KR100702331B1

KR100702331B1 - 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR100702331B1
Application number: KR1020050045015A
Authority: KR
Inventors: 이정노; 이춘몽; 정지헌; 조병기
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2005-05-27
Filing date: 2005-05-27
Publication date: 2007-04-03
Also published as: KR20060122488A

Abstract

본 발명은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 엘라스테이즈 활성 억제용 조성물, 콜라겐 합성 촉진용 조성물 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 백굴채 추출물은 엘라스테이즈 억제 활성 및 콜라겐 합성 효과가 우수하여 피부 주름을 개선하는데 유용하게 사용될 수 있다.

백굴채, 피부 주름, 화장료 조성물

Description

백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Anti-Wrinkle Comprising the Extract of Chelidonium majus as Active Ingredient}

본 발명은 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

인체를 이루고 있는 가장 큰 기관인 피부는 외부로부터의 물리적, 화학적 자극으로부터 체내를 보호해 주는 기능과 체내의 습도, 체온 등의 항상성을 유지해주는 기능을 한다. 그러나, 나이가 들거나 외부의 자극에 지속적으로 노출되게 되면 피부가 손상되고 생리 기능이 저하되는 등 피부 노화가 빠르게 진행된다. 이러한 피부 노화는 나이가 들어감에 따라 필연적으로 발생하는 자연스런 현상이나 생활수준의 향상으로 삶의 질에 대한 요구가 증대되고 있고, 여러 가지 환경요인에 의해 피부 노화의 발생 요인이 증가한 지금에 들어서는 피부 노화에 대한 대책이 절실히 요구되고 있다.

노화에 수반하는 피부의 외관 변화 중 가장 두드러진 것은 주름이다. 주름은 이마, 눈 주변, 양미간 및 입 주변 등의 안면이나 목, 목 둘레, 팔꿈치, 겨드랑이, 손 및 발 등의 신체 각 부위에 생긴다. 주름은 대부분 30세 전후부터 눈에 띄기 시작해 나이가 들어감에 따라 그 수나 깊이 및 범위가 증가해간다.

피부 주름은 진피층에 존재하는 콜라겐 교원섬유에 의해 결정되는데, 콜라겐 분자는 섬유아세포에서 생성되어 진피층으로 분비된 후 자동회합에 의해 콜라겐 섬유로 형성된다 (Implant dentistry, 2002, 11(3):280-285). 이러한 콜라겐 섬유는 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력, 세포와의 부착 및 세포 분화 등에 관여한다 (Journal of the American Academy of Dermatology, 2001, 17(4):610-613). 이러한 콜라겐이 내인적 요인 및 외인적 요인에 의해 생성이 감소하거나 변형이 지속적으로 축적되게 되면 주름 생성의 원인이 된다 (Clinics in geriatric medicine, 2001, 17(4):617-630).

또한, 노화가 진행됨에 따라 피부의 탄력이 감소하게 된다. 일반적으로 피부의 탄력 유지에 가장 중요한 영향을 주는 인자는 피부 진피층에 존재하는 매트릭스 구성 성분인 엘라스틴이다. 엘라스틴은 결합조직의 세포외 기질에 존재하는 물질이며, 콜라겐 매트릭스 사이에 있으면서 이들을 견고하게 유지하여 피부의 탄성을 주는데 중요한 역할을 한다. 엘라스틴은 세포 내에서 트로포엘라스틴 (Tropoelastin)이라는 폴리펩타이드로 합성된 다음 세포 외에서 트로포엘라스틴 간의 교차결합을 통해 생성된다. 따라서, 엘라스틴은 트로포엘라스틴의 교차결합에 의해 2차 또는 3차원적인 탄성을 가지게 된다.

피부 노화가 진행되면 피부 세포들의 증식 및 재생능력이 저하된다. 표피에서는 표피세포의 증식이 저하되고, 표피의 턴오버 (turn-over), 즉 신진대사가 저하한다. 표피와 마찬가지로 진피에서는 콜라겐이나 엘라스틴과 같은 결합 조직 뿐만 아니라 세포간 지질 성분인 글리코스아미노글리칸 (glycosaminoglycans)과 글리코프로테인 (glycoproteins) 등의 합성 및 분해를 담당하는 섬유아세포의 증식 활성이 저하되고, 그 대사 기능도 저하된다.

따라서, 피부 노화를 지연시키기고 억제하기 위한 물질의 개발은 화장품 분야에서 중요한 과제로 대두되어 많은 연구가 진행되고 있다. 최근에는 천연으로부터 얻어지는 성분들을 화장품에 이용하는 사례가 급증하고 있어, 천연 식물성분들에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색하여 피부 노화 억제 효과가 우수한 물질들이 개발되고 있다.

그러나, 대부분의 천연 식물성분들은 그 자체가 불안정할 뿐만 아니라 화장료에 적용시, 내용물의 침전, 색깔의 변화 등과 같은 화장료의 안정성에 큰 문제점을 가지고 있다. 이러한 문제를 해결하고자 제약, 화장품 및 식품 분야 등에서는 생리 활성 성분이 파괴되지 않고 안정하게 전달될 수 있으며, 생리활성 성분이 지용성이든 수용성이든 모두 내포시킬 수 있는 리포좀을 이용하고 있다. 최근에는 나노 기술의 발달과 함께 피부 침투 효과를 극대화 할 수 있는 나노리포좀에 대한 연구개발도 활발히 진행되고 있다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허가 참조되고 그 인용은 괄호 내에 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준과 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

이에, 본 발명자들은 피부 노화를 억제하고 피부 주름을 개선하기 위해 천연 식물성분들에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색한 결과 천연 식물 추출물 중에서 백굴채 추출물이 엘라스테이즈 활성 억제 효과 및 콜라겐 합성 촉진 효과가 뛰어나고, 피부 자극이 없으면서도 피부 주름 개선 효과가 매우 뛰어남을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 엘라스테이즈 활성 억제용 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 엘라스테이즈 활성 억제용 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 합성 촉진용 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명자들은 다수의 천연물을 원료로 하여 다양한 추출방법으로 추출물을 제조하였고, 엘라스테이즈 활성 억제 및 콜라겐 합성 촉진 효과가 우수한 물질을 선별하는 작업을 수행한 결과 백굴채 (Chelidonium majus) 추출물이 상술한 본 발명의 목적에 가장 부합된다는 사실을 발견하게 되었다.

백굴채는 양귀비과의 여러해살이풀 애기똥풀 (Chelidonium majus)의 지상부이다. 백굴채는 양지 또는 숲 가장자리에서 흔히 자라는 이년초로서 원뿌리가 땅속 깊이 들어가고 등황색이며 원줄기는 높이 30-80 ㎝로서 잎과 더불어 분을 칠한 듯한 흰빛이 돌고 대세표로 된 곱슬털이 있으나 나중에 거의 없어지며 상처를 내면 등황색의 유액이 나오기 때문에 애기똥풀이라고 한다. 잎은 호생 (互生)하고 1-2회 우상으로 갈라지며 길이 7-15 ㎝, 너비 5-10 ㎝로서 끝이 둥글고 뒷면은 백색이며 철이 약간 남아 있기도 하고 표면은 녹색이며 가장자리에 둔한 톱니와 결각이 있다. 5-8월에 원줄기와 가지 끝에서 산형화서가 발달하고 황색 꽃이 핀다. 백굴채는 급만성위장염, 위·십이지장 궤양, 담낭염으로 인한 복부동통, 이질 증상을 완화시키고, 황달형 간염, 피부궤양, 결핵, 옴, 버짐 등에 쓰인다. 풍습성사지마비동통을 치료한다. 또한, 백굴채로부터 추출한 항암활성, 면역 증강성 및 조혈성이 우수한 다당체 조성물에 대한 특허가 등록되어 있다 (대한민국 특허등록 제 310059 호).

본 발명에 있어서, 백굴채 추출물은 애기똥풀의 지상부에 있는 다양한 기관 또는 부분 (예: 잎, 꽃, 줄기, 가지 및 껍질 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 애기똥풀의 잎, 꽃, 줄기, 가지 및 껍질을 모두 포함한 지상부로부터 얻은 추출물을 의미한다.

본 발명의 백굴채 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물의 유효성분인 백굴채 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출되는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 에틸 알코올, 부탄올 또는 메탄올이며, 보다 더 바람직하게는 에틸 알코올이다. 상기 에틸 알코올은 바람직하게는 70% 에틸 알코올이다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 백굴채 나무 건조 중량의 1-10 배이며, 보다 바람직하게는 5-8배이며, 가장 바람직하게는 6배이다.

본 발명의 백굴채 추출물은 다음의 단계를 포함하는 과정에 의해 제조된다:

(a) 건조한 백굴채에 1-10배의 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 첨가하는 단계;

(b) 상기 단계 (a)의 용매 첨가된 백굴채를 40-100℃에서 3-20시간 가열하여 추출하거나, 4-40℃에서 1-15일간 추출하는 단계;

(c) 상기 단계 (b)의 추출액을 여과한 뒤 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 여과하는 단계; 및

(d) 상기 단계 (c)의 여과액을 회전감압 증발기로 건조시키는 단계.

이때 1,3-부틸렌 글리콜을 추출용매로 사용하는 경우 회전감압 증발기를 이용하여 건조시키기 어려우므로 추출 단계 (b)를 수행한 후 건조 감량이 1%(w/v)가 되게 조정한다.

본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, 상술한 추출 과정은 다음과 같이 실시된다: 우선, 원료가 되는 백굴채를 세척, 건조 및 분말화한 다음 70% 에틸 알코올을 백굴채 나무 건조중량의 6배 부피비로 첨가하여 4-40℃에서 5일 동안 추출한 후 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 여과한다. 이어, 이 여액을 65℃에서 회전감압 증발기로 건조하여 백굴채 추출물을 제조한다.

한편, 본 발명의 백굴채 추출물은 상술한 추출법에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수 성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 백굴채 추출물에 포함된다고 해석된다.

본 발명의 백굴채 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 백굴채 추출물의 함량은 피부 주름 개선용 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-10 중량%, 바람직하게는 0.001-5중량%이다. 이때 백굴채 추출물의 총 중량이 0.0001% 미만일 때에는 그 효과가 나타나기 어렵고, 10% 이상일 때에는 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며, 제형의 안정화에도 큰 영향을 미칠 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시예에서는 백굴채 추출물을 2.0% 포함하는 화장료 조성물을 제조하였으며, 이를 피부에 직접 도포함으로서 피부 주름 개선 효과가 뛰어남을 확인하였다.

본 발명의 백굴채 추출물을 포함하는 엘라스테이즈 활성 억제용 조성물 및 콜라겐 합성 촉진용 조성물은 피부 주름 개선 및 피부 노화 억제의 목적으로 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 주름의 심각도, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예 방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물의 투여량은 1일 투여량으로 대략 0.01 ㎎/㎏-100 ㎎/㎏이다.

본 발명의 조성물은 백굴채 추출물만을 유효성분으로 포함하여도 우수한 엘라스테이즈 억제 활성 및 콜라겐 합성 촉진 효과를 나타내어 피부 주름 개선 효과를 나타낼 수 있으나, 피부에 자극을 주지 않으면서 엘라스테이즈 억제 활성 및 콜라겐 합성 촉진 효과를 갖는 다른 성분을 추가로 첨가하여 제조하여도 무방하다.

본 발명의 백굴채 추출물은 실제 임상투여 시에 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용 될 수 있다.

또한, 본 발명의 피부 주름 개선용 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 백굴채 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수 (스킨), 영양 화장수 (밀크로션), 영양 크림, 맛사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로 필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 백굴채 추출물은 피부의 탄력 유지에 가장 중요한 영향을 주는 인자로서 피부 진피층에 존재하는 매트릭스 구성 성분인 엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스테이즈의 활성을 억제하고 (참조: 실험예 1) 및 피부 진피 구성 성분인 콜라겐의 합성 효과가 뛰어나다 (참조: 실험예 2). 또한, 이러한 효과를 갖는 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하여 제조한 화장료 조성물은 피부에 직접 도포시 주관적 평가 및 객관적인 피부 주름 정도의 측정에서 모두 피부 주름 개선 효과가 뛰어나며 피부 자극을 유발하지 않는다 (참조 : 실험예 3 및 4).

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

실시예 1: 백굴채 추출물의 제조

정제수로 세척하고 건조한 백굴채 200 g을 물 1.2 ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 장치된 추출기에서 5시간 동안 70-90℃로 가열하여 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 5번 여과지로 여과했다. 이 여액을 65℃에서 회전 감암 증발기로 건조하여, 건조 중량 10.23 g의 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 2: 백굴채 추출물의 제조

정제수로 세척하고 건조한 백굴채 200 g을 물 1.2ℓ에 넣고 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 다시 와트만 5번 여과지로 여과한 후, 회전 감압 증발기로 2배 농축하였다. 여기에 100% 에탄올 0.6ℓ를 가하고 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 5번 여과지로 여과했다. 이 여액을 65℃에서 회전 감암 증발기로 건조하여, 건조 중량 10.85 g의 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 3: 백굴채 추출물의 제조

정제수로 세척하고 건조한 백굴채 200 g을 물 1.2 ℓ에 넣고 4-40℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 5번 여과지로 여과했다. 이 여액을 65℃에서 회전 감암 증발기로 건조하여, 건조 중량 9.83 g의 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 4-21 : 백굴채 추출물의 제조

하기 표 1의 추출용매를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 3에서와 동일한 방법으로 추출하여 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 4-21의 백굴채 추출물

추출물	추출용매	최종 추출물의 건조 중량 (단위 : g)
실시예 4	10% 에탄올	12.8
실시예 5	20% 에탄올	14.9
실시예 6	30% 에탄올	15.2
실시예 7	40% 에탄올	15.3
실시예 8	50% 에탄올	16.1
실시예 9	60% 에탄올	18.3
실시예 10	70% 에탄올	18.2
실시예 11	80% 에탄올	16.3
실시예 12	90% 에탄올	16.5
실시예 13	100% 에탄올	15.4
실시예 14	메탄올	15.3
실시예 15	n-프로판올	11.5
실시예 16	이소프로판올	10.6
실시예 17	2-부탄올	4.2
실시예 18	아세톤	3.5
실시예 19	클로로포름	2.5
실시예 20	에틸아세테이트	3.3
실시예 21	부틸아세테이트	2.6

실시예 22 : 백굴채 추출물의 제조

정제수로 세척하고 건조한 백굴채 200 g을 1.2 ℓ의 1,3-부틸렌 글리콜에 넣고 48시간 동안 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 5번 여과지로 여과했다. 이 추출물은 다시 건조 감량을 구하여 최종 농도가 1%(w/v)되게 준비하였다.

실시예 23 : 백굴채 추출물의 제조

정제수로 세척하고 건조한 백굴채 200 g을 10% 에탄올 1.2 ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 장치된 추출기에서 5시간 가열하여 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과하고, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 5번 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 65℃에서 회전 감압 증발기로 건조하여, 건조 중량 10.2 g의 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 24-32 : 백굴채 추출물의 제조

하기 표 2의 추출용매를 사용하는 것을 제외하고는 실시예 23과 동일한 방법으로 추출하여 백굴채 추출물을 얻었다.

실시예 24-32의 백굴채 추출물

추출물	추출용매	최종 추출물의 건조 중량 (단위 : g)
실시예 24	20% 에탄올	6.3
실시예 25	30% 에탄올	7.5
실시예 26	40% 에탄올	7.4
실시예 27	50% 에탄올	8.3
실시예 28	60% 에탄올	8.1
실시예 29	70% 에탄올	9.8
실시예 30	80% 에탄올	8.2
실시예 31	90% 에탄올	8.2
실시예 32	100% 에탄올	8.0

실험예 1 : 백굴채 추출물의 엘라스테이즈 활성 억제 효과

상기 실시예 1-32에서 제조한 백굴채 추출물에 대하여 엘라스테이즈 활성 억제 효과를 측정하였다.

먼저 완충액 [0.267 M Tris 액을 pH 8.0이 되도록 0.267 M 염산 (HCl) 용액으로 조정] 60 ㎕에 8.8 mM의 엘라스테이즈 기질 표준액 (Succ-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide) 20 ㎕를 넣었다. 여기에 100 ㎍/㎖ 농도의 실시예 1-32의 백굴채 추출물을 각각 100 ㎕ 첨가하고, 10 ㎍/㎖ 농도의 효소액 [돼지 췌장 엘라스테이즈 (Porcine Pancreatic Elastase)] 20 ㎕를 첨가하여 25℃에서 15분간 반응을 시켰다. 반응 후 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 백굴채 추출물 대신에 증류수를 사용하여 같은 방법으로 반응시키고 흡광도를 측정하였다. 엘라스테이즈 활성 억제율은 다음의 수학식에 따라 구하였으며 그 결과를 표 3에 나타내었다.

<수학식 1>

백굴채 추출물의 엘라스테이즈 활성 억제 효과

시험 물질	엘라스테이즈 활성 억제율(%)
실시예 1	65.3
실시예 2	63.5
실시예 3	64.8
실시예 4	66.3
실시예 5	65.8
실시예 6	67.5
실시예 7	68.5
실시예 8	69.6
실시예 9	71.2
실시예 10	73.2
실시예 11	73.3
실시예 12	74.2
실시예 13	73.5
실시예 14	75.6
실시예 15	76.8
실시예 16	77.5
실시예 17	73.2
실시예 18	72.8
실시예 19	71.5
실시예 20	70.5
실시예 21	68.9
실시예 22	65.8
실시예 23	66.5
실시예 24	63.5
실시예 25	62.5
실시예 26	63.6
실시예 27	68.9
실시예 28	65.6
실시예 29	62.3
실시예 30	61.2
실시예 31	65.3
실시예 32	62.3

실험예 2 : 백굴채 추출물의 콜라겐 합성 효과

인체 정상 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 ×10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 백굴채 추출물의 최종농도를 100 ppm으로 하여 혈청이 없는 DMEM으로 교체한 실험군과 백굴채 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐의 양을 측정하였다. PICP의 양은 ng/㎖로 환산하였으며, 이 값을 하기 수학식에 대입하여 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

<수학식 2>

콜라겐 합성 효과(%) = [(A ×100) / B] - 100

상기 수학식에서, A는 백굴채 추출물을 첨가한 실험군의 콜라겐 생성량이며, B는 대조군의 콜라겐 생성량이다.

백굴채 추출물의 콜라겐 합성 효과

시험 물질	콜라겐 합성 효과(%)
실시예 1	72.3
실시예 2	73.5
실시예 3	74.2
실시예 4	73.2
실시예 5	71.2
실시예 6	70.5
실시예 7	70.6
실시예 8	68.9
실시예 9	75.3
실시예 10	72.5
실시예 11	73.5
실시예 12	71.2
실시예 13	73.2
실시예 14	71.0
실시예 15	72.2
실시예 16	73.3
실시예 17	71.2
실시예 18	71.5
실시예 19	72.5
실시예 20	71.6
실시예 21	70.2
실시예 22	75.3
실시예 23	70.6
실시예 24	70.5
실시예 25	70.3
실시예 26	70.5
실시예 27	75.2
실시예 28	74.3
실시예 29	73.5
실시예 30	76.8
실시예 31	72.5
실시예 32	71.5

이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 엘라스테이즈 활성 억제 효과 및 콜라겐 생합성 효과를 갖는 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 포함하는 화장료가 하기의 처방 예들로 한정되는 것은 아니다.

처방예 1 : 유연화장수

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채추출물 글리세린 1,3-부틸렌 글리콜 PEG1500 알란토인 DL-판테놀 EDTA-2Na 벤조페논-9 소듐 히아루로네이트 에탄올 옥틱도데세스-16 폴리솔베이트 20 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 5.0 3.0 1.0 0.1 0.3 0.02 0.04 5.0 10.0 0.2 0.2 미량 잔량
합계	100

처방예 2 : 수렴화장수

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 수렴화장수의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채추출물 글리세린 1,3-부틸렌 글리콜 알란토인 DL-판테놀 EDTA-2Na 벤조페논-9 소듐 히아루로네이트 에탄올 폴리솔베이트 20 위치하젤 추출물 구연산 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 2.0 2.0 0.2 0.2 0.02 0.04 3.0 15.0 0.3 2.0 미량 미량 잔량
합계	100

처방예 3 : 영양화장수

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채 추출물 글리세릴 스테아레이트SE 스테아릴 알콜 라놀린 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 경화식물유 광물유 스쿠알란 트리옥타노인 디메치콘 초산토코페롤 카르복시비닐폴리머 글리세린 1,3-부틸렌 글리콜 소듐히아루로네이트 트리 에탄올아민 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 1.5 1.5 1.5 1.3 0.5 1.0 5.0 3.0 2.0 0.8 0.5 0.12 5.0 3.0 5.0 0.12 미량 잔량
합계	100

처방예 4 : 영양크림

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(단위:중량%)
백굴채 추출물 친유형 모노스테아린산글리세린 세테아릴알콜 스테아린산 밀납 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 경화식물유 스쿠알란 광물유 트리옥타노인 디메치콘 소듐마그네슘실리케이트 글리세린 베타인 트리에타올아민 소듐히아루로네이트 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량
합계	100

처방예 5 : 맛사지크림

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 맛사지크림의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채 추출물 친유형 모노스테아린산 글리세린 스테아릴알콜 스테아린산 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 이소스테아릴이소스테레이트 스쿠알란 광물유 디메치콘 히드록시에칠셀룰로오스 글리세린 트리에타올아민 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 1.5 1.5 1.0 1.5 0.6 5.0 5.0 35.0 0.5 0.12 6.0 0.7 미량 잔량
합계	100

처방예 6 : 에센스

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 에센스의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채 추출물 글리세린 베타인 PEG 1500 알란토인 DL-판테놀 EDTA-2Na 벤조페논 - 9 히드록시에틸 셀룰로오스 소듐 히아루로네이트 카르복시비닐폴리머 트리에탄올아민 옥틸도데칸올 옥틸도데세스-16 에탄올 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 10.0 5.0 2.0 0.1 0.3 0.02 0.04 0.1 8.0 0.2 0.18 0.3 0.4 6.0 미량 잔량
합계	100

처방예 7 : 팩

백굴채 추출물 (실시예 10)을 함유한 화장료 중 팩의 처방예는 다음과 같다.

성분	함량(단위:중량%)
백굴채 추출물 폴리비닐알콜 셀룰로오스 검 글리세린 PEG 1500 사이크로데스트린 DL-판테놀 알란토인 글리시리진산 모노암모늄 니코틴아미드 에탄올 PEG 40 경화피마자유 향, 색소, 방부제 증류수	2.0 15.0 0.15 3.0 2.0 0.15 0.4 0.1 0.3 0.5 6.0 0.3 미량 잔량
합계	100

실험예 3: 백굴채 추출물을 함유하는 크림의 주름 개선 효과의 객관적 평가

본 발명의 주름 개선 효과를 건강한 한국 여성 20명 (연령분포 35-51세)을 대상으로 측정하였다. 백굴채 추출물을 함유한 상기 제형예 4의 크림, 제형예 4에서 백굴채 추출물을 0.1 중량% 아스코르빈산으로 대체한 크림 (비교예 1) 및 0.1 중량% 레티노익산으로 대체한 크림 (비교예 2), 그리고 정제수로 대체한 크림 (대조군)을 팔의 상박 2 ×2 ㎠의 면적에 매일 아침 및 저녁으로 2회, 0.2 g씩 6주 동안 도포하였다. 실리콘 재질의 용액으로 도포전과 도포 8주 후 피부주름의 레플리카 (replica)를 뜨고, 피부 비지오미터 (Skin Visiometer SV400, C＋K Electronics GmbH., 독일연방공화국)로 피부 주름의 변화를 측정하였다. CCD 카메라로 레플리카의 상을 3차원적으로 분석하였으며, 각 주름의 거칠기 (R_m: m은 1 이상의 정수)의 합을 주름의 개수로 나눈 값인 하기 수학식 3의 평균 주름 거칠기 (R_z)로 주름 개선 효과를 분석하였다. 실험 결과는 표 12에 나타나 있다.

<수학식 3>

Rz = (R₁ ＋ R₂ ＋ R₃ ＋ ·····＋ R_m-2 ＋ R_m-1 ＋ R_m) / 주름의 개수(m)

구분	ΔRz = 사용전 Rz - 6주 후 Rz
구분	대조군	제형예 4	비교예 1	비교예 2
피검자 1	0.005	0.151	0.105	0.130
피검자 2	0.009	0.150	0.116	0.116
피검자 3	0.006	0.145	0.106	0.124
피검자 4	0.003	0.149	0.115	0.118
피검자 5	0.006	0.132	0.108	0.102
피검자 6	0.008	0.139	0.116	0.104
피검자 7	0.014	0.145	0.124	0.109
피검자 8	0.011	0.147	0.110	0.127
피검자 9	0.010	0.142	0.127	0.134
피검자 10	0.006	0.137	0.124	0.126
피검자 11	0.008	0.156	0.121	0.105
피검자 12	0.006	0.142	0.122	0.116
피검자 13	0.011	0.135	0.135	0.128
피검자 14	0.009	0.143	0.116	0.120
피검자 15	0.010	0.150	0.134	0.127
피검자 16	0.012	0.147	0.128	0.132
피검자 17	0.006	0.129	0.113	0.127
피검자 18	0.007	0.137	0.123	0.113
피검자 19	0.003	0.156	0.119	0.127
피검자 20	0.001	0.140	0.112	0.118
평균	0.008	0.144	0.119	0.120

상기 표 12의 결과에 의하면 정제수만을 포함하는 대조군에서는 주름 개선 효과가 나타나지 않았으며, 백굴채 추출물을 함유한 제형예 4는 백굴채 추출물 대신 아스코르빈산을 함유한 비교예 1과 레티노익산을 함유한 비교예 2에 비해 주름 개선 효과가 훨씬 높았다. 비교예 1과 비교예 2는 제형예 4와 주름 개선 효과에 있어 99% 신뢰수준에서 통계적으로 유의한 차이가 있었다. 따라서, 본 발명의 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 피부 주름 개선 효과가 뛰어남을 알 수 있다.

실험예 4 : 백굴채 추출물을 함유한 화장료의 주름 개선 효과의 주관적 평가

본 발명의 화장료의 주름 개선 효과를 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 백굴채 추출물을 2% 함유하고 있는 처방예 4의 영양 크림과 처방예 4에서 백굴채 추출물을 정제수로 대체한 대조예의 크림을 사용하였다. 30-40세 여성 20명을 무작위로 2개군으로 나누어 처방예 4와 대조예의 크림을 매일 아침, 저녁 2회씩 세안 후 크림 적당량을 눈가를 중심으로 2개월간 연속적으로 바르게 하였다. 각 피검자의 주름 개선 효과를 육안 관찰을 통하여 평가하였다. 실험 결과는 하기의 표 13에 나타낸 바와 같다.

본 발명 화장료의 주름 개선 효과(육안평가)

처리군	주름 개선 효과 우수	주름 개선효과 약간	주름개선 효과 없음	유효율(%)
처방예 4의 크림	8	8	4	70.0
대조예의 크림	1	3	16	45.0

상기 실험 결과에 의하면, 백굴채 추출물을 함유한 본 발명의 화장료 조성물은 대조예의 화장료에 비하여 높은 주름개선 효과를 나타낸다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물을 피부에 도포한 피검자들에게서 피부 자극을 관찰할 수 없었다.

이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 효과가 뛰어난 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 엘라스테이즈 활성 억제 효과 및 콜라겐 합성 촉진 효과가 뛰어난 백굴채 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피부 주름 개선 효과가 뛰어나다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

삭제
삭제
백굴채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 백굴채 추출물은 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 추출 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 4 항에 있어서, 상기 추출 용매는 에틸 알코올, 메탄올 또는 부탄올인 것을 특징으로 하는 조성물.
삭제
제 3 항에 있어서, 상기 백굴채 추출물은 조성물의 총 중량에 대해 0.0001-10 중량%인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.