KR100390760B1 - 지렁이 체액의 추출방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 지렁이 체액의 추출방법에 관한 것으로, 지렁이를 이용하여 그 체액을 효과적으로 추출하면서도 지렁이 체액에 일부 포함되는 혈전용해 활성 갖는 물질의 역가를 극대화시킬 수 있도록 한 지렁이 체액의 추출방법을 제공하는데 그 목적이 있으며, 상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 지렁이를 분쇄 또는 분해하고, 상기 분쇄 또는 분해물을 원심분리기로 분리하여 그 상등액을 취하여 동결건조하여 분말화하는 것을 포함하는 혈전용해 특정을 갖는 지렁이 체액의 추출방법에 있어서, 상기 지렁이 분쇄 또는 분해하는 과정이 단백질 분해효소를 이용하여 분해하는 것에 의한 지렁이 체액의 추출방법을 제공함으로서 달성할 수 있다.

Description

지렁이 체액의 추출방법{the extracting method of body fluids in earthworm}

본 발명은 지렁이 체액의 추출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 지렁이를 이용하여 그 체액을 효과적으로 추출하면서도 지렁이 체액에 일부 포함되는 혈전용해 활성 갖는 물질의 역가를 극대화시킬 수 있도록 한 지렁이 체액의 추출방법에 관한 것이다.

지렁이는 일명 토룡, 지룡 또는 백경구인으로 불리우는 빈모류의 환형동물로한 몸에 자성기관과 웅성기관을 가지고 있는 자웅동체이면서 각지의 비옥한 습지대의 토양속에서 부시된 유기물을 섭취하며 살아간다.

특히 동의보감이나 본초강목 등의 의학서에 의하면 지렁이는 약용성분이 함유되어 있어 용혈, 해열등의 효과가 있을 뿐만 아니라 장내기생충 특히 장충의 살충, 해열작용, 발광, 황달, 계절성전염병, 인후염 등에 효과적이라고 기재하고 있다.

이것은 지렁이의 체액에 용혈인자(hemolytic factor), 보체유사물질 (complement like factor), 분해인자(lytic factor), 응집소(agglutinin), 세균성장억제 인자(bacteriostatic factor) 등의 여러가지 인자들이 존재하고 있기 때문이며, 특히 상기 인자들이 매우 극미량으로서도 강력한 활성도를 나타낸다는 것은 기지의 사실이다.

그에 따라 지렁이의 체액에서 여러가지 용도에 맞추어 그 유효성분을 추출하거나, 특히 지렁이의 체액에 함유되어 있는 혈전을 용해하는 성분, 즉 혈전용해 활성을 나타내는 물질을 추출하는 방법에 대하여 많은 연구가 진행중에 있다.

일반적으로 혈전이란 간단히 표현하여 혈액이 응고된 덩어리를 말하는 것으로 섬유질과 단백질로 구성되어 있으며, 이 혈전이 혈관내에 침착하거나 뭉쳐져서 혈액의 순환을 방해하게 됨으로서 혈액의 흐름이 방해되거나 때로는 폐색되어 뇌졸중, 심근경색, 고혈압, 동맥경화 등의 각종 심장질환을 유발하게 된다.

혈전용해제는 상기 혈전을 용해시켜 혈액의 순환이 원활하게 이루어질 수 있도록 하는 역할을 하며, 그 용해 기작은 먼저 혈전용해제 내의 섬유질 분해효소가 섬유질을 분해하면 다시 혈전용해제 내의 단백질 분해효소가 단백질을 분해함으로서 혈전을 용해시키게 되는 것이다.

상기와 같이 혈전용해활성을 가지는 유효성분이 지렁이 체액에 함유되어 있어 체액 추출시 그 역가를 극대화시키면서도 효과적으로 체액을 추출하기 위한 많은 방법이 공지되어 있다.

상기 지렁이에서 유효성분을 함유하는 체액의 일반적인 추출방법은 먼저 지렁이를 습식분쇄하고, 상기 분쇄물을 원심분리기로 분리하여 그 상등액을 취하여 동결건조함으로서 유효성분을 함유하는 분말을 추출하여 왔다.

상기한 유효성분을 함유하는 체액 추출방법의 일환으로 대한민국 특허출원번호 제92-12244호의 "구인 추출물의 제조방법"에서는 이물질을 제거한 구인 생체를 습식분쇄하고, 구의 습식분쇄물을 가온 처리한 후, 냉동 진공건조시킴으로서 혈전용해 활성을 나타내는 분말상의 구인 추출물을 제조하는 방법을 공지하고 있다.

또 대한민국 특허출원번호 제94-7754호의 "구인 추출물의 제조방법"에서는 구인을 물과 혼합하여 자가분해시키거나 호모믹서로 분쇄하고, 분쇄물을 여과하여 여액에 유기산 또는 무기산을 가하여 불순물을 침전시키고, 상등액에 에탄올을 가하여 분리된 침전물을 건조시킴으로서 구인내에 존재하던 각종 불순물이 제거되기 때문에 오미나 오취가 없고 용혈현상을 나타내지 않으며 높은 혈전용해활성을 나타내는 구인의 건조분말 추출방법을 공지하고 있다.

그러나 상기한 혈전용해 활성을 갖는 구인분말의 추출방법들은 단순히 지렁이 내에 존재하는 혈전용해 활성을 갖는 체액의 추출방법을 제공할 뿐 그 체액내의 혈전용해 활성을 갖는 효소의 역가를 높이기 위한 방법은 제시하지 못하고 있으며, 또한 추출과정에서 혈전용해 활성을 갖는 체액의 역가를 높이기 위한 방법은 제시하고 있지 않은 실정이다.

그에 따라 본 발명자는 지렁이 체액의 추출과정에서 체액 내의 혈전용해 활성을 갖는 효소의 역가를 극대화 시키는 방법에 관하여 연구한 끝에 본 발명을 완성하게 되었다.

이에 본 발명은 지렁이를 이용하여 그 체액을 효과적으로 추출하면서도 지렁이 체액에 일부 포함되는 혈전용해 활성 갖는 물질의 역가를 극대화시킬 수 있도록 한 지렁이 체액의 추출방법을 제공하는데 그 목적이 있다.

상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 지렁이를 분쇄 또는 분해하고, 상기 분쇄 또는 분해물을 원심분리기로 분리하여 그 상등액을 취하여 동결건조하여 분말화하는 것을 포함하는 혈전용해 특정을 갖는 지렁이 체액의 추출방법에 있어서, 상기 지렁이 분쇄 또는 분해하는 과정이 단백질 분해효소를 이용하여 분해하는 것에 의한 지렁이 체액의 추출방법을 제공함으로서 달성할 수 있다.

특히, 본 발명에서는 상기 단백질 분해효소를 이용하여 분해하는 것으로 라이소자임을 생지렁이 100중량부에 대하여 5중량부 내지 50중량부 첨가하는 것에 의한 지렁이 체액의 추출방법을 제공함으로서 달성할 수 있다.

또한, 상기 단백질 분해효소를 이용하여 분해하는 또다른 방법으로 먼저 생지렁이를 용기에 담고 35±1℃까지 서서히 승온하여 지렁이를 열사시킴으로서 대량의 단백질 분해효소를 지렁이 체내에 발현시키고, 다시 38±2℃까지 승온하여 5시간 이상 유지시키는 것에 의한 지렁이 체액의 추출방법을 제공함으로서 달성할 수 있다.

본 발명에서는 지렁이를 분쇄 또는 분해하는 과정에서 단백질 분해효소를 이용하여 분해하게 되는데, 이때 단백질분해 효소를 첨가하는 경우 먼저 생지렁이를 2 내지 3등분 정도로 절단하는 과정을 포함하며, 이와 같이 지렁이를 절단하면 지렁이에서 체액이 배출되게 된다.

이때 첨가된 단백질 분해효소가 지렁이 체액에 침투하여 체액내의 긴 단백질사슬을 작게 분해함과 동시에 몸체를 구성하는 단백질을 함께 분해하여 지렁이가 액체로 변화되게 된다.

이와 같이 단백질 분해효소를 이용하게 되면 혈전용해 활성을 갖는 물질의 역가를 최대로 증진시킬 수 있게 되는데, 이것은 단백질 분해효소가 혈전용해 활성을 갖는 물질의 긴사슬을 보다 작게 분해하여 이를 복용시 체내에서 효과적으로 흡수가 일어날 수 있도록 하기 때문이다.

특히, 상기와 같은 효과를 증진시키기 위하여 단백질 분해효소로 라이소자임을 지렁이 100중량부에 대하여 5중량부 내지 50중량부 첨가하게 되는데, 이때 상기 라이소자임의 첨가량이 지렁이 100중량부에 대하여 5중량부 미만일 경우 라이소자임이 지렁이 체표를 구성하고 있는 케라틴만 분해하고 체세포를 분해하지 못하는 문제점이 발생하게 되며, 50중량부를 초과하도록 첨가할 경우 체내에 들어 있는 다당체와 혼합되어 동결 건조하는 과정에서 건조가 제대로 이루어지지 않아 분말형성이 곤란한 문제점이 발생하므로 상기의 범위내에서 첨가하는 것이 바람직하다.

특히 상기와 같이 라이소자임을 단백질 분해효소로 사용할 경우 일반적으로 라이소자임이 방부제 역할을 하는 것이 알려져 있으므로 상기 라이소자임에 의해 분말화된 지렁이 추출물이 변색 및 변패를 방지하는 방부제역할을 병행하는 장점이 있다.

또한 상기 라이소자임을 단백질 분해효소로 사용할 경우 라이소자임이 체세포를 구성한 단백질속에 들어 있는 혈전용해 물질의 긴 사슬을 잘게 끊는 생물 분쇄를 하기 때문에 종래 사용하던 세포균질화 분쇄기(호모저 나이저)의 단점인 분쇄 마찰열과 분쇄 진동 파장으로 인한 단백질 변성 및 혈전용해 물질의 활성도를 저하시키는 단점을 보완하게 되는 것이다.

또한 본 발명에서는 단백질 분해효소를 이용한 분해과정에서 단백질 분해효소를 첨가하지 않고도 지렁이 자체에서 단백질 분해효소를 생성시켜 이를 이용하여 지렁이를 분해할 수 있도록 한 방법을 제공한다.

상기한 방법은 먼저 생지렁이를 용기에 담고 35±1℃까지 서서히 승온하여 열사시킴으로서 대량의 단백질 분해효소를 지렁이 체내에 발현시키고, 다시 38±2℃까지 승온하여 5시간 이상 유지시키는 것이다.

이때 생지렁이를 35±1℃까지 서서히 승온시키면 생지렁이는 열에 의해 점차 그 생명을 잃어가며, 이때 생지렁이가 죽기 직전 체내에서는 대량의 단백질 분해효소가 발현된다.

상기와 같은 온도로 승온하는 과정에서 단백질 분해효소가 발현되는 것은 다음과 같이 생각해 볼 수 있는데, 먼저 지렁이 체내의 미소화된 음식물을 분해하기 위하여 장내 박테리아의 활동이 증가되고, 그에 따라 상기 박테리아에서 다량의 산이 분비되어 그 산에 의해 열이 발생하게 됨으로서 지렁이는 서서히 죽게 되며, 이때 산에 강한 프로테아제 즉 단백질 분해 효소가 대량으로 발현되는 것이다.

상기와 같이 단백질 분해효소가 발현되면 상기 단백질 분해효소는 지렁이 체액 내의 혈전용해 특성을 갖는 물질의 긴 단백질 사슬을 작게 분해함과 동시에 체내를 구성하는 단백질 사슬을 분해하여 결과적으로 지렁이는 완전 용액으로 변화되고, 이로인해 혈전용해 활성을 갖는 물질의 역가를 최대로 증진시킬 수 있게 되는데, 이것은 단백질 분해효소가 혈전용해 활성을 갖는 물질의 긴사슬을 보다 작게 분해하여 이를 복용시 체내에서 효과적으로 흡수가 일어날 수 있도록 하기 때문이다.

특히 지렁이가 열에 의해 죽은뒤 바로 38±2℃까지 승온하여 5시간 이상 방치하게 되는데, 이과정에서 지렁이가 완전 용액으로 변화되며, 특히 5시간 이상 방치하는 과정에서 지렁이 체액에 함유되어 있는 혈구파괴물질인 헤모라이신이 제거되어 인체에 무해한 혈전용해 특성을 갖는 지렁이 체액을 추출할 수 있게 되는 것이다.

이때 38±2℃에서의 방치시간이 5시간 미만일 경우 혈구파괴물질인 헤모라이신이 충분히 제거되지 않아 상기 체액에 인체에 해로움을 미칠수 있는 물질이 함유될 수 있으므로 5시간 이상 방치하는 것이 바람직하다.

상기와 같이 단백질 분해효소를 이용하여 지렁이를 분해시킨 다음, 통상적인 방법으로 원심분리하여 그 상등액만을 취하여 액상의 혈전용해 특성를 갖는 추출물로 사용하거나, 상기 추출액을 동결건조하여 분말상의 혈전용해 특성을 갖는 지렁이 추출물로 사용할 수 있다.

특히 상기와 같이 단백질 분해효소를 이용하여 지렁이를 분해할 경우 종래 단순분해 후 그 체액을 이용하는 경우보다 혈전용해 특성을 갖는 물질의 사슬을 작게 분해시키므로 본 발명에 의해 제조된 액상 또는 분말상의 추출물을 식용 또는 의약용으로 사용할 경우 체내에서 보다 빠른 흡수가 진행될 수 있다는 장점이 있다.

본 발명에서 사용가능한 지렁이로는 어떠한 종류의 지렁이를 사용하여도 무방하나 특히 본 발명자에 의해 선출원된 대한민국 특허출원번호 제2000-0039440호의 지렁이 양식방법에 의해 양식된 2개월 내지 4개월 정도의 붉은지렁이(학명 : Lumbricus Rubellus)를 사용하는 것이 바람직하다.

이하 본 발명을 하기한 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명하기로 하나 본 발명은 하기한 설명에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

표피를 수세하여 이물질을 제거한 다음 2등분 내지 3등분한 생지렁이 1kg을 용기에 넣고, 여기에 단백질 분해효소인 라이소자임 100g을 첨가혼합하여 완전히 용액으로 변화될 때까지 정치하고, 상기 얻어진 용액을 원심분리기로 분리하고 그 상등액만을 취한 후 동결건조하여 혈전용해 특성을 갖는 지렁이 체액의 분말상 140g을 얻었다.

<실시예 2>

표피를 수세하여 이물질을 제거한 생지렁이 1kg을 용기에 담고 35℃까지 서서히 승온시켜 대량의 단백질 분해효소를 지렁이 체내에 발현시키고, 다시 38℃까지 승온하여 5시간 동안 유지시켜 용액상을 얻은 다음, 상기 얻어진 용액을 원심분리기로 분리하고 그 상등액만을 취한 후 동결건조하여 혈전용해 특성을 갖는 지렁이 체액의 분말상 150g을 얻었다.

<비교예 1>

표피를 수세하여 이물질을 제거한 다음 생지렁이 1kg을 미분쇄하여 용액을 얻은 다음, 상기 얻어진 용액을 원심분리기로 분리하고 그 상등액만을 취한 후 동결건조하여 혈전용해 특성을 갖는 지렁이 체액의 분말상 80g을 얻었다.

상기 실시예1 내지 2 및 종래 방법인 비교예에서 보는 바와 같이 본 발명에 의해 실시한 실시예에서 얻어진 분말상이 종래의 방법에 의해 얻어진 분말상에 비해 그 량이 대략 2배 정도 많은 것을 알 수 있다.

상기와 같이 지렁이에서 추출한 분말은 미세한 입자성으로 인해 혈전용해제 뿐만 아니라 기타 화장품, 가죽 크린제, 치약 이나 소화제 등 다양한 용도로 사용할 수 있다.

상기에서 설명한 바와 같이 본 발명은 지렁이를 이용하여 그 체액을 효과적으로 추출하면서도 지렁이 체액에 일부 포함되는 혈전용해 활성 갖는 물질의 역가를 극대화시킬 수 있도록 한 지렁이 체액의 추출방법을 제공하는 유용한 발명인 것이다.

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3. 지렁이를 단백질 분해효소를 이용하여 분해하고, 상기 분해물을 원심분리기로 분리하여 그 상등액을 취하여 동결건조하여 분말화하는 것을 포함하는 혈전용해 특정을 갖는 지렁이 체액의 추출방법에 있어서, 생지렁이를 용기에 담고 35±1℃까지 서서히 승온하여 지렁이를 열사시킴으로서 대량의 단백질 분해효소를 지렁이 체내에 발현시키고, 다시 38±2℃까지 승온하여 5시간 이상 유지시켜 분해하는 것을 특징으로 하는 지렁이 체액의 추출방법.