KR100869287B1

KR100869287B1 - 콜레스테롤이 저감된 계란 및 그 생산방법

Info

Publication number: KR100869287B1
Application number: KR1020070028288A
Authority: KR
Inventors: 신현길
Original assignee: 신현길
Priority date: 2006-03-22
Filing date: 2007-03-22
Publication date: 2008-11-18
Also published as: KR20070095839A

Abstract

본 발명은 콜레스테롤이 저감된 계란 및 그 생산방법에 관한 것으로, 신규한 유산균을 산란계 사료에 첨가제로 사용시 콜레스테롤이 현저이 저감된 계란 및 그 생산방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

유산균, 콜레스테롤, 계란, 사료, 산란계

Description

콜레스테롤이 저감된 계란 및 그 생산방법{Cholesterol reduced egg and method of production thereof}

도 1은 본 발명 젖산균주의 in vitro 에서 콜레스테롤 저하효과를 보인 그림이다.

도 2는 본 발명의 젖산균주를 닭 사료에 급여 후 계란에서 콜레스테롤 저하효과를 보인 그림이다.

본 발명은 콜레스테롤이 저감된 계란 및 그 생산방법에 관한 것이다.

인체의 혈중 높은 콜레스테롤(High Cholesterol)은 사람을 죽음에 이르게 하며 심장마비와 같은 심혈관계질환의 주요원인 중 하나로 밝혀져 있다.

유산균은 한국의 발효김치의 우종균으로 알려져 있다.

본 발명자는 몇 가지 실험 및 실시예를 통하여 한국산 김치로부터 유산균을 분리동정하였고 각 형태적인 특성과 물리적 특성을 조사하였다.

따라서, 본 발명은 한국산 김치에서 분리한 유산균을 이용하여 사람의 심혈관계질환의 원인이 되는 콜레스테롤이 저감된 계란을 생산하여 이를 공급하는데 그 목적이 있다.

본 발명의 상기 목적은 닭의 장내 생존능력이 우수한 유산균을 분리동정하고 이를 닭 사료에 첨가하여 콜레스테롤이 저감된 계란을 생산함으로써 달성하였다.

본 발명은 본 발명의 유산균을 분리동정하는 단계와; 본 발명에 사용할 내성균주를 조사선별하는 단계와; 본 발명의 선별된 내성균주를 in vitro 에서 THIO-MRS에서 접종하여 콜레스테롤 저하효과를 조사하는 단계와; 본 발명의 선발된 내성균주를 닭의 사료에 첨가사용하여 생산된 계란에서 콜레스테롤 저하 정도를 조사하는 단계로 구성된다.

이하 본 발명의 구체적인 방법을 실시예 들어 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니다.

실시예1 : 콜레스테롤 저하균주의 분리동정

본 발명자들은 우리나라 한국산 발효김치의 우종균으로 알려진 유산균을 몇단계 실험을 통하여 우선 5종의 균주를 분리하는 데 성공하였다. 이들 유산균은 형태적, 배양적 특성에 따라 분리하였는데 정확히 동정하기 위하여 rep-PCR, RAPD-PCR 및 16S-rDNA 유전자 시퀀싱(gene sequencing)의 유전형 동정방법을 사용하였다.

본 발명에 사용하기 위해 분리 동정된 유산균주 HFI 65는 2006. 2. 28. 공인 기탁기관(농업생명공학연구원)에 기탁번호 KACC 91222P로 기탁하였다. 또한, HFI 58 균주는 2006. 2. 28. 농업생명공학연구원에 기탁번호 KACC 91223P로 기탁한 후, 해외출원을 위해 2006. 10. 23 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁번호 KCTC 11007BP로 재기탁하였다.

하기 표 1은 콜레스테롤 저하 균주의 동정결과이다.

콜레스테롤 저하균주 조사결과

Isolate	Identified	Identities base/base(%)
HFI 58	엔테로코커스 문드티이 (Enterococcus mundtii)	1431/1441(99%)
HFI 65	락토바실러스 파라플랜타륨 (Lactobacillus paraplantarum)	1425/1432(99%)

실시예 2: 위액과 장내 생존능력조사

유산균의 위액과 장내에서의 생존능력을 조사하기 위하여 pH 3.0에 대한 내성과 0.5% 옥스갈(Oxgall)에 대한 내성을 조사하였다. 조사된 균주 중 내성이 가장 강력한 균주는 HFI 58과 HFI 65로 나타났다(표 2).

본 발명 균주의 장내 생존능력 조사결과

균주	HFI 58	HFI 65
pH3.0	**	**
0.5% 담즙산염 옥스갈 (bile salt oxgall)	**	**

** 잘 증식함, * 증식함

실시예 3: 본 발명 균주의 동물의 장내 성장능력조사

본 발명 분리 동정균주가 pH 2 수준의 동물장내에서 성장 여부를 확인하기 위하여 pH 2와 담즙산염(Bile salt)에서의 생존능력을 조사하였다. 조사결과 보통의 유산균주들은 모두 사멸하였으나 본 발명 균주들은 모두 생존하여 성장능력이 있음이 확인되었다(표 3).

본 발명 유산균주의 pH 2와 담즙산염(Bile salt)에서의 생존능력 조사결과

균주	세포수	pH2에서 3시간 후 세포수	0.5% 담즙산염(Bile salt)에서 3시간 후 세포수
HFI 65	4.6×10⁸	1.06×10⁷	1.08×10⁷
HFI 58	5.2×10⁸	3.6×10⁶	6.2×10⁶

실시예 4: 본 발명 균주의 콜레스테롤 분해능 조사

담즙산염 가수분해효소 활성(Bile salt hydrolase activity)은 담즙산염(Bile salt)을 분해하는 능력의 크기이다. 담즙산염 가수분해효소 분비량이 커지면 담즙산염(Bile salt)의 분해량이 커지며 담즙산염(Bile salt)의 소스(source)가 되는 콜레스테롤의 분해가 촉진된다. 즉, 담즙산염 가수분해효소 활성은 콜레스테롤 저하와 밀접한 관계가 있으므로 본 발명의 실시예에서는 담즙산염 가수분해효소 활성을 조사하여 담즙산염(Bile salt)의 분해 정도를 측정하였다.

표 4에서와 같이, 대부분의 조사한 균주의 BSH 활성은 나타나지 않았으나, HFI 65와 HFI 58은 분해환의 크기(circle size)가 1.1cm 정도로 나타났다.

본 발명의 실시예의 실험에서 효소활성이 있거나 클수록 분해환의 크기(circle size)가 커지며 따라서 본 발명의 유산균주들은 B담즙산염 가수분해효소 활성이 있으며 콜레스테롤 분해 저감 효과가 있음이 확인되었다.

본 발명 유산균주의 MRS 아가 플레이트의 circle size(직경,cm)조사결과

균주	분해환의 크기(circle size)(cm)
HFI 65	1.1
HFI 58	1.1

실시예 5: 본 발명 유산균주의 콜레스테롤 분해( 저감 )효과조사

본 발명 유산균주의 콜레스테롤 분해효과를 확인하기 위하여 THIO-MRS에 접종배양하여 콜레스테롤 저하효과를 in vitro 상에서 조사하였다.

본 발명의 균주인 HFI 58과 HFI 65 모두 효과가 큰 것으로 조사되었으며 전자의 경우 50%, 후자의 경우 60%정도로 나타났다(도 1).

실시예 6: 콜레스테롤함량이 저감된 계란의 생산

본 발명 유산균주 HFI 58과 HFI 65 균주를 공시균주로 하여 성계의 일반사료에 첨가하여 사육한 후 생산된 계란의 난황(yolk)을 채취하여 콜레스테롤수치를 분석하였다.

본 발명의 바람직한 실시를 위하여 서울소재 (주)우진 B&G사 제품의 양계용 일반사료에 본 발명 유산균주 생균을 10⁷마리/g사료 비율로 함유하도록 첨가하여 잘 혼합시키고, 산란계 1마리당 급여량은 120g/1회/1일로 하고 4주간 급여하였다.

통제구(control)는 일반사료만 급여하는 것으로 하고 실험구는 HFI 58 급여구와 HFI 65 급여구로 구분하여 실험구당 산란중인 닭 50마리를 기준으로 하여 사육실험을 실시하였다. 각 실험구와 통제구는 4주 동안 계속적으로 급여하였으며 각 처리구당 실험기간 중에 계란은 처리구당 30개씩 랜덤(random)으로 수거하여 난황중에 함유한 콜레스테롤수치를 분석하였다.

통제구(control)는 일반사료를 급여하여 사육한 산란계로부터 수거한 계란 30개에서 난황을 취하여 콜레스테롤수치를 측정하고(이를, 'Control군'으로 함), 본 발명 유산균 HFI 58 첨가사료 급여군과 HFI 65 급여군을 각각 실험구로하여 수거한 각 30개씩의 계란으로부터 채취한 난황으로부터 측정한 콜레스테롤수치(이를, 각 '급여군'으로 함)와 비교분석하였다. 일반사료급여한 control군과 본 발명의 각 유산균 급여군의 콜레스테롤 함량조사결과를 다음 표 5 및 도 2와 같다.

본 발명 계란의 콜레스테롤 수치조사 결과

	5주 후 계란의 콜레스테롤 농도(mg)
일반 사료군	16.22
HFI 58 급여군	4.79
HFI 65 급여군	12.47

표 5 및 도 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 일반 control군에 비하여 본 발명의 유산균을 급여한 처리군(급여군)의 콜레스테롤수치가 저하된 것으로 나타났으며 백분율로 환산하여 본 결과, HFI 58급여군은 28.82%, HFI 65급여군은 75%로 나타나 콜레스테롤 저감효과가 각각 71% 및 25%로 확인되었다.

상기 실시예를 통해 살펴본 바와 같이, 본 발명은 콜레스테롤이 저감된 계란 및 그 생산방법에 관한 것으로, 본 발명 유산균 첨가사료를 이용한 산란계 사육실험결과, 계란의 난황중 콜레스테롤 저감효과가 뛰어나므로 본 발명 유산균이 첨가된 사료를 급여하여 수거된 계란을 취식하게 되면 인체 혈중 콜레스테롤 수치를 맞출 수가 있어서 사료공업 및 식품산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims

엔테로코커스 문드티이(Enterococcus mundtii) HFI 58(KCTC 11007BP) 또는 락토바실러스 파라플랜타륨(Lactobacillus paraplantarum) HFI 65(KACC 91222P) 중 어느 하나의 유산균 또는 복합균이 첨가된 콜레스테롤 저감용 산란계 사료.
제1항의 유산균 생균을 10⁷마리/g 사료비율로 함유하도록 첨가하여 혼합한 산란계용 사료를 산란계 1마리당 120g/1회/1일로 하여 4주간 급여하는 것을 특징으로 하는 콜레스테롤 저감용 산란계 사육방법.
제2항의 방법으로 생산되는 콜레스테롤이 저감된 계란.