KR101077229B1

KR101077229B1 - 마테차로부터 분리한 메가스티그만 유도체의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 조성물

Info

Publication number: KR101077229B1
Application number: KR1020100004768A
Authority: KR
Inventors: 유익동; 허광화; 유재국; 김진표
Original assignee: 주식회사한국신약
Priority date: 2010-01-19
Filing date: 2010-01-19
Publication date: 2011-10-27
Also published as: KR20110085151A

Abstract

본 발명은 하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 메가스티그만 유도체 화합물은 사람 중성구 엘라스타제 활성을 효과적으로 저해하여 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내므로 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 주름 개선을 위한 의약품, 화장품 또는 식품에 유용하게 사용될 수 있다.
[화학식 1]

[화학식 2]

Description

마테차로부터 분리한 메가스티그만 유도체의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 조성물{Megastigmane derivatives isolated from Ilex paraguariensis, preparation method thereof and anti-wrinkle composition containing the same as an active ingredient}

본 발명은 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.

인체를 이루고 있는 가장 큰 기관인 피부는 외부로부터의 물리적, 화학적 자극으로부터 체내를 보호해 주는 기능과 체내의 습도, 체온 등의 항상성을 유지하는 기능을 한다. 그러나, 나이가 들거나 외부의 자극에 지속적으로 노출되게 되면 피부가 손상되고 생리 기능이 저하되는 등 피부 노화가 빠르게 진행된다. 이러한 피부 노화는 나이가 들어감에 따라 필연적으로 발생하는 자연스런 현상이나 생활수준의 향상으로 삶의 질에 대한 요구가 증대되고 있고, 여러 가지 환경요인에 의해 피부 노화의 발생 요인이 증가한 지금에 들어서는 피부 노화에 대한 대책이 절실히 요구되고 있다.

피부노화는 유전적, 환경적 등의 다양한 요인에 의해 영향을 받는데 크게 자연노화 또는 내인성 노화와 외인성 노화로 구분된다. 자연노화 또는 내인성 노화(intrinsic aging)는 유전정보에 따라 시간이 지나면서 일어나는 노화현상으로 햇빛에 노출되지 않는 피부에서 주로 관찰이 되고, 잔주름과 피부탄력감소를 그 특징으로 하며 인위적인 조절이 어렵다. 외인성 노화(extrinsic aging)는 외부환경 요인, 그 중에서도 햇빛에 존재하는 자외선에 의해 일어나는 노화 현상으로 광노화(photoaging)라고도 하며, 햇빛에 노출이 많이 되는 부위에서 나타나며, 깊은 주름, 피부결의 거침, 색소침착, 피부톤 및 피부탄력이 감소하는 것을 특징으로 하며, 인위적인 조절이 용이하다. 따라서 외인성 노화를 방지하기 위한 연구가 지속되어 왔으며, 특히 장기간 자외선 노출에 의해 진행되는 외인성 광노화에 따른 주름 형성방지에 대한 연구가 주목되고 있다(Gilchre st B.A., J. Am. Acad. Dermatol., 1989:21:610-613).

노화에 수반하는 피부의 외관 변화 중 가장 두드러진 것은 주름이다. 주름은 이마, 눈 주변, 양미간, 입 주변 등의 안면이나 목, 목 둘레, 팔꿈치, 겨드랑이, 손, 발 등의 신체 각 부위에 생긴다. 주름은 대부분 30세 전후부터 눈에 띄기 시작해 나이가 들어감에 따라 그 수나 깊이 및 범위가 증가해간다.

피부의 구조에 따라 주름 발생 원인을 좀 더 자세히 설명하면, 다음과 같다. 피부는 크게 표피와 진피로 나뉜다. 표피는 주로 케라티노사이트(keratinocytes), 멜라닌세포(melanocytes) 및 랑게르한스 세포(Langerhans cells)로 구성되는 얇은 보호층이고, 진피는 콜라겐과 탄력섬유로 구성되는 섬유조직 및 결합조직의 두껍고 복잡한 층이다. 콜라겐은 피부의 주요 구조 단백질로 피부의 인장강도(tensile strength) 및 인성(toughness)을 결정하며, 탄력섬유는 피부탄성(skin resilience) 및 피부탄력(skin elasticity)에 중요하다.

표피에서는 각질 형성 세포의 턴-오버(turn-over)의 감소로 각질층의 누적과 이로 인해 각질층이 두꺼워지고, 각질층의 수분 함유 능력이 감소되며, 각질이 경화되어 주름이 발생하게 된다. 표피와 진피의 경계부위는 표피세포 지지, 부착, 영양물질의 이동, 표피 분화의 조절 등에 관여하는데, 각종 노화 요인으로 특히, UV 에 인하여 콜라겐 IV, VII가 감소되어 표피, 진피 지지기능이 감소되고, 선별 투과 기능이 약화되어 해로운 성분이 쉽게 진피에 영향을 미치게 되어 주름이 생성된다(Keene, J., Cell Biol., 104, pp.611-621, 1987).

진피는 표피의 아래에 있는 결합조직으로 이루어지는 조직으로 표피 세포인 케라티노사이트처럼 치밀하게 채워져 있지 않고 세포외 공간이 많으며 세포외 간질(extracellular matrix)이라 불리는 거대 분자의 망상 구조에 의해 채워져 있다. 이 세포외 간질은 진피 내의 섬유아세포에서 만들어지며, 콜라겐, 엘라스틴 등의 섬유상 단백질과 히알루론산 등의 산성 뮤코다당체라 불리는 다당류로 이루어져 있다. 피부 주름 형성에 관련이 있는 결합 조직은 주로 콜라겐 섬유(collagen fiber), 세망 섬유(reticular fiber), 엘라스틴 섬유(elastic fiber) 등의 섬유 성분으로 구성되어 있다. 진피 조직 내에 있는 콜라겐과 엘라스틴은 서로 긴밀하게 관련되어 작용함으로써 피부의 유연성과 탄력을 유지하게 하는 중요한 섬유 조직이다.

콜라겐은 피부의 유연성을 주는 섬유 조직으로서 진피 조직의 약 70%를 차지하는 주요 구성 요소로 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력, 세포와의 부착 및 세포 분화 등에 관여한다(Journal of the American Academy of Dermatology, 2001, 17(4):610-613). 콜라겐 섬유의 폴리펩타이드 사슬은 섬유아세포의 과립형질세망 내에서 양끝에 확장펩타이드(telopeptide)를 가지고 있는 상태로 합성된 뒤, 3중 나선 구조로 조합된 프로콜라겐 형태로 세포 외로 분비된다. 이렇게 분비된 프로콜라겐은 특정 효소에 의해서 확장펩타이드가 절단되어 트로포콜라겐이 생성되고 이들은 세포외 기질에서 서로 조합되어 콜라겐 섬유가 합성된다. 이러한 콜라겐 섬유의 합성은 피부 노화가 진행되면서 급격히 감소하며, 또한 외부 환경에 의해 콜라겐 섬유가 변형되면서 피부에 주름이 많이 생성되고 깊어지게 된다. 이러한 콜라겐의 분해에는 콜라겐 분해 효소인 콜라게나아제(collagenase)가 관여한다.

또한, 엘라스틴은 콜라겐과 마찬가지로 피부의 탄력성을 좌우하는 주요 섬유 조직으로서 그 양은 약 2% 정도로 콜라겐과 비교하여 적은 양이지만 표피를 지탱하는 연결망 조직을 형성하고 있으므로 피부 탄력에 매우 중요한 역할을 한다. 엘라스틴은세포 내에서 트로포엘라스틴(tropoelastin)이라는 폴리펩타이드로 합성된 다음 세포 외에서 트로포엘라스틴 간의 교차결합을 통해 생성된다. 따라서, 엘라스틴은 트로포엘라스틴의 교차결합에 의해 2차 또는 3차원적인 탄성을 가지게 된다. 엘라스틴은 엘라스타제(elastase)라는 분해 효소에 의하여 분해되며, 18-19세까지는 섬유아세포에 의하여 계속 생성되지만 그 이후부터는 생성이 중단되고 이미 생성된 엘라스틴만으로 피부 탄력을 담당해야 하므로 엘라스틴이 한번 약화되면 그 탄력성을 회복하기가 매우 어렵다.

이러한 콜라겐 또는 엘라스틴은 피부 주름 형성에 영향을 미치는 주요한 요인이 된다. 즉, 피부 주름 형성 등의 피부노화 현상은 콜라겐의 파괴, 콜라겐 합성의 감소, 엘라스틴의 소실 등에 의해 나타나는 것으로서, 피부 표피에서도 일어나지만 이보다는 진피에서 일어나는 현상이라고 볼 수 있다.

사람의 중성구 엘라스타제(Human neutrophil elastase, HNE)는 주로 다형핵 백혈구의 호아주르 과립에 위치하는 세린 프로테아제로서, 수용성의 탄력 섬유 단백질인 엘라스틴(elastin) 및 피브로넥틴(fibronectin), 콜라겐(collagen) 및 연골 조직(cartilage issue)과 같은 결합조직 단백질을 분해하는 기질 특이성을 가진다. 생물학적으로, 엘라스타제 활성은 나이가 들수록 두드러지게 증가하며, 피부 탄력을 감소시키는 것으로 알려져 있다. 따라서, 상기 엘라스타제 활성을 저해함으로써 피부 주름을 개선할 수 있는 것으로 기대된다.

현재 개발되고 있는 피부 주름 개선 또는 항노화를 위한 유효성분들은 일부 화장품 원료로 사용할 수 없거나 매우 불안정하고, 피부로의 전달이 용이하지 않아 특별한 안정화 시스템과 전달체계가 필요하며, 피부주름의 개선효과가 가시적이지 않는 등의 문제점이 있어서 최근 레티노이드(retinoid)를 함유한 피부보호제로 관심이 점차 집중되고 있다. 레티노이드는 일광으로 축적된 결과인 주름살, 피부의 두꺼워짐, 처짐, 탄력 감소 등의 광노화 현상을 해결하는 수단으로 이용되고 있다. 그러나 레티노이드는 매우 불안정한 화합물로 자외선, 수분, 열, 산소에 민감하여 쉽게 화학적인 변화를 일으키는 문제점이 있어 이를 해결하기 위한 천연물 유래의 유효성분 개발에 연구가 집중되고 있는 실정이다.

한편, 마테(Ilex paraguariensis, mate)는 감탕나무과의 상록 소교목으로 감탕나무과에 속하는 높이 6 m 정도의 식물로 남아메리카의 파라과이나 브라질 지역에 분포한다. 야생 상태에서는 본래 윗부분이 둥근 형태를 하고 있지만 재배할 경우에는 그 형태가 변형되어 줄기가 많은 관목이 되고 야생 상태보다 양질의 차잎을 재배할 수 있게 되며, 추수는 2년에 1번씩 한다. 마테의 꽃은 작고 잎겨드랑이에 달리며 4수이며 녹색이고, 열매는 적색 또는 적갈색이고 둥글며 지름 6 ㎜ 정도이다. 마테의 잎은 차로 음용되며, 잎은 10 ㎝ 내외로 달걀 또는 타원형 모양으로 두꺼우며 가장 자리가 톱니모양을 닮았다. 잎에는 카페인 성분이 함유되어 있고(2% 내외) 향기가 좋다. 잎은 따로 추수하고 말려서 물에 우려낸 차로 음용된다. 마테는 칼슘과 철분 등 무기질이 많은 토양에서 자라기 때문에 철분 칼슘 마그네슘 등의 무기질이 많이 포함되어 있으며, 특히 철 함유량이 매우 높고, 녹차의 5배에 달하는 철 함유량을 가진다. 특히나 다른 차에는 철의 흡수를 방해하는 탄닌 성분이 들어있는데 반해 마테에는 탄닌이 거의 들어 있지 않다. 마테차는 마테의 잎을 말려서 부수어 만든 것으로서, 트리테르펜, 카페인 및 카페인-유사 화합물을 함유한다. 마테차는 변비, 비만, 어깨 결림, 두통 등의 치료에 효과가 있다고 알려져 있다.

마테에 대한 종래 연구들은 크산틴(xanthine), 카페오일 유도체(caffeoyl derivative), 플라보노이드(flavonoid) 및 트리테르페노이드 사포닌(triterpenoid saponin)과 같은 많은 생활성의 화합물의 존재를 발견하였다. 예르바 마테(Yerba mate, ilex paraguariensis)는 항산화 및 세포 보호작용(Filip et al., 2000; Gugliucci and Stahl, 1995), 항비만 및 발열작용(Martinet et al., 1999), 순환계 작용 및 콜레스테롤 저하효과(Gorgen et al., 2005) 및 담즙 촉진 작용(Gorzalczany et at., 2001) 등과 같은 다양한 생물학적 활성이 알려져 있다.

그러나, 종래 마테로부터 분리한 메가스티그만(megastigmane) 유도체의 사람의 중성구 엘라스타제에 대한 효과는 알려진 바가 전혀 없다. 이에 본 발명자들은 자외선, 수분, 열, 산소 등에 의해 쉽게 화학적인 변화를 일으키지 않는 안정한 천연물 유래의 주름 개선제를 개발하기 위하여 연구하던 중, 마테로부터 분리한 메가스티그만 유도체가 엘라스타제 활성을 효과적으로 저해하여 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내어 이를 유효성분으로 함유하는 조성물을 주름 개선을 위한 의약품, 화장품 또는 식품으로 사용될 수 있음을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 신규한 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 신규한 메가스티그만 유도체 화합물의 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규한 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규한 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 화장품 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규한 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 식품 조성물을 제공하는 데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이의 제조방법을 제공한다.

[화학식 1]

[화학식 2]

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 화장품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 메가스티그만 유도체 화합물은 사람 중성구 엘라스타제 활성을 효과적으로 저해하여 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내므로, 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 주름 개선을 위한 의약품, 화장품 또는 식품에 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 실시예 1의 ¹³C-NMR 스펙트럼, ¹H-NMR 스펙트럼 및 HMBC 스펙트럼의 데이타이고;
도 2는 본 발명에 따른 실시예 2의 ¹³C-NMR 스펙트럼, ¹H-NMR 스펙트럼 및 HMBC 스펙트럼의 데이타이다.

본 발명은 하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

상기 화학식 1 및 화학식 2는 각각 마테노사이드 A 및 마테노사이드 B로 명명한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물 또는 수화물을 모두 포함한다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 따른 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체는

마테에 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 가하여 마테 추출물을 수득하는 단계(단계 1);

상기 단계 1에서 수득한 마테 추출물을 n-헥산 및 에틸아세테이트로 순차적으로 계통분획하여 마테 분획물을 수득하는 단계(단계 2); 및

상기 단계 2에서 수득한 마테 분획물에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하는 단계(단계 3)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

이하 본 발명에 따른 상기 제조방법을 단계별로 더욱 구체적으로 설명한다.

먼저, 본 발명에 따른 상기 단계 1은 추출용매로 마테잎 추출물을 수득하는 단계이다.

상기 마테잎 추출물은 마테 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 마테는 채취한 것, 양식한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.

상기 추출물은 초임계추출, 아임계추출, 고온추출, 고압추출 또는 초음파추출법 등의 추출장치를 이용한 방법 또는 XAD 및 HP-20을 포함한 흡착수지를 이용하는 방법 등 당업계의 통상적인 추출방법을 사용하여 제조할 수 있으며, 바람직하게는 가온하며 환류 추출 또는 상온에서 추출하여 제조할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 추출 회수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 추출물은 추출용매로 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출될 수 있다. 상기 유기용매는 C₁ 내지 C₄의 알코올, 초산에틸, 염화메틸렌 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 이들의 혼합용매인 것이 바람직하고, C₁ 내지 C₄의 알코올인 것이 더욱 바람직하고, 메탄올 또는 에탄올로 추출하는 것이 가장 바람직하다. 상기 추출용매는 마테잎 중량의 2배 내지 10배로 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 5배로 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

일례로 본 발명에 따른 마테 추출물은 마테 건조물을 적당한 크기로 분쇄하여 추출용기에 넣고 추출용매를 넣고, 일정시간 방치한 다음 거름종이 등으로 여과하여 알코올 추출물을 얻을 수 있다. 추출시간은 1 내지 5일인 것이 바람직하며, 2 내지 4일인 것이 더욱 바람직하다. 이후에 감압농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 거칠 수 있다.

다음으로, 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 얻은 마테 추출물을 물에 분산한 후, 극성을 달리하는 용매로 순차적으로 분획하여 분획물을 얻는 단계이다. 상기 용매로는 n-헥산(n-hexane), 에틸아세테이트(ethylacetate)를 순차적으로 사용할 수 있다.

다음으로, 상기 단계 3은 상기 단계 2에서 수득한 분획물에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하는 단계이다.

상기 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔 크로마토그래피용 컬럼 또는 크기 배제 크로마토그래피용 컬럼을 사용하여 수행될 수 있으며, 상기 크기 배제 크로마토그래피용 컬럼으로는 세파덱스 LH-20을 충진한 컬럼을 사용할 수 있다.

상기 단계 2에서 수득한 분획물에 대하여 메틸렌클로라이드와 메탄올의 혼합용매를 사용하여 농도구배 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행한다. 이때, 메틸렌클로라이드와 메탄올의 혼합용매의 농도구배는 20:1 내지 1:2인 것이 바람직하며, 유속은 4.0 내지 5.0 ㎖/분인 것이 바람직하고, 수행 시간은 20 내지 25 시간이 바람직하다.

상기 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 수득한 분획물에 대하여 세파덱스 LH-20 컬럼을 이용한 크로마토그래피를 수행할 수 있다. 이때. 이동상은 메틸렌클로라이드와 메탄올의 혼합용매(1:1)인 것이 바람직하다.

상기 단계 3에서 세파덱스 LH-20 컬럼을 이용한 크로마토그래피를 수행하여 수득한 분획물에 대하여 n-헥산과 아세톤의 혼합 용매를 사용하여 농도구배 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행할 수 있다. 이때, n-헥산과 아세톤의 혼합용매의 농도구배는 10:1 내지 2:8인 것이 바람직하다.

상기 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 수득한 분획물에 대하여 세파덱스 LH-20 컬럼을 이용한 크로마토그래피를 수행할 수 있다. 이때, 이동상은 메탄올인 것이 바람직하다.

상기 실리카겔 컬럼 크로마토그래피와 세파덱스 LH-20 컬럼을 이용한 크로마토그래피를 수행한 후에 고속 액체 크로마토그래피를 수행하여 화학식 1 또는 화학식 2의 마테노사이드 화합물을 분리할 수 있다. 상기 고속 액체 크로마토그래피는 메탄올과 증류수의 혼합용매(2:3)를 전개용매로 사용하여 수행될 수 있다. 이때, 상기 이동상의 유속은 3.0 내지 5.0 ㎖/분인 것이 바람직하고, 수행 시간은 20 내지 50 시간이 바람직하다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 유도체 화합물은 엘라스타제 활성을 저해함으로써 주름 예방 및 치료 용도로 사용될 수 있다. 이들의 주름 예방 및 치료 용도를 구체적인 실험결과를 근거로 설명한다.

본 발명에 따른 화학식 1 또는 2의 유도체 화합물은 사람 중성구 엘라스타제 활성저해 효과 측정 실험에서 농도의존적으로 엘라스타제 활성을 저해시키고, 각각 50.4 μM, 11.1 μM의 IC₅₀ 값을 나타내어 우수한 엘라스타제 활성저해효과를 나타냄으로써, 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내는 것을 알 수 있다(실험예 1 및 표 1 참조).

따라서, 본 발명에 따른 화학식 1 또는 2의 유도체 화합물은 사람 중성구 엘라스타제 활성을 효과적으로 저해하여 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내므로, 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 주름 개선을 위한 의약품, 화장품 또는 식품에 유용하게 사용될 수 있다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 화장품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 치료용 약학적 조성물은 하기의 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제. 액제. 현탁제, 유화제, 시럽제. 과립제, 엘릭시르제 등이 있는데, 이들 제형은 상기 유효성분 이외에 통상적으로 사용되는 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 활택제, 결합제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 1종 이상 사용할 수 있다. 붕해제로는 한천, 전분, 알긴산 또는 이의 나트륨염, 무수인산일수소 칼슘염 등이 사용될 수 있고, 활택제로는 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 이의 마그네슘염 또는 칼슘염, 폴리에틸렌 글리콜 등이 사용될 수 있으며, 결합제로는 마그네슘 알루미늄 실리케이트. 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨카복시메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리딘, 저치환도 하이드록시프로필셀룰로오스 등이 사용될 수 있다. 이외에도 락토즈, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로오스. 글리신 등을 희석제로 사용할 수 있으며, 경우에 따라서는 일반적으로 알려진 비등 혼합물, 흡수제, 착색제, 향미제, 감미제 등을 함께 사용할 수 있다.

또한 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 치료용 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사제, 정맥주사제, 근육 내 주사제 또는 흉부 내 주사제를 주입하는 방법에 의한다. 이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제조할 수 있다.

상기 조성물은 멸균되거나 또는 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염, 완충제 등의 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.

본 발명의 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 치료용 약학적 조성물을 단위 용량 형태로 제형화하는 경우, 유효성분으로서 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 약 0.1 내지 1,500 ㎎의 단위용량으로 함유되는 것이 바람직하다. 투여량은 환자의 체중, 나이 및 질병의 특수한 성질과 심각성과 같은 요인에 따라 의사의 처방에 따른다. 그러나, 성인 치료에 필요한 투여량은 투여의 빈도와 강도에 따라 하루에 약 1 내지 500 ㎎ 범위가 보통이다. 성인에게 근육 내 또는 정맥 내 투여 시 일 회 투여량으로는 분리하여 하루에 보통 약 5 내지 300 ㎎의 전체 투여량이면 충분할 것이나, 일부 환자의 경우 더 높은 일일 투여량이 바람직할 수 있다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 화장품 조성물은 피부학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 기초 화장품 조성물(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 바디오일), 색조 화장품 조성물(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발 제품 조성물(샴푸, 린스, 헤어컨디셔너, 헤어젤), 비누 등의 형태로 제조될 수 있다.

상기 부형제로는 피부연화제, 피부 침투 증강제, 착색제, 방향제, 유화제, 농화제 및 용매를 포함할 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제 및 보습제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 물성개선을 목적으로 점증제, 무기염류, 합성 고분자 물질 등을 포함할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 화장품 조성물로 세안제 및 비누를 제조하는 경우에는 통상의 세안제 및 비누 베이스에 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 첨가하여 용이하게 제조할 수 있다. 크림을 제조하는 경우에는 일반적인 수중유적형(O/W)의 크림베이스에 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 첨가하여 제조할 수 있다. 여기에 향료, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제 등과 물성개선을 목적으로 하는 단백질, 미네랄, 비타민 등의 합성 또는 천연소재를 추가로 첨가할 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물에 함유되는 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염의 함량은 전체 조성물 총중량에 대하여 0.001 내지 10 중량%인 것이 바람직하고, 0.01 내지 5 중량%인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 목적하는 주름 개선 효과를 기대할 수 없고, 10 중량% 초과인 경우에는 안전성 또는 제형상의 제조에 어려움이 있을 수 있다.

또한, 본 발명의 화장품 조성물은 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 식품 조성물은 식품, 음료 등의 건강보조 또는 건강기능성 식품에 첨가할 수 있다. 이 경우, 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 식품 첨가물로 사용시에 원료에 대하여 0.01 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 5 중량%의 양으로 첨가할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간 섭취하는 경우에 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안정성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염은 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한이 없다. 상기 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함하는 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.

본 발명의 식품 보조 첨가제는 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스 등과 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 솔비톨, 에르트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명에 따른 조성물 100 중량%당 일반적으로 약 0.01 내지 0.04 중량%, 바람직하게는 0.02 내지 0.03 중량%이다.

상기 외에 본 발명에 따른 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명에 따른 조성물은 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명에 따른 조성물 100 중량% 당 0.01 내지 0.1 중량%의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다,

단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> 마테노사이드 A의 제조

단계 1 : 마테 메탄올 추출물의 제조

예르바코리아(Yerba Korea)에서 구입한 마테잎 8 ㎏을 추출용기에 넣고, 메탄올 20 ℓ를 가하여 상온에서 3일 동안 추출하였고, 거름종이로 여과하여 추출물을 얻었다. 추출과정을 3회 반복하였고, 이후 용매를 감압 농축 및 건조하여 570 g의 메탄올 추출물을 수득하였다.

단계 2 : 마테 분획물의 제조

상기 제조예 1에서 수득한 메탄올 추출물을 극성에 따라 분획하기 위해 유기용매를 이용한 계통분획을 실시하였다. 구체적으로는 상기 에탄올 추출물에 일정량의 물을 가하여 현탁시킨 후, 헥산(hexane), 에틸아세테이트(ethylacetate)를 첨가하여 분획물을 수득하였다. 우선 상기 에탄올 추출물을 농축하여 얻은 농축물 570 g 에 물 2 ℓ를 가하여 현탁시킨 후에, 헥산 2 ℓ를 첨가하고 헥산 층을 분리하여 헥산 분획물을 수득하였다. 상기 헥산 분획물을 제거한 물 층에 에틸아세테이트 2 ℓ를 첨가하고, 에틸아세테이트 층을 분리하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다. 상기 에틸아세테이트 분획물을 제거하고 남은 물 층은 동결건조하여 물 분획물로 수득하였다. 상기 분획과정은 상온에서 수행하였고, 각 분획은 5시간 동안 정치하였다. 상기 분획과정은 물층에 유기용매를 첨가하고, 유기용매층을 분리하여 분획 추출물을 얻는 단계를 3회 반복하여 수행하였고, 상기 수득한 분획물을 여과하고 감압농축하고 건조시켰다. 상기 분획용매에 따른 분획 수율은 헥산 분획의 경우 22%, 에틸아세테이트 분획의 경우 42%, 물 분획의 경우 36%이었다.

단계 3 : 마테노사이드 A의 제조

상기 제조예 1의 단계 2에서 수득한 에틸아세테이트 분획물을 이동상으로 메틸렌클로라이드와 메탄올의 혼합용매(20:1→1:2 농도구배)를 사용하고, 실리카 겔을 이용한 크로마토그래피를 수행하여 분획물 1 내지 9를 수득하였다. 상기 분획물 중 분획물 5(12.8 g)을 메탄올에 녹인 후에 메틸렌클로라이드(1:1), 70% 메탄올을 이동상으로 하여 세파덱스 LH-20 컬럼크로마토그래피를 수행하여 분획물 5-1 내지 5-5를 수득하였다. 상기 분획물 중 분획물 5-1을 이동상으로 n-헥산과 아세톤의 혼합용매(10:1→2:8 농도구배)를 사용하고, 실리카겔을 이용한 크로마토그래피를 수행하여 분획물 5-1-1 내지 5-1-7을 수득하였다. 상기 분획물 중 분획물 5-1-6을 메탄올에 녹인 후에 메틸렌클로라이드(1:1), 70% 메탄올을 이동상으로 하여 세파덱스 LH-20 컬럼크로마토그래피를 수행하여 분획물 5-1-6-1과 5-1-6-2를 수득하였다. 상기 분획물 중 분획물 5-1-6-1을 분취형 고속 액체 크로마토그래피를 수행하여 마테노사이드 A를 수득하였다. 이때, 이동상으로 물과 메탄올의 혼합용매(2:3)을 이용하여 30분에 나타나는 피크를 수득하였다. 유속은 4 ㎖/분이었고, YMC-Pack ODS(20×250 ㎜) 컬럼을 사용하였다.

성상 : 백색 분말;

: +117.2 (c=0.04, MeOH);

CD (MeOH): +165.0 (244 ㎚);

UV (MeOH) λ_max ㎚ (logε) : 241 (3.94);

HR-ESI-TOF-MS (positive ion mode) m/z : 413.2159 [M+H]⁺ (calcd. for C₂₁H₃₃O₈, 413.2175);

NMR은 Bruker Avance Ⅱ 900 spectrometer를 사용하여 ¹³C-NMR(100 MHz), ¹H-NMR(400 MHz) 및 2D-NMR(HMBC)를 측정하였으며, 내부 표준물질로 TMS를 사용하였다. ¹³C-NMR 스펙트럼, ¹H-NMR 스펙트럼 및 HMBC 스펙트럼의 데이타를 도 1에 나타내었다.

< 실시예 2> 마테노사이드 B의 제조

상기 제조예 1의 단계 3에서 얻은 분획물 5-1-6-1을 분취형 고속 액체 크로마토그래피를 수행하여 마테노사이드 B를 수득하였다. 이때, 이동상으로 물과 메탄올의 혼합용매(2:3)을 이용하여 35분에 나타나는 피크를 수득하였다. 유속은 4 ㎖/분이었고, YMC-Pack ODS(20×250 ㎜) 컬럼을 사용하였다.

성상 : 백색 분말;

: +50.3 (c=0.01, MeOH);

CD (MeOH): +8.8 (244 ㎚);

UV (MeOH) λ_max ㎚ (logε) : 244 (3.67);

HR-ESI-TOF-MS (positive ion mode) m/z : 415.2319 [M+H]⁺ (calcd. for C₂₁H₃₅O₈, 415.2332);

NMR은 Bruker Avance Ⅱ 900 spectrometer를 사용하여 ¹³C-NMR(100 MHz), ¹H-NMR(400 MHz) 및 2D-NMR(HMBC)를 측정하였으며, 내부 표준물질로 TMS를 사용하였다. ¹³C-NMR 스펙트럼, ¹H-NMR 스펙트럼 및 HMBC 스펙트럼의 데이타를 도 2에 나타내었다.

< 실험예 1> 사람의 중성구 엘라스타제 활성저해 효과 측정

엘라스틴을 분해하는 효소인 엘라스타제가 활성을 나타내는 경우, 탄성 섬유인 엘라스틴이 분해되어 피부 주름 형성이 가속된다. 본 발명에 따른 화합물의 사람의 중성구 엘라스타제 활성저해 효과를 측정하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.

500 ㎕의 DMSO에 상기 실시예 1 및 2의 화합물을 1, 3, 10, 30 및 100 μM의 농도로 용해시킨 후에 Tris-HCl 완충용액을 첨가하여 실험용액을 제조하였다. 상기 실험용액 60 ㎕와 엘라스타제의 기질인 N-메톡시석시닐-알라닌-알라닌-프롤린-발린-p-니트로아닐라이드(N-methoxysuccinyl-ala-ala-pro-val-p-nitroanilide) 125 ㎕, Tris-HCl 완충용액 390 ㎕을 혼합하고, 사람 중성구 엘라스타제(0.18 units) 25 ㎕를 첨가한 후에 37 ℃에서 1시간 동안 배양하였다. 1시간 후에, 대두 트립신 저해제(soybean trypsin inhibitor)을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 엘라스타제의 기질인 N-메톡시석시닐-알라닌-알라닌-프롤린-발린-p-니트로아닐라이드는 분해되면 노란색의 p-니트로아닐린이 되며, p-니트로아닐린의 발색정도를 분광분석기를 이용하여 405 ㎚에서 흡광도를 측정함으로써 엘라스타제 활성저해율을 측정할 수 있다. 엘라스타제 활성저해율은 하기 수학식 1에 의해 계산하였고, 화합물의 농도별 엘라스타제 활성저해효과를 측정하여 IC₅₀ 값을 계산하였다. 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

A : 엘라스타제 활성 저해제가 없는 경우의 흡광도

B : 엘라스타제 활성 저해제가 있는 경우의 흡광도

시료	엘라스타제 활성저해효과(%)					IC₅₀(μM)
시료	1 μM	3 μM	10 μM	30 μM	100 μM	IC₅₀(μM)
실시예 1	2.0±3.5	8.6±1.2	11.4±1.6	34.5±6.4	68.2±1.8	50.4
실시예 2	20.4±6.5	36.1±1.8	47.5±3.7	62.2±1.7	65.0±0.7	11.1

상기 표 1을 참조하면, 본 발명에 따른 화합물은 농도의존적으로 엘라스타제 활성을 저해시키는 것을 알 수 있다. 특히 실시예 1의 화합물은 50.4 μM, 실시예 2는 11.1 μM의 IC₅₀ 값을 나타냄으로써 우수한 엘라스타제 활성저해효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

이를 통하여 본 발명에 따른 화합물은 우수한 엘라스타제 활성 저해율을 나타냄으로써, 우수한 피부 주름 개선 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.

그러므로 본 발명에 따른 유도체 화합물은 사람 중성구 엘라스타제 활성저해 효과가 우수하므로, 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 주름 개선을 위한 의약품, 화장품 또는 식품에 유용하게 사용될 수 있다.

한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 유도체는 목적에 따라 여러 형태로 제형화가 가능하다. 하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.

제제예 1: 약학적 제제의 제조

1-1. 산제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 2g

유당 1g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

1-2. 정제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

1-3. 캡슐제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 100 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

1-4. 주사제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 100 ㎎

만니톨 180 ㎎

Na₂HPO₄ㆍ2H₂O 26 ㎎

증류수 2974 ㎎

통상적인 주사제의 제조방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.

제제예 2: 화장품의 제조

2-1. 크림의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 4.6 중량%

세토스테아릴알코올 2.8 중량%

밀랍 2.6 중량%

스테아린산 1.4 중량%

친유형모노스테아린산글리세린 2 중량%

피이지-100 스테아레이트 1 중량%

세스퀴올레인산소르비탄 1.4 중량%

호호바 오일 4 중량%

스쿠알렌 3.8 중량%

폴리소르베이트 60 1.1 중량%

마카다미아 오일 2 중량%

초산토코페롤 0.2 중량%

메틸폴리실록산 0.4 중량%

에틸파라벤 0.1 중량%

프로필파라벤 0.1 중량%

Euxyl K-400 0.1 중량%

1,3-부틸렌글리콜 7 중량%

메틸파라벤 0.05 중량%

글리세린 6 중량%

d-판테놀 0.2 중량%

트리에탄올아민 0.2 중량%

pt 41891 0.2 중량%

p-H₂O 46.05 중량%

2-2. 로션의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 3.5 중량%

세토스테아릴알코올 1.6 중량%

스테아린산 1.4 중량%

친유형모노스테아린산글리세린 1.8 중량%

피이지-100 스테아레이트 2.6 중량%

세스퀴올레인산소르비탄 0.6 중량%

스쿠알렌 4.8 중량%

마카다미아 오일 2 중량%

호호바 오일 2 중량%

초산토코페롤 0.4 중량%

메틸폴리실록산 0.2 중량%

에칠파라벤 0.1 중량%

프로필파라벤 0.1 중량%

1,3-부틸렌글리콜 4 중량%

메틸파라벤 0.1 중량%

잔탄검 0.1 중량%

글리세린 4 중량%

d-판테놀 0.15 중량%

알란토인 0.1 중량%

카르보내(2% aq. Sol) 4 중량%

트리에탄올아민 0.15 중량%

에탄올 3 중량%

pt 41891 0.1 중량%

p-H₂0 48.3 중량%

제제예 3: 식품의 제조

3-1. 음료의 제조

꿀 522 ㎎

티옥트산아미드 5 ㎎

니코틴산아미드 10 ㎎

염산리보플라빈나트륨 3 ㎎

염산피리독신 2 ㎎

이노시톨 30 ㎎

오로트산 50 ㎎

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 0.48 - 1.28 ㎎

물 200 ㎖

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.

3-2. 츄잉껌의 제조

껌베이스 20%

설탕 76.36 - 76.76%

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 0.24 - 0.64%

후르츠향 1%

물 2%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.

3-3. 캔디의 제조

설탕 50 - 60%

물엿 39.26 - 49.66%

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 0.24 - 0.64%

오렌지향 0.1%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다.

3-4. 밀가루 식품의 제조

본 발명에 따른 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 0.5 내지 5 중량%를 밀가루 100 중량%에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.

3-5. 유제품( dairy products )의 제조

본 발명에 따른 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 5 내지 10 중량%를 우유 100 중량%에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.

3-6. 선식의 제조

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입고 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 검은콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 상기에서 제조한 곡물류 및 종실류와 본 발명에 따른 화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체를 다음과 같은 비율로 배합하여 제조하였다.

현미 30%

율무 15%

보리 20%

들깨 7%

검정콩 7%

검은깨 7%

화학식 1 또는 화학식 2의 메가스티그만 유도체 3%

영지 0.5%

지황 0.5%

Claims

하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
[화학식 1]

[화학식 2]
마테에 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 가하여 마테 추출물을 수득하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 수득한 마테 추출물을 n-헥산 및 에틸아세테이트로 순차적으로 계통분획하여 마테 분획물을 수득하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 수득한 마테 분획물에 대해 컬럼 크로마토그래피를 수행하는 단계(단계 3)를 포함하여 이루어지는 제1항의 메가스티그만 유도체의 제조방법.
제2항에 있어서, 상기 단계 1의 유기용매는 C₁ 내지 C₄의 알코올인 것을 특징으로 하는 메가스티그만 유도체의 제조방법.
제3항에 있어서, 상기 C₁ 내지 C₄의 알코올은 메탄올 또는 에탄올인 것을 특징으로 하는 메가스티그만 유도체의 제조방법.
하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물.
[화학식 1]

[화학식 2]
제5항에 있어서, 상기 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 엘라스타제 활성을 저해하는 것을 특징으로 하는 주름 예방 및 치료용 약학적 조성물.
하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 화장품 조성물.
[화학식 1]

[화학식 2]
하기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 메가스티그만 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 주름 방지 및 개선용 식품 조성물.
[화학식 1]

[화학식 2]