 발명에서와 같이 레스베라트롤 합성 유전자를 벼에 도입하여 레스베라트롤 및 피세이드를 모두 함유한 쌀을 생산한 사례는 아직까지 없다.
본 발명의 목적은 항암, 항고지혈증, 항혈전작용 등 다양한 약리 효과를 가지는 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀을 제공하는데 있다.
본 발명의 목적은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 세포내에 도입된 형질전환 벼 종자 및 벼 식물체를 제공하는데 있다.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀을 제공한다.
본 발명은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 세포내에 도입된 형질전환 벼 종자를 제공한다.
본 발명은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 세포내에 도입된 형질전환 벼 식물체를 제공한다.
본 발명은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자를 세포내에 도입하여 레스베라트롤을 생산하는 재조합 벼 종자의 제조방법을 제공한다.
본 발명은 상기의 형질전환 벼 종자를 배양하여 벼 식물체를 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 도입된 벼 형질전환용 재조합벡터를 제공한다.
상기에서 레스베라트롤을 암호화하는 유전자는 땅콩 또는 포도로부터 유래된 것을 특징으로 한다.
이하, 본 발명의 내용을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 레스베라트롤 및 피세이들를 함유하는 쌀을 생산하기 위한 레스베라트롤 생합성 벼를 개발하기 위하여, 농촌진흥청 육성 팔광땅콩에서 레스베라트롤 합성 유전자를 분리하였고, 이를 이용하여 레스베라트롤과 피세이드 (resveratrol-3-O-D-glucoside, 레스베라트롤과 배당체 결합물)를 생합성 하는 벼를 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 레스베라트롤을 암호화하는 유전자는 땅콩 또는 포도로부터 유래한 것을 사용할 수 있다.
본 발명의 실시예에서 레스베라트롤 합성 유전자는 땅콩으로부터 유래한 레스베라트롤 합성 유전자를 분리한 것으로, 식물체내에서 레스베라트롤(389 amino acid)을 발현한다(도 1 참조). 상기 레스베라트롤 합성 유전자는 서열번호 1의 염기서열을 가진다. 또한, 본 발명에서는 경우에 따라 상기 서열번호 1기재의 염기서열 중 일부결실, 과잉의 염기 또는 염기서열의 부가, 또는 염기 서열 중의 염기 또는 부분서열의 다른 염기서열로의 치환, 또는 이들의 복합인 변형서열이 사용될 수 있다. 하지만, 상기 변형서열은 궁극적으로 얻어지는 최종 레스베라트롤 단백질의 3차원적 구조에 실질적으로 영향을 주지 않는 범위 또는 활성에 실질적으로 영향을 주지 않는 범위내일 것이 요구된다.
또한, 본 발명의 레스베라트롤은 상기 서열번호 1 기재의 유전자와 이들의 변형서열 이외에도 이와 상보적인 유전자를 포함한다. 상보적인 유전자는 DNA 복제과정을 통해 서열번호 1 기재의 유전자와 이들의 변형서열을 가지는 유전자로 쉽게 합성할 수 있는 주형으로 사용될 수 있다. 상보적인 유전자를 얻는 과정은 당업자에게 극히 용이한 기술에 불과하며, 이러한 서열은 서열번호 1 기재의 유전자 또는 이들의 변형서열을 주형으로 직접 작성될 수 있다.
또한, 본 발명의 레스베라트롤은 서열번호 2 기재의 폴리펩타이드를 포함한다. 상기 서열번호 2 기재의 폴리펩타이드는 389개의 아미노산 서열을 가지며, 레스베라트롤 생합성 활성을 가진다.
또한, 본 발명은 서열번호 2 기재의 상기 폴리펩타이드를 암호화하는 유전자를 포함한다. 이들 유전자는 형질전환에 사용될 숙주의 종류에 따라 제공되는 코돈용법(codon usage)에 따라 상기 폴리펩타이드를 발현할 수 있도록 암호화하는 다양한 조합의 유전자일 수 있다.
본 발명에서 레스베라트롤을 암호화하는 유전자가 도입된 식물체를 제조하기 위하여 벡터는 pSB22, pBI121, pCAMBIA2301, pCAMBIA3301 등의 식물체 형질전환용 벡터를 사용할 수 있다.
상기에서, 식물체 형질전환용 벡터는 식물체 전신 발현을 유도하기 위하여 유비퀴틴(ubiquitin) 프로모터와 제초제 저항성 유전자를 선발 마커로 가질 수 있도록 구축할 수 있다.
형질전환과정은 식물체의 형질전환체 제조공정에서 통상적으로 사용되는 어 떠한 시스템도 이용될 수 있다. 이러한 기술로서는 특히 이들에 한정되지 않지만 칼슘/폴리에틸렌 글리콜법을 이용한 원형질체의 형질전환법, 전기 천공법 및 미량주사법 또는 (코팅된)입자 충격투입법 등이 있다.
이와 같은 소위 직접 유전자 형질전환법 이외에 바이러스 벡터(예를 들면, 콜리플라워 모자이크 바이러스(CaMV)로부터 얻음) 및 박테리아 벡터(예를 들면, 아그로박테리움속으로부터 얻음) 등의 벡터를 포함하는 형질전환 시스템이 널리 이용될 수 있다. 선택 및/또는 스크리닝 후, 형질전환된 원형질체, 세포 또는 식물부분을 공지의 방법에 따라 완전한 식물로 재생시킬 수 있다(Horsch, R. b. et al., 1985). 재생기술의 선택은 본 발명에서 중요한 것은 아니다.
벼를 포함한 단자엽 작물의 형질전환 및 재생은 표준공정은 아니나, 최근의 과학적 진보에 따라 원리적으로 단자엽 식물도 형질전환이 가능하며 형질전환 세포로부터 생식 능력이 있는 트랜스제닉 식물이 재생될 수 있음이 밝혀졌다. 이들 식물에 유전물질을 도입시키는 효과적인 방법과 더불어 이들 식물의 재생 조직배양 시스템의 개발로 형질전환은 더욱 용이하게 되었다. 최근에 단자엽 식물의 형질전환을 위하여 채택되는 방법은 체외 배양체 또는 현탁세포의 미량투사 충격투입법 및 직접적 유전자 흡수법 또는 원형질체의 전기 천공법 등이다. 또한, 이들 방법은 쌍자엽 식물의 형질전환 및 재생에도 적용될 수 있다.
종자에서 특정한 목적으로 사용하기 위하여 재조합 유전자를 높게 또는 적절한 수준으로 발현시키는 것으로 이미 공지된 조절서열이 본 발명에서도 사용될 수 있다. 이와 같은 조절서열은 식물 또는 식물 바이러스로부터 얻어지거나 또는 화학 적 방법으로 합성될 수 있다. 이러한 조절서열은 종자에서 전사를 지휘하는 프로모터를 들 수 있다. 발현율을 높이기 위한 프로모터로서는 특히 이들에 한정되지 않지만 종자-특이 유전자의 프로모터, 특히 브라시카 나퍼스의 CruA 프로모터와 같은 저장 단백질 유전자의 프로모터(Ryan et al., 1989) 또는 구조적 발현 유전자의 프로모터 예컨대 CaMV(Cauliflower Mosaic Virus)의 35S 프로모터(Guilley et al., 1982) 등이 있다. 다른 조절서열은 종결서열 및 폴리아데닐화 시그날 그리고 식물에서 이와 같은 기능을 하는 모든 서열 등이 여기에 포함될 수 있다. 구체적인 예로서는 아그로박테리움 투마파시엔의 노팔린 신타아제 유전자의 3'측위 영역 또는 브라시카 나퍼스의 CurA유전자의 3'측위 영역 등이 있다. 또한, 조절서열에서는 CaMV의 35S프로모터에서 발견되는 것과 같은 인핸서서열, AIMV(Alfalfa Mosaic Virus) RNA4의 리더 서열과 같은 mRNA 안정화 서열(Brederode et al., 1980) 또는 이와 같은 기능을 하는 기타 서열 등이 포함될 수 있다.
상기 본 발명의 적합한 유전자 구성체의 모든 부분(프로모터, 조절서열, 안정화서열, 시그날 서열 또는 종결서열)은 필요하다면 공지 기술을 사용하여 이들의 조절 특성이 변하도록 변이될 수 있다.
본 발명에 의하면 레스베라트롤 및 피세이드의 생합성 기능이 도입된 형질전환 벼 종자 및 벼 식물체를 제조하여 레스베라트롤 및 피세이드를 함유하는 쌀을 제공할 수 있다. 따라서 항암, 항혈전, 항고지혈증, 항산화 및 심혈관계 질환 등의 발병을 낮추는 기능을 갖는 레스베라트롤을 유전자 조작 기술에 의해 세계 인구의 1/3 이상이 주곡으로 이용하는 벼에 도입함으로써, 레스베라트롤 및 피세이드를 쌀을 통해 섭취할 수 있게 하여, 노화, 암, 심혈관질환 등 인간의 질병 예방과 국민건강 증진에 크게 기여할 수 있다.
본 발명에 의해서 레스베라트롤 및 피세이드 생합성 벼 종자 및 벼 식물체의 제조가 가능해졌으며, 본 발명의 방법에 의한 형질전환 벼 식물체는 항암, 항혈전, 항고지혈증, 항산화 및 심혈관계 질환에 효과적인 레스베라트롤 및 피세이드를 함유하고 있기 때문에 건강 기능성 성분이 강화된 벼 식물체를 만들 수 있게 되었다.
본 발명에 의해 제조된 벼 식물체는 유전자변형작물에 대한 안전성 평가 등 상세한 분석을 거쳐 품종으로 보급될 경우 항암, 항혈전, 항고지혈증, 항산화 및 심혈관계 질환 예방 약리작용이 있는 레스베라트롤 및 피세이드를 주곡인 쌀을 통해 섭취하게 됨으로써 국민건강 증진에 크게 기여할 수 있다.
본 발명은 레스베라트롤을 암호화하는 유전자를 이용하여 자연계에 존재하지 않는 레스베라트롤 및 피세이드 생합성 벼를 개발하여 건강식품, 기능성 화장품, 사료 개발에 활용할 수 있다.
이하 본 발명의 내용을 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명하기로 한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다.
실시예
본 발명은 레스베라트롤 합성 유전자를 이용하여 레스베라트롤 및 피세이드를 생합성하는 벼 개발을 위하여, 레스베라트롤 합성 유전자를 RT-PCR을 이용하여 땅콩에서 분리하고, AhRS 유전자의 염기서열을 분석하는 단계와, 상기 AhRS 목적 유전자를 포함하는 식물 형질전환용 발현벡터를 제조하는 단계와, 상기 형질전환용 벡터를 이용하여 AhRS 형질전환 벼를 개발하는 단계와, 상기 AhRS 형질전환 벼의 PCR, Southern과 northern 분석 단계와, 상기 AhRS 형질전환 벼의 레스베라트롤 생합성을 HPLC 법을 이용하여 분석하는 단계로 이루어진다.
실시예 1. RT-PCR 이용 땅콩 레스베라트롤 합성 유전자 분리 및 염기서열 분석
유전자 염기서열 데이터베이스인 GenBank (NCBI, USA)에 등록된 땅콩의 레스베라트롤 합성 유전자의 염기서열을 분석하여 정방향 프라이머 (ATGGTGTCT GTGAGTGGAATTC)와 역방향 프라이머 (CGTTATATGGCCACACTGC)를 제작하였다.
농촌진흥청에서 육성한 팔광땅콩으로부터 어린 꼬투리를 수확하여 액체 질소를 이용하여 곱게 마쇄한 후, TRI 시약(MRC, USA)을 사용하여 total RNA를 분리하였다. Total RNA을 NucleoTrap mRNA Midi Purification kit (Clontech, USA)를 이용하여 mRNA를 추출하였다.
TaKaRa One Step RNA PCR kit (Takara, Japan)을 이용하여 땅콩의 꼬투리로부터 분리한 mRNA와 상기의 프라이머를 이용 RT-PCR을 수행하여 레스베라트롤 합성 유전자를 증폭하였다.
상기의 땅콩 mRNA로부터 증폭된 레스베라트롤 합성 cDNA를 유전자 운반체인 pGEM-T Easy vector (Promega, USA)에 클로닝한 후, 대장균 JM109에 형질전환하여 염기서열 분석에 이용하였다. 염기서열 결정은 벡터에 존재하는 T7과 SP6 프라이머를 사용하여 LI-COR (USA)사의 DNA sequencer 4200을 이용하였다. 결정된 염기서열과 아미노산 서열을 도 1에 표시하였다(도 1).
땅콩에서 분리한 레스베라트롤 합성 유전자 AhRS의 염기서열은 1,172개의 뉴클레오티드(서열 1)와 389개의 아미노산으로 구성된 레스베라트롤 합성 단백질을 암호화하는 서열로 구성되어 있었다(도 1).
실시예 2. AhRS 유전자를 포함하는 형질전환 벡터 제작
AhRS 유전자를 벼에 도입하기 위하여 운반체의 backbone으로 binary 벡터인 pCAMBIA 3300이 사용되었으며, 식물체 전신발현을 유도하기 위하여 ubiquitin 프로모터와 제초제 저항성 유전자 (Bar)를 선발 마커로 갖는 형질전환 벡터를 제작하였다. pUBA 벡터로부터 HindIII와 BamHI 제한효소를 처리하여 ubiquitin 프로모터를 분리하고, pBT121 벡터로부터 BamHI과 EcoRI 제한효소를 처리하여 nos 터미네이터를 분리하였다. pCAMBIA 3300 벡터를 HindIII와 BamHI 제한효소를 처리하여 절단하고, 그 자리에 ubiquitin 프로모터를 첨가하고, pCAMBIA 3300을 BamHI과 EcoRI 제한효소를 처리하여 절단하고, 그 자리에 nos 터미네이터를 첨가하여 pSB22 벼 형질전환용 벡터를 제작하였다.
상기의 AhRS 유전자를 pSB22 벼 형질전환 벡터에 삽입하기 위하여, BamHI 제한효소 자리를 갖도록 정방향 프라이머 (CGGATCCATGGTGTCTGTGAGTG)와 SacI 제한효소 자리를 갖도록 역방향 프라이머 (CGAGCTCCGTTATATGG CCACA)를 제작하였다. AhRS 유전자를 상기의 프라이머를 이용하여 PCR 반응을 수행한 후, 유전자 증폭 산물을 BamHI와 SacI 제한효소로 처리하고 pSB 22 형질전환 벡터에 삽입하여 제작한 pSB2220 벡터를 도 2에 나타내었다. 도 2에서 각 부호의 약어는 다음과 같다.
BL (left border), RL (right border), pUbi (polyubiquitin gene promoter), RS (resveratrol synthase cDNA of peanut), tNos (polyadenylation signal of nopaline synthase gene), p35S (CaMV 35S promoter), Bar (phosphinothricin acetyltransferase), t35S (polyadenylation signal of CaMV 35S gene), Km(R) (kanamycin-resistant gene).
실시예 3. AhRS 유전자의 벼 형질전환
땅콩의 레스베라트롤 합성 유전자를 갖는 pSB2220 형질전환 벡터를 벼에 도입시키기 위하여, 재조합된 pSB2220은 freezing-thawing 법(An, 1987; An et al., 1988)을 이용하여 A. tumefaciens(LBA 4404)에 도입하였다.
상기의 pSB2220(도 2)이 도입된 아그로박테리움을 AB(K2HPO4 6g, NaH2PO4 2g, NH4Cl 2g, KCl 0.3g, MgSO4·7H2O 0.6g, CaCl2·2H2O 0.025g, FeSO4·7H2O 0.05g, Glucose 10g, DW 10㎖) 액체 배지에 28℃에서 3일간 배양하여 증식시킨 후, 10배 농축하여 벼 캘러스 감염에 이용하였다.
성숙한 벼 종자의 현미를 70% 에탄올로 1분간, 2% NaClO로 1시간 살균하였다. 살균 후 종자를 멸균수로 5회 이상 세척하고, 2N6 (N6 salt 3.95g/L, sucrose 30g/L, casamino acid 1g/L, 2,4-D 2㎎/L, phytagel 2g/L, pH 5.6∼5.7) 배지에 넣어, 25℃의 암조건에서 약 3주간 배양하여 캘러스를 유도하였다.
상기에서 유도한 벼 캘러스 중 직경이 3∼4mm 정도의 것을 다시 2N6 배지에 옮겨 25℃의 암조건에서 4일간 배양하였다. 이에 따라 캘러스 세포의 분열 활성을 높일 수 있었다. 유전자 도입은 배양된 캘러스와 AB 배지에서 증식한 작제물이 도입된 아그로박테리움을 혼합하여 20분간 감염시킴으로써 행하였다. 감염시킨 후, 250㎎/L cefotaxime이 첨가된 멸균수로 5회 이상 세척하여 아그로박테리움을 제거하였다.
아그로박테리움에 감염된 캘러스를 2N6-PT5(N6 salt 3.95g/L, sucrose 30g/L, casamino acid 1g/L, 2,4-D 2㎎/L, phosphinothricin 5㎎/L, cefotaxime 250㎎/L, phytagel 2g/L, pH 5.6∼5.7) 배지에 옮겨, 25℃의 암조건에서 4주간 배양하여 phosphinothricin(PPT) 선발마커에 저항성을 나타내어 활발하게 생장하는 캘러스를 선발하였다(도 3의 A).
2N6-PT5 배지에서 선발된 캘러스를 N6-BA(N6 salt 3.95g/L, sucrose 20g/L, sorbitol 30g/L, casamino acid 2g/L, 2,4-D 1㎎/L, BAP 0.5㎎/L PPT 6㎎/L, cefotaxime 250㎎/L, phytagel 2g/L, pH 5.6∼5.7) 배지에 옮겨, 25℃의 암조건에서 2주간 배양하여 활발하게 생장하는 캘러스를 선발하였다.
N6-BA 배지에서 선발된 캘러스를 MSR(N6 salt 3.95g/L, sucrose 40g/L, sorbitol 20g/L, myo-inositol 100㎎/L, NAA 0.1㎎/L, kinetin 2㎎/L PPT 6㎎/L, cefotaxime 250㎎/L, phytagel 5g/L, pH 5.6∼5.7) 배지에 옮겨, 25℃의 16시간 명조건에서 1개월 이상 배양하여 식물체를 분화시켰 (도 3의 B).
재분화된 벼는 페트리디쉬 안에서 약 4∼5cm 정도의 크기가 되면 병 배지에 옮겨 조도 약 2만 룩스, 25℃의 16시간 명조건에서 2∼3 엽기까지 생육시켰다(도 3의 C).
그 후, 유묘를 GMO 온실의 토양에 이식하여 종자를 수확하였다. 재분화된 당대의 식물체를 T0 세대, 이 식물체로부터 수확한 종자를 T1 세대로 가정하고, T2 세대까지 진전 시켰다(도 3의 D).
실시예 4. AhRS 유전자 형질전환 벼의 PCR 분석
본 발명에서 사용한 AhRS 유전자가 형질전환 벼에 성공적으로 삽입되었는지를 직접 확인하였다.
이를 위해 재분화 벼 식물체에서 genomic DNA을 분리하고 PCR을 수행하였다.
땅콩의 AhRS 유전자 도입을 확인하기 위해 PCR 수행에 이용된 프라이머는 상 기의 pSB2220 형질전환 벡터 제작에 이용된 정방향 프라이머 (CGGATCCATGG TGTCTGTGAGTG)와 역방향 프라이머 (CGAGCTCCGTTATATGGCCACA)를 사용하였다.
PCR 반응액 25㎕의 조성은 10mM Tris-HCl, pH 8.3, 50mM KCl, 1.5mM MgCl2, 200nM primer, 200μM dNTP, 주형 DNA 10ng 그리고 1unit Taq polymerase(Takara, Japan)이었다. PCR 반응은 94℃에서 2분간 변성반응을 거친 후, 증폭반응 (94℃에서 20초, 64℃에서 20초, 72℃에서 50초)을 35회 진행하였고, 최종 신장반응은 72℃에서 7분간 수행하였다. PCR 반응은 MJ research 사의 PTC-100 (USA)에서 수행하였다.
상기의 AhRS 프라이머를 이용하여 PCR 수행한 결과를 도 4에 나타내었다. 도에서 M은 1kb ladder, P는 positive control, N은 비형질전환체(동진벼), 1∼12은 pSB2220에 의한 형질전환 재분화 식물체를 나타낸다.
실험결과, 도 4에서 볼 수 있듯이, 재분화 벼 식물체 모두에서 약 1.1kb 크기의 밴드가 확인되었다. 이는 모든 재분화 벼 식물체에 땅콩의 AhRS 유전자가 벼의 게놈에 안정적으로 도입되었음을 증명하는 것이다.
실시예 5. AhRS 유전자 형질전환 벼의 Southern 분석
본 발명에서 사용한 AhRS 유전자가 형질전환 벼의 게놈에 성공적으로 삽입되었는지 여부를 Southern 분석으로 확인하였다.
이를 위해 재분화 벼 식물체에서 genomic DNA를 추출하였다. 분리한 genomic DNA 10㎍를 BamHI 제한효소로 처리하고, 0.8% agarose gel에서 전기영동한 후, Southern(1975)의 방법을 이용 Hybond N+ nylon membrane (Amersham, UK)에 DNA를 전이시켰다. AhRS cDNA를 AlkPhos Direct Labelling kit (Amersham, UK)를 이용하여 탐침자를 제작하고, 잡종화 반응을 위해 membrane을 AlkPhos Direct Detection kit(Amersham, UK)를 이용하여 잡종화 과정을 수행한 후, X-ray film에 3시간 노출한 후 현상하였다. 실험결과 사진을 도 5에 도시하였다. 도 5에서 각 기호의 의미는 도 4의 것과 동일하다.
도 5에서 보는 바와 같이, 비형질전환체(N)인 동진벼에서는 밴드가 전혀 나타나지 않았으나, positive control(P)과 pSB2220에 의한 T0 모든 형질전환체(1∼12)에서는 1개에서 6개의 밴드를 확인할 수 있었다. 이는 땅콩의 AhRS cDNA가 벼의 게놈 상에 성공적으로 도입되었음을 증명하는 결과이다.
실시예 6. AhRS 유전자 형질전환 벼의 northern 분석
상기의 형질전환 벼에서 외래 유전자 AhRS가 실제적으로 발현되는지 여부를 northern 분석으로 확인하였다.
AhRS 유전자의 발현을 확인하기 위하여 형질전환 벼 T0 식물체에서 total RNA를 추출하였다. Northern 분석을 위해 20㎍의 total RNA를 1.0% formaldehyde 젤에서 전기영동한 후, Southern(1975)의 방법을 이용 Hybond N+ nylon membrane (Amersham, UK)에 RNA를 전이시켰다. 잡종화 반응은 상기의 Southern 분석과 동일한 방법으로 수행한 후, X-ray film에 3시간 노출하여 현상하였다. 실험결과 사진을 도 6에 도시하였다. 도에서 각 기호의 의미는 도 4의 것과 동일하다.
도 6에서 보는 바와 같이, 비형질전환체(N)인 동진벼에서는 밴드가 전혀 나타나지 않았으나, 상기의 Southern 분석에서 DNA의 도입이 확인된 12개의 모든 형질전환체에서(비록 발현량은 차이가 있지만) AhRS 유전자가 발현됨을 확인하였다. 이는 땅콩의 AhRS cDNA 유전자가 벼에서 정상적으로 발현되고 있음을 증명하는 결과이다.
실시예 7. AhRS 형질전환 벼의 레스베라트롤 및 피세이드 생합성 분석
상기의 형질전환 벼에서 땅콩 AhRS 유전자의 최종산물인 레스베라트롤이 실제로 생성되는지를 HPLC 분석을 통해 확인하였다.
레스베라트롤은 T2 세대의 형질전환 벼 종자로부터 추출하였다. 형질전환 현미 종자를 마쇄한 후, 600㎎의 분말을 2㎖ 튜브에 넣고, 80% 메탄올 600㎕을 첨가하였다. 이를 45℃에서 50분간 150rpm으로 교반하여 레스베라트롤이 추출되도록 하였다. 추출 튜브를 4℃ 10,000g에서 5분간 원심분리한 후, 상징액을 0.2㎛ membrane filter로 여과하여 HPLC 분석에 이용하였다. HPLC 분석은 Waters사의 Alliance (Waters 2695, Ireland)와 XTerra RP18 5㎛ 4.6ㅧ250㎜ column (Waters, Ireland)을 이용하였고, 용매는 물과 아세토나이트릴을 구배조건으로 하였다. 구배조건은 처음 0에서 5분간은 물과 아세토나이트릴을 90:10 (v/v)으로, 5에서 65분간은 물과 아세토나이트릴을 70:30 (v/v)으로 기울기를 주어 분석을 수행하였다. 분석은 추출액 10㎕를 주입하여 1.0㎖/min 유속으로 UV 308nm 파장에서 측정하였다. 레스베라트롤, 레스베라트롤과 배당체 결합물인 피세이드 (resveratrol-3-O-D-glucoside)의 피크는 표준물질의 UV spectrum, retention time을 기준으로 추정하였다. 실험결과를 도 7에 나타내었다. 도에서 각 부호의 약어는 다음과 같다. P (resveratrol-3-O-D-glucoside), R (resveratrol), RT (retention time).
도 7에서 A는 piceid(P)와 reveratrol(R) 표준물질의 m/z값을 나타낸 것이고, B는 레스베라트롤 합성 유전자가 도입되지 않은 비형질전환체 (동진벼)를 나타내었고, C는 레스베라트롤 합성 유전자가 도입된 T2 세대 DRS-195-4 계통의 HPLC 결과를 나타낸 사진이다.
도 7-C 형질전환 벼의 피세이드와 레스베라트롤의 피크는 도 7-A의 표준물질인 피세이드의 머무름 시간 33.4분, 레스베라트롤의 머무름 시간 54.5분과 일치하였다. 이것은 땅콩의 AhRS 유전자가 벼의 게놈에서 안정적으로 발현되어 레스베라트롤과 레스베라트롤의 배당체인 피세이드가 정상적으로 생합성 됨을 증명하는 결과이다.
도 1은 본 발명의 팔광땅콩으로부터 분리한 레스베라트롤 생합성 유전자 AhRS의 염기 서열과 아미노산 서열을 나타낸다.
도 2는 본 발명 AhRS 유전자가 포함된 형질전환용 벡터를 나타낸다.
도 3은 본 발명 AhRS 유전자가 도입된 형질전환 벼 식물체를 나타낸다.
도 4는 본 발명 AhRS 유전자 형질전환 벼의 PCR 분석 결과를 나타낸다.
도 5는 본 발명 AhRS 유전자 형질전환 벼의 Southern 분석 결과를 나타낸다.
도 6은 본 발명 AhRS 유전자 형질전환 벼의 northern 분석 결과를 나타낸다.
도 7은 레스베라트롤과 피세이드 표준물질(A), 동진벼(B), 본 발명 AhRS 유전자 형질전환 벼 T2 세대(DRS-195-4)의 레스베라트롤 생합성(C)을 나타낸 HPLC 분석 결과를 나타낸다.
<110> Rural Development Administration
<120> Rice containing resveratrol
<160> 3
<170> KopatentIn 1.71
<210> 1
<211> 1172
<212> DNA
<213> Arachis hypogaea
<400> 1
atggtgtctg tgagtggaat tcgcaaagtt caaagggcag aaggccctgc aactgtattg 60
gcgataggca cagcaaatcc accaaattgt attgatcaga gcacatatgc tgattattat 120
tttagagtaa ctaacagtga acacatgact gatctcaaga agaagtttca gcgcatttgt 180
gagagaacac aaatcaagaa cagacatatg tacttaacag aagagatact gaaagagaat 240
cctaatatgt gtgcatacga ggcaccgtcg ttggatgcaa gggaagatat gatgattagg 300
gaggtaccaa gggttggaaa agaggccgca accaaggcca tcaaagaatg gggacagcca 360
atgtctaaaa tcacacattt gatcttctgc accgccagcg gtgttgcgtt gcctggcgtt 420
gattatgaac tcatcgtact cttaggactc gacccatgcg tcaagaggta catgatgtac 480
caccaaggct gcttcgctgg cggtactgtt cttcgtttgg ctaaggactt ggctgaaaac 540
aacaaggatg ctcgtgttct tatcgtttgt tctgagaata ccgcaatcac tttccgtggt 600
cctagtgaga cagacatgga tagtcttgta ggacaagcat tgtttgcgga tggagctgct 660
gcgattatca ttggttctga tcctgtgcca gaggttgaga agcctatctt tgagattgtt 720
tcgaccgatc aaaaactcgt ccctggcagc catggagcta ttggtggtct ccttcgtgaa 780
gttgggctta cattctatct taacaagagt gttcctgata ttatttcgca aaatatcaac 840
gacgctctta gtaaagcttt tgatccattg ggtatatttg attataactc aatattttgg 900
attgcacacc ctggtggacg tgcaattttg gaccaggttg aacaaaaggt aaacttaaaa 960
ccagaaaaga tgaaagctac tagagatgtg cttagcaatt atggtaacat gtcaagtgca 1020
tgtgtgtttt tcattatgga tttgatgaga aagaaatccc ttaaagaagg actcaaaacc 1080
accggagaag gacttgattg gggtgtactt tttggctttg gtcctggtct caccattgaa 1140
actgttgtgc tccgcagtgt ggccatataa cg 1172
<210> 2
<211> 389
<212> PRT
<213> Arachis hypogaea
<400> 2
Met Val Ser Val Ser Gly Ile Arg Lys Val Gln Arg Ala Glu Gly Pro
1 5 10 15
Ala Thr Val Leu Ala Ile Gly Thr Ala Asn Pro Pro Asn Cys Ile Asp
20 25 30
Gln Ser Thr Tyr Ala Asp Tyr Tyr Phe Arg Val Thr Asn Ser Glu His
35 40 45
Met Thr Asp Leu Lys Lys Lys Phe Gln Arg Ile Cys Glu Arg Thr Gln
50 55 60
Ile Lys Asn Arg His Met Tyr Leu Thr Glu Glu Ile Leu Lys Glu Asn
65 70 75 80
Pro Asn Met Cys Ala Tyr Glu Ala Pro Ser Leu Asp Ala Arg Glu Asp
85 90 95
Met Met Ile Arg Glu Val Pro Arg Val Gly Lys Glu Ala Ala Thr Lys
100 105 110
Ala Ile Lys Glu Trp Gly Gln Pro Met Ser Lys Ile Thr His Leu Ile
115 120 125
Phe Cys Thr Ala Ser Gly Val Ala Leu Pro Gly Val Asp Tyr Glu Leu
130 135 140
Ile Val Leu Leu Gly Leu Asp Pro Cys Val Lys Arg Tyr Met Met Tyr
145 150 155 160
His Gln Gly Cys Phe Ala Gly Gly Thr Val Leu Arg Leu Ala Lys Asp
165 170 175
Leu Ala Glu Asn Asn Lys Asp Ala Arg Val Leu Ile Val Cys Ser Glu
180 185 190
Asn Thr Ala Ile Thr Phe Arg Gly Pro Ser Glu Thr Asp Met Asp Ser
195 200 205
Leu Val Gly Gln Ala Leu Phe Ala Asp Gly Ala Ala Ala Ile Ile Ile
210 215 220
Gly Ser Asp Pro Val Pro Glu Val Glu Lys Pro Ile Phe Glu Ile Val
225 230 235 240
Ser Thr Asp Gln Lys Leu Val Pro Gly Ser His Gly Ala Ile Gly Gly
245 250 255
Leu Leu Arg Glu Val Gly Leu Thr Phe Tyr Leu Asn Lys Ser Val Pro
260 265 270
Asp Ile Ile Ser Gln Asn Ile Asn Asp Ala Leu Ser Lys Ala Phe Asp
275 280 285
Pro Leu Gly Ile Phe Asp Tyr Asn Ser Ile Phe Trp Ile Ala His Pro
290 295 300
Gly Gly Arg Ala Ile Leu Asp Gln Val Glu Gln Lys Val Asn Leu Lys
305 310 315 320
Pro Glu Lys Met Lys Ala Thr Arg Asp Val Leu Ser Asn Tyr Gly Asn
325 330 335
Met Ser Ser Ala Cys Val Phe Phe Ile Met Asp Leu Met Arg Lys Lys
340 345 350
Ser Leu Lys Glu Gly Leu Lys Thr Thr Gly Glu Gly Leu Asp Trp Gly
355 360 365
Val Leu Phe Gly Phe Gly Pro Gly Leu Thr Ile Glu Thr Val Val Leu
370 375 380
Arg Ser Val Ala Ile
385
Claims (1)
- 서열목록 1의 염기서열로 구성된 땅콩(Arachis hypogaea) 유래 레스베라트롤 합성(resveratrol synthase) 유전자(AhRS)를, 유비퀴틴(ubiquitin) 프로모터(pUbi)를 포함하는 pSB22 벡터에 삽입하여 구축된 pSB2220 벡터로 형질전환되어, 레스베라트롤 및 피세이드(resveratrol-3-o-D-glucoside) 모두를 생합성하는 벼로부터 생산된 것을 특징으로 하는 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020090004130A KR100894148B1 (ko) | 2009-01-19 | 2009-01-19 | 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020090004130A KR100894148B1 (ko) | 2009-01-19 | 2009-01-19 | 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020060073352A Division KR20080012483A (ko) | 2006-08-03 | 2006-08-03 | 레스베라트롤을 함유하는 쌀 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20090019882A KR20090019882A (ko) | 2009-02-25 |
KR100894148B1 true KR100894148B1 (ko) | 2009-04-20 |
Family
ID=40687459
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020090004130A KR100894148B1 (ko) | 2009-01-19 | 2009-01-19 | 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR100894148B1 (ko) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014098438A1 (ko) * | 2012-12-17 | 2014-06-26 | 대한민국(농촌진흥청장) | 레스베라트롤 생합성 벼 및 이의 용도 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6974895B1 (en) * | 1999-01-29 | 2005-12-13 | The Samuel Roberts Noble Foundation, Inc. | Transgenic legume plants modified to produce resveratrol glucoside and uses thereof |
-
2009
- 2009-01-19 KR KR1020090004130A patent/KR100894148B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6974895B1 (en) * | 1999-01-29 | 2005-12-13 | The Samuel Roberts Noble Foundation, Inc. | Transgenic legume plants modified to produce resveratrol glucoside and uses thereof |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
NCBI database sequence accession no.DQ124938, GI:71480640(2005.08.03.) |
Plant Cell Reports, Vol.16: 668-673(1997) |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20090019882A (ko) | 2009-02-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1807519B1 (en) | Stress tolerant cotton plants | |
CN113621039B (zh) | 花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因与应用 | |
EP0905242A1 (en) | Method for controlling water content of plant | |
RU2333245C2 (ru) | Способы получения растений с улучшенным ростом в условиях ограничения уровня азота | |
KR100896487B1 (ko) | 식물 스트레스 저항성을 증가시키는 OsRDCP1유전자및 상기 유전자가 도입된 형질전환 식물체 | |
KR20010105373A (ko) | 식물의 농업경영 및 영양 가치의 개선 방법 | |
CN107325161B (zh) | 一种与耐低氮胁迫和高盐胁迫相关的蛋白及其编码基因与应用 | |
CN101210251A (zh) | 烟草s期激酶蛋白1基因序列及其编码蛋白质序列和应用 | |
US20210395764A1 (en) | Method for obtaining ricin/rca-free castor-oil plant seeds, ricin/rca-free castor-oil plants, method for identifying ricin/rca-free castor-oil plants, polynucleotides, constructs and uses thereof | |
CN102477092B (zh) | 控制花青素含量的蛋白及其编码基因与应用 | |
ES2326789T3 (es) | Plantas transgenicas con el gen de la enzima para la segmentacion de neoxantina. | |
KR100894148B1 (ko) | 레스베라트롤 및 피세이드를 함유한 쌀 | |
US20210010014A1 (en) | Peanut with reduced allergen levels | |
CN114507674B (zh) | 茶树昼夜节律基因lux在提高植物抗寒性上的应用 | |
KR20080012483A (ko) | 레스베라트롤을 함유하는 쌀 | |
CN109956996B (zh) | 一种谷子产量相关蛋白SiAMP1及其编码基因与应用 | |
JP6056042B2 (ja) | イネ科植物を短稈化させる遺伝子および短稈イネ科植物の作出方法 | |
JPH10512451A (ja) | グルタチオンs−トランスフェラーゼをコードするデオキシリボ核酸およびその使用 | |
JP5164093B2 (ja) | イネの病原菌に対する抵抗性を高める方法及び病原菌耐性イネ形質転換体 | |
JP2008022782A (ja) | 雄性不稔植物体およびその作出方法 | |
JP2002508965A (ja) | 植物における疾病耐性に関する遺伝子 | |
CN114524868B (zh) | 甘薯叶片发育及类黄酮强化相关蛋白IbBBX29及其编码基因与应用 | |
US7655837B2 (en) | Glutathione-S-transferase gene from Proposis juliflora confers abiotic stress tolerance in plants | |
KR102173875B1 (ko) | 식물의 제초제 저항성 증진용 조성물 및 이를 이용한 식물의 제초제 저항성을 증진시키는 방법 | |
WO2004092372A1 (ja) | 塩ストレス耐性を付与する遺伝子 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A107 | Divisional application of patent | ||
A201 | Request for examination | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |